实验一ABO及Rh血型鉴定2013.3
实验一ABO正反定型及Rh定型、唾液血型物质检测
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唾液中HAB血型物质测定
【目的】
了解唾液HAB血型物质测定的原理、方法。
【原理】
HAB血型物质也存在于某些人的分泌液中。唾液中 HAB血型物质为半抗原，能特异性地与相应抗体结 合，从而抑制抗体与相应红细胞发生凝集。所以利
用凝集抑制试验，可测定唾液中HAB血型物质，它 有助于ABO亚型的分类及其特殊情况下血型的鉴定
(3)室温轻转动玻片(或鉴定纸板) ，使血清与细胞充
分混匀连续约2min，肉眼观察凝集(溶血)反应。玻片
试验时可用低倍镜观察结果。
医学ppt
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表l ABO血型正反定型结果
试剂血清+受检红细胞 （正定型）
-A -B 受检血型
受检血清+试剂红细胞 （反定型）
Ac Bc Oc
＋－
A
－＋
B
－－
O
＋＋
AB
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【器材】 小试管、滴管、试管架、记号笔、离心机
【试剂】 1. ５％A、B和O型红细胞盐水悬液。 2. 最适稀释度抗血清的制备（标化血清）
【标本】受检者唾液
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1.被检者漱口后留取自然流出的唾液2ml，将留取 的唾液1000g离心，取上清液置于大试管中，煮 沸10min，再离心10min，留取上清液备用。
－＋ － ＋－ － ＋＋ － －－－
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注意事项 1.试剂 2.悬红 3.蛋白 4.溶血 5.冷抗体 6.老年、儿童 7.污染
作业 简述ABO血型鉴定正反不一致的原因
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红细胞凝集强度判断标准 4+ 红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。 3+ 红细胞凝集成大小块，血清清晰。 2+ 红细胞凝块分散成许多小块，血清清晰。 l+ 肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞。 ± 镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离
实验一、ABO血型的鉴定
若无标准血清，已知某人血型为A型或B型，能否用来鉴 定他人血型？如何鉴定？
[结论]
红细胞上的A、B凝集原被测知，即可作出ABO血型鉴定。 [注意事项] 1、实验前对所用A、B两种标准血清要经过校准，合格 者才能用。 2、加入玻片或试管中的A、B两种标准血液切不可混淆错 乱。 3、制备红细胞混悬液摇匀时，不可用力摇振，要轻轻将 试管来回倒置，以防红细胞破裂溶血。 4、玻片或试管内加入红细胞混悬液时所用牙签要分别专 用，不能两侧共用。
A 抗B凝集素
B抗A凝集素
4、ABO血型的鉴定 用已知的标准血清（含有凝集素），检测未知的凝集原
[结果分析]
1、甲玻片上红细胞在含抗A、B两种凝集素标准 血清中都不发生凝集，说明红细胞上A、B两种凝 集原都没有，则血型为O型。 2、乙玻片上红细胞在含抗B标准血清中不凝集， 在含抗A凝集素标准血清中发生凝集，说明红细 胞上含A凝集原，则血型为A型。 3、丙玻片与乙玻片刚好相反，说明红细胞上含B 凝集原，则血型为B型。 4、丁玻片上红细胞在A、B两种标准血清中都发 生凝集，说明红细胞上含有A、B两种凝集原，则 血型为AB型。
[异常现象讨论]
本实验一般不会出现异常情况，但有时所测血型与某人原 来正式鉴定过的血型不相符，其原因一方面可能所采用的 标准血清存放时间过长，已失去标准血清的作用，需要用 重新校准的新鲜标准血清；其次可能系实验场所不清洁， 红细胞悬液及血清有严重污染而产假凝集。 [思考题]
[方法步骤]
1、玻片法 （1）取双凹玻片一块，用玻璃蜡笔在两端分别标 以A、B字样。 （2）在A侧中央滴含抗B凝集素标准血清一滴， 在B侧中央滴含抗A凝集素标准血清一滴。 （3）消毒手指或耳垂后，针刺取血1～2滴于盛有 1ml生理盐水之试管混匀，制成红细胞混悬液。分 别用二根牙签取混悬液加入A型和B型血清中，并 将玻片转动数次后，使其充分混匀，放置10～15 分钟观察结果。
ABO血型及Rh血型鉴定 卡式法(审)
ABO血型及Rh血型鉴定操作规范（卡式法）
1、用抗凝（EDTA—K2）血，取40ul放入2ml生理
盐水中，配制成10%红细胞悬液，混匀备用。
2、取血型鉴定卡，撕开封条，编号。
3、分别取10ul 10%红细胞悬液，加入A、B和Rh
孔。
注意加红细胞悬液时不能直接加到孔内有试剂的液面。
4、将加好红细胞悬液的血型卡平衡放入专用离心
机中，以转/分的速度，离心5分钟。
5、5分钟后离心机提示音响，打开离心机，取出观察结果。
6、结果观察：
（1）A型：A试剂孔红细胞在试剂液面上端（凝集），B试剂孔红细胞沉降到试剂液面底端（不凝集）；
（2）B型：B试剂孔红细胞在试剂液面上端（凝集），A试剂孔红细胞沉降到试剂液面底端（不凝集）；
（3）AB型：A试剂孔红细胞在试剂液面上端（凝集），B试剂孔红细胞在试剂液面上端（凝集）；
（4）O型：试剂孔红细胞沉降到试剂液面底端（不凝集），B试剂孔红细胞沉降到试剂液面底端（不凝集）；
（5）Rh阴性：Rh试剂孔位红细胞沉降到液面底端（不
凝集）；
（6）Rh阳性：Rh试剂孔位红细胞在试剂液面上端（凝集）。
注意：观察结果时，要反复查对结果，以免报告错误。
7、打印结果，报告。
测血型鉴定实验报告
一、实验目的1. 掌握ABO血型鉴定原理和方法。
2. 观察红细胞凝集现象，理解抗原抗体反应。
3. 了解血型鉴定在临床医学和输血中的应用价值。
二、实验原理人类的ABO血型系统是由三个等位基因I^A、I^B和i共同控制的。
根据这些基因的不同组合，人类血型可分为A型、B型、AB型和O型。
其中，I^A和I^B为显性基因，i为隐性基因。
在ABO血型系统中，红细胞膜上的抗原分为A抗原和B抗原，而血清中的抗体分为抗A抗体和抗B抗体。
当A型或B型血液与抗A或抗B抗体接触时，会发生红细胞凝集现象。
通过观察红细胞凝集现象，可以判断受试者的血型。
三、实验材料1. 实验试剂：抗A抗体、抗B抗体、A型标准血清、B型标准血清、生理盐水。
2. 实验器材：载玻片、滴管、消毒棉签、75%乙醇、显微镜。
四、实验步骤1. 准备实验试剂和器材，并检查是否齐全。
2. 将载玻片擦干净，并用腊笔在两端分别标记“A”和“B”。
3. 在载玻片的两端各滴一滴A型标准血清和B型标准血清。
4. 用消毒棉签取受试者血液，加入含有1ml生理盐水的小试管中，混匀，制成红细胞悬液。
5. 用滴管吸取红细胞悬液，分别滴一滴于载玻片两端的血清上。
6. 用竹签轻轻搅拌，使红细胞与血清充分混合。
7. 将载玻片放置在显微镜下观察，观察红细胞是否发生凝集现象。
8. 根据红细胞凝集现象，判断受试者的血型。
五、实验结果与分析1. 若受试者的红细胞在A型标准血清中发生凝集，而在B型标准血清中不发生凝集，则受试者的血型为A型。
2. 若受试者的红细胞在B型标准血清中发生凝集，而在A型标准血清中不发生凝集，则受试者的血型为B型。
3. 若受试者的红细胞在A型标准血清和B型标准血清中都发生凝集，则受试者的血型为AB型。
4. 若受试者的红细胞在A型标准血清和B型标准血清中都不发生凝集，则受试者的血型为O型。
六、实验结论通过本次实验，我们掌握了ABO血型鉴定的原理和方法，观察了红细胞凝集现象，了解了抗原抗体反应。
血型鉴定实验报告结论
血型鉴定实验报告结论血型鉴定实验报告结论在现代医学中，血型鉴定是一项非常重要的实验，它不仅可以帮助医生确定病人的血型，还可以为输血、器官移植等医疗过程提供必要的信息。
在这次实验中，我们通过几种不同的方法来鉴定血型，最终得出了结论。
实验中我们采用了ABO血型系统和Rh血型系统进行鉴定。
ABO血型系统是根据红细胞表面的抗原A和抗原B来进行分类的，而Rh血型系统则是根据红细胞表面的Rh抗原（D抗原）的有无来进行分类的。
首先，我们进行了直接凝集试验。
这个试验是通过将病人的血液与已知血型的抗血清混合，观察是否出现凝集反应来确定血型。
实验结果显示，当病人的血液与抗A抗血清混合时出现凝集反应，而与抗B抗血清混合时没有凝集反应。
这表明该病人的血型为A型。
接下来，我们进行了间接凝集试验。
这个试验是通过将病人的血清与已知血型的红细胞混合，观察是否出现凝集反应来确定血型。
实验结果显示，当病人的血清与A型红细胞混合时出现凝集反应，而与B型红细胞混合时没有凝集反应。
这进一步证实了该病人的血型为A型。
然后，我们进行了Rh血型的鉴定。
实验结果显示，当病人的血液与抗Rh抗血清混合时没有凝集反应，这表明该病人的Rh血型为阴性。
通过综合以上实验结果，我们可以得出结论：该病人的血型为A阴性。
这个结论对于未来的治疗和输血过程非常重要，因为不同血型之间的输血会引发免疫反应，严重的话可能会导致输血反应甚至死亡。
因此，在进行任何输血或器官移植之前，都需要对病人的血型进行准确的鉴定。
此外，血型鉴定还有其他的应用领域。
例如，在法医学中，血型鉴定可以用于破案和鉴定亲子关系。
在破案中，通过对犯罪现场的血迹进行血型鉴定，可以帮助警方锁定嫌疑人。
而在鉴定亲子关系方面，通过对父母和子女的血型进行比对，可以确定亲子关系的真伪。
总之，血型鉴定是一项重要的实验，它可以为医疗过程提供必要的信息，确保病人的安全。
通过本次实验，我们成功地确定了该病人的血型为A阴性。
ABO血型鉴定
观察结果时若试管中出现溶血现象，应视为阳性 结果。 所有器材必须干燥清洁，应使用一次性试管和吸 管。 操作中一般先加血清，然后加红细胞悬液。 为防止冷凝集素的干扰，一般在室温下进行试验。 仔细记录，严格核对，正、反定型结果不一致时， 应进一步查找原因。二、RhD血型鉴定1. 盐水介质法
原理：盐水介质法
全血离心（2000rpm,5min）,收集血浆待用。 生理盐水（NS）洗涤RBC，离心2000rpm, 5min，重复 3次, 弃上清，收集压积RBC。
制备5%RBC悬液：1滴压积RBC+16滴NS（每组操作）
试管法
3. 正定型
取试管2支，分别标记抗A，抗B；
加入 2滴抗A、抗B型定型试剂+1滴待测RBC悬液，轻摇混合； 瞬时离心： 2000rpm,15sec，轻摇试管使细胞扣悬起，观察有无凝 集或溶血现象。 4. 反定型
用抗RhD试剂（单克隆抗体IgM）与相应红 细胞RhD抗原发生凝集反应，区分RhD阴 性或阳性。
操作步骤：
加1滴抗D试剂于试管中； 再加被检红细胞液（ 1滴血＋0.5ml NS ） ， 轻摇混匀； 离心，3000rpm，15s 结果判断：凝集者为RhD阳性。
2. 微柱凝胶卡法
1人一张 启封血型卡封条，标记患者姓名； 分别在A、B、D、Ctrl卡中加入已配制好的 5%红细胞悬液，将卡放入专用离心机离心 10min，取出观察结果。
取试管2支，分别标明A、B细胞管；
2滴待检血浆+1滴A、B型标准RBC悬液，轻摇混合；瞬时离心，轻 摇试管观察结果。
玻片法（一般只做正定型，多用于血型普查）
正定型：
在玻片上分别标记抗A、抗B，在相应区域 内加定型试剂1滴，再滴加待检红细胞1滴， 轻摇玻片，观察结果。
实验__人体ABO血型的测定
实验人体ABO血型的测定〔目的与要求〕1、学习辨别血型的方法。
2、观察红细胞凝集现象，掌握ABO血型测定的原理。
〔基本原理〕一、ABO血型系统的分型依据：1、抗原（凝集原）：存在于红细胞膜上。
抗原有两种： A、 B。
2、抗体（凝集素）：存在于血清（血浆）中。
抗体有两种：抗A、抗B。
（解释血清与血浆的区别）。
相对应的一对抗原与抗体相遇时会发生凝集反应。
正常人体内无凝集反应发生，因此可以断定：在正常人体内绝不存在相对应的一对抗原与抗体。
3、分型依据：根据红细胞膜上是否有抗原及抗原的种类划分。
分为A型、B型、AB二、判断方法：已知A型标准血清（抗B）、B型标准血清（抗A），根据是否发生凝集反应判断血型。
有以下几种情况：〔实验器材〕凹槽、一次性刺血针、消毒牙签、A型与B型标准血清、生理盐水、酒精棉球、一次性采血管、记号笔、试管架、小试管、消毒镊子。
〔方法与步骤〕1、清洗所用器材：首先用清水把要用的凹槽、小试管冲洗干净，然后用生理盐水再冲洗几遍，防止发生溶血。
这一步是保证实验成功的关键。
2、取凹槽，用记号笔作好标记。
3、在凹槽内分别加入A型与B型标准血清。
4、取小试管，向内加入生理盐水约2ml，放在试管架上备用。
5、采血：用酒精棉球消毒左手无名指指尖，另一名同学用手捏紧已消毒的手指，用一次性刺血针刺破手指取血。
注意：进针速度要快，力度适中，采血时要挤松交替。
当手指尖出现小血滴时，用一次性采血管吸取少许血液放入小试管中制成混悬液，然后再吸取混悬液分别加入A型和B型标准血清中各一滴，用牙签搅动，使每侧的血液与血清混匀。
注意每侧用一支牙签搅动，切勿混用。
6、静置，观察结果：在室温下静置10-15分钟，观察有无凝集现象发生，并判断结果。
注意：这种凝集反应的强度因人而异，如果15分钟后没有出现结果，可以再延长一段时间。
〔注意事项〕1、一定要严格消毒。
2、区别血液的凝集与凝固。
〔作业〕记录你的血型，说明你能接受和输血给何种血型的人，为什么？。
ABO及RhD血型鉴定试验标准操作规程
ABO及RhD血型鉴定试验标准操作规程(一)检验目的检测红细胞表面ABO血型抗原、RhD抗原及血清(或血浆)中抗A、抗B抗体，确定受检者ABO及RhD血型。
(二)检验原理1.手工试管法、玻片法或纸板法利用标准IgM抗A／B血清鉴定红细胞表面ABO抗原即正定型，利用已知ABO 血型反定型红细胞鉴定同一标本血清(或血浆)中的抗A／B 抗体即反定型，综合正反定型结果确定受检标本ABO血型；利用标准IgM抗D直接鉴定RhD血型。
2.微柱凝胶法ABO／RhD卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗A、抗B、抗D标准血清，如果红细胞表面存在A或B或D抗原，就会与对应的抗体发生凝集反应，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶颗粒中，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
3.玻璃珠微柱法ABO／RhD卡的微管中装填有玻璃微珠和抗A、抗B、抗D标准血清，如果红细胞表面存在A或B或D抗原，就会与对应的抗体发生凝集反应，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
(三)适用范围适用于手工、半自动、全自动ABO血型及RhD血型鉴定试验。
(四)设备性能参数各种血型检测系统性能指标参见相应血型检测系统说明书。
(五)器材与试剂1.器材WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO 血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro AutoVue Innova全自动血型配血系统、B600-A型低速离心机、KA-2200血清学专用离心机、阅片灯箱、塑料软试管、塑料硬质试管(100m m×12mm和75m m×l2mm)、血型鉴定专用纸板、玻片、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
2.试剂Diana DG Gel ABO-CDE血型卡、DiaMed ABO／RhD血型卡、OTHROBiovueABO／RhD血型卡、2％氢氧化钠溶液、生理盐水、抗A／B标准血清、抗D标准血清、3％～5％反定型试剂红细胞、1％反定型试剂红细胞。
abo血型测定实验报告
abo血型测定实验报告ABO血型测定实验报告。
实验目的，通过实验掌握ABO血型的测定方法，了解不同血型间的抗体和抗原反应，加深对血型遗传规律的理解。
实验仪器和试剂，玻璃量筒、试管、移液管、洗涤皿、显微镜、抗A血清、抗B血清、洗涤液、试纸条。
实验步骤：1. 实验前准备，将玻璃量筒、试管、移液管等实验器材清洗干净，准备好所需试剂和试纸条。
2. 取一张试验纸，用移液管吸取一滴被测血液滴在试纸上，分别滴加抗A血清和抗B血清。
3. 轻轻摇晃试纸，观察凝集反应。
若出现凝集，表示被测血液中含有相应的抗原。
4. 观察血型凝集反应结果，并记录下来。
实验结果：实验结果显示，被测血液在抗A血清中出现凝集反应，而在抗B血清中未出现凝集反应。
根据实验结果，可判断被测血液为A型血。
实验分析：根据ABO血型遗传规律，A型血的基因型可以是AA或AO，而B型血的基因型可以是BB或BO。
因此，被测血液为A型血，可能的基因型为AA或AO。
实验结论：通过本次实验，我们成功地测定了被测血液的血型，并对血型遗传规律有了更深入的了解。
实验结果表明，被测血液为A型血，可能的基因型为AA或AO。
实验总结：本次实验通过简单的试剂和试纸条，成功地测定了被测血液的血型，加深了对ABO血型的理解。
同时，也展现了血型遗传规律的重要性，为进一步的相关研究提供了基础。
实验注意事项：1. 实验过程中要注意个人安全，避免血液直接接触皮肤和黏膜。
2. 实验器材要保持清洁，避免交叉污染。
3. 实验操作要准确无误，避免误差产生。
通过本次实验，我们成功地掌握了ABO血型的测定方法，并对血型遗传规律有了更深入的了解。
这将为我们的学习和研究提供重要的基础，也为今后的实验操作积累了宝贵的经验。
血型鉴定机能实验报告
血型鉴定机能实验报告实验报告：血型鉴定机能实验一、引言血型是根据红细胞表面的抗原差异进行分类的，常见的血型分类系统有ABO血型系统和Rh血型系统。
ABO血型系统包括A型、B型、AB型和O型四种血型，Rh血型系统包括Rh阳性和Rh阴性两种血型。
血型的鉴定对于输血、器官移植等临床操作具有重要意义，因此开展血型鉴定机能实验是非常有必要的。
二、实验目的1. 了解ABO血型的基本原理和鉴定方法。
2. 了解Rh血型的基本原理和鉴定方法。
3. 学习使用血型试剂进行血型鉴定。
4. 比较不同试剂的鉴定结果，评估各试剂的准确性和可靠性。
三、实验原理1. ABO血型的鉴定方法：a) 直接试剂法：将待鉴定的血液滴在不同的试剂反应孔上，观察出现凝集反应的现象。
b) 不直接试剂法：将待鉴定血液与试剂反应孔中的抗体混合，观察凝集反应或溶解反应的现象。
2. Rh血型的鉴定方法：a) 直接试剂法：将待鉴定的血液滴在不同的试剂反应孔上，观察出现凝集反应的现象。
b) 不直接试剂法：将待鉴定血液与试剂反应孔中的抗体混合，观察凝集反应或溶解反应的现象。
四、实验步骤1. 根据实验需要，准备所需试剂和标本。
2. 将待鉴定的血液滴在试剂反应孔上，按照试剂说明书的要求进行操作。
3. 观察试剂和血液的反应情况，记录凝集反应或溶解反应的现象。
4. 根据试剂说明书的解读规则，判断血型的鉴定结果。
五、实验结果根据实验步骤操作，观察到了血液与试剂的反应现象。
根据试剂说明书的要求和解读规则，得出了每个被鉴定血样的血型结果。
比较不同试剂的鉴定结果，评估各试剂的准确性和可靠性。
六、实验讨论1. 不同试剂的鉴定结果是否一致？不同试剂的鉴定结果一般是一致的，但也存在少数情况下不一致的情况。
这可能是由于试剂的质量差异、操作技巧不同或被鉴定血样的特殊情况等原因导致的。
2. 试剂的准确性和可靠性如何评估？评估试剂的准确性和可靠性可以通过比对不同试剂的鉴定结果，以及与已知的标准血型结果进行对比来进行。
实验一ABO及Rh血型鉴定2013.3
实
验
内
容
一、5%红细胞悬液的配制 二、ABO血型鉴定（试管法、纸片法） 三、Rh血型鉴定
?
一、5%红细胞悬液的配制
原理：使用一定量的稀释液（生理盐水）稀释
压积红细胞，遵循抗原抗体结合的量比关系，
获出最佳结果。
器材: 小试管（玻璃及塑料皆可）、加样枪、
试管架、离心机、记号笔、显微镜。
正定型
反定型
注意事项
1.试剂 5.冷抗体 2.悬红 3.蛋白 4.溶血 7.污染 6.老年、儿童
三 、 Rh血型鉴定
目的 原理
掌握Rh血型鉴定的原理、方法。 Rh血型系统，包括四十几个抗原，通常使用相应
的抗C、抗c、抗D、抗E、抗e五种Rh分型血清来检查红
细胞抗原。 在临床输血中一般只做D抗原的鉴定，被检红细胞 和抗D血清凝集者为Rh阳性，不凝集者为Rh阴性。
1滴到5支试管中。
2.每管各加1滴3％～5％待检红细胞悬液。 3.充分混匀，以1000 g离心15秒。 4.观察结果：轻摇散开试管底部的细胞扣，用 肉眼观看凝集。 5.判定结果
注意事项
1．用抗D血清进行Rh血型鉴别时，结果为阴性，不能直 接报告Rh阴性，需进一步检测弱D型还是部分D型。 2．Rh血型鉴定应严格控制温度与时间，因Rh抗原、抗体 凝集反应块比较脆弱，观察反应结果时，应轻轻摇动 试管，不可用力振摇。 3.Rh血型系统的抗体多为后天免疫刺激产生，不需要做 反定型。
二、ABO鉴定
目的：掌握ABO正反定型的原理、方法。 原理：红细胞凝集试验，通过正、反定型鉴定ABO 血型。 正定型：用已知血型特异性抗体（抗-A、抗-B） 来测定红细胞上有无相应的抗原； 反定型：用已知血型试剂红细胞测定血清中有无 相应的抗体。
ABO和RH血型鉴定操作规程4
ABO和RH血型鉴定操作规程4ABO和RH血型鉴定操作规程4一、实验目的1.学习和掌握ABO和Rh血型的鉴定方法；2.学会正确操作相关试剂和仪器设备；3.提高实验操作的准确性和规范性。
二、实验原理ABO血型系统是血浆中存在的A抗原、B抗原和漏斗性E抗原在红细胞膜上的表达情况的不同所决定的。
Rh血型系统是Rh抗原在红细胞膜上的表达情况所决定的。
实验中采用“直接添加法”和“间接抗人球蛋白试剂法”进行ABO和Rh血型的鉴定。
ABO血型鉴定根据红细胞与抗A血清、抗B血清的凝集反应情况判断，Rh血型鉴定根据红细胞与抗D血清的凝集反应情况判断。
三、所需试剂及仪器设备1.10%的牛血清白蛋白溶液；2.抗A血清、抗B血清、抗D血清、抗人球蛋白试剂；3.输血细胞和被检血液样本；4.显微镜及玻璃制品。
四、实验步骤1.取一小号试管，用P3琼脂糖盐水洗涤试管内壁。
2.分别取少量被检血液样本和输血细胞加入试管中。
3.加入3滴抗A血清到试管1中，3滴抗B血清到试管2中。
4.试管1和试管2每个都加入一滴抗人球蛋白试剂。
5.用试管架将试管在室温下静置20分钟。
6.观察试管1和试管2的凝集情况，并比较。
7.根据凝集情况判断被检血液的ABO血型。
五、结果判断1.如果试管1发生凝集，试管2不发生凝集，即为A型血；2.如果试管2发生凝集，试管1不发生凝集，即为B型血；3.如果试管1和试管2都发生凝集，即为AB型血；4.如果试管1和试管2都不发生凝集，即为O型血。
六、Rh血型的鉴定1.取一小号试管，用P3琼脂糖盐水洗涤试管内壁。
2.分别取少量被检血液样本和输血细胞加入试管中。
3.加入1滴抗D血清到试管中。
4.用试管架将试管在室温下静置20分钟。
5.观察试管的凝集情况。
七、结果判断如果试管发生凝集，即为Rh阳性；如果试管不发生凝集，即为Rh阴性。
八、实验注意事项1.实验过程中，要注意操作规范，避免交叉感染；2.抗人球蛋白试剂需保存在2-8摄氏度，使用前应在室温下放置30分钟；3.实验前，应检查试剂的有效期和质量；4.实验完成后，及时清理实验台面和试管，做好垃圾分类处理。
ABO及Rh血型鉴定
试管法结果判定
附：评分判断标准 4+：12分； 3+：10分； 2+：8分； l+：5 分； ±
(1)洁净玻片(鉴定纸板)一张。标-A、-B，分别用滴管滴
加抗-A、抗-B试剂1滴，再加受检者3％～5％红细胞悬液l
滴，混匀。
(2)另取洁净玻片(或鉴定纸板)一张。标Ac、Bc、Oc，各 (3)室温轻转动玻片(或鉴定纸板) ，使血清与细胞充分混 玻片试验时可用低倍镜观察结果。
实验一 ABO血型鉴定 Rh血型鉴定
临床检验基础与输血教研室
实 验
内 容
一、5%红细胞悬液的配制 二、ABO血型鉴定（试管法、纸片法及微柱 凝胶法） 三、Rh血型鉴定及阴性确认试验
?
一、5%红细胞悬液的配制
原理：使用一定量的稀释液（生理盐水）稀释
压积红细胞，为了遵循抗原抗体结合的量比关
系，获出最佳结果。
判断标准
表l ABO血型正反定型结果
受检血清+试剂红细胞 （反定型） Ac Bc Oc － ＋ ＋ － ＋ － ＋ － － － － － 试剂血清+受检红细胞 （正定型） -A -B 受检血型 ＋ － － ＋ － ＋ － ＋ A B O AB
红细胞凝集强度判断标准 4+ 红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。 3+ 红细胞凝集成大小块，血清清晰。 2+ 红细胞凝块分散成许多小块，血清清晰。 l+ 肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞。 ± 镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多 游离红细胞。 mf 混合凝集外观,指镜下可见少数红细胞凝集，而 极大多数红细胞仍呈分散分布。 － 阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。
三 、 Rh血型鉴定
实验一__人类ABO血型鉴定
2011.05
一、实验目的:
学习人类ABO血型的鉴定方法。
二、实验原理 人类ABO血型检测 通过观察参试人员的血液与抗A和抗B标准血清是 否发生凝集反应，判断其血型。 A型：红细胞上具有A抗原，能与特异性抗体A发 生凝集反应，而不与B抗体发生凝集反应。 B型：红细胞上具有B抗原，与特异性抗体B发生 凝集反应，而不与A抗体发生凝集反应。 AB型：红细胞上具有A抗原和B抗原，既与抗体A 发生凝集反应，也与抗体B发生凝集反应。 O型：红细胞上缺乏A抗原，也缺乏B抗原，均不 与抗体A或抗体B发生凝集反应。
三、实验材料 人类ABO血型检测：参试人 员的手指毛细管血液两滴
四、实验准备
人类ABO血型检测：显微镜、载 玻片、抗A、抗B、消毒药棉、 玻璃蜡笔（记号笔）、尖头滴管、 70％乙醇、一次性采血针。
五、实验步骤 1、人类ABO血型检测 （1）. 在载玻片上划分两格，分别标明A与B。 （2）. 在A处滴加抗A标准血清一滴，在B处加抗B 标准血清一滴。 （3）. 用采血针采血。 （4）. 一滴血液滴在加抗A血清处，另一滴血液滴 在加抗B血清处。 （5）. 分别用采血针调匀，调匀一处血液后揩擦 采血针，再调另一处。 （6）. 两分钟内肉眼观察反应结果，或用最低倍 显微镜观察其凝聚的情况，反之可能产生假凝集 现象。
ABO及RhD血型鉴定试验标准操作规程
ABO及RhD血型鉴定试验标准操作规程(一)检验目的检测红细胞表面ABO血型抗原、RhD抗原及血清(或血浆)中抗A、抗B抗体，确定受检者ABO及RhD血型。
(二)检验原理1.手工试管法、玻片法或纸板法利用标准IgM抗A／B血清鉴定红细胞表面ABO抗原即正定型，利用已知ABO 血型反定型红细胞鉴定同一标本血清(或血浆)中的抗A／B 抗体即反定型，综合正反定型结果确定受检标本ABO血型；利用标准IgM抗D直接鉴定RhD血型。
2.微柱凝胶法ABO／RhD卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗A、抗B、抗D标准血清，如果红细胞表面存在A或B或D抗原，就会与对应的抗体发生凝集反应，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶颗粒中，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
3.玻璃珠微柱法ABO／RhD卡的微管中装填有玻璃微珠和抗A、抗B、抗D标准血清，如果红细胞表面存在A或B或D抗原，就会与对应的抗体发生凝集反应，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
(三)适用范围适用于手工、半自动、全自动ABO血型及RhD血型鉴定试验。
(四)设备性能参数各种血型检测系统性能指标参见相应血型检测系统说明书。
(五)器材与试剂1.器材WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO 血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro AutoVue Innova全自动血型配血系统、B600-A型低速离心机、KA-2200血清学专用离心机、阅片灯箱、塑料软试管、塑料硬质试管(100m m×12mm和75m m×l2mm)、血型鉴定专用纸板、玻片、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
2.试剂Diana DG Gel ABO-CDE血型卡、DiaMed ABO／RhD血型卡、OTHROBiovueABO／RhD血型卡、2％氢氧化钠溶液、生理盐水、抗A／B标准血清、抗D标准血清、3％～5％反定型试剂红细胞、1％反定型试剂红细胞。
实验ABO血型鉴定
一般抗A、抗B效价在1：128以上。
三、亲和力实验
亲和力是指血清中的抗体与相应红细胞 抗原发生凝集的速度和强度。 被检测血清0.05ml 于玻片上，再吸取 10%相应红细胞生理盐水悬液0.1ml 于 被测定血清的近旁，用玻片混合血清和 红细胞，立即看表，并缓缓转动玻片， 要求15s内出现凝集，3min 凝快大小不 小于1mm2。
分离血清 分别加5%的三种标准红细胞生理盐水悬 液1d，观察有无凝集或者溶血（显微 镜）。
A型红细胞
+
B型红细胞 O型红细胞
+ -
血型
A B
+
-
+
-
-
O
AB
严格标记，防止混淆。 观察时，应该先肉眼观察，不确定则用 显微镜低倍镜观察有无凝集。 防止出现冷凝集或者某些疾病干扰引起 的假凝集。
二、血型抗体效价测定
实验 ABO血型鉴定 效价测定 亲和力实验
一、ABO血型鉴定
ABO血型抗体系IgM型，分子大，能 在生理盐水介质中与相应的抗原结合而 发生凝集反应。做ABO血型鉴定时，应 该以标准抗体鉴定红细胞上的抗原，同 时以标准红细胞鉴定血清中的抗体，两 者符合才能做出正确判断。
（一）正定型
用已知IgM类特异性血型抗体与被检测红 细胞在盐水介质中反应，若出现凝集现 象，表明被检测红细胞膜上有相应抗原， 从而判断血型。
效价是指血清中含某种抗体的浓度，将 被检测抗血清做倍比稀释后，加入一定 量的抗原红细胞，观察凝集程度，以最 大稀释倍数能与相应红细胞抗原发生凝 集的试管稀释倍数之倒数定为效价。
10支小试管，每管加0.1ml生理盐水，再第1管 中加入0.1ml血清，混匀后吸取0.1ml到第2管， 以此类推，做倍比稀释。稀释倍数为1：2，1： 4，1：8等。 加相应的2%的红细胞生理盐水悬液0.1ml，混 匀，最终稀释倍数为1：4，1；8，1；16等等。 15min后离心后观察结果，先观察上层有无溶 血，再轻轻浑匀观察。 以出现凝集的最高稀释倍数的倒数定为该抗体 效价。
abo血型的鉴定的实验报告
abo血型的鉴定的实验报告ABO血型的鉴定的实验报告引言：ABO血型是人类最常见的血型系统之一，根据人体红细胞表面上的抗原类型不同，将人类血型分为A型、B型、AB型和O型四种。
ABO血型的鉴定对于血液输血、器官移植以及亲子鉴定等方面具有重要意义。
本实验旨在通过几种简单的实验方法来鉴定ABO血型。
实验材料和方法：1. 实验材料：- 试管- 血型试剂盒（包括抗A血清、抗B血清和抗Rh血清）- 滴管- 血液样本（来自实验者自愿捐献）2. 实验方法：1. 取一根干净的滴管，分别用滴管吸取被测血液样本。
2. 将血液滴入试管中，每个试管约滴入2滴。
3. 加入相应的抗血清（如加入抗A血清，表示检测A型血液）。
4. 轻轻摇晃试管，观察是否出现凝集反应。
5. 根据观察结果，判断被测血液的ABO血型。
实验结果和讨论：根据实验方法，我们进行了一系列的实验，以下是我们的实验结果和讨论：1. 实验一：检测A型血液- 加入抗A血清后，观察到血液与抗A血清发生凝集反应，说明被测血液中存在A抗原。
- 结论：被测血液为A型血。
2. 实验二：检测B型血液- 加入抗B血清后，观察到血液与抗B血清发生凝集反应，说明被测血液中存在B抗原。
- 结论：被测血液为B型血。
3. 实验三：检测AB型血液- 加入抗A血清和抗B血清后，观察到血液与两种抗血清均未发生凝集反应，说明被测血液中不存在A抗原和B抗原。
- 结论：被测血液为AB型血。
4. 实验四：检测O型血液- 加入抗A血清和抗B血清后，观察到血液与两种抗血清均发生凝集反应，说明被测血液中既不存在A抗原也不存在B抗原。
- 结论：被测血液为O型血。
通过以上实验结果，我们成功地鉴定了被测血液的ABO血型。
实验方法简单易行，结果明确可靠，可以应用于临床医学和实验室研究中。
结论：本实验通过简单的实验方法，成功鉴定了ABO血型。
实验结果显示，被测血液分别为A型、B型、AB型和O型血。
ABO血型的鉴定对于血液输血、器官移植以及亲子鉴定等方面具有重要意义，因此，准确鉴定血型对于人类健康和医学研究至关重要。
生物实验报告abo血型鉴定
生物实验报告姓名：班级：日期：同组者：实验序号：实验题目：ABO血型鉴定实验目的：1.掌握血涂片的制作，了解各种血细胞的结构特点2.掌握ABO血型的鉴定方法实验原理：人类的ABO血型遗传是由基因决定的。
很多時间，一个基因只包含两个等位基因。
但是，控制血型的基因I则有三个不同等位基因。
即同一时间内，一个位点可以有其中任何两个等位基因出现。
等位基因A使红血球产生抗原A；等位基因B使红血球产生抗原B；等位基因O使红血球不产生抗原；等位基因A和B为等显性，O对A和B均为隐性。
ＡＢＯ血型鉴定的原理是根据红细胞上有或无Ａ抗原和Ｂ抗原或AB抗原，将血型分为Ａ型、Ｂ型、ＡＢ型及Ｏ型四种。
本实验采用红细胞凝集试验，用已知抗Ａ和抗Ｂ单克隆抗体来测定红细胞上有无相应的Ａ抗原或Ｂ抗原或AB抗原来确定ABO血型。
抗原抗体反应——在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。
A抗原加抗A单克隆抗体或B抗原加抗B单克隆抗体，则产生凝集现象→从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B抗原→判断血型抗体在相邻的红细胞表面抗原决定簇之间搭桥形成肉眼可见的颗粒状凝集团块.实验对象：血液实验器材：受检者血液抗A、抗B单克隆抗体载玻片、脱脂棉、针、酒精棉球、生物显微镜、冰箱等。
实验方法及步骤：1.血涂片的制作用酒精棉球擦拭消毒指尖，用采血针刺破指尖或耳垂，从采血针眼处挤出绿豆大小血滴，用清洁玻片面的一端轻轻接触血滴，使血滴附于玻片面上（注意勿触及皮肤，否则血在玻片上就不能成滴）。
⏹以左手拿该片的两端，迅速用右手拿住另一载玻片的一端，在左手载玻片上由前向后接触血滴，使两载玻片约成45°角，轻轻移动，使血滴成一直线，然后由前向后推为一均匀的薄片。
⏹涂片在空气中干燥后置于染色架上，滴加瑞氏染色液，使涂片被染色液覆盖。
⏹染1分钟后，再加等量的缓冲液于染色液上，浸染约5-8分钟此时涂片表面呈现一层古铜色。
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二、ABO鉴定
目的：掌握ABO正反定型的原理、方法。 原理：红细胞凝集试验，通过正、反定型鉴定ABO 血型。 正定型：用已知血型特异性抗体（抗-A、抗-B） 来测定红细胞上有无相应的抗原； 反定型：用已知血型试剂红细胞测定血清中有无 相应的抗体。
器材:
记号笔、小玻璃试管、滴管、试管架、
离心机、鉴定纸板、显微镜。
试剂:
1. ABO血型抗体：抗A、抗B(-A、-B)；
பைடு நூலகம்
2．试剂红细胞：3％～5％Ac、Bc及Oc。
3. 生理盐水。
标本:
抗凝或非抗凝静脉血。
操作（试管法） (1)标记试管：正定型：取洁净小试管2支，分别标 明－A、－B；反定型：取3支小试管，标记Ac、Bc、 Oc。 (2)配5%悬浮红细胞：取静脉血2滴于小试管中，加 2ml生理盐水，混匀，1000g离心60s，弃上清；重复3 次。取管底1滴压积加19滴生理盐水，即为5%悬红。 (3)加样：正定型管中分别加入1滴试剂和1滴悬红， 反定型管中分别加入2滴血清和1滴试剂红细胞。 （4）离心：1000g离心15秒。 (5)结果：轻摇试管,观察有无凝集或溶血现象。
器材 小试管、滴管、试管架、记号笔、鉴定纸 板、显微镜、离心机。 试剂 1.Rh抗血清：常用的为IgM抗抗D（其他为抗C、 抗c、抗E、抗e）。 2.己知Rh阳性和阴性的5％红细胞悬液各1份 3.生理盐水。 标本 静脉血。
操作(盐水试管测试法)
1.取单克隆抗-D（IgM）-C、-c、-E、-e试剂各
试管架、离心机、记号笔、显微镜。
试剂: 生理盐水。
标本:
抗凝或非抗凝静脉血。
操
作
1、全血2ml 1000g离心5min，吸取分离上清至另一干净试 管（备用）； 2、压积加生理盐水约2～3ml，充分摇匀或吸管轻轻吹打 混匀，再次离心去掉上清液； 3、重复离心（1000g，60s）洗涤红细胞3次，去掉上清液 制备压积红细胞； 4、取1滴压积红细胞于1支干净的小试管中，在其中加入 19滴生理盐水，用小吸管轻轻吹打混匀，就是5%的红细 胞悬液。
加抗-A、抗-B试剂1滴，再加受检者10％红细胞悬液l滴， 混匀。
(2)另取洁净玻片(或鉴定纸板)一张。标Ac、Bc、Oc，各 (3)室温轻转动玻片(或鉴定纸板) ，使血清与细胞充分混 玻片试验时可用低倍镜观察结果。
加受检血清2滴，再分别滴加Ac、Bc、Oc悬红1滴。
匀，约2min肉眼观察凝集(溶血)反应。
作业
简述导致ＡＢＯ血型鉴定出现正反
定型不一致的常见原因。
1滴到5支试管中。
2.每管各加1滴3％～5％待检红细胞悬液。 3.充分混匀，以1000 g离心15秒。 4.观察结果：轻摇散开试管底部的细胞扣，用 肉眼观看凝集。 5.判定结果
注意事项
1．用抗D血清进行Rh血型鉴别时，结果为阴性，不能直 接报告Rh阴性，需进一步检测弱D型还是部分D型。 2．Rh血型鉴定应严格控制温度与时间，因Rh抗原、抗体 凝集反应块比较脆弱，观察反应结果时，应轻轻摇动 试管，不可用力振摇。 3.Rh血型系统的抗体多为后天免疫刺激产生，不需要做 反定型。
试管法结果判定
判断标准
表l ABO血型正反定型结果
受检血清+试剂红细胞 （反定型） Ac Bc Oc － ＋ ＋ － ＋ － ＋ － － － － － 试剂血清+受检红细胞 （正定型） -A -B 受检血型 ＋ － － ＋ － ＋ － ＋ A B O AB
操作：玻片法(鉴定纸板)
(1)洁净玻片(鉴定纸板)一张。标-A、-B，分别用滴管滴
正定型
反定型
注意事项
1.试剂 5.冷抗体 2.悬红 3.蛋白 4.溶血 7.污染 6.老年、儿童
三 、 Rh血型鉴定
目的 原理
掌握Rh血型鉴定的原理、方法。 Rh血型系统，包括四十几个抗原，通常使用相应
的抗C、抗c、抗D、抗E、抗e五种Rh分型血清来检查红
细胞抗原。 在临床输血中一般只做D抗原的鉴定，被检红细胞 和抗D血清凝集者为Rh阳性，不凝集者为Rh阴性。
实验一ABO血型 鉴定和Rh血型鉴定
临床检验诊断学实验室
实
验
内
容
一、5%红细胞悬液的配制 二、ABO血型鉴定（试管法、纸片法） 三、Rh血型鉴定
?
一、5%红细胞悬液的配制
原理：使用一定量的稀释液（生理盐水）稀释
压积红细胞，遵循抗原抗体结合的量比关系，
获出最佳结果。
器材: 小试管（玻璃及塑料皆可）、加样枪、
红细胞凝集强度判断标准 4+ 红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。 3+ 红细胞凝集成大小块，血清清晰。 2+ 红细胞凝块分散成许多小块，血清清晰。 l+ 肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞。 ±镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离 红细胞。 mf 混合凝集外观（mixed field）指镜下可见少数红细 胞凝集，而极大多数红细胞仍呈分散分布。 － 表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。