欧李染色体制片技术初探

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植物染色体标本的制备和观察

植物染色体标本的制备和观察【实验目的】掌握常规压片法和去壁低渗法制备植物染色体标本的基本原理和方法。

【实验原理】植物染色体标本的制备，常用分生组织，如根尖、茎尖和嫩叶做材料。

常规压片法仍是当今观察植物染色体常用的方法，其程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等步骤。

但压片法的不足之处是染色体很难分散开，染色体容易变形和断裂。

而去壁低渗法则能较好地克服这弊端，方法也较简单，不需要特殊设备。

它是借助纤维素酶和果胶酶将细胞间的果胶质和组成细胞壁的α-纤维素、半纤维素溶解掉，使植物细胞只有质膜，然后按哺乳类动物染色体标本制备的方法——低渗、火焰干燥法制备植物染色体标本。

实验证明，这一技术可以显著提高染色体的分散程度，现已广泛应用于植物染色体显带，姊妹染色单体交换等研究，大大促进了植物细胞遗传学研究的发展。

【实验仪器、材料和试剂】（一）仪器、用具培养箱、显微镜、剪刀、镊子、刀片、培养皿、滤纸、吸水纸、青霉素瓶、染色缸、载玻片、盖玻片、玻璃板、酒精灯（二）材料蚕豆种子、洋葱鳞茎（三）试剂1．Giemsa 母液：原液的配制：Giemsa 粉0.5g甘油（AR）33ml甲醇（AR）33ml先将少量甘油加入研鉢中，将Giemsa 粉充分研细，再倒入剩余甘油，并在56℃温箱中保温2 小时，然后再加入甲醇混匀，贮存在棕色瓶内。

2．磷酸缓冲液、甲醇、冰醋酸、混合酶液、秋水仙素（或对二氯苯）3．改良苯酚品红染色液。

【方法与步骤】（一）压片法制备染色体标本1．取材把洋葱鳞茎置于盛水的小烧杯上，放在25℃温箱中发根，待根长至2cm左右，于上午9～11 时剪下根尖。

或者把蚕豆种子预先浸泡6小时，然后转入垫有湿润滤纸的培养皿中，置25℃温箱中发芽，幼根长至1～2cm左右，于上午9～11时剪下根尖。

2．预处理将剪下的根尖置对二氯苯饱和水溶液，或0.02%秋水仙素溶液中，浸泡处理4 小时。

3．固定用水洗净处理过的根尖，经甲醇-冰醋酸（3∶1）固定6～12 小时，再经95%、85%酒精各半小时，最后转入70%酒精中，4℃保存备用。

骨髓染色体制片原理

骨髓染色体制片原理一、前言骨髓染色体制片是一种重要的诊断手段，它可以通过染色体的形态和数量来判断患者是否存在染色体异常。

本文将详细介绍骨髓染色体制片的原理。

二、概述骨髓染色体制片是指用特定方法将人类骨髓中的细胞进行固定、染色和显微镜观察，以便于分析其核型及其异常情况。

该技术主要应用于血液系统疾病的诊断，如白血病、淋巴瘤等。

三、样本采集1.样本来源：骨髓液或外周血。

2.采集方法：骨髓液采集需经过无菌操作，通常在臀部或胸骨处穿刺取得。

外周血则可通过静脉采血得到。

四、样本处理1.固定：用乙醇-冰乙酸（3:1）混合液进行固定。

2.制片：将固定后的细胞在玻片上均匀涂布，晾干后进行染色。

五、染色方法1.Giemsa染色：常用于骨髓染色体制片中，可使染色体呈现出特定的条纹和带状结构，有助于分析其核型。

2.其他染色方法：还有一些其他的染色方法，如Wright-Giemsa染色、Leishman染色等，但在骨髓染色体制片中较少使用。

六、显微镜观察1.显微镜：通常使用100倍至400倍的光学显微镜进行观察。

2.分析：观察样本中的细胞核型及其异常情况，如是否存在多余或缺失的染色体、是否存在易位等。

同时还需对细胞形态进行分析。

七、结果解读1.正常核型：指细胞核型正常且没有任何异常情况。

2.异常核型：指细胞核型存在多余或缺失的染色体、易位等异常情况。

3.诊断意义：根据结果判断患者是否存在血液系统疾病，并进一步确定具体疾病类型和治疗方案。

八、注意事项1.操作要求严格无菌操作；2.样本处理要及时；3.显微镜观察要仔细，避免漏检；4.结果解读应结合患者的临床症状和其他检查结果进行综合分析。

九、总结骨髓染色体制片是一种重要的诊断手段，它可以通过染色体的形态和数量来判断患者是否存在染色体异常。

该技术主要应用于血液系统疾病的诊断，如白血病、淋巴瘤等。

在操作过程中需注意无菌操作、样本处理及显微镜观察等方面，以确保结果准确可靠。

新疆欧洲李种质资源染色体核型分析

新疆欧洲李种质资源染色体核型分析孙琪;廖康;耿文娟;曼苏尔·那斯尔;刘欢;徐桂香【期刊名称】《西北植物学报》【年(卷),期】2015(35)6【摘要】运用常规制片法,以5个新疆欧洲李类型种质资源为研究材料,对其染色体核型特征进行观察测量及数据分析.结果表明:(1)供试的5个欧洲李类型均为六倍体(2n=6x=48),均含有不同数量的m和sm染色体,相对长度系数均包括L、M2、M1和s等4种类型.(2)5个欧洲李类型染色体的平均臂比范围为1.46～1.69,核型类型均属2B型,核型不对称系数范围为59.13％～62.34％.研究认为,新疆欧洲李核型特征具有种共性的同时,不同类型间也具有一定程度的差异,核型进化趋势总体由对称向不对称发展.在核型特征上,国外引进欧洲李品种与塔城槟子具有较近的亲缘关系,而塔城酸梅与野生欧洲李的亲缘关系较近.【总页数】7页(P1153-1159)【作者】孙琪;廖康;耿文娟;曼苏尔·那斯尔;刘欢;徐桂香【作者单位】新疆农业大学特色果树研究中心,乌鲁木齐830052;新疆农业大学特色果树研究中心,乌鲁木齐830052;新疆农业大学特色果树研究中心,乌鲁木齐830052;新疆农业大学特色果树研究中心,乌鲁木齐830052;新疆农业大学特色果树研究中心,乌鲁木齐830052;新疆农业大学特色果树研究中心,乌鲁木齐830052【正文语种】中文【中图分类】Q343.2+2【相关文献】1.新疆野苹果的不同种下类型染色体核型分析 [J], 马衣努尔姑·吐地;张延辉;秦伟;司洪章;杨新峰2.新疆桃和新疆甜仁桃染色体核型分析 [J], 郭振怀;贾希有3.新疆野生单叶蔷薇的染色体核型分析 [J], 惠俊爱;张霞;王绍明4.新疆江鳕染色体核型分析和形态特征研究 [J], 蒋艳琳;张林;王昱斌;周剑光;阿达可白克·可尔江;郭焱;杨天燕5.28个中国紫苏属种质资源的染色体核型分析 [J], 孙浩男;田琳;温春秀;刘冬云;王鑫;李明阳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

维吾尔药欧李显微鉴别研究

ＴｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆＰ．ｄｏｍｅｓｔｉｃａａｏｄＰ．ｓｐｉｎｏｓａａｔｆｍｉｔｃｒｏｓｓ — ｓｅｃｔｉｏｎｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄｂｙｍｅａｎｓｏｆｐａｒａｆｆｉｎ — ｃｕｔｓｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄｔｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅｃｈａｒａｃｔｅｉｓｒｔｉｃｏｆｐｏｗｄｅｒｗａｓｓｔｕｄｉｅｄｂｙｎｌｅａｎｓｏｆｐｏｗｄｅｒｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓｅｃｔｉｏｎ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅｒｅｗａｓｎｏ
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎｏｎＵｇｉｈｕｒｍｅｄｉｃｉｎｅＰｒｕｎｕｓｄｏｍｅｓｔｉｃａｐｏｗｄｅｒ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：
Байду номын сангаас
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ＰｒｕｎｕｓｄｏｍｅｓｔｉｃａＬ．； ¨ ｎｗｓｐｉｎｏｓａＬ．；ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎ；ｐｏｗｄｅｒ
２０１５年１０月第１７卷

欧李优系组培快繁技术研究

欧李优系组培快繁技术研究欧李优系组培快繁技术是一种高效、稳定、精准的组培繁殖方法，因其具有快速、大量生产优质种苗的特点，已成为现代植物育种和工业化生产的必备技术之一。

本文将介绍欧李优系组培快繁技术的研究内容。

一、组培快繁技术的发展历程组培快繁技术最早起源于上世纪60年代，当时许多科学家开始尝试将植物在无菌条件下进行组织培养，以达到快速繁殖和育种的目的。

但由于当时技术条件限制较大，组培快繁技术并未得到广泛应用。

随着科技的进步和研究工作的深入，组培快繁技术得到了迅速发展，逐渐成为植物育种和种质资源保护的核心技术之一。

欧李优系组培快繁技术就是在这样的背景下逐步完善和发展起来的。

二、欧李优系组培快繁技术的研究内容1. 组培快繁基础研究：欧李优系组培快繁技术的研究包括组织分离、培养条件筛选、培养基配方设计、生长素和激素的搭配比例等基本研究。

其中，组织分离是欧李优系组培快繁技术的核心步骤，研究者通过试验研究，探索出了最适合欧李李子细胞分离的方法。

同时，培养条件的筛选、培养基的配方设计也是研究者不断探索和完善的方向。

2. 欧李优系组培快繁优化研究：为了提高欧李优系组培快繁技术的生产效率和品质，研究者对组织分离、培养基的改进和调整、生长素和激素的搭配比例、培养条件的精细化调控等方面展开了深入的研究。

这些优化措施不仅提高了组培快繁技术的成功率，还有效缩短了繁殖周期，增强了育种和种质资源保护的实际效果。

3. 欧李优系组培快繁应用研究：欧李优系组培快繁技术已被广泛应用于欧李种苗生产、种质资源保存、疫苗生产等方面。

在应用研究中，研究者通过实验验证其适用性，通过不断地探索和改进，成功实现了大规模优质种苗的生产。

三、欧李优系组培快繁技术的未来发展目前，随着科技的不断进步，欧李优系组培快繁技术也在不断发展。

未来，欧李优系组培快繁技术的发展方向主要包括：1. 培养基的智能化设计：研究者将开发一些新型有机化合物，制备与植物组织生长和发育相关的培养基和生物材料。

实验一染色体玻片标本的制作与染色体观察共18页PPT

配方Ⅱ：改良石碳酸品红
取配方Ⅰ石碳酸品红染色液2-10毫升，加入90-98毫升45％的醋酸和1.8克山梨醇(sorbitol)。此染色液初配好时颜色较浅，放置二周后，染色能力显著增强，在室温下不产生沉淀而较稳定。
五、实验说明
1. 根尖取材方便，是观察植物染色体最常用的材料，也可以用茎尖作为材料。 2. 植物细胞分裂周期的长短不同，在十到几十小时之间，温度影响分裂周期，对于一个不太熟悉的实验材料，最好在特定温度下长根，掌握有丝分裂高峰期，以便得到更多的有丝分裂的细胞。 3. 前处理的目的是降低细胞质的粘度，使染色体缩短分散，防止纺锤体形成，让更多的细胞处于分裂中期，一般在分裂高峰前，把根尖放到药剂中处理3-4 小时。可处理的药剂很多，如秋水仙素、对二氯苯、8-羟基喹啉等。 4. 解离的目的是使分生组织细胞间的果胶质分解，细胞壁软化或部分分解，使细胞和染色体容易分散压平，解离方法有酸解法和酶解法。
1. 压片材料要少，避免细胞紧贴在一起，细胞和染色体没有伸展的余地。
2. 用镊子敲打盖玻片时，用力要均匀，若在压片时稍不留意，使个别染色体丢失，而被迫放弃一个良好的分裂相的细胞。
（五）封片：把压好的玻片标本，放在干冰或冰箱结冰器里冻结。然后用刀片迅速把盖玻片和载玻片分开，用电吹风把玻片吹干后，滴上油派胶加上盖玻片封片，或经二甲苯透明后，滴中性树胶，加盖玻片封片，做成永久封片。
（三）解离(酸解)：从固定液中取出大蒜根尖，用蒸馏水漂洗，再放到0.1mol/LHCl中，在60℃水浴中解离8-10分钟，用蒸馏水漂洗后，放在染色板上，加上几滴改良石碳酸品红染色液，根尖着色后即可压片观察。
（四）压片：把染色后的根尖放在清洁的载玻片上，用解剖针
把根冠及延长区部分截去，加上少量染色液，并盖上盖玻片。一个解离良好的材料，只要用镊子尖轻轻的敲打盖玻片，分生组织细胞就可铺展成薄薄的一层，再用毛边纸把多余的染色液吸干，经显微镜检查后，选择理想的分裂细胞，再在这个细胞附近轻轻敲打，使重叠的染色体渐渐分散，就能得到理想的分裂相，要达到这个目的，必需掌握以下几点：

第一章染色体制片方法

经过众多研究者的不懈努力植物染经过众多研究者的不懈努力植物染色体的研究技术得到了长足的发展色体的研究技术得到了长足的发展也为育种学家提供了充分的理论依据和实践基育种学家提供了充分的理论依据和实践基11染色体研究技术的发展历史染色体研究技术的发展历史18881888年年瓦尔德瓦尔德第一次提出了染色体这一名词第一次提出了染色体这一名词
➢ 8-羟基喹啉（8-hydroxyquinoline），多用 0.002mol/L水溶液。适宜中、小染色体，离体处理好。优点在于显示缢痕清晰，缺点在于中期分裂相不如其他的多，但总体优于其他药物。
➢ α-溴萘（α-Bromonaphthalene ）,饱和液现配最好，适于禾本科及水生植物，活体处理。100ml加2滴即可。
2.染色体形态比较完整：染色体各组成成分—长臂、短臂、着丝点、随体、染色体单体的显示都比较清楚，有利于染色体的测量与分析。
3.方法简单，不需特殊设备，不需压片，揭盖片等程序，且Giemsa染色后，不用树胶封片，可在显微镜下直接观察，方便，长期保存不褪色。
2.4 制片过程中的问题及可能原因
原因：
为预处理不足的明显标志。即预处理液未能阻止纺锤丝的形成和活动，使细胞分裂过程能顺利进行到底。这主要是预处理液变质或处理时间太短所致。
（5）染色体发生粘连或聚集成团而不分散。
原因：
a.预处理液浓度太高或温度太高。
b.固定时间太短。
c.软化或酶解时间太长，染色体过度膨胀。
（6）细胞核或染色体完全解体，而只能看见细胞壁或细胞核与染色体只见染色成淡、残缺不全的轮廓，有时可见到细胞核碎裂成大小不等的碎块。
➢ 放线菌酮（cycloheximide）,适宜早中期染色体供核型分析和G-带研究。20-50ppm，小+α-溴萘，100ml对二氯苯饱和液加1-2滴α-溴萘，对大、中染色体作用迅速。可在短时间内明显缩短。

欧李优系组培快繁技术研究

,,,.[J].,2019,58(6):136-139.收稿日期:2018-06-20基金项目:河北省科学技术与发展计划项目(16232503D-X-1)作者简介:梁伟玲(1970-),女,河北邯郸人,实验师,主要从事园艺、园林植物的组培快繁试验研究,(电话)0310-*******(电子信箱)1803495817@;通信作者,刘艳芬(1968-),女,河北徐水人,教授,硕士,主要从事园艺、园林植物组织培养与栽培应用研究,(电话)0310-*******(电子信箱)274821817@。

欧李(Cerasus humilis )又名钙果,属蔷薇科樱属,是中国特产的落叶小灌木。

栽培品种果实含有丰富的活性钙元素,具有多种保健功能[1]。

欧李抗寒、耐旱、耐贫瘠,是集营养、保健、绿化、美化于一身的多功能树种,具有广阔的市场前景[2]。

通过组织培养进行离体快繁是繁殖欧李优良苗木的有效方法[3]。

已有科研工作者对欧李的组织培养技术进行了研究[4-7],但欧李种质资源变异类型多[8],离体培养条件与品种、品系有一定关系[9,10],通过离体快繁进行规模化生产技术体系尚未成熟。

本研究以河北工程大学试验基地引自河北涉县的欧李优系为材料,通过初代培养,增殖继代培养,生根与移栽3个阶段的培养,确定了其完整的离体快繁体系,旨在为欧李规模化育苗提供技术支持。

1材料与方法1.1试验材料试验材料为河北工程大学实习基地引自河北涉县山地的欧李优系植株,2015年至2016年以茎段为外植体,进行初代培养、增殖继代培养、生根培养3个阶段的试验研究。

1.2试验方法1.2.1初代培养以欧李半木质化茎段(距梢端第二个至第五个芽)为外植体,经过常规消毒后,剪切成单芽茎段,接种于各处理培养基,每瓶接种3~4个茎段。

4周后统计各茎段腋芽的萌发情况与芽生长状况。

处理1,MS+0.5mg /L 6-BA+0.1mg /L IBA;处理2,MS+0.5mg /L 6-BA+0.2mg /L IBA;处理3,MS+1.0mg /L 6-BA+0.1mg /L IBA;处理4:MS+1.0欧李优系组培快繁技术研究梁伟玲,陈翠果,孟繁祎,赵敏,孙华冉,刘艳芬(河北工程大学园林与生态工程学院,河北邯郸056021)摘要:为建立欧李(Cerasus humilis )优系离体快繁技术体系,对其离体培养过程中初代培养、增殖继代培养、生根培养3个阶段的培养条件进行了研究。

维吾尔药欧李显微鉴别研究

维吾尔药欧李显微鉴别研究潘兰;石明辉;齐耀东;贾晓光;贾新岳【摘要】目的:建立维吾尔常用药材欧李的显微鉴别方法.方法:采用石蜡切片法和粉末制片法进行制片,在光学显微镜下进行欧李Prunus domestica及常见混淆品黑刺李Prunus spinosa药材的观察并测量及描述.结果:两者的横切面显微结构无显著差别,但粉末的纤维及导管特征区别较明显.结论:粉末鉴别可以很好地区分欧李及其混淆品黑刺李,为欧李的鉴定提供科学依据.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2015(017)010【总页数】3页(P1030-1032)【关键词】欧李;黑刺李;显微鉴别;粉末【作者】潘兰;石明辉;齐耀东;贾晓光;贾新岳【作者单位】新疆维吾尔自治区中药民族药研究所,新疆乌鲁木齐830002;新疆维吾尔自治区中药民族药研究所,新疆乌鲁木齐830002;中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所,北京100193;新疆维吾尔自治区中药民族药研究所,新疆乌鲁木齐830002;新疆维吾尔自治区中药民族药研究所,新疆乌鲁木齐830002【正文语种】中文欧李为蔷薇科植物欧洲李Prunus domestica L.的干燥近成熟或成熟果实，为维吾尔常用药材，维吾尔名卡拉·玉如克，具有清热解毒、生津止渴、消散异常胆液质的功效，用于发热发烧、大便干结、恶心呕吐等症[1-3]。

项目组前期对新疆喀什、乌鲁木齐、和田、吐鲁番等地的维吾尔医院及药材市场进行走访调查发现，市场流通及临床应用的欧李品种非常混乱，常见的混淆品为黑刺李，维吾尔名艾努拉。

欧李的质量标准在《中华人民共和国卫生部药品标准·维吾尔药分册》中有记载，但该标准相对滞后，不能很好地与其混淆品进行区分。

为了更好地对欧李进行鉴别和使用，提高药物的疗效，本文对欧李及其混淆品黑刺李进行了显微鉴别比较研究，确定了欧李的显微鉴别特征，为欧李药材质量标准的提升提供参考。

离体加倍创造欧李多倍体种质及其鉴定

离体加倍创造欧李多倍体种质及其鉴定本试验以欧李“农大7号”的组培苗茎尖和种子的种胚为试验材料,采用接种法和浸泡法对材料进行处理。

以秋水仙素为诱变剂,用不同浓度的秋水仙素进行不同时间的处理,研究欧李多倍体的诱导方法。

采用形态学观察、流式细胞仪检测、染色体计数等方法对诱导的材料进行倍性鉴定,并对变异植株的生理指标进行测定,研究其与二倍体植株在生理指标上存在的差异。

主要研究结果如下：1.采用种子的种胚为诱导材料,直接接种到添加有不同浓度秋水仙素的MS培养基中,随着秋水仙素的浓度的提高,种胚的成活率逐渐降低,疑似变异率先升高后下降,培养基中秋水仙素的浓度为80mg/L时,种胚的疑似变异率最高,为30%。

2.采用欧李组培继代苗的茎尖为诱导材料,分别用浸泡法和直接接种法处理。

随着浸泡的浓度和时间增长,茎尖的死亡率增高,当秋水仙素浓度为0.6%,且处理时间为48h±24h时,茎尖的疑似变异率较高。

直接接种到含有不同浓度秋水仙素培养基上,当秋水仙素的浓度达到80mg/L时,疑似变异率最高,为30%。

3.采用流式细胞仪对疑似变异的组培苗进行倍性鉴定。

对50个疑似变异的材料进行鉴定,结果检测出4个样品为四倍体。

将上述的4个样品做染色体制片研究：用幼嫩的组培苗根尖,0.002mol/L的8一羟基喹啉预处理2.5h,在温度为60±1℃的HCI中解离15min,可获得较为清晰的染色体图片。

经鉴定4个样品的均为四倍体,染色体数为2n=4x=32。

4.变异的组培苗表现出叶片变大,为对照组的3.46倍；叶片颜色变深；茎段分化能力和生根能力强,均为对照组的2.1倍；叶片气孔变大,是对照组的5.1倍；气孔长直径/短直径比值为对照组的50%,气孔形状偏圆；单位面积气孔数少,为对照组的40%。

5.优化SSR分子标记体系,对“农大7号”和鉴定的4个四倍体材料进行标记,分析得出其中1个样品的标记条带与“农大7号”条带相同,可能为茎尖加倍的四倍体,其余3个为种子加倍的四倍体。

欧李茎尖分生组织培养与快速繁殖技术研究

ｖｎｉｏｓｂｄｒｇｎｒｔｎｗａＳ＋６一Ｂ０．ｇＬ＋ＩｅｔｉｕｕｅｅｅａｉｓＭｔｏＡ４ｍ／ＡＡ．／：ｔｅｂｓｕｔｒｄｕ０５ｍｇＬｈｅｔｃｌｅｍｅｉｍｕｆｒｓｏｔｐｏｉｒｔｎｗａＳ＋６一Ｂ０．／ＯｈｒｌｅａｉｓＭｆｏＡ３ｍｇＬ＋ＩＡＡ４ｍｇＬ；ｔｅｐｏｅｕｔｒｄｕｏ０．／ｈｒｐｒｃｌｕｅｍｅｉｍｆｒｔｇｗａ／ＭＳ＋Ｉｏｉｓ２３ｎＡＡ５ｍｇＬ．Ａｎｈｖｒｇｉｓｆｅａｅｗａ３ｂｓｄｏｈｅｏｏ — ０．／ｄｔｅａｅａｅｖｒ —ｒｅｒｔｓ％ａｅｎｔｅｓｍｉｌｇｕ７
毒率为７％。３
关键词：欧李；织培养；毒；快速繁殖组脱
中图分类号：￥６、６２５文献标识码：Ａ文章编号：１００４—３６（０６０ —０９２８２０）９０７—０３
ＴｅｈｏｏｙＳｓｅｆｒＳｔｍ— ｐｘＭｅｉｔｍｌｕｅａｄｃｎｌｇｙｔｍｏｅａｅｒｓｅＣｕｔｒｎＲａｉｏａａｉｎｏｕｎｕｍｉｉｐｄＰｒｐｇｔｏｆＰｒｓｈｕｌｓ
欧李（ｒｎｓｕｌｕｇ．俗称山樱桃，ＰｕｕｍｉｓＢｎｅ）ｈｉ属
达，长迅速，水土保持、耕还林的优势植生是退物５。欧李属赏、、、态多用途优良树种，食药生因此，市场苗木需求量日益增大。但在实际生产中，欧李通常采用分株繁殖和扦插繁殖，繁殖系数都很低，不能满足生产的要求。１８９７年以来，贤伟人阎６等

欧李优系组培快繁技术研究

欧李优系组培快繁技术研究
欧李优系组培快繁技术是一种在植物组织培养中快速繁殖植物的技术。

通过该技术，
可以大量繁殖具有良好质量和特性的优良植株。

选取适宜的母本材料。

母本材料应该是健康、无病虫害的植物，同时其生长速度和形
态特征也要符合要求。

将母本材料的茎、叶、根等组织取出，进行消毒处理。

消毒处理是防止细菌和真菌污
染的重要步骤。

用流动水清洗母本材料，去除表面的污物。

然后，使用消毒剂（如漂白粉、过氧化氢等）进行浸泡和冲洗，杀灭潜在的病菌和病毒。

用无菌的水进行冲洗，去除消毒
剂残留。

接着，将消毒处理后的母本材料培养到含有适宜植物生长激素的培养基中。

植物生长
激素的种类和浓度会影响到组织的增殖和分化。

一般来说，培养基中会添加类似于植物生
长素和细胞分裂素的激素。

培养基的温度、光照和湿度等环境条件也需要控制好，以保证
组织的生长与分化。

在组培的过程中，需要进行定期的更换培养基，以提供营养物质和保持培养环境的稳定。

还需要注意对培养器皿和器具的无菌处理，以防止污染。

当组织培养的过程中出现问题时，如浑浊的培养基、组织发黑等，则可能是由于微生
物污染或培养条件不当所致。

此时，需要及时采取相应的措施，如更换培养基、提高消毒
效果等，以保证组织继续生长。

当组织生长到一定程度后，可以将其移植到土壤中进行生长。

为了提高移植成功率，
可以对移植物进行根系处理，如修剪、浸泡等。

植物染色体的标本制备

植物染色体的标本制备目前，国内外常用的植物染色体制片技术可以分为两种，即压片技术和去壁低渗技术。

Belling(1921)提出植物染色体压片技术后，压片已成为植物染色体研究中最广泛应用的常规技术；但是由于植物细胞有坚实的细胞壁，染色体很难象动物染色体那样平整地贴在载玻片上，Omura 和Kurata(1978)把植物原生质体技术应用到水稻染色体研究之中，用纤维素酶、果胶酶和0.075mol.L-1氯化钾处理取得了一定的进展，陈瑞阳等人（1979、1982）提出了植物染色体标本制备的酶解去壁低渗技术，并在多种植物上得到广泛应用，成为当今植物染色体研究中的重要方法。

压片技术和去壁低渗技术在取材和预处理要求及其操作都是相同的，即两者的材料基础条件是相同的，但它们所采用的染色体分散方法是不同的。

压片法是以人工外加机械压力使染色体分散，而去壁低渗法是用酶分解细胞壁，低渗液使细胞膜吸胀、水表面张力使染色体分开。

两种技术各有其优缺点，前者操作快速简便、省材省时，后者染色体易于展开、且真实不变形，尤其是对成熟细胞多的植物组织，如芽、愈伤组织等材料有独到效果，本实验主要介绍去壁低渗染色体制片技术。

一、实验原理植物根尖的分生细胞的有丝分裂，每天都有分裂高峰时间，此时把根尖固定，经过染色和压片，再置放在显微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。

二、实验目的根尖染色体压片法，是观察植物染色体最常用的方法，也是研究染色体组型、染色体分带、染色体畸变和姊妹染色单体交换的基础。

学习醋酸洋红染色的具体操作方法，掌握植物有丝分裂制片技术，通过大量的制片观察，能比较快速准确地判断细胞有丝分裂前、中、后、末期的染色体图象，并对其典型制片照像。

三、实验材料大蒜（Aillumsativum）、洋葱（Aillumcepa）的鳞基或蚕豆（Viciafaba）的种子。

四、实验内容1、植物染色体制片技术训练，独立完成植物根尖、茎尖及幼叶的取材、预处理、固定、制片、染色等染色体制片全过程，并获得图象清晰、完整、高度分散的染色体典型图象制片；2、染色体显微照相技术训练，用生物摄影显微镜，摄制某新资源植物种典型的染色体图象照片40张，并从中挑选确定清晰的图片；3、细胞有丝分裂典型时期识别技能训练，通过大量的染色体图象观察，能比较快速准确地判断细胞有丝分裂前、中、后、末各个时期的。

one tube method for chromosome preparation

one tube method for chromosome preparation
一管法是一种可以有效制备染色体的技术，它是由美国科学家施特拉斯（Strasburger）于1906年提出的。

它基于一个简单的原理：当植物或动物细胞的核膜被溶解时，染色体就可以从其中抽出。

一管法将一种溶剂（通常是盐水）加入细胞悬液中，溶解细胞核膜，从而释放染色体。

一管法制备染色体大体上分为三步：
第一步：使用物理技术将细胞悬液放置在一管中，并加入溶剂，以溶解细胞核膜。

第二步：通过均质技术将染色体分离出来，悬浮在溶液中。

第三步：使用冰冻技术将染色体冷冻固定，避免染色体受到损害。

一管法制备染色体的好处是它简单快捷，只需要30分钟就可以完成，而其他技术可能需要数小时或更长时间才能完成。

它还可以有效检测染色体结构，以及细胞质组学及细胞信号中染色体的作用。

另外，一管法可以用于大量样品，有助于快速获取大量数据。

然而，一管法也有一些缺点；它可能会过度溶解核酸，从而影响染色体的效果；也有可能因染色体悬浮不均匀而损害染色体的结构；还可能受污染造成结果不准确的情况。

因此，在使用一管法制备染色体时，要注意梳理实验过程，避免这些问题的发生，最大限度地减少变量的干扰，从而提高实验的准确性和可重复性。

总而言之，一管法是一种可以有效制备染色体的技术，它简单快捷、可大量处理，可以被用于检测染色体结构，以及细胞质组学及细
胞信号中染色体的作用，但是也要注意梳理实验过程，以减少可能的误差，确保实验的准确性和可重复性，取得更好的实验成果。

鹌鹑骨髓细胞染色体制片新方法

鹌鹑骨髓细胞染色体制片新方法随着科技的进步，基因工程及其相关技术的发展，染色体制片技术及其应用也不断发展。

染色体制片技术主要应用于植物、微生物、哺乳动物的染色体分析，如植物、动物的染色体组织和染色体结构分析，细胞癌症、遗传性疾病的检测及基因分析。

这种技术在植物、动物遗传学、生物医学研究中也有广泛的应用，如感染和肿瘤的检测、细胞周期监控、染色体结构变化分析等。

近日，研究人员基于流式细胞术技术，利用鹌鹑骨髓细胞染色体制片新方法研究了染色体的结构和功能。

该研究发现，鹌鹑骨髓细胞染色体制片（FCP）能够更精确地反映出染色体结构特征，这对于更好地了解染色体在基因组结构中的位置具有重要意义。

首先，研究人员采用氢氧化铝（AlOh）持久性染色剂染色，以提高染色稳定性和信号/噪声比。

然后，视野视频技术实施拍摄全自动收集和高精度计数鹌鹑骨髓细胞的染色体结构信息，以消除图像模糊等不足。

同时，研究人员证明了一种简单、有效的氢氧化铝染色工艺，用于提取更多染色体结构信息，如染色体缺失和缩短、反向结构变异等。

此外，研究人员还发现，采用鹌鹑骨髓细胞染色体制片技术可以更加准确有效地测定细胞染色体的倍性结构，对于寻找染色体副本数和类型的变异具有重要意义。

在同一图象上，它们还发现，染色体的染色细胞组分比以及染色体的色素比突变之间存在微妙的关联，同时还发现细胞染色体缺失及缩短等结构变化与染色体组成不匹配。

总之，本研究基于鹌鹑骨髓细胞染色体制片新方法提出了一种新的技术来检测染色体结构和功能，这可以有效地探测染色体缺失和染色体相关性变化。

该技术可以为研究染色体结构和功能提供有效的技术支持，且具有良好的灵敏性和准确性。

未来，该技术在基因组学、植物育种、基因疾病和遗传研究等方面可能具有重要的临床应用。

随着科研的不断深入，鹌鹑骨髓细胞染色体制片技术将在发展过程中进一步完善。

只要有充足的研发投入，相信在未来，鹌鹑骨髓细胞染色体制片技术将能够在生物医学研究中发挥更大的作用，为植物，动物及基因组学研究提供最有效的帮助。

欧李再生和遗传转化体系的研究进展

欧李再生和遗传转化体系的研究进展作者：郎绍裕任静王迪笈小龙宋兴舜来源：《林业科技》2021年第03期摘要：通过总结近年来对欧李再生体系和遗传转化体系的研究结果发现：1.带有芽点的茎段是构建无性系的主要材料;2.叶片更适合诱导愈伤组织产生;3.培养基中添加细胞分裂素和生长素的比例接近时有利于诱导愈伤组织产生，比例升高时会促进愈伤组织的分化;4.单独添加生长素可以诱导生根;5.欧李遗传转化的方法是农杆菌介导法。

同时总结和讨论了影响欧李再生率、转化率的主要因素。

关键词：欧李; 组织培养; 植株再生; 遗传转化; 外植体中图分类号： S 662. 5 文献标识码： A 文章编号：1001 - 9499（2021）03 - 0033- 05欧李（Cerasus humilis （Bge.） Sok.）是我国特有的一种蔷薇科樱属多年生小灌木，也是实施“退耕还林”的重要树种之一，具有重要的生态价值。

欧李适应性强，耐干旱、耐贫瘠、耐盐碱，对生长环境要求较低，具有短期内速生繁殖等优点[ 1 ]。

其果实颜色鲜艳，含有丰富的天然活性钙，是一种具有代表性的药食两用水果[ 2 ]。

同时其种仁中药称之为郁李仁，具有润肠通便，下气利水的功效[ 3 ]。

现阶段对于欧李幼苗栽培，果实加工，新品种培育的研究已经取得了极大的成果，但是对其抗逆机理等分子生物学问题深入研究较少，主要还是因为当前欧李的再生和遗传转化体系构建不够完善，可重复性较差。

基于此，本文对近年来相关研究进行归纳和总结，以期为当前欧李再生和遗传转化时遇到的再生率、转化率低下等问题提供一些参考，旨在为建立欧李快速、高效的再生和遗传转化体系提供理论依据。

1 欧李再生体系和遗传转化体系研究进展近年来，已有较多欧李品种的再生体系和遗传转化体系的研究。

本文将从建立无性系、愈伤组织诱导、诱导不定芽产生和增殖、生根、驯化移栽、遗传转化等方面对当前的研究进行总结。

1. 1 建立无性系1. 1. 1 外植体消毒条件不同欧李品种、不同外植体的消毒条件大致相同。