实验四酵母菌形态观察

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酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴定_百替生物

实验七酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴定一、实验目的1.观察酵母菌的形态特征、出芽生殖方式，并掌握酵母菌与细菌形态特征的区别。

2.学习鉴别死活细胞的实验方法。

二、实验原理酵母菌是单细胞的真核微生物，菌体比细菌大而且不运动。

酵母菌的繁殖方式分为无性繁殖和有性繁殖两种，以无性繁殖为主。

芽殖是酵母菌普遍的无性繁殖方式，少数为裂殖；有性繁殖是产生子囊和子囊孢子。

本实验是通过美蓝染液水浸片和水一碘液水浸片来观察酵母的形态和芽殖方式。

美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。

用美蓝对酵母活细胞染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型，而对代谢作用微弱或死细胞，无此还原能力或还原能力极弱，而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。

因此，不仅用此法可观察酵母细胞形态，也可用来鉴别酵母菌的死细胞和活细胞。

三、实验器材1.材料：酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)或卡尔酵母(Saccharomyces calsbergensis)培养2天左右的麦芽汁(或豆芽汁)液体培养物。

2.试剂：O.1％吕氏碱性美蓝染色液、革兰氏染色用的碘液。

3.器材：显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、洒精灯等。

四、实验步骤1.美蓝浸片观察（1）在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染色液，然后按无菌操作接种环挑去少量酵母菌放在染液中，混合均匀，染液不宜过多。

注：染液不宜过多或过少，否则，在盖上盖玻片时，菌液会溢出或出现大量气泡。

（2）用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上。

注：盖玻片不宜平着放，以免产生气泡。

（3）将制片放置约3min后镜检，先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母的形态和出芽情况，并根据颜色来区别死活细胞。

（4）染色约0.5h后再次观察，注意死细胞数量是否增加。

2.水-碘浸片观察在载玻片中央滴一滴碘液，然后在其上加3小滴水，取少许酵母菌苔放在水-碘液中混匀，盖上盖玻片后镜检。

实验4放线菌、酵母菌、霉菌形态观察.

实验4放线菌、酵母菌、霉菌形态观察.实验四放线菌、酵母菌、霉菌形态观察（一）放线菌的形态观察1 目的观察放线菌的基本形态特征掌握培养放线菌的几种方法2 原理放线菌一般由分枝状菌丝组成，它的菌丝可分为基内菌丝(营养菌丝)、气生菌丝或有孢子丝三种。

放线菌生长到一定阶段，大部分气生菌丝分化成孢子丝，通过横割分列的方式产生成串的分生孢子。

孢子丝形态多样，有直、波曲、钩状、螺旋状、轮生等多种形态。

孢子也有球形、椭圆形、杆状和瓜子状等等。

它们的形态构造都是放线菌分类鉴定的重要依据。

放线菌的菌落早期绒状同细菌菌落月牙状相似，后期形成孢子菌落呈粉状、干燥，有各种颜色呈同心圆放射状。

3 材料3.1 菌种灰色链霉菌(Str. griseus),天蓝色链霉菌(Str. coelicolor),细黄链霉菌（Str.microflavus）。

3.2 培养基高氏1号培养基。

3.3 器皿培养皿，载玻片、盖玻片、无菌滴管、镊子、接种环、小刀(或刀片)、水浴锅，显微镜，超净工作台，恒温培养箱。

4 流程4.1插片法: 倒平板→插片→接种→培养→镜检→记录绘图4.2压印法: 倒平板→划线接种→挑取菌落→加盖玻片→镜检→记录绘图4.3埋片法: 倒琼脂→切槽→接种→培养→镜检→记录绘图5 步骤5.1插片法5.1.1倒平板将高氏1号培养基熔化后，倒10~12毫升左右于灭菌培养皿内，凝固后使用.5.1.2插片将灭菌的盖玻片以45度角插入培养皿内的培养基中，插入深约为1/2或1/3(图5-1)。

5.1.3接种与培养用接种环将菌种接种在盖玻片与琼脂相接的沿线，放置28℃培养3～7天。

5.1.4观察培养后菌丝体生长在培养基及盖玻片上，小心用镊子将盖玻片抽出，轻轻擦去生长较差的一面的菌丝体，将生长良好的菌丝体面向的载玻片，压放于载玻片上。

直接在显微镜下观察。

5.2压印法5.2.1制备放线菌平板同5.1.1。

在凝固的高氏1号培养基平板上用划线分离法得到单一的放线菌菌落。

【生物课件】实验四酵母菌形态及菌落特征的观察

【生物课件】实验四酵母菌形态及菌落特征的观察实验目的通过观察酵母菌的形态和菌落特征，了解酵母菌的生长形态、菌落特征及其对应的属种。

实验器材显微镜、玻璃片、盖玻片、移液管、培养基、酵母菌培养液、灭菌针实验步骤1.制备酵母菌培养液：取1g葡萄糖、0.5g酵母粉、0.1g硫酸镁在100mL蒸馏水中溶解，用自制的无菌培养瓶煮沸30分钟，灭菌后保存备用。

2.取一支酵母菌液体菌种，在无菌条件下采取少量菌液接种到培养基上，再将其存放在恒温培养箱中，温度为25℃，在培养过程中要注意对无菌操作方法的规范性。

3.观察菌落特征：观察24小时、48小时、72小时3个时期的菌落形态，比较菌落的大小、形状、颜色等特征，并记录下来。

4.观察酵母菌形态：用无菌的显微镜玻片将酵母菌液体培养液中的酵母菌移涂到玻璃片上，再用盖玻片把酵母菌压扁。

然后观察酵母菌的形态，比较细胞的大小、形状和细胞壁的厚度等特征，并记录下来。

实验结果1.菌落特征观察：在培养液表面，经过24小时，酵母菌的菌落直径为2mm-3mm，呈白色，球状，边缘清晰；经过48小时，酵母菌的菌落直径为4.5mm-5mm，呈白色，球状，边缘模糊；经过72小时，酵母菌的菌落直径为8mm-10mm，呈乳白色，规则圆形，边缘模糊。

2.酵母菌形态观察：酵母菌细胞呈椭圆形或卵圆形，直径约2μm，细胞壁厚度约为0.1μm。

在显微镜下，酵母菌细胞明显可见且呈现圆形，且细胞壁能被观察到。

讨论分析本实验通过对酵母菌菌落特征、形态的观察，初步确定酵母菌种类。

在进行观察时，需要注意培养温度、培养基的组成以及无菌操作等因素的影响，这些因素都可能对菌落和细胞形态产生一定的影响。

在实验过程中，还可以尝试采用不同的培养基，探究培养基成分对酵母菌的生长和菌落形态的影响，这样可以更加深入地了解酵母菌的生理特性和形态特征。

实验四、酵母菌和霉菌形态的

实验四、酵母菌和霉菌形态的观察
一、实验目的及内容

目的：1、了解霉菌的形态
2、观察并掌握酵母菌的个体形态

内容：1、学习自制水浸片观察霉菌的形态 2、通过制作美蓝浸片观察酵母菌的形态特征
二、实验原理

酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，其大小通常比常见细菌大几倍甚至十几倍。大多数酵母以出芽方式进行无性繁殖，有的分裂繁殖；有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。本实验通过美蓝染液水浸片和水一碘液水浸片来观察酵母的形态和出芽生殖方式。美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的、而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色，借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生抱子。霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多(约为3—10 µm)，常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。

三、操作步骤

1、酵母菌美蓝浸片的制备 (1) 在载玻片中央加一滴0.1％吕氏碱性美蓝染色液，然后按无菌操作用接种环挑取少量酵母菌苔放在染液中，混合均匀。 (2) 用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上。

(3) 将制片放置约3min后镜捡，先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母的形态和出芽情况并根据颜色来区别死活细胞。

实验四放线菌的形态观察和酵母菌的形态观察及死活细胞鉴别

实验四放线菌的形态观察和酵母菌的形态观察及死活细胞鉴别一、实验目的：1.了解放线菌和酵母菌的形态特征。

2.学习区分细胞的死活状态。

二、实验原理：1.放线菌的形态特征：放线菌属于细菌的一种，具有很大的细胞大小差异，通常为革兰氏阳性菌。

放线菌的形态特征包括菌落形态、细胞形态、颜色、菌丝特征等。

放线菌的菌落形态多呈现出有规则的褶皱或丝状结构。

2.酵母菌的形态特征：酵母菌属于真菌的一种，单细胞有丝分裂生殖的真菌。

酵母菌的形态特征包括细胞形态、菌落形态、颜色等。

酵母菌的细胞呈球形或卵圆形，常以单细胞或成链形式存在。

3.死活细胞鉴别：通过酵母菌培养基中的亚甲基蓝染色来判断细胞的存活状态，活细胞吸收染料颜色比较浅，死细胞吸收染料颜色比较深。

三、实验材料与方法：1.材料：-放线菌菌种：已提前分离培养好的放线菌-放线菌培养基：含有葡萄糖、酵母提取物、氨基酸、无机盐等-培养皿、显微镜、镰刀、牛津杯、显微镜载玻片-无菌移液器、无菌吸管、火焰灭菌器-酵母菌培养基：含有葡萄糖、酵母提取物、氨基酸、无机盐等-亚甲基蓝染液：浓度为1%2.方法：a.取一小块放线菌菌落，用镰刀切下悬浮于牛津杯中的放线菌菌落。

b.用无菌吸管将放线菌菌液吸入无菌移液器中，将移液器染上菌液的一侧略吹气，使菌液沾附在显微镜载玻片上。

c.让菌液干燥后，用显微镜在高倍镜下观察放线菌的细胞形态和菌落特征。

d.取一小块酵母菌菌落，用镰刀切下悬浮于牛津杯中的酵母菌菌落。

e.用无菌吸管将酵母菌菌液吸入无菌移液器中，将移液器染上菌液的一侧略吹气，使菌液沾附在显微镜载玻片上。

f.将带有酵母菌菌液的显微镜载玻片倾斜，滴入一滴亚甲基蓝染液，静置5分钟。

g.用显微镜在高倍镜下观察染色后的酵母菌细胞，根据染色程度判断细胞的存活状态。

四、实验结果与分析：通过观察放线菌的细胞形态和菌落特征，可以发现放线菌的形态特征是不规则的菌落结构，内部有菌丝状结构。

放线菌的细胞形态多样，有圆形或椭圆形细胞。

放线菌、霉菌、酵母菌形态观察

七、下一个实验
实验五微生物数量的测定

酵母菌具有典型的真核细胞
结构,有细胞壁、细胞膜、细胞核、
细胞质、液泡、线粒体等，有的
还具有微体。
啤酒酵母的菌落
红酵母的菌落
各种酵母菌的菌落
酵母菌和霉菌的培养对比
电镜下的酵母
三、实验器材
1、菌种：根霉、青霉、曲霉、放线菌、酵母等标本片
2、显微镜、蒸馏水、插镜纸、香泊油、二甲霉。
菌丝无隔、多核、分枝状，在基物内外能广泛蔓延，有假根，无匍匐菌丝。
毛霉
毛霉显微结构
根霉
根霉(Rhizopus)属于毛霉目根霉在自然界分布很广，用途广泛，其淀粉酶活性很强，
是酿造工业中常用糖化菌。我国最早利用根霉糖化淀粉（即阿明诺法）生产酒精。
根霉显微形态
曲霉
红曲霉黑曲霉米曲霉
曲霉
曲霉的显微的显微结构
曲霉和青霉的异同
两者同属于曲霉科的，主要鉴别特征就是孢子。曲霉成的是放射状的孢子青霉成的是扫把状的孢子。
他们都属于半知菌，基本结构特征相同即菌丝有隔，分生孢子，无有性世代等等。显微镜下最容易观察到的是青霉扫帚状排列的分生孢子小梗和曲霉膨大的分生孢子头（顶囊），另曲霉的分生孢子梗直立于菌丝独特厚壁的足细胞上。
实验四放线菌、霉菌、酵母菌的形态观察
实验四放线菌、霉菌、酵母菌的形态观察
一、实验目的
1、学习掌握观察放线菌、霉菌标本片形态特征。
2、学习掌握观察酵母菌标本片形态特征。
二、实验原理---放线菌
放线菌因菌落呈放线状而的得名
二、实验原理
放线菌
放线菌的形态比细菌复杂些，但仍属于单细胞。在显微镜下，放线菌呈分枝丝状

【细菌菌落特征】常见细菌特征性菌落

【细菌菌落特征】常见细菌特征性菌落细菌,酵母,霉菌的形态与菌落特征观察实验四、细菌，酵母，霉菌的形态与菌落特征观察一、实验目的细菌：观察食品中常见细菌的平板菌落特征，了解细菌的菌落在细菌形态学检定上的重要性酵母菌：1.学习并掌握观察酵母菌的形态及出芽繁殖的基本方式2.学习区分酵母的死活细胞的实验方法3.观察酵母的平板菌落特征，了解酵母菌的菌落在真菌形态学检定上的重要性霉菌：1.学习并掌握观察四类常见霉菌形态特征的基本方法2.掌握青霉，曲霉的小室栽片培养法，以便更好地观察其个体形态3.观察霉菌的平板菌落特征，了解霉菌的菌落特征在丝状真菌形态学检定上的重要性二、实验原理1．细菌：将单个微生物细胞或多个同种细胞接种于固体培养基表面，经适宜条件培养，以母细胞为中心，在有限空间中大量繁殖，扩展成一堆肉眼可见的有一定形态构造的子细胞群落，成为菌落。

若将某一纯种细胞大量密集接种于固体培养基表面，菌体生长的各菌落连接成片，称为菌苔。

各种细菌在平板上生成的菌落均具有一定特征，对细菌的分类，鉴定有重要意义，菌落主要用于微生物的分离，纯化，鉴定，计数等研究和选种，育种等实际工作中。

2．酵母菌：以出芽繁殖为主要特征的不运动的单细胞真核微生物，其细胞核与细胞质有明显分化，个体大小比常见细菌大几倍甚至几十倍，酵母菌的形态通常有球状，卵圆状，椭圆状，柱状，或香肠状等多种。

酵母菌的无性繁殖主要有芽殖，裂殖与产生掷孢子和厚垣孢子。

有性繁殖通过结合产生子囊孢子。

酵母菌的母细胞在一系列的芽殖后若长大的子细胞与母细胞不分离，就会形成藕节状的假菌丝，称假丝酵母。

美蓝是一种无毒的弱氧化剂染料，其氧化型呈蓝色，还原型呈无色。

用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。

因此，具有还原能力的酵母活细胞为无色，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色，故可用美蓝鉴别细胞的死活。

实验四酵母菌霉菌放线菌个体形态观察

实验四酵母菌霉菌放线菌个体形态观察实验目的：通过对酵母菌、霉菌和放线菌的个体形态观察，了解它们的外部特征及区分方法。

实验器材：1.酵母菌：酵母菌培养基、显微镜、玻璃片、盖玻片；2.霉菌：霉菌培养基、显微镜、玻璃片、盖玻片；3.放线菌：放线菌培养基、显微镜、玻璃片、盖玻片。

实验步骤：1.酵母菌的观察：(1)取一片酵母菌培养基，用微量移液器吸取适量酵母菌悬浊液滴于盖玻片上；(2)将盖玻片放在显微镜上，用40倍镜下观察酵母菌的形态特征。

2.霉菌的观察：(1)取一片霉菌培养基，用微量移液器吸取适量霉菌悬浊液滴于盖玻片上；(2)将盖玻片放在显微镜上，用40倍镜下观察霉菌的形态特征。

3.放线菌的观察：(1)取一片放线菌培养基，用微量移液器吸取适量放线菌悬浊液滴于盖玻片上；(2)将盖玻片放在显微镜上，用40倍镜下观察放线菌的形态特征。

实验结果：1.酵母菌的形态特征：酵母菌是单细胞真菌，呈卵圆形或肾脏形状，大小约为5-10微米。

在显微镜下观察，可以看到酵母菌呈透明或微黄色，细胞表面光滑，没有菌丝或分枝。

在适宜的培养条件下，酵母菌可以通过分裂繁殖。

2.霉菌的形态特征：霉菌是多细胞真菌，细胞呈丝状或孢子状，构成了菌丝体。

在显微镜下观察，可以看到菌丝呈无规则分枝状，菌丝上有许多孢子。

菌丝和孢子的颜色和形状有所差异，根据这些特征可以区分不同种类的霉菌。

3.放线菌的形态特征：放线菌是革兰氏阳性菌，形态特征类似细菌。

在显微镜下观察，可以看到放线菌呈革兰氏阳性杆菌，有时菌体呈分枝状。

放线菌是严格需氧菌，所以通常在培养基的表面形成菌落。

放线菌的菌落通常呈灰黄色、红色或蓝绿色等，形状不规则。

放线菌还可以产生一种特殊的菌丝结构，孢子链，它们是放线菌繁殖和传播的主要方式。

实验结论：通过对酵母菌、霉菌和放线菌的个体形态观察，我们可以区分它们的外观特征。

酵母菌是单细胞真菌，没有菌丝或分枝，呈卵圆形或肾脏形状；霉菌是多细胞真菌，构成了分枝的菌丝体，菌丝上有多个孢子；放线菌是革兰氏阳性菌，菌体类似细菌，可产生分枝状的菌体和特殊的孢子链。

实验四、放线菌的形态观察和酵母菌的形态观察及死活细胞鉴别

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六、思考与讨论
1、镜检时，你如何区分放线菌的基内菌丝和气生菌丝。 2、在显微镜下，酵母菌与细菌有何异同？（从形态、大小、繁殖方式分析比较）
下次实验项目：霉菌的形态观察
注意：带上镊子和解剖针
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基内菌丝
孢子丝
链霉菌
气生菌丝
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芽细胞
酿酒酵母
裂殖
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精Hale Waihona Puke ppt课件2二、基本原理
1、放线菌形态
放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。常见放线菌大多能形成菌丝，紧贴培养基表面或深入培养基内生长的叫基内菌丝，基内菌丝生长到一定阶段向空中生长出气生菌丝，并进一步分化产生孢子丝及孢子。
插片法是将放线菌接种在琼脂平板上，插上灭菌盖玻片后培养，使放线菌菌丝沿着培养基表面与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻上。观察时，轻轻取出盖玻片，置于载玻片上直接镜检，这种方法可观察到放线菌自然生长状态下特征，而且便于观察不同生长期的形态。
假丝酵母
子囊子囊孢子
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操作要点： • 宜用略暗光线观察。 • 先用低倍镜找到适当视野，再换高倍镜观察。
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四、操作步骤
1、酵母菌形态观察和死活细胞鉴别
在载玻片上滴加0.05%吕氏碱性美蓝染色液
挑取少许酵
母菌，与染液混匀，盖上盖玻片
立刻镜检
放置
3min后镜检
放置10min后再次镜检，观察颜色变化(观
察酿酒酵母、裂殖酵母、假丝酵母）
实验四放线菌的形态观察和酵母菌的形
态观察及死活细胞的鉴别
主讲:徐尔尼生命科学学院生物技术系

实验四：酵母菌形态观察及计数-文档资料

思考题: 一． 1、吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同，对酵母菌死细胞数量有何影响？试分析原因。二． 2、在显微镜下，酵母菌有哪些突出的特征区别于一般细菌？三． 3、某单位要求知道一种干酵母粉中的活菌存活率，请设计1-2种可行的检测方法。
14
1ml菌液中的总数=N/5×25×10000×M=50000N×M（个）
16个中方格
1ml菌液中的总数=N/5×16×10000×M=32000N×M（个）
9
细菌形态观察
5.计数原则
一． 1.在计数前若发现菌液太浓或太稀，需重新调节稀释度后再计数。一般样品稀释度要求每小格内约有 5~10 个菌体为宜。二． 2.每个计数室选 5 个中格（可选 4 个角和中央的一个中格）中的菌体进行计数。三． 3.位于格线上的菌体一般只数上方和右边线上的。四． 4.如遇酵母出芽，芽体大小达到母细胞的一半时，即作为两个菌体计数。五． 5.计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算样品的含菌量。
氧化还原和电极电势
酵母菌形态观察及微生物直接计数法
自定义内容
细菌形态观察一、目的要求:来自1、观察酵母菌的形态特征及出芽方式。
2、了解血球计数板计数原理，掌握显微计数的原理及方法。
3
二、实验原理:
细菌形态观察
1.酵母菌酵母菌是单细胞真核生物，菌体比细菌大且不运动。繁殖方式以无性为（芽殖或裂殖）有性繁殖产生子囊和子囊孢子。
hxjluzhcom2021610酵母菌形态观察及微生物直接计数法201010氧化还原和电极电势自定义内容酵母菌形态观察及微生物直接计数法2021610细菌形态观察1观察酵母菌的形态特征及出芽方式
酵母菌形态观察及微生物直接计数法

工业微生物概述—放线菌显微镜观察

实验四放线菌、霉菌、酵母菌的形态观察 • 一、实验目的
• 1、学习掌握观察放线菌、霉菌标本片形态特征。
• 2、学习掌握观察酵母菌标本片形态特征。
二、实验原理---放线菌二、实验原理---放线菌
放线菌因菌落呈放线状而的得名
二、实验原理
• 放线菌
Hale Waihona Puke 放线菌的形态比细菌复杂些，但仍属于单细胞。在显微镜下，放线菌呈分枝丝状
毛霉与根霉的比较
• ①两者皆有假根，但根霉属有匍匐枝，毛霉属无。②根霉属有囊托，毛霉属无。③两者皆具囊轴 ④毛霉属孢子囊梗单株从菌丝上发生，分枝或不分枝，根霉无分支。
二、实验原理
• 酵母
• 酵母菌是单细胞真核微生物
。酵母菌细胞的形态通常有球形
、卵圆形、腊肠形、椭圆形、柠
檬形或藕节形等。比细菌的单细胞个体要大得多，一般为1~5微米′5~30微米。酵母菌无鞭毛，不能游动。
• 1. 寻找放线菌、霉菌、酵母菌的标本片，注意各类型标本片的菌株名称。
• 2. 在显微镜下寻找观察各标本的最适合倍数，从低倍镜、高倍镜再到油镜。
• 3. 在最适合倍数下画出所观察标本的形态 • 4. 实验完毕，注意镜头的清洗，特别是油镜
五、实验结果
酵母放大倍数 —×—
六、思考题
• 1. 比较毛霉和根霉、青霉和曲霉的形态异同
毛霉
• 毛霉又叫黑霉、长毛霉。
• 菌丝无隔、多核、分枝状，在基物内外能广泛蔓延，有假根，无匍匐菌丝。
毛霉
毛霉显微结构
根霉
根霉(Rhizopus)属于毛霉目根霉在自然界分布很广，用途广泛，其淀粉酶活性很强，
是酿造工业中常用糖化菌。我国最早利用根霉糖化淀粉（即阿明诺法）生产酒精。

微生物实验：酵母菌与霉菌的形态观察

微生物实验：酵母菌与霉菌的形态观察实验四酵母菌与霉菌的形态观察一. 实验目的1. 2. 3. 4.观察酵母菌的形态与结构并掌握其特征。

观察霉菌的菌落特征，学会霉菌的一般制作方法。

观察并掌握各种霉菌的个体形态及生长繁殖方式。

进一步熟悉显微镜的使用。

二. 实验原理酵母菌是一类单细胞真菌，一般呈圆形、椭圆形，无性繁殖以芽孢为主，也有少数是裂殖，有些酵母菌能产生囊孢子，有的能形成假菌丝。

酵母菌的菌落似细菌菌落，但较大且厚，多呈白色，少数为红色。

酵母菌在液体中生长可形成菌膜、菌环、沉淀和浑浊。

酵母菌的细菌结构较完善，即有壁、膜、质、核等结构。

酵母菌的细胞形态、繁殖方式和培养特征均为菌种鉴定的依据。

酵母活细胞新陈代谢旺盛，活力强，复原力也强，假设无毒的染料进入细胞，既被复原脱色，但死细胞及代谢作用缓慢的老弱细胞无此复原力。

美兰是无毒染料，且能被活细胞复原成无色，故可用来区别细胞的死活。

霉菌是一些小型丝状真菌、单细胞〔根霉、毛霉〕或多细胞〔曲霉、青霉〕，其细胞结构与酵母类似，同属真核细胞。

霉菌形态较复杂，个体较大，具有分枝的菌丝体和分化的繁殖器官。

其菌丝分为气生菌丝与营养菌丝〔菌丝比放线菌粗得多〕观察时请注意菌丝是否具有横膈膜、有无假根、无性繁殖时形成何种孢子，孢子着生方式以及孢子头的构造等，以区别各种不同霉菌的形态。

霉菌菌落由分枝状菌丝组成，较疏松，呈毛状、棉絮状、绒毛状或毡状。

由于不同霉菌形成的孢子均有不同颜色、构造、性状，故菌落外表呈现出不同的结构和色泽特征。

菌丝一般呈白色或灰白色，菌落中心的菌丝较老，先产生孢子，故常形成同心圆。

三. 实验器材1. 菌种：面包酵母、根霉、曲霉、青霉。

2. 仪器：显微镜。

3. 其它：生理盐水、乳酸酚棉兰染液、载玻片、盖玻片、接种环、酒精灯、美兰、镊子、大头针。

四. 步骤与方法1. 酵母菌细胞形态观察〔1〕制片：用接种环挑取一环面包酵母菌种于载玻片上的一滴美兰染液中混匀，盖上盖玻片静置4~5分钟。

实验四酵母菌的形态观察

实验四酵母菌的形态观察, 死活细胞鉴别,微生物测量技术,显微镜直接计数法生物科学贺冰冰 040012010025 周二 9、0 节一实验目的1．观察酵母菌的形态及出芽生殖方式，学习区分酵母菌死活细胞的实验方法；掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。

2.了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造及使用原理，掌握测定微生物细胞大小的方法 .3. 了解血球计数板的构造和使用方法,学会用血球计数板对酵母细胞进行计数。

二实验原理美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。

用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。

因此，具有还原能力的酵母细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色。

微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体微小，只能在显微镜下测量。

用于测量微主物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。

目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把 10 mm长度刻成 100等分。

测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间物像重叠)用于测量经显微镜放大后的细胞物象。

由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。

镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的专用载玻片，一般将lmm等分为100格，每格长10μm，每格长（0.01mm），是专门用来校正目镜测微尺的。

校正时，将镜台测微尺放在载物台上，由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成像进入视野，即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的实际长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物细胞大小。

酵母菌的形态观察实验报告

一、实验目的1. 观察酵母菌的细胞形态及出芽生殖方式。

2. 学习掌握区分酵母菌死、活细胞的染色方法。

二、实验原理酵母菌是一种单细胞真菌，其细胞结构包括细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核等。

酵母菌主要通过出芽生殖进行繁殖，即在母细胞的一端形成芽体，芽体逐渐长大并与母细胞分离，形成新的个体。

美蓝是一种无毒性的染料，其氧化型呈蓝色，还原型无色。

活细胞具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型，因此，活细胞无色，而死细胞或代谢缓慢的老细胞则呈蓝色或淡蓝色。

三、实验器材1. 酿酒酵母或卡尔酵母（Saccharomyces calsbergensis）2. 0.1%吕氏碱性美蓝染液3. 革兰氏染色用的碘液4. 显微镜5. 载玻片6. 盖玻片7. 接种针8. 烧杯9. 火柴四、实验步骤1. 准备酵母菌培养物：取少量酿酒酵母，接种于土豆平板培养基上，28-30℃培养3-5天。

2. 制备美蓝浸片：a. 在载玻片中央滴一滴0.1%吕氏碱性美蓝染液。

b. 用接种针挑取少量酵母菌，均匀涂布在染液上。

c. 盖上盖玻片，轻压使酵母菌与染液充分接触。

3. 制备水浸片：a. 在载玻片中央滴一滴无菌水。

b. 用接种针挑取少量酵母菌，均匀涂布在水中。

c. 盖上盖玻片，轻压使酵母菌与水充分接触。

4. 显微镜观察：a. 将美蓝浸片和水浸片置于显微镜下观察。

b. 观察酵母菌的细胞形态、大小、细胞核、芽体等特征。

c. 比较美蓝浸片和水浸片中酵母菌的形态差异。

5. 死活细胞鉴别：a. 观察美蓝浸片中酵母菌的染色情况。

b. 活细胞呈无色，死细胞或代谢缓慢的老细胞呈蓝色或淡蓝色。

五、实验结果1. 酵母菌细胞形态：a. 酵母菌细胞呈椭圆形、圆形或卵圆形，大小不一。

b. 细胞核位于细胞中央，呈圆形或椭圆形，核膜清晰。

c. 细胞质均匀，无色或淡蓝色。

2. 出芽生殖方式：a. 观察到酵母菌细胞一端形成芽体，芽体逐渐长大。

b. 芽体与母细胞分离，形成新的个体。

酵母菌形态的观察和显微镜直接计数法

根据计算结果，得出样品中微生物的数量及分布情况。
显微镜直接计数法的优缺点
优点
操作简单、快速，适用于初步估计样品中微生物的数量。
缺点
主观性强，误差较大，无法准确反映样品中微生物的种类和分布情况。
03 酵母菌的应用
酿酒工业
酿造啤酒
酵母菌是酿造啤酒的关键微生物，通过发酵作用将麦芽中的糖分转化为酒精和二氧化碳。
选择高倍数显微镜，以便清晰观察酵母菌形态。
用于放置观察样本，需干净无痕。
酵母菌培养液
选择适当的培养基，以便培养和观察不同种类
的酵母菌。
染色剂
如美蓝或苯酚品红，用于染色酵母菌，使其更
易于观察。
实验操作步骤
1. 制备样本
将酵母菌培养液滴在载玻片上，然后盖上盖玻片。
2. 染色
用染色剂对样本进行染色，使酵母菌更容易观察。
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3. 观察
在显微镜下观察酵母菌形态，记录其特征。
4. 计数
采用直接计数法，统计显微镜下观察到的酵母菌数量。
实验注意事项与安全须知
样本新鲜度
确保样本新鲜，避免酵母菌死亡或污染。
显微镜操作
正确操作显微镜，避免损坏仪器或造成人身伤害。
安全须知
避免染色剂与皮肤、眼睛接触，如不慎接触，应立即用大量清水冲洗。
酵母菌的分类学依据
形态学特征
根据酵母菌的形态、大小、出芽方式等特征进行分类。
生理生化特征
根据酵母菌的生理生化反应和代谢产物进行分类。
分子生物学特征
通过分析酵母菌的基因组序列和分子标记进行分类。
02 显微镜直接计数法

04 酵母菌的形态观察和显微直接计数法

四、实验报告
绘出酵母菌在高倍镜下的视野图
操作录像
微生物的显微直接计数法
一目的要求
1．明确血细胞计数板（血球计数板）计数的原理。 2．掌握使用血细胞计数板进行微生物计数的方法。
二基本原理
计数板是一块特制的厚玻璃片，玻片上有四个槽构成三个平台，中间的平台又由一短的横槽隔成两半，其上各刻有一方格网，每个方格网共分九个大方格，中间的大方格即为计数室，微生物的计数就在计数室中进行。
二实验材料和用具酿酒酵母saccharomyescerevisiae斜面菌显微镜载玻片擦镜纸盖玻片接种环三操作步骤取005美蓝染色液12滴置载玻片中央并用接种环挑取少量酵母菌菌苔与染色液混匀染色23min加盖玻片注意不要产生气泡2在高倍镜下观察酵母菌个体形态区分其母细胞与芽体区分死细胞蓝色与活细胞不着四实验报告绘出酵母菌在高倍镜下的视野图操作录像微生物的显微直接计数法一目的要求1
三

试验材料
菌种：稀释103倍的啤酒酵母培养液其他：显微镜、血球计数板、毛细管、盖玻片、吸水纸、擦镜纸等。
四操作步骤
1. 检查血球计数板取血球计数板一块，先用显微镜检查计数板的计数室，看其是否沾有杂质或干涸着的菌体。若有污物则用少量脱脂棉沾95%酒精，轻轻擦洗，然后用水冲洗，再用吸水纸吸干（切勿用火焰烘烤），最后用擦镜纸擦干净。镜检清洗后的计数板，直至计数室无污物时才可使用。 2. 稀释样品将培养后的酵母培养液振荡振摇混匀，然后作一定倍数的稀释。稀释度选择以小方格中的分布的菌体清晰可数为宜。一般以每小格内含4～5个菌体的稀释度为宜。
3. 加样取出一块干净盖玻片盖在计数板中央。用毛细管取菌稀释悬液注入盖玻片边缘，让菌液自行渗入，若菌液太多可用吸水纸吸去。（如有气泡须重做，且盖玻片不能上浮，菌液不能溢至盖玻片上方。）静置5—10分钟。 4. 镜检待细胞不动后进行镜检计数。先用低倍镜找到计数室方格后，再用高倍镜测数。一般应取上下及中央五个中格的总菌数。每个样品重复计数3次（每次数值不应相差过大，否则应重新操作），取其平均值，按公式计算出每毫升菌液所含酵母细胞数。