最新凝聚胺介质交叉配血试验操作规程
s014交叉配血试验标准化操作规程(聚凝胺法)
红细胞外表的负电荷，使红细胞的 Zeta 电位降低，从而产生红细胞
可逆性的聚集，缩短红细胞之间的距离，让 IgG 抗体可直接引起红细
胞凝聚。第三步参加重悬液，重悬液可中和聚凝胺的作用。可区分由
聚凝胺诱发的红细胞之间的非特异性凝聚与由抗原抗体反响所致的
特异性凝聚。
四、适用范围
适用于输血前需进展穿插配血试验的血液及血液成分。
采用聚凝胺介质试管法；
三、原理
聚凝胺法第一步采用低离子强度溶液降低红细胞和抗体反响介
质的离子强度，从而减少了红细胞周围的阳离子云，促进带正电荷的
IgG 抗体与带负电荷的红细胞发生反响，这样大大加快了抗原和抗体
反响的速率。第二步通过参加聚凝胺来促使红细胞产生可逆性的非特
异性凝聚。聚凝胺是一种多价阳离子溴化己二甲胺多聚物，可以中和
五、仪器设备
ห้องสมุดไป่ตู้
普通离心机；血型专用离心机；
六、试剂
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z.
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文件名
穿插配血试验标准化操作规程〔聚凝胺法〕
编制人
审核人
批准人
批准日期
修改日期
签字
修改日期
签字
复审日期
签字
复审日期
签字
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z.
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穿插配血试验标准化操作规程〔聚凝胺法〕
一、目的
为保证临床输血的相容性，确保临床输血平安，对全血、红细胞 悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机 采浓缩白细胞悬液等血液成分进展穿插配血试验。 二、方法
凝聚胺介质交叉配血试验操作规程
凝聚胺介质交叉配血试验操作规程(S O P文件) 1目的作为介质辅助用于完全抗体及不完全抗体的临床筛选检测及辅助用于临床交叉配血实验。
2检验原理红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。
凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM)，降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。
其后，加入凝聚胺（Polybrene)溶液，它是一种高价阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。
最后，加入悬浮液（Resuspending),Resuspending具有中和凝聚胺（Polybrene)阳离子的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。
3储存条件及有效期未开封试剂应贮存于2℃~25℃、相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体的室内；已开封试剂应贮存于相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体和通风良好的室温环境，试剂用后应及时拧紧瓶盖保存；未开封试剂的有效期为二年，在有效期内的已开封试剂应在开封后的6个月内使用完。
4样本要求4.1新鲜血清，含EDTA抗凝血浆、3%~5%的红细胞悬液。
4.2不能使用溶血标本及含枸橼酸钠、肝素抗凝血浆标本。
5检验方法辅助交叉配血试验5.1取试管二支，标主次侧，主侧管加病人血清（血浆）2滴，加供血者3%~5%红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1滴，次侧管反之。
5.2各加LIM0.65ml,混合均匀后，再各加Polybrene溶液2滴，并混合均匀。
5.3用离心机3400转/min(相当于1000g离心力）离心10秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。
交叉配血操作规范(凝聚胺法)
交叉配血操作规范（凝聚胺法）【操作人员】经批准人授权的同志【部门主管】【质量控制员】【目的】保证测试结果的准确性。
【适用仪器范围】双目显微镜、普通离心机。
【该SOP变动程序】该标准操作程序的更改，可由任一使用本程序的操作人员提出并报请专业主管及科主任签字后生效。
【应用范围】交叉配血（凝聚胺法）的手工操作。
【标本采集和处理】1．由临床科室采用真空负压EDTA K2抗凝管采集3ml-5ml，作好标记，立即送检。
备血使用的受血者标本必须是输血前三天之内的血样。
采血时要防止溶血及多量组织液混入（多发生在静脉穿刺不顺利勉强抽血时），在病人输液时采集标本，必须从未输液的一侧肢体抽取，绝不允许在输液管接头处采集。
2．非急症病人输血前，应事先采取血标本作血型鉴定，填写申请单配血单上，以便核对。
急症抢救输血，未能事先采血检测血型，则要求由专人核对、贴标签、采取血标本送检。
3. 检验人员认真核对患者姓名、性别、床号、检验目的以及标本是否与申请单一致。
确认无误后用专用记号笔在试管与申请单上编写对应数字序号。
并按日期索引进行登记。
4. 将标本置于台式离心机内，放置保证平衡，以1500转/min离心10分钟。
保证血浆于血球有效分离。
溶血标本应重采取、乳糜血及标本量不足应加以登记，溶血性疾病应注明。
【方法学原理】凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清（浆）中的抗体反应，再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集，让已有抗体（IgG）反应的红细胞间的距离缩短。
距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。
而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开，如有免疫反应，凝集就不会散开，为阳性反应。
如没有免疫反应，凝集就会散开，为阴性反应。
交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺，检测供患之间是否相合，患者血清（浆）中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。
【试剂和材料】1．供血者血清（血浆）；2．受血者血清（血浆）；3．BASO凝聚胺（Polybrene）试剂盒。
交叉配血试验(凝聚胺方法)
交叉配血试验（凝聚胺方法）一、试剂储存条件及有效期未开封试剂应贮存于2～25℃、相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体的室内；已开封试剂应贮存于相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体和通风良好的室温环境，试剂用后应及时拧紧瓶盖保存；未开封试剂的有效期为二年，在有效期内的已开封试剂应在开封后的6个月内使用完。
二、样本要求1、新鲜血清、含EDTA抗凝血浆、3%-5%的红细胞悬液。
2、不能使用溶血标本及含枸橼酸钠、肝素抗凝血浆标本。
三、检验方法1、取试管二支，标主次侧，主侧管加病人血清（血浆）2滴，加供血者 3-5%红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1 滴，次侧管反之。
2、各加 LIM0.7ml,混合均匀后，再各加 Polybrene2 滴，并混合均匀。
3、用血库离心机 3400 转/分离心 10 秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml 液体。
4、轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。
5、最后加入 Resuspending2 滴，轻轻转动试管混合并涂片，显微镜下观察结果：在 30 秒-1 分钟内凝集散开，代表是由 Polybrene 引起的非特异性聚集，配血结果相合；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。
如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。
四、注意事项1、可以用含EDTA之血浆代替血清使用。
2、若病人血清（血浆）含肝素，如洗肾患者，须多加4-6滴Polybrene溶液以中和肝素。
3、本试剂盒的操作方法也适用于抗体鉴定。
4、若试剂使用前为低温贮存，请恢复室温再行操作。
5、加做辅助性抗球蛋白试验，目的是增加检测抗-K的敏感性，对检测其他红细胞抗体无帮助。
6、在冬天室温极低的情况下，操作交叉配血试验，某些病人血清中可能含有寒冷凝集素等因素，面导致假阳性的结果出现。
若有此怀疑，建议在最后滴入Resuspending时，将试管立即置入37摄氏度水浴中，轻轻转动试管混合，并在60秒内观察结果。
交叉配血操作规程凝聚胺法
交叉配血操作规程（凝聚胺法）一．目的规范交叉配血试验操作；保证临床用血的安全性和有效性。
二．适用范围适用于临床配血标本。
三．职责血库技术人员负责交叉配血试验四．所需材料和设备材料：凝聚胺试剂盒、患者血标本、生理盐水、小试管、滴管、献血者标本。
设备：普通离心机、血型血清学专用离心机、37℃恒温水浴箱、显微镜五．操作步骤1.凝聚胺法（1）以生理盐水配制供、受者3％～5％红细胞悬液。
（2）取试管3支，标记主、侧和自身对照主侧加受血者血浆（血清）2滴，献血者3%～5%的红细胞悬液1滴；次侧加献血者血浆（血清）2滴，受血者3%～5%的红细胞悬液1滴；自身对照管加患者血浆（血清）2滴和患者3%～5%的红细胞悬液1滴混匀。
（3）以1000r/分钟离心1分钟，观察盐水介质实验结果。
（4）每管各加低离子介质（LIM）溶液0.7ml,混合均匀，室温孵育1min。
（5）每管各加2滴凝聚胺溶液，混匀后静置15s。
（6）1000r/分钟离心1分钟，倾去上清液，不要沥干。
（7）轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，必须重复步骤（3）-（6）（8）加入2滴重悬液，并轻轻混合，观察结果。
（9）结果判定如凝聚散开，则为凝聚胺引起的非特异性凝集，判为阴性结果，配血相合；如凝聚不散开，则为抗原抗体结合的特异性反应，判为阳性结果，配血不相合，如肉眼观察凝集强度弱，可进一步在显微镜下观察有无凝集。
结果判定要求在1min内完成，最长不要超过3min，因为弱凝集的阳性结果，超过1min 可能变为阴性。
六．注意事项1.配血技术①常规配血技术：选择的技术不仅要能检查出不配合的IgM抗体，还必须能检查出尽可能多的不配合的IgG抗体，最大限度地减少抗体的漏检。
目前认为盐水法交叉配血是输血前检查必不可少的试验，首先采用盐水法进行交叉配血，再采用能够检出IgG类抗体的方法进行交叉配血；②特殊配血技术，如：预温配血技术：主要用于解决无临床意义的冷抗体引起的交叉配血不配合。
交叉配血操作规程凝聚胺法
交叉配血操作规程凝聚胺法交叉配血是指将一定数量的输血者的红细胞与另一组供血者的血清进行混合，通过观察混合血后是否发生凝集反应来确定血型。
交叉配血操作主要采用凝聚胺法进行，以下是交叉配血操作规程的详细步骤。
1.准备工作a.配置所需试剂，包括输入血浆、配血瓶、试剂盘、标本管、溶血酶溶液、配血盘等。
b.通过测定输血者和供血者的血型，确认双方的血型信息，并记录在相关记录表中。
2.标本采集a.采集输血者和供血者的静脉血标本，放入标本管中，避免血样凝固。
b.标本采集的相关操作要符合严格的无菌原则，确保血样的无菌及安全性。
3.标本处理a.将标本管中的静脉血标本置于冰上，在4℃下保存。
b.用溶血酶溶液处理输血者的红细胞，将3滴红细胞加入到每一个配血瓶中，轻轻摇动混合均匀。
4.试剂配置a.将配血盘中的试剂盘取出，配置新鲜的抗血型血清和已知血型标准红细胞。
5.凝胶装配a.打开凝胶洞口，将配血盘的试剂盘放入凝胶洞中。
b.确保试剂盘的位置正确，使试剂液体触及到凝胶洞的底部。
6.样本混合a.取出保存在冰上的输血者和供血者的静脉血标本，放置于试剂盘的对应位置。
b.轻轻旋转试剂盘，使血样和试剂充分混合起来，注意避免搅拌过于激烈。
7.观察凝聚反应a.在一定的时间内，观察配血盘中是否发生凝聚反应。
b.根据凝聚反应的情况，判断输血者和供血者的血型是否兼容。
8.结果判读a.若输血者的红细胞与供血者的血清发生凝聚反应，表示两者的血型不兼容，不适合进行输血。
b.若输血者的红细胞与供血者的血清没有发生凝聚反应，表示两者的血型兼容，可以进行输血。
9.记录和报告a.记录每次交叉配血的操作过程和结果，包括输血者和供血者的血型信息、配血的凝聚反应情况等。
b.报告输血者的血型结果和是否适合进行输血。
交叉配血操作规程凝聚胺法主要是通过观察凝聚反应来判定血型的兼容性，该方法操作简单、结果可靠。
但需要注意的是，交叉配血结果只能作为指导输血的参考依据，还需要综合考虑患者的临床情况和输血指征等因素，确保安全有效地进行输血操作。
凝聚胺交叉配血标准操作规程
凝聚胺交叉配血标准操作规程一、目的：为规范交叉配血试验的技术操作，保证临床输血安全有效，特制定本规程。
二、适用范围适用于输血科进行交叉配血试验三、职责输血科技术人员负责交叉配血试验。
四、测定原理：红细胞表面带有大量的负电荷，凝聚胺是一种高效价阳离子季胺盐多聚物，溶解后产生较多正电荷，可以中和红细胞表面的唾液酸带有的负电荷，使红细胞之间的距离减少。
若是未被抗体致敏的红细胞，加入悬浮液它具有中和凝聚胺的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体所致敏，则会被凝聚胺凝集，凝块就不会散开，试验结果为阳性。
五、试剂及材料(一)聚凝胺试剂盒(合肥天一生物技术研究所)成分：低离子介质溶液、聚凝胺溶液、重悬液、阴性及阳性对照液；保存条件：2~8℃贮存2年，试剂盒打开使用后可置于室温(二)材料：玻璃试管、微量移液器、离心机、载玻片、显微镜等六、标本要求：(一)抽取受血者抗凝（抗凝剂为EDTA.K2）静脉血2-3ml（注意核对病人信息）, 在3000r/min条件下离心5分钟备用。
(二)标本保存：血液样本必须密封，2~8℃保存7天。
(三)用于交叉配血必须是2~8℃保存3天以内的标本。
七、操作程序：(一)将受血者红细胞配成3%盐水悬液，鉴定ABO血型及Rh血型。
(二)将供血者血样配制3%红细胞悬液，鉴定ABO血型及Rh血型。
(三)取洁净小试管2支，1支标明受血者血清（PS）+供血者细胞（DC）或“主侧”；另1支标明供血者血清（DS）+受血者细胞(PC)或“次侧”。
（四）主侧管：受血者血清100ul+供血者红细胞悬液50ul。
次侧管：供血者血清100ul+受血者红细胞悬液50ul。
各加低离子介质溶液0.6 ml，混匀后静置1分钟，再各加聚凝胺溶液2滴，静置15s。
(五) 混合均匀后，在1000g条件下离心15s，然后倒掉上清液。
(六) 轻轻侧动试管里的细胞扣，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。
交叉配血操作规程(凝聚胺法)
交叉配血操纵规程（凝集胺法）之青柳念文创作一．目标规范交叉配血试验操纵；包管临床用血的平安性和有效性.二．适用范围适用于临床配血标本.三．职责血库技术人员负责交叉配血试验四．所需资料和设备资料：凝集胺试剂盒、患者血标本、生理盐水、小试管、滴管、献血者标本.设备：普通离心机、血型血清学专用离心机、37℃恒温水浴箱、显微镜五．操纵步调1.凝集胺法（1）以生理盐水配制供、受者3％～5％红细胞悬液.（2）取试管3支，标识表记标帜主、侧和自身对照主侧加受血者血浆（血清）2滴，献血者3%～5%的红细胞悬液1滴；次侧加献血者血浆（血清）2滴，受血者3%～5%的红细胞悬液1滴；自身对照管加患者血浆（血清）2滴和患者3%～5%的红细胞悬液1滴混匀.（3）以1000r/分钟离心1分钟，观察盐水介质实验成果.（4）每管各加低离子介质（LIM）溶液0.7ml,混合平均，室温孵育1min.（5）每管各加2滴凝集胺溶液，混匀后静置15s.（6）1000r/分钟离心1分钟，倾去上清液，不要沥干.（7）轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝固，如无凝固，必须重复步调（3）-（6）（8）加入2滴重悬液，并轻轻混合，观察成果.（9）成果断定如凝离合开，则为凝集胺引起的非特异性凝固，判为阴性成果，配血相合；如凝集不散开，则为抗原抗体连系的特异性反应，判为阳性成果，配血不相合，如肉眼观察凝固强度弱，可进一步在显微镜下观察有无凝固.成果断定要求在1min内完成，最长不要超出3min，因为弱凝固的阳性成果，超出1min可以变成阴性.六．注意事项1.配血技术①惯例配血技术：选择的技术不但要能检查出不配合的IgM抗体，还必须能检查出尽量多的不配合的IgG抗体，最大限度地减少抗体的漏检.今朝认为盐水法交叉配血是输血前检查必不成少的试验，首先采取盐水法停止交叉配血，再采取可以检出IgG类抗体的方法停止交叉配血；②特殊配血技术，如：预温配血技术：主要用于处理无临床意义的冷抗体引起的交叉配血不配合.2.主侧交叉配血不相合的原因①患者或供者ABO血型定型不正确，或二者的ABO血型不配合；②患者血清中存在同种抗体，与供者红细胞上的相应抗原起反应；③患者血清中存在自身抗体，与供者红细胞中的相应抗原起反应；④供者红细胞上已经包被了抗体，导致抗球蛋白阳性；⑤患者血清不正常，如白蛋白/球蛋白比例不正常引起缗钱状假凝固，血清中存在高分子聚合物的血浆扩容剂引起假阳性（用盐水添加试验来处理）；⑥试验系统被污染.3.次侧交叉配血不相合的原因①供者血清中存在针对患者红细胞抗原的抗体；②患者与供者的ABO血型不相合；③患者红细胞已经包被了抗体，直接抗球蛋白试验阳性.。
交叉配血(凝聚胺法)标准操作规程SOP文件
交叉配血（凝聚胺法）标准操作规程SOP文件1. 原理凝聚胺（polymatching）法首先利用低离子介质降低溶液的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，促进血清（浆）中的抗体与红细胞相应抗原结合，再加入带亚电荷的高价阳离子多聚物-凝聚胺溶液，中和红细胞表面的负电荷，缩短细胞间距，形成可逆的非特异性聚集，并使IgG型抗体直接凝集红细胞。
加入中和液后，仅由凝聚胺引起的非特异性聚集，会因电荷中和而分散，而由抗体介导的特异性凝集则不会分散。
2. 标本采集：2.1 标本种类：抽取静脉血3-4ml待凝固后分离血清，将细胞配成5％盐水悬液将供血者血样以同样方法分离血清(浆)和红细胞悬液。
2.2 标本要求：抗凝和干燥管均可，如用抗凝血主张用EDTAK2（mg/dz）抗凝标本应无溶血，切标签齐全。
3. 标本储存：急诊标本30分钟内完成操作，标本应至4℃冰箱保存7天。
4. 标本运输：室温运输。
5. 标本拒收标准：污染。
溶血标本，标签不齐全不能作测定。
6. 试剂：6.1 试剂名称：凝聚胺试剂(polymatching)6.2 试剂生产厂家：6.3 试剂组成：试剂1. 低离子介质(LowLonic Medium，LIM).试剂打开使用后，可置室温贮存，未开封者2-10度贮存，有效期为2年。
试剂2. 凝聚胺溶液(PolybreneSolution).贮存及有效期同上。
试剂3. 重悬液(ResuspendingSolution).贮存及有效期同上。
试剂4. 8.5％生理盐水。
7. ：7.17.27.3 恒温水箱8. 操作步骤及结果判断：8.1 供受者红细胞用生理盐水配成3-5％的细胞悬液。
加样量均为：血清2滴，红细胞悬液1滴。
主管：受血者血清+供者红细胞悬液;次管：受者红细胞悬液+供者血清;(阴阳对照管另设)。
8.2 各管分别加低离子介质0.6ml混匀置室温1分钟。
加凝聚胺溶液2滴，混匀，置室温15秒。
8.3 1000g(3000rpm)，离心18秒，弃上清液，管底保留约2滴液体。
08-聚凝胺介质交叉配血操作规程---作业指导书
操作人员3.1.1负责对检测标本进行聚凝胺介质交叉配血的具体操作并编写实验报告单。
仪器管理人员3.2.1负责相关仪器的日常保养。
3.2.2负责相关仪器的维护。
质量监督员负责操作过程监督，仪器室内质量控制。
科室主任或授权者负责检测报告审核。
实验原理聚凝胺是一种多价阳离子聚合物，在溶液中有多个阳离子基团，能中和红细胞表面的负电荷，并借助正负电荷的相互作用，引起红细胞的非特异性凝聚，这种凝聚力是可逆的。
当红细胞与血清在低离子介质中孵育，IgG抗体与红细胞上相应的抗原结合后，在聚凝胺的作用下发生凝集，凝集和聚集外表上肉眼不能区分，当再加入枸橼酸钠重悬液，枸橼酸根标本接收6.1.1可接收标本：受检的标本为输血前3天内抽取的静脉血标本，抗凝或不抗凝全血标本上有完整的与申请单相对应的受检者姓名、标本号、检测项目标签，标本量符合要求，外包装合格无污染。
6.1.2拒收标本：标本上无与申请单相对应的受检者姓名、标本号、检测项目标签，标本量不符合要求，外包装明显污染。
标本有发生污染、溶血、稀释、脂血及保留血标本时间不合要求等情况。
患者ABO血型鉴定，见《ABO血型定型试管法操作规程》。
患者Rh（D）定型，见《Rh血型鉴定试管法操作规程》。
患者血清进行抗体筛选实验，见《抗体筛选试管法操作规程》。
聚凝胺法交叉配血实验6.5.1患者标本准备6.5.1.1分离血清，标记为PS。
6.5.1.2配制3%-4%患者红细胞生理盐水悬液，标记为PC。
《Rh血型鉴定试管法操作规程》（SXK-SOP-002）《抗体筛选试管法操作规程》（SXK-SOP-005）《盐水介质交叉配血操作规程》（SXK-SOP-007）。
交叉配血试验操作规程
交叉配血试验操作规程1目的：保证临床用血安全，为患者提供配血相合的血液制品。
2范围：患者的血液标本与供血者标本。
3职责：3.1临床科室采集正确的血样，并提交输血申请单。
3.2血库进行交叉配血试验。
4所用设备与试剂4.1BY-320A离心机4.2聚凝胺介质试剂5原理：红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。
凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM）降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。
其后，加入凝聚胺（Polybrene）溶液，它是一种高价阳离子多聚物，肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚，最后，加入悬浮液（Resuspending）,Resuspending具有中和凝聚胺阳例子的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，实验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阴性。
6操作将受血者、供血者的标本选择工况3分离血清及血浆待用。
用生理盐水姜受血者、供血者红细胞制备5%盐水悬液代用（选用工况2洗涤红细胞三次）6.1盐水介质交叉配血试验：6.1.1取小试管2支标记主、次侧。
主侧管：受血者血清（PS）100ul+ 供血者红细胞悬液（DS）50ul；次侧管：供血者血浆（DS）100ul+受血者红细胞悬液（PC）6.1.2将上述试管混匀后，放入离心机，选工况16.1.3取出试管，观察上清液是否溶血，如果没有溶血，然后轻轻晃动试管，肉眼观察结果。
6.1.4结果判定：6.1.4.1肉眼观察，如果试管中出现任何红细胞凝集或溶血，则判读为阳性、配血结果不相合，无凝集为阴性、配血结果相合。
最新凝聚胺交叉配血标准操作规程
凝聚胺交叉配血标准操作规程一、目的：为规范交叉配血试验的技术操作，保证临床输血安全有效，特制定本规程。
二、适用范围适用于输血科进行交叉配血试验三、职责输血科技术人员负责交叉配血试验。
四、测定原理：红细胞表面带有大量的负电荷，凝聚胺是一种高效价阳离子季胺盐多聚物，溶解后产生较多正电荷，可以中和红细胞表面的唾液酸带有的负电荷，使红细胞之间的距离减少。
若是未被抗体致敏的红细胞，加入悬浮液它具有中和凝聚胺的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体所致敏，则会被凝聚胺凝集，凝块就不会散开，试验结果为阳性。
五、试剂及材料(一)聚凝胺试剂盒(合肥天一生物技术研究所)成分：低离子介质溶液、聚凝胺溶液、重悬液、阴性及阳性对照液；保存条件：2~8℃贮存2年，试剂盒打开使用后可置于室温(二)材料：玻璃试管、微量移液器、离心机、载玻片、显微镜等六、标本要求：(一)抽取受血者抗凝（抗凝剂为EDTA.K2）静脉血2-3ml（注意核对病人信息）, 在3000r/min条件下离心5分钟备用。
(二)标本保存：血液样本必须密封，2~8℃保存7天。
(三)用于交叉配血必须是2~8℃保存3天以内的标本。
七、操作程序：(一)将受血者红细胞配成3%盐水悬液，鉴定ABO血型及Rh血型。
(二)将供血者血样配制3%红细胞悬液，鉴定ABO血型及Rh血型。
(三)取洁净小试管2支，1支标明受血者血清（PS）+供血者细胞（DC）或“主侧”；另1支标明供血者血清（DS）+受血者细胞(PC)或“次侧”。
（四）主侧管：受血者血清100ul+供血者红细胞悬液50ul。
次侧管：供血者血清100ul+受血者红细胞悬液50ul。
各加低离子介质溶液0.6 ml，混匀后静置1分钟，再各加聚凝胺溶液2滴，静置15s。
(五) 混合均匀后，在1000g条件下离心15s，然后倒掉上清液。
(六) 轻轻侧动试管里的细胞扣，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。
交叉配血操作规程(凝聚胺法)
交叉配血操作规程（凝聚胺法）一．目的规范交叉配血试验操作；保证临床用血的安全性和有效性。
二．适用范围适用于临床配血标本。
三．职责血库技术人员负责交叉配血试验四．所需材料和设备材料：凝聚胺试剂盒、患者血标本、生理盐水、小试管、滴管、献血者标本。
设备：普通离心机、血型血清学专用离心机、37℃恒温水浴箱、显微镜五．操作步骤1.凝聚胺法（1）以生理盐水配制供、受者3％～5％红细胞悬液。
（2）取试管3支，标记主、侧和自身对照主侧加受血者血浆（血清）2滴，献血者3%～5%的红细胞悬液1滴；次侧加献血者血浆（血清）2滴，受血者3%～5%的红细胞悬液1滴；自身对照管加患者血浆（血清）2滴和患者3%～5%的红细胞悬液1滴混匀。
（3）以1000r/分钟离心1分钟，观察盐水介质实验结果。
（4）每管各加低离子介质（LIM）溶液0.7ml,混合均匀，室温孵育1min。
（5）每管各加2滴凝聚胺溶液，混匀后静置15s。
（6）1000r/分钟离心1分钟，倾去上清液，不要沥干。
（7）轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，必须重复步骤（3）-（6）（8）加入2滴重悬液，并轻轻混合，观察结果。
（9）结果判定如凝聚散开，则为凝聚胺引起的非特异性凝集，判为阴性结果，配血相合；如凝聚不散开，则为抗原抗体结合的特异性反应，判为阳性结果，配血不相合，如肉眼观察凝集强度弱，可进一步在显微镜下观察有无凝集。
结果判定要求在1min内完成，最长不要超过3min，因为弱凝集的阳性结果，超过1min可能变为阴性。
六．注意事项1.配血技术①常规配血技术：选择的技术不仅要能检查出不配合的IgM抗体，还必须能检查出尽可能多的不配合的IgG抗体，最大限度地减少抗体的漏检。
目前认为盐水法交叉配血是输血前检查必不可少的试验，首先采用盐水法进行交叉配血，再采用能够检出IgG类抗体的方法进行交叉配血；②特殊配血技术，如：预温配血技术：主要用于解决无临床意义的冷抗体引起的交叉配血不配合。
交叉配血操作规程
交叉配血操作规程[原理]凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清（浆）中的抗体反应，再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集，让已有抗体（IgG）反应的红细胞间的距离缩短。
距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。
而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开，如有免疫反应，凝集就不会散开，为阳性反应。
如没有免疫反应，凝集就会散开，为阴性反应。
交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺，检测供患之间是否相合，患者血清（浆）中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。
[试剂组成]1.洁净试管，离心机，显微镜。
2.0.85% 氯化钠溶液：准确称取氯化钠（AR）8.5 g，用蒸馏水溶解并定容至 1000 ml。
试剂启用后，有效期为：二周。
3.凝聚胺试剂①低离子介质溶液：含葡萄糖，乙二胺四醋酸-2 钠及稳定剂。
②凝聚胺溶液：含凝聚胺，氯化钠及稳定剂。
③复悬液：含柠檬酸钠，葡萄糖及稳定剂。
④阳性对照血清：含抗D 血清，氯化钠及稳定剂。
4.抗人IgG 血清。
[试剂保存和稳定性]1.凝聚胺试剂须保存在2-25℃。
2.有效期内可使用。
3.抗人IgG 血清低温冰箱保存。
复溶后放2—4℃冰箱保存。
[标本收集和准备]1.抽取受血者静脉血3-4ml（操作中小心防止红细胞破损），放入一已贴标签干燥洁净的试管中为血清管(也可用EDTA-K2 抗凝血液)，并将注射器中余下的少量血液配成2%红细胞生理盐水悬液，放入另一已贴标签干燥洁净的试管中为红细胞悬液管。
以上标本有效期为三天；若受血者抽取标本后，输用过血液或血液制品，且输用时间超过12 小时的，必须重新采集标本。
2. 2% 红细胞悬液：用生理盐水洗涤红细胞3 次。
根据下表进行红细胞悬液的配制。
悬液浓度（%）压积红细胞（滴）盐水（滴）----------------------------------------------------------------2 1 2ml(40)5 1 0.8ml(16)----------------------------------------------------------------[操作步骤]1.取出3 支试管分别标记主，次及对照测试：主测管：加入病人血清（浆）2 滴，再加入供血者3-5%红细胞悬液1 滴，次测管：加入供血者血清（浆）2 滴，再加入病人3-5%红细胞悬液1 滴，对照管：加入2 滴*4 阳性对照血清，再加入供血者3-5%红细胞悬液1 滴。
凝聚胺法交叉配血步骤
凝聚胺法交叉配血步骤
凝聚胺法是一种用于交叉配血的实验方法，主要用于确定献血者和受血者之间的血型相容性。
以下是凝聚胺法交叉配血的步骤：
1. 准备试剂和血液样品：准备好用于配血的抗人类免疫球蛋白（anti-human globulin）、酶处理的红细胞（酶处理可增加凝
集反应的可观性）、受试者的血清样本和献血者的红细胞样本。
2. 制备红细胞悬液：将献血者的红细胞样本与生理盐水等溶液混合，制备成红细胞悬液。
3. 凝聚胺法测试：将受试者的血清样本与献血者的红细胞悬液混合，使其发生凝集反应。
这种凝集反应是由于血型抗原和抗体的特异性反应引起的。
4. 观察反应：观察混合溶液中是否发生红细胞凝集。
如果发生凝集，说明受试者的血清中含有能与献血者红细胞上的抗原反应的抗体。
反之，如果没有发生凝集，则表示受试者的血清与献血者红细胞没有血型抗原-抗体相互作用。
5. 阅读和解释结果：根据凝聚胺法反应的结果，确定献血者和受血者之间的血型相容性。
对于发生凝集的配对，表示不相容；在没有凝集的配对中，表示相容。
这些步骤可以帮助血库人员确定合适的献血者给予血液输血给
受血者，从而减少输血反应和不良后果的发生。
每次输血前都要进行凝聚胺法测试来确保安全有效的输血过程。
凝聚胺交叉配血标准操作规程
凝聚胺交叉配血标准操作规程一、目的：为规范交叉配血试验的技术操作，保证临床输血安全有效，特制定本规程。
二、适用范围适用于输血科进行交叉配血试验三、职责输血科技术人员负责交叉配血试验。
四、测定原理:红细胞表面带有大量的负电荷，凝聚胺是一种高效价阳离子季胺盐多聚物，溶解后产生较多正电荷，可以中和红细胞表面的唾液酸带有的负电荷，使红细胞之间的距离减少。
若是未被抗体致敏的红细胞，加入悬浮液它具有中和凝聚胺的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验结果为阴性;但如果红细胞被相应的抗体所致敏，则会被凝聚胺凝集,凝块就不会散开，试验结果为阳性。
五、试剂及材料（一）聚凝胺试剂盒(合肥天一生物技术研究所）成分：低离子介质溶液、聚凝胺溶液、重悬液、阴性及阳性对照液；保存条件：2～8℃贮存2年，试剂盒打开使用后可置于室温(二）材料：玻璃试管、微量移液器、离心机、载玻片、显微镜等六、标本要求：（一)抽取受血者抗凝（抗凝剂为EDTA.K2）静脉血2-3ml（注意核对病人信息），在3000r/min条件下离心5分钟备用。
（二)标本保存:血液样本必须密封,2~8℃保存7天.（三）用于交叉配血必须是2～8℃保存3天以内的标本。
七、操作程序：(一）将受血者红细胞配成3％盐水悬液，鉴定ABO血型及Rh血型.(二）将供血者血样配制3%红细胞悬液，鉴定ABO血型及Rh血型。
(三)取洁净小试管2支，1支标明受血者血清（PS）+供血者细胞（DC)或“主侧”；另1支标明供血者血清（DS）+受血者细胞（PC)或“次侧"。
（四）主侧管:受血者血清100ul+供血者红细胞悬液50ul.次侧管:供血者血清100ul+受血者红细胞悬液50ul。
各加低离子介质溶液0.6 ml，混匀后静置1分钟,再各加聚凝胺溶液2滴，静置15s.（五) 混合均匀后，在1000g条件下离心15s，然后倒掉上清液。
(六) 轻轻侧动试管里的细胞扣，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。
凝聚胺交叉配血操作流程
凝聚胺交叉配血操作流程一、移植前检查1、医护人员、手术室用品、抗污染措施、各种设备的准备工作，并检查交叉配血的源和受者，确保安全性。
2、根据预定的方案，做出血液学等检测，同时分析所需肝脏移植的浓度，做好调整。
3、双方做出的抗原检测结果要在移植完成之前确定。
4、检查医疗设备是否正确，确保手术室和床位安全，调整好手术条件。
二、合并操作1、将免疫调节剂，如凝聚素、胺和相关成分连续输入受者，按照相关程序，以保持肝脏合并正确。
2、将肝脏活性素加入受者的血流中，把受者的血液和肝脏活性素混合，以使受者的免疫反应得到有效抑制。
3、注入受者口服的药物，防止受者抗原性反应，减轻排异反应。
4、受者注射相关基因，避免向受者体内输入来源肝脏所含有的抗体。
5、注入必要的抗血清，防止受者抗原性反应。
三、移植后护理1、检查受者情况，监测血液学，根据医生要求调节抗滤膜质量，确保肝脏在移植后运转正常。
2、严格控制膳食，定期检查肝功能、电解质和血糖，确保受者的生理机能。
3、血液循环不良应及时处理，以防止移植的肝脏受到损伤。
4、定期给受者注射抗排异药物，以保持肝脏的抗排异能力，维持器官功能正常。
5、及时给受者施用抗感染药物，防止移植肝脏因感染而被破坏。
四、交叉膜交叉配血1、以源者血浆、受者血液和未活化剂为原料，让血浆中卡蛋白复制聚合，形成膠状状态。
2、把聚合物倒入由特殊材料制作的滤膜内，完成小分子量混合吸附，透过滤膜转换成血液。
3、改变滤膜的温度和压力，完成混合、转换和稳定血浆，使源者和受者的血液交叉混合，在一起稳定、混合。
4、将混合血液安全输入受者体内，完成肝脏移植。
五、总结交叉膜交叉配血是一种技术复杂、程序繁琐的血液学手术，是肝脏移植的基本步骤，也是保证肝脏移植安全、排异反应程度采取合适措施的重要步骤。
在血漿交叉配血程序中，凝聚素、胺和相关成分是抑制受者的排异反应的主要因素。
此外，混合血液的温度、压力等也是手术过程中必不可少的要素。
凝聚胺交叉配血试验标准操作规程
凝聚胺交叉配血试验标准操作规程1、目的为规范输血科交叉配血试验的技术操作，确保鉴定结果准确及临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》4.1.7条款的要求制定本规程。
2、适用范围本文件适用于本院输血科进行交叉配血的操作技术的规范化管理。
3、职责：输血科技术人员负责本实验的技术操作。
4、试验方法及原理4.1试验方法：凝聚胺介质配血法4.2原理：针对不规则抗体的检出及鉴定多采用红细胞的凝聚反应试验，而凝聚反应试验的成效则与分布红细胞表面之电荷以及抗体的亲和性息息相关。
凝聚胺法是利用低离子介质（LIM）来降低介质的离子强度，进而减少红细胞之间距，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体发生特异性结合；接着加入凝聚胺（polybrene）此种多价阳离子聚合物来中和红细胞上的阴性电荷，使细胞间发生非特异性凝聚；最后加入重悬液，使之中和由凝聚胺所引起之非特异凝聚，倘若没有凝聚发生，则判定为阴性；若有凝集，则得知存在特殊性之抗原抗体反应，则判定为阳性。
5、样本采集和处理同盐水交叉配血试验。
6、试剂：贝索的试剂盒：1)低离子溶液（LIM）2)聚凝胺溶液（POLYBRENE）3)悬浮液（RESUSPENDING）7、操作步骤7.1 取试管两支,分别标明主次侧管,主侧管加入受血者血清两滴,再加入2~5%献血者红细胞悬液1滴,次侧管反之。
7.2每支试管中加入0.7mlLIM液,混匀;再各加入2滴POLYBRENE 液,混匀。
7.3 3400转离心10秒，弃上清液，不要沥干，让管底残留约0.1ml 液体。
7.4轻摇试管，目测红细胞有无凝集，若无凝集则必须重作。
7.5加2滴resuspeneing液，轻摇试管混合并同时观察结果。
8、结果判断立即目测并镜检观察凝集状态。
如果30秒内凝集散开，代表是由polybrene引起的非特异性聚集，配血结果相合。
若凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性凝集，配血结果不相合。
若反应可疑，可进一步用显微镜观察。
2024聚凝胺法交叉配血试验操作规程
2024聚凝胺法交叉配血试验操作规程1.原理聚凝胺试验(PO1ybrene)使用低离子介质(IoWionicmedium,1IM)加速IgG 型抗体与红细胞之间的反应速度。
聚凝胺作为一种碱性分子可以和红细胞表面的酸性糖分子结合，在离心力的作用下聚凝胺使红细胞相互靠近,使得已经结合在红细胞表面的IgG抗体分子可以在不同的红细胞之间搭桥。
然后加入重悬液，使得聚凝胺的作用被消除。
被聚凝胺凝集起来的红细胞，此时会渐渐散开，但已经被IgG抗体分子搭桥连接起来的红细胞不会散开，以此检测血清或血浆中存在的血型抗体。
本试验具有敏感性高及快速等优点，已应用于血型检查、抗体筛选和鉴定交叉配血试验。
聚凝胺试剂目前国内市场有售。
2.试剂与器材2.1低离子介质(1IM)。
2.2Po1ybrene试剂。
2.32%~5%已知抗原的红细胞生理盐水悬液2.4重悬液。
3操作1.1主侧配血向试管中加入患者血清2滴和献血者2%~5%红细胞悬液1滴。
次侧配血：向试管中加入献血者血清2滴和患者2%~5%红细胞悬液1滴。
1.2立即以1000Xg离心，观察结果。
如果阴性则继续试验；如果阳性，需分析原因排除干扰后继续后续试验。
1.3加0.6m11IM试齐I」，室温放置1分钟。
1.4加入2滴po1ybrene试剂,立即以IOoOxg离心1分钟，弃去试管中液体，轻摇试管，肉眼判断红细胞凝集情况。
如果有凝集出现则继续操作。
如果没有凝集出现则该试验无效。
1.5加人1滴重悬液，轻摇试管，肉眼观察结果。
4.结果判定1分钟内凝集消失为聚凝胺试验阴性，1分钟内凝集不消失为聚凝胺试验阳性。
5.注意事项5.1通常情况下,使用1ISS和1IM试剂作为缩短抗原-抗体的反应时间是同时有效的。
5.2加人重悬液后，应尽快观察结果，以免弱反应消失。
5.3肝素会中和聚凝胺的作用，应避免用肝素抗凝的血样。
5.4聚凝胺方法不适合Ke11系统抗体的检测，所以对阴性结果需进行抗球蛋白试验，以免漏检。
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凝聚胺介质交叉配血试验操作规程凝聚胺介质交叉配血试验操作规程(SOP文件)1目的作为介质辅助用于完全抗体及不完全抗体的临床筛选检测及辅助用于临床交叉配血实验。
2检验原理红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。
凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM)，降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。
其后，加入凝聚胺（Polybrene)溶液，它是一种高价阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。
最后，加入悬浮液（Resuspending),Resuspending具有中和凝聚胺（Polybrene)阳离子的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。
3储存条件及有效期未开封试剂应贮存于2℃~25℃、相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体的室内；已开封试剂应贮存于相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体和通风良好的室温环境，试剂用后应及时拧紧瓶盖保存；未开封试剂的有效期为二年，在有效期内的已开封试剂应在开封后的6个月内使用完。
4样本要求4.1新鲜血清，含EDTA抗凝血浆、3%~5%的红细胞悬液。
4.2不能使用溶血标本及含枸橼酸钠、肝素抗凝血浆标本。
5检验方法辅助交叉配血试验5.1取试管二支，标主次侧，主侧管加病人血清（血浆）2滴，加供血者3%~5%红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1滴，次侧管反之。
5.2各加LIM0.65ml,混合均匀后，再各加Polybrene溶液2滴，并混合均匀。
5.3用离心机3400转/min(相当于1000g离心力）离心10秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml 液体。
5.4轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须要重做。
5.5最后加入Resuspending 2滴，轻轻摇动试管混合并同时观察结果。
如果在60秒内凝集散开，代表是由Polybrene引起的非特异性聚集，配血结果相合；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。
如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。
6注意事项6.1可以用含EDTA之血浆代替血清使用。
6.2若病人血清（血浆）含肝素，如洗肾患者，须多加4~6滴Polybrene溶液以中和肝素。
6.3本试剂盒的操作方法也适用于抗体鉴定。
6.4若试剂使用前为低温贮存，请回复室温再行操作。
6.5加做辅助性抗人球蛋白试验，目的是增加检测抗-K的敏感性。
6.6在冬天室温极低的情况下，操作交叉配血试验，某些病人血清中可能含有冷凝集素等因素，而导致假阳性的结果出现。
若有此怀疑，建议在最后滴入Resuspending时，将试管立即置入37℃水浴中，轻轻摇动试管混合，并在60秒内观察结果。
6.7红细胞抗原检测步骤同抗体筛检试验，其检测标准血清用已知标准血清。
6.8用户可使用IgG抗D抗体（效价≥64）与RhD阳性红细胞反应做阳性对照实验，测试本试剂的有效性。
ABO血型定型操作规程（SOP文件）1目的用于鉴定人ABO血型2检验原理本品系用产生抗A或抗B血型抗体的杂交瘤细胞培养上清液（或在上清液中加入少量同型腹水）配制而成，采用凝集试验原理，专供鉴定人ABO血型用。
3样本要求本试剂适用于全血或10％、5％红细胞悬液。
4检验方法平板法（玻片法）：本品与受检者全血或10％红细胞生理氯化钠悬液按1:1搅匀，不必再稀释，按照有无凝集判定结果5结果判断注：“+”有凝集反应，“-”无凝集反应6检验结果的解释将已知的抗A、抗B血型定型试剂与受检者的红细胞混合时，与抗A血型定型试剂发生凝集者即为A型血型，与抗B 血型定型试剂发生凝集者即为B型血型，与抗A、抗B血型定型试剂均发生凝集者即为AB型血型，与抗A、抗B血型定型试剂均不发生凝集者即为O型血型。
7注意事项7.1对含有较多自身冷凝集的受检者，在鉴定血型时往往被误认为AB血型，遇到此种情况，需用37°生理氯化钠溶液洗涤受检者细胞2-3次，以去除吸附在红细胞上的凝集素，然后再鉴定血型。
7.2在做配型试验时，如发现有不配合现象，则取受检者血清，用已知A血型或B血型细胞进行反定型试验，以核实原鉴定的血型是否正确。
7.3用立即试管法不能测出亚型（如Ax），需延长作用时间。
7.4本品如出现浑浊或变色则不能使用，若开瓶使用时间较长后，最好用已知ABO血型红细胞检查结果是否与已知血型相符，以防制品污染，变质失效，而造成鉴定错误。
7.5在有效期内使用。
ABO血型反定型操作规程(SOP文件）1目的用于ABO血型的反定型检测，该产品不用于血源筛查。
2检验原理本品系采用三人份同型混合的A1型、B型和O型合格人红细胞经洗涤后悬浮于红细胞保存液中配制而成。
采用凝集试验原理，用已知的A1，B，O型红细胞测定被检者血清/血浆中有无相应的抗A或抗B抗体（反定型试验），结合正定型结果判定ABO血型。
3检验方法试管法3.1取被检者血清/血浆各50ul分别加入3支标记好的试管中；3.2分别各加50ulA1、B、O试剂红细胞；3.3摇动试管，混匀。
于900g离心15s，或室温静止1h;3.4首先检查是否溶血，（溶血可能是阳性结果，或是细菌污染。
）轻轻摇动悬浮红细胞。
3.5观察凝集情况，并立即记录结果。
必要时可借助显微镜观测。
4检验结果的解释ABO血型正反定型反应格局表注：“+”有凝集反应，“-”无凝集反应5注意事项5.1如果在反定型试验中，受检者的血清/血浆与O血型红细胞试剂产生阳性反应，则需要添加自身对照试验。
如果自身对照为阳性，表明是冷凝集素导致。
如果自身对照为阴性，则表明被检者血清或血浆中可能存在ABO系统以外的其他血型系统的抗体干扰定型。
请按照相关的试验方法解决上述定型问题。
5.2本品如出现红细胞颜色变成暗紫色或红细胞自发凝集，出现菌落或溶血，则不能使用。
若开瓶使用时间较长后，最好用注册上市的抗A、抗B血型定型试剂检查结果是否与已知血型相符，以防制品污染、变质失效、而造成检定错误。
5.3为了便于鉴别，A1血型红细胞试剂标签为蓝色，B血型红细胞试剂标签为黄色，O血型红细胞试剂标签为红色。
乙型肝炎病毒表面抗原操作规程（SOP文件）1.目的用于血液的筛查和临床乙型肝炎病毒感染的辅助诊断。
2.检验原理本品系用乙型肝炎表面抗体（抗-HBs)包被的微孔板和酶标记抗-HBs及其他试剂制成，应用双抗体夹心酶联免疫法原理检测人血清和血浆中的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg) 3.适用仪器微量移液器；37℃恒温水浴箱；振荡器；洗板机或洗瓶；计时器；酶标仪，检测波长450nm，参考波长630nm。
4.样本要求4.1样本采集不需要特殊准备，按照正常的采血技术收集血液，全血样本最好先放置37℃处理2小时，再将血样本充分离心，3000转/分钟离心6分钟以上，使血清（血浆）不含有或极少含有血细胞。
如果为抗凝血样本，应将血样本充分离心后，最好再放置室温2小时以上。
4.2样本中含有叠氮钠会影响试验的结果，高度溶血的样本、没完全收缩的血清样本或有微生物污染的样本可能会引起错误的结果。
4.3新鲜的样本在2~8℃无菌条件下可保存一周，新鲜样本可长期贮存在-20℃或以下，避免反复冻融。
5.检验方法5.1实验准备：从冷藏环境中取出试剂盒，在室温下平衡30分钟，同时将洗涤液进行1:40倍稀释。
5.2设阳性对照2孔，阴性对照3孔，空白对照1孔。
5.3加样：在阳性对照、阴性对照孔内分别加入阳性对照、阴性对照50ul，其余每孔加待测血清或血浆50ul。
盖上封孔胶片，置37℃水浴孵育60分钟。
5.4洗涤：弃去孔内液体，用稀释后的洗涤液连续洗涤5次后，拍干孔内液体。
5.5加酶结合物：空白孔除外，每孔各加酶结合物50ul。
盖上封孔胶片，置37℃水浴孵育30分钟。
5.6洗涤：弃去孔内液体，用稀释后的洗涤液连续洗涤5次后，拍干孔内液体。
5.7加底物液：每孔先加底物液A50ul，再加底物液B50ul,混匀，盖上封孔胶片，置37℃条件下避光显色30分钟后，加终止液50ul，混匀，终止反应。
6.参考值（参考范围）终止后尽快测定，波长450nm，先用空白孔校零，测OD 值。
如果选用双波长测定，不必设置空白对照空。
按下列公式计算：COV=阴性对照平均OD值×2.1倍阴性对照平均OD值低于或等于0.05，按0.05计算；高于0.05时，按照实际OD值计算。
7.检验结果的解释样品OD值S/COV≥1时，待测样本HBsAg为阳性；样品OD值S/COV＜1时，待测样本HBsAg为阴性。
8.注意事项8.1本品仅用于体外诊断，仅限检测人体血清或血浆；检测结果作为诊断指标之一。
8.2使用时，从冷藏环境取出试剂盒，置室温平衡30分钟后，方可进行测试。
剩余试剂应及时封存于冰箱内保存，备用。
8.3结果判定需在反应终止后10分钟内完成。
8.4封孔胶片不得重复使用。
8.5在有效期内，微孔板密封袋如有漏气现象，不影响试验结果。
试剂盒在有效期内使用，不同批号不得混用。
8.6阳性对照应呈阳性，否则全部试验无效。
8.7确保样本加样量的准确，如果加样不准确可能会导致错误的试验结果。
8.8使用微量移液器加样时，每次应更换吸头吸取样本。
8.9在操作过程中应尽量避免反应微孔中产生气泡。
8.10准确控制反应温度和反应时间。
8.11洗板：1用洗板机洗板时，洗板机的加液量应注意控制，既避免洗液过量而溢出，又能充满反应微孔，并经常检查加液头是否堵塞；2洗板机最好每次使用前、后冲洗干净，防止管路堵塞或腐蚀；3洗板时所用的吸水纸请勿反复使用。
8.12本试剂盒及临床样本均应视为传染性物质或潜在传染性物质，请按相关实验室工作规范执行和处理。
9.参考文献《中国药典》2010年版三部；《体外诊断试剂说明书编写指导原则》（国食药监械【2007】240号）梅毒螺旋抗体操作规程（SOP文件）1.目的本试剂盒定性检测人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体。
适用于血液的筛查及临床梅毒螺旋体感染的辅助诊断。
2.检验原理本试剂盒采用双抗原夹心法酶联免疫吸附试验原理。
在微孔条上预包被梅毒螺旋抗体的基因重组抗原，配以酶标记抗原及TMB显色剂等其他试剂，检测人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体。
3.适用仪器加样器、温箱、洗板机、含波长450nm的酶标仪。
4.样本要求4.1本试剂使用样品为人血清或血浆，含有EDTA、柠檬酸钠或肝素等抗凝剂的样品可用于本实验。