最新凝聚胺介质交叉配血试验操作规程

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凝聚胺法交叉配血标准操作规程

1.目的

规范凝聚胺法交叉配血标准操作程序。

2.原理

红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引,此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕,而形成Zeta电位， Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM），降低介质的离子强度，减少红细胞细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。其后，加入凝聚胺(Polybrene)溶液，它是一种高阶阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。最后加入悬浮液（Resuspending）， Resuspending具有中和凝聚胺(Polybrene)的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。

3.试剂

由珠海贝索生物技术有限公司生产的凝聚胺法试剂盒，其组成：

3.1低离子介质(LIM) 2×130ml。

3.2凝聚胺(Polybrene)溶液2×20ml。

3.3 Resuspending溶液2×20 ml

4.仪器

4.1 80-2离心机：上海医疗器械有限公司

4.2电热恒温水浴箱：上海精宏实验设备有限公司

4.3 OLYMPUS显微镜：日本

5.操作步骤及结果判断

按照试管法血型鉴定检验标准操作程序进行受血者血型鉴定, 并将鉴定结果写于申请单，并签名。以“同型输注”为原则，取相对应的成分血源进行交叉配血。

交叉配血操作规程凝聚胺法

交叉配血是指将一定数量的输血者的红细胞与另一组供血者的血清进

行混合，通过观察混合血后是否发生凝集反应来确定血型。交叉配血操作

主要采用凝聚胺法进行，以下是交叉配血操作规程的详细步骤。

1.准备工作

a.配置所需试剂，包括输入血浆、配血瓶、试剂盘、标本管、溶血酶

溶液、配血盘等。

b.通过测定输血者和供血者的血型，确认双方的血型信息，并记录在

5.用凝聚胺做交叉配血试验的操作程序

交叉配血（凝聚胺法）试验操作规程(SOP)

1.目的：交叉配血；检出和鉴定意外抗体；红细胞血型抗原定型

2.原理：凝聚胺溶解后产生的阳离子中和红细胞表面的唾液酸使红细胞间距缩短，发生由IgG直接搭桥的可逆的非特异性凝集，当非特异性凝集回复时，只剩下由抗原抗体

1.目的：检出和鉴定意外抗体；红细胞血型抗原定型

2.原理：凝聚胺溶解后产生的阳离子中和红细胞表面的唾液酸使红细胞间距缩短，发生由IgG直接搭桥的可逆的非特异性凝集，当非特异性凝集回复时，只剩下由抗原抗体搭桥的特异性凝集。

3.适用范围：配血、免疫性抗体检查、红细胞血型鉴定、特殊的研究

4.所需材料：聚凝胺试剂、定型血清、谱细胞、洁净试管、滴管、离心机

5.操作程序：（以交叉配血为例）

5.1以生理盐水洗涤受血者和献血者红细胞1—3次，配成3-5%的悬液。

5.2交叉配血试验：

主侧：2滴患者血清加1滴供者3-5%的RBC悬液。

次侧：2滴供者血清加1滴患者3-5%的RBC悬液。

阳对：2滴抗-D血清加1滴RH（+）3-5%的RBC悬液。

自身对照：2滴患者血清加1滴患者3-5%的RBC悬液。

5.3每只试管加600微升低离子液，混合放置1分。

5.4分别加2滴Polybrene应用液，混合放置15秒。

5.5离心3400转/分15秒，弃上清，控干。

5.6观察管底有无聚凝物，如果没有则需重做。

5.7每管各加2滴解聚液，轻轻混合10秒，观察结果并做记录。

5.8结果判定：10秒内若为Polybrene引起的聚合应该会散开，判为阴性。若为抗原抗体引起的凝聚则不会散开，判为阳性。

医院交叉配血试验标准操作规程

交叉配血试验标准操作规程

1、目的

为规范交叉配血试验的技术操作，保证临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》4.1.7(2)条款的要求制定本规程。

2、适用范围

适用于医疗机构输血科（血库）进行交叉配血试验。

3、职责

医疗机构输血科（血库）技术人员负责交叉配血试验。

4、原理

使受血者血清（血浆）和红细胞分别与献血者红细胞和血清（血浆）反应，采用盐水介质法、凝聚胺法、抗球蛋白法及微柱凝胶法等检测供、受者之间是否存在相应的红细胞血型抗原抗体反应，判定受血者与献血者血液之间红细胞血型免疫的相容性。

5、所需设备和试剂

5.1设备普通离心机，血型血清学专用离心机，电热恒温水浴箱，普通显微镜。

5.2试剂凝聚胺试剂盒，抗球蛋白试剂。6、检测环境条件

6.1室温应控制在18～27℃，湿度应保持30%～70%。

7、步骤与方法

7.1受血者、献血者血标本处理

7.1.1将受血者血标本离心分离血清（血浆）及红细胞，取2支试管，分别标记受血者的唯一性标识，吸取离心后血标本血清（血浆）到一支已标识的试管内；吸取红细胞30μl 到另一支已标识的试管内，加生理盐水1ml稀释成3%的红细胞悬液。

7.1.2受血者ABO和RhD血型鉴定，执行《试管法鉴定ABO和RhD血型标准操作规程》。

7.1.3受血者红细胞不规则抗体筛选及鉴定，执行《红细胞不规则抗体筛选及鉴定标准操作规程>。

7.1.4根据受血者ABO和RhD血型鉴定结果选择ABO和RhD相容血液成分，剪取献血者血袋上一段留样管，取1支试管标记献血者唯一性标识，将剪下的血标本盛入标识的试管中，离心分离血清（血浆）及红细胞；另取2支试管分别标记献血者唯一性标识，吸取献血者血标本血清（血浆）到一支已标识的试管内；吸取献血者血标本红细胞3μl到另一支已标识的试管内，加生理盐水1ml稀释成3%的红细胞悬液。

凝聚胺法交叉合血操作说明

凝聚胺检测试剂盒使用说明书

【产品名称】

通用名：凝聚胺测试剂盒

英文名：Polybrene Kit

【包装规格】100人份/盒

【预期用途】

本产品用于交叉配血、抗体的筛查及鉴定，不适用于血源筛查。

【检验原理】

凝聚胺是一种多价阳离子氨基聚合物，它可以引起红细胞的可逆性凝集。低离子介质促进红细胞与相应抗体的结合后，在凝聚胺作用下，红细胞发生凝集，加入再悬液后，如果存在不完全抗体，细胞将不会散开，发生不可逆凝集，表明交叉配血不合或存在不完全抗体；反之凝集的细胞将均匀散开，表明交叉配血相合或不存在不完全抗体。

【主要组成成份】

1、凝聚胺溶液（0.5%凝聚胺、0.9%氯化钠）10mlx1

2、低离子介质（5%葡萄糖、0.2%乙二胺四乙酸二钠）10mlx2

3、再悬液(3.5%柠檬酸、2%葡萄糖) 10mlx1

4、阳性对照（效价为16的IgG型抗D试剂）1mlx1

【储存条件及有效期】

2~8℃ 保存，有效期为12个月。

试剂开封后2~8℃ 保存，自开封之日起3个月内使用。

【使用仪器】离心机

离心力和离心转数的换算公式为：rpm=299√g/r

（r为离心半径，单位：cm）。

【样本要求】

1、交叉配血:静脉抗凝全血，抗凝剂为EDTA.Na

2、柠檬酸等，2~8℃保存48小时。

2、抗体筛查：采集静脉血于血清分离管中，2000 rpm，离心5分钟，收集血清。采集

静脉血于抗凝管中，2000rpm，离心5分钟，收集血浆，抗凝剂为EDTA.Na2、柠檬

酸等，2~8℃ 保存48小时，或-20℃ 保存12个月。不能用于发生溶血、黄疸及高脂

血库输血科交叉配血试验 (凝聚胺法)

[试剂组成]
1，洁净试管，离心机，显微镜。
2，0.85%氯化钠溶液：准确称取氯化钠（AR）8.5 g，用蒸馏水溶解并定容至1000 ml。
试剂启用后，有效期为：二周。
3，凝聚胺试剂
*1低离子介质溶液：含葡萄糖，乙二胺四醋酸-2钠及稳定剂。
*2凝聚胺溶液：含凝聚胺，氯化钠及稳定剂。
*3复悬液：含柠檬酸钠，葡萄糖及稳定剂。
5．在冬天气温极低的情况下，操作交叉配血试验，某些病人血清（浆）中可能含有寒冷凝集素等因子而导致假阳性的结果出现。若有此怀疑，请再滴入2滴*3复悬液，将试管立即置入37 C水浴中轻轻混匀，并在一分钟内观察结果。
ＸＸＸＸ医院
血库
文件编号：
ABCD-SOP-10
交叉配血试验（凝聚胺法）
版序：abcd
页码：第4页，共4页
8．再滴入1滴*3复悬液。
9．用生理盐水洗红细胞3—5次，并把最后一次上清液完全倒干。
10．滴入2滴Anti-human IgG血清，并混匀。
11．3400rpm离心1分钟。
12．观察有无凝集反应，如果有凝集反应，表示有Anti-K抗体，则必须进一步做抗体冲出试验，供血者的血液不适合病人使用。如果没有凝集反应，为了确保输血的安全性，须再各添加1滴已知致敏性红细胞至所有没有凝集的试管中，混匀，3400rpm离心1分钟。正常应有2+反应。如果没有凝集反应，可能是假阴性，辅助性抗球蛋白试验必须重做。

交叉配血(凝聚胺法)标准操作规程SOP文件

交叉配血（凝聚胺法）

标准操作规程SOP文件

1. 原理

凝聚胺（polymatching）法首先利用低离子介质降低溶液的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，促进血清（浆）中的抗体与红细胞相应抗原结合，再加入带亚电荷的高价阳离子多聚物-凝聚胺溶液，中和红细胞表面的负电荷，缩短细胞间距，形成可逆的非特异性聚集，并使IgG型抗体直接凝集红细胞。加入中和液后，仅由凝聚胺引起的非特异性聚集，会因电荷中和而分散，而由抗体介导的特异性凝集则不会分散。

2. 标本采集：

2.1 标本种类：抽取静脉血3-4ml待凝固后分离血清，将细胞配成5％盐水悬液将供血者血样以同样方法分离血清(浆)和红细胞悬液。

2.2 标本要求：抗凝和干燥管均可，如用抗凝血主张用EDTAK2（mg/dz）抗凝标本应无溶血，切标签齐全。

3. 标本储存：急诊标本30分钟内完成操作，标本应至4℃冰箱保存7天。

4. 标本运输：室温运输。

5. 标本拒收标准：污染。溶血标本，标签不齐全不能作测定。

6. 试剂：

6.1 试剂名称：凝聚胺试剂(polymatching)

6.2 试剂生产厂家：

6.3 试剂组成：

试剂1. 低离子介质(LowLonic Medium，LIM).试剂打开使用后，可置室温贮存，未开封者2-10度贮存，有效期为2年。

试剂2. 凝聚胺溶液(PolybreneSolution).贮存及有效期同上。

试剂3. 重悬液(ResuspendingSolution).贮存及有效期同上。

试剂4. 8.5％生理盐水。

7. ：

7.1

7.2

7.3 恒温水箱

凝聚胺交叉配血标准操作规程

一、目的：

为规范交叉配血试验的技术操作,保证临床输血安全有效,特制定本规程;

二、适用范围

适用于输血科进行交叉配血试验

三、职责

输血科技术人员负责交叉配血试验;

四、测定原理：

红细胞表面带有大量的负电荷,凝聚胺是一种高效价阳离子季胺盐多聚物,溶解后产生较多正电荷,可以中和红细胞表面的唾液酸带有的负电荷,使红细胞之间的距离减少;若是未被抗体致敏的红细胞,加入悬浮液它具有中和凝聚胺的作用,使正常的红细胞非特异性凝集散开,试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体所致敏,则会被凝聚胺凝集,凝块就不会散开,试验结果为阳性;

五、试剂及材料

一聚凝胺试剂盒合肥天一生物技术研究所

成分：低离子介质溶液、聚凝胺溶液、重悬液、阴性及阳性对照液；

保存条件：2~8℃贮存2年,试剂盒打开使用后可置于室温

二材料：玻璃试管、微量移液器、离心机、载玻片、显微镜等

六、标本要求：

一抽取受血者抗凝抗凝剂为静脉血2-3ml注意核对病人信息, 在3000r/min条件下离心5分钟备用;

二标本保存：血液样本必须密封,2~8℃保存7天;

三用于交叉配血必须是2~8℃保存3天以内的标本;

七、操作程序：

一将受血者红细胞配成3%盐水悬液,鉴定ABO血型及Rh血型;

二将供血者血样配制3%红细胞悬液,鉴定ABO血型及Rh血型;

三取洁净小试管2支,1支标明受血者血清PS+供血者细胞DC或“主侧”；另1支标明供血者血清DS+受血者细胞PC或“次侧”;

四主侧管：受血者血清100ul+供血者红细胞悬液50ul;

次侧管：供血者血清100ul+受血者红细胞悬液50ul;

交叉配血试验操作规程

1目的：保证临床用血安全，为患者提供配血相合的血液制品。

2范围：患者的血液标本与供血者标本。

3职责：

3.1临床科室采集正确的血样，并提交输血申请单。

3.2血库进行交叉配血试验。

4所用设备与试剂

4.1BY-320A离心机

4.2聚凝胺介质试剂

5原理：红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM）降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。其后，加入凝聚胺（Polybrene）溶液，它是一种高价阳离子多聚物，肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚，最后，加入悬浮液（Resuspending）,Resuspending具有中和凝聚胺阳例子的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，实验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阴性。

6操作

将受血者、供血者的标本选择工况3分离血清及血浆待用。用生理盐水姜受血者、供血者红细胞制备5%盐水悬液代用（选用工况2洗涤红细胞三次）

6.1盐水介质交叉配血试验：

6.1.1取小试管2支标记主、次侧。主侧管：受血者血清（PS）100ul+ 供血者红细胞悬液（DS）50ul；次侧管：供血者血浆（DS）100ul+受血者红细胞悬液（PC）

凝聚胺交叉配血操作流程

凝聚胺交叉配血是一种重要的辅助性医学操作，它可以帮助医生和护士在紧急情况下，迅速、准确地给患者配血，保证患者得到优质的治疗。本文将结合流程图，着重介绍凝聚胺交叉配血操作的基本流程。

自动交叉配血系统通常由凝聚胺交叉配血设备和血液实验室材

料组成，它可以完成一次全自动的交叉配血操作。

第一步是将血液实验室的样本置于设备上，将凝聚胺置入设备中。耐普森凝聚胺具有双向交叉作用，能够将血液样本混合、交叉混合，达到所需的组成比例。

第二步是进行配血，将混合的血液样本注入接收者的血液管中，使血液按照所需的比例分配，从而使接收者得到最佳的治疗效果。

第三步是处理凝聚胺，经过操作后，凝聚胺被收集，然后经过处理处理，分解凝聚胺质粒，使其保持有效的状态，为下一次的操作做好准备。

第四步是清洗设备，在每次操作完成后，应当及时清洗设备，以确保本次操作在下一次使用时可用。

整个凝聚胺交叉配血操作不仅确保了患者得到优质的治疗，而且操作流程简单、安全，为医护人员提供了大量便利。

凝聚胺交叉配血操作提醒我们，要提高护理质量，做到安全、准确、快速，在每一个环节都要做到严谨慎重。采用凝聚胺交叉配血的护理工作应该被视为一项重要的护理任务，必须认真对待，以保护患

者的生命安全。

总之，凝聚胺交叉配血是一项重要的护理操作，它不仅能够给患者提供优质的治疗，还可以保证医护人员的安全，为他们提供一个安全、可靠的治疗环境。通过规范操作，准确按照操作规程，凝聚胺交叉配血操作可以确保操作的安全性和准确性，保护患者的安全和健康。

交叉配血操作规程(凝聚胺法)

交叉配血操纵规程（凝聚胺法）之蔡仲巾千创作

一．目的

规范交叉配血试验操纵；包管临床用血的平安性和有效性。二．适用范围

适用于临床配血标本。

三．职责

血库技术人员负责交叉配血试验

四．所需资料和设备

资料：凝聚胺试剂盒、患者血标本、生理盐水、小试管、滴管、献血者标本。

设备：普通离心机、血型血清学专用离心机、37℃恒温水浴箱、显微镜

五．操纵步调

1.凝聚胺法

（1）以生理盐水配制供、受者3％～5％红细胞悬液。

（2）取试管3支，标识表记标帜主、侧和自身对照

主侧加受血者血浆（血清）2滴，献血者3%～5%的红细胞

悬液1滴；次侧加献血者血浆（血清）2滴，受血者3%～

5%的红细胞悬液1滴；自身对照管加患者血浆（血清）2

滴和患者3%～5%的红细胞悬液1滴混匀。

（3）以1000r/分钟离心1分钟，观察盐水介质实验结果。

（4）每管各加低离子介质（LIM）溶液0.7ml,混合均匀，室温孵育1min。

（5）每管各加2滴凝聚胺溶液，混匀后静置15s。

（6）1000r/分钟离心1分钟，倾去上清液，不要沥干。

（7）轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，必须重复步调（3）-（6）

（8）加入2滴重悬液，并轻轻混合，观察结果。

（9）结果判定

如凝聚散开，则为凝聚胺引起的非特异性凝集，判为阴性

结果，配血相合；如凝聚不散开，则为抗原抗体结合的特

异性反应，判为阳性结果，配血不相合，如肉眼观察凝集

强度弱，可进一步在显微镜下观察有无凝集。结果判定要

求在1min内完成，最长不要超出3min，因为弱凝集的阳

性结果，超出1min可能变成阴性。

血型鉴定、交叉配血操作规程

ABO、Rh-D血型鉴定操作规程

1.目的：规范ABO、Rh-D检测的操作过程

2. 标本采集：静脉采血2ml抗凝血,避免溶血试剂

3. 试剂：长春博讯生物技术有限责任公司

4.方法原理

【原理】:标准血清中的完全抗体(lgM)抗A、抗B、和抗D能和红细胞表面相应的抗原在盐水介质中发生特异性的凝集反应。根据红细胞凝聚类型可鉴别出A、B、O、AB四型和RHD阴性或阳性。

5. 操作:

一、玻片法(一般只能做正定型)

【正定型】:

1、取一张玻片,用蜡笔或记号笔将其分为三等份,从左到右每一等份左上角标明A、B、D,

2、对应加入抗A和抗B抗D标准血清一滴;

3、分别加PC(患者10—15%红细胞悬液);

4、用洁净竹签将试剂和红细胞充分混匀,混合物约2cm2大小;

5、轻轻地连续倾斜转动玻片2—5分钟,观察并记录; 【解释】:A端凝集为A型血;B端凝集为B型血;A、B 端均凝集则为AB型;A、B端均不凝集则为O型;D端凝集则为RH阳性者,无凝集则为RH阴性。

备注:玻片法可作为ABO血型初筛或复检;不适用于抗体鉴定和交叉配血;不适合检测ABO亚型。

二、试管法(盐水介质)

【原理】:标准的A型和B型红细胞能和受检者血清(血浆)中相应的抗体发生特异性结合,形成肉眼可见的凝集反应,从而可推断出受检者的血型。

【材料】:

1、标准A型和B型红细胞悬液(浓度4%,商品有售,亦可自行新鲜配制);

2、受试者血清或血清;

3、洁净康氏试管。

【正定型】:

1、取二支洁净试管分别记上抗A和抗B;

2、对应加入抗A和抗B血清1滴;

3、分别加入病人红细胞悬液1滴(浓度为2%-5%);

交叉配血操作规程(凝聚胺法)

交叉配血操作规程（凝聚胺法）

一．目的

规范交叉配血试验操作；保证临床用血的安全性和有效性。

二．适用范围

适用于临床配血标本。

三．职责

血库技术人员负责交叉配血试验

四．所需材料和设备

材料：凝聚胺试剂盒、患者血标本、生理盐水、小试管、滴管、献血者标本。

设备：普通离心机、血型血清学专用离心机、37℃恒温水浴箱、显微镜

五．操作步骤

1.凝聚胺法

（1）以生理盐水配制供、受者3％～5％红细胞悬液。

（2）取试管3支，标记主、侧和自身对照

主侧加受血者血浆（血清）2滴，献血者3%～5%的红细胞悬液

1滴；次侧加献血者血浆（血清）2滴，受血者3%～5%的红细

胞悬液1滴；自身对照管加患者血浆（血清）2滴和患者3%～

5%的红细胞悬液1滴混匀。

（3）以1000r/分钟离心1分钟，观察盐水介质实验结果。

（4）每管各加低离子介质（LIM）溶液0.7ml,混合均匀，室温孵育1min。

（5）每管各加2滴凝聚胺溶液，混匀后静置15s。

（6）1000r/分钟离心1分钟，倾去上清液，不要沥干。

（7）轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，必须重复步骤（3）-（6）

（8）加入2滴重悬液，并轻轻混合，观察结果。

（9）结果判定

如凝聚散开，则为凝聚胺引起的非特异性凝集，判为阴性结果，配血相合；如凝聚不散开，则为抗原抗体结合的特异性反应，

判为阳性结果，配血不相合，如肉眼观察凝集强度弱，可进一

步在显微镜下观察有无凝集。结果判定要求在1min内完成，

最长不要超过3min，因为弱凝集的阳性结果，超过1min可能

变为阴性。

六．注意事项

1.配血技术

交叉配血试验操作规程

1目的：保证临床用血安全，为患者提供配血相合的血液制品。

2范围：患者的血液标木与供血者标木。

3职责：

3.1临床科室采集正确的血样，并提交输血申请单。

3.2血库进行交叉配血试验。

4所用设备与试剂

4.1BY-320A 离心机

4.2聚凝胺介质试剂

5原理：红细胞表而带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。凝聚胺技术首先利用低离子溶液(LIM) 降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清(血浆)中的抗体结合。其后，加入凝聚胺(Polybrene)溶液, 它是一种高价阳离子多聚物，肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷, 可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Ze恰电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚，最后，加入悬浮液(Resuspending)

‘Resuspending具有中和凝聚胺阳例子的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，实验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阴性。

6操作

将受血者、供血者的标木选择工况3分离血清及血浆待用。用生理盐水姜受血者、供血者红细胞制备5%盐水悬液代用（选用工况2洗涤红细胞三次）

6.1盐水介质交叉配血试验：

6.1.1取小试管2支标记主、次侧。主侧管：受血者血清（PS） 100ul+ 供血者红细胞悬液（DS）50ul；次侧管：供血者血浆（DS）100ul+受血者红细胞悬液（PC）

凝聚胺交叉配血标准操作规程

一、目的：

为规范交叉配血试验的技术操作，保证临床输血安全有效，特制定本规程。

二、适用范围

适用于输血科进行交叉配血试验

三、职责

输血科技术人员负责交叉配血试验。

四、测定原理:

红细胞表面带有大量的负电荷，凝聚胺是一种高效价阳离子季胺盐多聚物，溶解后产生较多正电荷，可以中和红细胞表面的唾液酸带有的负电荷，使红细胞之间的距离减少。若是未被抗体致敏的红细胞，加入悬浮液它具有中和凝聚胺的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验结果为阴性;但如果红细胞被相应的抗体所致敏，则会被凝聚胺凝集,凝块就不会散开，试验结果为阳性。

五、试剂及材料

（一）聚凝胺试剂盒(合肥天一生物技术研究所）

成分：低离子介质溶液、聚凝胺溶液、重悬液、阴性及阳性对照液；

保存条件：2～8℃贮存2年，试剂盒打开使用后可置于室温

(二）材料：玻璃试管、微量移液器、离心机、载玻片、显微镜等

六、标本要求：

（一)抽取受血者抗凝（抗凝剂为EDTA.K2）静脉血2-3ml（注意核对病人信息），在3000r/min条件下离心5分钟备用。

（二)标本保存:血液样本必须密封,2~8℃保存7天.

（三）用于交叉配血必须是2～8℃保存3天以内的标本。

七、操作程序：

(一）将受血者红细胞配成3％盐水悬液，鉴定ABO血型及Rh血型.

(二）将供血者血样配制3%红细胞悬液，鉴定ABO血型及Rh血型。

(三)取洁净小试管2支，1支标明受血者血清（PS）+供血者细胞（DC)或“主侧”；另1支标明供血者血清（DS）+受血者细胞（PC)或“次侧"。

（四）主侧管:受血者血清100ul+供血者红细胞悬液50ul.

凝聚胺交叉配血试验标准操作规程

1、目的

为规范输血科交叉配血试验的技术操作，确保鉴定结果准确及临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》4.1.7条款的要求制定本规程。

2、适用范围

本文件适用于本院输血科进行交叉配血的操作技术的规范化管理。

3、职责：输血科技术人员负责本实验的技术操作。

4、试验方法及原理

4.1试验方法：凝聚胺介质配血法

4.2原理：针对不规则抗体的检出及鉴定多采用红细胞的凝聚反应试验，而凝聚反应试验的成效则与分布红细胞表面之电荷以及抗体的亲和性息息相关。凝聚胺法是利用低离子介质（LIM）来降低介质的离子强度，进而减少红细胞之间距，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体发生特异性结合；接着加入凝聚胺（polybrene）此种多价阳离子聚合物来中和红细胞上的阴性电荷，使细胞间发生非特异性凝聚；最后加入重悬液，使之中和由凝聚胺所引起之非特异凝聚，倘若没有凝聚发生，则判定为阴性；若有凝集，则得知存在特殊性之抗原抗体反应，则判定为阳性。

5、样本采集和处理

同盐水交叉配血试验。

6、试剂：贝索的试剂盒：

1)低离子溶液（LIM）

2)聚凝胺溶液（POLYBRENE）

3)悬浮液（RESUSPENDING）

7、操作步骤

7.1 取试管两支,分别标明主次侧管,主侧管加入受血者血清两滴,再加入2~5%献血者红细胞悬液1滴,次侧管反之。

7.2每支试管中加入0.7mlLIM液,混匀;再各加入2滴POLYBRENE 液,混匀。

7.3 3400转离心10秒，弃上清液，不要沥干，让管底残留约0.1ml 液体。

7.4轻摇试管，目测红细胞有无凝集，若无凝集则必须重作。