胡萝卜组织培养系统实验
高中生物实验：胡萝卜的组织培养
高中生物实验：胡萝卜的组织培养
一、实验目的：
胡萝卜是细胞和组织培养中常用的经典材料，是教学实验的良好材料。通过本实验实训，要求学生熟悉胡萝卜离体根培养的基本方法和步骤，掌握愈伤组织诱导的基本技能。
二、实验原理：
植物体的茎，根，叶细胞一般都具有全能性，在一定条件的营养和激素等条件下，
可以脱分化形成愈伤组织。将愈伤组织转接到含有不同激素成分的培养基上，就可以诱导其再分化生成胚状体或丛芽，进而发育成完整的小植株。植物组织培养的全过程，证明了分化的植物细胞，仍具有形成完整植株所需要的全部基因。
三、实验用具：超净台解剖刀刮皮刀不锈钢打孔器培养皿温箱
四、方法步骤：
1. 将胡萝卜用自来水冲洗干净，用刮皮刀除去表皮1-2mm，横切成大约10mm厚的切片。以下步骤均在无菌条件下进行。
2. 胡萝卜片经70%乙醇处理30秒钟后，用无菌水冲洗一遍，再用、2%的次氯酸钠溶液浸泡10分钟，无菌水冲洗3~4次。
3. 将胡萝卜片放入培养皿中，一手用镊子固定胡萝卜片，一手用打孔器垂直打孔，每个小孔打在靠近维管形成层的区域，务必打穿组织。然后从组织片中抽出打孔器，将胡萝卜组织片收集在装有无菌水的培养皿。重复打孔步骤，直至收集到足够数量的组织圆片。
4. 用镊子取出组织圆片，放入培养皿中，用刀片将组织圆片切成2mm长的小块，放入装有无菌水的培养皿中。在整个操作过程中镊子和解剖刀要多次火焰消毒，冷却后再使用。
5、将胡萝卜组织小块放到灭过菌的滤纸上，吸干水分后接种到培养基表面。注意接种时培养瓶要有一定倾斜度，接种过程中镊子不要直接在培养基上方完成，以减少污染机会。
胡萝卜组织培养教学设计
胡萝卜组织培养教学设计
引言概述：
胡萝卜是一种常见的蔬菜，其组织培养在生物学教学中具有重要意义。通过胡萝卜组织培养实验，学生可以了解植物生长发育的基本原理，培养实验操作能力和科学研究精神。因此，设计一套科学合理的胡萝卜组织培养教学方案至关重要。
一、实验目的
1.1 帮助学生了解植物细胞培养的基本原理和技术。
1.2 培养学生的实验操作能力和观察分析能力。
1.3 培养学生的科学研究意识和团队协作能力。
二、实验材料和仪器
2.1 胡萝卜组织样本：新鲜胡萝卜块或悬浮液。
2.2 培养基：含有适当营养物质和植物激素的培养基。
2.3 实验器材：培养皿、移液器、显微镜等。
三、实验步骤
3.1 准备工作：将胡萝卜组织样本切割成小块，消毒处理。
3.2 培养基配置：根据实验要求配置含有适当植物激素的培养基。
3.3 培养操作：将胡萝卜组织样本置于培养基中，定期观察生长情况。
四、实验观察和分析
4.1 观察胡萝卜组织的生长情况：记录组织的颜色、形态和大小变化。
4.2 分析培养结果：根据观察结果分析植物细胞的分化和增殖情况。
4.3 讨论实验意义：与学生一起讨论实验结果，引导学生总结实验经验。
五、实验总结与展望
5.1 总结实验成果：总结实验过程中遇到的问题和解决方法，总结实验结果。
5.2 展望未来研究：探讨胡萝卜组织培养在生物学研究中的应用前景。
5.3 提出改进建议：根据实验过程中的经验，提出改进教学设计的建议。
通过以上胡萝卜组织培养教学设计方案，可以帮助学生深入了解植物细胞培养
的原理和技术，培养他们的实验操作能力和科学研究意识，为未来的科学研究打下坚实基础。同时，教师在实施教学过程中也要根据学生的实际情况进行调整和改进，不断提高教学质量和教学效果。
胡萝卜组织培养教学设计
胡萝卜组织培养教学设计
引言概述：
胡萝卜组织培养是生物学实验中常见的实验项目之一，通过培养胡萝卜组织，可以观察细胞的生长和分化过程，为学生深入了解植物细胞生物学提供了实践机会。本文将介绍胡萝卜组织培养教学设计的相关内容，包括实验目的、实验材料、实验步骤、实验结果分析和实验注意事项。
一、实验目的
1.1 观察植物细胞的生长和分化过程。
1.2 理解植物细胞培养的原理和方法。
1.3 学习细胞培养技术的操作步骤。
二、实验材料
2.1 需要准备的材料包括：胡萝卜、琼脂培养基、生长激素等。
2.2 实验器材包括培养皿、移液器、显微镜等。
2.3 实验环境要求无菌条件，确保实验结果的准确性。
三、实验步骤
3.1 从胡萝卜中取出组织样本，进行消毒处理。
3.2 将组织样本切割成小块，放入含有生长激素的琼脂培养基中。
3.3 将培养皿放置在恒温箱中，定期观察组织的生长情况。
四、实验结果分析
4.1 观察胡萝卜组织在培养基中的生长情况。
4.2 分析细胞的分化和增殖情况。
4.3 结合显微镜观察细胞的形态和结构，进行实验结果的定量分析。
五、实验注意事项
5.1 实验过程中要注意无菌操作，避免细菌污染。
5.2 实验结束后要及时清理实验器材，保持实验室整洁。
5.3 学生在进行实验时要注意安全，避免发生意外情况。
结语：
通过胡萝卜组织培养教学设计，学生可以深入了解植物细胞的生长和分化过程，提高实验操作能力和科学素质。希翼本文的介绍可以匡助教师更好地设计和开展胡萝卜组织培养实验，为学生的学习提供更多的实践机会。
胡萝卜组织培养
易 易 最易 中
灭菌时间
0.1-3 2-10 5-30 5-30 5-30 5-15 30-60
灭菌效果
好 最好 很好 很好 很好 好 较好
3、制备外植体与接种
• 将已消毒的材料，用无菌刀、剪、镊子等，在 无菌的环境下，剥去芽的鳞片、嫩枝的外皮和 种皮胚乳等，叶片则不需剥皮。在操作中严禁 用手接触材料。
泡30秒；
5）然后将外植体转入0.2％升汞中，浸泡25~30分钟，不能超
过30分钟；
6）把带有升汞和组织材料的烧杯拿到超净工作台，取出材料，
放入培养皿，用灭菌水洗4~5分钟，重复3次，用滤纸吸干。
• 接种与培养
7）把洗净的材料用烧过的镊子夹到盛有滤纸的培养皿中，去
除表面一层，然后切成约8×8×5 mm的块；
• 在无菌坏境下，将切好的外植体立即接在培养 基上，每瓶接种2~4个，防止交叉污染。
• 接种后，瓶、管用无菌药棉或盖封口，培养皿 用无菌胶带封口。
三、无菌操作步骤
• 接种3天前用甲醛熏蒸接种室，并于接种前3小时打开紫外线 灯进行杀菌；
• 接种前20分钟，打开超净工作台的风机以及台上的紫外灯； • 接种员洗净双手，在缓冲间换好专用实验服，换穿拖鞋等； • 上工作台后，用酒精棉球搽拭双手（特别是指甲处）和工作
台面； • 用酒精棉球搽拭接种工具，再将镊子和剪刀从头至尾过火一
胡萝卜组织培养教学设计
胡萝卜组织培养教学设计
引言
组织培养技术是植物繁殖和品种改良的重要手段，具有繁殖速度快、周期短、能保持优良性状等优点。胡萝卜作为一种常见的蔬菜，具有丰富的营养价值，利用组织培养技术可以快速繁殖优质胡萝卜，提高产量。本教学设计将介绍胡萝卜组织培养的原理、实验材料与设备、操作步骤、安全注意事项、结果分析以及实验总结与展望等方面的内容。
一、组织培养简介
组织培养定义：组织培养是指在体外人工控制的环境条件下，将植物的离体器官、组织或细胞培养成完整植株的过程。组织培养的意义：组织培养是植物繁殖、品种改良、基因工程和细胞工程等领域的重要手段，具有繁殖速度快、周期短、能保持优良性状等优点。
二、胡萝卜组织培养的原理
植物细胞的全能性：植物细胞全能性是指一个植物细胞具有发育成完整个体的潜在能力。通过组织培养技术，可以利用植物细胞的全能性，将离体的组织或细胞培养成完整的植株。胡萝卜离体培养的可行性：胡萝卜是二倍体植物，其离体培养的可行性较高，可利用组织培养技术实现快速繁殖和高产。
三、实验材料与设备
实验材料：新鲜的胡萝卜根、酒精、无菌水、玻璃板、标签纸等。实验设备：超净工作台、灭菌锅、培养皿、培养瓶、三角瓶等。
四、实验操作步骤
灭菌处理：将实验材料放入灭菌锅中进行灭菌处理，以去除表面微生物。切取组织块：在无菌条件下，将胡萝卜根切成小块的组织块。制备培养基：按照配方配制适宜胡萝卜组织培养的培养基。接种：将切取的组织块接种到培养基上，注意避免交叉污染。培养：将接种好的组织块放置在温度、湿度适宜的环境中进行培养，定期观察记录生长情况。移栽：待植株长出根系和叶子后，将其移栽到营养土中，进行后续的培养和观察。
高中生物选修3精品课件 实验-胡萝卜组织培养
实验-胡萝卜组织培养
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实验原理ຫໍສະໝຸດ Baidu
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实验原理
1、细胞全能性 2、植物组织培养的基本过程
实验目的
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Go Out
实验目的
1、尝试进行植物的组织培养 2、了解植物组织培养的原理
实验目的
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材料用具
胡萝卜根、经过灭菌的培养基、70%酒精、20%的次氯酸钠溶液、 无菌水、50mL的锥形瓶或大试管、烧杯、酒精灯、恒温箱、超净工作 台、高压灭菌锅、滤纸、标签、酒精棉、培养皿、解剖刀、镊子等。
骤
实 验
3 用无菌滤纸吸去胡萝卜段表面的水分。在培养皿 上，用无菌解剖刀将胡萝卜段切成1cm厚的横切片，
步
选择有形成层的部位，切取1cm³左右的小块。
骤
实 验
4
将胡萝卜组织块接种到培养基上，用锡箔纸 封盖瓶口，贴上标签，写上材料名称，日期、
胡萝卜组织培养教学设计
胡萝卜组织培养教学设计
引言概述：
胡萝卜是一种常见的蔬菜，其组织培养技术在植物生物技术研究中起着重要作用。本文将介绍胡萝卜组织培养的教学设计，包括实验目的、实验步骤、实验材料和实验结果的分析等内容。
一、实验目的：
1.1 了解胡萝卜组织培养的原理和意义；
1.2 学习培养胡萝卜愈伤组织的方法；
1.3 掌握胡萝卜愈伤组织的分化与再生过程。
二、实验步骤：
2.1 材料准备：
2.1.1 胡萝卜种子的消毒处理；
2.1.2 培养基的制备。
2.2 组织培养的操作步骤：
2.2.1 胡萝卜愈伤组织的诱导；
2.2.2 胡萝卜愈伤组织的培养与增殖；
2.2.3 胡萝卜愈伤组织的分化与再生。
2.3 实验观察和记录：
2.3.1 观察愈伤组织的形态和颜色变化；
2.3.2 记录愈伤组织的生长速度和增殖情况；
2.3.3 分析愈伤组织的分化和再生能力。
三、实验材料：
3.1 胡萝卜种子；
3.2 无菌培养基；
3.3 愈伤组织诱导剂；
3.4 培养器具（包括培养皿、培养瓶、移液器等）；
3.5 显微镜。
四、实验结果的分析：
4.1 胡萝卜愈伤组织的诱导效果；
4.2 胡萝卜愈伤组织的生长速度和增殖情况；
4.3 胡萝卜愈伤组织的分化和再生能力。
五、实验的意义和应用：
5.1 胡萝卜组织培养技术在植物生物技术研究中的应用；
5.2 胡萝卜组织培养技术在植物育种中的意义；
5.3 胡萝卜组织培养技术在植物病害防治中的潜力。
总结：
通过本文的介绍，我们了解了胡萝卜组织培养教学设计的内容和步骤。胡萝卜组织培养技术的掌握对于植物生物技术研究、植物育种和植物病害防治等领域具有重要意义。希翼本文能够为胡萝卜组织培养教学提供一定的参考和指导。
胡萝卜组织培养教学设计
胡萝卜组织培养教学设计
引言概述：
胡萝卜组织培养是一种重要的实验技术，在植物组织培养领域有着广泛的应用。本文将详细介绍胡萝卜组织培养的教学设计，包括实验目的、所需材料、步骤和注意事项等内容。
一、实验目的
1.1 掌握胡萝卜组织培养的基本原理和技术方法；
1.2 学习胡萝卜组织培养的步骤和操作技巧；
1.3 培养对胡萝卜组织的了解和实验设计能力。
二、所需材料
2.1 胡萝卜种子：选择健康、无病虫害的胡萝卜种子；
2.2 培养基：准备含有适当激素和营养成分的培养基；
2.3 器皿和培养容器：如试管、培养瓶、培养皿等；
2.4 实验室设备：包括显微镜、离心机、培养箱等。
三、步骤
3.1 种子消毒：将胡萝卜种子浸泡在含有消毒剂的溶液中，进行消毒处理；
3.2 胚轴培养：将消毒后的种子取出，剥离外皮，将胚轴切割成适当大小的组织段；
3.3 培养基接种：将切割好的胚轴组织段接种到含有培养基的培养容器中。
四、注意事项
4.1 操作无菌：实验过程中要严格遵守无菌操作规范，避免细菌和真菌的污染；
4.2 温度和湿度控制：胡萝卜组织培养需要在适宜的温度和湿度条件下进行，保证培养的成功率；
4.3 培养基配制：根据实验要求，准确配制含有适当激素和营养成分的培养基。
五、实验结果分析
5.1 观察胡萝卜组织的生长情况：通过显微镜观察培养组织的生长状态和形态特征；
5.2 记录实验数据：包括组织的增长速率、形成的新组织类型等；
5.3 分析实验结果：根据实验数据进行结果分析，总结胡萝卜组织培养的特点和应用前景。
总结：
通过本次胡萝卜组织培养的教学设计，学生能够全面了解胡萝卜组织培养的基本原理和技术方法，掌握实验操作技巧，培养实验设计和数据分析能力。这对于培养学生的实验能力和科研素养具有重要意义，并为今后的植物组织培养研究提供了基础。
实验2-4胡萝卜愈伤组织的继代培养
胡萝卜是一种常见的蔬菜，其愈伤组织培养的研究对于了解植物细胞分化和发育机 制，以及实现植物的遗传转化等方面具有重要的意义。
02
实验材料与方法
实验材料
胡萝卜外植体
选取健康、新鲜的胡萝卜，清 洗干净后切成合适大小的外植
显微结构分析
显微镜观察结果显示，愈伤组织细胞 分裂旺盛，排列紧密，这表明愈伤组 织活性较高，具有较好的再生潜力。
结果讨论
影响因素分析
胡萝卜愈伤组织的继代培养受到多种因素的影响，如培养基 成分、温度、光照等。实验中应进一步探讨这些因素对愈伤 组织生长的影响。
应用前景展望
胡萝卜愈伤组织具有较高的再生潜力和广泛的应用前景，可 以用于植物遗传转化、基因克隆和功能研究等领域。未来可 进一步研究其在农业生产和生物技术领域的应用价值。
实验2-4：胡萝卜愈伤组织 的继代培养
目 录
• 实验简介 • 实验材料与方法 • 实验结果与分析 • 结论与展望
01
实验简介
实验目的
掌握愈伤组织继代培 养技术。
研究不同培养条件对 愈伤组织生长和分化 的影响。
观察愈伤组织在继代 培养过程中的变化。
实验原理
愈伤组织是由植物体细胞经过脱 分化形成的具有无限增殖能力的
胡萝卜组织培养教学设计
胡萝卜组织培养教学设计
引言概述：
胡萝卜组织培养是一种常见的植物细胞培养技术，可以应用于植物生物学教学中。本文将从胡萝卜组织培养的原理、实验材料与设备准备、实验步骤、实验结果分析和实验注意事项等五个大点进行阐述，旨在提供一份详细且专业的胡萝卜组织培养教学设计。
正文内容：
1. 胡萝卜组织培养的原理
1.1 胡萝卜组织培养的基本原理
1.2 胡萝卜组织培养的应用领域
1.3 胡萝卜组织培养的意义和价值
2. 实验材料与设备准备
2.1 实验所需材料清单
2.2 实验所需设备清单
2.3 实验材料与设备的准备方法
3. 实验步骤
3.1 胡萝卜组织的获取与处理
3.2 培养基的制备与调配
3.3 组织培养的操作步骤
3.4 培养条件的控制与调节
3.5 实验结束后的处理与保存
4. 实验结果分析
4.1 胡萝卜组织培养的观察指标
4.2 实验结果的记录与统计
4.3 实验结果的分析与讨论
5. 实验注意事项
5.1 实验操作的安全注意事项
5.2 实验过程中的常见问题与解决方法
5.3 实验结果的正确解读与分析方法
总结：
通过本文的阐述，我们对胡萝卜组织培养的教学设计有了更深入的了解。胡萝卜组织培养作为一种常见的植物细胞培养技术，具有广泛的应用领域和重要的意义和价值。在实验中，我们需要准备好所需的材料和设备，并按照一定的步骤进行操作。在实验结果的分析中，我们应该注重观察指标的记录与统计，并进行正确的解读与分析。同时，在实验过程中需要注意安全事项，并及时解决常见问题。通过这样的教学设计，学生能够更好地理解和掌握胡萝卜组织培养的原理和实验技术，提高植物生物学的实验操作能力。
胡萝卜组织培养教学设计
胡萝卜组织培养教学设计
引言概述：
胡萝卜组织培养是生物学实验课程中常见的实验项目之一，通过培养胡萝卜组织，学生可以了解植物的生长过程和组织培养技术。本文将介绍一套胡萝卜组织培养的教学设计，匡助教师更好地进行实验教学。
一、实验目的
1.1 匡助学生了解植物胡萝卜的生长过程和组织培养技术。
1.2 培养学生的实验操作能力和观察分析能力。
1.3 培养学生的团队合作意识和科学研究精神。
二、实验材料准备
2.1 胡萝卜：选择新鲜的胡萝卜，去皮切成小段备用。
2.2 培养基：准备含有适当植物激素的培养基，促进组织生长。
2.3 实验器材：包括培养皿、移液器、显微镜等实验器材。
三、实验步骤
3.1 培养基制备：将培养基倒入培养皿中，待凝固。
3.2 组织培养：将胡萝卜组织放入培养基中，放置在适当的温度和光照条件下。
3.3 观察记录：定期观察胡萝卜组织的生长情况，记录生长速度和形态变化。
四、实验结果分析
4.1 生长速度：观察不同培养条件下胡萝卜组织的生长速度，比较结果。
4.2 形态变化：观察胡萝卜组织的形态变化，分析植物生长的规律。
4.3 实验效果评价：评价实验结果的可靠性和教学效果，总结子验经验。
五、实验拓展
5.1 实验设计：根据胡萝卜组织培养实验结果，设计相关实验课题。
5.2 实验研究：开展更深入的植物组织培养研究，探索新的实验方向。
5.3 实验应用：将胡萝卜组织培养技术应用于其他植物的组织培养实验中，拓展实验内容。
结语：
通过以上教学设计，胡萝卜组织培养实验可以更好地匡助学生理解植物生长过程和培养技术，培养他们的实验操作能力和科学研究精神。教师可以根据实际情况进行适当调整，提高实验教学的效果和趣味性。希翼本文的内容对胡萝卜组织培养教学设计有所匡助。
胡萝卜组织培养教学设计
胡萝卜组织培养教学设计
引言概述：
胡萝卜是一种常见的蔬菜，富含维生素和纤维，对人体健康非常有益。为了更好地了解胡萝卜的组织培养方法，本文将介绍一种胡萝卜组织培养的教学设计。通过这个教学设计，学生将学习到如何培养胡萝卜的组织，培养技巧以及相关的实验操作。
一、培养基的准备
1.1 了解培养基的组成
胡萝卜组织培养所需的培养基是由多种营养物质组成的。学生需要了解培养基中的主要成份，如无机盐、有机物质、植物激素等。同时，还需要了解培养基的pH值和浓度等参数对培养效果的影响。
1.2 制备培养基
学生需要学习如何准备胡萝卜组织培养所需的培养基。制备培养基的过程包括称量和溶解培养基的各种成份，调节pH值和浓度，最终得到适合胡萝卜组织培养的培养基。
1.3 灭菌和保存
在进行组织培养实验之前，培养基需要进行灭菌处理，以避免细菌和真菌的污染。学生需要学习灭菌的方法，如高温灭菌和化学灭菌。此外，学生还需要学习如何保存培养基，以便后续的实验使用。
二、胡萝卜种子的处理
2.1 种子的消毒
在进行组织培养之前，胡萝卜种子需要进行消毒处理，以杀灭种子表面的细菌和真菌。学生需要学习消毒的方法，如用酒精或者漂白粉处理种子。
2.2 种子的激素处理
为了促进种子的萌发和胡萝卜组织的生长，学生需要学习如何使用植物激素处理种子。植物激素的浓度和处理时间对种子的生长和组织的培养有重要影响，学生需要学会合理调节激素的浓度和处理时间。
2.3 种子的萌发和筛选
经过激素处理后，胡萝卜种子将在培养基上迅速萌发。学生需要学习如何观察和筛选萌发的种子，选择生长良好的幼苗作为后续组织培养的材料。
胡萝卜的组织培养-北师大版选修1生物技术实践教案
胡萝卜的组织培养-北师大版选修1 生物技术实践教案
一、实验目的
1.了解植物的组织培养技术，掌握常用植物的组织培养方法；
2.学习如何构建植物组织培养的基本实验流程；
3.初步探究不同植物体部位对于组织培养的影响。
二、实验设备和物料
1. 设备
不锈钢工作台、蒸馏水机、显微镜、移液器、扩展罐、手套箱、烧杯、移液管、无菌操作台等。
2. 物料
•pH=5.8~6.2的MS培养基
•10~20g/L蔗糖
•不同部位的胡萝卜组织，还包括含有胡萝卜素的幼茎、幼芽、茎叶、幼根等部位。
•NaN3或酒精(用于杀死胡萝卜的外界细菌)
•过氧化氢
•活性炭(用于吸收干燥剂带来的湿度)
三、实验流程
1. 组织消毒
将胡萝卜取出，剪去较老的部分，然后将鲜活的胡萝卜以及所需要的其他部位进行取样切碎，然后液体表面无菌处理（消毒），传统方法为用70%的乙醇漂流
消毒，维持采样器具无菌工作等级。
2. 组织培养
取一个无菌组织，放入MS培养液中，控制装置培养10d ~ 14d。
3. 生长检测
可以用显微镜观察植物组织的生长情况。
4. 分析
分析组织培养的成功率以及植物组织的生长情况，探究胡萝卜不同组织的生长特性。
四、实验注意事项
1.操作前要进行完备无菌措施，保证实验结果的准确性；
2.胡萝卜取样均要使用锐利的工具，并保证其在取样工具的范围内；
3.胡萝卜的处理、培养、检测各个环节都要严格按照操作规范进行，否则会影响实验结果；
4.植物组织培养液的温度、光照、湿度应当根据实验情况进行调整，操作时要进行多次调整。
五、实验结果分析
经过实验，胡萝卜的组织培养成功率较高，可以通过MS培养液为基础进行培养。同时，在实验中发现，不同部位的胡萝卜组织对于生长的影响较大，含胡萝卜素的部位如茎叶组织生长较快，而幼根组织生长较缓慢。
胡萝卜组织培养系统实验
云南大学生命科学实验教学中心
实验报告
课程名称：细胞工程实验
院系：生命科学学院
年级专业：2013级生物技术（国家生命科学与技术
姓名：杨梦梅选课号：2015107066
学号：20131070156座号：A2
开课日期：2015.09 学期：2015秋季学期
任课教师：吕琦、牛芸
云南大学生命科学实验教学中心制
胡萝卜愈伤组织的诱导、继代及细胞悬浮培养研究
第一作者：杨梦梅同组实验者：赵姗
( 云南大学生命科学学院,昆明650504)
摘要: 以胡萝卜肉质根为外植体诱导出愈伤组织, 并建立细胞悬浮系. 实验
结果表明: 胡萝卜肉质根是诱导愈伤组织和进行细胞悬浮培养的可行外植体; 诱导致密型愈伤组织的最佳激素浓度配比是 0.5 mg/ L 2, 4- D+ 0.4 mg/ L KT;继代培养 1代~ 2时,可得到高活性的悬浮细胞系；细胞悬浮培养细
胞经过 14 天达到高峰期（生长平台）。
关键词: 胡萝卜; 组织培养; 细胞悬浮培养; 致密型愈伤组织;
The study about inducement, subculture and suspension cell
lines of Carrots’ callus
Abstract: Carrots’flesh roots can induce callus as explants, and then it establishes suspension cell lines. The experimental results show that: Carrots’flesh roots really can induce callus and then make suspension cell lines. In order to induce high density callus, the best hormone ratio is 0.5 mg/ L 2, 4- D+ 0.4 mg/ L KT. Subculturing the cell line for 1 to 2 times, we can obtain the suspension cell line with high activity. After 2 weeks, the cell line reaches to the peak of growth.
胡萝卜组织培养教学设计
胡萝卜组织培养教学设计
引言：
胡萝卜是一种常见的蔬菜，富含维生素和纤维素，对人体健康有不少好处。为了让学生更好地了解胡萝卜的生长过程和培养方法，我们设计了一套胡萝卜组织培养教学方案。本文将从胡萝卜的组织培养原理、实验步骤、实验条件、实验结果和教学效果等方面进行详细阐述。
正文：
1. 胡萝卜组织培养原理
1.1 组织培养的概念和意义
组织培养是一种在无菌条件下培养植物细胞、组织和器官的技术，可以实现植物的无性繁殖和基因改良等目的。
1.2 胡萝卜组织培养的原理
通过体细胞分裂和再生过程，将胡萝卜的细胞培养成植株，可以利用胡萝卜的愈伤组织、叶片和种子等不同组织进行培养。
2. 胡萝卜组织培养实验步骤
2.1 材料准备
准备无菌培养基、胡萝卜种子、培养器具等实验所需材料。
2.2 组织消毒
将胡萝卜种子进行表面消毒，以杀灭种子表面的细菌和真菌。
2.3 组织分离
将胡萝卜种子切割成小块，分离出愈伤组织或者叶片等组织。
2.4 培养基接种
将分离出的组织放入无菌培养基中，培养基提供了细胞分裂和再生所需的营养物质。
2.5 培养条件控制
控制培养基的温度、光照和湿度等条件，促进组织的生长和分化。
2.6 观察和记录
观察培养组织的生长情况，记录实验结果。
3. 胡萝卜组织培养实验条件
3.1 温度控制
适宜的温度有利于组织的生长和分化，普通在20-25摄氏度之间。
3.2 光照控制
适量的光照可以促进光合作用和植物生长，普通采用间接光照或者人工光源。
3.3 培养基配方
培养基的配方要根据胡萝卜组织的需求进行调整，提供适宜的营养物质和激素。
4. 胡萝卜组织培养实验结果
胡萝卜组织培养教学设计
胡萝卜组织培养教学设计
引言概述
胡萝卜是一种常见的蔬菜，其组织培养技术在生物学教学中具有重要意义。通过胡萝卜组织培养实验，学生可以了解植物细胞培养的基本原理和操作技巧，培养他们的实验操作能力和科学素质。本文将介绍胡萝卜组织培养教学设计的具体内容。
一、实验材料准备
1.1 选择新鲜的胡萝卜
在进行组织培养实验前，首先要选择新鲜的胡萝卜作为实验材料。新鲜的胡萝卜组织细胞活力高，有利于细胞分裂和再生。
1.2 消毒处理
将胡萝卜表面进行消毒处理，以防止外源微生物的污染。可以使用75%酒精或者含有消毒剂的溶液对胡萝卜进行消毒处理。
1.3 切割准备
将胡萝卜切成小段，保证组织培养时细胞易于释放和培养。切割时要注意使用锋利的刀具，避免对组织细胞造成伤害。
二、组织培养基的配制
2.1 选择适当的培养基
根据实验的目的和要求，选择适合胡萝卜组织培养的培养基。常用的培养基包括MS培养基、B5培养基等。
2.2 添加植物生长调节剂
在培养基中添加适量的植物生长调节剂，如激素和细胞分裂素，促进胡萝卜组织的分裂和再生。
2.3 调节pH值和渗透压
调节培养基的pH值和渗透压，保持培养环境的稳定性，有利于组织细胞的生长和分化。
三、组织培养操作步骤
3.1 组织释放
将切好的胡萝卜组织放入含有酶解剂的培养基中，利用酶解剂分解细胞壁，释放组织细胞。
3.2 培养条件控制
控制培养基的温度、光照、湿度等条件，提供适宜的生长环境，促进组织细胞的生长和分化。
3.3 观察和记录
定期观察胡萝卜组织的生长情况，记录细胞分裂和再生的过程，培养学生的观察和记录能力。
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云南大学生命科学实验教学中心
实验报告
课程名称：细胞工程实验
院系：生命科学学院
年级专业：2013级生物技术（国家生命科学与技术姓名：杨梦梅选课号：2015107066
学号：20131070156座号：A2
开课日期：2015.09 学期：2015秋季学期
任课教师：吕琦、牛芸
云南大学生命科学实验教学中心制
胡萝卜愈伤组织的诱导、继代及细胞悬浮培养研究第一作者：杨梦梅同组实验者：赵姗
( 云南大学生命科学学院,昆明650504)
摘要: 以胡萝卜肉质根为外植体诱导出愈伤组织, 并建立细胞悬浮系. 实验结果表
明: 胡萝卜肉质根是诱导愈伤组织和进行细胞悬浮培养的可行外植体; 诱导致密型
愈伤组织的最佳激素浓度配比是 0.5 mg/ L 2, 4- D+ 0.4 mg/ L KT;继代培
养 1代~ 2时,可得到高活性的悬浮细胞系；细胞悬浮培养细胞经过 14 天达到高
峰期（生长平台）。
关键词: 胡萝卜; 组织培养; 细胞悬浮培养; 致密型愈伤组织;
The study about inducement, subculture and suspension cell
lines of Carrots’ callus
Abstract: Carrots’ flesh roots can induce callus as explants, and then it establishes suspension cell lines. The experimental results show that: Carrots’flesh root s really can induce callus and then make suspension cell lines. In order to induce high density callus, the best hormone ratio is 0.5 mg/ L 2, 4- D+ 0.4 mg/ L KT. Subculturing the cell line for 1 to 2 times, we can obtain the suspension cell line with high activity. After 2 weeks, the cell line reaches to the peak of growth.
Keywords: Carrot; tissue culture experiments; suspension cell; callus in high density 胡萝卜( Daucus carota L . ) , 属于十字花科植物, 是一种十分重要的蔬菜作物, 由于胡萝卜肉质根营养丰富，约含有88％的水、6％～8％糖、1％～2％植物纤维，0．7％～1．2％蛋白质、1％灰份及0～3％脂肪，及其适于生食、加工、烹调等多种用途, 在世界范围内广泛栽培。中国是农业大国, 胡萝卜作为蔬菜作物在人们生活中起着重要的作用。因此, 加快我国胡萝卜育种研究以成为迫切需要。近些年来, 随着生物技术与分子生物学技术的快速发展, 作为生物技术研究的理想材料, 许多国家对胡萝卜体细胞杂交技术、遗传转化与再生技术、分子标记与基因克隆技术进行了广泛深入的研究。我国科研工作者在胡萝卜的生物技术与分子生物学研究上也取得了一定进展, 特别是在组织培养、原生质体融合、遗传转化及再生等方面。但是在胡萝卜细胞培养方面并不是太多, 因此继续深入研究还是很有必要的。
本文对胡萝卜愈伤组织诱导的最佳培养基和细胞悬浮培养的条件进行探讨, 为其次生代谢产物α- 胡萝卜素、β- 胡萝卜素（维生素A前体）的生产以及将来的工厂化和分子生物学研究打下基础。
1 材料和方法
1. 1材料来源
胡萝卜肉质根自农贸市场购买.
1. 2 方法
1. 2. 1MS培养基的配制1000ml
1)用大烧杯取蒸馏水100-120ml
2)依次用移液管量取加入母液：100ml大量（10x）、100ml大量钙盐（10x）、10ml微量
I（100x）、1ml微量II（1000x）、10ml铁盐（100x）、10ml有机（100x）、100ml有机肌醇（10x）、以及适当含量植物激素。
3)称取30g蔗糖加入，搅拌直至全部溶解，作为1号溶液备用。
4)称取9g琼脂，用量筒量取500ml蒸馏水一起加入1000ml体积白瓷缸中，放在电炉上一
边加热一边搅拌，加热直至清澈无沉淀。将1号溶液加入，继续加热搅拌，至将要沸腾，离火。
5)用pH试纸调pH至5.8-6.0 。
6)在白瓷缸中定容至1000ml，搅拌均匀。
7)分装至350ml培养瓶中每瓶约40~50ml。121℃高压灭菌20min。
探究实验：
( 1) 以胡萝卜肉质根形成层为外植体诱导。用自来水洗净胡萝卜肉质根, 用小刀切成长约6~7cm块段, 将其在 75% 的酒精中消毒 60s, 再用0. 1% 的升汞消毒 10min或用20%次氯酸钠水溶液消毒20min, 最后用无菌水漂洗三遍每遍5~10min..
（2）消毒好的胡萝卜根块, 切去形态学下端的5~10mm厚的一片, 留下部分用消毒好的小刀, 沿截面横切成厚度 3~5mm 左右的小圆片, 然后将小圆片的韧皮部和木质部切去, 留下形成层, 再切成长 3mm, 宽 1. 5mm, 高 3~5mm 的小长块, 分别接种在M1、M2、M3、M4的诱导培养基上.
（3）获得愈伤后进行继代培养, 培养环境条件与诱导培养相同.
1. 2. 3胡萝卜愈伤组织的继代
（1）从培养瓶中取出愈伤组织，置于无菌培养皿内，用解剖刀将愈伤组织坏死部分剔除并将愈伤组织切成黄豆大小颗粒，放在无激素的新鲜培养基表面，用镊子轻轻压实，每个培养瓶接种2~3个切块。用记号笔标注操作者、组别和日期。
（2）3~4周后在相同培养基上继代培养1次。
1. 2. 4胡萝卜细胞无菌系的建立悬浮培养
（1）用镊子夹取在固体继代培养基上继代 10d 左右的胚性愈伤组织即分散性好、疏松的愈伤, 称取鲜重2g左右的胡萝卜愈伤组织，在灭过菌的培养皿中用无菌镊子尽量将其拨散。
（2）将散碎的愈伤组织转移入盛有20ml液体无激素MS培养基的三角瓶中。
（3）置于80~120r/min摇床上25℃暗培养。