碧云天 BCA蛋白浓度测定试剂盒
BCA蛋白浓度测定试剂盒
BCA蛋白浓度测定试剂盒产品编号产品名称包装价格P0012 BCA蛋白浓度测定试剂盒500次258.00 元O 碧云天生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成，实现了蛋白浓度测定的简单，高稳定性，高灵敏度和高兼容性。
O 灵敏度高，检测浓度下限达到25微克/毫升，最小检测蛋白量达到0.5微克，待测样品体积为1-20微升。
O 在50-2000微克/毫升浓度范围内有较好的线性关系。
O BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween20, 60, 80。
但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇低于1mM，β-巯基乙醇低于1mM。
不适用BCA法时建议使用碧云天Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
O BCA蛋白浓度测定试剂盒对样品中各种物质详细的兼容性表，参见BCA蛋白浓度测定兼容性表。
O 每个试剂盒可以检测500个样品。
包装清单：BCA试剂A 100 mlBCA试剂B 3 ml蛋白标准（5mg/ml BSA） 1 ml说明书 1 份保存条件：BCA试剂A和B室温保存，蛋白标准请-20℃冻存。
本试剂盒自订购之日起一年注意事项：O 需酶标仪一台，测定波长为540-595nm之间，562nm最佳。
需96孔板。
如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但是测定蛋白浓度时，需根据测定吸光度的杯子的体积，按比例调整A液,B液和样品的体积。
使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
O 如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景，请试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
O 为了加快BCA法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热，但是切勿过热。
O EDTA浓度必需小于10mM，不兼容EGTA。
不适用BCA法时，请试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
P0012S BCA蛋白浓度测定试剂盒说明书
使用说明：
1. 取0.8ml蛋白标准配制液加入到一管蛋白标准(20mg BSA)中，充分溶解后配制成25mg/ml的蛋白标准溶液。配制后可立即 使用，也可以-20℃长期保存。
2. 取适量25mg/ml蛋白标准，稀释至终浓度为0.5mg/ml。例如取20l 25mg/ml蛋白标准，加入980l稀释液即可配制成 0.5mg/ml蛋白标准。蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见，也可以用0.9%NaCl或PBS 稀释标准品。稀释后的0.5mg/ml蛋白标准也可以-20℃长期保存。
15. Zong-Chun Yi, Hong Wang, Guang-Yao Zhang, Bing Xia. Downregulation of connexin 43 in nasopharyngeal carcinoma cells is related to promoter methylation. Oral Oncol. 2007 Feb 14;
注: 也可以室温放置2小时，或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时，颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反 应会因温度升高而加快。如果浓度较低，适合在较高温度孵育，或适当延长孵育时间。 7. 测定A562，540-595nm之间的波长也可接受。根据标准曲线计算出样品的蛋白浓度。
常见问题：
1. 测定标准曲线时发现随着标准品浓度的增加吸光度或颜色没有明显变化。 可能的原因是样品中含有严重干扰BCA法测定蛋白浓度的物质，详细的BCA法的兼容性列表请参考碧云天如下网页: /Compatibility Chart For BCA Kit.pdf
9. Le-Feng Zhang, Shuang-Qing Peng, Sheng Wang. Influence of lead (Pb2+) on the reactions of in vitro cultured rat aorta to 5-hydroxytryptamine. Toxicology Letters 159 (2005) 71–82.
BCA蛋白浓度测定-酶标仪法
BCA法测定蛋白浓度-酶标仪一、药品1.BCA蛋白浓度测定试剂盒（P0012，500次酶标仪，碧云天），含以下成分：a)BCA试剂A（P0012-1，100ml，碧云天），室温保存b)BCA试剂B（P0012-2，3ml，碧云天），室温保存c)蛋白标准（5mg/ml BSA）（P0012-3，1ml，碧云天），-20度保存二、仪器和试剂1.酶标仪（测定波长为540-595nm之间，562nm最佳），水浴锅2.96孔单条可拆酶标板（平底）3.15 ml 离心管1个（准备BCA工作液用）4. 1.5 ml 离心管1个（准备蛋白标准品工作液用）5.单道移液器和枪头，8道移液器（排枪）和枪头6.PBS三、操作步骤1.水浴锅调至37℃。
2.蛋白标准品工作液（1 mg/ml）的配制：将蛋白标准品（5mg/ml）从-20℃冰箱中取出，完全溶解并混匀。
取60μl 蛋白标准品（5mg/ml），加入240μl PBS，即稀释5倍，即配成蛋白标准品工作液（1 mg/ml）。
3.计算BCA工作液总量= 0.2 ml×（样本数+8）×2×1.1（标准品和样本均需测复孔）。
BCA工作量按50体积的BCA试剂A加上1体积的BCA试剂B配制（即50:1），需充分混匀。
BCA 工作液室温24小时内稳定。
4.按下表配制8个蛋白标准液（S0~S7），充分摇匀。
5.将96孔酶标板的A1孔放在左上角，按下表加入蛋白样本和标准品。
（1）先在第3~4条酶标板的蛋白样本孔（N 1~N8）中加入待测蛋白样本各2μl，再用排枪在蛋白样本孔中追加PBS液各18μl，使总量达到20μl。
（此时蛋白样本的稀释比为10，适用于预计蛋白浓度为2~8mg/ml时。
如预计蛋白浓度太高或太低，可适当调整稀释比例）（2）再在第1~2条酶标板的蛋白标准品孔（S0~S7）中加入上面配制的8个蛋白标准液各20μl。
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12A S0 S0 N1 N1B S1 S1 N2 N2C S2 S2 N3 N3D S3 S3 N4 N4E S4 S4 N5 N5F S5 S5 N6 N6G S6 S6 N7 N7H S7 S7 N8 N86.用排枪在各孔中加入200μl BCA工作液，轻轻摇匀，37℃放置30分钟或室温放置2小时。
BCA法蛋白含量测定试剂盒使用说明
BCA法蛋白含量测定试剂盒使用说明BCA法（bicinchoninic acid assay）是一种用于测定蛋白质含量的常用方法。
BCA法蛋白含量测定试剂盒使用说明如下：试剂盒组成：1.BCA试剂A：含有重铜离子和碱性溶液。
2.BCA试剂B：含有双咪唑试剂和碱性溶液。
3.蛋白标准溶液：一系列已知浓度的牛血清蛋白标准溶液。
4.BCA试剂C：含有特殊缓冲溶液。
注意事项：1.所有试剂和样品在使用前均需室温下静置至少30分钟。
2.打开试剂盒后，避免将试剂直接暴露于空气中，以免影响试剂稳定性。
3.在所有步骤中，使用干净且蛋白污染的工具可能会导致错误的结果。
步骤1：制备标准曲线1.准备一系列不同浓度的蛋白标准溶液，如0、20、40、60、80和100μg/mL。
2.取0.1mL蛋白标准溶液加入1.9mL去离子水，即配制出100μg/mL的稀释溶液。
3.以同样的方法依次配制出20、40、60和80μg/mL的稀释溶液。
4.将每个稀释溶液的0.2mL与2mLBCA试剂A混合，放置30分钟。
5.加入0.5mLBCA试剂B，再次混合均匀。
6.将混合液放置37°C加热反应30分钟后冷却至室温。
7. 使用紫外-可见光谱仪测定吸光度，以280 nm为波长，绘制标准曲线。
步骤2：测定待测样品1.取待测样品，如细胞裂解液，加入BCA试剂C进行稀释，使得样品中的蛋白质浓度在标准曲线范围内。
2.取样品0.1mL加入1.9mL去离子水，配制出与标准曲线相同浓度的稀释液。
3.加入1mLBCA试剂A混合均匀，放置30分钟。
4.加入0.2mLBCA试剂B，再次混合均匀。
5.将混合液放置37°C加热反应30分钟后冷却至室温。
6. 使用280 nm波长的紫外-可见光谱仪测定吸光度。
步骤3：计算蛋白质含量1.将待测样品的吸光度值与标准曲线进行比较，根据吸光度值确定样品中蛋白质的含量。
2.通过线性拟合标准曲线计算待测样品中蛋白质的浓度。
BCA蛋白浓度测定-酶标仪法
.酶标仪BCA法测定蛋白浓度-一、药品500次酶标仪，碧云天），含以下成分：BCA蛋白浓度测定试剂盒（P0012，1. 100ml，碧云天），室温保存试剂A（P0012-1，a)BCA ，碧云天），室温保存P0012-2试剂B（，3mlb)BCA 度保存P0012-3，1ml，碧云天），-20c)蛋白标准（5mg/ml BSA）（二、仪器和试剂最佳），水浴锅酶标仪（测定波长为540-595nm之间，562nm1. 孔单条可拆酶标板（平底）2.96 1个（准备BCA工作液用）3.15 ml 离心管个（准备蛋白标准品工作液用） 1.5 ml 离心管14. 道移液器（排枪）和枪头5.单道移液器和枪头，8PBS 6. 三、操作步骤℃。
1.水浴锅调至37℃冰箱中取出，）的配制：将蛋白标准品（5mg/ml）从-202.蛋白标准品工作液（1 mg/ml倍，即配μl PBS，即稀释5完全溶解并混匀。
取60μl 蛋白标准品（5mg/ml），加入240 成蛋白标准品工作液（1 mg/ml）。
BCA。
2×1.1（标准品和样本均需测复孔）BCA计算工作液总量= 0.2 ml×（样本数+8）×3.BCA需充分混匀。
50:1），体积的BCA试剂B配制（即试剂工作量按50体积的BCAA加上1 24工作液室温小时内稳定。
S0~S7），充分摇匀。
4.按下表配制8个蛋白标准液（0.2 20 D 80S30.3 S4 7030E0.4 S5 F 40 600.5 G 50 50S61.00S7100H5.将96孔酶标板的A1孔放在左上角，按下表加入蛋白样本和标准品。
（1）先在第3~4条酶标板的蛋白样本孔（N 1~N8）中加入待测蛋白样本各2μl，再用排枪在蛋白样本孔中追加PBS液各18μl，使总量达到20μl。
（此时蛋白样本的稀释比1 / 2.时。
如预计蛋白浓度太高或太低，可适当10，适用于预计蛋白浓度为2~8mg/ml为调整稀释比例）个蛋白标准液S0~S7）中加入上面配制的8）（2再在第1~2条酶标板的蛋白标准品孔（。
碧云天BCA Kit manual
¾ 和碧云天生产的普通BCA蛋白浓度测定试剂盒相比，显色速度更快，相同的样品孵育较短时间即可进行吸光度测定。 ¾ 在20-1000µg/ml浓度范围内有较好的线性关系。 ¾ BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的
使用说明：
1. 取0.8ml蛋白标准配制液加入到一管蛋白标准(20mg BSA)中，充分溶解后配制成25mg/ml的蛋白标准溶液。配制后可立即 使用，也可以-20℃长期保存。
2. 取适量25mg/ml蛋白标准，稀释至终浓度为0.5mg/ml。例如取20µl 25mg/ml蛋白标准，加入980µl稀释液即可配制成 0.5mg/ml蛋白标准。蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见，也可以用0.9%NaCl或PBS 稀释标准品。稀释后的0.5mg/ml蛋白标准也可以-20℃长期保存。
8. Liu MJ, Wang Z, Ju Y, Wong RN, Wu QY. Diosgenin induces cell cycle arrest and apoptosis in human leukemia K562 cells with the disruption of Ca2+ homeostasis. Cancer Chemother Pharmacol. 2005 Jan;55(1):79-90.
12.Le-Feng Zhang, Shuang-Qing Peng, Sheng Wang. Influence of lead (Pb2+) on the reactions of in vitro cultured rat aorta to 5-hydroxytryptamine. Toxicology Letters 159 (2005) 71–82.
BCA 法蛋白含量测定试剂盒说明书
BCA法蛋白含量测定试剂盒说明书(货号：G0418W微板法96样)一、产品简介：BCA蛋白含量试剂盒提供一种简单，快速，耐去污剂（最多5％）的检测蛋白质浓度的方法。
由于蛋白质能将Cu2+还原成Cu+；BCA可与Cu+结合生成紫蓝色复合物，在562nm 处有最大光吸光值，颜色的深浅与蛋白含量成正比，因此可根据吸光值测定蛋白质浓度。
二、试剂盒组分与配制:试剂名称规格保存要求备注试剂A液体25mL×1瓶4℃保存依据实验用量，临用前试剂A:B=50:1的比例混匀成反应mix试剂B液体0.5mL×1支4℃保存标准品液体1.5mL×1支4℃保存若重新做标曲，则用到该试剂三、所需的仪器和用品：酶标仪、96孔板、台式离心机、恒温水浴锅、移液器和蒸馏水。
四、蛋白含量测定：建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！1、样本制备：①组织样本：称取约0.1g组织，加入1mL提取液（提取液可选用酶提取缓冲液、蒸馏水、生理盐水）冰浴匀浆，12000rpm，4℃离心10min，取上清，即待测液。
【注】：依据研究经验，一般需将样本粗提液稀释到适当倍数再进行测定，如10倍。
实验前可以先选2个样本测定，摸索确定适合本次实验的稀释倍数。
②细菌或细胞样本：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取500万细菌或细胞加入1mL提取液；超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），12000rpm，4℃离心10min，取上清，即待测液。
【注】：依据研究经验，一般需将样本粗提液稀释到适当倍数再进行测定，如10倍。
实验前可以先选2个样本测定，摸索确定适合本次实验的稀释倍数。
③液体样本：澄清无色液体样品可以直接测定。
若浑浊，离心后取上清检测。
2、上机检测：①酶标仪预热30min，调节波长到562nm。
②反应mix置于60℃水浴预热30min（仅煮一次即可）。
BCA蛋白浓度测定-酶标仪法
BCA 法测定蛋白浓度-酶标仪一、药品1.BCA 蛋白浓度测定试剂盒（ P0012， 500 次酶标仪，碧云天），含以下成分：a)BCA 试剂 A （P0012-1， 100ml ，碧云天），室温保存b)BCA 试剂 B （ P0012-2， 3ml ，碧云天），室温保存c)蛋白标准（ 5mg/ml BSA ）（ P0012-3， 1ml ，碧云天）， -20 度保存二、仪器和试剂1.酶标仪（测定波长为 540-595nm之间， 562nm最佳），水浴锅2.96孔单条可拆酶标板（平底）3.15 ml 离心管 1个（准备 BCA 工作液用）4. 1.5 ml 离心管 1个（准备蛋白标准品工作液用）5.单道移液器和枪头， 8道移液器（排枪）和枪头6.PBS三、操作步骤1.水浴锅调至 37℃。
2.蛋白标准品工作液（ 1 mg/ml ）的配制：将蛋白标准品（5mg/ml ）从 -20℃冰箱中取出，完全溶解并混匀。
取60μl 蛋白标准品（ 5mg/ml ），加入 240μl PBS，即稀释 5倍，即配成蛋白标准品工作液（ 1 mg/ml ）。
3.计算 BCA 工作液总量 = 0.2 ml（×样本数 +8）×2×1.1（标准品和样本均需测复孔）。
BCA工作量按 50体积的 BCA 试剂 A 加上 1体积的 BCA 试剂 B配制（即50:1），需充分混匀。
BCA工作液室温 24小时内稳定。
样本数 (n)1~56~78~1011~1213~1415~1617~1920~2122~2324~26A （ ml）6789101112131415B（ ml）0.120.140.160.180.20.220.240.260.280.3总量 (ml) 6.127.148.169.1810.211.2212.2413.2614.2815.34.按下表配制 8 个蛋白标准液（ S0~S7），充分摇匀。
P0010S BCA蛋白浓度测定试剂盒_增强型_
包装清单：
产品编号 P0010S-1 P0010S-2 P0010S-3 P0010S-4
—
产品名称 BCA试剂 A BCA试剂 B 蛋白标准(BSA) 蛋白标准配制液
说明书
包装 40ml 1.2ml 20mg 1ml 1份
保存条件：
室温保存。蛋白标准配制成溶液后-20℃冻存。
注意事项：
¾ 需酶标仪一台，测定波长为540-595nm之间，562nm最佳。需96孔板。如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测 定，但测定时，需根据比色皿的最小检测体积，适当加大BCA工作液的用量使不小于最小检测体积，样品和标准品的用 量可相应按比例放大也可不变。使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
3. Zheng CH, Gao JQ, Zhang YP, Liang WQ. A protein delivery system: biodegradable alginate-chitosan-poly(lactic-co-glycolic acid) composite microspheres. Biochem Biophys Res Commun. 2004 Oct 29;323(4):1321-7.
15.Wu ZQ, Li M, Chen J, Chi ZQ, Liu JG. Involvement of cAMP/cAMP-dependent protein kinase signaling pathway in regulation of Na+,K+-ATPase upon activation of opioid receptors by morphine. Mol Pharmacol. 2006 Mar;69(3):866-76.
P0010 BCA蛋白浓度测定试剂盒_增强型_
使用本产品的部分文献：
1. Liu MJ, Wang Z, Li HX, Wu RC, Liu YZ, Wu QY. Mitochondrial dysfunction as an early event in the process of apoptosis induced by woodfordin I in human leukemia K562 cells. Toxicol Appl Pharmacol. 2004 Jan 15;194(2):141-55.
9. Le-Feng Zhang, Shuang-Qing Peng, Sheng Wang. Influence of lead (Pb2+) on the reactions of in vitro cultured rat aorta to 5hydroxytryptamine. Toxicology Letters 159 (2005) 71–82.
12. Huang YY, Deng JY, Gu J, Zhang ZP, Maxwell A, Bi LJ, Chen YY, Zhou YF, Yu ZN, Zhang XE. The key DNA-binding residues in the C-terminal domain of Mycobacterium tuberculosis DNA gyrase A subunit (GyrA). Nucleic Acids Res. 2006;34(19):5650-9.
碧云天 BCA蛋白浓度测定试剂盒
BCA蛋白浓度测定试剂盒产品编号产品名称包装P0012 BCA蛋白浓度测定试剂盒 500次产品简介：¾BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成，实现了蛋白浓度测定的简单，高稳定性，高灵敏度和高兼容性。
¾灵敏度高，检测浓度下限达到25µg/ml，最小检测蛋白量达到0.5µg，待测样品体积为1-20µl。
¾在50-2000µg/ml浓度范围内有较好的线性关系。
¾BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20, 60, 80。
但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇低于1mM，β-巯基乙醇低于0.01%。
不适用BCA法时建议试用碧云天生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006)。
¾BCA蛋白浓度测定试剂盒对样品中各种物质的详细的兼容性，请参见碧云天如下网页:/Compatibility Chart For BCA Kit.pdf¾每个试剂盒可以检测500个样品。
包装清单：产品编号产品名称包装P0012-1 BCA试剂 A 100mlP0012-2 BCA试剂 B 3mlP0012-3 蛋白标准(5mg/ml BSA) 1ml—说明书1份保存条件：BCA试剂A和B室温保存，蛋白标准请-20℃冻存。
本试剂盒自订购之日起一年内有效。
注意事项：¾需酶标仪一台，测定波长为540-595nm之间，562nm最佳。
需96孔板。
如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但测定时，需根据比色皿的最小检测体积，适当加大BCA工作液的用量使不小于最小检测体积，样品和标准品的用量可相应按比例放大也可不变。
BCA蛋白定量试剂盒使用说明书
BCA蛋白定量试剂盒使用说明书一、产品简介BCA 蛋白定量试剂盒是一种常用的蛋白质浓度测定方法，具有操作简便、灵敏度高、准确性好等优点。
本试剂盒适用于细胞裂解液、组织匀浆、血清、血浆等多种样品中总蛋白浓度的定量测定。
二、试剂盒组成1、 BCA 工作液：A 液与 B 液按 50:1 的比例混合而成，现配现用。
2、蛋白标准品（2mg/ml）：牛血清白蛋白（BSA）溶液。
3、 96 孔板三、所需设备1、酶标仪（波长 562nm）2、移液器（量程分别为20μl、200μl、1000μl）3、涡旋振荡器4、离心机四、操作步骤1、标准曲线的绘制（1）将蛋白标准品（2mg/ml）用 PBS 或生理盐水稀释成一系列浓度梯度，如0μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml、600μg/ml、800μg/ml、1000μg/ml、1500μg/ml、2000μg/ml。
（2）在 96 孔板中，每个浓度梯度设置 2 个复孔。
分别向孔中加入25μl 不同浓度的标准品溶液。
（3）向每个孔中加入200μl BCA 工作液，轻轻振荡混匀，37℃孵育 30 分钟。
（4）使用酶标仪在 562nm 波长下测定吸光度值（OD 值）。
（5）以蛋白浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，绘制标准曲线。
2、样品测定（1）将待测样品用 PBS 或生理盐水适当稀释（若样品浓度过高，可能会超出标准曲线范围）。
（2）在 96 孔板中，设置样品孔和空白孔（仅加25μl 稀释液和200μl BCA 工作液）。
向样品孔中加入25μl 稀释后的样品。
（3）向每个孔中加入200μl BCA 工作液，轻轻振荡混匀，37℃孵育 30 分钟。
（4）使用酶标仪在 562nm 波长下测定样品孔和空白孔的吸光度值（OD 值）。
（5）样品的蛋白浓度可根据标准曲线计算得出。
五、注意事项1、 BCA 工作液应现配现用，避免长时间放置导致失效。
bca蛋白浓度测定试剂盒原理
bca蛋白浓度测定试剂盒原理BCA蛋白浓度测定试剂盒是用于测定蛋白质溶液浓度的一种常用试剂盒。
BCA（Bicinchoninic Acid）法是一种基于铜离子对蛋白质的氮原子的络合反应的方法，通过测定产生的蓝色化合物的吸光度来间接测定蛋白质的浓度。
BCA蛋白浓度测定试剂盒通常包含有BCA试剂、标准蛋白、含蛋白样品和试剂盐溶液等，下面将对BCA蛋白浓度测定试剂盒的原理进行详细描述。
首先，BCA法的原理基于铜离子（Cu2+）和蛋白质之间的络合反应。
BCA试剂中含有两个主要成分：bicinchoninic酸（BCA）和柠檬酸盐缓冲溶液。
此外，还添加有氢氧化钠溶液等试剂以调节反应条件。
当BCA试剂与蛋白质样品中的铜离子相结合时，形成紫红色螯合络合物。
螯合反应是在碱性条件下进行的，此时蛋白质中的四个以上的肽键和氨基酸残基中的部分功能团（特别是还原型氨基酸，如半胱氨酸、酪氨酸、组氨酸等）能参与到络合反应中。
然后，络合物吸收O.D. 562nm处的特定波长下，形成深浅不同的紫红色。
络合物的深度与蛋白质的浓度成正相关。
在进行测定前，需要校准光学密度计（尤其对于多样本测量或与先前的试验结果相比）。
然后，我们使用标准曲线法测定未知样品中的蛋白质浓度。
标准曲线由已知浓度的标准蛋白构建，通常是牛血清蛋白（BSA）。
首先，标准蛋白被稀释成一系列已知浓度的标准溶液。
然后，将标准溶液与BCA试剂反应，并记录吸光度。
这将为后续绘制标准曲线提供基础。
对于待测样品，我们需要将其稀释到适当的浓度范围内，并与BCA试剂反应。
然后，通过比较待测样品的吸光度与标准曲线上相应吸光度对照点，可以计算出待测样品中的蛋白质浓度。
总体来说，BCA蛋白浓度测定试剂盒的原理是基于蛋白质与BCA试剂中的铜离子的络合反应，并通过测定产生的紫红色络合物的吸光度来间接测定蛋白质的浓度。
测定前需要校准光学密度计，利用构建的标准曲线，可以计算待测样品中的蛋白质浓度。
bca蛋白浓度测定试剂盒原理
bca蛋白浓度测定试剂盒原理
BCA蛋白浓度测定试剂盒是一种常用于测定蛋白质浓度的试剂盒，原理主要基于蛋白质与试剂盒中的铜离子在碱性条件下形成紫色融合复合物。
试剂盒中的主要成分包括BCA试剂、BSA标准品和NaOH溶液。
具体操作步骤如下：
1. 准备待测蛋白样品和BSA标准品。
BSA标准品是已知浓度的蛋白质，可用于建立一个标准曲线。
待测蛋白样品和BSA 标准品需稀释至适宜的浓度范围。
2. 取一定量的待测蛋白样品和BSA标准品分别加入试管中。
3. 加入BCA试剂，BCA试剂中含有两个重要的成分：琼脂糖和胺基乙酸。
胺基乙酸能够稳定铜离子，而琼脂糖能够与蛋白质在碱性条件下形成紫色融合复合物。
4. 使用乙醇洗涤液洗涤玻璃坩埚，将洗净后的玻璃坩埚用于测定。
5. 加入NaOH溶液，NaOH溶液用于加强试剂与蛋白质之间的相互作用。
6. 将试管放入水浴中加热，使反应发生。
7. 反应完成后，测量吸光度。
BCA试剂与蛋白质形成的紫色产物在560 nm处具有吸光度。
8. 使用标准曲线计算待测蛋白样品的浓度。
总结：BCA蛋白浓度测定试剂盒的原理是利用蛋白质与试剂盒中的铜离子在碱性条件下形成紫色融合复合物，通过测量吸光度来计算蛋白质的浓度。
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BCA蛋白浓度测定试剂盒产品编号产品名称包装价格P0012 BCA蛋白浓度测定试剂盒500次258.00 元O 碧云天生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成，实现了蛋白浓度测定的简单，高稳定性，高灵敏度和高兼容性。
O 灵敏度高，检测浓度下限达到25微克/毫升，最小检测蛋白量达到0.5微克，待测样品体积为1-20微升。
O 在50-2000微克/毫升浓度范围内有较好的线性关系。
O BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween20, 60, 80。
但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇低于1mM，β-巯基乙醇低于1mM。
不适用BCA法时建议使用碧云天Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
O BCA蛋白浓度测定试剂盒对样品中各种物质详细的兼容性表，参见BCA蛋白浓度测定兼容性表。
O 每个试剂盒可以检测500个样品。
包装清单：BCA试剂A 100 mlBCA试剂B 3 ml蛋白标准（5mg/ml BSA） 1 ml说明书 1 份保存条件：BCA试剂A和B室温保存，蛋白标准请-20℃冻存。
本试剂盒自订购之日起一年注意事项：O 需酶标仪一台，测定波长为540-595nm之间，562nm最佳。
需96孔板。
如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但是测定蛋白浓度时，需根据测定吸光度的杯子的体积，按比例调整A液,B液和样品的体积。
使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
O 如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景，请试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
O 为了加快BCA法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热，但是切勿过热。
O EDTA浓度必需小于10mM，不兼容EGTA。
不适用BCA法时，请试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
BCA蛋白浓度测定试剂盒完整版
BCA蛋白浓度测定试剂盒说明23225蛋白质化验试剂盒：为500试管或5000微孔板的检测提供充足的试剂23227蛋白质化验试剂盒：为250试管或2500微孔板的检测提供充足的试剂试剂盒组分：BCA 试剂A，1000 mL (No. 23225产品中) 或500mL ( No. 23227产品中)，碳酸钠，碳酸氢钠，二喹啉甲酸，酒石酸钠溶于0.1 M氢氧化钠中。
BCA 试剂B , 25 mL, 包括4%硫酸铜一次性标准白蛋白, 2mg/ mL, 10 × 1 mL 安瓿, 包含2 mg/ mL牛血清白蛋白(BSA) 存在于0.9% 盐和0.05%叠氮化钠中。
储存：以上试剂保持在室温下储存和装运注意：如果试剂A 或试剂B 在低温下运输或长期储存时出现沉淀现象，可以通过缓慢加温或轻轻搅拌溶液使沉淀物溶解。
当试剂变色或确定微生物污染时请丢球试剂盒。
目录介绍 (1)准备标准试剂和工作试剂 (2)准备试管 (3)准备微型版 (3)故障检修 (4)有关美国热电其他产品 (5)附加信息 (5)参考文献 (6)介绍美国热电（Thermo）公司的BCA蛋白浓度测定试剂盒是基于二喹啉甲酸(BCA)通过比色检测和定量测定总蛋白的洗涤剂兼容配方。
该方法通过碱性介质中的一种蛋白结合了Cu2使其显著减少转变为Cu1 （缩二脲反应）。
用一种含二奎琳甲酸的试剂选择性的比色法高敏感的比色杯中的Cu1. 这种测定方法的紫色色反应产物是通过BCA的两个分子和亚铜离子螯合作用形成的。
这种水溶性复合物在562nm 处有强吸收峰。
在大的活性范围内(20-2000µg / mL）几乎同蛋白浓度增加呈线性关系。
BCA 法不是真正的终点的方法；也就是说，最终颜色继续发展。
孵化之后, 继续的颜色发展速度是足够慢以允许一起进行测定大量样本。
大分子结构的蛋白质,肽键的数量和存在的四个特定氨基酸(半胱氨酸,胱氨酸，色氨酸和酪氨酸)据说是与BCA形成颜色产物的原因。
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BCA蛋白浓度测定试剂盒产品编号产品名称包装P0012 BCA蛋白浓度测定试剂盒 500次产品简介：¾BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成，实现了蛋白浓度测定的简单，高稳定性，高灵敏度和高兼容性。
¾灵敏度高，检测浓度下限达到25µg/ml，最小检测蛋白量达到0.5µg，待测样品体积为1-20µl。
¾在50-2000µg/ml浓度范围内有较好的线性关系。
¾BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20, 60, 80。
但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇低于1mM，β-巯基乙醇低于0.01%。
不适用BCA法时建议试用碧云天生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006)。
¾BCA蛋白浓度测定试剂盒对样品中各种物质的详细的兼容性，请参见碧云天如下网页:/Compatibility Chart For BCA Kit.pdf¾每个试剂盒可以检测500个样品。
包装清单：产品编号产品名称包装P0012-1 BCA试剂 A 100mlP0012-2 BCA试剂 B 3mlP0012-3 蛋白标准(5mg/ml BSA) 1ml—说明书1份保存条件：BCA试剂A和B室温保存，蛋白标准请-20℃冻存。
本试剂盒自订购之日起一年内有效。
注意事项：¾需酶标仪一台，测定波长为540-595nm之间，562nm最佳。
需96孔板。
如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但测定时，需根据比色皿的最小检测体积，适当加大BCA工作液的用量使不小于最小检测体积，样品和标准品的用量可相应按比例放大也可不变。
使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
¾如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景，请试用碧云天生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006)。
¾为了加快BCA法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热，但是切勿过热。
¾EDTA浓度必须小于10mM，不兼容EGTA。
不适用BCA法时，请试用碧云天生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006)。
¾为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：1. 根据样品数量，按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B(50:1)配制适量BCA工作液，充分混匀。
BCA工作液室温24小时内稳定。
2.完全溶解蛋白标准品，取10µl稀释至100µl，使终浓度为0.5mg/ml。
蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。
但是为了简便起见，也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。
3.将标准品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20µl加到96孔板的标准品孔中，加用于稀释标准品的溶液补足到20µl。
4.加适当体积样品到96孔板的样品孔中，加用于稀释标准品的溶液到20µl。
5.各孔加入200µl BCA工作液，37℃放置30分钟。
注: 也可以室温放置2小时，或60℃放置30分钟。
BCA法测定蛋白浓度时，吸光度会随着时间的延长不断加深。
并且显色反应会因温度升高而加快。
如果浓度较低，适合在较高温度孵育，或延长孵育时间。
6.测定A562，540-595nm之间的波长也可接受。
根据标准曲线计算出蛋白浓度。
常见问题：1. 测定标准曲线时发现随着标准品浓度的增加吸光度或颜色没有明显变化。
可能的原因是样品中含有严重干扰BCA法测定蛋白浓度的物质，详细的BCA法的兼容性列表请参考碧云天如下网页: /Compatibility Chart For BCA Kit.pdf2.是否每次测定时都需要做标准曲线？建议每次测定时都做标准曲线。
因为BCA法测定时颜色会随着时间的延长不断加深，并且显色反应的速度和温度有关，所以除非精确控制显色反应的时间和温度，否则如需精确测定宜每次都做标准曲线。
使用本产品的文献：1. Liu MJ, Wang Z, Li HX, Wu RC, Liu YZ, Wu QY.Mitochondrial dysfunction as an early event in the process of apoptosis induced by woodfordin I in human leukemia K562 cells.Toxicol Appl Pharmacol. 2004 Jan 15;194(2):141-55.2. Wu RC, Chen DF, Liu MJ, Wang Z.Dual effects of cycloheximide on U937 apoptosis induced by its combination with VP-16.Biol Pharm Bull. 2004 Jul;27(7):1075-80.3. Zheng CH, Gao JQ, Zhang YP, Liang WQ.A protein delivery system: biodegradable alginate-chitosan-poly(lactic-co-glycolic acid) composite microspheres.Biochem Biophys Res Commun. 2004 Oct 29;323(4):1321-7.4. R.-C. Wu, Z. Wang, M.-J. Liu, D.-F. Chen and X.-S. Yue.β2-integrins mediate a novel form ofchemoresistance in cycloheximide-induced U937 apoptosis.Cell. Mol. Life Sci. 2004,61(16):2071–2082.5. 刘军丁劲薛采芳李英辉宫卫东赵亚黄豫晓。
带有蛋白转导域的靶向核糖核酸酶对乙型肝炎病毒复制的影响。
中华肝脏病杂志2004年第6期第377页。
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