dna粗提取的实验步骤
《DNA 的粗提取及鉴定》 讲义
《DNA 的粗提取及鉴定》讲义一、引言DNA 作为生命的遗传物质，承载着生物体的遗传信息。
对 DNA 的研究有助于我们深入了解生命的奥秘、疾病的发生机制以及进行法医学鉴定等。
DNA 的粗提取及鉴定是分子生物学中的基础实验技术，下面我们就来详细了解一下。
二、实验目的1、了解 DNA 粗提取的原理和方法。
2、学习 DNA 的鉴定方法。
三、实验原理1、 DNA 在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同在014mol/L 的氯化钠溶液中，DNA 的溶解度最低。
利用这一特点，可以使 DNA 从细胞中析出。
2、 DNA 不溶于酒精溶液但细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，从而可以将 DNA 与蛋白质进一步分离。
3、 DNA 遇二苯胺会呈现蓝色这一特性可用于鉴定 DNA。
四、实验材料和用具1、材料新鲜的鸡血细胞液（也可以使用菜花、洋葱等材料）2、用具研钵、烧杯、玻璃棒、漏斗、纱布、试管、量筒、体积分数为 95%的酒精溶液、2mol/L 的氯化钠溶液、0015mol/L 的氯化钠溶液、二苯胺试剂等。
五、实验步骤1、制备鸡血细胞液将新鲜的鸡血加入抗凝剂，离心或静置沉淀，除去上清液，得到鸡血细胞液。
2、破碎细胞，释放 DNA取 20mL 鸡血细胞液倒入烧杯中，加蒸馏水到 100mL，搅拌均匀。
然后向鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使鸡血细胞破裂，释放出 DNA。
3、去除杂质（1）过滤用纱布过滤含 DNA 的溶液，取滤液。
（2）去除核蛋白向滤液中加入 2mol/L 的氯化钠溶液 40mL，搅拌 1min，使核蛋白充分溶解。
然后缓慢加入蒸馏水，同时轻轻搅拌，直至溶液中氯化钠浓度达到 014mol/L，此时 DNA 会析出，用多层纱布过滤，取纱布上的黏稠物。
4、 DNA 的进一步提纯将上述黏稠物放入 20mL 体积分数为 95%的酒精溶液中，搅拌，使DNA 沉淀。
然后用玻璃棒卷起沉淀，放入试管中。
5、 DNA 的鉴定（1）向两支试管中分别加入 2mol/L 的氯化钠溶液 5mL。
实验九DNA的粗提取与鉴定
【实验九】DNA的粗提取与鉴定陈小珺（江西省赣州市第三中学341000）1 教学建议在本实验的教学中，教师应注意以下几点。
1.1 实验材料必须准备充足。
本实验所用的实验材料是鸡血细胞液,由活鸡的鲜血经沉淀后获得。
每组(2个学生)需用5 mL 鸡血细胞液,则每班(50人)至少需要130 mL,而鸡血细胞液与鸡血的体积比为1:3,这样每班至少需要390 mL 鸡血细胞液。
宰杀1只中等大小的活鸡,一般可得120 mL 左右的鲜血,因此,1个班实验需要买4只活鸡。
也可以到市场售活鸡处去索取鸡血,但所带烧杯中必须提前放入抗凝剂。
（每100ml鸡血加入3g柠檬酸钠）1.2 盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。
因为鸡血细胞破碎后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少。
1.3 获取较纯净的DNA的关键步骤。
1.3.1 充分搅拌鸡血细胞液：将鸡血细胞液与蒸馏水混合以后,必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌,使鸡血细胞加速破裂,并释放出DNA。
1.3.2沉淀DNA时必须用冷酒精：体积分数为95%的酒精在冰箱中至少存放24 h。
1.3.3正确搅拌含有悬浮物的溶液实验步骤3、5、7,都需要用玻璃棒搅拌。
教师应提醒学生注意,在进行步骤3、5时,玻璃棒不要直插烧杯底部,而且搅拌要轻缓,以便获得较完整的DNA 分子。
进行步骤7时,要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间,用手缓慢转动5 min。
2 实验原理的补充介绍2.1 DNA的释放本实验用鸡血细胞做实验材料有两个原因。
一是因为鸡血细胞核的DNA 含量丰富，材料易得；二是鸡血细胞极易吸水胀破。
DNA位于鸡血细胞的细胞核中,正常情况下不会释放出来。
为了使DNA从细胞核中释放出来,实验中采用了向鸡血细胞液中加入蒸馏水并且搅拌的方法。
蒸馏水对于鸡血细胞来说,是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞破裂。
高中生物实验—DNA的粗提取和鉴定
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3、方法与过程
1).制鸡血细胞液
0.1g/mL柠檬酸钠100mL 500mL烧杯中，玻棒搅拌， 离心或静置沉淀。 活鸡鲜血180mL
血浆
血细胞 离心或静置后去掉上清液
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关于DNA粗提取的实验材料的选择，也经过了多次实验结果的比较， 最终选择鸡血做实验材料的原因是什么？请回答下列问题： （1）鸡血中红细胞 含有完整的、成形的细胞核，家鸡属于鸟类， 新陈代谢旺盛，因而血液中 红 细胞数目较多，可以提供丰富的 DNA量，所以一般采用鸡血 （2）实验前由老师制备鸡血细胞液供同学们做实验材料，而不用 鸡全血，主要原因是 鸡的全血包括血浆和血细胞，血浆中无DNA， 全血中除掉血浆后就是浓缩的血细胞液，DNA的相对含量提高了。
）
DNA在不同浓度的NaCl 溶液中的溶解度不同 溶于NaCl ，在0.14 mol/L的 溶液中并 NaCl溶液中的溶解度 稀释 最低
DNA不被蛋白酶所水解 加入嫩肉粉 嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白质（酶的专一性
DNA耐高温
DNA不溶于酒精溶液
高温
DNA和蛋白质对高温耐受性不同：蛋白质、DNA 热稳定性不同。大多数蛋白质不能忍受60～ 80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。
2)实验方法步骤：
提取细胞核物质： 利用细胞吸水破裂，细胞核内物质释放出来，后用纱布过滤取其滤液。 血细胞在蒸馏水中易吸水而导致细胞膜和核膜的破裂，据此可得出含核DNA的溶液。
溶解核内DNA：在滤液中加2mol/L的NaCl溶液并搅拌，使染色质中DNA 与蛋白质分离，DNA充分溶解，过滤(除杂质)
8 用二苯胺须加热。用甲基绿不用水浴加热。 洋葱的鳞片叶表皮细胞
9
注
意
DNA的粗提取与鉴定
DNA的粗提取与鉴定（一）实验原理鸟类血液中红细胞有细胞核，细胞核内DNA与蛋白质结合成染色质。
利用DNA在0.14mol/L的氯化钠溶液中溶解度最低，而蛋白质此时的溶解度高的特点，可以使DNA与蛋白质分离，形成沉淀析出，通过过滤，得到粗提取的滤出物DNA。
再利用DNA不溶于酒精，但细胞中的其他物质可溶于酒精的特点，进一步提取出含杂质较少的DNA。
利用DNA遇二苯胺（沸水浴）成蓝色的特性，可以鉴定提取的DNA。
（二）实验材料（以鸡血为例）鸡血细胞液：先配备10%的柠檬酸钠溶液，按180mL新鲜鸡血混合100mL10%柠檬酸钠溶液的比例，立即将血液与柠檬酸钠充分混合，同时用玻璃棒搅拌以免凝血。
然后，用离心机以2000转/min的速度离心4min后，用吸管除去离心管上清液，就可获得所需的鸡血细胞悬液。
每组大约需要5—10mL鸡血细胞悬液。
如果无离心机，可将与柠檬酸钠充分混合的血液置于冰箱内，静置一天，使血细胞自行沉淀后，也可获得所需的鸡血细胞悬液。
（三）试剂与仪器1、2mol/L的NaCl溶液称取117g的NaCl，加蒸馏水至1000mL，使之完全溶解，即可获得2mol/L 的NaCl，须按此配方配备大量的2mol/L 的NaCl。
2、二苯胺试剂A液——1.5g二苯胺溶于100mL冰醋酸中，再加1.5mL浓硫酸，用棕色瓶保存。
B液——体积分数为0.2%的乙醛溶液。
实验前，将0.1mL的B液加入到10mL的A液中，现配现用。
3、0.015mol/L的NaCl溶液称取0.88g氯化钠加蒸馏水至1000mL，使之完全溶解。
4、塑料杯和试管DNA易吸附在玻璃器皿上，用塑料杯和试管可减少提取过程中DNA的损失。
（四）实验方法与步骤1、提取细胞核物质取5—10mL鸡血细胞悬液入烧杯中，加蒸馏水20mL，同时，用玻璃棒沿一个方向快速充分搅拌，使血细胞过度吸水破裂，细胞核内物质释放出来，然后用纱布过滤取其滤液。
2、溶解核内的DNA在滤液中加入2mol/L的NaCl40mL，并用玻璃棒沿一个方向搅拌1min，核中DNA游离并充分溶解，染色质中的DNA和蛋白质分离。
dna粗提取步骤
DNA粗提取步骤一、目的要求本实验旨在使学生掌握DNA粗提取的基本原理和操作步骤，了解DNA的物理、化学性质以及其在生物科学研究中的应用。
通过实验，要求学生能够独立完成DNA的粗提取，并对实验结果进行分析和解释。
二、实验原理DNA粗提取的原理基于DNA在不同物理和化学环境中的稳定性。
在一定浓度的盐溶液和适当的温度条件下，DNA的溶解度会发生变化，从而实现DNA 的分离和提取。
本实验采用盐析法进行DNA粗提取，具体操作步骤如下：1.细胞破碎：通过物理或化学方法破碎细胞，释放出细胞内的DNA。
常用的破碎方法包括机械破碎（如研磨、匀浆等）、化学破碎（如用酸、碱或酶处理）和冷冻破碎等。
2.去除杂质：通过离心、过滤等方法去除细胞碎片、蛋白质和其他杂质，使DNA充分溶解在溶液中。
3.调节盐浓度：通过调节盐浓度，使DNA在盐溶液中的溶解度发生变化，从而实现DNA的分离和提取。
常用的盐溶液包括氯化钠、氯化钾、氯化钙等。
4.沉淀DNA：通过降低pH值、加入乙醇或异丙醇等方法，使DNA从溶液中沉淀析出。
5.洗涤与干燥：用70%乙醇或无水乙醇洗涤DNA沉淀，去除残留的盐分和杂质，然后干燥得到粗提取的DNA。
三、实验步骤1.准备实验材料与试剂（1）实验材料：鸡血细胞；（2）试剂：氯化钠、柠檬酸钠、蒸馏水、95%乙醇、70%乙醇；（3）仪器与器皿：离心管、离心机、滴管、玻璃棒、烧杯。
2.操作步骤（1）制备鸡血细胞溶液：取适量鸡血细胞，加入等体积的柠檬酸钠溶液，混合均匀后离心，去除上清液，得到鸡血细胞沉淀。
（2）破碎细胞：将鸡血细胞沉淀重新悬浮于适量蒸馏水中，加入适量的玻璃珠或石英砂，搅拌破碎细胞。
也可以采用匀浆、超声破碎等方法破碎细胞。
（3）去除杂质：将破碎后的溶液离心，去除上清液，得到的沉淀物为富含DNA的细胞碎片。
可以进一步用蒸馏水冲洗沉淀物，去除残留的蛋白质和其他杂质。
（4）调节盐浓度：向沉淀物中加入适量的氯化钠溶液，搅拌均匀，使DNA充分溶解在盐溶液中。
DNA粗提取与鉴定
DNA的粗提取与鉴定1．基本原理2．操作过程(1)操作流程选取材料→破碎细胞，获取含DNA的滤液→去除滤液中的杂质→DNA的析出与鉴定。
(2)材料的选取：选用DNA含量相对较高的生物组织。
(3)破碎细胞①动物细胞：易破碎，可通过吸水破裂。
②植物细胞：加入洗涤剂、食盐后研磨。
(4)除去杂质的方法方法一：利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同，通过调节NaCl溶液的浓度除去溶于和不溶于NaCl溶液中的杂质。
方法二：利用DNA对酶的耐受性，直接在滤液中加入嫩肉粉，反应10～15 min，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质，而不会破坏DNA。
方法三：利用DNA对高温的耐受性，将滤液放在60～75 ℃的恒温水浴箱中保温10～15 min，使蛋白质变性沉淀而DNA分子还未变性。
(5)DNA的析出：向处理后的滤液中加入与滤液体积相等的、冷却的酒精溶液(体积分数为95%)，静置2～3 min，溶液中会出现白色丝状物，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸去上面的水分。
(6)DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
易错警示(1)本实验不能用哺乳动物成熟红细胞作实验材料，原因是哺乳动物成熟红细胞无细胞核。
可选用鸡血细胞作材料。
(2)实验中两次使用蒸馏水，第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA，第二次的目的是稀释NaCl溶液，使DNA从溶液中析出。
1．下图表示以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序，请分析回答下列问题：(1)步骤一中，向鸡血细胞液中加入____________并搅拌，可使鸡血细胞破裂。
(2)步骤二中，过滤后收集含有DNA的____________。
(3)步骤三、四的操作原理是________________________________________________________________________________________________________________________；步骤四中，通过向溶液中加入____________调节NaCl溶液的物质的量浓度至____________mol/L时，DNA将会析出，过滤去除溶液中的杂质。
DNA的粗提取与鉴定
4.DNA的再溶解。 用高浓度（2mol/L）的氯化钠溶液再溶解DNA粘稠物。 5.DNA的沉淀和浓缩。 对于除去了蛋白质的DNA的氯化钠溶液，必须再进 一步沉淀和浓缩，常用酒精沉淀法。即往含有Na＋的 DNA溶液，加入体积分数为95%的冷却酒精，混匀后可 以使DNA沉淀、浓缩，形成含杂质较少的DNA丝状物， 悬浮于溶液中。若丝状物较少，可将混合液再放入冰 箱中冷却几分钟即可。浓缩后的DNA丝状物可以用玻棒 （玻棒有吸附DNA的作用）缓缓旋转的方法卷起。 6.DNA的鉴定。 100℃ DNA＋二苯胺 蓝色物 鉴定时蓝色的深浅与溶液中DNA的含量多少有关。
二、方法与过程
1.制鸡血细胞液
0.1g/mL柠檬酸钠100mL 500mL烧杯中，玻棒搅拌， 离心、分离或静置沉淀。 活鸡鲜血180mL 2.提取DNA ⑴.提取细胞的核物质： ①取鸡血细胞液5-10mL＋20mL蒸馏水，用玻棒沿一个 方向快速搅拌。 ②纱布过滤：滤液中含DNA和其他核物质，如蛋白质。 ③原理：血细胞的细胞膜、核膜吸水胀破，玻璃棒快速 搅拌，加速细胞破裂。 ⑵.溶解核内的DNA： 滤液＋2mol/L的NaCl溶液40mL，玻棒沿一个方向 轻缓搅拌，使DNA充分溶解。
DNA的粗提取与鉴定
一、实验原理 1.血细胞在蒸馏水中因渗透吸水过度而导致细胞膜和细 胞核膜的破裂。利用此特性可得到含有DNA的溶液。 2.DNA在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠的浓度 的变化而改变的。DNA在物质的量浓度为0.14 mol／L 的氯化钠溶液中的溶解度最低，利用这一原理，可以使 溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。 3.DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质则可以溶 于酒精。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少 的DNA。 4.DNA遇二苯胺（沸水浴）会变成蓝色，因此，二苯胺 可以作为鉴定DNA的试剂。
实验05DNA的粗提取与鉴定
专题05DNA 的粗提取与鉴定一、实验原理1．提取DNA的原理利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。
如：(1)DNA在酒精溶液中的溶解性：DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精。
(2)DNA在NaCl溶液中的溶解性：DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，它能溶于2 mol/L 的NaCl溶液。
2．鉴定DNA的原理在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色。
二、方法步骤1．称取约30 g洋葱，切碎，然后放入研钵中，倒入10 mL研磨液，充分研磨。
2．去除滤液中的杂质方案一在漏斗中垫上纱布，将洋葱研磨液过滤到烧杯中，在4 ℃冰箱中放置几分钟后，再取上清液方案二直接将研磨液倒入塑料离心管中，在1 500 r/min的转速下离心5 min，再取上清液3．DNA方案一在上清液中加入体积相等的、预冷的酒精溶液(体积分数为95%)，静置2～3 min，溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA；用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸去上面的水分方案二将溶液倒入塑料离心管中，在10 000 r/min的转速下离心5 min，弃上清液，将管底的沉淀物(粗提取的DNA)晾干4.DNA取两支20 mL的试管，各加入2 mol/L的NaCl溶液5 mL。
将丝状物或沉淀物溶于其中一支试管的NaCl溶液中，再向两支试管中各加入4 mL的二苯胺试剂。
混合均匀后，将试管置于沸水中加热5 min，待试管冷却后，比较两支试管中溶液颜色的变化。
三、操作提示1．以血液为实验材料时，每100 mL血液中需要加入3 g柠檬酸钠，防止血液凝固。
2．加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。
四、关键点拨1．利用动物细胞提取DNA时，破碎细胞的方法：动物细胞无细胞壁，可直接使其吸水涨破。
2．不能选用哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料，原因是哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。
选择性必修3 第10单元 微专题 DNA的粗提取与鉴定、DNA片段的扩增及电泳鉴定
解析：电泳是指带电分子在电场的作用下发生迁移的过程，A正 确；限制酶SalⅠ有三处切割位点，切割后产生4个DNA片段，因此泳道 ①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物，B错误；限制酶SalⅠ有三处切割 位点，切割后产生4个DNA片段，限制酶XhoⅠ有2处切割位点，切割后 产生3个DNA片段，结合题图可知，若用XhoⅠ和SalⅠ两种酶同时处理 该DNA片段后电泳，可能存在相同长度的DNA片段，其泳道可能有5 条，C正确；不同生物的DNA切割后长度不同，切割后再进行电泳，可 以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定，D正确。
1 ． (2019·江 苏 卷 ) 下 列 关 于 DNA 粗 提 取 与 鉴 定 的 叙 述 ， 错 误 的 是
( A) A．用同样方法从等体积兔血和鸡血中提取的DNA量相近 B．DNA析出过程中，搅拌操作要轻柔以防DNA断裂 C．预冷的酒精可用来进一步纯化粗提的DNA D．用二苯胺试剂鉴定DNA需要进行水浴加热
第三步：取6支试管，分别加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮
状物。
DNA检测：在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂，混合均匀后，
置于沸水中加热5 min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下
表。
材料保存温度 花菜 辣椒 蒜黄
20 ℃
＋＋ ＋ ＋＋＋
－20 ℃ ＋＋＋ ＋＋ ＋＋＋＋
(注：“＋”越多表示蓝色越深)
分析上述实验过程，回答下列问题： (1)该探究性实验课题名称是_探__究__不__同__材__料__和__不__同__保__存__温__度__对__D__N_A__ _提__取__量__的__影__响______。 (2)第二步中“缓缓地”搅拌，这是为了减少___D_N_A__断__裂______。 (3)根据实验结果，得出结论并分析。 ①结论1：与20 ℃相比，相同实验材料在－20 ℃条件下保存，DNA 的提取量较多。 结论2：_等__质__量__的__不__同__实__验__材__料__，__在__相__同__的__保__存__温__度__下__，__从__蒜__黄__提__ _取__的__D_N__A_量__最__多__________________________________。
dna的粗提取与鉴定
dna的粗提取与鉴定dna的粗提取与鉴定实验十一 DNA的粗提取与鉴定教学目的1、初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法2、观察提取出来的DNA物质实验原理1、DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。
当NaCl的物质的量浓度为0.14mOl/L时,DNA的溶解度最低。
利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
2、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。
利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
3、DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
注意事项1、步骤3析出含DNA的黏稠物中，蒸馏水要沿烧杯内壁缓缓加入，不能一次快速倒入。
2、实验中有多个步骤都要用玻璃棒进行搅拌，但是在不同的步骤中玻璃棒的用法不同。
实验用具鸡血细胞液(5～10mL);体积分数为XX%的冷酒精，蒸馏水，质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液，物质的量浓度分别为2mol/L和0.015mol/L的NaCl溶液，二苯胺试剂;烧杯(100mL，1个，50mL， 500mL，各2个)，漏斗，试管(20mL，2个)，玻璃棒，滴管，量筒(100mL，1个)，纱布，镊子，滤纸，铁架台，铁环，三角架，酒精灯，石棉网，载玻片，试管夹。
课时安排一课时课前准备制备鸡血细胞液，方法是：将质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液100mL，置于500mL烧怀中，注入新鲜的鸡血(约180mL)，用玻璃棒搅拌，使其充分混合，以免凝血。
静置于冰箱内一天，使血细胞自行沉淀。
也可以用离心机离心2 min(转速1000转/分)。
用吸管吸去上清液。
板书实验十一 DNA的粗提取与鉴定实验原理1、析出溶解在NaC1溶液中的DNA。
2、用冷酒精提取出含杂质较少的DNA。
3、DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。
方法步骤：1、提取鸡血细胞的细胞核物质：顺时针方向搅拌，稍快，稍重。
5 min2、溶解细胞核内的DNA3、析出含DNA的黏稠物：蒸馏水300mL，逆时针方向搅拌，缓慢4、过滤：取黏稠物5、再溶解：顺时针方向搅拌，较慢。
dna粗提取方法
dna粗提取方法DNA粗提取方法DNA（脱氧核糖核酸）是构成生物体的基因遗传物质，对于研究基因组学、进化学以及疾病诊断等方面具有重要意义。
DNA粗提取是从生物样本中提取出DNA的一种常用方法，本文将介绍DNA粗提取的步骤和相关注意事项。
一、实验前的准备工作在进行DNA粗提取前，需要准备以下实验材料：1. 细胞样本：可以是人体组织、细菌、植物组织等；2. 细胞裂解液：包括裂解液缓冲液和蛋白酶K等；3. 蛋白沉淀剂：如氯化钠、聚乙二醇等；4. 离心管、离心机、超声波仪等实验设备。
二、DNA粗提取步骤1. 细胞裂解：将细胞样本加入细胞裂解液中，通过机械或化学方法使细胞壁破裂，释放出细胞内的DNA。
2. 蛋白沉淀：加入蛋白沉淀剂，与DNA结合的蛋白质会沉淀到底部，形成蛋白质沉淀物。
3. DNA沉淀：将上述混合液离心，离心后，DNA会沉淀到离心管的底部形成DNA沉淀物。
4. 洗涤：将DNA沉淀物用乙醇洗涤，去除杂质。
5. 干燥：将洗涤后的DNA沉淀物在通风处晾干，使其变为干燥的DNA固体。
三、注意事项1. 实验操作过程中应注意无菌操作，避免外源性DNA的污染。
2. 细胞裂解液的选择应根据具体实验目的进行优化，以获得高质量的DNA。
3. 实验过程中应控制温度，避免DNA的降解。
4. 保存提取得到的DNA时，应避免阳光直射，存放在低温干燥的环境中，以防止其降解。
5. 实验操作中应注意个人安全，避免接触有毒物质和腐蚀性液体。
DNA粗提取方法是提取DNA的常用方法之一，它能够快速、高效地从生物样本中提取出DNA，为后续的分子生物学研究提供了重要的基础。
然而，需要注意的是，DNA粗提取方法提取得到的DNA质量较低，适用于一些对DNA纯度要求不高的实验，如PCR反应等。
对于一些对DNA质量要求较高的实验，如测序、限制性酶切等，需要使用更为精细的DNA提取方法。
DNA粗提取是一种常用的DNA提取方法，通过简单的步骤可以从生物样本中提取出DNA。
dna粗提取与鉴定实验步骤
dna粗提取与鉴定实验步骤一、一周知识概述。
1、实验：DNA的粗提取与鉴定的实验目的、实验原理；2、实验：DNA的粗提取与鉴定的实验方法与步骤；3、实验过程中的注意事项。
二、学习重难点。
1、该实验的实验原理。
2、该实验的实验方法和步骤。
三、重难点精析。
（一）实验目的：1、了解生物组织中DNA的存在部位和形式。
2、初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法。
3、观察提取出来的DNA物质。
（二）实验原理：鸟类血液中红细胞有细胞核，细胞核内DNA与蛋白质结合成染色质。
利用DNA在0.14mol/L的氯化钠溶液中溶解度最低，而蛋白质此时的溶解度高的特点，可以使DNA与蛋白质分离，形成沉淀析出，通过过滤，得到粗提取的滤出物DNA。
再利用DNA不溶于酒精，但细胞中的其他物质可溶于酒精的特点，进一步提取出含杂质较少的DNA。
利用DNA遇二苯胺（沸水浴）成蓝色的特性，可以鉴定提取的DNA。
（三）实验材料：鸡血细胞液：先配备10%的柠檬酸钠溶液，按180mL新鲜鸡血混合100mL10%柠檬酸钠溶液的比例，立即将血液与柠檬酸钠充分混合，同时用玻璃棒搅拌以免凝血。
然后，用离心机以2000转/min的速度离心4min后，用吸管除去离心管上清液，就可获得所需的鸡血细胞悬液。
每组大约需要5—10mL鸡血细胞悬液。
如果无离心机，可将与柠檬酸钠充分混合的血液置于冰箱内，静置一天，使血细胞自行沉淀后，也可获得所需的鸡血细胞悬液。
（四）试剂与仪器：1、2mol/L的NaCl溶液。
称取117g的NaCl，加蒸馏水至1000mL，使之完全溶解，即可获得2mol/L 的NaCl，须按此配方配备大量的2mol/L的NaCl。
2、二苯胺试剂。
A液——1.5g二苯胺溶于100mL冰醋酸中，再加1.5mL浓硫酸，用棕色瓶保存。
B液——体积分数为0.2%的乙醛溶液。
实验前，将0.1mL的B液加入到10mL的A液中，现配现用。
3、0.015mol/L的NaCl溶液。
dna的粗提取方法
dna的粗提取方法DNA的粗提取方法DNA是生物体内最基本的遗传物质，对于研究生物学、医学等领域具有重要意义。
因此，DNA的提取方法也成为了科学研究中的一项重要技术。
下面将介绍一种简单易行的DNA粗提取方法。
材料准备1. 10% SDS溶液：称取10克SDS加入100毫升去离子水中，混合均匀后加热至70℃左右，搅拌至SDS完全溶解即可。
2. 0.5M EDTA溶液：称取186.1克EDTA加入500毫升去离子水中，调节pH至8.0。
3. 1M Tris-HCl缓冲液：称取121.14克Tris-HCl加入1000毫升去离子水中，调节pH至8.0。
4. NaCl溶液：称取58.44克NaCl加入1000毫升去离子水中，搅拌均匀后过滤灭菌。
5. 蛋白酶K：用去离子水将蛋白酶K稀释至10mg/ml浓度。
6. 高锰酸钾：用去离子水将高锰酸钾稀释至0.1%浓度。
7. 95%乙醇：用去离子水将95%乙醇稀释至70%浓度。
8. 细胞样品：可以是动物组织、细菌、真菌等样品。
步骤步骤一：制备细胞裂解液1. 取适量的细胞样品，用PBS缓冲液洗涤3次，去除细胞外的杂质。
2. 向含有10% SDS的裂解液中加入适量的蛋白酶K，搅拌均匀后在60℃水浴中孵育2小时。
3. 将孵育后的裂解液加入相同体积的高锰酸钾溶液中，搅拌均匀后再加入相同体积的4M NaCl溶液中，轻轻摇晃混合即可。
步骤二：沉淀DNA1. 将上述混合溶液离心10分钟，收集上清液至新离心管中。
2. 向上清液中滴加等体积的冷乙醇（70%），轻轻摇晃后放置于-20℃冷冻库中保存至少30分钟以上。
3. 将离心管取出，离心10分钟，倒掉上清液，将沉淀用无菌去离子水洗涤3次。
步骤三：纯化DNA1. 将沉淀加入含有0.5M EDTA的去离子水中，搅拌均匀后放置于60℃水浴中孵育30分钟。
2. 在孵育过程中，制备1M Tris-HCl缓冲液，并调节pH至8.0。
3. 孵育结束后，向上述溶液中加入相同体积的1M Tris-HCl缓冲液，轻轻摇晃混合均匀。
实验九DNA的粗提取与鉴定原理DNA在0.14molLnaCl中溶解度最解读
[例：某种鼠的种群密度调查]
方法：标志重捕法
过程：捕捉一部分个体，标记、计数（P）后放回原环 境；
一段时间后进行重捕，计数总捕获数（N1）和重捕中 标记个体数（P1）。 求种群数量（N）： N：P== N1：P1
• [说明]：应尽量防止种群内有迁入或迁出的个体。
洪泽外国语中学：生物组
将两条细铁丝的末端分别拴到另一个塑料框一侧的 两端。
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实验十一：性状分离比的模拟实验
取甲、乙两个小桶，每桶中各放两色小球10只 [分别标上D和d ]
1、摇匀两只小桶 2、随机各抓取1球[相当于两配子结合成合子] 3、统计后将小球放回原桶
重复50—100次 4、填写实验报告 5、计算各组合比例[DD：Dd：dd=？]
洪泽外国语中学：生物组
研究性课题：调查人群中的遗传病
（１）计算遗传病的发病率 （２）调查一对相对性状中的显隐性 （３）调查一种遗传病是常染色体遗传还是伴性遗
某遗传病的患病人数
某遗传病的发病率＝—————————— ＊１００％
某遗传病的被调查人数
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实习3：种群密度的取样调查
原理：样方法（样方是指从研究对象的总体中抽取出 来的个体的集合）—在被调查种群的生存环境内， 随机选取若干个样方，以所有样方种群密度的平均 值作为该种群的种群密度。
加入到溶解有DNA 的NaCl中
加入到过滤后DNA 的NaCl中
析出DNA丝状物
产生特定的颜 色反应
洪泽外国语中学：生物组
实验十：制作DNA双螺旋结构模型 实验原理： DNA分子具有特殊的空间结构：规则的双螺旋结构 1、 DNA分子由两条反向平行脱氧核苷酸链盘旋
dna粗提取的原理
dna粗提取的原理DNA粗提取是一项重要的实验技术，它可以帮助科学家们获取DNA 样本中的大量DNA分子。
这项技术的原理是通过一系列化学和物理方法将DNA样本中的细胞壁、蛋白质和其他杂质去除，从而纯化出大量的DNA分子。
DNA粗提取的过程可以分为以下几个步骤。
首先，需要将DNA样本进行破碎，使DNA分子变得更加容易提取。
这可以通过机械方法（如超声波或搅拌）或化学方法（如酶处理）来实现。
接下来，通过加入缓冲液和试剂，可以使DNA分子与其他组分分离开来。
这些试剂可以破坏细胞壁、溶解蛋白质和其他有机物质，从而使DNA分子完全暴露出来。
在DNA分子纯化的过程中，可以通过离心的方式将DNA分子从其他组分中分离出来。
离心是一种利用离心力将混合物中的成分分离的技术，通过调整离心力和离心时间，可以将DNA分子从其他组分中沉淀下来。
然后，通过去除上清液中的其他杂质，可以得到纯净的DNA分子。
DNA粗提取的关键在于选择合适的试剂和缓冲液。
试剂和缓冲液的选择应根据不同的样本类型和实验目的来确定。
一般来说，缓冲液应具有适当的pH值和离子浓度，以维持DNA分子的稳定性。
试剂可以包括蛋白酶、盐酸、EDTA等，用于去除细胞壁、蛋白质和其他有机物质。
DNA粗提取的过程中还需要注意一些技术细节。
例如，操作过程中应保持无菌条件，以避免细菌或其他污染物的污染。
此外，应注意使用适当的离心力和时间，以确保DNA分子能够完全沉淀下来。
在提取过程中，还应避免过度破坏DNA分子，以免影响后续实验的进行。
DNA粗提取是获取DNA样本中大量DNA分子的重要步骤。
它为后续的DNA分析提供了可靠的基础。
通过合理选择试剂和缓冲液，并注意操作细节，可以获得高质量的DNA样本。
这项技术的广泛应用为生物医学研究、犯罪侦查和基因工程等领域提供了强大的支持。
DNA的粗提取与鉴定好实验流程图
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
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2mol/L
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
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鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
5、过滤→取纱布上的滤物 纱布过滤
6、再次溶解DNA
取滤物
2mol/LNaCl溶液
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鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
选择适宜材料
破碎细胞
DNA的纯化
DNA的溶解和析出
与二苯胺混合，沸水浴，呈现蓝色反应
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1. 下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是
A．氯化钠的浓度越低，对DNA的溶解度越大
B．人血也可代替鸡血进行实验
C．柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂
D．DNA不能溶于酒精
2. 在破碎鸡血细胞时，要先加入20ml的蒸馏水，其作用是
7、加冷酒精使DNA析出（纯化） 冷酒精
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DNA的鉴定
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总结：
实验原理
DNA
的
粗
提
取
DNA粗提取
与
鉴
定
鉴定DNA
DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同 DNA与其他细胞成分在酒精中溶解度不同 DNA和蛋白质对酶、高温和洗涤剂耐受性不同 DNA与二苯胺呈现蓝色反应
A. DNA溶解于水
B． 血细胞破裂，DNA释放
C．稀释血液，防止凝固
D． 有利于搅拌
3. 若选择的实验材料为植物细胞，破碎细胞时要加入一定量的洗
涤剂和食盐，加入食盐的目的是
DNA的粗提取
实验小结 1.共有“三次过滤，两次析出，七次搅拌”
2. 加入“两次蒸馏水， 三次 NaCl 溶液 ，一次酒精”
（二）DNA的鉴定
1. DNA的鉴定的原理
试剂： 二苯胺 条件： 沸水浴 现象： 沸水浴条件下， DNA遇二苯胺被染成蓝色
2. DNA的鉴定
⑴ 向两支试管中分别加入 2mol/L NaCl 溶液5ml
5.滤取含 DNA 的黏稠物
6.将 DNA 的黏稠物再溶解 7.过滤含 DNA 的 NaCl 溶液 8.提取含有杂质较少的DNA 冷却的 95％的酒精 50 mL A:(1)向试管中加入0.015 mol／L 的 NaCl 溶液 5mL (2)加入 DNA 9.DNA 的鉴定 (3)4 mL 二苯胺试剂 B:(1)向试管中加入0.015mol／L 的 NaCl 溶液 5mL (2)4 mL 二苯胺试剂 2 mol／L 的 NaCl 溶液 20 mL
DNA的粗提取
一、提取DNA的原理 ⑴ DNA的溶解性 DNA和蛋白质等成分在不同浓度的NaCl溶 液中溶解度不同
选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，使杂 质沉淀；或让其他成分溶解，DNA析出
⑵ DNA不溶于酒精溶液 DNA不溶于酒精溶液， 但细胞中某些蛋白质则溶于酒精。 将DNA与蛋白质进一步分离。 ⑶ DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
1.在DNA的粗提取实验过程中，两次向烧杯 中加入蒸馏水的作用是( B )。 A.稀释血液、冲洗样品 B.使血细胞破裂、降低NaCl浓度使DNA析出 C.使血细胞破裂、增大DNA溶解量 D.使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNA
2.提取鸡血中的DNA时，为什么要除去血液 中的上清液?
答：DNA的提取，关键是对杂质的去除，由于 上清液是血液中的血浆部分，不含DNA，所以 要除去上清液(含有蛋白质)。
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实验步骤——以洋葱为实验材料：
1、称取30克已切碎的洋葱，放入研钵中，加入少量石英砂助研，倒入10mL 2mol/L 的氯化钠溶液，充分研磨。
洋葱含有挥发性刺激物，有效减少刺激，才能使实验顺利进行。
上课前，教师可先将洋葱放入冰箱冷冻一会儿，使其凉透但又不能结冰；或将洋葱切成几大块，放入清水泡一会儿，让其挥发性刺激物溶于水，可以减轻刺激。
然后将洋葱切碎备用。
研磨的目的主要是使洋葱细胞破裂，使DNA溶于2mol/L的氯化钠溶液，没必要将洋葱研成粥糊状，后者既浪费时间又影响实验效果。
研磨时，切忌使用搅拌器（榨汁机）。
使用搅拌器虽可以提高研磨效率，但搅拌器将洋葱切成极细小的颗粒，无法通过过滤将洋葱颗粒剔除。
只能将酒精直接倒入滤液中，许多洋葱小颗粒因为轻会漂浮起来，DNA藏在其中，无法分辨。
学生看不到白色纤维状粘稠物的DNA。
2、研磨后，用漏斗和纱布将汁液过滤到小烧杯中，得到滤液。
3、向滤液中加入95%的酒精溶液20mL，沿烧杯壁缓缓倒入，不要震动或搅拌。
此时，烧杯中的液体分为上、下两层，下层较浑浊，上层澄清，很快上层溶液中就会有白色纤维状粘稠物析出，用玻璃棒可将其轻轻卷起。
实例: 用鸡血细胞液粗提取DNA 并鉴定步骤
1、提取鸡血细将制备好的鸡血细胞液(已在课前配好) 5~10mL，注入到50ml 烧杯中。
向烧杯中加入蒸馏水20mL，同时用玻璃棒沿一个方向快速搅拌5min，然后，用放有纱布的漏斗将血细胞过滤至1000mL 的烧杯中，取其滤液。
图示胞的细胞核物质
2、溶解细胞核内的DNA 将物质的量浓度为2mol/ L 的NaCl 溶液40 mL 加入到滤液中，并用玻璃棒沿一个方向搅拌1min，使其混合均匀，这时DNA 在溶液中呈溶解状态。
3、析出含DNA的粘稠物沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水，同时用玻璃棒沿一个方向不停地轻轻搅拌，这时烧杯中有丝状物出现。
继续加入蒸馏水，溶液中出现的黏稠物会越来越多。
当黏稠物不再增加时停止加入蒸馏水。
4、滤取含DNA的粘稠物用放多层纱布的漏斗，过滤溶液至1000 mL 的烧杯中。
取纱布上的黏稠物。
5、将DNA 的粘稠物再溶解取一个50 mL 烧杯，向烧杯内注入物质的量浓度为2mol/ L 的NaCl 溶液20 mL。
用钝头镊子将纱布上的黏稠物夹至NaCl 溶液中，用玻璃棒沿一个方向不停地搅拌3min，使黏稠物尽可能多地溶解于溶液中。
6、过滤含DNA的氯化钠溶液取一个100 mL 烧杯，用放有两层纱布的漏斗过滤以上溶液。
取其滤液(DNA 溶于滤液中)。
7、提取含杂质较少的DNA 在上述滤过的溶液中，加入冷却的、体积分数为95% 的酒精溶液50 mL(加入时动作要慢)，并用玻璃棒沿一个方向搅拌，溶液中会出现含杂质较少的丝状物。
当玻璃棒上出现丝状物缠绕时，继续慢慢搅拌，至不再增加时，用玻璃棒将丝状物卷起，并用滤纸吸取上面的水分。
取两支20 mL 的试管，各加入物质的量浓度为0.015mol/ L 的NaCl 溶液5mL，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。
然后，向两支试管中各加入4 mL的二苯胺试剂。
混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，等试管冷却后，观察并且比较两支试管中溶液颜色的变化。
那是心与心的交汇，是相视的莞尔一笑，是一杯饮了半盏的酒，沉香在喉，甜润在心。
红尘中，我们会相遇一些人，一些事，跌跌撞撞里，逐渐懂得了这世界，懂得如何经营自己的内心，使它柔韧，更适应这风雨征途，而不会在过往的错失里纠结懊悔一生。
时光若水，趟过岁月的河，那些旧日情怀，或温暖或痛楚，总会在心中烙下深深浅浅的痕。
生命是一座时光驿站，人们在那里来来去去。
一些人若长亭古道边的萋萋芳草，沦为泛泛之交；一些人却像深山断崖边的幽兰，只一株，便会馨香满谷。
人生，唯有品格心性相似的人，才可以在锦瑟华年里相遇相知，互为欣赏，互为懂得，并沉淀下来，做一生的朋友。
试问，你的生命里，有无来过这样一个人呢？
张爱玲说“因为懂得，所以慈悲”.
于千万人群中，遇见你要遇见的人，没有早一步，也没有晚一步，四目相对，只淡淡的问候一句：哦！原来你也在这里，这便足够。
世间最近与最遥远的距离，来自于心灵与心灵。
相遇了，可以彼此陌生，人在咫尺心在天涯，也可初见如旧，眼光交汇的那一刻，抵得人间万般暖。