肤康合剂制备及质量控制

肤康合剂制备及质量控制

作者：张先平李珩等

来源：《中国中医药信息》2012年第11期

1.长江大学附属第一医院，湖北荆州 434000；

2.荆州市第三人民医院，湖北荆州434000；

3.荆州市中心医院，湖北荆州 434020

摘要：目的研制肤康合剂，并建立该制剂的质量控制方法。方法采用薄层色谱法鉴别肤康合剂中黄芩、白花蛇舌草，高效液相色谱法测定制剂中黄芩苷、芍药苷的含量。色谱柱：Agilent EclipseXDB-C18柱（250 mm×4.6 mm， 5 µm）。黄芩苷流动相为甲醇-2%醋酸

（55∶45），流速1.0 mL/min，检测波长315 nm；芍药苷流动相为甲醇-水（35∶65），流速0.8 mL/min，检测波长230 nm。柱温为常温，灵敏度为0.08 AUFS，进样量20 µL。结果薄层色谱能明显检出黄芩、白花蛇舌草。制剂中黄芩苷和芍药苷的含量分别为2.103～2.145 g/L、1.569～1.650 g/L。黄芩苷进样量在0.54～4.32 µg范围内呈良好线性关系，平均回收率为

99.80%，RSD=1.76%（n=6）；芍药苷进样量在0.14～0.70 µg范围内呈良好线性关系，平均回收率为99.10%，RSD=1.08%（n=6）。结论该制备工艺简单，质量控制方法准确可靠、重复性好。

关键词：肤康合剂；质量控制；薄层色谱法；高效液相色谱法；黄芩苷；芍药苷

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2012.11.018

中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2012）11-0046-03

肤康合剂[鄂药制字（2001）第LZ01-057号]系荆州市中心医院在总结多年临床经验的基础上，根据中医药理论研制的医院制剂，由蒲公英、土茯苓、黄芩等15味中药材组成，具有祛风止痒、活血化瘀等功效，临床主要用于各类皮炎（脂溢性皮炎、神经性皮炎、接触性皮炎）、湿疹、痤疮、银屑病等皮肤病的治疗[1-3]。为更好地控制该制剂的内在质量，保证其临床疗效，本试验采用薄层色谱法（TLC）对制剂中的黄芩、白花蛇舌草进行定性鉴别，用高效液相色谱法（HPLC）测定该制剂中有效成分黄芩苷、芍药苷的含量，现报道如下。

1 仪器与试药

Agilent-1100高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）， Agilent-1100系列四元泵，Agilent VWD检测器，Chemstation色谱工作站；超声清洗机KQ-100E型（工作频率40 kHz，昆山市超声仪器有限公司）。

黄芩苷对照品（批号110715- 200212）、芍药苷对照品（批号110736-200629）、齐墩果酸对照品（批号110709-200505）均购自中国药品生物制品检定所；肤康合剂（荆州市中心医

院制备，规格250 mL，批号060713、060904、061116、070102）；甲醇为色谱纯；试验用水为多效蒸馏水；其余试剂均为分析纯。

2 处方及制备

处方：蒲公英33.3 g，土茯苓100 g，青蒿33.3 g，柴胡33.3 g，土鳖虫16.67 g，蒲黄33.3 g，桔梗20 g，甘草20 g，黄芩53.3 g，白鲜皮53.3 g，槐花33.3 g，牡丹皮33.3 g，夏枯草33.3 g，赤芍100 g，白花蛇舌草66.6 g，蔗糖及防腐剂适量，制成1 000 mL。

制备方法：将15味药加入约10倍量水，煎煮沸腾2 h后，倒出煎出液，再向药渣中加入适量体积水煎煮2次，煎煮时间均为2 h，合并3次煎出液，静置，过滤，滤液浓缩至约600 mL，加适量蔗糖及防腐剂，搅拌使溶解，用水调至1 000 mL，煮沸，过滤，分装，即得。

3 质量控制

3.1 性状

本品为棕褐色的液体；味苦、微甜。

3.2 薄层色谱鉴别

3.2.1 黄芩的鉴别取本品10 mL，蒸干，残渣加水15 mL搅拌使溶解，滤过，滤液加稀盐酸调节pH值至1～2，用醋酸乙酯振摇提取2次，每次10 mL，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另按处方比例和工艺同法制成缺黄芩的阴性对照液备用。再取黄芩苷对照品，加甲醇制成1.0 g/L的对照品溶液。照薄层色谱法[2005年版《中华人民共和国药典》（一部）附录Ⅵ B]试验，吸取上述3种溶液各5 µL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5∶3∶1∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点，而阴性对照无干扰。

3.2.2 白花蛇舌草的鉴别取本品20 mL，加醋酸乙酯20 mL振摇萃取，分取醋酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另按处方比例和工艺同法制成缺白花蛇舌草的阴性对照液备用。再取齐墩果酸对照品，加甲醇制成1.0 g/L的对照品溶液。照薄层色谱法[2005年版《中华人民共和国药典》（一部）附录Ⅵ B]试验，吸取上述3种溶液各10

µL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-丙酮-醋酸乙酯（12∶3∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，放入烤箱，在110 ℃烘烤5 min。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点，而阴性对照无干扰。

3.3 一般检查

相对密度应不低于1.08；pH值应在4.0～7.0之间；其他应符合《中华人民共和国药典》合剂项下有关各项规定。

4 含量测定

4.1 色谱条件

色谱柱：Agilent EclipseXDB-C18柱（250 mm×4.6 mm，

5 µm）。黄芩苷流动相为甲醇-2%醋酸（55∶45），流速1.0 mL/min，检测波长315 nm；芍药苷流动相为甲醇-水（35∶65），流速0.8 mL/min，检测波长230 nm。柱温为常温，灵敏度为0.08 AUFS，进样量20 µL。

4.2 溶液的制备

4.2.1 对照品溶液的制备①精密称取黄芩苷对照品（105 ℃干燥至恒重）10.8 mg，置10 mL 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为黄芩苷对照品储备液。精密量取该储备液适量，加甲醇制成每1 mL含36 µg黄芩苷的对照品溶液。②精密称取芍药苷对照品（105 ℃干燥至恒重）

5.6 mg，置10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为芍药苷对照品储备液。精密量取该储备液适量，加甲醇制成每1 mL含28 µg芍药苷的对照品溶液。

4.2.2 供试品溶液的制备①精密量取肤康合剂

5.0 mL，置25 mL量瓶中，加50%乙醇适量，超声处理（频率40 kHz，功率100 W）30 min，放冷，加50%乙醇至刻度，摇匀，静置。精密量取上清液2.0 mL，置25 mL量瓶中，加50%乙醇至刻度，摇匀，用0.45 µm的微孔滤膜过滤，弃去初滤液，即得黄芩苷供试品溶液。②精密量取肤康合剂2.0 mL，置25 mL量瓶中，加50%乙醇适量，超声处理（频率40 kHz，功率100 W）30 min，放冷，加50%乙醇至刻度，摇匀，静置。精密量取上清液1.0 mL，置10 mL量瓶中，加50%乙醇至刻度，摇匀，用0.45 µm的微孔滤膜过滤，弃去初滤液，即得芍药苷供试品溶液。

4.2.3 阴性对照溶液的制备按处方比例和工艺，分别制成不含黄芩及赤芍、牡丹皮的阴性样品，再按供试品溶液制备方法制得2种阴性对照溶液。

4.3 系统适用性试验

分别取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各20 µL，按“4.1”项下色谱条件，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，结果见图1、4.4 标准曲线的建立

4.4.1 黄芩苷分别精密量取黄芩苷对照品储备液一定量，用甲醇稀释成黄芩苷质量浓度分别为27、54、108、162、216 mg/L的标准溶液。分别进样20 µL，测定峰面积，并以峰面积对进样量进行线性回归，得到回归方程Y=13.81X-13.15， r=0.999 9（n=5）。表明黄芩苷进样量在0.54～4.32 µg范围内与峰面积呈良好的线性关系。