在链霉菌中表达透明颤菌血红蛋白需要异源启动子
透明颤菌血红蛋白基因在金色链霉菌中的克隆与表达
４ 卷 ２
３期
微 生 物 Nhomakorabea学
报
Ｖｏ Ｉ ４２
０ ３
２０ 年 ６月 ０２
Ａｃ ａ ｉ ｒ ｂｉ ｏ ｉ ｔ Ｍ ｃ ｏ ｏｌ ｇ ｃａ ｉ ｉ ａ Ｓ ｎｃ
Ｊ ｅ ｕｎ
２ ２ ００
透 明 颤 菌 血 红 蛋 白 基 因 在 金 色 链 霉 菌 中 的 克 隆 与 表 达
摘
要 ： 别 用 质 粒 ｎ ６ ９与 ｐ Ｃ１ ｌ ｈ ， ｌ ０ 分 ＂９ Ｕ ９ ｂ） ｐ ７ ２与 ｐ Ｒ ２ ． ） 构 建 大 腑 杆 菌 － 霉 菌 穿 梭 ｖ ｊ Ｂ ３ ２ ｃ ， 链
质 粒 ． 透 明 鳜 苗 血 红 蛋 白 基 因 转 凡 金 色 链 霉 菌 。 在 低 溶 解 氧 浓 度 下 ， 明 颤 苗 血 红 蛋 白 的 祷 透 表达 ． 町提 高 金 邑链 霉 菌 氧 的 利 用 技 率 物 合 成 比 原 始 菌 株 提 高 ４ ％ ～６ ％ 一 在 局 部 低 氧 产 ０ 。 的 环 境 中 采 用 四 环 素 抗 性 基 因 启 动 子 带 动 血 红 蛋 白 基 因 表 达 可 有 效 发 挥 透 明 颤 菌 血 红 蛋 白 的 氧 传 递 技 率 优 于 透 明 颤 菌 血 红 蛋 白基 因 受 溶 解 氧 调 控 时 天 然 启 动 子 ｃ 关 键 词 ：透 明 颤 苗 血 红 蛋 白基 因 ，金 色 链 霉 菌 ，四 环 素 抗 眭： 塞因 启 动 子 天 然 启 动 于 中图分 类 号 ：７６ Ｑ ８ 文献 标识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ：０ １ ２ ｃ０ ２ ３０ ０ —６ ０ ０ — 哪 ０ ）０ －３ ５ ０ ６ ２
动 子 和 四 环 紊 抗 性 基 因 启 动 子 （ ） 达 透 明 颤 菌 血 红 臻 白基 因 。 Ｐ 表
透明颤菌血红蛋白基因在酶工程中的应用
中 图分 类号 ： Ｔ Ｑ ９ ２ ５ ￣ ． ２
文献标识码 ： Ａ
文章 编 号 ： １ ６ ７ ４ — ５ ０ ６ Ｘ（ ２ ０ １ ７ ） ０ ６ — ０ ０ ０ １ — ０ Ｏ ０ ４
Ｔ ｈ ｅ Ａｐ ｐ ｌ ｉ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｏ ｆ Ｖ ｉ ｔ ｒ ｅ ｏ ｓ ｃ ｉ Ｕ ａ Ｈｅ ｍｏ ｇ ｌ ｏ ｂ ｉ ｎ（ ｖ ｇ ｂ ）ｉ ｎ Ｅｎ ｚ ｙ ｍｅ Ｅｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ
王兴吉 ， 佟 新伟 ， 刘 文 龙 ， 张 杰
（ 山 东 隆科 特 酶 制 剂 有 限 公 司 ． 山东 临 沂 ２ ７ ６ ４ ０ ０ ）
摘 要 ： 透 明 颤 菌 的 血 红蛋 白 （ Ｖ Ｈｂ ） 具 有 结 合 氧 的特 性 ， 可 使 专 性 好 氧 的 革 兰 氏 阴性 茵透 明颤 茵在 贫氧 环 境 中生 长 。
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ６ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ６ ７ ４ — ５ ０ ６ Ｘ ． ２ ０ １ ７ ． ０ ６ — ０ ０ １
Байду номын сангаас
１ 透 明 颤 菌 血 红 蛋 白 的 结 构
全 相 同的相对 分子 量为 １ ５ ７ ７ ５的亚 基和 两个 ｂ型血 红 素组成 。每个亚 基 由 １ ４ ６个氨基 酸残 基形 成 ６个 仪 一 螺旋 区（ Ａ、 Ｂ 、 Ｅ、 Ｆ 、 Ｇ和 Ｈ） ， 其三维结构见图 １ 。 １ ９ ９ ８年 ， Ｄ ｉ ｋ ｓ ｈ ｉ ｔ 等 通过 定 点 突变 的方 法 将 Ｖ Ｈｂ蛋 白Ｅ ７位 点 的 Ｇ ｌ ｎ变 成 Ｌ ｅ ｕ或 者 Ｈｉ ｓ 发现 ， Ｖ Ｈ ｂ蛋 白的生 物活 性未 受影 响 ， 由此 断定 Ｖ Ｈ ｂ蛋 白血红 素 跟 氧 的结 合不 发 生在 Ｅ ７位 置 ，这跟 其 他血 红 蛋 白 不 同［ ２ ３ 。 完整的 Ｖ Ｈ ｂ可溶 。 但 脱 去 血 红 素辅 基 便 不
透明颤菌血红蛋白与氧的供需
M2及WX-02分批发酵过程中DO，OD600，γ-PGA产量的变化曲线
透明颤菌血红蛋白生理功能的研究
扩散促进假说：VHb与氧 的结合增加了氧在细胞周 质区域内的传递量。 氧化还原效应物假说： VHb与氧结合后具备传感 功能、调控功能或者是呼 吸酶的变构功能。 协助扩散假说：VHb的表 达提高了低氧条件下的细 胞溶氧能力，调控了末端 氧化酶的生物活性。 末端电子受体假说：氧合 态的VHb能够影响细菌在 呼吸链中的氧化过程。
透明颤菌血红蛋白 ——氧的供需 氧的供需
生工0902 生工 李聪智 卢志超 刘 佳 张培政 岑 侃 姚晨阳
透明颤菌简介
隶属于贝日阿托式菌属， 丝状细菌家族，专性好 氧的革兰氏阴性菌。
合成的透明颤菌血红蛋质。
透明颤菌血红蛋白
VHb具有氧结合特性， 在好养生物发酵中可以 不增加投入提高发酵产 量。如在工业中可提高 α-淀粉酶、青霉素酰化 酶的产量。 通过引入编码VHb的单 个基因使转基因植物较 早发芽和快速生长。 VHb可以促进微生物降 解水环境污染的毒害作 用。
谢谢大家
透明颤菌血红蛋白
VHb具有氧结合特性， 在好养生物发酵中可以 不增加投入提高发酵产 量。如在工业中可提高 α-淀粉酶、青霉素酰化 酶的产量。 通过引入编码VHb的单 个基因使转基因植物较 早发芽和快速生长。 VHb可以促进微生物降 解水环境污染的毒害作 用。
VHB在植物代谢工程中的应用 在植物代谢工程中的应用
对于VHb分子内的 分子内的 对于 作用机理目前较为流行的 就是扩散促进假说， 就是扩散促进假说，但事 实上到底是哪种作用机理 目前还未研究清楚。 目前还未研究清楚。
透明颤菌血红蛋白基因表达对金色链霉菌生长代谢的影响
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实验结果
金色链霉菌氧的利用特性
［>］ 在发酵过程中， 溶解氧的高低对金色链霉菌生长代谢特性有明显的影响 。在保证
发酵过程溶解氧充足的条件下， 研究了金色链霉菌发酵过程的摄氧率变化。 研究结 果 表 明 （ 图 .） ， 在对数生长期 （ %’: 左 右） ， 菌 体 的 摄 氧 率 达 到 最 大 即， 1 ， 发酵进入产物合成期， 摄氧率显著降低。工程菌株与参比菌株相比， 摄 1,$AAJ4（ @ A・ L） 氧率的最大值基本一致， 但工程菌株摄氧率最大值出现略迟于参比菌株。与参比菌株相
氧是好气性微生物进行能量代谢的重要物质， 在正常状态下， 空气中的氧在培养基中 的溶解度大约只有 #="78&’986 左右， 而培养液中的氧还须经过气膜、 液膜、 细胞团块、 细
［3］ 。 胞膜等一系列传递过程最后进入细胞内到达呼吸链， 此过程需要克服相当大的阻力
传统的抗生素工业以及近年来发展的基因工程菌高密度培养， 都遇到发酵设备的供氧能 力与生产菌株对氧的需求量之间的矛盾。供氧己成为微生物工业中提高产品产量的主要 限制因素之一。提高供氧水平， 通常从设备和操作角度考虑， 例如， 改进发酵罐设计、 通气
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春等： 透明颤菌血红蛋白基因表达对金色链霉菌生长代谢的影响
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是其底物消耗速度略同的主要原因。
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正常发酵过程菌体生长对比
透明颤菌血红蛋白基因在酶工程中的应用
透明颤菌血红蛋白基因在酶工程中的应用
王兴吉;佟新伟;刘文龙;张杰
【期刊名称】《食品与发酵科技》
【年(卷),期】2017(053)006
【摘要】透明颤菌的血红蛋白(VHb)具有结合氧的特性,可使专性好氧的革兰氏阴性菌透明颤菌在贫氧环境中生长.目前,VHb可以在很多宿主细胞中表达,通过促进氧的输送增强呼吸和能量代谢,以提高许多有益的代谢产物的产量.本文综述了VHb 的结构与功能,以及vgb基因在产酶工程菌中的应用及存在的问题,并对vgb基因在酶工程领域的应用前景进行了展望.
【总页数】4页(P1-4)
【作者】王兴吉;佟新伟;刘文龙;张杰
【作者单位】山东隆科特酶制剂有限公司,山东临沂 276400;山东隆科特酶制剂有限公司,山东临沂 276400;山东隆科特酶制剂有限公司,山东临沂 276400;山东隆科特酶制剂有限公司,山东临沂 276400
【正文语种】中文
【中图分类】TQ925+.2
【相关文献】
1.透明颤菌血红蛋白基因(vgb)与monellin基因在毕赤酵母中的联合表达 [J], 王清路;张玉军;窦烨;李俏俏;周彩霞
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文
3.透明颤菌血红蛋白基因在龟裂链霉菌中的表达及其对土霉素合成的影响 [J], 倪辉;Ali Mohsin;曹君书;张风新;郭美锦;储炬;庄英萍
4.透明颤菌血红蛋白基因在解淀粉芽孢杆菌中的表达及其影响 [J], 刘清术;夏立秋;罗玉双;李敬业;张允雷;丁学知;胡胜标;余子全;孙运军
5.透明颤菌血红蛋白基因在多粘芽孢杆菌中的克隆和表达 [J], 周荣华;饶犇;廖先清;胡蔻孜;杨自文
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透明颤菌血红蛋白的结构功能和应用进展
透明颤菌血红蛋白的结构功能和应用进展陈云美;徐海洋;王世明【摘要】The hemoglobin from the bacteriumVitreoscilla(VHb)is the firstmicrobial hemoglobin, which has been extensively studied with respect to its structure, biochemical functions, and the mechanisms by which itsexpression is controlled. Expressing VHb in a variety of heterologous hostsresults substantial increasesin production of a variety of useful products(antibiotics, proteins, polymersetc.), host resistance andability to degrade some harmful compounds, by promoting oxygen transport to enhance respiratory and energy metabolism. So this paper reviewed on the function and structure of VHb and the improving output of microbial metabolites, some characteristics of plants and animals and influence ofthe application of bioremediation capability. And we discussed about the application prospect and development space in the metabolism of plant and animal.%透明颤菌血红蛋白（VHb）是科学家发现的第一种微生物血红蛋白，它的结构、生化功能以及表达调控机制都已经得到广泛的研究。
阿维菌素透明颤菌血红蛋白原生质体制备及再生转化溶氧硕士论文
阿维链霉菌基因重组菌株的选育食品科学， 2011，硕士【摘要】随着人们生活水平的提高,国际上和国内的消费者对于化学农药造成的直接或间接的危害越来越重视。
阿维菌素作为生物农药的一种,是迄今为止人类发现的最有效的杀螨杀虫抗生素。
阿维菌素的的发酵是一个好氧的生物过程。
传统工业的微生物发酵使用深层高密度的发酵罐,溶氧常常成为发酵产品产量的重要限制性因素。
本研究通过将含有透明颤菌血红蛋白基因的质粒转化到阿维链霉菌中,从而改善阿维链霉菌的供氧条件,促进阿维链霉菌的生长以及提高阿维菌素的产量。
本文重点考察了影响阿维链霉菌原生质体的制备和再生的因素。
首先,通过对阿维链霉菌发酵过程中定点取样,用菌体干重法测得了阿维链霉菌的生长曲线。
以此确定原生质体制备的菌丝体最佳培养时间为60 h。
在培养基中加入浓度为0.25 g/ml甘氨酸。
溶菌酶的浓度为2 %,在34℃恒温条件下酶解30 min。
在此条件下形成的原生质体的量最大为6.4×108个/ml。
采用双层平板涂布法,将制备的原生质体涂布于加有0.2 %的MgCl2·6H2O缓冲剂的再生培养基上。
涂布的密度为每个平板不多于1000个原生质体。
在此条件下得到... 更多还原【Abstract】 With increasing of the consumers of theinternational market and domestic to the quality of agricultural products, people attach great importance tohazards from the agricultural pollution by tocic chemicals.As a kind of biological pesticides, avermectin is the most effective antibiotics to insecticidal and acaricidal so far. The process of fermentation of streptomyces which can product the avermectin is an aerobic process. The traditional fermentation in industry uses the high-density and deepl... 更多还原【关键词】阿维菌素；透明颤菌血红蛋白；原生质体制备及再生；转化；溶氧；【Key words】avermectin；Vitreoscilla hemoglobin；protoplast formation and regeneration；conversion；dissolved oxygen；摘要4-5Abstract 5第1章绪论9-171.1 概述9-121.2 阿维菌素的结构及其理化性质12-141.3 阿维链霉菌及伊维菌素的作用机理14-151.4 阿维菌素的研究进展151.5 阿维菌素的分离提取与检测15-161.6 本课题的研究目的与方法16-17第2章阿维链霉菌原生质体的制备17-272.1 实验材料17-192.1.1 实验仪器172.1.2 菌种172.1.3 培养基17-182.1.4 主要溶液的配制18-192.1.5 主要试剂192.2 实验方法19-202.2.1 菌种的活化192.2.2 担孢子悬液的制备192.2.3 菌丝体的培养19-202.2.4 原生质体的制备202.3 实验结果与讨论20-242.3.1 不同菌龄对原生质体制备的影响20-222.3.2 甘氨酸浓度对原生质体制备的影响222.3.3 酶的浓度对原生质体制备的影响22-232.3.4 酶解时间对原生质体制备的影响23-242.3.5 酶解温度对原生质体制备的影响242.4 本章小结24-27第3章阿维链霉菌原生质体的再生27-353.1 实验材料27-293.1.1 实验仪器273.1.2 实验菌种273.1.3 培养基27-293.2 实验方法293.2.1 菌丝体的培养293.2.2 原生质体的制备293.2.3 原生质体的再生293.3 实验结果与讨论29-333.3.1 再生培养基对原生质体再生的影响29-313.3.2 酶解时间对原生质体再生的影响313.3.3 再生培养方法对原生质体再生的影响31-323.3.4 原生质体放置条件及时间对原生质体再生的影响323.3.5 平板涂布密度对原生质体再生的影响32-333.4 本章小结33-35第4章透明颤菌血红蛋白基因的转化35-474.1 实验材料35-384.1.1 实验仪器35-364.1.2 实验菌种364.1.3 培养基36-374.1.4 主要试剂374.1.5 缓冲液37-384.1.6 其他试剂384.2 实验方法38-424.2.1 大肠杆菌DH-5a 的收获和裂解384.2.2 大肠杆菌DH-5a，pUC18/vgb 质粒的提取38-394.2.3 pUC18/vgb 质粒的纯化394.2.4 酶切质粒DNA 及目的基因394.2.5 凝胶板的制备394.2.6 DNA 片段电泳及燃烧我观察39-404.2.7 质粒DNA 凝胶片段的回收404.2.8 变铅青链霉菌的质粒提取40-414.2.9 穿梭质粒载体与目的基因的连接414.2.10 原生质体的转化414.2.11 Vhb 基因PCR 反应414.2.12 超声波提取阿维菌素41-424.3 实验结果与讨论42-454.3.1 大肠杆菌DH-5a 中vgb 基因的鉴定424.3.2 大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒的构建42-434.3.3 硫链丝菌素的最低添加浓度43-444.3.4 透明颤菌血红蛋白对阿维菌素产量的影响44-454.4 本章小结45-47结论47-49参考文献。
透明颤菌血红蛋白研究现状及其在中药中的应用展望
透明颤菌血红蛋白研究现状及其在中药中的应用展望【关键词】透明颤菌属［关键词］透明颤菌属; 血红蛋白类; 基因; 转基因Current research status of Vitreoscilla hemoglobin and the prospective application in traditional Chinese medicineKEY WORDS Vitreoscilla; hemoglobins; genes; transgenes氧传递直接或间接阻碍着需氧生物的低级代谢和次级代谢。
在哺乳动物中，血红蛋白具有氧结合特性，过去曾以为这种氧结合蛋白只存在于哺乳动物中，近期发觉，它几乎普遍存在于动物、植物和微生物中［1］。
透明颤菌血红蛋白（Vitreoscilla hemoglobin, VHb）是由透明颤菌属（Vitreoscilla sp. C1）中产生的一种可溶性血红蛋白，这种血红蛋白能在贫氧条件下被大量诱导合成，使透明颤菌在微氧条件下能够专门好地生存。
随着研究的深切，发觉该基因的表达在转录水平上受氧浓度调控。
因此在以溶氧为限制条件的生物反映器中，尤其是在大规模、高密度微生物发酵和动植物细胞培育解决供氧问题领域具有潜在的应用前景。
1VHb的结构及特性透明颤菌是一种专性好氧的革兰氏阴性丝状菌，属于贝日阿托氏菌属（Beggiatoe），在沼泽、腐臭植物等贫氧的环境中生长旺盛。
VHb在透明颤菌中被发觉，最初被以为是“细胞色素o(cytochrome o, Cyo)”蛋白，具有结尾氧化酶的性质［2］。
Cyo在不同的环境条件下可呈现三种不同的状态，即氧化态、还原态、氧合态，并能够彼此转化；其中还原态是生理活性态，而氧合态那么是富氧条件下的表现形式。
它在577、544和420 nm处有最大吸收峰，假设向溶液中鼓入CO 气体，那么可形成蛋白CO复合物，在56六、535及419 nm处呈现特点吸收峰［3］。
透明颤菌血红蛋白基因克隆及在紫色非硫细菌中的表达
透明颤菌血红蛋白基因克隆及在紫色非硫细菌中的表达
透明颤菌血红蛋白基因克隆及在紫色非硫细菌中的表达
构建了含有透明颤菌血红蛋白基因的可转化大肠杆菌-紫色非硫细菌穿梭质粒(pHSG-MG-vgb),将其转化到紫色非硫细菌(Rhodopseudo palustns),获得了基因工程菌EPB01.经SDS-PAGE和CO示差分光光谱分析证明,重组菌株表达了有活性的透明颤菌血红蛋白,通过低溶解氧诱导后,基因工程菌EPB01的菌体密度较对照菌增加了24%～32%.
作者：张立国罗人明周集体吕红杜进民郭建博罗晓王晓磊ZHANG Li-guo LUO Ren-ming ZHOU Ji-ti L(U) Hong DU Jin-min GUO Jian-bo LUO Xiao WANG Xiao-lei 作者单位：张立国,罗人明,郭建博,罗晓,王晓磊,ZHANG Li-guo,LUO Ren-ming,GUO Jian-bo,LUO Xiao,WANG Xiao-lei(河北科技大学环境科学与工程学院,河北石家庄,050018)
周集体,吕红,ZHOU Ji-ti,L(U) Hong(大连理工大学环境与生命学院,辽宁大连,116012)
杜进民,DU Jin-min(河北科技大学生物科学与工程学院,河北石家庄,050018)
刊名：河北工业科技ISTIC 英文刊名：HEBEI JOURNAL OF INDUSTRIAL SCIENCE & TECHNOLOGY 年，卷(期)：2008 25(1) 分类号： Q939.11 关键词：透明颤菌血红蛋白基因天然启动子光合细菌基因工程菌低氧诱导。
透明颤菌血红蛋白基因的克隆与表达
透明颤菌血红蛋白基因的克隆与表达孙艳;郑煜焱;王洪军;张志强;王立强【期刊名称】《中国公共卫生》【年(卷),期】2005(21)4【摘要】目的用野生型透明颤菌菌株中获得的血红蛋白基因 ,构建透明血红蛋白(VHb)重组表达质粒 ,并在大肠埃希菌 (E .cloi)中实现表达。
方法将环境中筛选出的透明颤菌菌株 ,直接通过聚合酶链式反应 (PCR)克隆血红蛋白基因 ,以质粒pBluescriptSK为载体。
构建透明颤菌血红蛋白重组表达质粒 pBlueV ,并转化到大肠埃希菌DH - 5a中 ,使用CO示差光谱、十二烷基磺酸钠 -聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳 (SDS -PAGE)电泳和蛋白印记 (westernblot)进行分析。
结果PCR扩增的产物透明颤菌血红蛋白基因 (vgb)在琼脂糖凝胶电泳图 0 . 5kb处显示 1条亮带 ,测序结果证实与已发表的vgb序列的同源性 10 0 %。
经质粒转化的大肠埃希菌菌株在 16kb处有 1条特征蛋白带 ,而未经质粒转化的菌株则没有。
结论成功构建透明颤菌血红蛋白重组质粒 ,并在大肠埃希菌中得到表达。
【总页数】2页(P436-437)【关键词】透明颤菌血红蛋白;大肠埃希菌;克隆;表达【作者】孙艳;郑煜焱;王洪军;张志强;王立强【作者单位】沈阳农业大学食品科学院;沈阳军区联勤部疾病预防控制中心【正文语种】中文【中图分类】R33【相关文献】1.透明颤菌血红蛋白基因在恶臭假单胞菌中的克隆及表达 [J], 李尔炀;蔡志强;史乐文2.透明颤菌血红蛋白基因克隆及在紫色非硫细菌中的表达 [J], 张立国;罗人明;周集体;吕红;杜进民;郭建博;罗晓;王晓磊3.透明颤菌血红蛋白基因在产黄青霉中的克隆与表达 [J], 李兵;李术娜;周艳芬;赵晓瑜;朱宝成4.透明颤菌血红蛋白基因在产TRAIL蛋白大肠杆菌中的克隆表达 [J], 杨凌超;孙爱友;沈亚领;魏东芝;龚毅;马昱澍5.透明颤菌血红蛋白基因在多粘芽孢杆菌中的克隆和表达 [J], 周荣华;饶犇;廖先清;胡蔻孜;杨自文因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
透明颤菌血红蛋白在枯草芽孢杆菌WB800中的表达及其对菌体生长的影响
透明颤菌血红蛋白在枯草芽孢杆菌WB800中的表达及其对
菌体生长的影响
廖瑜玲;任楠;李俊星;杨慧林
【期刊名称】《生物技术通报》
【年(卷),期】2010(000)009
【摘要】通过基因工程的方法,将透明颤菌血红蛋白基因(vhb)置于大肠杆菌-枯草杆菌穿梭质粒pBEP43-DFE的强启动子P43下,构建重组质粒pBEP43-vhb,并通过化学感受态法转入枯草杆菌WB800中,转化子经过酶切和PCR验证.采用一氧化碳差异色谱法测定转入的血红蛋白基因具有表达活性.通过限氧试验表明,血红蛋白基因能在低氧环境下促进菌体的生长.
【总页数】4页(P177-180)
【作者】廖瑜玲;任楠;李俊星;杨慧林
【作者单位】广东肇庆星湖生物科技股份有限公司,肇庆,526040;华南理工大学生物科学与工程学院,广州,510006;华南理工大学生物科学与工程学院,广州,510006;华南理工大学生物科学与工程学院,广州,510006
【正文语种】中文
【中图分类】Q94
【相关文献】
1.透明颤菌血红蛋白对毕赤酵母菌体密度及表达的影响 [J], 张玉军;孔浩;王斌
2.透明颤菌血红蛋白基因在弗氏链霉菌中的表达及其对菌体生长和泰乐星合成的影
响 [J], 陈文青;喻子牛;郑应华
3.透明颤菌血红蛋白在肉桂地链霉菌中的表达对其细胞生长及抗生素合成的影响[J], 文莹;宋渊;李季伦
4.透明颤菌血红蛋白基因表达对金色链霉菌生长代谢的影响 [J], 孟春;叶勤;邱荔;石贤爱;苏文金;郭养浩
5.透明颤菌血红蛋白基因(vgb)表达对委内瑞拉链霉菌秦岭变种生长代谢及瑞拉菌素效价的影响 [J], 高峰;陈太春;苟丽霞;安德荣
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将透明颤菌血红蛋白基因(vgb)转移到链霉菌染色体整合载体的构建
将透明颤菌血红蛋白基因(vgb)转移到链霉菌染色体整合载体的构建张桂敏;周秀芬;邓子新;庄永红【期刊名称】《华中农业大学学报》【年(卷),期】2004(23)6【摘要】链霉菌抗生素的生物合成对培养环境中氧的供应相当敏感 ,为了改善这一溶氧问题 ,本研究通过将透明颤菌血红蛋白基因 (vgb)克隆到含ФC31int,attP基因的诱导型表达载体pIJ86 0 0上 ,构建了可接合转移到链霉菌的整合型表达vgb基因的质粒 pHZ12 76。
pHZ12 76通过接合转移导入变铅青链霉菌(Streptomyceslivi dans) ,所得重组子经Southern杂交验证后 ,进行诱导表达 ,菌体经破碎后所得蛋白粗提物经Western杂交和CO结合试验表明vgb基因在该菌中表达出了有活性的VHb蛋白。
【总页数】4页(P602-605)【关键词】透明颤菌血红蛋白基因;变铅青链霉菌;整合型;基因表达【作者】张桂敏;周秀芬;邓子新;庄永红【作者单位】华中农业大学生命科学技术学院;湖北大学生命科学学院,武汉430062;湖北大学生命科学学院【正文语种】中文【中图分类】Q786【相关文献】1.利用透明颤菌血红蛋白基因vgb改造毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K的研究[J], 孟志刚;张锐;陈毓荃;郭三堆2.透明颤菌血红蛋白基因(vgb)在阿维链霉菌的整合表达 [J], 张桂敏;周秀芬;邓子新3.斑贝链霉菌接合转移系统的构建及透明颤菌血红蛋白基因的表达对其次级代谢的影响 [J], 凌华云;闵勇;熊伟;吕和平;喻子牛;郑应华4.透明颤菌血红蛋白基因(vgb)表达对委内瑞拉链霉菌秦岭变种生长代谢及瑞拉菌素效价的影响 [J], 高峰;陈太春;苟丽霞;安德荣5.透明颤菌血红蛋白基因(vgb)表达载体的构建及其诱导表达 [J], 吴迪;杨明明;张亚妮;张炜炜;周乍琴;樊俊华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
透明颤菌血红蛋白基因在红色糖多孢菌株中表达及对红霉素产量的阻碍
透明颤菌血红蛋白基因在红色糖多孢菌株中表达及对红霉素产量的阻碍吴益民王洪军孙艳吴琼冯立张志强杨青杨国平【摘要】目的利用已含有血红蛋白基因(vgb)的红色糖多孢基因工程重组菌，探讨vgb表达产物对重组糖多孢红霉菌提高红霉素产率的阻碍。
方式用SDS-PAGE、Western blot方式鉴定血红蛋白，用葡萄糖浓度与总蛋白质含量比较原始菌株与重组菌株的不同。
结果红色糖多孢基因工程重组菌与原始菌株比较，重组菌株发酵进程葡萄糖浓度的转变出此刻第二时段(约38h)，原始菌株达到了L，而重组菌株只有L；第三时段原始菌株显现了游离葡萄糖浓度顶峰而重组菌株未显现。
在两个菌株中生物物质浓度［以总蛋白质(g/L)表示］存在不同，重组菌株比原始菌株约低27%。
红霉素效价，原始菌株和重组菌株别离为和L，相当于重组菌株提高红霉素体积产率约29%。
结论重组红色糖多孢菌表达了透明颤菌血红蛋白，提高了红霉素产率，对解决抗生素工业和基因工程菌高密度发酵有良好的应用前景。
【关键词】透明颤菌；血红蛋白基因；红色糖多孢菌；基因重组ABSTRACT Objective To study the exprssion of Vitreoscilla hemoglobin gene (vgb) in the Saccharopoblyspoura erythraea andits effect on erythromycin production. Method A vgb gene was integrated into the chromosomal DNA of by electrotransformation and the recombinant was obtained. The VHb was identified with SDS-PAGE and Western blotting method. Glucose concentrations and total protein content in original and recombinant strain fermentation processes were determined and compared with auto-biochemical assay. The erythromycin titers were tested with cylinder plate method. Results At the second stage of fermentation, glucose concentration of original strain reached L at about 38h and that of recombinant strain was L; at the third stage, a glucose concentration peak appeared in original strain while none did in recombinant. The total protein content of recombinant was lower than that of original strain by 27%. The titres of erythromycin in original strain and recombinant were and L, respectively, . the the erythromycin production of recombinant was increased by 29% compared with that of original strain. Conclusion vgb gene was expressed in recombinant , which increased erythromycin production and showed a bright application prospect of antibiotic-gene engineering strain.KEY WORDS Vitreoscilla; vgb; Saccharopolyspora erythraea;Gentic recombination红霉素是由红色糖多孢菌培育液中分离出来的一种抗生素，每一年的产量有数千吨。
2022年湖南师范大学树达学院生物科学专业《微生物学》期末试卷B(有答案)
2022年湖南师范大学树达学院生物科学专业《微生物学》期末试卷B(有答案）一、填空题1、能产芽孢的细菌较少，主要是属于革兰氏______性细菌的______属和______属，前者是好氧菌，其芽孢囊呈______状，后者是厌氧菌，其芽孢囊的外形常呈______状。
2、病毒的非增殖性感染有______、______和______3种类型。
3、在代谢回补顺序中，约有10条途径都是围绕着补充______途径中的关键中间代谢产物______以及______途径中的关键中间代谢产物______ 进行的。
4、各大类微生物都有其生长适宜的pH范围，如细菌为______、放线菌为______、酵母菌菌为______、霉菌为______、藻类为______、原生动物为______。
5、核糖体的功能是______，它由存在于表层的______和位于内层的______两种成分组成；在真核生物细胞质中的核糖体的沉降系数一般为______，而在线粒体中则为______，原核生物的一般为______。
6、微生物与人类关系的重要性，你怎么强调都不过分，微生物是一把十分锋利的双刃剑，它们在给人类带来______的同时也带来______。
7、1971年，McCord和Fridovich提出了一个关于厌氧菌氧毒害机制的______学说。
其根据是厌氧菌缺乏______酶，一般也缺乏______酶，因此易受______等的毒害。
8、细菌沥滤又称细菌冶金，主要分三阶段：______，______，______；其中后一步是关键，它由化能自养细菌______来完成的。
9、微生物转录水平的调控一般都是蛋白质或某些小分子物质对基因转录的阻遏或激活，而在翻译水平上也发现了类似的______作用。
10、外毒素的种类很多，常见的如______、______、______和______ 等。
二、判断题11、由于间体是细胞膜内陷形成的，因此其组成结构和功能与细胞膜是完全相同的。