培养基配方

一、LB培养基：
Yeast extract 5 g/L
Tryptone 10 g/L
Nacl 10 g/L
PH为7.0 若配制固体培养基加入1.5%的琼脂。

二、YEB培养基:
Yeast extract 1 g/L
Peptone(或Tryptone) 5 g/L
Beef extract 5 g/L
Sucrose 5 g/L
MgSO4 2 mmol/L
PH为7.0 若配制固体培养基加入1.5%的琼脂。

三、N6D2培养基(2,4D浓度2mg/L)：
① N6大量母液1：20×大量元素(1L) 50ml
KNO
3
56.6g
(NH
4)
2
SO
4
9.26g
KH
2PO
4
8g
② N6大量母液2：40×大量元素(500ml) 25ml
CaCl
2·2H
2
O 3.32g
③ N6大量母液3：40×大量元素(500ml) 25ml
MgSO
4∙7H
2
O 3.7g
④ B5微量元素I：100×微量元素（1L） 10ml
溶液A：
MnSO
4∙H
2
O 781mg
ZnSO
4∙7H
2
O 200mg
溶于400ml无菌水溶液B：
H 3BO
3
300mg
KI 75mg
溶于400ml无菌水
然后缓慢将溶液A和溶液B混合，定容至1L
⑤ B5微量元素II：1000×微量元素（500ml） 1ml
Na
2MoO
4
·2H
2
O 125mg
CuSO
4·5H
2
O 12.5mg
CoCl
2·6H
2
O 12.5mg
⑥ B5维生素I：100×维生素（500ml） 10ml
盐酸硫胺素 500mg
盐酸吡哆醇 50mg
烟酸 50mg
⑦ B5维生素II：100×维生素（500ml） 10ml
甘氨酸 100mg
⑧200×铁盐(500ml) 5ml
Na
2
-EDTA 3730mg
FeSO
4·7H
2
O 2780mg
⑨ 2,4 D：100×2,4 D 10ml
200mg 2,4 D，先溶于1ml 无水乙醇中，再定容到1L。

配制1L NBD2 培养基时分别加入母液1 50 ml，母液2、3 各25 ml，B5微量I 10 ml，B5微量II 1ml，B5维生素I、II 各10ml 和200×铁盐 5 ml，另加入
蔗糖 30g
肌醇 0.1g
L-脯氨酸 0.5g
L-谷氨酰胺 0.5g
水解酪蛋白 0.5g
调节pH 值至5.8，高压灭菌。

(固体培养基加0.3%的phytagel)
四、 MS 母液(现在基本用MS粉代替)：
母液1：20×大量元素(500ml)
KNO
3
38g
NH
4NO
3
33g
MgSO
4·7H
2
O 7.4g
母液2：20×钙盐(1L)
CaCl
2·2H
2
O 8.8g
母液3：20×钾盐(1Ll)
KH
2PO
4
3.4g
母液4：100×微量元素(1L)
MnSO
4·4H
2
O 2230mg
ZnSO
4·7H
2
O 860mg
H 3BO
3
620mg
KI 83mg
Na
2MoO
4
·2H
2
O 25mg
CuSO
4·5H
2
O 2.5mg
CoCl
2·6H
2
O 2.5mg
母液5：100×维生素(500ml)
甘氨酸 200mg
盐酸硫胺素 40mg
盐酸吡哆素 50mg
烟酸 50mg
肌醇 10000mg
母液6：200×铁盐(500ml)
Na
2
-EDTA 3730mg
FeSO
4·7H
2
O 2780mg
配制1L MS 培养基时分别加入母液1、2、3 各 50 ml，母液4 10 ml，母液
5、6各 5ml。

五、AAM-AS 液体培养基
10×AA大量元素
KH
2PO
4
1.7g/L
MgSO
4·7H
2
O 3.7g/L
CaCl
2·2H
2
O 4.4g/L
100×AA微量元素I
MnSO
4·H
2
O 1.69g/L
ZnSO
4·7H
2
O 0.86g/L
H 3BO
3
0.62g/L
KI 0.083g/L 1000×AA微量元素II
CuSO
4·5H
2
O 0.025g/L
NaMoO4·2H
2
O 0.25g/L
CoCl
2·6H
2
O 0.025g/L
10×AA氨基酸
谷氨酰胺 8.77g/L
天冬氨酸 2.66g/L
精氨酸 2.88g/L
甘氨酸 0.75g/L
200×铁盐(500ml)
Na
2
-EDTA 3730mg
FeSO
4·7H
2
O 2780mg
100×MS维生素
烟酸 0.05g/L
盐酸硫胺素 0.1/L
盐酸吡哆醇 0.05g/L
配制1L AAM培养基加入AA大量 100ml，AA微量I 10ml，AA微量II 1ml，AA氨基酸100ml，铁盐 5ml，MS维生素 10ml。

另外加入：
KCL 2.94/L
水解酪蛋白 500mg/L
蔗糖 68.5g/L
葡萄糖 36g/L
肌醇 0.1g/L
调节pH 值至5.2，高压灭菌。

用时加入 AS（乙酰丁香酮）200Μμ/L。

六、MS-H分化培养基
MS母液6瓶，外加
干酪素 500 mg/L
6-BA 2 mg/L
ZT 0.2 mg/L
激动素（KT） 0.5mg/L
NAA 0.5 mg/L
蔗糖 30g/L
山梨醇 15 g/L
调节PH 值至5.8，高压灭菌。

(固体培养基加0.3%的phytagel)。

七、 NBD2-AS 培养基
配制1L NB-AS 培养基时按照NB-2,4D培养基配方加入9个母液，另外再加入水解酪蛋白 1g
肌醇 0.1g
蔗糖 30g
葡萄糖 10g
调节pH 值至5.2，高压灭菌(固体培养基加0.3%的phytagel)。

倒平板时加入AS（乙酰丁香酮）100μΜ/L。

八、生根培养基(1/2MS)
MS粉 2.215/L
蔗糖 30g/L
调节pH 值至5.8，加0.2%的phytagel，高压灭菌。