广东地区乙肝病毒C基因亚型的分布与临床

采用聚合酶链反应 一
在 Ｈ ＣＬ Ｃ ，Ｃ和 Ｃ Ｈ
限制 性 片 断 长度 多态性 （ Ｃ Ｐ Ｒ—Ｒ Ｉ ） ， １５例慢 性 ｔ Ｖ Ｃ基 因 型 感 染 者 ， Ｆ 法 对 ５ Ｐ ｔ Ｂ 包括 ７ ８例 肝 细 胞 癌 （ Ｃ ） ３ Ｈ Ｃ 、６例
肝 硬 化 （ ｃ 和 ４ 例 慢 性 肝 炎（ Ｈ） 清样 本 进 行 Ｃ基 因 亚型 检 测 ， 分 析 其 临床 特 点 结 果 Ｌ） １ Ｃ 血 并
病例 组 里 ， ｌ 型 分 布 均 高 于 ｃ ｃ 亚 ２亚型 ； 例 组 间 比 较提 示 Ｃ亚 型 分 布 在 不 同疾 病 组 中 的 分 布 无 明 显 差 异 ； １与 病 Ｃ
Ｃ ２亚型 的 血 清 肝 功 能指 标 、 龄 、 别 以及 Ｈ ｅ ｇ 带 状 况 差 异 无 显 著 性 。结 论 广 东地 区慢 性 Ｈ ＶＣ 基 因 型 年 性 ＢＡ 携 Ｂ 感染以 ｃ １为主 ， ｃ基 因亚 型 分布 的 调 查 及 其 与 临床 关 系的探 讨 能选 一 步 完善 Ｂ Ｖ 基 因 型和 亚型 的研 究 。 对 Ｂ
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２０ ０ ０・
广东医学
２０ ０ ８年 １ ２月 销 ２ ９卷第 １ ２期
Ｇ ａ ｇ ｏ ｇＭｅ ｉ ｌ ｏ ｒａ Ｄ ｃ ０ ８ ｏ ９ ｏ ２ ｕ ｎｄ ｎ ｄｃ ｕｎ ｌ ｅ．２ ０ ，Ｖ ｌ ，Ｎ ．１ ａＪ ２
广东 地 区 乙肝病 毒 Ｃ基 因亚 型 的分 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 与 临床
１ １ 血 清 来 源 １５例慢 性 Ｈ Ｖ感 染 者 分 别 来 自南 ． ５ Ｂ 方 医 院 和 Ｊ 医 学 院 第 一 附 属 医 院 ２０ 一州 ０ ４年 ２月 至 ２０ ０６年 ６月 病 例 ， 括 Ｈ Ｖ 相 关性 肝 细 胞癌 （ Ｃ ）８ 包 Ｂ Ｈ Ｃ ７ 例 、 炎 后 肝硬 化 （ Ｃ ３ 肝 Ｌ ）６例 、 性 肝 炎 （ Ｈ） ｌ ， 慢 Ｃ ４ 例 昕 有病 例 均 为 Ｈ Ｖ持续 感 染 ２年 以 上 ， 排 除 以下任 一 Ｂ 并 情况 ： 自身 免疫 性 肝 病 、 代谢 性 肝病 、 血性 肝病 、 物 瘀 药 性肝 病 、 精性 肝 病 以 及合 并 其 他 肝 炎 病 毒 和 Ｈ Ｖ感 酒 Ｉ 染者 。肝 细胞 癌 、 性 肝 炎 和 肝 硬 化 的 诊 断 标 准 均 参 慢 照 ２０ ０７年 美 国 肝病 年 会 （ Ａ Ｌ ） 荐 的指 南 Ａ ＳＤ 推 ； 所 有病 例 已明 确 为 Ｈ Ｖ Ｃ基 因 型 感 染 。常 规 采 血 ２ｍ ， Ｂ ｌ
基因型进一步分为 不同的亚 型。中国大陆 Ｈ Ｖ基 因 Ｂ
型 主要 为 Ｂ型 和 ｃ型 ， 中 Ｂ基 因 亚 型 主 要 为 Ｂ ， 其 ２ｃ
１３ 血 清 中 Ｈ Ｖ Ｄ Ａ 的 提 取 在 ５ ｌ 清 中 加 ． Ｂ Ｎ ０ 血 ２０ Ｉ ０ ｌ裂 解 液 （ ｏ Ｌ 异 硫 氰 酸 胍 ， ． ％ Ｓ Ｓ ｘ ６ｍｌ ｆ ０５ Ｄ ， １ ｍ ｌＬＥ Ｔ 混 匀 ， 温 静 置 ５ ｍｎ 加 入 ２０ Ｉ 异 ｍ ｏ Ｄ Ａ） ／ 室 ｉ， ５ ｌ ｘ 丙 醇 ， 温 静 置 ５～１ ｉ，２０ ０ｒ／ ｍｎ 离 心 １ 室 ０ ｒｎ １ ０ ａ ｉ， ０ ａ ， ｒｎ 弃 去上 清 ， 淀 用 ７ ％ 乙 醇 洗 １次 后 溶 于 ２ ｌ ｉ 沉 ０ ０
纯水中。 １４ ＨＢ ． Ｖ基 因型 Ｃ亚型 的分 型 方 法 按 文 献 所 述 方
亚型有 Ｃ 和 ｃ ，１ 利用 Ｐ Ｒ—Ｒ Ｆ １ ２ Ｆ前 Ｃ Ｌ Ｐ方法能将 Ｃ ｌ
与Ｃ ２亚 型 区分 出来 ：多 项 研 究 表 明 基 因 型 ｃ较 Ｂ 有更 为 严重 的肝 脏 病 变 ， 括 肝硬 化 和肝 细胞 癌 ， 包 因 此有 必 要 对 基 因 型 ｃ作 更 为 深 人 的 研 究 ； 而 关 于 然 Ｈ Ｖ基 因亚 型 与 Ｈ Ｖ慢 性 感 染 的 肝 脏 损 害 和 临 床 结 Ｂ Ｂ 局 的 关 系 尚未 有 深 入 的报 道 ， 本研 究 拟 对 来 自Ｊ 东 地 区 的 １５ 慢 性 Ｈ Ｖ Ｃ基 因 型 感 染 者 进 行 Ｃ基 因 亚 ５例 Ｂ 型 分 布 的 调 查 及 其 与 临 床 关 系 的 探 讨 ， 一步 完 善 进 Ｈ Ｖ基 因 和亚 型 的 研究 。 Ｂ
５～４ ／．ＡＳ ５～４ ／ Ａ ３ ～５ ／ Ｔ Ｉ ０Ｕ Ｉ； Ｔ： ０ Ｕ Ｌ； Ｉ Ｂ：５ ５ ｇ Ｌ； Ｂ Ｌ：
１ ７ ～２ ． ． ２ ２ ｕｍｏ ／Ｌ。 ｌ
究 发现 ， 来源于同一基因型的毒株之间是有 差异的 ， 根
据 Ｈ Ｖ全 基 因 序列 异 质 性 ≥４ 且 ＜ ％ 的 原 则 ， Ｂ ％ ８ 把
【 关键词 】 广东地 区 乙肝病毒
基 因亚型
根据乙肝病毒 （ Ｂ 全基 因序列 异质性 ≥８ 的 Ｈ Ｖ） ％
标准 ， 可将 Ｈ Ｖ 分 为 Ａ ～ 八 个 基 因 型 。最 近 的 研 Ｂ Ｈ
（ Ｓ ） 白蛋 白（ Ｌ 、 ＡＴ 、 Ａ Ｂ） 总胆 红 素 （ ＢＬ 试 剂 由美 国 ＴＩ） Ｂ ｃｍ ｎ公 司 提 供。 各 正 常 值 范 围 如 下 ： Ｌ ： ｅｋ ａ Ａ Ｔ
１ 资 料 与 方 法
法 进 行 ： Ｈ Ｖ Ｄ Ａ ２ １ 以外 引 物 ９４ （ １ Ａ 取 Ｂ Ｎ ， ６Ｆ ＡＴ — ｒ
Ｇ Ｃ ＡＩ ＧＡ Ｔ Ａ Ｇ ） 和 １７ （ Ａ Ｔ Ｔ ＡＣ Ｔ ｒ Ｔ ＣＧ ＡＡ Ｔ Ｔ ２ ２ Ｒ Ｇ Ａ Ｇ．
Ｇ Ｔ Ｇ Ｃ Ｇ Ｇ Ａ ， 及 内 引 物 ９０ Ｃ Ｔ Ｔ 。 Ａ Ｃ Ｇ Ａ Ａ Ｇ Ｇ） 以 ７ Ｆ（ Ｃ Ａ Ｆ Ｇ Ｔ Ｇ Ａ Ａ Ｔ Ｔ Ｔ Ａ） １７ Ｒ 进 行 半 巢 式 Ｐ Ｒ Ａ Ｔ Ｇ Ａ Ｇ Ａ Ｇ Ｃ 和 ２２ Ｃ 扩增 ， 然后 分 别 以 内 切 酶 Ａｅ 和 Ｎ ｉ 酶 切 ２ｈ 酶 ｓ Ｉ ｃ Ｉ ， 切 产 物在 ３％ 的琼 脂 糖 凝 胶 上 进 行 电泳 观 察 ， 据 图 根 谱 分 型 ； 于 不 能 被 Ａｅ Ｉ Ｎ ｉＩ 切 的 Ｐ Ｒ产 物 ， 对 ｓ 和 ｃ 酶 Ｃ 再 用 Ｂ ｔ Ⅱ内切 酶 酶切 ； 于 还 不 能确 定 基 因 亚型 的 ｓＥ 对
黄 月华 梁敏 锋 杨海红 区映研 岑 均 华 周彬
广 州 医学 院 第 一附 蓓 医院 感 染 内科 （ 州 ５ ０２ ） 南 方 医科 大 学 南方 医院 感 染 内科 （ 州 ５ ０ １ ） 广 １ １０ ； 广 １５ ５
【 摘要 】 目的 探讨广 东地 区乙肝病毒 （ Ｂ’ｃ基 因亚型的分布与临床特点 。方法 Ｈ ＼）