NucliSENS Training miniMAG EasyQ HIV
HIV-1病毒载量检测及质量保证指南
Donald J. Brambilla 美国华盛顿大学新英格兰研究所
Francis F. Mandy 加拿大公共卫生局疾病预防控制中心国家免疫学实验室
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前言
随着 HIV-1 病毒载量检测在艾滋病临床辅助诊断和抗病毒治疗监测以及艾滋病科研工 作中的广泛应用，我国开展该项检测工作的实验室日益增多。自 1997 年艾滋病实验室首次 引进 HIV-1 病毒载量检测技术，截至 2007 年底，全国已经配备了近 120 台 HIV-1 病毒载量 检测仪，覆盖了疾控、医院、检疫、军队等系统。目前，虽然许多实验室已经将病毒载量检 测纳入艾滋病相关辅助诊断和治疗监测工作，但大多数实验室开展工作的时间较短，经验不 足，因此，急需加强该领域的培训和质量控制工作，以保证检测结果的准确性和可靠性。
此方法可分成四个步骤：核酸释放、提取、扩增和测定。扩增后的产物使用 NASBA QR 电化学发光（ECL）系统进行检测和定量，此系统包括亲和素标记的磁珠、生物素标记的核 苷酸片段（此片段可与新合成的 RNA 产物的一端互补结合）及可特异与四种产物结合的探针 （探针上标记有铷元素），这四种探针可分别与不同的 RNA 产物结合。将四种探针分别置于 不同的反应管内，在适当的条件下（410C）几种成分将结合在一起，形成复合体。这些复合 体可在 ECL 读数仪中被分别读取铷元素的激发信号，根据野生型病毒核酸测定值与其他三个 内标物测定值的比较可得到野生型病毒的拷贝数。
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根据《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》的要求 运输，并严格控制运输的冷冻状态，防止样品冻融。 3.5 样品的发送和接收
3.5.1 发送样品时必须填写样品 HIV-1 病毒载量检测样品送检及接收单（附表 2）。 3.5.2 接收样品时，核对样品数量，检查样品状况，按 HIV-1 病毒载量检测样品送检及接 收单（附表 2）核对。 3.5.3 样品管破损造成样品溢出、出现明显溶血、凝血的样品，不宜作 HIV-1 病毒载量 检测；如果样品已经融化， 4℃保存并尽快检测，记录冻融一次。
HIV抗体不确定的血清学特征及鉴别效果
HIV抗体不确定的血清学特征及鉴别效果【摘要】目的：分析hiv抗体不确定标本的血清学特征，探讨hiv抗体不确定结果的鉴别方法。
方法：对12例hiv抗体不确定孕妇的标本进行免疫印迹确认（wb）；观察12例孕妇hiv抗体的发展情况；比较条带免疫印迹法（lia）、hiv-1p24抗原检测法以及病毒载量法（vl）对hiv不确定标本的鉴别效果。
结果：12例产妇hiv 抗体p24、gp160+p24、gp160不确定所占比例最高；hiv抗体转阳率为8.33%。
结论：只有条带类型为gp160+p24不确定的孕妇会发生hiv抗体转阳，lia、vl实验检测方法能有效鉴别hiv抗体不确定孕妇感染情况。
【关键词】 hiv抗体不确定；免疫印迹法；条带免疫印迹法；病毒载量； hiv-1p24抗原检测hiv抗体不确定是指检测标本免疫印迹确认有条带出现，但条带不满足阳性标准。
本文对12例hiv抗体不确定标本的血清学特征进行分析，并总结鉴别方法，现报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选取2006年1-12月本市疾病预防控制中心艾滋病确认实验室收集的12例hiv抗体不确定的孕妇标本作为研究对象。
1.2 试剂来源 wb检测试剂来源于genelab公司；lia检测所需的inno-lia-1/2 score试剂、vl检测所需的nuclisens easyq试剂、hiv-1p24抗原检测所需的elisa双抗体夹心法试剂均来源于法国生物梅里埃公司。
1.3 检测方法本研究依据2004年版的《全国艾滋病检测技术规范》[1] ，对12例孕妇进行wb、lia、vl及hiv-1p24抗原检测，如随访期内hiv出现抗体阳性则报告阳性，对报告阳性标本行elisa 检测确诊，三阴性者报告阴性。
2 结果2.1 wb条带类型 12例hiv抗体不确定标本中共出现5种wb条带类型，其中p24、gp160+p24、gp160条带类型所占比例最高，分别为41.67%、25.00%、16.67%，p17+p24占6.25%；gp120+p24、p17+p24各占8.33%。
艾滋病病毒感染实验检测方法研究进展
艾滋病病毒感染实验检测方法研究进展刘凤艾滋病是人类免疫缺陷病毒（HIV）感染引起的一种获得性免疫缺陷病，是全球主要公共卫生问题。
截至2019年底，全球约有3 800 万人感染，其中仅有67%接受了抗逆转录病毒治疗（ART），仍有710 万感染者甚至不知道自己的感染状况[1]。
随着抗逆转录病毒治疗技术的发展，HIV感染已成为一种可控制的慢性病，感染者能够过上长期的健康生活，寿命与未感染人群无明显差异。
联合国艾滋病规划署的3个90%目标中，首个即是90%的艾滋病病毒感染者知道自己的感染状况，而实验室检测是确定艾滋病感染的唯一办法。
随着科学的进步，HIV检测引入了许多新方法，取得了长足的进步。
本文将近年来艾滋病病毒的血清学检测和核酸检测方法的研究进展综述如下。
1 血清学检测1.1抗体检测或抗体抗原联合检测抗体检测是实验室最常用、最主要也是灵敏度和特异度均较高的HIV 检测方法。
1.1.1酶联免疫吸附试验（ELISA）中国于1985年出现艾滋病病例时开始研制第1代ELISA试剂，至今已发展到第5代，每一代新试剂都旨在克服前一代的不足。
第1代和第2代试剂只能检测IgG抗体，窗口期分别为6～8周和4～5周。
第3代试剂可检测到HIV-1 IgM抗体，窗口期为3～4周。
第4代试剂是一种HIV-1/HIV-2抗体与p24抗原的联合检测方法，窗口期为2～3周。
目前，我国HIV筛查普遍使用第3代试剂，也有部分地区使用第4代试剂，献血员的筛查使用第4代试剂，以提高输血的安全性。
2015年美国FDA批准了第5代试剂BioPlex 2200 HIV Ag-Ab assay用于临床HIV筛查，此试剂采用多重磁珠流式免疫测定的方法，可同时定性检测并准确区分HIV-1抗体、HIV-2抗体和p24抗原，可用于诊断HIV-1急性感染[2]，但在公共卫生领域中尚未广泛使用。
第5代试剂目前在中国未获得国家药品监督管理局（NMPA）批准。
病毒载量检测方法及其意义
工效率
6.5小时48份标本
48小时192份标本
二、病毒载量检测的意义
早期诊断 婴儿的早期诊断：感染HIV的母亲所生婴儿小 于18个月时，不能按照常规检测程序进行抗体检测 来确证是否感染了HIV。这种情况下，采集婴儿不 同时间的样本进行HIV核酸检测。 也可使用集合法对采供血机构的原料血浆及 HIV抗体阴性的高危人群样品进行核酸检测，及时 发现窗口期感染者，降低“残余危险度”，预防传 播。
指导抗病毒治疗及疗效判定
通常在病毒载量达到一定水平后（如>3500050000拷贝/毫升）抗病毒治疗才显示良好的 治疗效果。治疗后通过病毒水平的检测能够 确定治疗是否有效。理想的结果是治疗24周 后，病毒水平会控制在检测线以下。
.耐药性监测
可用于HIV耐药性检测和监测。治疗后病毒载 量得不到有效控制时被认为治疗失败。引起 治疗失败的原因之一是病毒对治疗药物的敏 感性降低或不敏感，也就是产生了耐药。对 病毒载量>1000拷贝/毫升的样本进行耐药性 检测对临床医生修改治疗方案有一定的帮助。
Roche
Simens(Bayer)
RT-PCR bDNA 产物为DNA，易发生污染，不对目标进行扩增，只进 对实验室区域划分严格 行信号放大
检测
辣根过氧化物酶标记检测 探针，TMB底物显色 用样品OD值和定标物OD 值的比值计算结果，需要 稀释扩增产物，检测范围 小，并且受酶活性、底物 氧化显色的影响 每次检测12或24个标本 需要设一个阴性、一个弱 阳性和一个强阳性对照 48人份/盒 每次试验12人份分装 一旦打开试剂盒，需要在 1个月内使用完48人份， 否则试剂失效 8小时24份标本
标记的探针与该复合体杂交结合。与化学发光底物共同孵育，所产生的光强度与
包病毒载量试剂梅里艾
包4-病毒载量试剂（梅里艾）
生物梅里埃HIV病毒载量试剂技术参数
全自动技术指标
HIV病毒载量检测
生产厂家：生物梅里埃公司
品牌： NucliSens
型号： EasyQ HIV-1
原产国：荷兰
招标要求
1、用于定量检测HIV病毒载量
2、原理：实时NASBA扩增检测
3、线性范围：至少4个数量级（不需要稀释检测）
4、线性动力学范围50 - 10,000,000 IU/mL, 用国际单位/毫升(IU/mL)报告结果
5、特异性：99.7%（95%可信区间98.5-100%）
6、精密度：50 - 3,000,000 IU/mL，0.12 log，≤1,000 IU/mL，0.28 log
7、样品体积：10-2000微升
8、样品处理能力：可以同时提取24个样品中的核酸，可以同时检测48个样品
9、核酸提取速度：24个样品的核酸提取时间约40分钟，一个操作员配合一部提纯仪于8小时内能完成168个标本的提取
10、检测速度： 48个标本扩增检测时间约1小时
11、试剂盒包装规格：扩增检测试剂48人份/盒，核酸提取试剂384人份/盒
12、检测亚型：HIV-1 M组 A-J亚型
13、仪器和HIV病毒载量试剂必须通过国家食品药品监督管理局进口注册
14、供货计划：按用户要求数量分批次供货，到货试剂有效期大于10个月。
DBS 提取步骤
5.2 干血斑样本5.2.1 一般程序说明●在采集卡上标出正确的样本名称和日期●不得重新使用干燥剂●采集卡应分开包装（例如每个信封一张采集卡，或每个塑料袋一张采集卡），以避免交叉污染。
5.2.2 必需（但没有提供的）材料●Whatman 903®样本采集纸（例如Proteinsaver TM 903®卡）●袋装干燥剂（MiniPax®吸附剂袋2克装，MultiSorb Technologies)●信封或塑料袋●NucliSENS®裂解缓冲液2ml(生物梅里埃）●无滤芯的2-100µl的移液器吸头（例如Eppendorf # 0030 073 223)●有滤芯的5ml移液器吸头（例如Labsystems # 94052550)●用于NucliSENS®裂解缓冲液管的离心机●滚轴混合机，采用振动和滚动的运动，用于平缓的搅拌（例如Stuart SRT6,Sigma-Aldrich)●剪刀●有盖子的5ml试管（例如VWR #2110047/ #2110039)5.2.3 DBS采集把全血采集到装有EDTA抗凝血剂的试管中，同一天，使用已校准的装置（移液器）把50µl血液点到Whatman 903®样本采集纸上（例如 Proteinsaver TM 903®卡）。
注意：确保一次操作就充满每个血液印记圈。
防止超出圆圈外。
注意：避免接触或擦抹血液点。
需要两个点用于以下描述的核酸提取步骤。
如果血液点无法在抽血后立即制备，血液试管应储存在冰箱中超过24小时，直到能够点血为止。
在室温下 (15-30 °C)滤纸干燥至少3小时（最长时间为整夜）。
5.2.4 DBS储存把含有干血斑的滤纸与袋装干燥剂一起在室温下(15-30°C)装在透气的袋子内，最多储存9个月。
防止储存于高湿度条件和/或高温条件，因为这会对于样本稳定性产生不利影响。
使用四代HIV抗原抗体试剂筛查联合蛋白印迹或核酸补充实验的检测对降低漏诊率的价值分析
使用四代 HIV 抗原抗体试剂筛查联合蛋白印迹或核酸补充实验的检测对降低漏诊率的价值分析2.航天中心医院北京 100049【摘要】：目的：探索使用四代HIV抗原抗体试剂筛查联合蛋白印迹或核酸补充实验的检测对降低漏诊率的价值。
方法：本次研究对象为120份艾滋病筛查实验室送检标本，均进行四代HIV抗原抗体检测，随后再运用蛋白印迹和核酸检测法进行补充实验，分析各项检测的符合率。
结果：120例检测标本中，蛋白印迹实验HIV抗体阳性率为66.67%，蛋白印迹试验联合核酸检测HIV阳性率为78.33%；在88例三代阳性+四代阳性标本中，蛋白印迹试验HIV阳性率为90.91%，蛋白印迹试验联合核酸检测97.73%。
结论：面对四代HIV抗原抗体检测有反应的标本时，单方面运用蛋白印迹进行补充实验检测仍存在漏检问题，因此需联合HIV核酸实验，从而提高准确率。
【关键词】：四代HIV抗原抗体；蛋白印迹；核酸；检测；漏诊率四代HIV（艾滋病病毒）抗原抗体能够有效缩短艾滋病检测的窗口期，敏感性较高，且能够同时对P24抗原和HIV抗体进行检测，近年来开始广泛推广于临床。
蛋白印迹试验无法对P24抗原进行检测，能够为抗体检测提供依据，若病变为P24抗原产生的炎性反应，蛋白印迹试验无法确证，从而导致漏诊。
随着近年来，医疗技术的完善和进步，核酸检测开始广泛推广于临床，第四代HIV抗原抗体检测能够作为初筛手段方案，但在补充实验过程中，运用核酸联合蛋白印迹实验，能够真正实现对HIV感染的早期确诊[1]。
而本文进一步探索HIV核酸、蛋白印迹、四代HIV抗原抗体联合检测的优势，如下文报道。
1资料和方法1.1资料将120份艾滋病筛查实验室送检标本为试验对象，此次试验均在2016年2月10日至2020年2月19日期间完成。
本次的送检标本经过雅培化学发光试剂筛查为有反应性。
1.2方法检测方法：本次使用的第四代HIV检测试剂为雅培公司提供的Rchitect HIVAg/Ab COMBO，复检时使用北京万泰胶体硒试剂、杭州艾博乳胶法试剂、英科新创和北京万泰三代酶联免疫吸附试验，确证试剂由MP公司提供的HIV BLOT2.2；HIV-1 2.0试剂由梅里埃公司提供NUCLISENS EASYQ ，用于检测病毒核酸；NU-CLISEMS EASYQ 病毒载量仪、TECAN PROFIBLOT 48全自动蛋白印迹仪、雅培公司提供Architect I2000SR化学发光仪，本次运用的所有试剂均进行校准检测，均在合理范围。
迷你临床演练评量Mini-CEX 于英
√也是一种教与学。
有效回馈
√通常是描述性的而非批评性的； √具体的建议； √对学习过程中的行为给予回馈，而非就结果； √适当的时机给予回馈；
√简洁明确的回馈，避免过于冗长；
√具正面性及纠正性的回馈；
√预先的指导或练习；
√发展学生自主回馈机制的能力。
双向回馈指引
√开放性问题开始； √针对该次评量过程表现； √依据学习目标及内容予以回馈； √行为表现以正向鼓励态度予以指导建议；
美国内科医学会发展推荐的评量工具；
已于21所医院进行指导研究，颇获好评； 信效度优于传统评量方法； 2004年台湾中医药大学陈伟德教授翻译成中文，在港台 实施，并作为住院医师和医学生临床评估和教学的工具； 2009年，岳阳医学院、华山医院、中日友好医院、哈尔 滨医科大学等陆续实施；
什么是mini-CEX
mini-CEX执行方式
mini-CEX执行方式
时间 人员 事情 地点 物件
随时，每次约20-30分钟 1位临床教师、学员及病人 直接观察学员例行而重点式 的照顾过程 门诊、急诊、ICU、病房 评量及回馈记录
评 量 表 和 细 则
mini-CEX执行评论时机
每月分别执行一次迷你临床演练评量 主要临床教师及学员能互相配合时间，即可进行 每年至少接受4次以上 评量后的表单可有学员存放于学习历程资料册
mini-CEX指引-5
咨商卫教
解释检查或处置的基本理由
获得病人同意
有关处置之教育与咨商
mini-CEX指引-5
咨商卫教
√尊重患者的决定权；
√对利弊进行合理而适度的分析告知；
√对手术方案的成功率给予科学而审慎的解释； √判断患者对所做决定是否真实理解； √尝试了解患者及家属对手术的期望值和对治 疗失败的接受度；
法国生物梅里埃介绍
A world leader in in vitro diagnosticsContribute to the improvement of public health worldwide through in vitro diagnosticsAnalyzing a food, drug or air sample to monitor and confirm the quality of the production processThe Company and its Market先生Mérieux)开创了科学和工业应用领域，创建梅里埃基金会创立了生物梅里埃——所致力发展和生产用于细菌学、血清学、临床生化学和凝血方面的标准化试剂的化验所，进而又把它扩展为国际性公司¾1897: Marcel Mérieux creates the “Institut Biologique Mérieux”,The Start of the Mérieux Venture¾1917: Installation in Marcy l’Etoile9Focus on 4 pathologies:tuberculosis,diphtheria, tetanus and puerperal streptococcus9Production of tuberculin(Koch’s bacillus)9Production of sera (foot-and-mouth disease)9Microbiological analyses1911: Marcel Mérieux inBrings Industrialization to Biology¾1937: Upon his fatherMarcel’s death, CharlesMérieux took over ashead of theInstitut Mérieux¾1947: introduction of invitro culture techniquesdeveloped in well-knownuniversities around theworld (Reiks University,Prof. Frenkel, JonasSalk…)1942: Dr. Charles Mérieux at a laboratory in Marcy l’EtoileBanner for vaccination campaign in Rio(in the middle) and of which he was掌控了公司的绝大多数股份，至此BD Mérieux成为了收购麦道公司的1994增加对生物梅里埃的控股并收购TransgeneApplications & ProductsBecome the undisputed leader with full microbiology lab automationVITEK ®2 CompactDiversiLab ®VIDAS ®API ®袋装肉汤致病菌检测TEMPO 卫生指标菌群定量VITEK ®2 Compact菌株分型检测环境监测BioBall BacT/ALERT Count-Tact ®Air/DEAL ®API ®Global Customer Service& Training¾Product trainingTraining by University professorsEditions (more than 6 subjectsManufacturing & QualityFlorence (Italy)Basingstoke(UK)Durham (USA)Rio de Janeiro(Brazil)Brisbane (Australia)Saint Louis (USA)GrenobleSidney (Australia)Portland (USA)Lombard (USA)2010Tres Cantos (Spain)Shanghai (China)SitesbioMérieux La BalmebioMérieux Marcy l’EtoileIDC –St Vulbas bioMérieux CraponneMarcy l’EtoileFranceHead Office¾Site since1971¾Staff9~ 1,150 people*¾Activities9bioMérieux administration9Research9Production9Quality Control laboratory forclinical chemistry, immunoassaysand microbiology¾Products9Clinical chemistry9Immunoserology9VIDAS®reagents31。
分子生物学技术在感染性疾病诊断中的应用进展
ＤＯＩ：１０．１３６０２／ｊ．ｃｎｋｉ．ｊｃｌｓ．２０２１．０２．０１·专家论坛·分子生物学技术在感染性疾病诊断中的应用进展 作者简介：吕晶南，１９８９年生，女，技师，硕士，从事临床微生物检验工作。
通信作者：余方友，主任技师，博士研究生导师，博士，Ｅ ｍａｉｌ：ｗｚｊｘｙｆｙ＠１６３．ｃｏｍ。
吕晶南１，余方友２（１．苏州大学第二附属医院检验科，江苏苏州２１５００４；２．同济大学附属上海市肺科医院检验科，上海２０００８２）摘要：临床常见病原菌的检测方法中，传统的病原菌分离培养及表型鉴定方法检测周期耗时长，且操作繁琐、敏感性低、特异性差。
相比这下，分子诊断技术可有效弥补传统方法的不足，尤其是２０１９新型冠状病毒（２０１９ ｎＣｏＶ）的暴发，使分子生物学理论和技术飞速发展并得到广泛应用，对指导临床预防、诊断、治疗及疗效评价起到重要的作用。
该文从呼吸道感染、中枢神经系统感染、血流感染及胃肠道感染４个方面系统化介绍核酸检测技术在病原体鉴定中的应用，同时阐述这些方法在临床实验室应用时可能遇到的挑战和机遇。
关键词：分子生物学技术；分子诊断技术；感染性疾病；病毒中图分类号：Ｒ４４６．５ 文献标志码：Ａ ２０１９新型冠状病毒（２０１９ ｎＣｏＶ）的暴发，使分子生物学技术在临床感染性疾病诊断、治疗、疗效评价及预防等方面得到前所未有的重视和飞速发展。
本文就近年来基于核酸检测技术鉴定病原体进行系统化讨论，同时也对这些方法在临床实验室应用时可能遇到的挑战和机遇进行阐述。
１ 呼吸道感染１．１ 病毒 呼吸道病毒的感染对全球流行病公共卫生可引起严重的威胁，如１９１８年甲型流感大流行，２００３年严重急性呼吸系统综合征（ＳＡＲＳ）冠状病毒暴发，２００９年甲型Ｈ１Ｎ１流感引起的大流行，２０１２年阿拉伯半岛出现由冠状病毒引起的中东呼吸综合征（ＭＥＲＳ），２０１９年２０１９ ｎＣｏＶ的暴发。
值得注意的是，仅基于体征和症状区分病毒来源较困难，同时不同病毒感染采取的治疗方案不同，因此，呼吸道病毒对人类健康构成严重威胁［１］。
RT-PCR和NASBA方法检测52例HIVAIDS病人HIV-1 RNA定量结果的比较
DOI:10.13419/ki.aids.2020.12.23•短篇报道•RT-PCR和NASBA方法检测52例HIV/AIDS病人HIV1RNA定量结果的比较严亚军，桂希恩，柯亨宁，冯玲，杨蓉蓉(武汉大学中南医院感染科，湖北武汉430071)关键词：1型艾滋病病毒；反转录荧光定量聚合酶链反应试验；核酸序列依赖性扩增试验中图分类号：R373.9文献标志码：B文章编号：1672-5662(2020)12-1355-021型艾滋病病毒核糖核酸(HIV-1RNA)定量检测，不仅可以预测H1V-1感染者疾病进展、评估抗病毒治疗效果及监测耐药，而且也可作为HIV感染辅助诊断，用于v18月龄婴幼儿的早期诊断、急性期/窗口期及晚期HIV感染者诊断Z。
因此HIV-1RNA定量是艾滋病防治工作中一项重要的实验室检测指标。
目前，国际上检测HIV-1RNA定量的方法主要有：反转录荧光定量聚合酶链反应试验(RT-PCR)、核酸序列依赖性扩增试验(NASBA)及分支脱氧核糖核酸信号放大试验(bDNA),由于这三种方法的原理不同而导致其敏感性均不同［4,o 本研究采用RT-PCR和NASBA方法平行检测52例HIV-1感染者血浆中的RNA定量并进行比较，以探讨两种方法检测HIV-1RNA定量的相关性及一致性。
1对象与方法1.1对象2018年1—12月，武汉大学中南医院感染科收治的HIV-1感染者，所有患者均经酶联免疫吸附试验初筛和蛋白印迹试验确证，共52例。
其中未治疗的(选择新发现HIV-1感染者)42例，治疗的(选择服药依从性好，而且治疗M1年HIV-1感染者)10例。
1.2方法1)用一次性EDTA-K2抗凝真空采血管采集外周静脉血5mL,血样标本在当天6h内3000r/min 离心15min,分离的血浆冻存于-70七超低温冰箱备用检测。
2)RT-PCR法检测HIV-1RNA定量采用美国罗氏公司的COBAS AmpliPrep/COBAS Taqman全自动分析系统及配套的试剂盒，该方法检测靶点为Gag/LTR、最低检测限为20拷贝/mL。
提高胰岛素敏感度的运动方法
提高胰岛素敏感度的运动方法英文回答：To improve insulin sensitivity, there are several exercise methods that can be beneficial. Regular physical activity plays a crucial role in increasing insulin sensitivity and managing blood sugar levels. Here are some effective exercise methods:1. Aerobic Exercise: Engaging in aerobic exercises such as brisk walking, jogging, cycling, swimming, or dancing can help improve insulin sensitivity. These activities increase heart rate and require the body to use glucose for energy, thus improving insulin sensitivity over time.For example, I often go for a jog in the morning before work. Not only does it help me stay fit, but it also improves my insulin sensitivity. I have noticed that my blood sugar levels are more stable throughout the day when I include aerobic exercise in my routine.2. Resistance Training: Including resistance training or strength training exercises in your workout routine can also improve insulin sensitivity. These exercises involve the use of weights or resistance bands to build muscle strength and increase muscle mass.For instance, I regularly do weightlifting at the gym. It not only helps me build muscle and increase my strength but also improves my insulin sensitivity. I have noticed that my body responds better to insulin after incorporating resistance training into my exercise routine.3. High-Intensity Interval Training (HIIT): HIIT workouts involve short bursts of intense exercise followed by short recovery periods. This type of training has been shown to improve insulin sensitivity and promote fat loss.An example of a HIIT workout is sprinting for 30 seconds, followed by a 1-minute recovery period of walking or light jogging. Repeat this cycle for a total of 10-15 minutes. I find HIIT workouts to be time-efficient andeffective in improving my insulin sensitivity.4. Yoga and Pilates: Practicing yoga and Pilates can also help improve insulin sensitivity. These activities focus on flexibility, balance, and core strength. They can help reduce stress levels, which is beneficial for managing blood sugar levels.I enjoy attending yoga classes twice a week. Not only does it help me relax and reduce stress, but it also improves my insulin sensitivity. I have noticed that my blood sugar levels are more stable on the days when I practice yoga.中文回答：提高胰岛素敏感度的运动方法有很多种。
两种仪器定量检测HIV-1病毒载量比较研究
两种仪器定量检测HIV-1病毒载量比较研究李丽华;余婷婷;丁彩梅;张润武;杨冬梅;王红英;白经;普冬【摘要】目的比较雅培m2000和罗氏AmpliPrep/TaqMan两种全自动分析系统定量检测人类免疫缺陷病毒(HIV)-1病毒载量的一致性,为临床选择高精度检测方法提供参考.方法对30例艾滋病患者血浆标本同时采用雅培m2000全自动分析系统和罗氏AmpliPrep/TaqMan全自动分析仪进行病毒载量测定,比较二者检出率、相关性和一致性.结果雅培m2000全自动分析系统和罗氏AmpliPrep/TaqMan全自动分析仪测得HIV-1病毒载量平均值分别为(2.990±0.284)log copy/mL和(3.100±0.244)log copy/mL,差异无统计学意义(t=1.446,P>0.05);两种检测系统检测出的病毒载量有明显相关性(r=0.968,P<0.001),且与患者的CD4+T细胞数及CD4+/CD8+呈明显直线负相关.结论雅培m2000全自动分析系统和罗氏AmpliPrep/TaqMan全自动分析仪检测HIV-1病毒载量具有较好的相关性和一致性,在实际工作中,均可作为高精度检测HIV-1的可靠方法.【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2018(015)024【总页数】4页(P3678-3681)【关键词】HIV病毒载量;雅培m2000全自动分析系统;罗氏AmpliPrep/TaqMan 全自动分析仪;高精度【作者】李丽华;余婷婷;丁彩梅;张润武;杨冬梅;王红英;白经;普冬【作者单位】云南省昆明市第三人民医院检验科 650041;云南省昆明市第三人民医院检验科 650041;云南省昆明市第三人民医院检验科 650041;云南省昆明市第三人民医院检验科 650041;云南省昆明市第三人民医院检验科 650041;云南省昆明市第三人民医院检验科 650041;云南省昆明市第三人民医院检验科 650041;云南省昆明市第三人民医院检验科 650041【正文语种】中文【中图分类】R33随着艾滋病(AIDS)防治工作的不断强化，AIDS实验室检测技术也在不断发展，根据《艾滋病资料手册》规定[1]，接受治疗的AIDS患者必须定期检测病毒载量，人类免疫缺陷病毒(HIV)载量检测被认为是目前预示疾病演变、提示开始临床治疗和评估疗效的有效指征[2]。
艾滋病诊疗指南第三版(2015版)
ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４－２３９７．２０１５．０５．００１通信作者：李太生，Ｅｍａｉｌ：ｌｉｔｓｈ＠２６３．ｎｅｔ引用格式：中华医学会感染病学分会艾滋病学组．艾滋病诊疗指南第三版（２０１５版）［Ｊ］．中华临床感染病杂志，２０１５，８（５）：３８５－４０１．・标准与指南・艾滋病诊疗指南第三版（２０１５版）中华医学会感染病学分会艾滋病学组【关键词】 获得性免疫缺陷综合征； ＨＩＶ； 诊断； 治疗； 指南Third edition of the guidelines for diagnosis and treatment of HIV／AIDS（2015） AIDS Professional Group，Society of Infectious Diseases，Chinese Medical Association．【Key words】 Ａｃｑｕｉｒｅｄｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｓｙｎｄｒｏｍｅ； ＨＩＶ；Ｄｉｓｇｎｏｓｉｓ； Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ； ＧｕｉｄｅｌｉｎｅCorresponding author：Li Taisheng，Email：litsh＠263．net艾滋病，即获得性免疫缺陷综合征（Ａｃｑｕｉｒｅｄｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＡＩＤＳ），其病原体为人类免疫缺陷病毒（Ｈｕｍａｎｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｖｉｒｕｓ，ＨＩＶ），亦称艾滋病病毒。
目前，艾滋病已成为严重威胁我国公众健康的重要公共卫生问题。
中华医学会感染病学分会艾滋病学组牵头，于２００５年制订了我国枟艾滋病诊疗指南枠（以下简称枟指南枠）第一版，２０１１年进行了更新［１］。
第三版枟指南枠是在２０１１年第二版枟指南枠的基础上参照国内外最新研究成果和国内临床实践修订而成。
本指南将根据最新的临床医学证据进行定期的修改和更新。
1 流行病学ＨＩＶ主要存在于感染者和患者的血液、精液、阴道分泌物、胸腹水、脑脊液和乳汁中，经以下三种途径传播：性接触（包括同性、异性和双性性接触），血液及血制品（包括共用针具静脉注射毒品、介入性医疗操作、纹身等）和母婴传播（包括经胎盘、分娩时和哺乳传播）。
NucliSENSTrainingminiMAGEasyQHIV
2005/07/15GCS-TM0311 V312005/07/15GCS-TM0311 V32什么是HIV病毒载量检测定义测量每毫升血液里病毒的数量。
临床意义1、患者身体情况基础水平测定。
2、了解治疗前的基线水平。
3、治疗过程中疗效评估和监测。
检测结果低10000copies/ml 高100000copies/ml2005/07/15GCS-TM0311 V33卫生部HIV病毒载量监测指南检测次数??抗病毒治疗前进行病毒载量检测??治疗基线及治疗后每3-6 个月但根据目前国家现有资源至少应在治疗后6个月检测一次并在之后每年检测一次。
监测病毒载量??治疗前做基线病毒载量检测便于观测抗病毒治疗后病毒抑制的效果??治疗的第30天病毒载量下降至少0.51.0 log10 拷贝/ml 预示着病毒被完全抑制??治疗4 个月16周时病毒载量应该低于检测下限。
??如果治疗6 个月时病毒载量还没有低于检测下限仔细寻找原因更换治疗方案有条件地区推荐在1个月后应该重复检测病毒载量以观察是否仍高于检测下限。
??患者在抗病毒治疗46 个月时病毒载量还没有低于检测下限时均应报告临床AIDS 专家。
2005/07/15GCS-TM0311 V34其他国家抗HIV治疗知道方针美国卫生部DHHS抗HIV治疗指导方针2007年??首次接受抗HIV治疗前和治疗后的2-8周各1次??接受抗HIV治疗开始后16-24周1次??若HIV VL最低检测限度治疗有效??若HIV VL可被检测出调整治疗方案。
??当病人抗HIV治疗有效并持续治疗后需要每3-4个月进行一次病毒载量检测。
南非卫生部抗HIV治疗指导方针??接受抗HIV治疗的病人每6个月进行一次病毒载量检测??若接受治疗的病人HIV VL5000拷贝/ml改为每3个月进行一次病毒载量检测直到HIV VL5000拷贝/ml后改回每6个月检测一次。
英国HIV协会治疗指导方针??未开始治疗的病人需要每年进行2-4次病毒载量检测??开始治疗的病人需要在治疗后1个月和3个月进行病毒载量检测然后持续每年4次检测。
HIV-1抗原检测技术规范
HIV-1抗原检测技术规范1 范围本章规定了HIV-1P24抗原检测的方法和用途。
适用于对人血液标本和病毒培养上清液中HIV-1P24抗原的检测。
2 规范性引用文件NIAID，Virology Manual for HIV Laboratory, NIH Publication,No.97-3828, Jan 19973 HIV－1P24抗原检测的意义3.1 HIV-1感染窗口期、HIV抗体不确定或HIV-1阳性母亲所生婴儿的鉴别诊断。
3.2 第四代HIV检测试剂的阳性结果的辅助诊断。
3.3 监测病程进展或抗病毒治疗效果。
3.4 HIV分离培养，病毒复制状况的监测。
4 实验室要求同HIV抗体检测。
5 检测方法及程序5.1 试剂：抗体夹心ELISA方法，应使用经国家药品监督管理局批准注册的试剂。
5.2 样品：血清、血浆或病毒培养上清液。
5.3 定性检测5.3.1 筛选试验按照试剂盒说明书提供的标准判断有反应或无反应。
5.3.2 确证试验是P24抗原的中和试验，用于排除筛选试验的假阳性。
待检样品先与中和剂（P24 抗原的抗体）共同孵育，如果样品中存在P24抗原，中和抗体将与之结合形成复合物，而不能与固相载体上的捕获抗体结合。
然后，用这样处理过的样品重复筛选实验的步骤，同时做一孔未中和的原始样品对照，将中和与未中和孔的OD值进行比较，如果中和孔的OD 值下降50 % 以上，认为样品中的P24 抗原是真正的阳性；如果中和孔没有出现OD值的下降，认为P24抗原的反应性可能是假阳性，需要做RNA检测或随访做进一步确证。
5.4 定量检测将 P24抗原的标准物质稀释成包含0.0和125pg/ml 二个浓度在内的六个不同浓度的系列标准，进行检测。
以横坐标为P24抗原的浓度（pg/ml ），纵坐标为OD值，绘制出标准曲线。
测出未知标本的OD值以后，在标准曲线上查出抗原的浓度。
如果未知标本的OD值超出标准曲线上最高抗原浓度的OD值，则需用正常人血清将标本稀释以后再行检测。
迷你临床演练评量MiniCEX讲课文档
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Mini-CEX－迷你型的多次重点式评量
1. 一位临床教师，一位受训学员，一位病人（新/老） 2. 门诊、急诊或病房 3. 直接观察重点式的临床诊疗工作（15-20分钟） 4. 结构式表单上给予评分和即时的回馈（5-10分钟）
教师姓名：
患者信息：门诊/住院号：
姓名：
性别： 年龄：
主要诊断：1
2
3
初/复诊：初诊□ 复诊□ 就诊地点：住院□ 门诊□ 家床□ 站点□
病情复杂程度：低□ 中□ 高□
演练及评估重点：①病史询问□ ②体格检查□ ③人文关怀□ ④临床判断□ ⑤卫教咨询□ ⑥组织效能□ ⑦整体表现□
有待改进
合格
优良
□称呼病人 □自我介绍 □能鼓励病人叙述病史 □适当的提问及引导以获得正确及足够的信息 □对病人的情绪及肢体语言能有适当的回应
Mini-CEX的特点
可行性高
——与临床例行工作同步进行，不致于增加额外负担
信效度高
——学员参加多次测试，经由不同主治医师评量
Mini-CEX的信度
Changes in reliability as a function of the observed number of encounters
教師簽章：______________________ 學員簽章：________________________
考核项目 1．病史询问 2．体格检查
3．人文关怀 4．临床判断 5．卫教咨询 6．组织效能 7．整体表现
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2005/07/15
什么是HIV病毒载量检测？
定义：测量每毫升血液里病毒的数量。
临床意义： 1、患者身体情况基础水平测定。 2、了解治疗前的基线水平。 3、治疗过程中疗效评估和监测。
检测结果： 低：＜10,000copies/ml 高：＞100,000copies/ml
NucliSens EasyQ SARS Reagents (RUO) NucliSens EasyQ 人体偏肺病毒试剂 (CE) NucliSens EasyQ RSV A+B (CE)
NucliSens EasyQ H5 N1
NucliSens EasyQ easyMAG (CE/SDA)
NucliSens EasyQ HSV 1/2
2005/07/15
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bioMérieux NAD发展历程
1990 1994
Start R&D • 专利注册 • 系统研发
成品推向市场: NASBA HIV-1 QT
1997 第二代试剂:NucliSens HIV-1 QT
1998 NucliSens 核酸提纯仪及 CMV pp67 1999 NucliSens 基础试剂盒及 HIV-1 QL 2004 第三代试剂 (多中心评估)
– NucliSens EasyQ HIV-1 (实时)
2004
Basic Kit / TSRs concept NucliSens EasyQ 肠病毒 (CE) NucliSens EasyQ 磁性硅胶提纯试剂 NucliSens EasyQ MINI MAG (CE/SDA)
NucliSens EasyQ HPV
……
NucliSens EasyQ® test menu
➢ Available :
✓ NucliSens EasyQ® SARS ( RUO ) ✓ NucliSens EasyQ® H5N1 ( RUO ) ✓ NucliSens EasyQ® RSV (ASR CE) ✓ NucliSens EasyQ® hMPV (ASR) * ✓ NucliSens EasyQ® Enterovirus (ASR CE) ✓ NucliSens EasyQ® HIV-1 v1.2 Viral Load (CE) * ✓ NucliSens EasyQ® Chlamydia pneumoniae (ASR) * ✓ NucliSens EasyQ® Mycoplasma pneumoniae (ASR) * ✓ NucliSens EasyQ® HSV 1/2 (ASR) *
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核酸提取设备
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EasyQ 核酸实时扩增检测设备
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分子生物学产品系列
➢ NucliSens 核酸提纯 :
扩增/检测 : 实时扩增/检测 :
NucliSens miniMAG NucliSens easyMAG NucliSens ECL NucliSens EasyQ
* Launched in 2006 * ASR: Analyte Specific Reagent
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NucliSens EasyQ® test menu
➢Coming soon:
expected
✓ NucliSens EasyQ® HPV (CE)
04-07
✓ NucliSens EasyLINK
07-07*
✓ NucliSens EasyQ® hMPV (ASR CE)
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南非卫生部抗HIV治疗指导方针
• 接受抗HIV治疗的病人每6个月进行一次病毒载量检测； • 若接受治疗的病人HIV VL＞5000拷贝/ml，改为每3个月进行一次病毒载量检测， 直到HIV VL＜5000拷贝/ml后改回每6个月检测一次。
英国HIV协会治疗指导方针
• 未开始治疗的病人需要每年进行2-4次病毒载量检测； • 开始治疗的病人需要在治疗后1个月和3个月进行病毒载量检测，然后持续每年4 次检测。
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其他国家抗HIV治疗知道方针
美国卫生部（DHHS）抗HIV治疗指导方针（2007年）
• 首次接受抗HIV治疗前和治疗后的2-8周，各1次； • 接受抗HIV治疗开始后16-24周，1次； • 若HIV VL＜最低检测限度，治疗有效； • 若HIV VL可被检测出，调整治疗方案。 • 当病人抗HIV治疗有效，并持续治疗后，需要每3-4个月进行一次病毒载量检测。
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卫生部HIV病毒载量监测指南
检测次数
• 抗病毒治疗前进行病毒载量检测； • 治疗基线及治疗后每3-6 个月，但根据目前国家现有资源，至少应在治疗 后6个月检测一次，并在之后每年检测一次。
监测病毒载量：
• 治疗前做基线病毒载量检测，便于观测抗病毒治疗后病毒抑制的效果； • 治疗的第30 天，病毒载量下降至少0.5～1.0 log10 拷贝/ml 预示着病毒被 完全抑制； • 治疗4 个月（16周）时，病毒载量应该低于检测下限。 • 如果治疗6 个月时，病毒载量还没有低于检测下限，仔细寻找原因，更 换治疗方案；有条件地区推荐在1个月后应该重复检测病毒载量，以观察 是否仍高于检测下限。 • 患者在抗病毒治疗4～6 个月时病毒载量还没有低于检测下限时，均应报 告临床AIDS 专家。
➢ DiversiLab
➢ DNA Chips (基因芯片)
高密度
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低密度
ApiBio
➢ Gen Probe
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Assays
• HIV-1 • Enterovirus • RSV A + B • hMPV • SARS CoV • H5N1 Influenza • Atypical lungpanel • HSV 1/2