一株来源于酒曲的纤溶酶产生茵的鉴定及其酶学性质
1株纤溶酶菌株的筛选鉴定及提高产酶量的方法
产纤溶酶菌种的鉴定及纤溶酶的分离纯化
片断编码 ２ ５ ７ 个氨基酸残基 ， 四川大学彭 勇等 与
从解 淀 粉芽 孢杆 菌 中获得 的纤溶 酶 Ｂ —Ｆ ＡＤ Ｅ有 两个
作者简介 ：范晓丹 （ ９０ ） 女 ， 士生 ， 要从 事 酶工 程 １８ 一 ， 博 主
研 究 ． — ｉ：ｉ ｄｎ＠ １６ ｃｍ Ｅｍａ ｘ ｏａ ｆ ２ ．ｏ ｌ ａ
（ 华南理工 大学 生物科学与工程学 院 ， 广东 广州 ５ ０４ ） １６ ０
摘
要 ： 了获得 纯纤溶酶并探讨其酶学性质 ， 为 从广泛收集的豆豉 中筛选到一株具有 高
产 纤溶酶 能 力的 菌株 ， 经鉴 定 为枯 草 芽孢 杆 菌． 该 茵 突 变株 Ｄ 一２ ８的发 酵液 经 离心 将 Ｃ １Ｎ 除 茵 、 酸铵 分级 沉 淀 、 Ｅ Ｅ Ｓｐ ａｏｅＦ ｓ Ｆｏ 硫 Ｄ Ａ —ｅ ｈｒｓ ａｔ ｌ ｗ和 Ｃ Ｓｐ ａｏｅＦ ｓ Ｆｏ 离子 交换 层 Ｍ—ｅ ｈｒｓ ａｔ ｌ ｗ
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华 南 理 工 大 学 学 报 （自 然 科 学 版 ）
第３ ５卷 第 ４期 ２０ ０ ７年 ４月
Ｊ ｒ ａ ｏｕ ｈ Ｃｈ ｎ ｎ ｖ ｒ ｉ ｃ ｏ ｏ ｙ ｏｕ ｎ ｌｏｆＳ ｔ ｉ ａ Ｕ ｉ ｅ ｓｔ ｏｆＴｅ ｈｎ ｌ ｇ ｙ
析 、ｅｈｄｘＧ７ Ｓｐ ａｅ 一５凝胶 过 滤 ， 得 电泳 纯的 豆豉 纤溶 酶 ， 升 发 酵液 可得 到 ４５ ｇ活性 酶 获 每 ．ｍ
蛋 白 ， 克酶蛋 白活 力达 １ １ ｏ／ ， 每 ． ８ Ｌｓ 纯度 为发 酵原 液 的 ５ ． ｍ ３ ６倍 ， 收 率 为 ｌ． ％ ． Ｄ ． 回 １７ Ｓ Ｓ
ｔＡ － 进行改造并生产出第三代溶栓药物——ｔ Ａ的 Ｐ — Ｐ
突变体 和嵌合 体 ， 疗 效 有 所 改 善 ， 是 价 格 昂贵 ． 其 但
1株纤溶酶菌株的筛选鉴定及提高产酶量的方法
诱变育种的筛选工作量很大， 且纤维蛋白平 板的制作成本较高， 因此确定一种简单可靠的初 筛方法至关重要。 纤溶酶也是一种蛋白酶，对脱脂 牛奶、酪蛋白也有一定的水解作用，因此采用点种 法，分别以脱脂牛奶、酪蛋白、粗提血纤维蛋白为 培养基主要成分， 以纤维蛋白平板法的测定结果 为标准， 比较这 3 种初筛方法与纤维蛋白平板法 的相关性，以确定一种可靠的初筛方法。 1.9 菌株的诱变及选育
1 材料与方法
1.1 样品采集 本试验样品采自于齐齐哈尔市拜泉县自酿农
家豆酱制品。 1.2 培养基
富 集 培 养 基 ：蛋 白 胨 1%，酵 母 粉 0.5%，NaCl 1%， 粗提血纤维蛋白 0.629%，pH 7.0，108 ℃灭菌 20 min，用于豆酱浸提液的富集培养。
LB 培养基： 蛋白胨 1%， 酵母粉 0.5%，NaCl 1%，pH 7.0，121 ℃灭菌 15 min，用于豆酱纤溶酶产 生菌的培养。
第 11 卷 第 6 期
1 株纤溶酶菌株的筛选鉴定及提高产酶量的方法研究
55
时间下的致死率及正、负突变率。 选择正突变率最 高的处理时间作为最佳诱变剂量[15]。 从以最佳诱 变剂量处理所得的突变株中筛选出 H/C 值较大的 菌株， 进一步采用纤维蛋白平板法测定其纤溶酶 活力， 并对纤溶酶活性提高最大的菌株进行遗传 稳定性分析。
54
中国食品学报
2011 年第 6 期
粗 提 血 纤 维 蛋 白 培 养 基 ：0.01 mol/L Na2HPO4，0.001 mol/L KH2PO4， 粗 提 血 纤 维 蛋 白 0.4%，琼脂 2%，pH 7.0，108 ℃灭菌 20 min，用于突 变株的初筛。
微生物发酵生产纤溶酶及其酶学性质的研究进展
＊收 稿 日期 ： ０ ２—０ ２０ ８１
２０ 年第３ ０２ 期
根 据 筛 选 的纤 溶 酶 产 生 菌 的 形 态 特 征 、 养 特 培
征、 生理 生化 特征 进 行 菌种 鉴定 。
１ ．３ 酶 活 测 定 方 法
关键 词 ： 纤溶 酶 ； 酵 ； 活 测 定 ； 学性 质 发 酶 酶
中图分类号 ： ＴＱ９ ０ １ ２ ． 文献 标识码 ： Ａ
Ｐｒ ｇ ｅ ｓ ｏ ｒ ｅ ａｔｏ ｄ Ｃｈａ ａ ｔ ｒ ｚ ｉ ｎ ｏ ｒ ｓ ｎ Ｆｅ ｍ ｎｔ ｉ ｎ ａｎ ｒ ｃ ｅ ｉ ａｔｏ
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品 与 崖 磅
Ｓ ｉ ｌ ｕ ａ ｎ Ｆ ｏｏ ｄ ｃ １ ｎ ｎ ｄ Ｆ ｒｍ ｅ ｌ ｔ ｔｔ ｌ ｌ ｎ ｏｌ
文 章 编 号 ： ６ １ ８ ２ ２ ０ ） ３ ０ ７—０ １ ７ —６ ９ （ ０ ２ ０ —０ ３ ２
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培 养基 灭 菌一 冷 却一 接 人菌 种一 发 酵 液一 离 心
一
收集 上清 液
溶 活性 物 质 的 芽孢 杆 菌 、 霉 菌 、 孢 菌 、 霉 菌 。 曲 镰 根
本 文 就微 生物 来 源 的纤 溶 酶 发 酵 生 产 、 学 性 质 作 酶
一
１２ ２ 产 酶条 件 选择 和 优化 ．． 进 行碳 源 、 源 、 氮 无机 盐 等最 适 培 养基 配方 的确 定 以及研 究 ｐ 温 度 、 床 转 速 、 种 量 对 产 酶 的 Ｈ、 摇 接 影响 。韩 润 林 等 （ ０ ０年 ） ２０ 以恒 通 气 速 率 为 参 照 对
酒曲酶系菌系特征及酿造过程中微生物动态变化研究
酒曲酶系菌系特征及酿造过程中微生物动态变化研究引言酒曲酶是一种具有重要酿造功能的发酵酶，它是由多种微生物共同作用产生的。
在酿造过程中，微生物的种类和数量会发生动态变化，这对酒曲酶的产生和发酵过程起着至关重要的作用。
本文将对酒曲酶系菌系特征及酿造过程中微生物动态变化进行研究，以探讨其对酿造工艺的影响和优化。
一、酒曲酶系菌系特征1.1 酿酒酵母酒曲酿造过程中，酿酒酵母是非常重要的微生物之一。
它具有产生酒精和二氧化碳的能力，同时还可以产生各种酶类，包括淀粉酶、葡萄糖酶、乳酸酶等。
这些酶类对酿造过程中的淀粉水解、糖化和发酵起着至关重要的作用。
酿酒酵母还可以产生丰富的芳香物质，为酒品的口感和香气贡献了很大的影响。
1.2 曲霉曲霉是酿造过程中产生酶类的主要微生物之一，它具有较强的分解能力和产酶能力。
曲霉能够产生α-淀粉酶、β-淀粉酶、葡萄糖酸酶等多种酶类，其中α-淀粉酶和β-淀粉酶是淀粉水解的关键酶类，能有效地将淀粉分解成可发酵的糖类。
在酿造过程中，曲霉的同时作用对于提高酒曲酶的产生和发酵效率起着至关重要的作用。
1.3 乳酸菌酿造过程中，乳酸菌是另一个重要的微生物。
它可以产生乳酸和其他有机酸，对酿造过程中的酸化和风味调节起着非常重要的作用。
乳酸菌还能够发酵产生一些抗氧化物质，对酒品的质量和保质期有一定的影响。
二、酿造过程中微生物动态变化2.1 初次发酵酿造过程中的初次发酵是微生物动态变化的开始阶段。
在发酵初期，曲霉的生长繁殖速度较快，其主要功能是分泌各种酶类进行淀粉水解和糖化。
此时酿酒酵母也开始活跃，开始产酒精和二氧化碳。
乳酸菌在此时期也开始活跃，产生一些酸性物质。
2.3 发酵后期在发酵的后期，微生物的数量开始逐渐减少。
酿酒酵母的活跃度开始下降，生长速度减慢。
曲霉的数量也开始减少，但仍然在产生酶类。
乳酸菌的数量和活跃度也在此时下降，但仍然在产生酸性物质。
整个发酵过程中，微生物的种类和数量会随着时间的推移而发生变化。
泸州老窖大曲中高产纤溶酶菌株的分离及鉴定
酿酒科技 2021 年第 3 期（总第 321 期）• LIQUOR-MAKING SCIENCE & TECHNOLOGY 2021 No.3(Tol.321)17DOI ： 10.13746/j.njkj.2021033泸州老窖大曲中高产纤溶酶菌株的分离及鉴定张立强1 ’2’3，冉茂芳1 ，王松涛1 ’2'3，刘光钱|'2，马卓2，任剑波2，沈才洪1 ’2.3,许涛1，2(1.於州品创科技有限公司，四川泸州646000;2.泸州老窖股份有限公司，四川泸州646000;3.国家固态酿造工程技术研究中心，四川泸州646000)摘要：从泸州老窖大曲中分离纯化得到13株蛋白酶活力较高的微生物，对微生物的菌落形态和细胞形态进行观察，结果表明，这些微生物均为革兰氏阳性芽孢杆菌。
经琼脂糖-纤维蛋白原平板法对 其产纤溶酶活性进行测定，筛选出2株纤溶酶活力较高的菌株：QM 5和Q M 12,纤溶酶活力分别为3711.48 IU/mL ±418.93 IU/mL 和 4270.83 RJ/mL ±563.52 IU/mL 。
对 QM5 和 QM12 进行 VITEK 2 COM- PACT 全自动微生物鉴定、16S rDNA 全序列测定及系统发育树分析，结果表明，菌株QM 5为贝莱斯芽孢杆菌（Sac///i« ve/eze«j/s) ,QM 12为地衣芽抱杆菌（Sac!7/z« //c/iem/ormk)。
芽抱杆菌能够合成多种生理 活性物质■，如活性肽、地衣素和》比嗓类化合物等，在白酒中也有检出，其中地衣素也具有一定的纤溶活 性。
本研究结果有利于揭示白酒的预防动脉粥样硬化等养生保健功能。
关键词：大曲；纤溶酶；分离鉴定；贝莱斯芽孢杆菌；地衣芽孢杆菌中图分类号:TS261.1; TS261.7文献标识码:A文章编号：100卜9286(2021 )03-0017-08Isolation and Identification of Strains with High Yieldof Fibrinolysin from Daqu of Luzhou LaojiaoZHANG Liqiang1，2,3, RAN Maofang1，2, WANG Songtao12,3, LIU Guangqian 12，MA Zhuo2, REN Jianbo2, SHEN Caihong 12 3 and XU Tao 1,2(1 .Luzhou Pinchuang Technology Co. Ltd” Luzhou，Sichuan 646000; 2丄uzhou Laojiao Co. Ltd.，Luzhou, Sichuan 646000;3. National Engineering Research Center of Solid-state Brewing, Luzhou, Sichuan 646000, China)Abstract : 13 microbial strains with high yield of protease were isolated from Daqu sampled in Luzhou Laojiao Distillery. All of them were identified as gram-positive Bacillus strains via colonial and morphological observation. Agarose-fibrin plate method was employed to evaluate the fibrinolysin-producing ability of the isolated strains, and two strains with high yield of fibrinolysin were ob- tained and labeled as QM5 and QM12, with their fibrinolytic activities being 3711.48 IU/mL 土418.93 IU/mL and 4270.83 IU/mL 土 563.52 IU/mL, respectively. Results of physiological and biochemical tests, 16S rDNA sequencing and phylogenetic tree analysis indicated that QM5 was Bacillus velezensis , and QM12 was Bacillus licheniformis . Bacillus strains could synthesize various bioactive substances, including bioactive peptide, lichenysin and pyrazines, which were also detected in Baijiu; lichenysin also exhibited certain fi- brinolytic activity. The results of this study would help to reveal the healthcare function of Baijiu, such as preventing atherosclerosis. Key words : Daqu; fibrinolysin; isolation and identification; Bacillus velezensis \ Bacillus licheniformis血栓疾病是一种由大量纤维蛋白和血小板凝 死、心源性猝死等疾病。
酒曲酶系菌系特征及酿造过程中微生物动态变化研究
酒曲酶系菌系特征及酿造过程中微生物动态变化研究酒曲酶系菌是酿酒过程中关键的微生物群落之一，在酿造过程中发挥着重要的作用。
它们参与了淀粉的酶解、酒精的发酵等关键步骤，直接影响着酒类的品质和口感。
对酒曲酶系菌的特征及酿造过程中微生物动态变化进行研究，可以为酒类工业的发展提供重要的理论和实践指导。
一、酒曲酶系菌的特征1. 基本特征酒曲酶系菌是酿造过程中的独特微生物群落，主要包括曲霉和酵母等微生物。
曲霉是革兰氏阳性菌，能够产生丰富的淀粉水解酶和葡萄糖还原酶，对淀粉的酶解起着重要作用。
而酵母则是发酵过程中的关键微生物，能够将糖类底物转化为酒精和二氧化碳。
2. 代谢特征酒曲酶系菌在酿造过程中主要通过其代谢活性来影响酒类的品质。
曲霉的淀粉水解酶能够将淀粉分解成糖类底物，酵母则利用这些糖类底物进行发酵产生酒精。
酵母还能够合成一系列的代谢产物，如醇、酸、酯类物质，直接影响着酒类的风味和口感。
3. 适应特征酒曲酶系菌对环境的适应能力较强，能够在高温、高湿、高酸等条件下生长繁殖。
这使得它们能够适应不同类型的酒类酿造工艺，如黄酒、米酒、啤酒等。
二、酿造过程中微生物动态变化的研究1. 酒曲酶系菌的菌群结构变化研究发现，在酿造过程中，酒曲酶系菌的菌群结构会发生变化。
曲霉和酵母等微生物在酒曲中的比例会随着时间的推移而发生变化，这直接影响了酿造过程中各种酶的活性和产品的生成。
研究酒曲酶系菌在不同阶段的菌群结构变化，可以为合理控制酿造过程提供重要的参考。
2. 微生物代谢产物的动态变化酿造过程中，酒曲酶系菌的代谢活性会产生大量的代谢产物，如醇、酸、酯等。
这些代谢产物对酒类的风味和品质起着至关重要的作用。
研究这些代谢产物在酿造过程中的动态变化规律，可以为调控酿造过程中的代谢活性提供重要的依据。
3. 微生物在不同酿造条件下的适应性研究不同类型的酒类酿造过程中的条件各不相同，酒曲酶系菌需要具备较强的适应性才能够发挥其作用。
研究酒曲酶系菌在不同酿造条件下的适应性，可以为优化酿造工艺提供重要的参考。
酒曲酶系菌系特征及酿造过程中微生物动态变化研究
酒曲酶系菌系特征及酿造过程中微生物动态变化研究
酿酒是一种享誉已久的饮食文化，而微生物在其中扮演着不可或缺的角色。
其中，酒
曲和酶系菌都是酿酒过程中主要参与微生物。
本研究将着重介绍酒曲和酶系菌的特征及酿
造过程中微生物的动态变化。
一、酒曲特征
酒曲是酿酒过程中最重要的微生物之一，它能在酿酒过程中产生大量的酵母菌和细菌，为酿造美酒提供了有利的条件。
酒曲通常分为黄曲和黑曲两种，黄曲主要分布在北方地区，黑曲主要分布在南方地区。
酒曲生存条件的变化能够影响酿酒过程中的微生物群落动态变化。
二、酶系菌特征
酶系菌是在糖化过程中产生的微生物，在酿酒过程中起着重要的作用。
酶系菌能够在
糖化阶段，促进酵母的发酵，使得糖化过程更加快速、稳定。
此外，酶系菌还能通过产生酸、酶、氨和多种气体等物质，促进酿酒过程中的微生物群落的平衡。
酿酒过程中，初期营养物质充足，微生物群落以细菌为主，而随着酿酒过程的进行，
酵母菌的数量逐渐增加，而细菌菌群的数量则逐渐降低。
此外，在糖化过程中，随着酶系
菌的活跃，微生物群落也呈现出一定的波动，但总体上微生物群落的稳定程度是较高的。
最后，结合酒曲和酶系菌的特征及酿造过程中微生物动态变化，可以得出酒曲和酶系
菌在酿造过程中起着关键的作用，对于酿造美酒而言是不可或缺的。
未来，需要进一步探
究酿酒过程中微生物群落的变化规律，以优化酿酒过程，提高酿酒的产量和质量。
酒曲酶系菌系特征及酿造过程中微生物动态变化研究
酒曲酶系菌系特征及酿造过程中微生物动态变化研究酒曲酶系是指在酿酒过程中起主要作用的微生物种类和酶的系统。
酒曲主要由酿酒酵母和醋酸菌组成，它们通过相互作用，在酿酒过程中发挥重要的作用。
酵母是酒曲中最重要的组成部分。
它们在酿酒过程中发挥了发酵作用，将糖转化为乙醇和二氧化碳。
酵母菌在酿酒过程中的特征包括：1. 耐受高酒精浓度：酵母菌能够耐受较高的酒精浓度，这是因为它们可以通过调节细胞膜的脂质组分和改变细胞壁的结构来适应高酒精环境。
2. 高代谢活性：酵母菌具有较高的代谢活性，能够快速地将葡萄糖转化为乙醇和二氧化碳。
3. 耐受低温：酵母菌能够在较低的温度下进行发酵，这是因为它们可以在低温下维持正常的细胞代谢。
醋酸菌是酿酒过程中另一个重要的成分，它们能够将乙醇氧化为醋酸。
醋酸菌的特征包括：1. 耐酸性：醋酸菌能够耐受较低的pH值，这使得它们能够在发酵过程中生存和繁殖。
2. 较低的温度适应性：相比于酵母菌，醋酸菌对低温的适应性较差。
在醋酸发酵过程中，温度的控制是十分重要的。
在酿造过程中，酒曲菌系和酵母菌的存在会引起复杂的微生物动态变化。
酵母菌会竞争性地与其他微生物竞争营养和生存空间。
这可能导致一些有害微生物的生长，从而影响酿酒过程的质量。
酿酒过程中还会产生一些化学物质，如酒精和醋酸，这些化学物质对一些微生物是有毒的。
在酿酒过程中对酒曲酶系菌系及微生物动态变化的研究非常重要。
这可以帮助我们更好地了解酿酒过程中微生物的相互关系，从而优化酿酒工艺，提高酒的质量和产量。
通过对微生物动态变化的研究，我们还可以开发一些控制微生物生长的方法，以预防一些微生物引起的酿酒问题。
酒醅中产纤溶酶细菌的分离及发酵产酶研究
酒醅中产纤溶酶细菌的分离及发酵产酶研究邓永平;杨敏;郭建华;李琰;刘晓兰;艾瑞波【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2017(036)005【摘要】该研究从酒醅中筛选高产纤溶酶的细菌.经过初筛和复筛得到1株高产纤溶酶的菌株,命名为DL-1.通过菌株形态学和生理生化试验初步鉴定菌株DL-1为芽孢杆菌(Bacillus sp.).菌株DL-1产纤溶酶发酵试验结果表明,最适菌龄为4h,最适碳源为牛肉膏,最适氮源为豆饼粉.在此条件下,所产的纤溶酶在血纤维蛋白平板上形成的溶圈面积可达379.79 mm2.【总页数】5页(P67-71)【作者】邓永平;杨敏;郭建华;李琰;刘晓兰;艾瑞波【作者单位】齐齐哈尔大学食品学院,黑龙江齐齐哈尔161006;黑龙江省普通高校农产品深加工重点实验室,黑龙江齐齐哈尔161006;齐齐哈尔大学食品学院,黑龙江齐齐哈尔161006;齐齐哈尔大学食品学院,黑龙江齐齐哈尔161006;黑龙江省普通高校农产品深加工重点实验室,黑龙江齐齐哈尔161006;齐齐哈尔大学食品学院,黑龙江齐齐哈尔161006;黑龙江省普通高校农产品深加工重点实验室,黑龙江齐齐哈尔161006;齐齐哈尔大学食品学院,黑龙江齐齐哈尔161006;黑龙江省普通高校农产品深加工重点实验室,黑龙江齐齐哈尔161006;齐齐哈尔大学理学院,黑龙江齐齐哈尔161006【正文语种】中文【中图分类】Q815【相关文献】1.与产酱香有关细菌的分离及在酒醅堆积中的作用 [J], 张倩;赵华;张美艳;陈琳玲;车利伟2.酒醅中高产淀粉酶酵母的分离鉴定及产酶条件研究 [J], 庾昌文;薛栋升;郭威;汪江波3.1株分离自宋河镇浓香型白酒酒醅的产香细菌鉴定及风味物质分析 [J], 刘冰冰;周开心;叶丽靖;余盈盈;李学思;闫培勋;郭书贤4.赊店老酒酒醅中高产纤维素酶菌种的分离鉴定及产酶条件优化 [J], 刘延波;刘洋洋;赵志军;吴俊仪;王贤;潘春梅;孙西玉5.自然发酵酱油酱醅中产香芽孢杆菌的筛选及其产酶性能研究 [J], 曹月;邓岳;徐小芳;郭晓梅;张慧;孙群因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
一株质粒转导纤溶酶基因工程菌株在啤酒发酵中的特性
一株质粒转导纤溶酶基因工程菌株在啤酒发酵中的特性罗剑辉;段开红;田瑞华;魏立杰;牛爱华【摘要】研究了1株通过质粒转导而获得纤溶酶基因的下面发酵酵母在啤酒发酵中的特性，并进行规模为5L的啤酒发酵试验，对啤酒主发酵过程中5个主要影响指标—PH值、双乙酰、酒精度、实际发酵度、总还原糖进行了测定。
结果表明，各项指标与对照菌株相比差异较小，且都在正常范围之内，具有可应用于保健啤酒生产的潜能。
%In this study, the properties of a lower-layer beer barm strain of fibrinolytic enzyme obtained through plasmid transduction in beer fer- mentation were investigated and 5L scale of beer fermentation test was carried out, and five main indexes influencing beer chief fermentation in- cluding pH and diacetyl, alcohol content, real fermentation degree, total reducing sugar were analyzed. The results showed that compared with contrast strains, there was little difference in the indexes （such difference within a normal range）. Accordingly, such newly-obtained strain could be used for healthcare beer production.【期刊名称】《酿酒科技》【年(卷),期】2012(000)005【总页数】3页(P58-59,64)【关键词】保健啤酒;纤溶酶;基因工程菌;下面啤酒酵母;发酵特性【作者】罗剑辉;段开红;田瑞华;魏立杰;牛爱华【作者单位】内蒙古农业大学生命科学学院,内蒙古呼和浩特010018;内蒙古农业大学生命科学学院,内蒙古呼和浩特010018;内蒙古农业大学生命科学学院,内蒙古呼和浩特010018;内蒙古农业大学生命科学学院,内蒙古呼和浩特010018;内蒙古农业大学生命科学学院,内蒙古呼和浩特010018【正文语种】中文【中图分类】TS262.5啤酒已经有五千年的历史，因其清爽的口感而颇受消费者青睐，其世界销售量也逐年上升[1-3]。
一株来源于酒曲的纤溶酶产生菌的鉴定及其酶学性质
一株来源于酒曲的纤溶酶产生菌的鉴定及其酶学性质曹兴南;王海宽;孙岩;戚薇【期刊名称】《天津科技大学学报》【年(卷),期】2011(026)005【摘要】从酒曲中分离到一株纤溶酶产生菌,经形态及ITS序列分析鉴定为菊芋小孢根霉(Rhizopus microsporus var.tuberosus).酶学性质研究表明,该纤溶酶的最适作用温度为37℃,最适作用pH为7.0.在37℃保温4h酶活力仍保存95％,57℃下保温4h后仍有一定酶活.该酶具有广泛的酸碱适应性,在pH＜3.4时仍残留部分活性；最稳定的pH范围是6～8.Zn2+、Cu2+对酶活有抑制作用,Na+、Ca2+、Mn2+对酶活具有明显的促进作用.该酶在人工肠液中具有较好的稳定性,37℃保温4h后残余酶活仍然保持在80％以上,有望制成注射剂应用于临床.%A strain producing fibrinolytic enzyme was isolated from starter. The strain was identified as Rhizopus micro-sporus var. Tuberosus based on the morphological and ITS sequence. The enzymatic properties of the fibrinolytic enzyme secreted by the strain were determined. The properties tes ts suggest that the optimum temperature and pH were 37 °C and 7.0, respectively. The enzyme retained 95% of its initial activity by retaining for 4 h at 37 °C, and when it was treated at 57 °C for 4 h, the enzyme was still remained of activity. The enzyme had a wide range of pH adaptability, it still remained of part of activity when pH was adjusted to a level (pH<3.4); and it remained enzyme activity in between the range of pH 6.0-8.0. Zn2+ and Cu2+ have a very clear function to restrain the enzyme activitywhereas Na+, Ca2+, Mn2+ showed obvious stimulation on the enzyme. The results show that the enzyme is stable in the artificial intestinal juice, it retained 80% of its initial activity by retaining for 4 h at 37 °C. It may be developed to injection used in clinical research.【总页数】6页(P13-18)【作者】曹兴南;王海宽;孙岩;戚薇【作者单位】工业发酵微生物教育部重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津300457;工业发酵微生物教育部重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津300457;工业发酵微生物教育部重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津300457;工业发酵微生物教育部重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津300457【正文语种】中文【中图分类】Q93【相关文献】1.一株碱性脂肪酶产生菌的筛选、鉴定及酶学性质研究 [J], 韩生义;赵淑琴;刘晓丽;王景乐;杨孝朴2.一株碱性脂肪酶产生菌的分离、鉴定及其酶学性质研究 [J], 李鑫玲;孙晓菲;李欣;李璇;张玉先;张敏3.一株关中热泉液口普鲁兰酶产生菌的筛选鉴定及部分酶学性质研究 [J], 常帆;薛文娇;马赛箭;安超;贾凤安4.一株高温酸性淀粉酶产生菌的筛选、鉴定及其酶学性质研究 [J], 杨力权;杨国保;桑鹏;陈贵元5.一株高温酸性淀粉酶产生菌的分离、筛选、鉴定及其酶学性质研究 [J], 杨力权;杨国保;陈贵元;桑鹏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
中草药纤溶酶的筛选与鉴定
中草药纤溶酶的筛选与鉴定周艳芬;何叶喧;王士英;袁洪水;王秀伶;朱宝成【期刊名称】《中国生化药物杂志》【年(卷),期】2006(27)6【摘要】目的获得具有溶解纤维蛋白能力的中草药.方法选择22种具有活血化瘀功能的中草药,分别进行蛋白质的提取,对蛋白质提取物进行纤维蛋白溶解活性的鉴定.结果 10种中草药具有溶解纤维蛋白的能力,作用强弱顺序为肉豆蔻、莪术、益母草、茜草、延胡索、皂角刺、祖师麻、石蒜、九里香、姜黄,其中肉豆蔻纤维蛋白溶解圈最大而且透明.对出现溶圈的蛋白质提取物进行浓度测定,根据尿激酶标准曲线,计算其溶解纤维蛋白的比活力.益母草、延胡索、肉豆蔻、茜草的比活力相对较高,分别为582.43,543.18,480.20和264.52 U/mg.结论建立了筛选具有纤溶酶活性的中草药的方法,并筛选出4种纤溶酶活力相对较高的中草药.【总页数】3页(P355-357)【作者】周艳芬;何叶喧;王士英;袁洪水;王秀伶;朱宝成【作者单位】河北农业大学,生命科学学院,河北,保定,071001;河北大学,生命科学学院,河北,保定,071002;河北大学,生命科学学院,河北,保定,071002;河北农业大学,生命科学学院,河北,保定,071001;河北农业大学,生命科学学院,河北,保定,071001;河北农业大学,生命科学学院,河北,保定,071001;河北农业大学,生命科学学院,河北,保定,071001;河北大学,生命科学学院,河北,保定,071002【正文语种】中文【中图分类】R284.1【相关文献】1.纤溶酶高产菌株的筛选与鉴定 [J], 薛健;王欢;尹锐2.纤溶酶产生菌-藤黄微球菌的筛选、鉴定及纤溶酶基因的克隆 [J], 肖璐;张仁怀;张义正3.水豆豉中高产豆豉纤溶酶的菌株筛选、鉴定及生长性能研究 [J], 董科; 陈宇航; 沈丹芸; 裴晓方4.一株来自可口革囊星虫产纤溶酶菌株的筛选与鉴定 [J], 刘聪颖;苏愉;魏若冰;江佰仪;周逢芳5.一株来自可口革囊星虫产纤溶酶菌株的筛选与鉴定 [J], 刘聪颖;苏愉;魏若冰;江佰仪;周逢芳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
酒曲酶系菌系特征及酿造过程中微生物动态变化研究
酒曲酶系菌系特征及酿造过程中微生物动态变化研究1.引言酿酒是一种古老的工艺，其酿造过程中微生物的活动是至关重要的。
酿酒中常用的一种微生物是酵母菌，而酵母菌的特征及其在酿造过程中的动态变化一直是酿酒工艺研究的热点之一。
而酒曲酶系菌系则是酿酒中另一种重要的微生物，在酿造过程中起着至关重要的作用。
本文将对酒曲酶系菌系的特征及在酿造过程中微生物的动态变化进行研究，以期对酒曲酶系菌系的应用和酿造过程中微生物的作用有所了解。
2.酒曲酶系菌系特征酒曲酶系菌系是一种常见的酿酒中的微生物，其特征主要包括以下几个方面：（1）酶系丰富：酒曲中含有丰富的酶系，包括淀粉酶、蛋白酶、蔗糖酶等，这些酶系对于酿造过程中的淀粉、蛋白质和糖类的分解起着至关重要的作用，是酿造过程中不可或缺的一部分。
（2）微生物多样性：酒曲中包含的微生物种类丰富，既有酵母菌，也有乳酸菌等其他微生物，这些微生物之间相互作用，共同参与酿造过程，对于酿造过程中的各种物质的分解和转化起着重要的作用。
（3）菌群稳定：酒曲酶系菌系具有较强的菌群稳定性，不易受外界环境的影响而发生变化，这对于酿造过程中的微生物的动态变化有一定的影响。
3.酿造过程中微生物的动态变化在酿造过程中，微生物的动态变化是非常复杂的，酒曲酶系菌系及其它微生物之间相互作用，共同影响着酿造过程中各种物质的分解和变化。
下面我们将对酿造过程中微生物的动态变化进行简要介绍：（1）初期发酵阶段：在酿造初期，酒曲酶系菌系及其它微生物开始活跃起来，开始对原料中的淀粉、蛋白质等成分进行分解，释放出各种糖类和氨基酸等物质，为后续发酵提供了充足的营养物质。
（2）中期发酵阶段：随着发酵的进行，酿造液中的糖类和氨基酸等物质逐渐被微生物消耗殆尽，这时，酒曲酶系菌系及其它微生物的活动逐渐减弱，但仍在继续进行着物质的分解和转化。
（3）后期成熟阶段：在酿造后期，酿造液中的物质基本上被微生物消耗殆尽，这时，酒曲酶系菌系及其它微生物的活动逐渐减弱，甚至停止，酿造液中的物质逐渐趋于稳定，酒类开始成熟。
根霉12#发酵产生纤溶酶的酶学性质
根霉12#发酵产生纤溶酶的酶学性质杜连祥;刘晓兰;路福平;肖静;郑喜群【期刊名称】《生物工程学报》【年(卷),期】2005(21)2【摘要】溶栓疗法是血栓性疾病安全有效的治疗手段,开发新型纤溶酶具有实际应用意义.分离自南方小酒药的根霉12豆粕和麸皮为原料可产生纤溶酶.已采用盐析,疏水层析、离子交换层析和凝胶层析方法对纤溶酶分离提纯.提纯的纤溶酶比活力2143u/mg(尿激酶单位),有直接溶解血栓和激活纤溶酶原的双重溶栓作用,降解纤维蛋白α、β和γ肽链速度快;最适作用温度45℃,适宜作用pH范围6.8～8.8;等电聚焦方法测定该酶等电点8.5±0.1;只分解生色底物N-Succinvl-Ala-Ala-Pro-Phe-pNA,其米氏常数Km为O.23mmol/L,酶转换数Kcat为16.36 s-1;Molish 实验和甲苯胺蓝实验均证明该酶为糖蛋白,地衣酚-硫酸法测得该酶含糖量4.70%;EDTA、PMSF、PCMB对该纤溶酶有抑制作用,说明活性中心含有巯基、金属和丝氨酸;N端12个氨基酸序列为NH2-Ser-Val-Ser-Glu-Ile-Gln-Leu-Met-His-Asn-Leu-Gly,与其它生物来源的纤溶酶相比较没有同源性.根霉12#产生的纤溶酶为新型纤溶酶,有希望开发成溶栓药物.【总页数】5页(P323-327)【作者】杜连祥;刘晓兰;路福平;肖静;郑喜群【作者单位】天津科技大学生物工程学院,天津,300222;天津科技大学生物工程学院,天津,300222;齐齐哈尔大学生命科学与工程学院,齐齐哈尔,161006;天津科技大学生物工程学院,天津,300222;齐齐哈尔大学生命科学与工程学院,齐齐哈尔,161006;齐齐哈尔大学生命科学与工程学院,齐齐哈尔,161006【正文语种】中文【中图分类】TQ92【相关文献】1.产纤溶酶菌株根霉12#的诱变育种及固态发酵培养基的优化 [J], 刘晓兰;杜连祥;路福平;凌洪博2.Rhizopus chinensis 12#发酵产生纤溶酶的分离提纯 [J], 刘晓兰;杜连祥;路福平;凌洪博3.固体豆粕为氮源根霉12#产纤溶酶液体发酵条件的优化 [J], 李树文;刘晓兰;杜连祥;咸洪泉4.根霉12#发酵生产纤溶酶的分离纯化 [J], 郭利美;王腾飞;国天庆;李春磊;胡敏5.根霉液态发酵产生纤溶酶的培养条件优化 [J], 刘晓艳;刘毅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
单环刺螠纤溶酶UFEⅠ的酶学性质和初步药效学及安全性评价的开题报告
单环刺螠纤溶酶UFEⅠ的酶学性质和初步药效学及安全性评价的开题报告一、研究背景纤维蛋白溶酶是一种重要的纤维蛋白溶解酶，其主要作用是促进纤维蛋白的降解和溶解。
然而，传统的纤维蛋白溶酶存在许多缺点，如易受到抗体的干扰、生产成本高等，因此需要寻找新的替代品。
近年来，随着人们对生物资源的认识不断加深，越来越多的研究表明，动物毒液是一种潜在的、丰富的生物资源。
在这些动物毒液中，许多蛋白质具有生物活性和丰富的资源价值，如含有纤维蛋白溶酶活性的刺螠毒液。
单环刺螠是一种寄生于蜂类和黄蜂类的寄生虫，其毒液中含有多种活性蛋白质，其中就包含了纤维蛋白溶酶。
然而，目前对于单环刺螠纤溶酶UFEⅠ的酶学性质、药效学和安全性评价等方面的研究还不够充分，因此有必要进行深入的研究。
二、研究目的本研究旨在从单环刺螠毒液中提取纯化出单环刺螠纤溶酶UFEⅠ，并对其酶学性质、药效学及安全性进行初步评价。
具体的研究目标如下：1. 纯化出单环刺螠纤溶酶UFEⅠ，并确定其分子量。
2. 对单环刺螠纤溶酶UFEⅠ进行酶学性质的分析，包括活性、催化底物的种类和酶的最适温度、最适pH值等。
3. 进行单环刺螠纤溶酶UFEⅠ的药效学评价，包括其对纤维蛋白溶解的效果、以及其对动物实验中的生物学指标的影响。
4. 进行单环刺螠纤溶酶UFEⅠ的安全性评价，包括其对小鼠的急性毒性、长期毒性以及对人体的潜在风险等方面的评价。
三、研究方法1. 提取单环刺螠毒液：使用电击法或用无菌针脱离单环刺螠后，在冷藏条件下保存，待毒液自行流出或刺螠刺刺出毒液后，用0.01M Tris-HCl缓冲液洗涤一遍，将毒液收集起来。
2. 纯化单环刺螠纤溶酶UFEⅠ：采用柱层析技术（如离子交换、凝胶过滤等）。
3. 确定单环刺螠纤溶酶UFEⅠ的分子量：采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）。
4. 测定单环刺螠纤溶酶UFEⅠ的酶学性质：（1）活性：利用比色法测定其对特定基质的溶解速率；（2）催化底物种类：通过不同底物和正、负对照试验，确定其最适底物；（3）酶的最适温度和最适pH值：测定在不同温度和pH下酶活性的变化情况。
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一
株 来 源 于酒 曲的纤 溶 酶产 生茵 的鉴 定 及 其 酶 学 性 质
曹兴南 ，王海宽 ，孙 岩 ，戚 薇
（ 工业发酵微生物教育部重点实验室 ，天津科技大学生物工程学 院，天津 ３ ０ ５ ） ０ ４ ７
摘
要 ：从酒 曲中分 离到一株 纤溶酶产生菌 ， 经形态及 Ｉ Ｓ序列分析鉴定为菊芋小孢根 霉 （ ｈ ｏ ｕ ｃｏ ｏｕ ａ． Ｔ Ｒ ｉ ｐ ｓｍｉ ｓ ｒｓ ｖｒ ｚ ｒｐ
第２卷 ６
第 ５ 期
天 津科 技 大 学 学报
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆ ｉｎｉ ｉｅｓ ｙｏ ｃｅ ｃ ＆ Ｔｅｈ ｏｏ ｙ ｏ ｒ ａ ａ ｊｎＵｎｖｒｉ ｆ ｉｎ ｅ ｏＴ ｔ Ｓ ｃ ｎ ｌｇ
Ｖ １ ６ ＮＯ ５ ０２ ＿． ． ０ｃ ． ０１ ｔ２ １
２１ 年 １ ０１ ０月
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关键 词 ：纤溶酶 ；菊芋小孢根霉 ；酶学性质
中 图分 类 号 ：Ｑ９ ３ 文 献 标 志 码 ：Ａ 文 章 编 号 ：１ ７ —５ ０ ２ １） ５０ １—６ ６ ２６ １ （０ １０ — ｉ ｂｒｎ ｌ ｔｃＥｎｚ ｍ ｅＳｔ ａ ｎ ｆ ｏ ｄｅ ｔｆ ａ ｉ ｎ ｏ ｏ ｕｃｎｇＦｉ ｉ ｏ ｙ ｉ ｉ ｙ ｒ ｉ ｒ ｍ Ｓ ａ ｔ ｒａ ｄ ｔ ｔ ｒ ｅ ｎ ＩｓＥｎｚ ｍ ａ ｉ ｏ ｒ ｉｓ ｙ ｔｃＰｒ ｐｅ ｔｅ
范 围是 ６ ． ｎ＋ ｃ 对酶活有抑 制作用 ， Ｃ ２、 对酶 活具 有明显的促进作 用． ～８ ｚ ２、 ｕ Ｎａ 、 ａ Ｍｎ 该酶在人工肠液 中具有较
好 的稳 定性 ， ７℃保温 ４ ３ 残余酶 活仍 然保持在 ８％以上 ， ｈ后 ０ 有望制成 注射剂应 用于Ｉ 临床．
８０． ａ ｈａ ｅ ｌ ａ ｕｎ ｔｏｎ ｔ ｅ ｔａ ｎ ｔ ｎｚ ｅ ａ ｔ ｔ ． Ｚｎ ｎｄ Ｃｕ ｖｅ ａｖ ｒ ｃｅ ｒｆ ｃ ｉ ｏ ｒ ｓｒ ｉ ｈｅｅ ｙｍ ｃｉ ｙ ｗｈｅ ｅ ｓＮ ａ Ｃａ Ｍ ｎ ｓ ｏ ｄ ｏ ｖ ｏ ｓｓｉ ． ｙ ｖｉ ｒ ａ ． 。 ｈ ｗｅ ｂ ｉｕ ｔ ｍｕ