高通量测序法对剑南春大曲真菌群落结构的分析
清香大曲糖化力酯化力功能及真菌群落结构分析
清香大曲糖化力酯化力功能及真菌群落结构分析大曲是白酒酿造中微生物和酶的有效载体，在白酒酿造过程中起糖化、发酵、生香作用，被称为酒之骨。
由于大曲本身是生料制曲、自然接种、开放式培养，导致大曲中微生物种类非常复杂，因而也是酿酒微生物研究的重要内容。
大曲是酿酒的糖化发酵剂，说明大曲中真菌来源的酶为酿酒原料中淀粉的降解提供糖化酶等相关酶类，更说明大曲中真菌的重要作用。
本文针对清香大曲真菌群落结构，大曲糖化力、酯化力功能进行了相关研究。
本文首先利用高通量测序法分析了冷季和热季清香白酒生产用曲真菌群落结构。
结果表明，用不同的宏基因组DNA试剂盒以及不同测序区域18S V4区和ITS区得到较为一致的结果，清香大曲在热季和冷季的主要真菌类群相同，主要的真菌类群有霉菌和酵母，霉菌有Rhizopus oryzae（米根霉）和Lichtheimia corymbifera （伞枝犁头霉），酵母有Pichia kudriavzevi（i库德毕赤酵母）和Saccharomycopsis fibuligera（扣囊复膜酵母），两种霉菌含量明显高于酵母，而且冷季酵母比例较热季明显减少。
通过本实验可以确认清香大曲主要真菌类群有米根霉、伞枝犁头霉，酵母菌则比较少，主要有扣囊复膜酵母和库氏毕赤酵母。
糖化力的高低对于酿酒过程有很大影响，尤其在清香白酒的发酵初期。
本文选取只有糖化力不同其它成分完全相同的大曲添加到酒醅中进行酿酒实验，结果表明糖化力为1200U、1500U时，酵母菌生长过快，在2对时已达较高，容易出现菌种早衰的现象，不符合前缓、中挺、后缓落的规律。
糖化力为900U时，酵母菌在4对时达到最高点，符合一般发酵规律；糖化力为600U和300U 时，酵母菌生长减弱，最高点的酵母菌数量减弱，有可能导致发不起来的后果。
结合酒精度变化情况，糖化力为1500U、1200U和900U的酒醅发酵结束后酒精度比较高，说明较高的糖化力水平有助于提高原料出酒率。
四川不同地区浓香型大曲微生物群落结构比较
than those in Yibin Daqu and Luzhou Daqu. The diversities of bacteria and fungi in Suining Daqu were higher than in
Yibin Daqu and Luzhou Daqu. Principal component analysis revealed that the microbial community structures of the
摘 要：利用高通量测序技术分析四川不同地区浓香型大曲微生物群落结构差异。结果表明：大曲中优势 细菌菌群为葡萄球菌属（Staphylococcus）、魏斯氏菌属（Weissella）、芽孢杆菌属（Bacillus）、乳杆菌属 （Lactobacillus）、Kroppenstedtia、高温放线菌属（Thermoactinomyces）、糖多孢菌属（Saccharopolyspora）、 短杆菌属（Brevibacterium），其中在品温较高的宜宾、泸州曲样中，魏斯氏菌属、高温放线菌属比例均高于 遂宁曲样，而遂宁两个曲样的优势菌属均为葡萄球菌属和芽孢杆菌属，其中葡萄球菌属远高于宜宾和泸州曲 样。另一方面，4 种曲样的真菌主要以嗜热真菌属（Thermomyces）、曲霉属（Aspergillus）、嗜热子囊菌属 （Thermoascus）、丝衣霉属（Byssochlamys）、节担菌属（Wallemia）为主，在品温较高的宜宾、泸州曲样中，嗜 热真菌属和嗜热子囊菌属为优势菌属，其比例远高于遂宁曲样，而遂宁两个曲样的优势菌属均为曲霉属，其比例远 高于宜宾和泸州的曲样。遂宁1、遂宁2曲样的细菌和真菌多样性均高于宜宾和泸州曲样。通过主成分分析发现，遂 宁1和遂宁2曲样微生物群落结构较相似，而宜宾和泸州曲样的微生物群落结构则更接近。 关键词：大曲；微生物群落；高通量测序；主成分分析
浓香型大曲贮藏过程中糖化力发酵力变化及真菌多样性分析
浓香型大曲贮藏过程中糖化力发酵力变化及真菌多样性分析施思;彭智辅;乔宗伟;刘多涛;罗青春;涂福明【摘要】为了探究大曲贮藏过程中微生物群落结构变化,采用高通量测序技术分析了真菌18S rDNA V4区,聚类分析共产生3 747个OTU分类.结果表明,在贮藏过程中大曲真菌群落结构不断调整,毕赤酵母属、根霉菌属及横梗霉属成为最终的优势菌群.随着时间的推移,大曲发酵力逐渐升高,而糖化力则经历了由高变低再升高的过程.数据结果与大曲质量要求相符,能为后续酿造提供足够动力.%To explore the change of microorganisms communities of Daqu in the storage process,the V4 regions of fungal 18S rDNA were analyzed by high-throughput sequencing,3747 OTUs were obtained in clustering analysis.The results showed that fungal community structure was constantly adjusted,Pichia,Rhizopus,Lichtheinia became the dominant genera at the end of storage.The fermenting power of Daqu gradually increased as time going on,while saccharifying power gradually decreased and then increased again.The data meet the requirements for quality of Daqu,which can provide enough power for the subsequent brewing.【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2017(043)005【总页数】4页(P76-79)【关键词】大曲;储藏;真菌多样性;理化指标【作者】施思;彭智辅;乔宗伟;刘多涛;罗青春;涂福明【作者单位】五粮液股份有限公司,四川宜宾,644007;五粮液股份有限公司,四川宜宾,644007;五粮液股份有限公司,四川宜宾,644007;固态发酵资源利用四川省重点实验室,四川宜宾,644007;五粮液股份有限公司,四川宜宾,644007;五粮液股份有限公司,四川宜宾,644007;五粮液股份有限公司,四川宜宾,644007【正文语种】中文在我国传统酿酒行业一直流传着“曲乃酒之骨”的说法，曲药既是酿酒的糖化发酵剂，又是酿酒的重要原料，同时为酿酒提供部分风味物质或风味前体物质，对白酒的香型风格有着举足轻重的作用。
剑南春酒曲细菌群落结构的分析
Ｗｅ ｉ ｓ ｓ ｅ ｌ ｌ ａ ｃ ｉ ｂ ａ ｒ ｉ ａ 、 Ｋｌ ｅ ｂ ｓ ｉ ｅ ｌ ｌ ａ ｏ ｘ ｙ ｔ ｏ ｃ ａ 和Ｓ ｔ ａ ｐ ｈ ｙ ｌ ｏ ｃ ｏ ｃ ｃ ｕ ｓ ｘ ｒ ｌ ｏ ｓ ｕ ｓ 等细菌。曲药微 生物种群 多样性特征的解析为深入
研 究 白 酒微 量香味 物 质 生成 机 理提 供 了技 术 支撑 。
度 和 纯净 感 ， 大 量 的生 产 实 践 表 明 ， 新 窖 池 由于 增 加 了功 能 菌 的数 量 和种 类 ， 窖 泥加 速 新 窖 老熟 。经 过 大 约 半 年 的 时 间 ， 曲酒 中己 酸 乙 酯 的 含 量 达 到 ２ １ ０ ｍ ｇ ／ ｌ Ｏ Ｏ ｍ Ｌ以上 ， 优 质酒 品率 达 ４ ０ ％左 右 ， 相 当 于
【 参考文献】
『 １ ］ 吴衍庸 ， 薛堂荣 ， 陈昭蓉 ， 等． 五粮液老窖厌 氧菌群的分布及其作 用
研究ｆ Ｊ １ ． 微 生物学报 ， １ ９ ９ １ （ ４ ） ： ２ ９ ９ — ３ ０ ７ ．
通 讯作者 ： 徐 占成 。
臭味 ， 增加了酒 的主体香和复合香 ， 酒体纯净丰满 ， 基本接近 １ ５ 年窖龄窖池的酒质。
ｄ ｂ ａ ｒ ｉ ａ 。 同时 ，还 检 测到 了传 统培 养 方法 未检 测到 的 Ｓ ａ ｃ ｃ ｈ ａ ｒ ｏ ｐ ｏ ｌ ｙ ｓ ｐ ｏ ｒ ａ ｓ ｐ Ｊ ｎ ｏ ｓ ｐ ｏ ｒ ｏ ｔ ｒ ｉ ｃ ｂ Ｊ ａ 、 Ｗｅ ｉ ｓ ｓ ｅ ｌ ｌ ａ Ｃ Ｏ Ｄ ｆ Ｕ Ｓ ｇ ￣ 、
基于高通量测序技术的中温大曲中微生物群落多样性解析
收稿日期：２０１９－０４－１０ 基金项目：国家自然科学基金项目（３１８０１５３５）；河南省重大科技专项项目（１８１１００２１１４００）；中国轻工业浓型白酒固态发酵重
点实验 室 开 放 基 金 项 目 （２０１８ＪＪ０１７）；郑州轻工业学院博士科研启动基金 项 目 （２０１６ＢＳＪＪ０１８）；河 南 省 自 然 科 学 基 金 项 目 （１８２３００４１００７０）
２．Ｈｅ′ｎａｎＳｈｏｕｊｉｕＧｒｏｕｐＣｏ．，Ｌｔｄ．，Ｘｉｎｘｉａｎｇ４５３０００，Ｃｈｉｎａ
关键词： 白酒；中温大曲； 微生物群落； 高通量测序技术
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ： Ｃｈｉｎｅｓｅｌｉｑｕｏｒ；ｍｅｄｉｕｍ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅＤａｑｕ； ｍｉｃｒｏｂｉａｌｃｏｍｍｕｎｉｔｙ； ｈｉｇｈｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
ＨＵＸｉａｏｌｏｎｇ１，ＷＡＮＧＫａｎｇｌｉ１，ＮＩＵＧｕａｎｇｊｉｅ２，ＱＩＡＯＹａｊｕａｎ１，ＺＨＡＮＧＹｕ１， ＨＥＰｅｉｘｉｎ１
１．郑州轻工业大学 食品与生物工程学院 ／食品生产与安全河南省协同创新中 心，河南 郑州 ４５０００１；
２．河南省寿酒集团有限公司，河南 新乡 ４５３０００
１．ＳｃｈｏｏｌｏｆＦｏｏｄａｎｄＢｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ／ＣｏｌｌａｂｏｒａｔｉｖｅＩｎｎｏｖａｔｉｏｎＣｅｎｔｅｒｏｆＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎａｎｄＳａｆｅｔｙ， Ｈｅ′ｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ，ＺｈｅｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＬｉｇｈｔＩｎｄｕｓｔｒｙ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５０００１，Ｃｈｉｎａ；
作者简介：胡晓龙（１９８４—），男，河南省开封市人，郑州轻工业大学讲师，博士，主要研究方向为白酒酿造． 通信作者：何培新（１９７０—），男，河南省商丘市人，郑州轻工业大学教授，博士，主要研究方向为发酵工程．
浓香型白酒酿造过程中微生态群落的研究进展
DOI：10.16660/ki.1674-098X.2005-1001-4070浓香型白酒酿造过程中微生态群落的研究进展①张新红1 张源1 崔磊2(1.阜阳职业技术学院 安徽阜阳 236000；2.安徽文王酿酒股份有限公司 安徽阜阳 236000)摘 要：为探索浓香型白酒酿造过程中的微生态群落演替规律，对浓香型白酒酿造过程中的大曲、酒醅和窖泥等三大人工微生态系统中优势微生物种群进行了分析比较研究，结果发现，浓香型白酒酿造微生态系统存在不稳定性、开放性、目的性和可控性的特点，是酒类酿造中最为复杂的人工微生态系统，三大人工微生态系统之间相互协调，相互融合，完成复杂微生物代谢过程，对浓香型大曲酒生产技术的发展具有指导意义，为进一步提高浓香型白酒的质量和稳定性提供参考。
关键词：浓香型白酒 微生物 微生态 群落演替中图分类号：TS262.3 文献标识码：A 文章编号：1674-098X(2020)08(b)-0066-05Research Progress of Micro-ecological Communities duringthe Brewing of Luzhou-flavor LiquorZHANG Xinhong 1 ZHANG Yuan 1 CUI Lei 2(1.Fuyang Institute of Technology, Fuyang, Anhui Province, 236000 China; 2.Anhui WenWang BreweryCo., Ltd., Fuyang, Anhui Province, 236000 China)Abstract: In order to explore the succession of microecological communities in luzhou-f lavor liquor brewing process, the dominant microbial populations in daqu, fermented grains and pit mud in three artif icial microecosystems were analyzed and compared. The results showed that the micro-ecological communities of brewing of luzhou-f lavor liquor charactered with instability, openness, teleonomy and controllability are the most complex artificial micro-ecosystems in liquor brewing. The micro-ecosystems of Daqu, fermented grains and pit mud collectively complete the complex metabolic process of microorganism by coordination and fusion with each other. It has guiding signif icance to the development of brewing technique of luzhou-f lavorliquor , and which can provide reference for improvement of quality and stability of luzhou-f lavorliquor.Key Words: Luzhou-f lavorliquor; Microorganism; Micro-ecological; Community succession①基金项目：安徽省教育厅自然科学研究重点项目“浓香型大曲中优势微生物种群的分离鉴定与功能研究”（课 题编号：KJ2017A613）。
基于高通量测序技术的中温大曲中微生物群落多样性解析
基于高通量测序技术的中温大曲中微生物群落多样性解析作者：胡晓龙王康丽牛广杰乔亚娟张玉何培新来源：《郑州轻工业学院学报(社会科学版)》2019年第04期关键词：白酒;中温大曲;微生物群落;高通量测序技术0引言曲作为一种糖化剂、发酵剂、产香剂和原料，在制酒、制醋、制酱油等传统酿造行业的应用已有几千年的历史.其中，大曲主要用于白酒固态发酵[1]，其品质的优劣在很大程度上决定了白酒的品质和风格.大曲主要是以大麦、小麦、豌豆等单一或多种谷物为原料，经破碎、加水混合再压成块状曲醅[2]，经自然或人工接种并在适宜的温度和湿度条件下进行固态发酵，经成型、控温、贮存等十几个环节而制成块曲或砖曲.制曲过程中，纯种或环境中的微生物在适宜的条件下经过长时间的富集和培养，可在曲醅表面和内部形成有益的酿酒微生物群系[3].大曲微生物菌群复杂，主要集中在酵母菌、霉菌和细菌三类菌中，三者在酿酒过程中的糖化、产香、产酒方面可以协同作用，但各自侧重不同[4]：酵母菌有酒化和酯化的作用;霉菌助产一些生物酶，如红曲霉和米根霉产酯化酶，黑曲霉助产淀粉酶、蛋白酶和糖化酶[5-6];细菌助产一些呈香物质，如吡嗪类化合物、愈创木酚、苯甲醛、乳酸、芳香族化合物等多种香气成分.此外，大曲中还有少量的放线菌，其功能虽然尚不明确，但其可以产生蛋白酶，使蛋白质分解成氨基酸，进而与淀粉分解生成的糖反应会产生醛、酮、吡嗪类化合物等香味物质.目前，关于大曲群落信息研究的报道很多[7-8]，其所采用的方法包括传统可培养方法[9]、传统分子生态学方法（16srDNA克隆文库法[10]、PCRDGGE[11]，扩增核糖体DNA限制性分析[12]和PLFA[13]等）和高通量测序技术[14].尤其是高通量测序技术的应用，使得大曲中痕量微生物和不可培养微生物得以被发现，极大地丰富了人们对大曲中微生物群落多样性的认识.目前对产自四川、贵州等地区的大曲微生物的研究较多，但对产自河南地区的大曲微生物群落的研究相对较少，且对产自河南地区的大曲曲皮和曲心微生物群落差异尚不明晰.基于此，本文拟采用高通量测序技术研究河南地区中温大曲曲皮和曲心两个部位的微生物群落多样性及其组成，以期拓展对河南地区中高温大曲中微生物种类的研究，在一定程度上丰富对我国不同地区中温大曲微生物多样性的认识.1材料与方法1.1材料和仪器1.1.1样品采集中温大曲样品，取自河南某知名酒厂，取曲块表面厚度约为1cm的大曲作为曲皮样品，粉碎后备用;在曲块中心，取长、宽、厚均为5cm的正方体作为曲心样品，粉碎后备用.1.1.2主要试剂 2×TaqPCRMasterMix，上海天根生物公司产;引物ITS1/ITS4和515F/806R，氯化钠、苯酚、氯仿，生工生物上海股份有限公司产;无水乙醇，上海联硕生物技术有限公司产;TritonX-100，上海碧云天生物技术有限公司产;SDS，美国Amresco公司产;Tris，北京索莱宝科技有限公司产;EDTA，上海国药集团化学试剂有限公司产;醋酸铵，天津市科密欧化学试剂有限公司产.以上试剂均为分析纯.1.1.3主要仪器 MP200A型精密电子天平，上海良丰仪器仪表有限公司产;TG16-WS型台式高速离心机，安徽中佳科学仪器有限公司产;DKY-Ⅱ型恒温调速回转式摇床，倍辉北京产品部产;ZDX-35B型灭菌锅，上海三申医疗器械厂产;SW-CJ-1F型超净工作台，苏州净化设备有限公司产;JY92-Ⅲ型PCR仪，宁波新芝生物科技股份有限公司产;DYY-8C型琼脂糖电泳仪，北京市六一仪器厂产.1.2实验方法1.2.1基因组提取1.2.1.1样品预处理分别称取7g大曲曲皮和曲心样品，用20mL灭菌后的0.1mol/LPBS缓冲液悬浮，加入3—5颗玻璃珠，漩涡振荡5min后在300r/min转速下离心5min，取上清液，沉淀用PBS缓冲液重复洗涤3次，离心后合并上清液.将上清液于9000r/min转速下离心3min，弃去上清液，收集细胞沉淀.再用5mLPBS缓冲液重复洗涤3次，每次于9000r/min转速下离心3min，收集细胞沉淀.最后将细胞沉淀用1.5mLPBS缓冲液重新悬浮，该悬浮液用于基因组提取.1.2.1.2DNA的提取上述悬浮液中DNA的提取参照H.Y.Wang等[15]的方法.1.2.2PCR扩增与高通量测序采用原核微生物16SrRNA基因序列V4可变区设计的通用引物515F/806R[16]和真核生物通用引物ITS1/ITS4分别对上述基因组进行PCR扩增，两种引物的PCR扩增和高通量测序方法分别参照胡晓龙[17]和朱文优[18]的方法进行.1.2.3数据处理1.2.3.1序列质量控制采用Cutadapt（v1.9.1），Vsearch（1.9.6），Qiime（1.9.1）分析软件对所测原始序列进行质量控制：首先，将每对双向测序的序列进行比对，根据比对的末端重叠区进行拼接，拼接时保证至少有20bp的重叠区，去除拼接结果中含有N的序列;接著，去除引物和接头序列，去除两端质量值低于20bp的碱基，去除长度小于200bp的序列;最后，将上面拼接过滤后的序列与数据库进行比对，去除其中的嵌合体序列，得到最终的有效数据.1.2.3.2操作分类单元（OTU）分析采用Qiime′suclust程序将相似度为97%的有效序列归为一个OTU，并确定每个OTU的代表序列[17].将获得的每个OTU 的代表序列与RibosomalDatabaseProject（RDP）在线数据库进行比对，选取置信度为80%的阈值对上述序列进行分类，进而确定每个OTU的分类水平，即门、纲、目、科、属、种水平.2结果与讨论2.1大曲样品中真菌群落多样性及其组成分析2.1.1大曲真菌群落多样性大曲真菌群落稀疏曲线如图1所示.由图1可知，当测序深度超过10000序列时，曲皮和曲心样品中真菌群落ObservedOTU数目基本不再增加，稀疏曲线趋于平缓.由于本实验所测序列深度远高于10000条，因此，本文所选取样品有效测序数量能够较全面地反映待测大曲样品的真菌群落多样性信息.大曲真菌群落多样性指数见表1.由表1可知，经过IlluminaMiseq高通量测序和序列质量控制，曲皮和曲心样品中真菌菌群中所得有效序列分别为66850条和70954条.曲皮样品中真菌群落的Shannon和Chao1指数均略高于曲心样品，表明曲皮样品中真菌群落多样性和丰度高于曲心样品.这可能是由于在制曲和存放过程中曲皮和空气或地面直接接触，氧气充足，而曲心温度高于曲皮且氧含量低于曲皮，进而导致曲皮真菌群落多样性和丰度高于曲心，这与李燕荣等[19]的研究结果一致.2.1.2大曲真菌群落组成大曲曲皮和曲心样品中真菌群落组成如图2所示.由图2可知，代表性OTU序列的物种注释结果表明，除“门”水平外，大曲曲皮和曲心样品在不同分类水平上存在一定的差异.在“门”水平（图2a）），子囊菌门（Ascomycota）是曲皮和曲心样品中的唯一优势（相对含量≥1%）菌门，相对含量均大于99%，同时也是四川和安徽等地区中温大曲中的优势真菌菌门[18，20].在“纲”水平（图2b）），酵母纲（Saccharomycetes）和散囊菌纲（Eurotiomycetes）为大曲样品中的优势真菌，且其中酵母纲的相对含量远高于散囊菌纲的相对含量;较之于曲心，曲皮样品中酵母纲相对含量较高，散囊菌纲相对含量较低.在“目”水平（图2c）），酵母菌目（Saccharomycetales）和散囊菌目（Eurotiales）為大曲样品中的优势微生物，同时也含有少量的毛霉目（Mucorales）.在“科”水平（图2d）），共检测到9个科，其中复膜孢酵母科（Saccharomycopsidaceae）、发菌科（Trichocomaceae）、毕赤酵母科（Pichiaceae）和酵母科（Saccharomycetaceae）为大曲样品中的优势菌科，其在曲皮和曲心样品中的平均相对含量分别为65.3%，27.2%，3.5% 和2.2%.较之于曲心样品，曲皮中毕赤酵母科（6.3%）和酵母科（4.1%）的相对含量较高;复膜孢酵母科在曲皮（65.4%）和曲心（65.2%）中的相对含量差别不大;发菌科（23.3%）的相对含量较低.在“属”水平（图2e）），共检测到14个属，其中复膜孢酵母属（Saccharomycopsis）、散囊菌属（Eurotium）、毕赤酵母属（Pichia）和酵母属（Saccharomyces）为大曲样品中的4个优势菌属，其在曲皮和曲心样品中的平均相对含量分别为65.3%，26.3%，3.5%和2.2%.尽管复膜孢酵母属和毕赤酵母属是不同地域中温大曲样品共有的优势微生物，但不同地域中温大曲样品整体的优势微生物组成存在明显的差异，如安徽某酒厂中温大曲中有7种优势真菌，四川某酒厂中温大曲中则有10多种优势真菌[18，20]，这主要是由于地理环境、水源、气候、工艺等的不同所造成的微生物群落的区域差异.此外，复膜孢酵母属在曲皮样品（65.4%）中和曲心样品（65.2%）中的相对含量基本相同;而散囊菌属在曲皮样品（23.2%）中的相对含量低于曲心样品（29.3%）;毕赤酵母属和酵母属在曲皮样品（6.3%和4.1%）中的相对含量均远高于曲心样品（0.8%和0.3%）.在“种”水平（图2f）），共检测到15个种，其中扣囊复膜孢酵母（Saccharomycopsisfibuligera）、雪黄散囊菌（Eurotiumniveoglaucum）和毕赤酵母sp1（Pichiasp1）为曲皮和曲心样品中的优势真菌，其在曲皮和曲心样品中的平均相对含量分别为65.3%，26.1%和3.4%.在优势真菌组成上，曲皮和曲心样品中扣囊复膜孢酵母含量基本一致，分别为65.4% 和65.2%;雪黄散囊菌在曲皮样品（23.0%）中的含量低于曲心样品（29.2%）;毕赤酵母sp1在曲皮样品（6.1%）中含量远高于曲心样品（0.7%）.2.2大曲样品中细菌群落多样性及其组成分析2.2.1大曲细菌群落多样性经过IlluminMiseq高通量测序和序列质量控制，曲皮和曲心样品中细菌菌群中所得有效序列分别为42590条和50323条，其平均长度大小分别为459bp和462bp.通过图3所示大曲细菌群落稀疏曲线可以看出，测序深度大于10000条时，稀疏曲线趋于平缓，由于本实验所测序列深度远高于10000条，因此，本文所选取样品有效测序数量能够充分反映待测大曲样品的细菌群落多样性信息.由表1可知，曲心样品中细菌群落的Shannon指数高于曲皮样品，表明曲心样品中细菌群落多样性高于曲皮样品.但是，曲皮样品中细菌群落Chao1指数高于曲心样品，表明曲皮样品中细菌群落丰度略高于曲心样品，这一研究结果与李登勇等[21]发现的高温大曲细菌群落分布规律相近.2.2.2大曲细菌群落组成大曲曲皮和曲心样品中细菌群落组成如图4所示.由图4可知，曲皮和曲心部位细菌群落组成在门、纲、目、科属、种水平上均存在一定的差异.在“门”水平（图4a）），共检测到5个门.其中变形菌门（Proteobacteria）和厚壁菌门（Firmicutes）为曲皮和曲心样品中的优势菌门，其在曲皮和曲心样品中的平均含量分别为79.6%和17.1%.较之于曲心样品，曲皮中的变形菌门相对含量较高，厚壁菌门相对含量较低，而酸杆菌门仅在曲皮样品中可以检测到.在“纲”水平（图4b）），共检测到10个纲，其中γ-变形菌纲（Gammaproteobacteria）、芽孢杆菌纲（Bacilli）和α-变形菌纲（Alphaproteobacteria）为大曲样品中的优势菌纲.较之于曲心样品，曲皮中的γ-变形菌纲相对含量较高，而芽孢杆菌纲相对含量（9.9%）明显低于曲心（24.2%）.此外，Deltaproteobacteria，Holophagae，vadinHA17和鞘脂杆菌纲（Sphingobacteriia）4种纲仅在曲皮样品中可以检测到.大曲真菌群落多样性指数见表1.由表1可知，经过IlluminaMiseq高通量测序和序列质量控制，曲皮和曲心样品中真菌菌群中所得有效序列分别为66850条和70954条.曲皮样品中真菌群落的Shannon和Chao1指数均略高于曲心样品，表明曲皮样品中真菌群落多样性和丰度高于曲心样品.这可能是由于在制曲和存放过程中曲皮和空气或地面直接接触，氧气充足，而曲心温度高于曲皮且氧含量低于曲皮，进而导致曲皮真菌群落多样性和丰度高于曲心，这与李燕荣等[19]的研究结果一致.2.1.2大曲真菌群落组成大曲曲皮和曲心样品中真菌群落组成如图2所示.由图2可知，代表性OTU序列的物种注释结果表明，除“门”水平外，大曲曲皮和曲心样品在不同分类水平上存在一定的差异.在“门”水平（图2a）），子囊菌门（Ascomycota）是曲皮和曲心样品中的唯一优势（相对含量≥1%）菌门，相对含量均大于99%，同時也是四川和安徽等地区中温大曲中的优势真菌菌门[18，20].在“纲”水平（图2b）），酵母纲（Saccharomycetes）和散囊菌纲（Eurotiomycetes）为大曲样品中的优势真菌，且其中酵母纲的相对含量远高于散囊菌纲的相对含量;较之于曲心，曲皮样品中酵母纲相对含量较高，散囊菌纲相对含量较低.在“目”水平（图2c）），酵母菌目（Saccharomycetales）和散囊菌目（Eurotiales）为大曲样品中的优势微生物，同时也含有少量的毛霉目（Mucorales）.在“科”水平（图2d）），共检测到9个科，其中复膜孢酵母科（Saccharomycopsidaceae）、发菌科（Trichocomaceae）、毕赤酵母科（Pichiaceae）和酵母科（Saccharomycetaceae）为大曲样品中的优势菌科，其在曲皮和曲心样品中的平均相对含量分别为65.3%，27.2%，3.5% 和2.2%.较之于曲心样品，曲皮中毕赤酵母科（6.3%）和酵母科（4.1%）的相对含量较高;复膜孢酵母科在曲皮（65.4%）和曲心（65.2%）中的相对含量差别不大;发菌科（23.3%）的相对含量较低.在“属”水平（图2e）），共检测到14个属，其中复膜孢酵母属（Saccharomycopsis）、散囊菌属（Eurotium）、毕赤酵母属（Pichia）和酵母属（Saccharomyces）为大曲样品中的4个优势菌属，其在曲皮和曲心样品中的平均相对含量分别为65.3%，26.3%，3.5%和2.2%.尽管复膜孢酵母属和毕赤酵母属是不同地域中温大曲样品共有的优势微生物，但不同地域中温大曲样品整体的优势微生物组成存在明显的差异，如安徽某酒厂中温大曲中有7种优势真菌，四川某酒厂中温大曲中则有10多种优势真菌[18，20]，这主要是由于地理环境、水源、气候、工艺等的不同所造成的微生物群落的区域差异.此外，复膜孢酵母属在曲皮样品（65.4%）中和曲心样品（65.2%）中的相对含量基本相同;而散囊菌属在曲皮样品（23.2%）中的相对含量低于曲心样品（29.3%）;毕赤酵母属和酵母属在曲皮样品（6.3%和4.1%）中的相对含量均远高于曲心样品（0.8%和0.3%）.在“种”水平（图2f）），共检测到15个种，其中扣囊复膜孢酵母（Saccharomycopsisfibuligera）、雪黄散囊菌（Eurotiumniveoglaucum）和毕赤酵母sp1（Pichiasp1）为曲皮和曲心样品中的优势真菌，其在曲皮和曲心样品中的平均相对含量分别为65.3%，26.1%和3.4%.在优势真菌组成上，曲皮和曲心样品中扣囊复膜孢酵母含量基本一致，分别为65.4% 和65.2%;雪黄散囊菌在曲皮样品（23.0%）中的含量低于曲心样品（29.2%）;毕赤酵母sp1在曲皮样品（6.1%）中含量远高于曲心样品（0.7%）.2.2大曲样品中细菌群落多样性及其组成分析2.2.1大曲细菌群落多样性经过IlluminMiseq高通量测序和序列质量控制，曲皮和曲心样品中细菌菌群中所得有效序列分别为42590条和50323条，其平均长度大小分别为459bp和462bp.通过图3所示大曲细菌群落稀疏曲线可以看出，测序深度大于10000条时，稀疏曲线趋于平缓，由于本实验所测序列深度远高于10000条，因此，本文所选取样品有效测序数量能够充分反映待测大曲样品的细菌群落多样性信息.由表1可知，曲心样品中细菌群落的Shannon指数高于曲皮样品，表明曲心样品中细菌群落多样性高于曲皮样品.但是，曲皮样品中细菌群落Chao1指数高于曲心样品，表明曲皮样品中细菌群落丰度略高于曲心样品，这一研究结果与李登勇等[21]发现的高温大曲细菌群落分布规律相近.2.2.2大曲细菌群落组成大曲曲皮和曲心样品中细菌群落组成如图4所示.由图4可知，曲皮和曲心部位细菌群落组成在门、纲、目、科属、种水平上均存在一定的差异.在“门”水平（图4a）），共检测到5个门.其中变形菌门（Proteobacteria）和厚壁菌门（Firmicutes）为曲皮和曲心样品中的优势菌门，其在曲皮和曲心样品中的平均含量分别为79.6%和17.1%.较之于曲心样品，曲皮中的变形菌门相对含量较高，厚壁菌门相对含量较低，而酸杆菌门仅在曲皮样品中可以检测到.在“纲”水平（图4b）），共检测到10个纲，其中γ-变形菌纲（Gammaproteobacteria）、芽孢杆菌纲（Bacilli）和α-变形菌纲（Alphaproteobacteria）为大曲样品中的优势菌纲.较之于曲心样品，曲皮中的γ-变形菌纲相对含量较高，而芽孢杆菌纲相对含量（9.9%）明显低于曲心（24.2%）.此外，Deltaproteobacteria，Holophagae，vadinHA17和鞘脂杆菌纲（Sphingobacteriia）4种纲仅在曲皮样品中可以检测到.。
基于高通量测序的微生物群落结构和功能研究
基于高通量测序的微生物群落结构和功能研究近年来，随着高通量测序技术的不断发展，微生物群落的研究越来越受到重视。
微生物群落结构和功能的研究对于了解生态系统、推动农业、医学领域的发展等方面有着重要意义。
一、高通量测序技术高通量测序技术是一种快速准确地得到DNA片段序列的技术。
它适用于不同领域的研究，如微生物群落、基因组、转录组等。
它可以从大量的样本中同时提取数据，并得到大量的序列信息，它已经成为微生物学家研究微生物群体的强大工具。
二、微生物群落结构研究微生物群落包括细菌、真菌、病毒、古菌等多种微生物类型，它们共同构成了一个微生物生态系统。
微生物群落存在于土壤、水体、肠道等不同环境中，它们通过共生、拮抗、竞争等多种关系影响彼此的生长繁殖，最终达到微生物平衡。
高通量测序技术可以在不同的环境中分析微生物群落的结构，了解微生物群落的丰度、物种多样性等信息。
通过对微生物群落结构的研究，可以了解它们的分布规律、生态环境以及微生物的分类和演化。
三、微生物群落功能研究微生物群落的功能包括能量代谢、物质转化等多种生命过程。
微生物群落的代谢活动与其种类和数量密切相关。
通过高通量测序技术，可以分析微生物群落中不同种类的基因表达、代谢物之间的通路以及与宿主（如人体）的相互作用等。
同时，可以利用微生物群落的基因组学和转录组学等手段，对微生物群落的功能进行深入的研究，进而揭示微生物群落与宿主之间的相互关系，并为治疗疾病提供指导方针。
四、未来展望随着高通量测序技术的不断进步，微生物群落的研究将会有更为广泛和深入的应用。
微生物群落的研究可以为疾病诊断、治疗提供参考，也可以为农业生产提供相关的指导和帮助。
同时，微生物群落结构和功能的研究将会为保护生态环境提供科学依据，为各个领域提供更精准的数据支撑。
总之，高通量测序技术的广泛应用解决了传统时间和资源不足的问题，为微生物群落结构和功能研究提供了更好的工具和方法，预示着微生物群落研究在未来将会有更大的发展和适用。
基于高通量测序的微生物群落结构分析
基于高通量测序的微生物群落结构分析随着人类对微生物的认知越来越加深入，对微生物群落结构分析的需求也越来越高。
微生物在地球上广泛存在，从土壤、水体到人体内都有着丰富的微生物种类。
而如何快速、准确地鉴定出微生物群落结构，就成为了微生物学研究中的重要课题之一。
近年来，高通量测序技术的出现，推动了微生物学领域的革命，使微生物群落结构分析的研究变得更加迅速和精准。
一、高通量测序技术简介高通量测序技术是一种快速测序、高通量、高准确性的技术，能够对复杂的基因组、转录组、表观组等进行分析。
在微生物群落分析的应用中，通过高通量测序技术可以对微生物的种类、数量、功能进行深入分析，从而更好地了解微生物生态系统的复杂性和多样性。
高通量测序技术可以分为两大类，即基于芯片的测序和基于测序仪的测序。
基于芯片的测序是利用芯片上的固定探针来捕获特定的DNA序列，并将其扩增进行测序。
这种技术主要应用于小规模的测序，适用于大规模筛选、准确性高和到位度高的应用。
基于测序仪的测序则是通过将DNA序列随机割裂，并将其进行扩增和测序，实现对大规模序列的快速测定。
这种技术高通量、精度高、扩展性好，成为了微生物群落结构分析的主流方法之一。
二、基于高通量测序的微生物群落结构分析基于高通量测序的微生物群落结构分析主要包括以下几个步骤：1、采样和提取DNA。
采样时需要注意对不同生态系统进行不同的提取方法，如采集土壤样品需要进行土壤粒子分离和物理破碎。
DNA提取需要使用高质量的DNA提取试剂盒，并对DNA进行纯化和电泳检测。
2、选择合适的引物扩增V4区域。
在选择引物时需要注意引物的特异性和引物对芯片的适配性，通常可以选择V4区域进行扩增。
3、建库和质控。
将DNA经过PCR扩增得到文库，再经过多轮PCR扩增和检测。
然后进行文库测序，得到原始数据。
4、数据清洗和质控。
对于得到的原始数据，需要进行质控和过滤，去掉低质量、低信噪比或长度小于指定值的序列。
5、序列比对和分类。
浓香型大曲微生物群落结构及功能微生物
在浓香型大曲的酿造过程中，一些微生物能够产生特定的酶，这些酶能够促进大曲的发酵和提升酿酒 品质。例如，淀粉酶能够将淀粉分解为糖类，为后续的酒精发酵提供能量。
微生物代谢产物
一些微生物的代谢产物能够促进大曲的发酵和提升酿酒品质，例如乳酸能够降低pH值，创造酸性环境 ，抑制有害微生物的生长。
参与大曲的生物降解和环境适应
微生物群落结构特点
以细菌为主导
浓香型大曲的微生物群落 以细菌为主导，其中乳酸 菌和芽孢杆菌是主要的优 势菌群。
霉菌的作用
霉菌在糖化和发酵过程中 起到重要作用，但不同种 类的霉菌在功能上有所差 异。
酵母菌的分布
酵母菌在浓香型大曲中分 布较为广泛，但不同种类 的酵母菌在发酵过程中发 挥不同的作用。
曲发酵过程中发挥着关键 作用，如乳酸菌、芽孢杆菌等具有产酸、产香、 产酒精等作用，对大曲的口感和品质有重要贡献 。
研究展望与不足之处
尽管已经对浓香型大曲的微生物群落结构和功能微生物进行了深入研究，但仍需要 进一步探究不同微生物种类之间的相互作用机制及其对大曲品质的影响。
在研究方法上，需要进一步引入先进的分子生物学技术和生物信息学方法，以便更 深入地解析微生物群落的结构和功能。
05
结论与展望
研究结论
浓香型大曲微生物群落结构复杂，包括细菌、霉 菌、酵母菌等多种微生物。
微生物群落结构受到环境条件、原料成分、发酵 时间等多种因素的影响，这些因素对浓香型大曲 的品质和风味具有重要影响。
不同种类微生物在浓香型大曲发酵过程中发挥不 同的作用，如细菌主要参与糖类和蛋白质的代谢 ，霉菌主要参与淀粉和纤维素的分解，酵母菌则 主要进行酒精发酵和产生香气物质。
浓香型大曲微生物群 落结构及功能微生物
采用高通量测序技术分析清香型白酒酿造微生物
采用高通量测序技术分析清香型白酒酿造微生物雷振河【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2015(041)009【摘要】应用高通量测序技术(high-throughput sequencing)对清香型白酒酿造用大曲和酒醅中微生物构成进行了分析,得出大曲中优势原核微生物主要包括厚壁菌门、变形菌门、放线菌门、酸杆菌门,这四类原核微生物占大曲中原核微生物的30％左右;优势真核微生物主要包括曲霉菌属、热子囊菌属、根霉菌属、嗜热真菌属、假丝酵母.酒醅中优势原核微生物主要包括肠杆菌科、醋酸杆菌科、明串珠菌科、乳杆菌科、球菌科、芽胞杆菌科、假诺卡氏科,醋酸杆菌科和乳杆菌科是清香型发酵酒醅中优势原核微生物,占原核微生物70％以上;优势真核微生物主要包括双足囊菌科、假丝酵母、小囊菌科、毛霉科、赤壳科、毕赤酵母科、鬼伞科、酵母科、复膜孢酵母科、发菌科、丝孢酵母科,假丝酵母和毕赤酵母科是清香型发酵酒醅中真核微生物绝对优势菌.【总页数】4页(P164-167)【作者】雷振河【作者单位】山西杏花村汾酒集团有限责任公司,山西汾阳,032205【正文语种】中文【相关文献】1.基于高通量测序技术分析北京清香型大曲微生物多样性 [J], 张双燕;廖永红;纪南;周晓宏2.清香型白酒酿造过程中微生物的分类及鉴定研究 [J], 乔婧;杨玲;段冰;邵强;郭旭凯;郭睿3.清香型白酒酿造核心功能微生物的研究与应用 [J], 杜艾明;李良;李俊薇;胡申才4.清香型白酒酿造微生物和风味物质的研究进展 [J], 田德雨;闫子茹;危晶晶;关军锋;赵国群;刘金龙5.应用高通量测序技术解析清香型大曲微生物多样性 [J], 周森;胡佳音;崔洋;赵卫鹏;张如今;白逢彦因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高通量测序技术在航天大曲微生物多样性中的应用
高通量测序技术在航天大曲微生物多样性中的应用周森;胡佳音;赵卫鹏;刘红霞;于晓涛;魏金旺【摘要】太空搭载微生物已有多年历史,因太空具有超真空、超洁净、微重力、强辐射的特殊环境,可以引起染色体变异,导致表达性状改变.牛栏山酒厂利用太空搭载技术将"牛栏山一号清香型低温大曲"搭载神舟9号飞船,在太空遨游13 d,利用太空失重状态以及太空射线等因素对酒曲微生物进行诱导,采用免培养手段"高通量测序技术"对太空大曲和对照大曲进行微生物多样性分析.结果表明,大曲在航天飞行过程中,由于受到宇宙射线、高真空、弱磁场等多种环境因素的影响,改变了原有大曲中微生物的比例.%Space flight microbial experiment has a long history. Outer space has special environment (ultra-vacuum, ultra-clean, micro-gravity, and intense radiation) which might induce chromosome variation and further result in the change of microbial character expressions. Niulan-shan No.1 Qingxiang low-temperature Daqu was once used for space flight experiment (in Shenzhou-9 spaceship and in outer space for 13 d). In the conditions of weightless environment and intense radiation etc., high-throughput sequencing was applied to analyze Daqu microbial di-versity. Then the analytic results were compared with that of the contrast Daqu. And the results suggested that, microbial proportions in Daqu changed in outer space due to the influence of space environment.【期刊名称】《酿酒科技》【年(卷),期】2016(000)009【总页数】3页(P76-78)【关键词】航天大曲;对照大曲;高通量测序【作者】周森;胡佳音;赵卫鹏;刘红霞;于晓涛;魏金旺【作者单位】北京顺鑫农业股份有限公司牛栏山酒厂,北京101301;北京顺鑫农业股份有限公司牛栏山酒厂,北京101301;北京顺鑫农业股份有限公司牛栏山酒厂,北京101301;北京顺鑫农业股份有限公司牛栏山酒厂,北京101301;北京顺鑫农业股份有限公司牛栏山酒厂,北京101301;北京顺鑫农业股份有限公司牛栏山酒厂,北京101301【正文语种】中文【中图分类】TS261.1;Q93-3;TQ925.7高通量测序技术是传统测序技术一次革命性的改变，被称为下一代测序技术，可以一次对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定，为环境样品中微生物群落的多样性研究提供了契机。
基于高通量测序技术分析牛栏山大曲微生物多样性
基于高通量测序技术分析牛栏山大曲微生物多样性王勇;周森;魏金旺【摘要】为了探究牛栏山大曲的微生物菌群结构,为制曲工艺及成品曲质量评估提供理论依据,该研究采用高通量测序方法对牛栏山低温大曲原核16S rDNA V3/V4区和真核1TS1区进行微生物多样性分析.研究结果表明,从牛栏山大曲中共获得358种原核操作分类单元(OTU),乳酸菌类群是大曲中主体原核生物,维斯氏菌(Weissella confuse)、耐酸乳杆菌(Lactobacillus acctotolerans)和戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)分别占大曲总OTU的22.68％、16.54％和9.84％,同时大曲中高温放线菌(Kroppenstedtia ebumea)可占14.78％;而真核多样性较低,仅获得69种OTU,扣囊覆膜酵母(Saccharomycopsis fibuligera)和库氏毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)是主体真核微生物,其余真核微生物含量较低;综上得出,牛栏山大曲中原核微生物多样性要远高于真核微生物,且大曲主体微生物较为明显.【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2019(038)002【总页数】4页(P58-61)【关键词】大曲;高通量测序;微生物;多样性【作者】王勇;周森;魏金旺【作者单位】北京顺鑫农业股份有限公司牛栏山酒厂,北京101301;北京顺鑫农业股份有限公司牛栏山酒厂,北京101301;北京顺鑫农业股份有限公司牛栏山酒厂,北京101301【正文语种】中文【中图分类】Q93.3牛栏山二锅头属于清香型白酒，凭借清香纯正、口味甘冽、酒体醇厚等特点，逐渐成为我国北方清香型的代表性白酒之一，在国内具有较高的知名度[1-2]。
牛栏山二锅头主要以大曲作为糖化发酵剂，经过糖化、发酵、蒸馏和储存等步骤制得。
大曲是二锅头酿造中的主要糖化剂，是富含微生物菌系、酶系和曲香物质的微生态制品，具有糖化、发酵、生香等功能[3]，是白酒中微生物的主要来源。
剑南春大曲曲药培养过程中菌系_酶系的研究_唐清兰
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第 ４０ 卷 第 ２ 期 ２０１３年３月
酿酒 LIQUOR MAKING
Ｖｏｌ．４０．№．２ Ｍａｒ．，２０１３
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·科学实验·
中国白酒第一坊
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７０ ６０ ５０ ４０ ３０ ２０ １０
０ １
２３ 图２
春季 夏季 秋季
４ ５ ６ ７ ９ １１ １３ １５ ２１ ２７ ３７验曲 培养时间 ／ｄ
曲药培养过程中温度变化规律图
从图 ２ 中可以看出，春季制曲时曲药培养环境 温度在 ７￣１２℃，经 ２４ｈ 培养曲药曲心温度在 ２０℃左 右，培养 ８￣１０ｄ 升至最高温度 ５８℃，高温期持续 ２￣４ｄ 开始缓慢下降。夏季制曲环境温度在 ３０￣３５℃， 经 ２４ｈ 培养曲药曲心温度在 ４５℃左右，培养 ３￣５ｄ 升至最高温度 ５８℃，高温期维持 １０～１２ｄ 开始缓慢 下降。秋季制曲环境温度在 ２０￣２５℃，经 ２４ｈ 培养曲 药曲心温度在 ４０℃左右，培养 ５￣７ｄ 升至最高温度 ５８℃，高温期维持 ４￣６ｄ 开始缓慢下降。 2.3 不同季节曲药在培养过程中微生物数量变化 规律的研究结果
基于高通量测序技术分析菌草酒发酵过程中的真菌群落变化
基于高通量测序技术分析菌草酒发酵过程中的真菌群落变化范锦琳;王诗宇;易超;林冬梅;林占熺【期刊名称】《广东农业科学》【年(卷),期】2024(51)1【摘要】【目的】菌草酒是采用菌草为原料酿造的白酒,了解菌草酒不同发酵时期的真菌群落演变规律和优势真菌群落,为建立菌草酒微生物信息数据库、探究菌草酒的发酵机理、提升菌草酒的品质提供理论基础和科学依据。
【方法】采用Illumina MiSeq高通量测序技术对菌草酒酿造过程中不同发酵时期的酒醅样本进行测序分析,揭示菌草酒发酵过程中真菌群落的分布和演替规律。
【结果】在菌草酒发酵过程中,真菌群落的分布在不同发酵时期不断调整和平衡,共注释到8个门、22个纲、50个目、110个科、243个属。
在门水平上分析,优势真菌门包括子囊菌门(Ascomycota)、担子菌门(Basidiomycota)和接合菌门(Zygomycota),平均相对丰度分别为92.32%、4.88%和1.34%,其中子囊菌门是整个发酵过程中的核心优势菌门。
在属水平上分析,优势真菌属包括未分类属、酵母属(Saccharomyces)、曲霉属(Aspergillus)、青霉属(Penicillium)、木耳属(Auricularia)、被孢霉属(Mortierella)和镰刀菌属(Fusarium),平均相对丰度分别为45.53%、35.11%、2.72%、2.06%、1.60%、1.25%和1.00%,其中未分类属和酵母属在发酵过程中发挥重要作用。
主成分分析(Principal component analysis,PCA)结果显示,发酵前和发酵后样本真菌群落的遗传距离均较远。
【结论】菌草酒酿造过程不同发酵时期的酒醅中真菌群落的组成和多样性存在较大差异,而发酵前和发酵后的群落结构差异最为显著。
【总页数】11页(P116-126)【作者】范锦琳;王诗宇;易超;林冬梅;林占熺【作者单位】国家菌草工程技术研究中心;福建农林大学生命科学学院【正文语种】中文【中图分类】S554.9【相关文献】1.基于高通量测序的草莓酒发酵过程中的细菌群落分析2.基于高通量测序技术分析2种菌草根际土壤细菌群落多样性3.基于高通量测序技术分析2种菌草根际土壤真菌群落多样性4.基于高通量测序分析豆粕发酵过程中真菌群落的组成和变化5.高通量测序技术分析鲜食花生贮藏过程中真菌群落的的组成和变化因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
基于高通量测序技术分析南方清香型白酒大曲的微生物多样性
基于高通量测序技术分析南方清香型白酒大曲的微生物多样性凌荔;方尚玲;牟飞燕;董孝元;陈茂彬;李良
【期刊名称】《酿酒科技》
【年(卷),期】2023()1
【摘要】利用高通量测序技术对不同香型大曲及南北两地清香型大曲中微生物菌群结构进行分析比较。
结果表明,南方清香型白酒大曲的细菌以芽孢杆菌属(Bacillus)为优势菌群,其次以魏斯氏菌属(Weissella)、片球菌属(Pediococcus)及其他乳酸菌(Lactobacillus)为主要菌群;真菌优势菌种为覆膜孢酵母属(Saccharomycopsis),其次是弯曲假丝酵母(Apiotrichum)、伊萨酵母属(Issatchenkia)、异常威克汉姆酵母属(Wickerhamomyces)等;霉菌以曲霉属(Aspergillus)占比最多。
微生物群落由于制曲工艺不同与高温、中高温大曲有较为明显的差别,南北两地清香型白酒大曲的细菌真菌优势菌属均一致,但南方清香型白酒大曲中各类乳酸菌属与酵母属较北方清香型大曲丰富。
【总页数】10页(P51-60)
【作者】凌荔;方尚玲;牟飞燕;董孝元;陈茂彬;李良
【作者单位】湖北工业大学生物工程与食品学院;黄鹤楼酒业有限公司
【正文语种】中文
【中图分类】TS262.3;TS261.1
【相关文献】
1.基于高通量测序技术分析北京清香型大曲微生物多样性
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3.高通量测序技术分析酱香型白酒下沙轮次堆积过程的微生物多样性
4.基于高通量测序技术分析浓香型白酒大曲真菌菌群多样性
5.采用高通量测序技术分析宝丰清香型白酒大曲的真菌多样性
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高通量测序技术在酿酒微生物多样性研究中的应用谭峰旭
高通量测序技术在酿酒微生物多样性研究中的应用谭峰旭发布时间：2021-10-14T02:07:25.615Z 来源：《基层建设》2021年第16期作者：谭峰旭[导读] 中国酒精产品种类繁多，包含了白酒、米酒、黄酒、啤酒和葡萄酒，都有悠久的酿造历史，有自己独特的风味贵州茅台酒股份有限公司贵州遵义 563100摘要：中国酒精产品种类繁多，包含了白酒、米酒、黄酒、啤酒和葡萄酒，都有悠久的酿造历史，有自己独特的风味。
其中茅台酒、绍兴黄酒、烟台长玉酒因其独特的味道而闻名据报道，中国每年饮酒量超过40亿吨，深受国内外消费者的赞赏。
中国葡萄酒产品的独特风味与酿造过程中微生物的生长和衰变有关。
细菌、酵母、霉菌和其他微生物在产生和形成香气的过程中发挥着至关重要的作用。
混合材料、混合技术、地理位置和气候条件等因素将影响混合微生物群落结构。
因此，酿造的微生物多样性与我国各种葡萄酒产品的风味特征密切相关。
关键词：高通量测序平台；主成分分析；相对丰度热图；白酒；葡萄酒；高速测序技术是分析酿酒微生物多样性的重要手段。
与其他方法相比，它具有简单排序方法、高吞吐量、高速度和高精度的特点。
根据对技术特点和宽带测序平台的介绍，重点介绍了在酿酒领域微生物多样性领域常用的数据分析方法和应用现状，旨在为酿酒领域微生物多样性研究人员提供一个系统和全面的战略。
一、高通量测序技术中常用的数据分析方法用于微生物多样性研究的数据分析方法包括主要成分分析（APC）、规范相关性分析（CCA）和相对丰度热图。
1. PCA是一种多维统计分析方法，主要用于对大量原始数据样本进行降维，分析样本之间的差异，并对不同样本进行分类。
PCA可以通过SPSS、canoco等软件进行分析。
一般情况下，分析结果可以用得分图和负荷图来反映，前者可以反映样本之间的差异。
主成分分析（PCA）反映排序数据在坐标轴上的行、行、列之间的关系，直接反映主成分和变量的得分。
这可以作为进一步分析的基础，但主成分分析中样本间的关系只能用离散距离来度量。
基于高通量测序分析建曲发酵过程中微生物多样性变化
基于高通量测序分析建曲发酵过程中微生物多样性变化谭斯尹;潘礼业;罗宇琴;李国卫;陈向东;孙冬梅;张军【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2024(26)1【摘要】目的:明确建曲在发酵过程中微生物种类、优势类群的组成和功能特征的变化。
方法:通过高通量测序技术对建曲不同发酵时间点的细菌和真菌群落结构和功能进行分析。
结果:建曲发酵过程中,真菌的优势类群为曲霉菌属(Aspergillus, 36.57%),其中溜曲霉(Aspergillus tamarii, 22.30%)和小菌核曲霉(Aspergillus minisclerotigenes,21.19%)为发酵后的优势菌种。
细菌由红串红球菌(Rhodococcus erythropolis,29.56%)和类肠膜魏斯菌(Weissella paramesenteroides,25.24%)先后成为优势类群。
在整个发酵过程中,建曲的优势菌群均出现明显的变化,反映了建曲发酵过程中存在清晰的群落演替。
功能预测分析显示,建曲中存在丰富的与代谢途径相关的真菌和细菌功能基因,且不同发酵时间点微生物发挥的功能也不同。
结论:建曲发酵后的真菌主要为溜曲霉和小菌核曲霉,细菌主要为红串红球菌和类肠膜魏斯菌,不同发酵时间点其菌群相对丰度和功能有所不同,为后续建立稳定可控的建曲现代发酵工艺提供参考依据。
【总页数】9页(P104-112)【作者】谭斯尹;潘礼业;罗宇琴;李国卫;陈向东;孙冬梅;张军【作者单位】广东一方制药有限公司;广东省中药配方颗粒企业重点实验室【正文语种】中文【中图分类】R282【相关文献】1.高通量测序分析玉米秸秆与牛粪联合发酵阶段微生物多样性变化2.基于高通量测序分析复配小曲白酒发酵过程中微生物群落结构及多样性3.基于Illumina Miseq 高通量测序技术探究藏茶发酵过程中微生物菌群变化4.高通量测序分析黄酒糟制香糟自然发酵过程中微生物群落多样性5.基于高通量测序分析覆盆子酵素自然发酵过程中的微生物多样性因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
剑南春大曲曲药培养过程中菌系、酶系的研究
剑南春大曲曲药培养过程中菌系、酶系的研究
唐清兰;徐姿静;徐占成
【期刊名称】《酿酒》
【年(卷),期】2013(040)002
【摘要】该研究通过对不同踩曲季节浓香型大曲曲药发酵过程中微生物及生物酶的跟踪分析,发现在一年的踩曲季节中,春季最适宜制曲.在大曲培养过程中,微生物数量在大曲升温期出现高峰,高温期步入低谷,降温期又稍有回升；在整个培养过程中霉菌占绝对优势,细菌次之,酵母菌相对较少.同时,曲药生物酶在升温期大量富集,到高温后期各种生物酶活明显下降,降温期又略有回升.该研究成果为制曲工艺优化提供了科学的理论依据.
【总页数】6页(P20-25)
【作者】唐清兰;徐姿静;徐占成
【作者单位】四川剑南春集团有限责任公司,四川绵竹618200
【正文语种】中文
【中图分类】TS262.3;TS261.11;TS201.2
【相关文献】
1.剑南春大曲曲药真菌群落结构的分析 [J], 徐占成;唐清兰;刘孟华;徐姿静
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3.酒曲酶系、菌系特征及酿造过程中\r微生物动态变化研究 [J], 关芊彤
4.酒曲酶系、菌系特征及酿造过程中微生物动态变化研究 [J], 关芊彤;
5.浓香型大曲菌系、酶系的研究进展 [J], 汪凌旭;易卓林;赵海;黄丹;罗惠波
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