药物分析-药物的杂质检查
药物分析-药物的杂质检查方法总结
酸碱滴定法
指示液法
pH测定法
物理性状检查法
1.臭、味
2.挥发性
3.颜色
4.溶解性
5.其他物理属性（旋光性、黏度等）
红外分光光度法（IR）
主要用于药物中无效或低效晶型检查
原子吸收分光光度法（AAS）
主要用于金属杂质的检查
其他方法
热分析方法
热重分析（TGA）
记录质量随温度变化的曲线
差热分析（DTA）
记录式样与参比物之间温度差与温度关系，以温度差对温度作图
差示扫描量热法（DSC）
记录输给待测物与参比物的能量差与温度间关系，分功率补偿型和热流型
药物的杂质检查方法
杂质检查方法
类别
特点
化学法
显色反应检查法
多为目视比色或对照法
沉淀反应检查法
比浊法或重量法测定杂质含量
生成气体的检查法
滴定法
色谱法（首选）
薄层色谱法
1.杂质对照品法
2.供试品试液自身稀释对照法
3.杂质对照品与供试品溶液自身稀释对照并用法（多个杂质）
4.对照药物法
高效液相色谱法
1.分离效能高、专属性强、检测灵敏度性好，可准确测定色谱峰面积
2.外标法（杂质对照品法）
3.加校正因子的主成分对照法（适用于已知杂质）
4.不加校正因子的主成分对照法（适用于没有对照品的杂质）
5.面积归一化法（杂质含量的初略考察）
气相色谱法
1.测定药物中挥发性杂质，尤其是残留溶剂
2.可采用“标准溶液加入法”
毛细管电泳法
酶类药物中的Vis）
药物分析-药物中一般杂质的检查
第三节 药物中一般杂质的检查
一般杂质检查gCl浑浊的形成； （2）产生较好的乳浊； （3）避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及 氧化银沉淀的形成。
Fe3+ + 6SCN-
HCl [Fe(SCN)6-]3- 红色
2. 测定条件 （1）标准铁溶液：FeNH4(SO4)2·12H2O （硫酸
铁铵） （2）酸 度 稀盐酸4ml/50ml （3）硫氰酸铵：加过量硫氰酸铵，使反应向 正反应方向进行 ；消除Cl-、PO43-、SO42-等 的干扰。
（4）氧化剂：过硫酸铵可氧化Fe2+为Fe3+， 同时可防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色。
加 硝 酸 后 加 热 也 可 氧 化 Fe2+ 为 Fe3+, 需 除 去 亚硝酸的干扰。
（5）检查Fe2+和Fe3+ 。
3．干扰的排除
当供试液管与对照溶液管色调不一致，或所呈硫氰 酸铁的颜色较浅不便比较时，可分别移入分液漏斗中， 加正丁醇或异戊醇提取，分别取提取液比色。
(二）巯基醋酸法(BP)
⑵供试品为Fe3+ 能消耗KI，SnCl2 ，先可 酸性氯化亚锡。
⑶环状结构的有机药物，ChP采用碱破坏法。
如酚磺酞、呋塞米+氢氧化钙；苯甲酸钠、对氨基水 杨酸钠+无水碳酸钠（硝酸镁乙醇溶液）
2.Ag-DDC法(二乙基二硫代氨基甲酸银， USP采用此法)
1）原理：金属锌与酸作用产生新生态氢， 与微量砷盐反应生成具挥发性的砷化氢还原 Ag-DDC吡啶溶液，产生红色胶态银，同时 在相同条件下使一定量标准砷溶液呈色，用 目视比色法或在510nm波长处测定吸收度进 行比较。
药物分析 第三章 药物杂质检查
6
例如： 药用规格 硫酸钡（BaSO4） 如存在可溶性钡盐则导致医疗事故。 检查：酸溶性钡盐、重金属、砷盐 试剂规格 硫酸钡 对可溶性钡盐不做检查；检查氯化物、铁、灼烧失 重
7
二、药物杂质的来源
杂 质
药物生产过程引入
的
来
源
药物贮存期间引入
8
（一）生产过程引入的杂质 （1）所用原料不纯、合成工艺中未反应完全的原料、 合成中间体、副产物等。
三、药物杂质的分类
1.按来源可分为:一般杂质和特殊杂质 一般杂质 指在自然界中分布广泛，在多种药物的生产或 贮存过程中容易引入的杂质
如：酸、碱、水分、氯化物、硫酸盐、重金属、砷盐、 硫化物、氰化物、铁盐、铵盐、易炭化物、干燥失重、 炽灼残渣、溶液颜色与澄清度、有机溶剂残留量等。
一般杂质其检查方法收载在中国药典的附录中。
30
例：肾上腺素中肾上腺酮的检查
盐酸溶液
样品
供试品液（2.0mg/ml）
λ＝310nm下测定，规定 A310≤0.05
肾上腺酮 肾上腺素
31
一般杂质检查规则
《药品检验操作标准》规定： 1. 遵循平行操作原则 （1）仪器的配对性 如纳氏比色管应配对， 刻度线高低相差不超过2mm，砷盐检查时导气 管长度及孔的大小要一致
28
如：蒸馏水中氯化物的检查 操作：在供试品溶液中加入试剂，在实验条 件下反应，不得出现正反应。
50ml蒸馏水
HNO3 AgNO3
不得发生混浊
0.2mgCl-/50ml Cl- 4μg/ml
规定水中氯化物含量不大于4μg/ml
29
比较法 取一定量供试品，在规定条件下测定待检杂 质参数（如吸光度、旋光度等），与规定数值 （限量）比较，判断供试品中杂质限量。（不 需对照品）
第2章药物的杂质检查-药物分析
第4章药物的鉴别试验依据药典进行的药物分析主要有三大项内容：鉴别、检查和含量测定。
药物的鉴别试验（Identification test），是利用药物的分子结构所表现的特殊的化学行为（如进行化学反应、测定药物的理化常数等）或光谱、色谱、生物学等特征，来判断药品的真伪。
药物的鉴别在药品质量检验工作中属首项工作。
只有在药物被鉴别无误、证实被分析的药物是真的后，才有必要接着进行检查和含量测定等分析工作。
药典所收载的药物项下的鉴别试验方法，仅适用于贮藏在有标签容器中的药物，用以证实是否为其所标示的药物。
这些鉴别试验方法虽然具有一定的专属性，但是还不足以用来确证化合物的结构，因而与分析化学中的定性鉴别有所区别，不能用来鉴别未知物。
因此，《中国药典》（2010年版）凡例中对药品“鉴别”项目的要求是：鉴别项下规定的试验方法，系根据反映该药品某些物理、化学或生物学等特征所进行的药物鉴别试验，不完全代表对该药品化学结构的确证。
本章讲授药物鉴别常用的方法和药物的一般鉴别试验，其中以化学鉴别法和仪器鉴别法为重点。
4.1 鉴别试验的项目鉴别项下规定的实验方法，仅仅适用于鉴别药物的真伪。
对于原料药，还应该结合“性状”项下的外观和物理常数进行确认。
4.1.1 性状（Description）药物的性状反映了药物特有的物理性质，一般包括外观、嗅、味、溶解度以及物理常数等。
性状观测是药品检验工作的第一步，也是不可省略的极其重要的一步。
只有性状符合规定的供试品，方可继续检查杂质限量和测定含量，否则不必进行检查和含量测定。
1. 外观所谓药品的外观，是指药品的外表感官和色泽，包括药品的聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等性质。
如《中国药典》（2010年版）对维生素A的描述为“本品为淡黄色溶液或结晶与油的混合物（加热至60 ℃应为澄清溶液）；无臭；在空气中易氧化，遇光易变质。
”对于维生素AD的描述为“本品或本品内容物为黄色至橙红色的澄清油状液体；无败油臭或苦味”。
药物分析 第03章药物的杂质检查
（二）第二法 炽灼残渣法
适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸、乙醇及碱的有机药物。
1. 原理 对照法 500～600℃炽灼后的残渣，经处理后，依一法检查。
2. 操作方法
HNO3、 500～600℃炽灼残渣 样品：S置坩埚中 残渣 HCl、 H2O 氯化物 依一法检查 NH3 H2O调节至pH7.0左右 pH3.5缓冲液2.0ml
管1 管2 （样品管） （对照管）
蒸馏水中氯化物的检查
HNO3、AgNO 3TS 5滴 1mL 50ml蒸馏水 不得发生浑浊
0.2mg/50mL 4µ g/mL
三、 杂质限量的计算
允许杂质存在的最大量 杂质限量= 100% 供试品量 标准溶液体积 标准溶液浓度 杂质限量= 100% 供试品量
二、药物中杂质的来源
1. 生产过程中引入 （1）原料、反应中间体及副产物 （2）试剂、溶剂、催化剂类 （3）生产中所用金属器皿、装置以及其他不耐酸、
碱的金属工具所带来的杂质
2. 贮藏过程中产生 水解、氧化、分解、异构化、晶形转变、聚合、 潮解和发霉等
易发生水解反应的结构： 酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等 易发生氧化反应的结构： 醚、醛、酚羟基、巯基、亚硝基、双键等
例：中国药典(2005)重金属检查法中，所使用的显色剂是（ A. 硫化氢试液 ）
B. 硫代乙酰胺试液
C. 硫化钠试液 D. 氰化钾试液
E. 硫氰酸铵试液
五、砷盐检查法 （一）古蔡法
1. 原理 对照法
Ch.P.（2005）、BP（2000）
Zn HCl H2 AsO33 AsH3
C. 所含杂质的绝对量不同 D. 化学性质及化学反应速度不同 E. 所含有效成分的生理效应不同
药物分析-第三章杂质检查
1、TLC法
优点：设备简单、操作简便、分离速度快 灵敏度和分辨率较高
应用：药物中杂质的检查 方法：（1）杂质对照品法
（2）供试品溶液自身稀释对照法 （3）杂质对照品与供试品溶液自身稀释对 照并用法 （4）对照药物法 注意：质量标准中应规定杂质的个数和限量
例：P106
（2）供试品溶液自身稀释对照法 适用范围：①杂质的结构不明确；
②虽然杂质的结构明确，但没有杂质对照品。
在新药的研发中，应该对新药中的杂质进行化学和安 全性研究。
杂质控制要合理地确定杂质检查项目与限度， 合理地选择杂质检查方法。
（一）有机杂质在药品质量标准中的项目名称 1、以杂质的化学名称作为项目名称
当被检查的杂质是已知化合物时(特定杂质)，就以 该化合物的化学名称作为质量标准的项目名称；
2、以某类杂质的总称作为项目名称
当杂质不能明确为单一物质而又为某一类物质时， 则以这类物质总称作为项目名称。
3、以检测方法作为项目名称
当被检查杂质的结构未知，亦不属于具体的类别时， 可用“吸光度”等，与检查方法相应的名称作为项目名 称。
（二）杂质检查项目的确定
杂质检查项目的确定要有针对性。
药品标准中杂质检查项目应包括药物在 质量研究和稳定性考察中检出的，并在批 量生产中出现的杂质和降解产物。
= 10×5.0/2.0×106×25/100×100% = 0.01%
例2．葡萄糖中重金属的检查： 已知：S = 4.0g；C = 10μg/ml；L = 5×10-6 求： V = ？ 解：V = L×S / C
药物分析 药物的杂质检查
杂质是指药物中存在的⽆治疗作⽤或影响药物的稳定性和疗效，甚⾄对⼈健康有害的物质。
药物的纯度，是指药物的纯净程度。
在药物的研究、⽣产、供应和临床使⽤等⽅⾯，必须保证药物的纯度，才能保证药物的有效和安全。
通常可从药物的结构、外观性状、理化常数、杂质检查和含量测定等⽅⾯作为⼀个有联系的整体来表明和评定药物的纯度，所以在药物的质量标准中就规定了药物的纯度要求。
药物中含有杂质是影响纯度的主要因素，如药物中含有超过限量的杂质，就有可能使理化常数变动，外观性状产⽣变异，并影响药物的稳定性；杂质增多也使含量明显偏低或活性降低，毒副作⽤显著增加。
因此，药物的杂质检查是控制药物纯度的⼀个⾮常重要的⽅⾯，所以药物的杂质检查也可称为纯度检查。
⼀般化学试剂不考虑杂质的⽣理作⽤，其杂质限量只是从可能引起的化学变化上的影响来规定。
故⼀般情况下不能与临床⽤药的纯度互相代替。
随着分离检测技术的提⾼，通过对药物纯度的考察，能进⼀步发现药物中存在的某些杂质对疗效的影响或其具有的毒副作⽤。
且随着⽣产原料的改变及⽣产⽅法与⼯艺的改进，对于药物中杂质检查项⽬或限量要求也就有相应的改变或提⾼。
杂质的来源，主要有两个：⼀是由⽣产过程中引⼊；⼆是在贮藏过程中受外界条件的影响，引起药物理化性持发⽣变化⽽产⽣。
由于所⽤原料不纯或所⽤原料中有⼀部分未反应完全，以及反应中间产物与反应副产物的存在，在精制时未能完全除去，都会使产品中存在杂质。
在贮藏过程中在温度、湿度、⽇光、空⽓等外界条件影响下，或因微⽣物的作⽤，引起药物发⽣⽔解、氧化、分解、异构化、晶型转变、聚合、潮解和发霉等变化，使药物中产⽣有关的杂质。
不仅使药物的外观性状发⽣改变，更重要的是降低了药物的稳定性和质量，甚⾄失去疗效或对⼈体产⽣毒害。
药物中的杂质按来源可分为⼀般杂质和特殊杂质。
⼀般杂质是指在⾃然界中分布较⼴，在多种药物的⽣产和贮藏过程中容易引⼊的杂质，如酸、碱、⽔分、氯化物、硫酸盐、砷盐、重⾦属等。
大学药学-药物分析-药品的杂质检查-试题与答案(附详解)-
药物分析-药品的杂质检查一、A11、药物及其制剂的成分中不属于杂质范畴的是A、药物中的残留溶剂B、药物中的多晶型C、阿司匹林片中的水杨酸D、药物中的合成中间体E、维生素AD胶丸中的植物油2、下列不属于杂质范畴的是A、阿司匹林中的游离水杨酸B、头孢地嗪钠中的残留溶剂C、复方新诺明中的磺胺甲噁唑D、药物中的多晶型E、药物合成中的中间体3、药物的杂质检查主要是指A、检查杂质是否存在B、检查杂质的含量多少C、检查杂质含量是否超过限量D、检查杂质的种类E、检查杂质的结构4、杂质限量常用的表示方法有A、mgB、ngC、mol／LD、gE、%或ppm5、药物中的重金属检查是在规定pH条件下与硫代乙酰胺作用显色，该条件为A、pH2.0～2.5B、pH3.0～3.5C、pH4.0～4.5D、pH4.5～5.0E、pH5.0～5.56、中国药典重金属的检查法，收载方法的数量是A、一种B、二种C、三种D、四种E、五种7、在中国药典中检查药物所含的微量砷盐，常采用A、古蔡氏法B、硫代乙酰胺法C、微孔滤膜法D、酸碱滴定法E、非水滴定法8、现有一药物为苯巴比妥，欲进行重金属检查，应采用《中国药典》上收载的重金属检查的哪种方法A、第一法B、第二法C、第三法D、第四法E、第五法9、药物中氯化物的检查，使用的试剂是A、氯化钾B、碘化钾C、硫代乙酰胺D、硝酸银E、溴化汞10、可以和硝酸银试剂反应生成白色沉淀的杂质是A、重金属B、砷盐C、硫酸盐D、氯化物E、水杨酸11、硫代乙酰胺法用于检查A、重金属B、砷盐C、氯化物D、硫酸盐E、铁盐12、在中国药典中检查药物所含的微量砷盐，常采用A、Ag-DDC法B、微孔滤膜法C、酸碱滴定法D、非水滴定法E、硫代乙酰胺法13、对杂质正确的叙述是A、药物中不允许任何杂质存在B、药物中的杂质均无害C、药物在生产和贮存过程中所引入的药物以外的其它化学物质称为杂质D、药物中的光学异构体不是杂质E、药物中的杂质均有害14、检查杂质氯化物时常加入的酸为A、盐酸B、硫酸C、硝酸D、醋酸E、高氯酸15、重金属杂质的代表是A、铅B、铜C、银D、锌E、汞16、药物中铁盐杂质检查所用的试剂是A、稀硝酸B、硫酸C、硫氰酸铵D、硫代乙酰胺E、硫酸钾17、用古蔡法检查砷盐时，导气管中塞入醋酸铅棉花的目的是除去A、I2B、AsH3C、H2SD、HBrE、KI18、硫酸盐检查法的试剂为A、氯化钡B、硝酸银C、硫氰酸盐D、碱性碘化汞钾E、氯化铵二、B1、所含待测杂质的适宜检测量为A.0.002mgB.0.01～0.02mgC.0.02～0.05mgD.0.05～0.08mgE.0.1～0.5mg<1> 、氯化物检查法中，50ml溶液中A B C D E<2> 、重金属检查法中，35ml溶液中A B C D E<3> 、硫酸盐检查法中，50ml溶液中A B C D E2、A.铁盐检查B.氯化物检查C.硫酸盐检查D.葡萄糖中重金属检查E.磺胺嘧啶中重金属检查以下试剂用于何种检查<1> 、硫化钠试液A B C D E<2> 、氯化钡试液A B C D E<3> 、硫代乙酰胺试液A B C D E答案部分一、A11、【正确答案】 E【答案解析】本题的考点是杂质的概念。
药物的杂质检查 杂质限度检查 (药物分析课件)
杂质限量的检查
杂质限量 药物中所含杂质的最大允许量，通常用百分之几或百万分之几来表示。
例如《中国药典》(2020年版）中规定布洛芬炽灼残渣不得超过0.1%。
杂质的限量检查 药物中杂质的检查，一般也不要求测定其含量，而Байду номын сангаас检查杂质的量是
否超过限量。
杂质限量的检查
对危害人体健康，影响药物稳定性的杂质，必须严格控制其限量。 砷对人体有毒，其限量规定较严，一般不超过百万分之十。 重金属 (其中以铅为主)易在体内积蓄，引起慢性中毒，并影响药 物的稳定性，允许存在的量也很低。
杂质的控制方法
限量 ip检sLuom查redm法olor
sit amet
定量
Lorem
ip测sum定d法olor
sit amet
杂质限量的检查
只要把杂质的量控制在一定的限度以内，仍 然能够保证用药的安全和有效。
药物中所存在的杂质，在不影响药物疗效和 药物使用安全的前提下，综合考虑药物生产的可 行性与产品的稳定性，是允许药物中含有一定量 的杂质的。
药物中杂质限量的制订除了根据杂质本身的性质外，还要根据 生产所能达到的水平并参考各国药典的惯例。
杂质限量的计算
供试品(S)中所含杂质 的量是通过与一定量杂质标 准溶液进行比较来确定。
杂质的限量检查法
对照法 灵敏度法 比较法 限量检查时，一般不需要测出
杂质的准确含量。
对照法
杂质的限量检查法
取一定量待检杂质的标准溶液与一定量供试品溶液在相同条件下加入 一定的试剂处理后，比较反应结果，从而判断供试品中所含杂质是否超过 限量。该法的检测结果，只能判定药物所含杂质是否符合限量规定，一般 不能测定杂质的准确含量。
药物的杂质检查 特殊杂质检查 (药物分析课件)
01
杂质对照品法
薄层色谱检查方法
02
对照药物法ຫໍສະໝຸດ 03自身稀释对照法薄层色谱检查方法
杂质对照品法 限度法
杂质对照品法适 用于已知待测杂质 且具有该杂质的对 照品。
薄层色谱法
杂质对照品法（限度法）
供试品溶液 杂质对照品溶液 同一块薄层板上点样 展开 斑点定位
供试品溶液色谱图中待检杂质的斑点颜色和大小不得超过杂质 对照溶液色谱中的斑点颜色和大小，以判断供试品中的特殊杂质是 否超过限量。
薄层色谱法
自身稀释对照法
供试品溶液的自身稀释对照法是将供试品溶液按杂 质限量稀释至一定浓度的溶液作为对照溶液。
供试品 溶解供试品溶液 供试品溶液 稀释对照溶液
同一薄层板上点样 展开
斑点定位
薄层色谱法
结果判定
供试品溶液色谱中除主斑点外的其他斑点，与自身稀释对照溶液中 所显主斑点进行比较，以判断供试品溶液中特殊杂质是否超过限量，这 种方法准确度较差，要求供试品与杂质对显色既显相同的颜色，显色灵 敏度也应相同或相近。
特殊杂质检查
特殊杂质检查
特殊杂质检测 方法
薄层色谱法
高效液相色谱 法
紫外-可见分光 光度法
薄层色谱法
色谱法 色谱法能利用药物与杂质在互不相容的两相中的分配系数或其他性质的
差异而被分离，因此这种方法广泛应用在杂质检查中。
薄层色谱法 薄层色谱法的分离效能、灵敏度虽然不如高效液相色谱法，但是和紫
外可见-分光光度法相比较，专属性要强，且不需要特殊设备，检测成本低。
对照药物法
薄层色谱法
1
2
3
1.供试品溶液①：每1ml含有5mg马来酸麦角新碱溶液； 2.供试品溶液②：每毫升中含有0.2毫克马来酸麦角新碱溶液； 3. 马来酸麦角新碱对照品溶液。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
1
药物的杂质检查
第二节 杂质的检查方法
2
一、杂质的研究规范
※△二、杂质的常用检查方法
3
一、杂质的研究规范
? （一）、有机杂质在药品质量标准中的 项目名称
? （二）、杂质检查项目的确定 ? （三）、杂质限度的确定 ? （四）、杂质检查方法的选择与验证
4
一）、有机杂质在药品质量标准中的 项目名称
24
例：吡罗西康中有关物质的检查
供试液：20mg/ml 对照液：0.2mg/ml (供试液稀释
100倍)供试液与对照液分别 点于同一硅胶GF254薄层板
25
展开剂：氯仿-丙酮-甲醇(25:25:5)
紫外灯 (254nm) 观察
判断:供试品溶液如显杂质斑点 其颜色≯对照液 主斑点颜色.
26
(3)杂质对照品法与供试品 自身稀释对照法并用
灵敏、简便、快速， 不需要特殊的设备、费用低， 具有分离和鉴定双重作用.
17
2. TLC的系统适用性实验
1)检测灵敏度 2)比移值 3)分离效能
18
3. 常用方法
(1) 杂质对照品法
首先确认存在的待检杂质 是什么,并且能够得到杂质对 照品。
19
例：枸橼酸乙胺嗪中检查 N-甲基哌嗪
供试品溶液： 50mg/ml的甲醇液
41
4.不加校正因子的主成分自身对照法 用于没有杂质对照品时杂质的限量检
以杂质的化学名称 某类杂质的总称
检测方法
5
一、杂质的研究规范
? （一）、有机杂质在药品质量标准中的 项目名称
? （二）、杂质检查项目的确定 ? （三）、杂质限度的确定 ? （四）、杂质检查方法的选择与验证
6
7
一、杂质的研究规范
? （一）、有机杂质在药品质量标准中的 项目名称
? （二）、杂质检查项目的确定 ? （三）、杂质限度的确定 ? （四）、杂质检查方法的选择与验证
（1）内标法 （2）外标法 （3）加校正因子的主成分自身
对照法
31
(二) 高效液相色谱法(HPLC)
（4）不加校正因子的主成分自身 对照法
（5）峰面积归一化法 是以杂质 峰总面积中所占比例不超过一 定数值来限量
32
(二) 高效液相色谱法(HPLC)
1.内标法 适用于有对照品的杂质，能够测
定杂质校正因子的情况需要内标物 和杂质对照品 .
在试验条件下显色剂对杂 质的最小检出量来控制杂质限 量.
29
(6)选用可能存在的某种物质 作为杂质对照品
当药物中的杂质没有完全确认 以前,或待检杂质不只一种时 ,可以 根据药物的合成路线、化学性质等 推断可能存在的杂质 ,并且能获得 此物质的对照品时可采用这个方法 .
30
(二) 高效液相色谱法(HPLC)
当药物中存在多个杂质时 ,有杂质 对照品的用杂质对照品法 .杂质的结 构不能确定，或无杂质对照品的情况 用供试品自身稀释对照法 .
27
(4)对照药物法
选用质量符合规定的与供试品 相同的药物作为杂质对照品 .
要求所选用的对照品中所含待检 杂质应为规定的限量水平 ,且稳定 性要好.
28
(5)在一定供试品及检查条件 下不允许有杂质斑点存在。
39
3.加校正因子的主成分自身对照测定 法
进行杂质检查时，不用杂质对照品 建立方法时，用杂质对照品
40
红霉素B、红霉素C杂质的测定
用 pH7.0 磷酸缓冲液：甲醇为溶剂， 制备浓度为 4mg/mL的供试品溶液，将供试 品溶液定量稀释制成浓度为 0.2mg/mL 的溶 液作为对照溶液， HPLC测定，ODS柱，以磷 酸盐溶液：乙腈（ 40：60）为流动相，检 测波长 215nm ，取供试品溶液和对照溶 液各20μl，分别进样，记录色谱图 至主成分峰保留时间的 3.5倍。红霉素 B 和红霉素 C按校正后的峰面积计算 （分别乘以校正因子 0.7，1.0），均不 得大于对照溶液的主峰面积（ 5.0%）
14
（二） 色谱分析法 P105
利用吸附或分配性质的差异 1. 薄层色谱法(TLC) 2 高效液相色谱法(HPLC) 3 气相色谱法(GC)
15
二. 色谱分析法 P105
利用吸附或分配性质的差异 1. 薄层色谱法(TLC) 2 高效液相色谱法(HPLC) 3 气相色谱法(GC)
16
(一). 薄层色谱法（TLC） 1.优点
质 杂
校正因子测定液
标
质
样品测定液
f ? As / Cs AR / CR
Cx
?
f
? Ax A?S / C?S
35
36
2.外标法测定法 适用于有对照品的杂质，而且
进样量能够精确控制（以定量环 或自动进样器进样)需要杂质对照 品.
37
杂质对照品 样品
38
方法 配制杂质对照品溶液和供试品溶
液，分别取一定量注入色谱仪，测 定对照品的峰面积和供试品中杂质 的峰面积，按外标法计算杂质的浓 度。
33
内标法
将一个已知含量，样品中不含 有的纯物质，加至待测样品溶液中， 以此纯物质的量为标竿，对比测定 待测组分的含量的方法谓内标法。 优点：定量结果与进样量无关（不 超载条件下） .
34
? 校正因子测定液——杂质对照品+内标 ? 样品测定液——样品+同样量内标 ? 分别进样，记录色谱图。
内
杂标Βιβλιοθήκη 内21(2)供试品自身稀释对照法
适用于杂质的结构不能确定， 或无杂质对照品的情况。
将供试品按限量要求稀释到 一定的浓度作为杂质对照液
22
例：氢化可的松中“其他甾体” 检查
供试液：3mg/ml 对照液：60? g/ml(供试液稀释50
倍)供试液与对照液分别点于 同一薄层板
23
判断：供试品溶液的杂质斑点数 ≯3个,且供试品溶液的杂质斑点 颜色≯ 对照液 主斑点颜色.
对照品溶液： N-甲基哌嗪50μg/ml的
甲醇液
板：硅胶G
点样：10μl
展开剂：CHCl3-CH3OH-NH3·H2O(13:5:1) 显色：碘蒸气中
判断：供试品溶液如显与对照品溶
液相应的杂质斑点，其颜色不得深于对
照品溶液的斑点。 20
L ? 50?g / ml ?100% ? 0.1%
50mg / ml
8
9
10
11
一、杂质的研究规范
? （一）、有机杂质在药品质量标准中的 项目名称
? （二）、杂质检查项目的确定 ? （三）、杂质限度的确定 ? （四）、杂质检查方法的选择与验证
12
二、杂质的常用检查方法
化学方法 光谱方法 ※△ 色谱方法 物理方法
13
（一）化学分析法
1、显色反应 2、沉淀反应 3、生成气体 4、滴定法