ru486分子质粒

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【国家自然科学基金】_高压培养_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140801

推荐指数 6 3 2 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2011年序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 2ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52
热等静压激光快速成形滑片膨胀机液态电极活性注浆加固沿面闪络沿面绝缘氮素矿化氦泡气骨导差毛乳头核因子κ b抑制因子α 核因子κ b 杂质晶体结构施压频率放电撂荒摩擦损失拉伸性能抗菌肽憎水性恢复微生物采油微囊形态平滑肌细胞射频密度泛函理论子宫颈女性生殖道大前庭水管综合征外源硝态氮肥基因调节同步辐射发射光谱原子力显微镜压力效应单晶si 半导体动力学模型力学特性分子动力学内耳病变内皮细胞低氧肺动脉高压优化设计人工交联聚乙烯电缆绝缘不锈钢上半规管裂综合征 π -π 相互作用 u型钢支架 ru486
1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
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参考频率标准去除率压力南北涛动南亚高压环流指数半胱氨酸动物模型,大鼠仿生培养中心位置中国 (iho)

列举重要质粒

列举重要质粒
质粒是一种环形的DNA 分子，常存在于细菌、真菌等生物体中，它能够自主复制并在细胞间转移，携带一些重要的基因信息。

以下是一些重要的质粒：
1. pUC19 质粒：这是一种常用的克隆载体，携带氨苄青霉素抗性基因和lacZ 基因。

它常用于在大肠杆菌中克隆和表达基因。

2. pET 系列质粒：这是一类用于表达外源基因的质粒，常用于在大肠杆菌中高效表达蛋白质。

pET 系列质粒携带T7 启动子，可以诱导基因的高水平表达。

3. pBR322 质粒：这是一种经典的质粒，携带氨苄青霉素和氯霉素抗性基因。

它常用于基因克隆和质粒构建。

4. pGL3 质粒：这是一种用于荧光素酶报告基因检测的质粒，常用于研究基因调控和启动子活性。

5. pGEX 系列质粒：这是一类用于表达谷胱甘肽S-转移酶（GST）融合蛋白的质粒，常用于蛋白质的纯化和检测。

这些质粒在分子生物学、基因工程和生物技术等领域具有重要的应用价值。

当然，还有许多其他类型的质粒，它们具有不同的特性和用途，可根据具体需求选择合适的质粒。

基因工程-简界

研究目的决定
载体选择后，对基因克隆方法具有一定的指导作用。
2. 选择、构建合适的载体
（1）载体的分类
根据宿主的对象
原核
真核
根据载体的性质
质粒病毒
根据功能
克隆表达
2. 选择、构建合适的载体
（2）质粒（plasmid）
独立于染色体外的能够进行自我复制的共价、闭环、双链的DNA分子严紧型质粒
主要内容
基因工程的发展史简介
基因工程的基本原理
基因工程的应用
基因工程发展简史
1865年 G.J.Mendel的豌豆杂交试验
1822-1884
基因工程发展简史
1944年 O.T.Avery的肺炎球菌转化实验
1877-1955
基因工程发展简史
1970年，从流感嗜血杆菌中分离到一种限制性酶
15K左右
真核复制起始点
若真核载体？
原核表达载体---Pharmacia
Tac Promoter GST-融合蛋白 GST标签
原核表达载体---Promega
T7启动子控制
体外转录 SP6 T3
原核表达载体---Merck
T7启动子控制 TrxA标签 His标签
Smith HO, Wilcox KW.
A restriction enzyme from Hemophilus influenzae. I. Purification and general properties. J Mol Biol. 1970;51(2):379-91
Hamilton O. Smith 美國霍普金斯大學醫學院 1931年--
表达可控性加入药物后不表达

植物乳杆菌天然质粒分类

植物乳杆菌天然质粒分类孙大庆1，李洪飞1，宋大巍2，杨建1,2（1.黑龙江八一农垦大学国家杂粮工程技术研究中心，黑龙江大庆 163319；2.黑龙江八一农垦大学食品学院，黑龙江大庆 163319）摘要：为建立植物乳杆菌天然质粒分类方法，以质粒复制起始蛋白（replication initiation protein ，Rep ）作为分类标记，通过系统进化树分析方法，将植物乳杆菌53 个编码Rep 天然质粒划分为6 个质粒类型，包括5 个质粒家族和1 个新的复制类型质粒，之后进一步提出了每个质粒家族特有的骨干序列，最终建立了一种简单、有效的植物乳杆菌天然质粒的分类方法和标准。

与以往质粒功能和不相容性分类方法相比较，本方法具有较好的实用性和通用性。

关键词：植物乳杆菌；质粒；基因组；复制起始蛋白；复制子Classification of Natural Plasmids in Lactobacillus plantarumSUN Daqing 1, LI Hongfei 1, SONG Dawei 2, YANG Jian 1,2(1. National Coarse Cereals Engineering Research Center, Heilongjiang Bayi Agricultural University, Daqing 163319, China;2. College of Food Science, Heilongjiang Bayi Agricultural University, Daqing 163319, China)Abstract: This study aimed to establish a classification method for natural plasmids of Lactobacillus plantarum (L. plantarum ) by using plasmid replication initiation protein (Rep) as a taxonomic marker. Fifty three plasmids encoding Rep in L. plantarum were divided into six plasmid types by the method of phylogenetic analysis, including five plasmid families and one novel replication type of plasmid. Then, the backbone sequence specific to each plasmid family was further proposed. Finally, a simple and effective classification method and criterion for L. plantarum natural plasmids was established. Compared with the previous classification methods based on plasmid function and incompatibility, this method displayed relatively better practicability and versatility.Key words: Lactobacillus plantarum ; plasmid; genome; replication initiation protein; replicon DOI:10.7506/spkx1002-6630-201712011中图分类号：Q19 文献标志码：A 文章编号：1002-6630（2017）12-0069-06引文格式：孙大庆, 李洪飞, 宋大巍, 等. 植物乳杆菌天然质粒分类[J]. 食品科学, 2017, 38(12): 69-74. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201712011. SUN Daqing, LI Hongfei, SONG Dawei, et al. Classification of natural plasmids in Lactobacillus plantarum [J]. Food Science, 2017, 38(12): 69-74. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-201712011. 收稿日期：2016-10-28基金项目：黑龙江省青年科学基金项目（QC2014C020）作者简介：孙大庆（1979—），男，副研究员，博士研究生，研究方向为食品微生物与生物技术。

【国家自然科学基金】_母胎免疫_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140730

科研热词细胞因子趋化因子调节性t细胞补肾益气方母胎界面小鼠 cxcl16 重组蛋白蜕膜cd4+t 芎归胶艾汤胸腺基质淋巴细胞生成素胚胎丢失胎膜胎盘肿瘤免疫疗法细菌脂多糖细胞滋养层细胞移植耐受白细胞介素4 父源性皮肤移植滋养细胞混合淋巴细胞反应流产习惯性流产活性检测水通道蛋白8 母胎耐受母胎液体平衡树突细胞早孕干扰素γ 巨噬细胞实验研究存活时间孕酮子痫前期妊娠多克隆抗体增殖基因表达吲哚胺2,3-双加氧酶含药血清免疫组织化学免疫磁珠法 t淋巴细胞调节性 th1/th2 ru486 il-4 ifn-γ ido抑制剂 cyr61克隆 adam10
推荐指数 5 3 3 2 2 2 2 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2012年序号 1 2 3 4
科研热词过继转输胚胎吸收率曲古菌素a cd4 cd25 调节性t细胞
推荐指数 1 1 1 1
2013年序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 40 41 42 43 44 45 46
科研热词妊娠母胎界面免疫耐受复发性自然流产吲哚胺2,3双加氧酶人类白细胞抗原 toll样受体 htr-8/svneo 针刺迁移浸润趋化因子蜕膜药物流产胚胎着床障碍胎盘绒毛膜滋养层细胞生物学功能生殖免疫特异性受体滋养细胞淋巴细胞免疫治疗流产,复发性母胎代谢小鼠宫清方子宫出血子宫内膜子宫固有免疫反复种植失败分子结构免疫应答人类白细胞抗原g unk细胞 t细胞亚群 t淋巴细胞,调节性 th2细胞 th1细胞 th17细胞 shla-g nod2 nod1 lectin染色 hla-g chemerin ccr2

2023北京高三二模生物汇编：生物技术与工程

2023北京高三二模生物汇编生物技术与工程1．（2023·北京西城·统考二模）激素应用广泛。

下列激素应用不当的是（）A．成年人注射生长激素以促进身高增长B．糖尿病患者定时注射胰岛素以控制血糖C．给供体母牛注射促性腺激素促进超数排卵D．应用生长素和细胞分裂素诱导愈伤组织分化2．（2023·北京西城·统考二模）将来自灰毛鼠某种组织的癌细胞注入白毛鼠早期胚胎中，再将胚胎植入代孕雌鼠体内，生出的大鼠具有灰白条纹（嵌合体）。

相关叙述正确的是（）A．灰白条纹鼠所有体细胞遗传信息相同B．抑癌基因表达水平上调导致细胞癌变C．胚胎发育中癌细胞基因表达发生变化D．嵌合体相互交配后代均为灰白条纹鼠3．（2023·北京西城·统考二模）医生可利用分子生物学技术检测受检人是否携带HIV。

下列叙述错误的是（）A．可根据HIV的RNA序列合成小段DNA作为引物B．血液样品中HIV的RNA经逆转录后进行PCR检测C．可通过抗原-抗体杂交技术检测血液样品中HIV抗原D．与检测抗原、核酸相比，检测抗体能更早诊断HIV感染4．（2023·北京昌平·统考二模）普通六倍体小麦基因组庞大，研究相对困难。

拟南芥基因组测序已完成，遗传背景相对清晰。

用紫外线分别照射普通小麦愈伤组织的原生质体30s、1min、2min，再与拟南芥原生质体进行融合，可将小麦染色体小片段插入拟南芥基因组。

下列叙述错误的是（）A．紫外线照射可随机破坏染色体结构B．可利用灭活病毒促进两种原生质体融合C．需设置单独培养的未融合原生质体作为对照组D．借助拟南芥的遗传背景对小麦基因组进行研究5．（2023·北京昌平·统考二模）癌细胞异常表达某些膜蛋白，影响原有的细胞识别，并借此逃避免疫系统的监视与攻击。

下列叙述错误的是（）A．膜蛋白可参与细胞间的信息交流B．癌细胞只有原癌基因没有抑癌基因C．膜蛋白的合成与加工需要多种细胞器分工协作D．靶向异常膜蛋白的单克隆抗体可用于癌症治疗6．（2023·北京朝阳·统考二模）以下不属于对转基因生物安全性评价的是（）A．对转基因生物的颜色、大小、形态的评价B．对转入基因是否会污染本土生物进行评价A．接种时，将高浓度菌液涂布在平板培养基上15．（2023·北京海淀·统考二模）人源干细胞传代培养时，容易出现凋亡现象。

质粒

质粒载体
把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术，送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫载体(Vector)。细菌质粒是重组DNA 技术中常用的载体。质粒载体是在天然质粒的基础上为适应实验室操作而进行人工构建的。与天然质粒相比，质粒载体通常带有一个或一个以上的选择性标记基因(如抗生素抗性基因) 和一个人工合成的含有多个限制性内切酶识别位点的多克隆位点序列，并去掉了大部分非必需序列，使分子量尽可能减少，以便于基因工程操作。大多质粒载体带有一些多用途的辅助序列，这些用途包括通过组织化学方法肉眼鉴定重组克隆、产生用于序列测定的单链DNA、体外转录外源DNA序列、鉴定片段的插入方向、外源基因的大量表达等。一个理想的克隆载体大致应有下列一些特性：（1）分子量小、多拷贝、松驰控制型；（2）具有多种常用的限制性内切酶的单切点；（3）能插入较大的外源DNA片段；（4）具有容易操作的检测表型。常用的质粒载体大小一般在1kb至10kb之间，如 PBR322、PUC系列、PGEM系列和 pBluescript（简称pBS）等
基因克隆载体之质粒
质粒(Plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子，大小从1200kb不等，为双链、闭环的 DNA分子，并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中，它具有自主复制和转录能力，能在子代细胞中保持恒定的拷贝数，并表达所携带的遗传信息。质粒的复制和转录要依赖于宿主细胞编码的某些酶和蛋白质，如离开宿主细胞则不能存活，而宿主即使没有它们也可以正常存活。质粒的存在使宿主具有一些额外的特性，如对抗生素的抗性等。 pBR322 质粒物理图谱
从细菌中分离质粒 DNA
从细菌中分离质粒DNA的方法都包括3个基本步骤：培养细菌使质粒扩增；收集和裂解细胞；分离和纯化质粒DNA。

HOXA10基因与子宫内膜容受性的研究进展

3．对胰岛素样生长因子结合蛋白-1（ IGFBP1）表达的影响： IGFBP1 是分泌期子宫内膜和早期蜕膜的分泌产物，蜕膜化的子宫内膜基质细胞表达 IGFBP1，其是蜕膜化过程的标志分子之一。IGFBP1 是能调节 IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ生物利用度的可溶性蛋白家族成员，其还参与了细胞凋亡、新陈代谢、生长发育等多种生理过程。IGFBP1 在母胎界面通过旁分泌形式与胚胎的滋养细胞分泌的 IGF-Ⅱ互相作用，有利于胚胎的着床。IGFBP1 还调节滋养细胞在适度范围内的侵蚀能力，既能使胚胎顺利着床，又能不至于侵蚀过度而产生滋养细胞疾病［17］。IGFBP1 是受 HOXA10 调节的下游基因，HOXA10 与其他转录因子共同作用，调控 IGFBP1 在子宫内膜基质细胞中的表达［18］。
4．对 EP3、EP4 的特异调节： PGE2、PGI2 和其他前列腺素（ PG）一样具有血管活性和促有丝分裂活性的作用，在多个物种的动情周期和孕期发挥重要调控作用［19］。另外，PG 分子的环氧合酶-2（ COX2）在子宫内膜的功能分化和早孕中也有重要作用。Lim 等［20］发现 PGE2 的两种细胞表面受体亚型 EP3 和 EP4 在 HOXA10 缺失小鼠的基质表达下降，而基质中（ TIMP-2、 MMP-2、ER、PR）和上皮中（ LIF、HB-EGF、Ar、COX-1）表达并未受到影响。HOXA10 缺失小鼠的 EP3 和 EP4 被孕酮异常调控，而孕酮正常调控其他 3 种基因 PR、HOXA11、c-myc。提示 HOXA10 特异调控孕激素介导的 EP3 和 EP4 在子宫基质的表达，以及影响 PG 合成的关键酶 COX2 的表达，进而改变子宫内膜基质 PG 信号系统的传递。
中华临床医师杂志（电子版） 2011 年 12 月第 5 卷第 23 期 Chin J Clinicians（ Electronic Edition），December 1，2011，Vol． 5，No．容受性的研究进展

【国家自然科学基金】_辅助质粒_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140730

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推荐指数 3 3 2 2 2 2 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2010年序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52
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序列分析尾静脉注射寡毛目多表位多功能工程菌基质辅助激光解吸单链抗体包膜糖蛋白g2 分离和提纯内部核糖体进入位点序列克隆假病毒人免疫缺陷病毒1型乙型肝炎病毒中和抗体 vegf sry sirna sae株 ru486 rt-pcr ribonuclease b padre nor1基因 n-糖酰胺酶 lfn-egfp融合蛋白 gst pull-down endoglin e2基因 cdh22 cd40l bmp b7-1

RU486 诱导调控系统

RU486 诱导调控系统一RU486调控系统的结构1RU486调控系统的基本结构RU486调控系统是1994年被Wang等1提出的,它由嵌合调控子反式作用调控区和目的基因区两部分组成。

反式作用调控区含有任意启动子控制下的嵌合调控子(chimericregulator,GLVP),后者是一种嵌合型的可诱导转录因子,它包括酵母转录因子Gal4的DNA结合区(Gal4DBD)、单纯疱疹病毒蛋白VP16激活区(VP16AD)和PR-891突变体改良后的C末端配体结合区(PRLBD-891)三部分。

目的基因区是指在最小启动子(TATA盒或胸腺嘧啶脱氧核苷激酶启动子tk)和四个Gal4DNA结合区串联体(p17×4)调控下的目的基因,如图1。

图1RU486调控系统的结构示意图在GLVP中,Gal4DBD代替了孕酮受体的DNA结合区,从而避免了任何激活内源性孕酮敏感性基因的可能,并且由于GAL4DBD在哺乳动物细胞中不存在,目前也没有发现任何哺乳动物的靶基因可以被Gal4激活,所以这一调控子只会调控目的基因的表达,而不会影响任何内源基因1。

PR-891是指野生型孕酮受体在891位点平头切断造成的突变体,因此其不能与孕酮受体激活剂R5020结合,但却可以与抗孕酮片RU486结合,从而在RU486存在时激活孕酮受体介导的基因。

这可能是由于PR-891比野生型受体少42个氨基酸,而孕酮结合位点属于缺失的下游内,RU486结合区则位于上游位置2。

这就避免了给予RU486时,激活内源性孕酮受体诱导其它基因引起一系列的细胞反应。

并且由于反式作用调控子是一种嵌合型的可诱导转录因子,所以它不再与孕酮反应元件(PREs)或糖皮质类固醇应答成分(GREs)结合3,干预孕酮受体介导的转录,取而代之的是在RU486作用下,这一调控子仅仅与目的基因区的Gal4DBD结合,并激活目的基因转录表达2。

由于PRLBD-891的转活能力较差,而VP16AD,即VP16的C末端为酸性,可以直接与转录起始复合物中的转录因子TFIIB、TATA结合蛋白(TBP)和TBP辅助因子TAFII40相互作用,具有很强的转活功能。

含有RU486诱导系统的IL-2基因表达质粒的构建及功能鉴定

含有RU486诱导系统的IL-2基因表达质粒的构建及功能鉴定杜博;苗兰芳;苏学今;朱喆;王琳【摘要】目的: 构建含有RU486诱导系统的小鼠白细胞介素2 (IL-2) 基因表达质粒,研究RU486系统对IL-2基因表达的调控作用.方法: 用限制性内切酶Cla Ⅰ处理含有RU486诱导系统的质粒pRS17和编码IL-2基因的质粒pUC57-IL-2,将IL-2基因插入到pRS17构建pRS-IL-2;通过PCR及限制性酶切鉴定重组质粒;将重组质粒体外转染SMMC-7721细胞,用不同浓度的RU486进行处理;将重组质粒通过水流动力学注射法注射到小鼠体内,腹腔注射RU486进行诱导;通过ELISA方法检测细胞上清及血清中IL-2基因的表达.结果: 重组质粒pRS-IL-2经过限制性内切酶消化及PCR分析,显示了预期的片段.细胞在1×10-8 mol·L-1 的RU486诱导下,IL-2表达水平最高,是无RU486组的1.95倍(P<0.001).注射质粒后,接受RU486诱导的小鼠血清中IL-2水平较诱导前升高320倍,而未接受RU486的小鼠血清未检测到IL-2的表达.结论:成功构建了含有RU486诱导系统的IL-2基因表达质粒,IL-2基因的表达依赖于诱导剂RU486的存在.【期刊名称】《吉林大学学报（医学版）》【年(卷),期】2010(036)003【总页数】4页(P469-472)【关键词】白细胞介素2;RU486诱导系统;基因调节【作者】杜博;苗兰芳;苏学今;朱喆;王琳【作者单位】吉林大学基础医学院,病理生物学教育部重点实验室,吉林,长春,130021;中国医学科学院,中国协和医科大学生物医学工程研究所,天津,300192;吉林大学基础医学院,病理生物学教育部重点实验室,吉林,长春,130021;第四军医大学第一附属医院病理科,陕西,西安,730032;吉林大学基础医学院,病理生物学教育部重点实验室,吉林,长春,130021;吉林大学基础医学院,病理生物学教育部重点实验室,吉林,长春,130021;吉林大学基础医学院,病理生物学教育部重点实验室,吉林,长春,130021【正文语种】中文【中图分类】R392.11白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)具有明显的抗肿瘤作用[1-2]，但是IL-2蛋白生物半衰期短，全身性治疗时用药剂量大，可引发毛细血管渗漏综合征、低血压和心动过速、间质性肺水肿、氮质血症等一系列循环、呼吸、泌尿、精神及神经系统的严重毒性反应[1]。

质粒的生物学

• 耐碱性
与染色体DNA相比，质粒有较高的耐碱性，调pH至与染色体DNA相比，质粒有较高的耐碱性， pH至 DNA相比 12.4 ，可使染色体DNA变性，通过离心将其与质粒可使染色体DNA变性， DNA变性分离
质粒的复制和调节
质粒的大小
常见质粒大小的范围为1 200kb，个别大质粒可达800～常见质粒大小的范围为1～200kb，个别大质粒可达800～1000 kb 800 质粒的大小常用分子量MD或碱基对数kb来表示。1MD的双链质粒的大小常用分子量MD或碱基对数kb来表示。1MD的双链 MD或碱基对数kb来表示 DNA≈1.65kb。 DNA≈1.65kb。未知质粒的大小通常可以在相同条件下与已知其大小的几个标准质粒比较并依其电泳距离作图来估算。标准质粒比较并依其电泳距离作图来估算。最精确的测定需要对质粒DNA作序列分析，最精确的测定需要对质粒DNA作序列分析，然后从所含碱基 DNA作序列分析数目来直接推算出其大小和分子量。
质粒的复制
(replicon)是一个复制单位细菌染色体是一个复制子，是一个复制单位，复制子(replicon)是一个复制单位，细菌染色体是一个复制子，每一个质粒也是一个复制子。每一个质粒也是一个复制子。复制起点是复制子起始复制的位点。部位，作为一个复制子,至少需要有一个复制起点, 部位，作为一个复制子,至少需要有一个复制起点,即ori位点大肠杆菌染色体的复制起点称为oriC，质粒的复制起点叫做oriV。大肠杆菌染色体的复制起点称为oriC，质粒的复制起点叫做oriV。 oriC oriV 质粒的复制主要是通过θ型复制和滚环复制两种方式之一进行的，质粒的复制主要是通过θ型复制和滚环复制两种方式之一进行的，其中以θ型复制为主。型复制中，其中以θ型复制为主。在θ型复制中，有单向复制和双向复制两种类型， R1、R100等的复制是单向的等的复制是单向的， R6k是双向复制种类型，如R1、R100等的复制是单向的，而F和R6k是双向复制类型。类型。

高效液相色谱分析人血中RU486及其代谢产物

高效液相色谱分析人血中RU486及其代谢产物张国庆;叶智厚【期刊名称】《生殖与避孕》【年(卷),期】1991(011)001【摘要】本文采用HPLC分析RU 486及其代谢产物。

分析用200mm×3.5mm ODS/YWG柱(青岛海洋化工厂担体),流动相为甲醇:乙腈:水42:28:30(V:V:V),pH4.7,流速1ml/min,紫外检测为302nm。

在此色谱条件下,能使RU 486及其三种代谢产物得到很好分离。

四种化合物的标准曲线在100～2800ng/ml浓度范围内,线性的相关系数为0.999。

RU 486和其代谢产物去单甲基衍生物(RU 42633),丙炔醇衍生物(RU 42698)不同浓度的回收率均达90%左右,另一代谢产物去双甲基衍生物(RU 42848)的回收率为60%左右,本方法已用于RU 486及其代谢产物的临床药代动力学研究。

【总页数】6页(P26-31)【作者】张国庆;叶智厚【作者单位】不详;不详【正文语种】中文【中图分类】R446.112【相关文献】1.高效液相色谱分析法检测多噻烷及其主要代谢产物 [J], 夏涛;夏世均2.高效液相色谱-飞行时间质谱法检测人血中的丁醚脲及其代谢产物 [J], 林葭;曾文灿;李航麒;叶树海;庄顺;林坚3.高效液相色谱法测定工人血中三硝基甲苯及两种代谢产物 [J], 刘海喜;李维新;王国荣;杨振中4.胎儿脑组织中单胺类递质及其代谢产物的高效液相色谱分析 [J], 朱珠5.高效液相色谱测定工人血中三硝基甲苯及两种代谢产物的样品处理研究 [J], 刘海喜;王国荣;李维新;杨振中;常元勋;崔京伟;江泉观;蒋震中;吕丰亭;胡全中;王宏军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

RU486诱导调控载体的构建及体外表达

中国生物工程杂志ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００７，２７（６）：１～５檪檪殏檪檪檪檪檪檪檪檪殏檪檪殏
研究报告
实现对目的基因进行有效调控，使其安全有效地表达，一直是基因治疗的难点和热点问题。对目的基因的表达时间和表达水平的精确调控，不仅能提高基因治疗的安全性，而且能使基因表达控制在有效作用浓度范围内，从而避免较大的全身毒性。目前通过诱导调控系统来实现基因的精确表达是最常用的方法，在已构建成的多种诱导调控系统中，ＲＵ４８６诱导调控系统由于具有本底表达低，诱导效率高，免疫原性小，诱导剂无毒性等优点，应用日益广泛
ＭｉｃｒｏｂｉｘＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ公司；ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ（）、ｐＣｌｏｎ９ＩＮＳＨＣＭＶ质粒均为东方肝胆外科医院病毒基因治疗实验室保存；萤火虫萤光素酶质粒ｐＧＬ３Ｃｏｎｔｒｏｌ、ｐＧＬ３，海肾萤光素酶质粒ｐＲＬＴＫ购自Ｐｒｏｍｅｇａ公司；Ｂａｓｉｃ含有ＧＬＰ６５反式作用调控因子和ＧＡＬ４杂合启动子两个组件的质粒ｐＲＳ由西班牙Ｎａｖａｒｒａ大学医学院钱程教授惠赠。１．１．２试剂和仪器各种限制性内切酶购自ＮｅｗＥｎｇｌａｎｄＢｉｏｌａｂ公司；诱导剂ＲＵ４８６购自ＳＩＧＭＡ公司；ＤＮＡ连接试剂盒购自大连宝生物工程有限公司；胶回收ｉａｑｕｉｃｋｇｅｌＥｘｔｒａｃｔｉｏｎｋｉｔ购自Ｑｉａｇｅｎ；新生小牛试剂盒Ｑ血清购自Ｇｉｂｃｏ公司；ＤｕａｌＬｕｃｉｆｅｒａｓｅＲｅｐｏｒｔｅｒＡｓｓａｙ购自Ｐｒｏｍｅｇａ公司；真核细胞转染试剂ＰｏｌｙｆｅｃｔＴｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎＲｅａｇｅｎｔ购自Ｑｉａｇｅｎ；ＬＢ９５０６型Ｌｕｍｉｎｏｍｅｔｅｒ（Ｂｅｒｔｈｏｌｄ）；ＰＣＲ仪（德国ＢＩＯＭＥＴＲＡ公司）；ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓＮａｐｃ０５４２０二氧化碳孵箱（法国ＪＯＡＶＮ公司）；１．１．３ＰＣＲ引物引物设计采用ＯＬＩＧＯ分析软件在ＲＳ质粒ＢＧＨｐｏｌｙＡ片段扩增引物：上计算机上进行，ｐ游引物和下游引物的５ ′ 端均设计有酶切位点，且其外

高中生物-细胞的衰老与死亡专题强化训练(解析版)

高中生物-细胞的衰老与死亡专题强化训练学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________一、单选题1．下列有关人体细胞生命历程的叙述，正确的是（）A．细胞分裂间期，染色体复制导致染色体数目加倍B．细胞分化过程中，细胞核遗传物质改变导致细胞形态改变C．细胞衰老过程中，多种酶的活性降低导致代谢减弱D．细胞凋亡导致细胞非正常性死亡，不利于个体的发育2．关于细胞衰老、细胞凋亡和细胞癌变的说法正确的是（）A．细胞凋亡时核膜内折，细胞核体积在增大，线粒体体积减小B．细胞衰老与基因无关，而细胞凋亡和细胞癌变与基因有关C．细胞癌变的过程中部分膜蛋白会丢失，其糖链也可能发生改D．植物细胞衰老时形态和结构的变化导致生理、生化的改变3．下图为人体某细胞所经历的生长发育各个阶段示意图，图中①~①为不同的细胞，a~c表示细胞所进行的生理过程。

据图分析，下列叙述不正确．．．的是（）A．进入c过程的细胞，酶活性逐渐降低，代谢逐渐减慢B．过程a、b、c是基因控制的，对个体生长发育和机体稳态的维持具有重要作用C．①①①的核基因相同，细胞内的蛋白质种类和数量也相同。

D．如果在a、b、c过程中，原癌基因和抑癌基因发生突变，则可能会成为癌细胞4．下图为人体细胞的生命历程，有关叙述错误的是（）A．①过程中存在遗传物质的复制B．①过程是由遗传物质的改变引起的C．①过程中细胞形态会发生改变D．①过程中有基因的选择性表达5．研究发现，细胞凋亡与动物组织损伤后的再生具有密切关系。

细胞凋亡过程中起主要作用的酶——凋亡蛋白酶在动物组织的再生过程中发挥重要作用（如图所示）。

下列叙述错误的是（）A．凋亡蛋白酶可诱导细胞凋亡并抑制周围细胞再生B．细胞凋亡和细胞分化过程中都有基因的选择性表达C．外界某些因素会影响细胞凋亡和细胞分化过程D．凋亡细胞与再生组织细胞中的遗传物质通常相同6．细胞色素C是动植物细胞普遍存在的一种由104个氨基酸组成的蛋白质，一般情况下，其参与线粒体中的[H]与氧气结合的过程。

地塞米松对体外培养足细胞nephrin磷酸化的影响

地塞米松对体外培养足细胞nephrin磷酸化的影响聂国明;邹敏书;余健;罗莉漫;徐洪涛;毛娇娇【摘要】目的 nephrin磷酸化在维持正常足细胞结构和功能上起重要作用.糖皮质激素是治疗原发性肾小球疾病蛋白尿的最常见药物.本研究观察地塞米松(dexamethasone,Dex)对体外培养足细胞nephrin磷酸化的影响.方法体外培养的足细胞给予不同浓度Dex(0、1、10、100nmol/L)处理24h,100nmol/L Dex 处理足细胞不同时间(0、12、24、36h),Dex (100nmol/L)与足细胞一起培养,分别加入糖皮质激素受体拮抗剂及盐皮质激素受体拮抗剂,小干扰RNA(siRNA)沉默Nck或Fyn的表达,采用抗pY1228 nephrin抗体应用免疫印迹分别测定nephrin 磷酸化水平的表达变化.结果 10、100nmol/L Dex处理足细胞明显增加nephrin 的磷酸化,100nmol/L Dex与足细胞孵育24、36h明显增加nephrin的磷酸化,100nmol/L Dex与足细胞孵育24h导致nephrin磷酸化明显增加,这种增加可被糖皮质激素受体拮抗剂所抑制,但不被盐皮质激素受体拮抗剂所抑制.100nmol/L Dex与足细胞孵育24h导致nephrin磷酸化明显增加,加siRNA沉默Nck或Fyn,前者可部分抑制nephrin磷酸化增加,后者完全抑制nephrin磷酸化.结论糖皮质激素可增加nephrin的磷酸化,糖皮质激素治疗人类肾小球疾病可能通过调节Nck 和Fyn复合物促进nephrin磷酸化实现,这种作用可能阐明了糖皮质激素治疗肾病新的机制.【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2014(043)001【总页数】5页(P70-74)【关键词】Nephrin;磷酸化;糖皮质激素;足细胞【作者】聂国明;邹敏书;余健;罗莉漫;徐洪涛;毛娇娇【作者单位】430070 广州军区武汉总医院;430070 广州军区武汉总医院;430070 广州军区武汉总医院;430070 广州军区武汉总医院;430070 广州军区武汉总医院;430070 广州军区武汉总医院【正文语种】中文【中图分类】R393在肾小球选择性滤过过程中，肾小球滤过屏障阻止蛋白尿的滤出。