宁夏枸杞果实发育过程中黄酮类化合物含量的变化研究
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见报 道 。现 采 用 分 光 光 度 法 测 定 了 宁 夏 枸 杞 果 实 发 育
主要仪 器 ： Ｃ Ｂ Ｍ一 ２ ０ Ａ高 效 液相 色谱 仪 （ 日本 岛津
公 司） ； Ｓ Ｐ Ｄ － ２ ０ Ａ检测器 ， 二 元梯度 泵 ； Ｌ Ｃ － Ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ色谱 工作站 ， Ｍｉ ｌ ｌ ｉ — Ｑ Ａ １ ０型纯水 仪 （ ＭＩ Ｌ ＵＰ （ ） Ｒ Ｅ ） ； ＫＱ 一 ５ ０ ０ Ｂ
摘
要： 以５ ａ 生“ 宁杞 １ 号” 为试 材 ， 利 用 分 光 光 度 法 测 定 了枸 杞 果 实发 育过 程 中总 黄 酮 的
含量 变化 ， 采用高效液相 色谱 法测定了宁夏枸杞 果 实发育过程 中芦丁的含 量变化 。结果表 明： 枸 杞果 实发育过程 中总黄 酮及其组分芦丁含量 总体呈 下降趋 势。总黄酮含 量在 花后 ９ ｄ时达到 最
高， 之后随果 实的发 育逐渐下降 ； 青果期黄酮含量下降较快 ， 至 色变期下 降趋势减缓 ， 成熟期含 量
趋于稳定 。花后 ９ ～１ ９ ｄ时， 芦丁含量急剧下降 ， 而花后 １ ９ ￣３ ７ ｄ期 间， 降至最低 点 ０ ． ０ １ ２ ｎ １ ｇ ／ ｇ ，
其后 变化 不 大 ， 基 本趋 于稳 定 。
具有很强的耐盐 碱 、 耐瘠 薄 、 抗 旱、 抗 风 沙等特 性 ， 集 中 种植在宁夏 、 新疆 、 河北、 内蒙古等 地 区， 是 西北 生态 建
设和经济发展的先锋树种 ， 也是西北 干旱地 区的重要 经
济作物口 ］ 。宁夏枸杞是我 国传统 名贵 中药材 ， 具有增 强 免疫力 、 抗 氧化 、 抗肿瘤 等多方 面的药理作 用ｌ ２ 伽。黄酮 类化合物是宁夏枸杞 的有效 成分之一 ， 具有 明显 的抗氧
基金 项 目 ： 国家科技 支撑 计 划子课 题 资助 项 目（ ２ Ｏ （ ） ９ Ｂ Ａ Ｉ ７ ２ Ｂ ｏ ３ ） 。 收稿 日期 ： ２ ０ １ ３ －０ １ —２ ８
记植株 树 冠 的 东 、 南、 西、 北 ４个 方 向 以及 上 、 中、 下、
内、 外各个 方 向采 取 无病 虫害 的果 实装 入 冰壶 带 回实 验室 ， 立 即测定有关 内在成分指标 。
定Ｅ 及药理活性口 “ 的研究 已有较多报道 ， 但对 宁夏枸 杞果实发育过程 中黄 酮类化 合物 的含量 变化规 律 尚鲜
从开花坐 果 到果 实 成 熟 的整 个 发 育过 程 中 ， 共 取样 ７
次， 每次 ３ 个重复 ， 果实发育前期 ， 采样时间间隔较长 ， 到 成熟期适 当缩短取 样时 间。每 重复具 体采样 时 间为花
后９ ｄ （ ５月 ２ ５日） 、 １ ４ ｄ （ ５月 ３ ０ 日） 、 １ ９ ｄ（ ６月 ４ 日） 、
过程中总黄酮 的含量变化 ； 采 用高效液相 色谱法测定 宁 夏枸杞果 实发育过程 中芦丁含量 的变化规律 ， 以期 为进
一
型超声波清洗器（ 昆山市 超声仪器有 限公司） ； 紫外可见 分光光度 计（ 上海 尤尼柯仪 器有 限公 司） ； Ｐ Ｂ ３ ０ ３ 一 Ｅ电子 天平 （ ＭＥ Ｔ Ｔ Ｌ Ｅ Ｒ — Ｔ Ｏ Ｉ ． Ｅ Ｉ ） Ｏ 仪器 公 司） 。主要 试 剂 ： 甲 醇、 乙腈为色谱 纯 ， 其它 为分 析纯 。芦 丁标准 品购 自中
化作用 。目前对 宁夏枸杞黄酮的分离鉴定＿ ７ ］ 、 定量测
２ ５ ｄ （ ６月 １ ０日） 、 ２ ９ ｄ （ ６ 月１ ４日） 、 ３ ３ ｄ （ ６ 月 １ ８日） 、３ ７ ｄ
（ ６月 ２ ２日） 。采 样 时间 为上 午 ８ ： ３ ０ ～９ ： ３ ０ ， 分 别从 标
国药 品 生物 制 品检 定 所 。 １ ． ２ 试 验 方法
步探索黄酮 类化合 物 的积累机 制及 其调控作 用及 宁
夏枸杞的优 质高产栽培提供理论 依据 。
１ 材料 与方 法
１ ． １ 试 验 材 料
以５ ａ 生“ 宁杞 １ 号” 为试 材 ， 于 ５ 月 １ ６日用毛线绳
标记 同天开 放 的花 朵 １万 朵 （ 将 毛线 段 系在 花 梗处 ） 。
１ ． ２ ． １ 分光光度法测 定枸杞总 黄酮含量 实 验室前期
研究表 明， 枸 杞黄 酮化 合物含 有 芦丁 ， 参考 张颖 等Ｌ ８ 方 法， 以芦丁为标准 品 ， 用分光 光度计 法测定 枸杞 总黄 酮
的含 量 。
第 一作者 简 介 ： 王忠忠（ １ ９ ８ ６ 一 ） ， 男， 硕 士研 究 生， 现 主 要从 事 宁夏 枸 杞化 学成 分 和 活 性 研 究等 工 作 。Ｅ — ｍａ ｉ ｌ ： ｗ ａ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｉ ｒ ｇ ２ ０ ０ ９
＠１ ６ ３ ． ｃ ｏ ｍ．
１ ＿ ２ ． ２ 芦丁标 准曲线 的制备
精密量 取干燥至 恒重芦
责任 作者 ： 张 自萍 （ １ ９ ７ ０ 一 ） ， 女， 博士， 教授 ， 硕 士 生 导师 ， 现 主 要 从 事天 然产 物分 析 等研 究Ｚ － 作 。Ｅ － ｍ ａ ｉ ｌ ： ｚ ｉ ｐ ｉ ｎ ｇ ｚ ｈ ａ ｎ ｇ ＠１ ６ ３ ． ｃ ｏ ｍ ．
关键 词 ： 枸杞 ； 果实发育 ； 黄酮 ； 芦 丁
中图分 类号 ： Ｓ ５ ６ ７ ． １ ９ 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ １ －０ ０ ０ ９ （ ２ ０ １ ３ ） １ ｌ —Ｏ １ ５ ２ 一Ｏ ４ 宁夏枸杞 （ Ｌ ｙ ｃ ｉ ｕ ｍ ｂ ａ ｒ ｂ ａ ｒ ｕ ｍ Ｉ ） 属茄科枸杞 属植物 ，
・
中草药 ・
北方 园 艺２ ０ １ ３ （ １ １ ） ： １ ５ ２ ～ １ ５ ５
宁夏枸 杞 果 实发 育过 程 中黄酮 类 化 合物 含 量 的变 化研 究
王 忠 忠，马 茜 ，慕 金 凤 ，张 自 萍
（ 宁夏 大学 生命 科学 学 院 ， 宁夏 银 川 ７ ５ ０ ０ ２ １ ）
主要仪 器 ： Ｃ Ｂ Ｍ一 ２ ０ Ａ高 效 液相 色谱 仪 （ 日本 岛津
公 司） ； Ｓ Ｐ Ｄ － ２ ０ Ａ检测器 ， 二 元梯度 泵 ； Ｌ Ｃ － Ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ色谱 工作站 ， Ｍｉ ｌ ｌ ｉ — Ｑ Ａ １ ０型纯水 仪 （ ＭＩ Ｌ ＵＰ （ ） Ｒ Ｅ ） ； ＫＱ 一 ５ ０ ０ Ｂ
摘
要： 以５ ａ 生“ 宁杞 １ 号” 为试 材 ， 利 用 分 光 光 度 法 测 定 了枸 杞 果 实发 育过 程 中总 黄 酮 的
含量 变化 ， 采用高效液相 色谱 法测定了宁夏枸杞 果 实发育过程 中芦丁的含 量变化 。结果表 明： 枸 杞果 实发育过程 中总黄 酮及其组分芦丁含量 总体呈 下降趋 势。总黄酮含 量在 花后 ９ ｄ时达到 最
高， 之后随果 实的发 育逐渐下降 ； 青果期黄酮含量下降较快 ， 至 色变期下 降趋势减缓 ， 成熟期含 量
趋于稳定 。花后 ９ ～１ ９ ｄ时， 芦丁含量急剧下降 ， 而花后 １ ９ ￣３ ７ ｄ期 间， 降至最低 点 ０ ． ０ １ ２ ｎ １ ｇ ／ ｇ ，
其后 变化 不 大 ， 基 本趋 于稳 定 。
具有很强的耐盐 碱 、 耐瘠 薄 、 抗 旱、 抗 风 沙等特 性 ， 集 中 种植在宁夏 、 新疆 、 河北、 内蒙古等 地 区， 是 西北 生态 建
设和经济发展的先锋树种 ， 也是西北 干旱地 区的重要 经
济作物口 ］ 。宁夏枸杞是我 国传统 名贵 中药材 ， 具有增 强 免疫力 、 抗 氧化 、 抗肿瘤 等多方 面的药理作 用ｌ ２ 伽。黄酮 类化合物是宁夏枸杞 的有效 成分之一 ， 具有 明显 的抗氧
基金 项 目 ： 国家科技 支撑 计 划子课 题 资助 项 目（ ２ Ｏ （ ） ９ Ｂ Ａ Ｉ ７ ２ Ｂ ｏ ３ ） 。 收稿 日期 ： ２ ０ １ ３ －０ １ —２ ８
记植株 树 冠 的 东 、 南、 西、 北 ４个 方 向 以及 上 、 中、 下、
内、 外各个 方 向采 取 无病 虫害 的果 实装 入 冰壶 带 回实 验室 ， 立 即测定有关 内在成分指标 。
定Ｅ 及药理活性口 “ 的研究 已有较多报道 ， 但对 宁夏枸 杞果实发育过程 中黄 酮类化 合物 的含量 变化规 律 尚鲜
从开花坐 果 到果 实 成 熟 的整 个 发 育过 程 中 ， 共 取样 ７
次， 每次 ３ 个重复 ， 果实发育前期 ， 采样时间间隔较长 ， 到 成熟期适 当缩短取 样时 间。每 重复具 体采样 时 间为花
后９ ｄ （ ５月 ２ ５日） 、 １ ４ ｄ （ ５月 ３ ０ 日） 、 １ ９ ｄ（ ６月 ４ 日） 、
过程中总黄酮 的含量变化 ； 采 用高效液相 色谱法测定 宁 夏枸杞果 实发育过程 中芦丁含量 的变化规律 ， 以期 为进
一
型超声波清洗器（ 昆山市 超声仪器有 限公司） ； 紫外可见 分光光度 计（ 上海 尤尼柯仪 器有 限公 司） ； Ｐ Ｂ ３ ０ ３ 一 Ｅ电子 天平 （ ＭＥ Ｔ Ｔ Ｌ Ｅ Ｒ — Ｔ Ｏ Ｉ ． Ｅ Ｉ ） Ｏ 仪器 公 司） 。主要 试 剂 ： 甲 醇、 乙腈为色谱 纯 ， 其它 为分 析纯 。芦 丁标准 品购 自中
化作用 。目前对 宁夏枸杞黄酮的分离鉴定＿ ７ ］ 、 定量测
２ ５ ｄ （ ６月 １ ０日） 、 ２ ９ ｄ （ ６ 月１ ４日） 、 ３ ３ ｄ （ ６ 月 １ ８日） 、３ ７ ｄ
（ ６月 ２ ２日） 。采 样 时间 为上 午 ８ ： ３ ０ ～９ ： ３ ０ ， 分 别从 标
国药 品 生物 制 品检 定 所 。 １ ． ２ 试 验 方法
步探索黄酮 类化合 物 的积累机 制及 其调控作 用及 宁
夏枸杞的优 质高产栽培提供理论 依据 。
１ 材料 与方 法
１ ． １ 试 验 材 料
以５ ａ 生“ 宁杞 １ 号” 为试 材 ， 于 ５ 月 １ ６日用毛线绳
标记 同天开 放 的花 朵 １万 朵 （ 将 毛线 段 系在 花 梗处 ） 。
１ ． ２ ． １ 分光光度法测 定枸杞总 黄酮含量 实 验室前期
研究表 明， 枸 杞黄 酮化 合物含 有 芦丁 ， 参考 张颖 等Ｌ ８ 方 法， 以芦丁为标准 品 ， 用分光 光度计 法测定 枸杞 总黄 酮
的含 量 。
第 一作者 简 介 ： 王忠忠（ １ ９ ８ ６ 一 ） ， 男， 硕 士研 究 生， 现 主 要从 事 宁夏 枸 杞化 学成 分 和 活 性 研 究等 工 作 。Ｅ — ｍａ ｉ ｌ ： ｗ ａ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｉ ｒ ｇ ２ ０ ０ ９
＠１ ６ ３ ． ｃ ｏ ｍ．
１ ＿ ２ ． ２ 芦丁标 准曲线 的制备
精密量 取干燥至 恒重芦
责任 作者 ： 张 自萍 （ １ ９ ７ ０ 一 ） ， 女， 博士， 教授 ， 硕 士 生 导师 ， 现 主 要 从 事天 然产 物分 析 等研 究Ｚ － 作 。Ｅ － ｍ ａ ｉ ｌ ： ｚ ｉ ｐ ｉ ｎ ｇ ｚ ｈ ａ ｎ ｇ ＠１ ６ ３ ． ｃ ｏ ｍ ．
关键 词 ： 枸杞 ； 果实发育 ； 黄酮 ； 芦 丁
中图分 类号 ： Ｓ ５ ６ ７ ． １ ９ 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ １ －０ ０ ０ ９ （ ２ ０ １ ３ ） １ ｌ —Ｏ １ ５ ２ 一Ｏ ４ 宁夏枸杞 （ Ｌ ｙ ｃ ｉ ｕ ｍ ｂ ａ ｒ ｂ ａ ｒ ｕ ｍ Ｉ ） 属茄科枸杞 属植物 ，
・
中草药 ・
北方 园 艺２ ０ １ ３ （ １ １ ） ： １ ５ ２ ～ １ ５ ５
宁夏枸 杞 果 实发 育过 程 中黄酮 类 化 合物 含 量 的变 化研 究
王 忠 忠，马 茜 ，慕 金 凤 ，张 自 萍
（ 宁夏 大学 生命 科学 学 院 ， 宁夏 银 川 ７ ５ ０ ０ ２ １ ）