PCR学习心得（优秀范文六篇）

PCR学习心得（优秀范文六篇）
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第一篇：实习学习心得
作为一名即将奔赴教师岗位的大学生，学习科学发展观，更要结合自身实际情况，要认真贯彻执行胡同志提出的：发展要有新思路，改革要有新突破，开放要有新局面，各项工作要有新举措，顶岗实习教师科学发展观学习心得。

我们要把学习践行科学发展观与执教工作结合起来；与谋划好今后与学生交往结合起来；着力提升我们的教师职业道德水平和专业素质。

实践已经充分证明，当代教育需要新的理念新的方式，教学改革的口号也越喊越响亮，这就更需要我们这些即将从事教师职业的顶岗实习生充分利用好实习这个锻炼的机会，以新的理念新的方式来组织教学，提高自己的教学能力，同时锻炼自己管理学生的实践能力，心得体会《顶岗实习教师科学发展观学习心得》。

通过近期的学习，我对科学发展观理论有了进一步的理解，我明白了科学发展观无处不在，无处不可以应用。

从人类个人、国家，乃至整个世界；从经济、政治到环境保护等等。

我们应该从现在起就将科学发展观应用于我们实习
教师的学习、生活、思想、工作上，在实习工作中以科学的理念来完善自己的各项能力。

我更加深刻感受到这次学习实践活动的意义，明白更多认识问题、解决事情的方法，凡事要全面地协调地去看待问题。

第二篇：实习学习心得
第一天，进入焊接实验室之前，老师简要地给我们讲解了一下实训的要求，让我们对收音机有一个大概的了解，在进行实训的时候心中更加有数。

在实训前，老师给我们发下了中夏S66E六管超外差式收音机实验套件。

接下来几天我们的工作就是将这套套件安装成一个合格的收音
机了。

我们每个人拆开套件之后对照元件清单仔细检查了各个元件有无缺失，损坏。

在进行焊接元件之前，我们用废弃的电路摸板练习，掌握烙笔的用法。

刚刚开始自己练习的时候，我们的焊点可谓“抽不忍赌”，有的同学甚至在焊接的时候会出现手颤抖的现象。

为此我专门上网，找了一些比较适合我的焊接的方法。

有了这些方法的指导，进过一天的练习，我可以完成一次较好的焊接，避免虚焊的同时提高了焊接的速度和准度，并且焊接出来的焊点也比较好看。

在经过两天的焊接以后，我开始仔细研究了这台收音机电原理图和印刷电路板。

在多次熟悉焊接工艺要求
在老师的指导下，我们认真完成了收音机。

反复检查后，我们满怀期待地装上了电池进行调试。

小心翼翼的调试后，收音机里发出了清晰的音乐声!我们成功了!我们心里充满了喜悦和成就感。

通过这次实习，我得到了很大的收获，这些都是平时在课堂理论学习中无法学到的，我主要的收获有以下几点：
1.实习过程中不应该只在意焊接后功能是不是合格，工艺上更加应该高要求;为此我上网找了一些焊接方法：a、右手持电烙铁。

根据情况左手持焊锡丝或者用尖嘴钳或镊子夹持无件或导线。

焊接前，电烙铁要充分预热。

烙铁头刃面L要吃锡，即带一定量焊锡。

b、将烙铁头刃面紧贴在焊点处。

电烙铁与水平面大约成45～60“角左右。

左手向下送锡，右手送烙铁。

送锡时间决定锡量大小，烙铁停留时间决定加热时间。

当焊锡、烙铁头在无件引脚根部焊盘处相接触后，烙铁头在焊点处停留的时间应根据焊盘大小拄制在0.5～2秒钟。

c、抬开烙铁头。

侍焊点处的锡冷却凝固。

2.掌握了几种基本的电工工具的使用，了解了电路安装中走线、元件布局等基本常识;
3.本次实培养了我们的动手实践能力和细心严谨的作风。

4.成装：板焊好后，在电位器和双联上安上拨轮，用四条电线连上喇叭、正极片与弹簧。

并将正极片、弹簧分别插入机壳。

要求：四条电线的长度要合适，尤其是每条电线两头露出的铜丝不要太长(露出
3mm为宜)，以防与其它地方短路。

5.直流测量：线路板上留有4个测电流的口，用万用表，分别在这4个口处测量三极管的静态工作电流：IC1=0.5MA左右，IC2=1.5MA，IC4=3MA，IC5.6=6MA。

测量合适后要用焊锡将电流口封住，这时收音机就响了。

如果遇到哪一级电流太小或太大要重点检查该级的二、三极管极性是否装错，周围元件是否装错，是否有焊接短路的现象。

这次实习给我们上了一堂很有意义的社会实践课，在很大程度上提高了我们的综合素质，使我们的理论知识能融入实践当中，让我对所学专业更有信心。

使我们对电子工艺的理论有了初步的系统了解。

我们了解到了焊普通元件与电路元件的技巧、印制电路板图的设计制作与工艺流程、收音机的工作原理与组成元件的作用等。

这些知识不仅在课堂上有效，对以后的电子工艺课的学习有很大的指导意义，在日常生活中更是有着现实意义;也对自己的动手能力是个很大的锻炼。

实践出真知，纵观古今，所有发明创造无一不是在实践中得到检验的。

没有足够的动手能力，就奢谈在未来的科研尤其是实验研究中有所成就。

在实习中，我锻炼了自己动手技巧，提高了自己解决问题的能力。

比如做收音机组装与调试时，好几个焊盘的间距特别小，稍不留神，就焊在一起了，但是我还是完成了任务。

在实习中，我锻炼了自己动手技巧，提高了自己解决问题的能力。

我很感谢在这次实习过程中帮助过我的老师和同学们。

谢谢!
第三篇：PCR技术原理及心得
PCR技术原理与心得体会
PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h 后带型不规则甚致消失。

一.假阴性,不出现扩增条带
PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及活性④PCR循环条件。

寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。

模板:①模板中含有杂蛋白质,②模板中含有Taq酶抑制剂,③模板中蛋白质没有消化除净,特别是染色体中的组蛋白,④在提取制备模板时丢
失过多,或吸入酚。

⑤模板核酸变性不彻底。

在酶和引物质量好时,不出现扩增带,极有可能是标本的消化处理,模板核酸提取过程出了毛病,因而要配制有效而稳定的消化处理液,其程序亦应固定不宜随意更改。

酶失活:需更换新酶,或新旧两种酶同时使用,以分析是否因酶的活性丧失或不够而导致假阴性。

需注意的是有时忘加Taq酶或溴乙锭。

引物:引物质量、引物的浓度、两条引物的浓度是否对称,是PCR失败或扩增条带不理想、容易弥散的常见原因。

有些批号的引物合成质量有问题,两条引物一条浓度高,一条浓度低,造成低效率的不对称扩增,对策为:①选定一个好的引物合成单位。

②引物的浓度不仅要看OD值,更要注重引物原液做琼脂糖凝胶电泳,一定要有引物条带出现,而且两引物带的亮度应大体一致,如一条引物有条带,一条引物无条带,此时做PCR有可能失败,应和引物合成单位协商解决。

如一条引物亮度高,一条亮度低,在稀释引物时要平衡其浓度。

③引物应高浓度小量分装保存,防止多次冻融或长期放冰箱冷藏部分,导致引物变质降解失效。

④引物设计不合理,如引物长度不够,引物之间形成二聚体等。

Mg2+浓度:Mg2+离子浓度对PCR扩增效率影响很大,浓度过高可降低PCR扩增的特异性,浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带。

反应体积的改变:通常进行PCR扩增采用的体积为20ul、30ul、50ul。

或100ul,应用多大体积进行PCR扩增,是根据科研和临床检测不同目的而设定,在做小体积如20ul后,再做大体积时,一定要模索条件,否则容易失败。

物理原因:变性对PCR扩增来说相当重要,如变性温度低,变性时间短,极有可能出现假阴性;退火温度过低,可致非特异性扩增而降低特异性扩增效率退火温度过高影响引物与模板的结合而降低PCR扩增效率。

有时还有必要用标准的温度计,检测一下扩增仪或水溶锅内的变性、退火和延伸温度,这也是PCR失败的原因之一。

靶序列变异:如靶序列发生突变或缺失,影响引物与模板特异性结合,或因靶序列某段缺失使引物与模板失去互补序列,其PCR扩增是不会成功的。

二.假阳性,出现非特异性扩增带 1.假阳性
出现的PCR扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。

引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行PCR 扩增时,扩增出的PCR产物为非目的性的序列。

靶序列太短或引物太短,容易出现假阳性。

需重新设计引物。

靶序列或扩增产物的交叉污染:这种污染有两种原因:一是整个基因组或大片段的交叉污染,导致假阳性。

这种假阳性可用以下方法解决:①操作时应小心轻柔,防止将靶序列吸入加样枪内或溅出离心管外。

②除酶及不能耐高温的物质外,所有试剂或器材均应高压消毒。

所用离心管及样进枪头等均应一次性使用。

③必要时,在加标本前,反应管和试剂用紫外线照射,以破坏存在的核酸。

二是空气中的小片
段核酸污染,这些小片段比靶序列短,但有一定的同源性。

可互相拼接,与引物互补后,可扩增出PCR产物,而导致假阳性的产生,可用巢式PCR方法来减轻或消除。

2.出现非特异性扩增带
PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致,或大或小,或者同时出现特异性扩增带与非特异性扩增带。

非特异性条带的出现,其原因:一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体。

二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR 循环次数过多有关。

其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶则不出现,酶量过多有时也会出现非特异性扩增。

其对策有:①必要时重新设计引物。

②减低酶量或调换另一来源的酶。

③降低引物量,适当增加模板量,减少循环次数。

④适当提高退火温度或采用二温度点法(93℃变性,65℃左右退火与延伸。

3.出现片状拖带或涂抹带
PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。

其原因往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多引起。

其对策有:①减少酶量,或调换另一来源的酶。

②减少dNTP的浓度。

③适当降低Mg2+浓度。

④增加模板量,减少循环次数。

三.PCR污染与对策
PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。

污染原因
(一标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染。

(二PCR试剂的污染:主要是由于在PCR试剂配制过程中,由于加样枪、容器、双蒸水及其它溶液被PCR核酸模板污染.(三PCR扩增产物污染:这是PCR反应中最主要最常见的污染问题,因为PCR产物拷贝量大(一般为1013拷贝/ml,远远高于PCR检测数个拷贝的极限,所以极微量的PCR产物污染,就可造成假阳就可形成假阳性。

还有一种容易忽视,最可能造成PCR产物污染的形式是气溶胶污染;在空气与液体面摩擦时就可形成气溶胶,在操作时比较剧烈地摇动反应管,开盖时、吸样时及污染进样枪的反复吸样都可形成气溶胶而污染.据计算一个气溶胶颗粒可含48000拷贝,因而由其造成的污染是一个值得特别重视的问题.(四实验室中克隆质粒的污染:在分子生物学实验室及某些用克隆质粒做阳性对照的检验室,这个问题也比较常见。

因为克隆质粒在单位容积内含量相当高,另外在纯化过程中需用较多的用具及试剂,而且在活细胞内的质粒,由于活细胞的生长繁殖的简便性及具有很强的生命力,其污染可能性也很大。

污染的监测
一个好的实验室,要时刻注意污染的监测,考虑有无污染是什么原因造成的污染,以便采取措施,防止和消除污染。

四.对照试验
1.阳性对照:在建立PCR反应实验室及一般的检验单位都应设有PCR阳性对照,它是PCR反应是否成功、产物条带位置及大小是否合乎理论要求的一个重要的参考标志。

阳性对照要选择扩增度中等、重复性好,经各种鉴定是该产物的标本,如以重组质粒为阳性对照,其含量宜低
不宜高(100个拷贝以下,但阳性对照尤其是重组质粒及高浓度阳性标本,其对检测或扩增样品污染的可能性很大。

因而当某一PCR试剂经自己使用稳定,检验人员心中有数时,在以后的实验中可免设阳性对照。

2.阴性对照:每次PCR实验务必做阴性对照。

它包括①标本对照:被检的标本是血清就用鉴定后的正常血清作对照;被检的标本是组织细胞就用相应的组织细胞作对照。

②试剂对照:在PCR试剂中不加模板DNA或RNA,进行PCR扩增,以监测试剂是否污染。

3.重复性试验
4.选择不同区域的引物进行PCR扩增五.防止污染的方法
(一合理分隔实验室:将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增及PCR产物的鉴定等步骤分区或分室进行,特别注意样本处理及PCR产物的鉴定应与其它步骤严格分开。

最好能划分①标本处理区;②PCR反应液制备区;③PCR循环扩增区;④PCR产物鉴定区。

其实验用品及吸样枪应专用,实验前应将实验室用紫外线消毒以破坏残留的DNA或RNA。

(二吸样枪:吸样枪污染是一个值得注意的问题。

由于操作时不慎将样品或模板核酸吸入枪内或粘上枪头是一个严重的污染源,因而加样或吸取模板
核酸时要十分小心，吸样要慢，吸样时尽量一次性完成，忌多次抽吸，以免交叉污染或产生气溶胶污染。

(三预混和分装 PCR 试剂:所有的 PCR 试剂都应小量分装，如有可能，PCR 反应液应预先配制好，然后小量分装，-20℃保存。

以减少重复加样次数，避免污染机会。

另外，PCR 试剂，PCR 反应液应与样品及 PCR 产物分开保存，不应放于同一冰盒或同一冰箱。

(四防止操作人员污染，使用一次性手套、吸头、小离心管应一次性使用。

(五设立适当的阳性对照和阴性对照，阳性对照以能出现扩增条带的最低量的标准病原体核酸为宜，并注意交叉污染的可能性，每次反应都应有一管不加模板的试剂对照及相应不含有被扩增核酸的样品作阴性对照。

(六减少 PCR 循环次数，只要 PCR 产物达到检测水平就适可而止。

(七选择质量好的Eppendorf 管，以避免样本外溢及外来核酸的进入，打开离心管前应先离心，将管壁及管
盖上的液体甩至管底部。

开管动作要轻，以防管内液体溅出。

呵呵其实 DNA（或 RNA）的提取方法及 DNA 的质量也很关键例如：SDS 法和 CTAB 法提取的 DNA 与 RNA 的 PCR 结果有很大的差异的。

呵呵。

第四篇：实习学习心得
来到容闳已经快有一个星期了，美丽的校园，彬彬有礼的学生，人与人之间和谐的关系，都让我看到了容闳学校的特别之处，直到我深入教学第一线才发现了容闳学校教学的独到之处，为什么连续三年位于珠海市中考第一的原因。

我的指导老师是初中文科组的组长，饶帮军老师。

他为人很热情，对语文教学也有自己独到的看法。

我实习的班是初三，第一次与他们见面完全没有拘束的感觉，课堂气氛很好，学生也很友善，容闳学校的班级实行的是分组教学，将分组到底，上课分组，班会也是分组，这样的好处可以充分发挥孩子们的创造力，并且一个小组只有8个人，每个人都在团队承担任务，这样有利于每个孩子的发展。

说一说今天的语文课吧，连着两节都是语文课，让我见识到了真正的自主学习。

第一节饶老师布置任务，学生准备分组讲解课文，一组一首词，背诵，第二节课展示，每组只有8分钟的时间展示，饶老师点评。

第一节课完全是学生自己在看书，背诵，准备讲课，饶老师只是进行一些指导，我在想学生自学可以搞定这些内容吗?
第二节课，讲课的结果让我大吃一惊。

效果很好，学生讲课的质量很高，很有效率，并且在很短的时间内把诗词都背了下来，真是让人佩服不已。

分组教学+自主学习=成功?
第五篇：PCR实验室
高端PCR实验室控制设计说明
PCR实验室即分子生物学实验室，在医疗、科研、生物技术方面得到广泛的应用。

因其在不同行业的应用各有区别，在具体设计时也
有不同之处，就医疗机构的应用而言，主要使用三区或四区设计，即试剂准备区、样品提取区、扩增分析区；此类三区设计时候应用于类似荧光定量型或同类PCR分析设备，及扩增与分析过程在设备内一次完成。

而四区设计在三区的基础上讲扩增分析区拆分为扩增区与分析区适用于其他类型的pcr设备及手工处理。

在PCR实验的设计上，经过多年的经验累积，已经在一些关键技术上达成了共识。

因为PCR实验中所产生的DNA与RNA片段过于微小，以至于可以穿透高效过滤器，所以在实验室设计上已经不在强制要求设计高效净化系统，但是为了提高实验环境水平及保护实验室内的敖贵设备方面，如果在具备条件的情况下可考虑追加高效空气净化系统；建议净化级别万级。

在PCR实验中所产生的DNA与RNA片段污染是一直以来PCR实验的重点问题。

此类污染主要至上次试验中所产生的基因片段对下次试验产生的污染，而且一旦试验环境中的污染形成后很难处理。

因为消毒等传统方式对于基因污染没有很良好的效果。

所以在PCR实验室设计中一般将整套实验室设计为全新风型实验室，这样而已通过有效的换气次数来达到净化室内污染的作用。

而在控制方面也有很多不同之处，因为各单位对PCR实验的重视程度各有不同，所以在设计上也有不同，主要的控制设计有定送定排式压力控制系统、变送定排式压力控制系统变送变排式压力控制系统。

在控制设备方面也有很多区分如压力无关型控制系统、压力有关型控制系统。

根据业主要求，本PCR实验室为三区设计，各区可独立使用，不设置高效过滤系统等相关要求，根据业主以上要求，我方给出的设计方案为压力无关型变送变排压力控制系统。

本系统的特点是，设备启动后可根据实验室内使用节点调节送风量及排风量来控制各房间状态，系统说明见下图
λ每个房间可分别控制，使用时通过房间开关输出启动信号，当设备接到启动信号时设备运行，运行中根据管道压力反馈决定变频器大小，房间内送排风量由压力无关型风量调节阀控制。

λ当有多个房间开启或关闭时，设备更加管道压力反馈，调节设备变频器增加或减少送排风量来稳定管道压力。

各房间内压力又房间内的压力无关型定
风量阀进行控制。

λ当BSC（生物安全柜，B2全排）开启时BSC专用供风机组运行，BSC-供风机-排风机连锁运转。

λ当BSC做变风量调节时，根据房间内压力变化，BSC专用供风机组前安装的压力无关型变风量调节阀根据压力变化增减送风量，确保房间压力执行在可控范围内。

λ当房间不适用时，房间与缓冲间均关闭电动密闭阀，确保房间处在密闭状态避免布朗运动造成的可能污染风险。

λ房间换气次数均按照一定净化标准设计，当室内污染发生时，通过一定时间的换气处理后，污染问题可以基本解决。

λ本系统如果业主需要，可在室内送风口末端加装高效过滤设备，房间可升级为净化型实验室。

λ压力无关型风阀简介：压力无关型风阀的特点是不会根据管道压力的变化而影响风阀内部的送风量，在一定管道压力区间内能够自行调节阀体阻力，来稳定送风量，是高端实验室必备的关键部件，目前此类阀体技术均有国外生产厂家控制，目前国内主用使用的产品有妥思、文丘里、西门子等品牌。

第六篇：实习学习心得
昨日只输入了两个费用科目的数据，今日要输的是管理费用，管理费用下比较通用的科目有：办公费，业务招待费，水电费，差旅交通费，固定资产折旧，地方税费（如堤围费，防洪费等），其他管理费用，管理人员工资，福利费，工会经费，职工教育经费，劳动保险费，住房公积金，资产减值准备等。

这些科目海峡基本都有，我们就把？按顺序编好明细输进去就好了，还好海峡的会计做账都很清楚所以我们在输完数据对账的时候就很简便了，因为每个数据都是对的话就不用我们去对总账，明细账，有的时候如果还是不对的话还要去翻看记账凭证，那样的话工作量就是很大的了，这都是小慧和我说的，我在想看来税审并没有我看到的这么简单，每个企业的会计的做账方法都是不一样的，有的还是手工账，看来我要应对的还有很多不一样的考验啊，期待中。

这样的话三个费用就输完了，也就是说损益表上
的科目是输完了，这有先把这个基本的工作做完了才能继续做后面的鉴证表的输入工作。