呋喃唑酮代谢物间接竞争化学发光酶免疫法的建立
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( 4 一 C B A) 将A O Z衍 生化 为 C P A O Z , 利 用 活化 酯 法将 C P A O Z与 卵 清蛋 白( O V A) 偶联 , 生 成 完全 抗 原 C P A O Z — O V A。 对 包被 原 与 抗 体 的 最佳 稀 释 倍 数 、 封 闭液 浓 度 、 竞争 时 间 、 酶标二抗稀 释倍数 进行优 化 , 建 立 标 准 曲线 , 同 时 对 方 法 的 特
2. Fo o d a n d Dr ug Fa s t I ns pe c t i o n Ce n t e r o f Sh a n x i Un i v e r s i t y, Ta i yu a n 0 3 00 06, Chi na;
3 . C h i n a F o o d a n d D r u g A d m i n i s t r a t i o n I n s t i t u t e o f E x e c u t i v e D e v e l o p m e n t , B e i j i n g 1 0 0 0 7 3 , C h i n a )
仅 , r l t 摹拉 议
S c i e n c e a n d T e c &o l o g r o f F o o d I n d u s t r y
分 析 检 割
呋 喃 唑 酮 代 谢 物
间接竞争化学发 光酶免疫法 的建立
黄登 宇 , 高 文静 ’ , 黄,
r e a c t i o n . CP A OZ —OVA, a s t h e c o a t i n g a n t i g e n, wa s p r e p a r e d b y a c t i v a t e d e s t e r me t h o d . Af t e r o p t i mi z i n g t h e d i l u t i o n mu l t i p l e o f c o a t i n g a n t i g e n a n d a n t i —b o d y, b l o c k i n g b u f f e r , c o mp e t i t i v e r e a c t i o n t i me a n d t h e d i l u t i o n mu l t i p l e o f s e c o n d a n t i b o d y , a s t a n d a r d c u r v e w a s e s t a b l i s h e d。 a n d i f n a l l y t h e s p e c i i f c i t y o f t h e me t h o d wa s e v a l u a t e d . T h e r e s u l t s i n d i c a t e d t h a t , t h e o p t i mu m
i nd i r e c t c o mp e t i t i v e c he mi l u mi ne s c e nc e e nz y me i m m un o a s s a y
HU AN G D e n g - y u 一 , G AO We n - j i n g 。 , H UA N G Z h o n g — q i a n 。 , GA O L i - x i a , F E NG Mi n ‘ , Y AN G X i u - s o n g ’ ( 1 . S c h o o l o f L i f e S c i e n c e , S h a n x i U n i v e r s i t y , T a i y u a n 0 3 0 0 0 6 , C h i n a ;
i de n t i ic f a t i o n o f t h e f u r a z o l i do n e me t a b o l i t e i n a ni ma l —de iv r e d oo f d . AOZ c a n b e t r a ns l a t e d i n t o ha pt e n CP AOZ b y d e r i v a t i v e
Ab s t r a c t : An i n d i r e c t c o mp e t i t i v e c h e mi l u mi n e s c e n c e e n z y me i mmu n o a s s a y(i c—C L E I A)w a s u s e d f o r d e t e r mi n a t i o n a n d
( 1 . 山西 大学 生命 科 学学 院 , 山西 太原 0 3 0 0 0 6 ; 2 . 山西大 学食 品 药品快检 技 术 中心 , 山西 太原 0 3 0 0 0 6 ;
3 . 国家食 品 药 品监督 管 理 总局 高级研 修 学 院 , 北京 1 0 0 0 7 3 )
摘 要: 建立快速检测 动物 源性 食 品 中呋喃 唑 酮代谢 物 A O Z 的 间 接 竞 争 化 学 发 光 酶 免 疫 法 。 利 用 对 醛 基 苯 甲 酸
异性进行评价 。结果表 明: 包被抗原最佳稀释倍 数为 2 0 0 0倍 , 抗体 的最佳稀释倍数 为 2 0 0 0 0倍 、 封 闭液 为 2 %脱脂 乳
粉、 竞 争 时 间为 2 h 、 二 抗 最佳 稀释 倍 数 为 4 0 0 0倍 ; 线 性 范 围是 0 . 0 7 5 - 7 . 3 9 6 i r g / m L , 半抑制浓度 I c 为 0 . 7 4 n g / m L , 对 呋 喃唑 酮原 药 的 交 叉反 应 率 为 2 3 . 4 %, 与 其 他 结构 类 似 物 及 衍 生 化 试 剂 的 交 叉 反 应 率 均 小 于 0 . 1 %。该 方法灵敏 度 高、
特 异性 好 , 可 为 监 管 部 门对 于 快 速 检 测 动 物 源 性 食 品 中 A O Z提 供 依 据 。
关键词 : 呋喃唑酮 , 间接 竞 争化 学发 光 酶 免 疫 法 , 动 物 源性 食 品 , 快 速 检 测
S y nt he s i s o f f ur a z o l i d o ne me t a b o l i t e a r t i ic f i a l a nt i g e n a nd d e v e l o pm e nt o f