淫羊藿中淫羊藿苷的提取工艺研究

淫羊藿中淫羊藿苷的提取工艺研究
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产很不适应.根据"枫斗"加工目的仅是为了除去
体内水分,达到干燥的目的,设计用机械的方法将其
截切成3～4cm的小段,80±5oC烘干.这样的加工
方法使体内的水分从截面处逸出.为了便于水煎煮时
有效成分的溶出,在投料前将干燥的短段用压轧机压
扁,同样可以达到角质层被撕裂的目的.
本研究采用同一种植棚内的4批小样本和基地加
工的6批大样本,将每批样本对分,同时用两种加工
方法加工,并对两种加工品进行有效成份的含量测
定.从每组含量数据对比看,无明显差异.实验表明
两种加工品的有效成分多糖的含量无明显差异,说明
用机械加工方法不影响铁皮石斛药材质量,机械加工
方法可以代替传统手工加工方法.
曾对2种不同加工品用氯仿提取其脂溶性成分,
以氯仿一甲醇(10:08)为展开剂,在硅胶G薄层板
上展开,取出,晾干后喷以l0%硫酸乙醇溶液,105
℃烘5min,在日光或紫外光灯(365nm)下检示,2
种加工品在薄层色谱的相同位置上显相同颜色的斑点
或荧光斑点.说明两种不同加工品的氯仿提取物所含
成分在薄层色谱上的表现是一致的.进一步说明机械
加工方法替代传统加工方法是可行的.
参考文献:
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[2】国家药典委员会.中华人民共和喇约典2000年版?部【sJ.北京:
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(编辑:邹元平)
淫羊藿中淫羊藿苷的提取工艺研究
杨柳,钟静娴,林巧玲,谢培山,黄海燕(1.广东省中医院,广州510120;2.广卅I市药品检验所,广州
510122)
摘要:目的研究淫羊藿中淫羊藿苷的提取工艺条件.方法采用HPLC法对不同提取工艺条件下淫羊藿苷含量进
行测定,探讨不同提取溶媒,煎煮时间,浓缩时间及温度,药材粉碎度对淫羊藿苷含量的影响结果不同提取方
法对淫羊藿中淫羊藿苷的提取率影响较大.结论本研究.-j-~工业大生产中合理地提取淫羊藿活性成分提供参考.
关键词:淫羊藿;淫羊藿苷;HPLC法;提取工艺
中图分类号:R284.2文献标识码:A文章编号:1003—9783(2005)04—0286—03 StudiesonExtractionofIcariininHerbaEpimedii
Y ANGLiu,ZHONGJingxian,LINQiaolin,XIEPeishan,HUANGHaiyan(1.GuangdongP rovincialH0spital0f
TCM,Guangzhou510120;2.GuangzhouInstituteforDrugControl,Guangzhou510122) Abstract:ObjectiveTooptimizetheextractionprocessforicariinfromHerbaEpimedii.Meth odsThec(Jntentof icariinintheextractsobtainedbydifferentextractionmethodswasdeterminedwithHPLC.T heeffect0fs0lvents,b0iling
time,extractingtimeandtemperature,andthesizeofthemedicinalpowderwasobserved.Res ultsDifferentextraction methodshadgreatinfluenceontheextractionrateoficariin.ConclusionThisresearchcanpro
videevidenceforthe extractionofactivecomponentfronHerbaEpimediiinindustrialproduction. Keywords:EpimediumSagittatumMaxim;Icarrin;HPLC;Extractiontechnologv
淫羊藿来源于小檗科Beberidace.e淫羊藿属
Epimedium多种植物,为常用补肾壮阳中药,其主要
成分为异戊烯取代的黄酮类化合物….对淫羊藿及其
制剂的质量评价,大多以所含淫羊藿苷或总黄酮为指
收稿日期:2005一Ol—l4
作者简介:杨柳(1974一),女,副研究员,主要从事中药活性成分分析及药代动力学研究Email:*****************.0m;Tel:020—88186083.
中_蔓堑垫墨堕壅垫里±旦箜4塑——
标.本文通过探讨不同提取溶媒,煎煮时间,浓缩时
间及温度,药材粉碎度对淫羊藿苷含量的影响,为合
理提取淫羊藿的活性成分提供参考.
l仪器与试药
美国HP1100型高效液相色谱仪.淫羊藿苷对照
品(批号:9508,中国药品生物制品检定所,供含量
测定用).淫羊藿药材由健心医药有限公司提供,经
广州市药检所谢培山主任药师鉴定为巫山淫羊藿EpimediumwushanenseT.S.Ying.甲醇,乙腈为色谱
纯,其余试剂均为分析纯.
2方法与结果
2.1淫羊藿苷的含量测定
2.1.1色谱条件色谱柱:HPSpherisorbODS2
(250×4mm,5m),流动相:乙腈一水(30:
70),检测波长270nm,柱温25℃,流速1mL/
rain.
2.1.2线性范围分别精密吸取淫羊茬苷对照品溶液
(0.206mg/mL)0.5,2.5,5.0,7.5,10LLL,按
上述色谱条件进样测定,以对照品进样量为横坐标, 峰面积积分值为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程:Y=2131.02921X一8.16197,r=0.9999,淫羊
藿苷在0.10～2.06Ixg范围内与峰面积呈良好的线性关系.
2.2不同提取溶媒对淫羊藿苷提取率的影响取淫羊藿药材粉末(50目)约0.2g共6份,精密称重,其
中5份置60mL圆底烧瓶中,分别以30%乙醇,50
%乙醇,70%乙醇,无水乙醇,水各20mL为提取
溶媒,回流提取1h;另1份置100mL三角烧瓶中,
加水20mL加热提取1h.待提取液冷却至室温,用50%乙醇定容至25mL,摇匀,0.45m微孔滤膜过
滤,取续滤液作为供试品溶液,高效液相色谱法测定样品中淫羊藿苷的含量.结果见表1.
采用不同的提取溶媒,淫羊藿苷的提取率有较大
差异,以纯水和无水乙醇为提取溶媒,淫羊藿苷含量均较低,而采用一定浓度的乙醇提取,淫羊藿苷含量明显增高,提示在实际生产中,对含淫羊藿药材的处方,可考虑以低浓度的乙醇提取,不仅有利于提高指标成分的含量,而且可降低生产成本.
287?
2.3不同煎煮时问及提取溶媒用量对淫羊藿苷提取率的影响取淫羊藿药材粉末(50目)约0.2g共14
份,置lO0mL三角烧瓶中,精密称重,分别以水10 mL,20mL提取0.5,l,1.5,2,3,4,5h,待提
取液冷却至室温,50%乙醇定容至25mL,摇匀,
0.45m微孔滤膜过滤,取续滤液作为供试品溶液,
高效液相色谱法测定样品中淫羊藿苷的含量.结果见
表2
表2不同煎煮时间及提取溶媒用量对
淫羊藿苷提取率的影响(%)
随着煎煮时间和提取溶媒量的增加,淫羊藿苷的
溶出量呈递增趋势,但煎煮时间过长会导致淫羊藿苷
的破坏.实验结果表明,当煎煮时间超过4h,淫羊
藿苷的含量明显下降,说明持续的高温加热会引起淫
羊藿苷的成分变化,提示在含淫羊藿的制剂工艺设计
中,应尽量避免长时间煎提.
2.4加热浓缩对淫羊藿苷提取率的影响取淫羊藿药
材粉末(50目)1.6g,精密称重,以水160mL加热
提取2h,待提取液冷却至室温,定容至200mL,摇
匀,过滤,精密吸取续滤液20mL,共6份,分置于
不同敞口容器中,按以下条件浓缩:①100oC直火加
热1h;②100oC直火蒸干药液后继续加热0.5h(总
受热时间为1.5h);③水浴浓缩1h;④75oC直火
浓缩1.5h;⑤50oC直火浓缩3.5h;⑥75oC直火蒸
干药液(总受热时间为5.5h).将按上述方法分别
处理后的浓缩药液或残渣放冷,分别以适量50%乙
醇稀释或溶解,并分次转移至25mL量瓶中,定容,
0.45m微孔滤膜过滤后进样分析,高效液相色谱法
测定样品中淫羊藿苷的含量.结果见表3.
表3加热浓缩对对淫羊藿苷提取率的影响
浓缩条件100℃,lh100℃,I.5h水浴.1h75℃.1.5h50℃,35h75℃.55h 结果表明,在均匀受热状态下,高温短时间
(1h)受热和较低温度下(75℃以下)长时间受热
(超过5h)均不会使淫羊藿药材中的淫羊藿苷遭到
破坏.但直火加热1h和1.5h,淫羊藿苷含量有显
着差异,加热1.5小时后,采用高效液相色谱法检测
不到淫羊藿苷的存在,说明蒸干后继(下转第293页) 筹
中药新药与临床药理2005年7月第16卷第土塑
3讨论
连花清瘟胶囊是吴以岭教授依据叶天士外感温热
病卫气营血传变规律及其本人临床经验研制的治疗流感的中药复方制剂.它以银翘散合麻杏石甘汤化裁,
配伍通腑泻肺逐秽之大黄,扶正清肺化瘀之红景天等中药组成.本方既有较好的抗流感病毒的作用,又有
抗菌,退热,镇痛,抗炎,止咳,化痰和调节免疫功
能,能阻断多个病理环节的恶性循环,调动机体抗病
康复能力,发挥中医药多靶点,多环节,多途径整体
治疗优势.
临床研究结果显示,连花清瘟胶囊对证候疗效和
体温疗效的改善试验组均优于对照组,发热起效时间试验组优于对照组.在本研究中连花清瘟胶囊显示了很好的安全性,未见不良反应发生.
中医证候疗效试验组显效率74.6%,对照组显
效率57.4%,两组显效率比较,P=0.006.体温疗
效试验组显效率72.8%,对照组显效率54.8%,两
组显效率比较,P=0.005.在目前及时诊断流感仍
很困难,且又需要尽早开始治疗的情况下,上述结果十
293?
分有意义,提示了在流感流行时,符合本纳入条件的患者可以接受连花清瘟胶囊的治疗,而不需病毒学的结果,与文献报道一致¨-6].因此,连花清瘟胶囊是一
种有效治疗流感的中药,其安全性好,可以普遍耐
受,适合在临床中推广使用.
参考文献:
【1J中华医学会呼吸病学分会.流行性感冒f临床诊断和治疗指南(草案)【J】.中华结核和呼吸杂志,2002.25(2):66—68.
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【5】常金荣.流行性感冒的中医药治疗与研究述略【J】.中医药学刊, 2003.21(7):l078一l080.
I6】薛恩彬,懂泽.感冒胶囊防治流感519例临床观察【J】.天津中医, 1999.16(I1:l3一l5.
(编辑:梁进权)
(上接第287页)
续高温加热可能会引起浸膏的不均匀受热或炭化,导
致淫羊藿苷损失殆尽.在工业大生产中,由于生产量
大,药液加热浓缩的时间必然很长,长时间的加热使
粘稠的药液极易因搅拌不及而导致受热不均,浸膏在
浓缩的过程中炭化,药材中的活性成分如淫羊藿苷等
均会遭致严重破坏.在生产中若能采用旋转薄膜蒸发
等方法,使药液在相对较低的温度下进行浓缩,对确
保制剂产品的质量将大有裨益.
2.5不同粉碎度对淫羊藿苷提取率的影响取未经粉
碎的淫羊藿叶片,淫羊藿叶片粉末(粉碎度分别为
20目和50目)各约0.2g,精密称定重量,置100
mL三角烧瓶中,加水20mL,加热提取2h,其余操
作同上,重复操作2次,取平均值.结果见表4.
表4不同粉碎度对淫羊藿苷提取率的影响
结果表明,粉碎度对淫羊藿苷的浸出影响不大,
这可能与叶片类药材的质地较疏松有关.提示在叶片
类药材,即使是革质类叶片的提取过程中,只要有足
够的溶媒使药材完全浸润,就能保证药材得到较完全
的提取.
3讨论
研究结果表明,在含淫羊藿药材制剂的大规模生
产中,简单的水提醇沉,去酒浓缩工艺已不能满足制
剂工艺合理化的需要,如果不对提取工艺中的诸多参
数进行综合考察,了解提取,浓缩等过程中活性成分
或总提取物等的含量变化情况,不仅与传统的中医药
理论背道而驰,还会导致产品质量的不可控,临床疗
效势必大打折扣.在工业大生产中,如何实现药材活
性成分的合理化提取,值得药学工作者进行深入地探
讨和研究.
参考文献:
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【2】国家药典委员会.中华人民共和国药典2000年版一部【s】北京:化学工业出版社.2000.229.
(编辑:邹元平)。