消化道肿瘤个体化治疗与靶标检测

2021/1/12
Lancet . 2010; 37176: 687–97
靶向药物相关靶标
靶向药物
肿瘤类型
西妥昔单抗 （爱必妥） 帕尼单抗 （维克替比）
结直肠癌
伊马替尼 （格列卫）
胃肠间质瘤
曲妥珠单抗 （赫赛汀）
胃癌
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检测项目 KRAS体细胞突变检测
（2,3外显子突变）
BRAF体细胞突变检测 （15外显子突变, T1799A）
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RRM1
核糖核苷酸还原酶(RR)
吉西他滨
阻断DNA合成
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RRM1低表达的胰腺癌接受吉西他滨治疗获益显著
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化疗药物相关靶标
药物
检测项目
氟尿嘧啶类
TYMS 基因表达量检测
铂类
ERCC1 基因表达量检测
紫杉类
TUBB3 基因表达量检测
吉西他滨
RRM1 基因表达量检测
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ERCC1与铂类药物
与ERCC1高表达患者相比，低表达者接受铂类为基础的化疗 具有更显著的生存获益
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22 J Clin Oncol .2001;19:4298-4304.
UGT1A1突变—伊立替康主要毒性作用显著
2021/1/12
J Clin Oncol.2009;27:262304-2614.
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荧光定量 PCR
多为新鲜样本 不适应 需要 需要 需要 一个
少于4个 大于30
分支DNA－ 液相芯片技术
所有样本 适用 不需要 不需要 不需要 可任意增加 超过30个 小于15
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个体化的挑战与策略
靶标 技术 样本
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组织样本要求
样本
类型
样本量需求
处理方法
新鲜手术组织
RR: 24.4%
KRAS testing
RR: 36.3%
BRAF testing
RR: 38.4%
NRAS testing
RR: 39.9%
PIK. E20. testing
RR: 41.2%
Mutation rate 41·2% Mutation rate in KRAS wild-type 7·2% Mutation rate in KRAS/BRAF wild-type 4·8% Mutation rate in KRAS/BRAF/NRAS wild-type 3·1%
Response Rate 25-55% 20-30% 25-35% 30-50% 20-30% 15-25% 15-25% 5-15% 5-15%
Median Duration of Response 6-12 months 4-6 months 6-8 months 4-6 months 4-6 months 4-6 months 3-5 months 2-4 months 2-4 months
低
最佳疗效分型
KRAS野生/BRAF野 生/PIK3CA野生的疗 效最佳
C-kit第11外显子突变 /PDGFRA突变的疗效 最佳
HER2表达水平高 /PTEN表达水平高的
疗效佳
疗效 无效 有效 无效 有效 无效 有效 无效 有效 有效 无效 有效 无效 有效
无效
野生 突变
PI3K野生的疗效最佳
有效
消化道肿瘤个体化治疗与靶标检 测
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2
不同疾病类别药物反应率比较
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3
不同肿瘤类别药物疗效比较
Cancer Type Breast Lung-Non-Small cell Colon Esophagus Stomach Melanoma Pancreas Liver (Hepatoma) Biliary(Cholangioca)
结直肠癌BRAF野生型—西妥昔单抗治疗获益显著
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J Clin Oncol.2008;26:57103 5-5712.
结直肠癌PI3K野生型—西妥昔单抗治疗获益显著
2021/1/12
Cancer Res.2009;69(5):181451-1857.
结直肠癌患者基因突变检测与Erbitex(爱必妥)的疗效
UGT1A1突变—伊立替康主要毒性作用显著
2005年，美国FDA要求在伊立替康药品标签上加入警示，建议 患者在使用伊立替康前先检测是否带有UGT1A1*28突变。
2021/1/12
Cancer.2008;112:193224 –1940.
TUBB3与抗微管类药物
TUBB3 微管蛋白
抗微管类
细胞分裂
1块（>30mg，米粒至黄豆大小）
《新鲜手术组织样本制备标准操作流程》
新鲜穿刺组织
2条或以上穿刺组织
《新鲜穿刺组织样本制备标准操作流程》
手术组织石蜡块 手术/穿刺样本 穿刺组织石蜡块
包埋的组织>30mg 包埋的穿刺组织两条或以上
无须处理
手术组织石蜡切片 穿刺组织石蜡切片
厚度8微米，15张白片 厚度8微米，15张白片（20G 的穿刺针）
《石蜡包埋组织切片样本制备标准操作流程》
注意事项：预染色组织或切片等样本不适用于检测
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检测方案
2021/1/12
40
谢谢观赏！
2020/11/5
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Lancet Oncol 2010;1151: 753–62
Ckit E11/E9突变的GIST患者接受伊马替尼靶向药物治疗获益显著
2021/1/12
16
HER2阳性胃癌患者接受曲妥珠单抗治疗疗效显著
HER2扩增胃癌患者接受曲妥珠单抗治疗后，中位生存期达到13.8个月， HER2高倍扩增患者甚至达到16个月。
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TUBB3低表达的胃癌接受含紫杉醇治疗获益显著
Progression-free survival curves
overall survival curves
2021/1/12
Mol Cancer Ther. 2005 Dec;4(12):200261-7.
RRM1与吉西他滨
Median Survival 24-36 months 6-9 months 12-16 months 6-9 months 6-9 months 6-9 months 6-9 months 6-9 months 6-9 months
2021/1/12
4
药物不良反应(ADR)严重
• 占据全球主要死亡原因第4-6位 • 我国因药物不良反应住院人数250万/年 • 因药物不良反应死亡人数约20万/年
美国国家癌症研究所（NCI）推荐检测的5个位点
检测位点
BAT25、BAT26、D5S346、D2S123、D17S250
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MSI-H的Ⅱ、Ⅲ期结直肠癌患者不宜进行氟尿嘧啶辅助治疗
微卫星稳定或低微卫星不稳定
高微卫星不稳定： 氟尿嘧啶辅助化疗与未辅助化疗 相比，不能改变总生存。
微卫星稳定或低微卫星不稳定： 氟尿嘧啶辅助化疗比未辅助化疗的 患者总生存更好（p=0.02）。
“假如个体之间没有如此大的不同，医学就是科学而不是艺术 ”
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个体化的挑战与策略
靶标 技术 样本
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10
个体化的挑战与策略
靶标 技术 样本
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11
结直肠癌KRAS野生型—西妥昔单抗治疗获益显著
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N Engl J Med.2008;359:175712-1765.
无效 18
TYMS与氟类药物
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TYMS
胸苷酸合成酶
5-FU
DNA合成
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TYMS低表达—接受含氟类辅助化疗获益显著
2021/1/12
J Clin Oncol .2001;19:422098-4304.
ERCC1与铂类药物
铂类药理作用的本质是破坏DNA，影响DNA复制
ERCC1参与DNA的修复与切除 ERCC1见于所有的肿瘤细胞，表达水平差异很大
PI3K体细胞突变检测 (9,20外显子突变)
C-Kit体细胞突变检测 (9外显子突变)
C-Kit体细胞突变检测 (11外显子突变)
PDGFRA体细胞突变检测 (D842V)
HER2、PTEN基因表达量检测
PI3K基因体细胞突变检测
指标 突变 野生 突变 野生 突变 野生 突变 野生 突变 野生 突变 野生 高
无效 有害
7
个体化治疗的优势
再换药
疾
病
换药
严
重
程
选药
度
确诊
适合的药物
疗效监测
确诊 + 靶标检测
时间
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传统治疗
个体化治疗
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个体化治疗的意义
Sir William Osler (1849-1919)
✓疾病的早发现，早诊断 ✓更有效进行治疗 ✓选择最佳治疗方案 ✓降低药品不良反应 ✓增加病人治疗的依从性 ✓改进药靶选择，有利于新药物发现 ✓降低临床试验中的成本、研究时间和失败率 ✓以预防为重点的转变 ✓减少整体的医疗成本
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MSI检测内容
大约15%的结直肠癌中存在MSI现象，与无MSI的结直肠癌相比，
携带有MSI的结直肠癌其预后较好，并且二者药物反应也不一样。
根据MSI表达的高低,结直肠癌可分为： 1、微卫星高度不稳定(MSI-H)：两个以上微卫星位点不稳定 2、微卫星低度不稳定(MSI-L)：一个微卫星位点不稳定 3、微卫星稳定(MSS)：无不稳定微卫星位点
伊立替康
UGT1A1 基因多态性检测
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指标 高 低 高 低 高 低 高 低 突变型 野生型
内容 疗效 疗效 疗效 疗效 疗效毒副作用
疗效 差 好 差 好 差 好 差 好 大 小
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MSI检测
微卫星是一种短的串联重复序列或简单重复序列，是一种重要的分子遗传 标记，能较好地反映物种的遗传结构和遗传多样性变化。微卫星不稳定 （Microsatallite Instability，MSI）表现为同一微卫星位点在不同个体之 间以及同一个体的正常组织与某些异常组织之间，微卫星位点的重复单位 的数目不同。
TSP Extension
PCR
EXO-SAP cleaning
Hybridization
Reading
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体细胞突变检测---同步检测70个突变位点
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基因mRNA表达水平检测方法比较
样本 石蜡组织 mRN复性（CV值）
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5
如何完善现行医学模式？
补充模式（即个性化医学模式）应运而生： 利用个人基因、蛋白和内环境信息来预防、诊断
或者治疗疾病。 --美国国家肿瘤中心
病人---分子诊断---目标药
2021/1/12
6
个体化治疗
给适合的病人、在适合的时候、使用适合治疗
有效 无害
有效 有害
无效 无害
2021/1/12
高微卫星不稳定
2021/1/12
N Engl J Med. 2003;349(33)2:247-57.
MSI-H的II期结肠癌患者可能预后比较好，但是不会从5-Fu辅助化疗中获益。
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个体化的挑战与策略
靶标 技术 样本
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体细胞突变检测液相芯片系列-组织 EGFR\KRAS\BRAF\PI3K\KIT