高效液相梯度洗脱法同时测定复方诺氟沙星滴耳液中3组分的含量分析

高效液相梯度洗脱法同时测定复方诺氟沙星滴耳液中3组分
的含量分析
摘要】目的:在高效液相梯度洗脱法建立的同时，测定复方诺氟沙星滴耳液中3
组分的含量，即甲硝唑、诺氟沙星、丙酸倍氯米松含量。

方法：采用高效液相梯
度洗脱法，色谱柱为Kromasil C18柱(4.6mmx250mm,5μm)；流动相为甲醇-已腈
0.025mol/L-1的磷酸溶液注射用水(pH3.0)；流速为0.7mL/min-1；检测波长为
241nm；柱温为室温；进样量为20μL。

结果：3组分的线性范围为：甲硝唑15.2-152.0μg/mL-1、诺氟沙星15.1-151.0μg/mL-1、丙酸倍氯米松2.5-25.0μg/mL-1；平
均回收率：甲硝唑99.60%、诺氟沙星99.49%、丙酸倍氯米松99.46%；RSD：甲硝唑0.77%、诺氟沙星0.80%、丙酸倍氯米松0.91%。

结论：高效液相梯度洗脱法测
定复方诺氟沙星滴耳液，简便快捷，准确度高，适合临床推广。

【关键词】高效液相梯度洗脱法复方诺氟沙星滴耳液诺氟沙星甲硝唑丙
酸倍氯米松
【中图分类号】R96 【文献标识码】A 【文章
编号】2095-1752（2014）18-0280-02
复方诺氟沙星滴耳液应用到临床，可有效治疗中耳炎与外耳道炎，其有效成
分主要为诺氟沙星、丙酸倍氯米松与甲硝唑。

在相关诺氟沙星滴耳液的文献报道[1]中，鲜少见到测定该制剂主要组成成分含量方法的报道。

因此，笔者采用高效
液相梯度洗脱法同时测定复方诺氟沙星滴耳液中3组分的含量来针对性的研究分析，报道如下。

1 资料与方法
1.1基本资料
仪器采用的是Ultimate3000高效液相色谱仪，HS-2060-超声仪与岛津AEU-
210的电子天平。

药品对照选用：批号为130450-200304的含量为97.8%的诺氟沙星、批号为100191-200305的甲硝唑、批号为100119-200603的丙酸倍氯米松。

另外选用批号为080726的复方诺氟沙星滴耳液，色谱纯的甲醇、三乙胺和已腈，注射用水，分析纯等。

1.2方法
1.2.1系统适用实验
条件：色谱柱为Kromasil C18柱(4.6mm×250mm,5μm)；流动相为甲醇-已腈
0.025mol/L-1的磷酸溶液注射用水(pH3.0)；流速为0.7mL/min-1；检测波长为
241nm；柱温为室温；进样量为20μL。

在甲硝唑、诺氟沙星与丙酸倍氯米松保留
时间的地方，若杂质没有被吸收，则表明实验样品中辅料和溶剂峰是不干扰主药
峰的，相互分离度皆大于1.5[2]。

表1 流动相梯度洗脱程序
1.2.2对照溶液制备
称取对照品诺氟沙星60.4mg和甲硝唑60.1mg于10mL量瓶内，然后加5mL 0.1mol/L的
盐酸溶液，采用超声将之溶解后加水，稀释至刻度处，命名为对照品的贮备液Ⅰ。

称取对照
品丙酸倍氯米松10.1mg于10mL量瓶内，然后加甲醇溶液进行稀释，至刻度处，命名为对照
品的贮备液Ⅱ。

之后，取对照品的贮备液Ⅰ和Ⅱ各5mL于同一100mL量瓶内，摇匀并稀释至刻度处，作混合对照溶液[3]。

1.2.3考察线性关系
分别取混合对照溶液0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0 mL、50mL分置于10mL的量瓶内，摇匀并稀释至刻度，得到对照品的一系列溶液。

而后分别取20μL上述的不同溶液注入到液相色谱仪内并记录色谱图。

以峰面积对浓度做线性回归。

1.2.4精密度实验
取浓度为60μg/mL的诺氟沙星对照品溶液，在连续进样6次后，测定峰面积。

1.2.5稳定性实验
取试品溶液在0h、2h、4h、6h、8h、10h时各进样20μL并测诺氟沙星、丙酸倍氯米松与甲硝唑的峰面积。

1.2.6重复性实验
取6份批号为080924的样品，按照含量测定项下的方法测定诺氟沙星、丙酸倍氯米松与甲硝唑的含量。

1.2.7样品含量测定
取样品1mL于50mL的量瓶内，稀释并摇匀，后用孔径为0.45μm的滤膜做滤过。

取
20μL注入到液相色谱仪内，并记录诺氟沙星、丙酸倍氯米松与甲硝唑的峰面积[4]。

表2 样品测定结果(%)
1.2.8回收率实验
取批号为080924的9分样品1.0mL，分别放于9个50mL量瓶内，再分别量取4mL、
5mL、6mL混合对照品的溶液，放到上述的量瓶内，稀释到刻度并摇匀，以样品含量测定的方法测定。

再分别取上述各溶液20μL，注入到液相色谱仪内，记录色谱图并计算回收率。

2 结果
3组分的线性范围为：甲硝唑15.2-152.0μg/mL-1、诺氟沙星15.1-151.0μg/mL-1、丙酸倍氯米松2.5-25.0μg/mL-1；平均回收率：甲硝唑99.60%、诺氟沙星99.49%、丙酸倍氯米松99.46%；RSD：甲硝唑0.77%、诺氟沙星0.80%、丙酸倍氯米松0.91%。

3 讨论
在流动相选择方面，笔者对比与参考文献资料[4]，经多次实验后确定选择表1的条件，所得结果表明朱峰的峰形、其峰与峰之前的分离效果是良好的。

在溶剂的选择方面，在考虑难易溶性的前提下进行选择，选择流动相组中，A与C各比例配伍中的1:1等分配伍作为稀释配伍，所得结果没有出现沉淀。

在检测波长选择上，为了减少实验误差，而将实验中检测波长确定在241nm。

总之，高效液相梯度洗脱法测定复方诺氟沙星滴耳液，简便快捷，准确度高，适合临床推广。

参考文献
[1]冀满丰.高效液相色谱-梯度洗脱法测定恩替卡韦分散片的含量和有关物质[J]. 中国药业,2012,09(13):26-27.
[2]吴德海,杨仕林. 七叶神安片中人参皂苷Rb_3含量的反相高效液相梯度洗脱法测定[J]. 时珍国医国药,2012,07(34):1818.
[3]万芳友. 高效液相色谱梯度洗脱法同时测定复方间苯二酚乳膏中两组分含量[J]. 中国药学杂志,2012,15(11):1254-1256.
[4]熊苗苗,汪秋兰,谢斌,王文清,方建国. 高效液相梯度洗脱法测定阿托伐他汀钙片有关物质[J]. 医药导报,2013,05(23):656-660.。