抗-HBs抗体阳性血清中和确认HBsAg方法的建立

文献标识码 Ｂ
文 章 编 号 １７ — ９２０ ）６ ０ ７ — ２ ６ ４ １２ （０ ８０ — ６ ７ ０ １
１１ 阴性 对 照 血 清 收 集 收 集 ２ ０ ．． ５ ０ ８年 ６ ７月 本 室 使 用 的 山 东 潍 坊 三 维 生 物 工 程 集 团有 限 公 司 ＨＢＡ ＬＳ 法 诊 断 ｓ ｇＥ ＩＡ 试 剂 剩 余 阴性 对 照 血 清 ．￣保存 ． 用 前 混 合 均 匀 ４Ｃ 使 １ ． 抗 一 ｓ 体 阳性 血 清 ｆ 称 “ ＨＢ 血 清 ”收集 ．６ １ ＨＢ 抗 下 抗一 ｓ ） 五 天 内收 集 本 实 验 室 检 测 乙 肝 病 毒 标 志 物 抗 一 ｓ 体 ＨＢ 抗 强 阳性 （ 一 Ｂ 抗 体 ＳＣ 抗 Ｈ ｓ ／ Ｏ值 大 于 ２） ０的标 本 剩 余 血 清 ． 集 收 期间 ４ ℃保 存 ； 集 结 束 将 所 有 血 清 混 合 均 匀 ， Ｅ ＩＡ 法 、 收 用 ＬＳ 化 学 发 光 法 再 次 检 测 乙肝 五 项标 志 物 ．结 果 应 为 抗 一 ｓ ＨＢ 抗
实 验 与 检 验 医学
２０ ０ ８年 １ ２月 第 ２ ６卷
第 ６期
・７ ６ ７・
・
经验交流 ・
抗一 Ｂ 抗体 阳性血 清 中和确认 Ｈ ｓ ｇ Ｈ ｓ Ｂ Ａ 方法 的建立
雷 震 谢 南 中 图分 类 号 Ｒ ４ ．２ ３ ３２２ ４ ６６ ． ７ ． Ｒ ＋
１ 材 料 与方 进 行 稀 释 后 再 确认 ｘ ０ ％＞ ０ 需
１２ 灵 敏 度 将 ２ ｎ ｌ Ｈ ｓ ｇ 比 血 清 用 阴性 对 照 ．２ ． ． ￣ｍ 的 Ｂ Ａ 参 ０ 血 清 精 确 稀 释 为 １ 、。、．、．、．ｒ／ ｌ 列 浓 度 血 清 。 ． ０９ ０８０７ ０６ｌ ｍ 系 ０ ｇ
２１ 抗一 ｓ 体 阳性 血 清 中和 法 确 认 １５份 ＨＢＡ ． ＨＢ 抗 ３ ｓ ｇ待 确
认 血 清 ， １４份 确 认 试 验 阳 性 ． １ 确 认 试 验 阴 性 确 认 有 ２ １ 份 试 验 阳性 的 １ ４份 血 清 ．其 “确 认 孔 ＳＣ ２ ｆ ／ Ｏ值 ／ 照 孔 ＳＣ 对 ／Ｏ
批 号 ２０ ０ １ 。 ０ ８ ５ ５
体 强 阳性 、 ｓ ｇ及 Ｈ ｅ ｇ阴性 ， ＨＢＡ ＢＡ 否则 本 批 血 清 弃 用 分 成
１０ｚ 的 小 份装 ，４ ℃保 存 备 用 。 ２ｔ ｌ 一０
１２ 方 法 ．
１１ ０ 、．、． ．＿ ． ２０ ５０和 ２０ ￣ｍ 的 ＨＢＡ ３ ５ ０ｎ ｌ ｓ ｇ定 值 参 比 血 清 由
０５ ￣ｍ 的 Ｈ ｓ ｇ参 比 血 清 用 阴 性 对 照 血 清 精 确 稀 释 为 ．ｎ ｌ ＢＡ
０４ ０３ ０ 、．ｎ／ ｌ 列 浓 度 血 清 ， 每 个 稀 释 度 ３份 ． ．、．、． ０１ｇｍ 系 ２ 用
ｌ ． 方 法 检 测 ０１ １ ｇｍ 共 ｌ ＿１ ２ ．～ ． ｎ ／ ｌ ０ ０个 系列 浓 度 共 ３ Ｏ份 血 清 ．
重 庆 埃夫 朗技 术 有 限责 任 公 司提 供 １１ 待 确 认 血 清 ２ ０ ．． ４ ０ ６年 ｌ 月 至 ２ ０ １ ０ ７年 ｌ ２月 间 本 实 验 室用 Ｅ ＩＡ 法 检 测 血 清 ＨＢＡ ． 检 结果 ＳＣ 值 界 于 １ ＬＳ ｓｇ初 ／Ｏ ～ ４的标 本 ； 收集 血清 － ０ ４ ℃保 存 备 检 。
１ ． 抗 一 Ｂ 抗 体 阳性 血 清 中和 法 确 认 １５份 Ｈ ｓ ｇ ．１ ２ Ｈ ｓ ３ Ｂ Ａ 待 确 认 血 清 每 份 血 清 均 设 样 本 对 照 孔 和 样 本 确 认 孑 ．按 表 １ Ｌ
方 法 操 作
表 １ 确 认 实 验 操 作 示 意 图
结 果 判 断 ：１ 照 孔 ＳＣ 值 ＞ ， ｆ 认 孔 ＳＣ 值／ ｌ 对 ／Ｏ １且 确 ／Ｏ 对 照孔 ＳＣ ／ Ｏ值 ）ｌ０ ５ ％被认 为确 认 试 验 阳性 ； １ 照 孔 Ｓ × ０ ％＜ ０ ２对 ／ Ｃ Ｏ值 、 认 孔 ＳＣ 值 均 小 于 １或 对 照 孔 ＳＣ 确 ／Ｏ ， ／ Ｏ值 ＞ ． ｆ １但 确 认 孔 ＳＣ ／Ｏ值 ／ 照 孔 ＳＣ 对 ／Ｏ值 ） １０ ５ ％ ． 被 认 为 确 认 试 ｘ ０ ％＞ ０ 均 验 阴性 。３对 照 孔 ＳＣ 值＞ ８ ｆ 认 孔 ＳＣ ） ／Ｏ １， 确 ，０值 ， 照 孑 ／ Ｏ 对 Ｌ Ｃ Ｓ
１ ． ＬＳ 法 检 测 ＨＢ Ａｇ 断 试 剂 盒 购 自山 东 潍 坊 三 ．２ １ Ｅ ＩＡ ｓ 诊 维 生 物 工 程 集 团有 限公 司 ， 号 ２ ０ ０ ０ ： 学 发 光 法 检 测 批 ０ ８５１化
Ｈ ｓ ｇ 断试 剂 盒 购 自重 庆 埃 夫 朗生 物技 术 有 限 责 任 公 司 ． ＢＡ 诊
值 ）１ ０ 值 在 １％至 ４ ％之 间 。 认 结 果 阴性 的 １ 份 血 清 × Ｏ ％” ０ ０ 确 １ 中 ，有 ５份 对 照 孔 ＳＣ ／Ｏ值 小 于 １ ．另 ６份 ＳＣ 值 分 别 为 ／Ｏ １ 、．、．、．、．、．， 其 “确 认 孔 ＳＣ 值／ 照 孔 ＳＣ ． １ ２１２３ ２５ ２ 但 ５ ６ ６ ｆ ／Ｏ 对 ／Ｏ 值 ） １０ ” 值 ， 分 别 为 ７ ．６ 、５０ ％ 、０８ ％ 、２１ ％ 、 ×Ｏ％ ８１％ ７ ． ４ ８． ２ ８． ８
１ ． 发 光 法 对 照 检 测 按 埃 夫 朗 有 限 公 司 ＨＢ Ａ ．４ ２ ｓ ｇ化 学 发 光 法 诊 断试 剂 盒 操 作 说 明 书 操 作 ：用 北 京 滨 松 ９０ ５ ４化 学 发 光 仪 进 行 化 学 发 光 分 析 １ ． ｂｏ Ｉ ．５ ２ Ａ ｂｕ ＭＥ Ａ法 对 照 检 测 试 验 送 浙 江 大 学 第 二 附 属 医院 检 测
１ 仪 器 、 剂 及 材 料 ． １ 试 １１１ ．． ＷＥ Ｌ Ｃ Ｎ Ｋ Ｌ Ｓ Ａ ３酶 标 仪 、ＨＰ ５ ４化 学 发 光 仪 、ｎ Ｂ ９０ ａ． ｔｏ ｕｄ ｈｓｆ ｉ ｌ ｏ洗 板 机 ， 别 是 芬 兰 雷 勃 公 司 、 京滨 松 光 子 技 术 分 北 股 份 有 限 公 司 和 郑 州 安 图 生 物 工 程公 司 产 品