新培优高中生物选修一课件专题课题DNA的粗提取与鉴定
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DNA的鉴定技术
04
紫外分光光度法
原理
DNA分子在260nm处有最大吸收峰 ,通过测定DNA溶液的紫外吸收值, 可以计算出DNA的浓度。
优缺点
操作简便、快速,但易受其他物质的 干扰,如蛋白质、酚类等。
操作步骤
制备DNA溶液 → 紫外分光光度计调 零 → 测定DNA溶液的吸光度 → 计算 DNA浓度。
变性后的DNA单链在适当的条件下可以重新形成双螺旋结构,称为复性。
DNA的粗提取方法
03
破碎细胞释放DNA
机械法
通过研磨、搅拌等方法使细胞破 裂,释放DNA。
酶解法
使用溶菌酶等酶类破坏细胞壁,使 DNA释放出来。
化学法
利用化学试剂(如SDS)破坏细胞 膜和核膜,使DNA暴露出来。
去除蛋白质等杂质
注意安全等。
拓展知识点介绍
1 2 3
DNA的分子结构和功能
介绍DNA的双螺旋结构、碱基互补配对原则以及 DNA作为遗传物质的功能等。
DNA的变性、复性和杂交技术
介绍DNA在高温、极端pH等条件下的变性作用 ,以及通过调整条件实现DNA的复性和杂交技术 。
PCR技术的基本原理和应用
介绍聚合酶链式反应(PCR)的基本原理、实验 步骤以及在分子生物学领域中的广泛应用。
提取DNA
用玻璃棒将絮状DNA挑出,放入 新的试管中,加入DNA提取液进 行纯化。
安全防护与废弃物处理
安全防护
实验过程中需穿戴实验服、手套等防护用品,避免直接接触 试剂和生物材料。同时,注意保持实验室通风良好,避免吸 入有害气体。
废弃物处理
实验结束后,需对废弃物进行分类处理。对于生物废弃物, 需进行高压蒸汽灭菌或化学消毒处理;对于化学废弃物,需 按照相关规定进行收集、储存和处理,避免对环境和人体健 康造成危害。
荧光染料法
原理
荧光染料能与DNA分子 特异性结合,结合后荧 光强度增强,通过测定 荧光强度可以间接测定 DNA的浓度。
操作步骤
制备DNA溶液 → 加入 荧光染料 → 测定荧光 强度 → 计算DNA浓度 。
优缺点
灵敏度高、选择性好, 但染料价格较贵,且可 能受到背景荧光的干扰 。
凝胶电泳法
原理
DNA分子在电场作用下,会向电极方向移动,不同大小的 DNA分子移动速度不同,通过凝胶电泳可以将它们分离出 来,并通过染色或荧光显色等方法进行检测。
DNA的基本性质与
02
结构
DNA的化学组成
脱氧核糖核酸(DNA)由脱氧 核糖、磷酸和含氮碱基组成。
含氮碱基包括腺嘌呤(A)、 鸟嘌呤(G)、胸腺嘧啶(T) 和胞嘧啶(C)。
DNA分子中,脱氧核糖和磷酸 交替排列,构成基本骨架,碱 基排列在内侧。
DNA的双螺旋结构
DNA分子呈双螺旋结构,由两 条反向平行的脱氧核苷酸链组成
精神。
教学要求
学生应认真听讲、积极 思考、勤于实践,按时 完成实验报告和作业。
课程内容及安排
课程内容
本课程将介绍DNA的粗提取与鉴定的基本原理、实验方法和操作步骤。包括实验 材料的准备、DNA的提取与纯化、DNA的鉴定与分析等环节。
课程安排
本课程将按照“理论讲解-实验操作-结果分析”的流程进行。首先由教师进行理 论讲解和示范操作,然后学生分组进行实验操作,最后对实验结果进行分析和讨 论。具体安排将根据教学进度和学生实际情况进行调整。
。
两条链之间的碱基通过氢键形成 碱基对,且遵循碱基互补配对原
则(A-T、G-C)。
双螺旋结构具有稳定性和多样性 ,是遗传信息的携带者。
DNA的稳定性与变性
DNA分子具有相对的稳定性,能够在一定的温度、pH和离子强度下保持其双螺旋结 构。
在高温、极端pH或高离子强度等条件下,DNA双链之间的氢键会断裂,导致DNA 变性。
实验结果分析与讨
06
论
实验数据记录与处理
数据记录
详细记录实验过程中每一步骤的数据,包括DNA提取量、纯度等。
数据处理
对实验数据进行整理、计算和分析,得出DNA提取效率、纯度等关键指标。
结果分析与解释
提取效率分析
根据实验数据,分析不同提取方法、 试剂浓度等因素对DNA提取效率的影 响。
纯度鉴定结果
意义
通过本课程的学习,学生将了解DNA 的基本性质、提取原理及方法,掌握 DNA鉴定的基本技术,为后续的生物 学实验和研究打下基础。
教学目标与要求
知识目标
掌握DNA的粗提取与鉴 定的基本原理和方法, 了解实分析能力和实验
设计能力。
情感目标
激发学生对生物科学的 兴趣和热爱,培养严谨 的科学态度和团队合作
DNA的沉淀与纯化
乙醇沉淀法
向含有DNA的溶液中加入乙醇, 使DNA形成沉淀析出。然后通过 离心等方法收集沉淀,再用乙醇
洗涤沉淀以去除杂质。
离子交换层析法
利用离子交换剂与DNA之间的静 电作用,将DNA吸附在离子交换 剂上,然后用不同浓度的盐溶液
洗脱,收集目标DNA片段。
凝胶电泳法
将含有DNA的溶液进行凝胶电泳 ,使不同大小的DNA片段在电场 作用下分离。然后通过染色等方 法观察并切下目标DNA片段进行
新培优高中生物选修一 课件专题课题DNA的粗 提取与鉴定
汇报人:XX 20XX-02-05
目 录
• 引言 • DNA的基本性质与结构 • DNA的粗提取方法 • DNA的鉴定技术 • 实验操作与注意事项 • 实验结果分析与讨论 • 课堂小结与拓展延伸
引言
01
课题背景及意义
背景
DNA是生命的基础分子,在生物体 内发挥着至关重要的作用。掌握 DNA的提取与鉴定技术,对于生物 学研究及实际应用具有重要意义。
洗涤剂、氯化钠溶液、酒精、冷 却的95%乙醇、DNA提取液等。
操作步骤及要点
溶解DNA
加入氯化钠溶液,使DNA溶解。
去除杂质
通过过滤、离心等方法去除溶液 中的蛋白质、脂质等杂质。
析出DNA
加入冷却的95%乙醇,使DNA析 出并缠绕成絮状。
破碎细胞
将含有DNA的生物材料(如鸡血 细胞)放入洗涤剂中,用玻璃棒 搅拌使细胞破裂,释放出DNA。
操作步骤
制备DNA样品 → 制备凝胶 → 加样电泳 → 染色或荧光显 色 → 观察结果。
优缺点
分辨率高、可同时检测多个样品,但操作较繁琐、时间较 长,且需要一定的实验技能和经验。
实验操作与注意事
05
项
实验器材与试剂准备
实验器材
微量移液器、离心管、水浴锅、 玻璃棒、烧杯、漏斗、滤纸、试 管等。
试剂准备
通过凝胶电泳、紫外分光光度计等方 法对提取的DNA进行纯度鉴定,分析 可能存在的杂质成分。
实验误差来源及改进措施
误差来源
实验操作不规范、试剂质量不稳定、仪器误差等都可能导致实验结果出现误差。
改进措施
提高实验操作技能、使用高质量试剂和校准仪器、增加重复实验次数等,以提高实验结果的准确性和可靠性。
课堂小结与拓展延
07
伸
重点内容回顾
01
DNA的粗提取原理和方法
利用DNA在不同浓度的氯化钠溶液中溶解度不同的特性,通过溶解、
过滤、析出等步骤提取DNA。
02
DNA鉴定的原理和方法
利用二苯胺试剂与DNA反应产生蓝色的特性,通过沸水浴加热、观察
颜色变化等方法鉴定DNA。
03
实验操作注意事项
如使用玻璃棒搅拌时避免用力过猛导致DNA断裂,使用酒精灯加热时
利用蛋白酶分解蛋白质
在提取液中加入蛋白酶,将蛋白质分解成小分子肽和氨基酸,然后通过离心等方法去除。
利用DNA与蛋白质在不同溶剂中的溶解度不同
通过加入不同溶剂,使DNA和蛋白质分别溶解在不同相中,从而实现分离。
利用盐析法去除蛋白质
在高盐浓度下,蛋白质会从水相中析出,而DNA仍留在水相中,从而实现分离。
思考题与作业布置
思考题
为什么在不同浓度的氯化钠溶液中,DNA的溶解度会发生变化?如何通过实验验证这 一原理?
作业布置
完成实验报告,包括实验目的、原理、步骤、结果和结论等部分。同时,鼓励学生进一 步探究DNA提取和鉴定过程中的影响因素,如温度、pH值、试剂浓度等,以提高实验
效果。
THANKS.
DNA的鉴定技术
04
紫外分光光度法
原理
DNA分子在260nm处有最大吸收峰 ,通过测定DNA溶液的紫外吸收值, 可以计算出DNA的浓度。
优缺点
操作简便、快速,但易受其他物质的 干扰,如蛋白质、酚类等。
操作步骤
制备DNA溶液 → 紫外分光光度计调 零 → 测定DNA溶液的吸光度 → 计算 DNA浓度。
变性后的DNA单链在适当的条件下可以重新形成双螺旋结构,称为复性。
DNA的粗提取方法
03
破碎细胞释放DNA
机械法
通过研磨、搅拌等方法使细胞破 裂,释放DNA。
酶解法
使用溶菌酶等酶类破坏细胞壁,使 DNA释放出来。
化学法
利用化学试剂(如SDS)破坏细胞 膜和核膜,使DNA暴露出来。
去除蛋白质等杂质
注意安全等。
拓展知识点介绍
1 2 3
DNA的分子结构和功能
介绍DNA的双螺旋结构、碱基互补配对原则以及 DNA作为遗传物质的功能等。
DNA的变性、复性和杂交技术
介绍DNA在高温、极端pH等条件下的变性作用 ,以及通过调整条件实现DNA的复性和杂交技术 。
PCR技术的基本原理和应用
介绍聚合酶链式反应(PCR)的基本原理、实验 步骤以及在分子生物学领域中的广泛应用。
提取DNA
用玻璃棒将絮状DNA挑出,放入 新的试管中,加入DNA提取液进 行纯化。
安全防护与废弃物处理
安全防护
实验过程中需穿戴实验服、手套等防护用品,避免直接接触 试剂和生物材料。同时,注意保持实验室通风良好,避免吸 入有害气体。
废弃物处理
实验结束后,需对废弃物进行分类处理。对于生物废弃物, 需进行高压蒸汽灭菌或化学消毒处理;对于化学废弃物,需 按照相关规定进行收集、储存和处理,避免对环境和人体健 康造成危害。
荧光染料法
原理
荧光染料能与DNA分子 特异性结合,结合后荧 光强度增强,通过测定 荧光强度可以间接测定 DNA的浓度。
操作步骤
制备DNA溶液 → 加入 荧光染料 → 测定荧光 强度 → 计算DNA浓度 。
优缺点
灵敏度高、选择性好, 但染料价格较贵,且可 能受到背景荧光的干扰 。
凝胶电泳法
原理
DNA分子在电场作用下,会向电极方向移动,不同大小的 DNA分子移动速度不同,通过凝胶电泳可以将它们分离出 来,并通过染色或荧光显色等方法进行检测。
DNA的基本性质与
02
结构
DNA的化学组成
脱氧核糖核酸(DNA)由脱氧 核糖、磷酸和含氮碱基组成。
含氮碱基包括腺嘌呤(A)、 鸟嘌呤(G)、胸腺嘧啶(T) 和胞嘧啶(C)。
DNA分子中,脱氧核糖和磷酸 交替排列,构成基本骨架,碱 基排列在内侧。
DNA的双螺旋结构
DNA分子呈双螺旋结构,由两 条反向平行的脱氧核苷酸链组成
精神。
教学要求
学生应认真听讲、积极 思考、勤于实践,按时 完成实验报告和作业。
课程内容及安排
课程内容
本课程将介绍DNA的粗提取与鉴定的基本原理、实验方法和操作步骤。包括实验 材料的准备、DNA的提取与纯化、DNA的鉴定与分析等环节。
课程安排
本课程将按照“理论讲解-实验操作-结果分析”的流程进行。首先由教师进行理 论讲解和示范操作,然后学生分组进行实验操作,最后对实验结果进行分析和讨 论。具体安排将根据教学进度和学生实际情况进行调整。
。
两条链之间的碱基通过氢键形成 碱基对,且遵循碱基互补配对原
则(A-T、G-C)。
双螺旋结构具有稳定性和多样性 ,是遗传信息的携带者。
DNA的稳定性与变性
DNA分子具有相对的稳定性,能够在一定的温度、pH和离子强度下保持其双螺旋结 构。
在高温、极端pH或高离子强度等条件下,DNA双链之间的氢键会断裂,导致DNA 变性。
实验结果分析与讨
06
论
实验数据记录与处理
数据记录
详细记录实验过程中每一步骤的数据,包括DNA提取量、纯度等。
数据处理
对实验数据进行整理、计算和分析,得出DNA提取效率、纯度等关键指标。
结果分析与解释
提取效率分析
根据实验数据,分析不同提取方法、 试剂浓度等因素对DNA提取效率的影 响。
纯度鉴定结果
意义
通过本课程的学习,学生将了解DNA 的基本性质、提取原理及方法,掌握 DNA鉴定的基本技术,为后续的生物 学实验和研究打下基础。
教学目标与要求
知识目标
掌握DNA的粗提取与鉴 定的基本原理和方法, 了解实分析能力和实验
设计能力。
情感目标
激发学生对生物科学的 兴趣和热爱,培养严谨 的科学态度和团队合作
DNA的沉淀与纯化
乙醇沉淀法
向含有DNA的溶液中加入乙醇, 使DNA形成沉淀析出。然后通过 离心等方法收集沉淀,再用乙醇
洗涤沉淀以去除杂质。
离子交换层析法
利用离子交换剂与DNA之间的静 电作用,将DNA吸附在离子交换 剂上,然后用不同浓度的盐溶液
洗脱,收集目标DNA片段。
凝胶电泳法
将含有DNA的溶液进行凝胶电泳 ,使不同大小的DNA片段在电场 作用下分离。然后通过染色等方 法观察并切下目标DNA片段进行
新培优高中生物选修一 课件专题课题DNA的粗 提取与鉴定
汇报人:XX 20XX-02-05
目 录
• 引言 • DNA的基本性质与结构 • DNA的粗提取方法 • DNA的鉴定技术 • 实验操作与注意事项 • 实验结果分析与讨论 • 课堂小结与拓展延伸
引言
01
课题背景及意义
背景
DNA是生命的基础分子,在生物体 内发挥着至关重要的作用。掌握 DNA的提取与鉴定技术,对于生物 学研究及实际应用具有重要意义。
洗涤剂、氯化钠溶液、酒精、冷 却的95%乙醇、DNA提取液等。
操作步骤及要点
溶解DNA
加入氯化钠溶液,使DNA溶解。
去除杂质
通过过滤、离心等方法去除溶液 中的蛋白质、脂质等杂质。
析出DNA
加入冷却的95%乙醇,使DNA析 出并缠绕成絮状。
破碎细胞
将含有DNA的生物材料(如鸡血 细胞)放入洗涤剂中,用玻璃棒 搅拌使细胞破裂,释放出DNA。
操作步骤
制备DNA样品 → 制备凝胶 → 加样电泳 → 染色或荧光显 色 → 观察结果。
优缺点
分辨率高、可同时检测多个样品,但操作较繁琐、时间较 长,且需要一定的实验技能和经验。
实验操作与注意事
05
项
实验器材与试剂准备
实验器材
微量移液器、离心管、水浴锅、 玻璃棒、烧杯、漏斗、滤纸、试 管等。
试剂准备
通过凝胶电泳、紫外分光光度计等方 法对提取的DNA进行纯度鉴定,分析 可能存在的杂质成分。
实验误差来源及改进措施
误差来源
实验操作不规范、试剂质量不稳定、仪器误差等都可能导致实验结果出现误差。
改进措施
提高实验操作技能、使用高质量试剂和校准仪器、增加重复实验次数等,以提高实验结果的准确性和可靠性。
课堂小结与拓展延
07
伸
重点内容回顾
01
DNA的粗提取原理和方法
利用DNA在不同浓度的氯化钠溶液中溶解度不同的特性,通过溶解、
过滤、析出等步骤提取DNA。
02
DNA鉴定的原理和方法
利用二苯胺试剂与DNA反应产生蓝色的特性,通过沸水浴加热、观察
颜色变化等方法鉴定DNA。
03
实验操作注意事项
如使用玻璃棒搅拌时避免用力过猛导致DNA断裂,使用酒精灯加热时
利用蛋白酶分解蛋白质
在提取液中加入蛋白酶,将蛋白质分解成小分子肽和氨基酸,然后通过离心等方法去除。
利用DNA与蛋白质在不同溶剂中的溶解度不同
通过加入不同溶剂,使DNA和蛋白质分别溶解在不同相中,从而实现分离。
利用盐析法去除蛋白质
在高盐浓度下,蛋白质会从水相中析出,而DNA仍留在水相中,从而实现分离。
思考题与作业布置
思考题
为什么在不同浓度的氯化钠溶液中,DNA的溶解度会发生变化?如何通过实验验证这 一原理?
作业布置
完成实验报告,包括实验目的、原理、步骤、结果和结论等部分。同时,鼓励学生进一 步探究DNA提取和鉴定过程中的影响因素,如温度、pH值、试剂浓度等,以提高实验
效果。
THANKS.