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组织胚胎学第一章绪论 ppt课件
组织学与胚胎学
( histology and embryology )
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1
第一章：组织学绪论
内容提要
• 组织学的定义和研究 内容
• 石蜡切片、HE染色
• 组织化学和免疫组织 化学
• 细胞培养与组织工程
• 组织和器官
• 光学显微镜术和电子显 微镜术
• 原位杂交 • 组织学的学习方法
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41
组织学的学习方法
• 建立立体与动态的概念 • 注意结构与功能的联系 • 重视理论与实践的结合 • 勤奋加技巧，学习效果好
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42
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43
ppt课件
37
原位杂交示脐静脉内皮细胞呈心房钠尿肽阳性
ppt课件
38
细胞培养技术
• 是将离体细胞或组织放置在适当的环境条 件下进行培养的一种技术方法，可用以检 测各种理化因子、细胞因子等对细胞增殖、 分化、代谢、运动、吞噬、分泌等生命活 动和细胞行为的影响，还可用细胞培养技 术研究细胞癌变、逆转的机制。
19
普通光学显微镜术
ppt课件
20
ppt课件
21
ppt课件
22
激光共聚焦扫描显微镜图像
ppt课件
23
CLSM显示上皮细胞
ppt课件
24
ppt课件
25
透射电镜术
Transmission electron microscopy，TEM
• 是用电子束穿透标本，经过电磁场的会聚、 放大后，在荧光屏上显像，或将影像投射 到照相底片。
• 器官：由四大基本组织按着一定的规律组成的、 具有一定形态结构和生理功能的结构，称为器官。 人体内有若干器官，如胃、心、肺、肾、肝、脾 等。
( histology and embryology )
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1
第一章：组织学绪论
内容提要
• 组织学的定义和研究 内容
• 石蜡切片、HE染色
• 组织化学和免疫组织 化学
• 细胞培养与组织工程
• 组织和器官
• 光学显微镜术和电子显 微镜术
• 原位杂交 • 组织学的学习方法
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41
组织学的学习方法
• 建立立体与动态的概念 • 注意结构与功能的联系 • 重视理论与实践的结合 • 勤奋加技巧，学习效果好
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42
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43
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37
原位杂交示脐静脉内皮细胞呈心房钠尿肽阳性
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38
细胞培养技术
• 是将离体细胞或组织放置在适当的环境条 件下进行培养的一种技术方法，可用以检 测各种理化因子、细胞因子等对细胞增殖、 分化、代谢、运动、吞噬、分泌等生命活 动和细胞行为的影响，还可用细胞培养技 术研究细胞癌变、逆转的机制。
19
普通光学显微镜术
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22
激光共聚焦扫描显微镜图像
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23
CLSM显示上皮细胞
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24
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透射电镜术
Transmission electron microscopy，TEM
• 是用电子束穿透标本，经过电磁场的会聚、 放大后，在荧光屏上显像，或将影像投射 到照相底片。
• 器官：由四大基本组织按着一定的规律组成的、 具有一定形态结构和生理功能的结构，称为器官。 人体内有若干器官，如胃、心、肺、肾、肝、脾 等。
组织学与胚胎学(绪论)
模式图和真实的标本彩图。学习时注意将文字描 述与插图对照阅读，加深理解和记忆。如肝小叶 的微细结构及其相互关系图。
4. 理论联系实际，重视标本观察 理论来源于实践，科学的理论能指导实践。
组织学的实验，是在理论的指导下，借助显微镜 观察切片标本。学习正常的组织结构是为进一步 学习病理组织改变打基础的，要认真观察各种微 细结构及其比邻关系。
⑶ 涂片：将游离的细胞直接涂在玻片上染色，
如血液涂片。
⑷ 铺片：将疏松结缔组织、肠系膜等撕成薄
片，铺在载玻片上。
⑸ 磨片：将骨、牙等硬组织切割成片后再磨成
薄片。
3. 其它常用特殊染色法
⑴ 镀银染色：如将神经组织切片标本浸泡在硝酸银 溶液中，可将神经元染成棕黑色或棕黄色。
若将网状组织切片标本浸泡在氢氧胺银溶液中， 再经5%甲醛液还原，能将网状纤维染成黑色，胶原纤 维呈褐色。
（hematoxylin –eosin staining）,简称H-E染色法。
苏木精为碱性染料，它的盐溶液带阳电荷， 能将细胞核内的染色质和胞质中的核糖体染成紫 兰色。伊红为酸性染料，它的盐溶液带阴电荷， 能使细胞质和细胞外基质的成分染成红色。
※何谓嗜碱性和嗜酸性？ 组织中的某些结构，易于被碱性染料着色的性
图10 免疫组织化学原理模式图
⑶呈色情况与
观察： ① 常用的荧
光素是异硫氰酸荧 光素发出黄绿色荧 光，四甲基异硫 氰酸罗丹明发出橙 红色荧光。 (见图1—4)
② 辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase， HRP）,它的底物是3，3′-二氨基联苯胺（DAB） 和H2O2。HRP能使DAB氧化形成棕黄色产物。
图：原位杂交(地高辛标记) 大鼠主动脉平滑肌细胞表达弹性蛋白mRNA，胞质呈综黄色。
4. 理论联系实际，重视标本观察 理论来源于实践，科学的理论能指导实践。
组织学的实验，是在理论的指导下，借助显微镜 观察切片标本。学习正常的组织结构是为进一步 学习病理组织改变打基础的，要认真观察各种微 细结构及其比邻关系。
⑶ 涂片：将游离的细胞直接涂在玻片上染色，
如血液涂片。
⑷ 铺片：将疏松结缔组织、肠系膜等撕成薄
片，铺在载玻片上。
⑸ 磨片：将骨、牙等硬组织切割成片后再磨成
薄片。
3. 其它常用特殊染色法
⑴ 镀银染色：如将神经组织切片标本浸泡在硝酸银 溶液中，可将神经元染成棕黑色或棕黄色。
若将网状组织切片标本浸泡在氢氧胺银溶液中， 再经5%甲醛液还原，能将网状纤维染成黑色，胶原纤 维呈褐色。
（hematoxylin –eosin staining）,简称H-E染色法。
苏木精为碱性染料，它的盐溶液带阳电荷， 能将细胞核内的染色质和胞质中的核糖体染成紫 兰色。伊红为酸性染料，它的盐溶液带阴电荷， 能使细胞质和细胞外基质的成分染成红色。
※何谓嗜碱性和嗜酸性？ 组织中的某些结构，易于被碱性染料着色的性
图10 免疫组织化学原理模式图
⑶呈色情况与
观察： ① 常用的荧
光素是异硫氰酸荧 光素发出黄绿色荧 光，四甲基异硫 氰酸罗丹明发出橙 红色荧光。 (见图1—4)
② 辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase， HRP）,它的底物是3，3′-二氨基联苯胺（DAB） 和H2O2。HRP能使DAB氧化形成棕黄色产物。
图：原位杂交(地高辛标记) 大鼠主动脉平滑肌细胞表达弹性蛋白mRNA，胞质呈综黄色。
组织学绪论
甲基绿－派若宁反应同时显示DNA与RNA
甲基绿-派若宁反应
三、组织学的学习方法 1.理论联系实际 2.结构与功能的关系断面与立体的关系 4、建立动态变化的概念 5、善于总结，掌握规律
其他的组织学研究技术作为自学内容
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组织学与胚胎学 精品课程
苏木精：为碱性染料
使细胞核和胞质内的核糖体着紫蓝色，称嗜碱性
伊红：为酸性染料
使多数细胞的细胞质着粉红色，称嗜酸性。
名词解释
嗜碱性：易被碱性染料着色的性质称嗜碱性。 嗜酸性：易被酸性染料着色的性质称嗜酸性。 中 性：与碱性或酸性染料亲和力都不强称中性
嗜碱性 嗜酸性
名词解释
嗜铬性：细胞经重铬酸盐处理后呈棕褐色，称嗜铬性
PAS阳性
原理： 多糖
PA 氧化
醛
Schiff
试剂
紫红色沉淀
酶类：
将具有酶活性的组织放入特定底物的溶液中孵育，
底物被酶水解或氧化为初级反应产物，再用捕捉 剂捕获该产物，形成镜下可见的有色沉淀物。
神经元ACP酶阳性
脂类：
苏丹Ⅲ染色，呈红色
锇酸固定染色，呈黑色
苏丹Ⅲ染色
锇酸固定染色
核酸： 福尔根反应显示DNA
组织(tissue): 由细胞和细胞外基质构成， 是构成器官的基本成分。 细胞外基质:包括纤维、基质和体液。
细胞
组织
纤维 细胞间质
基质
组织的类型(四种）
上皮组织 结缔组织 肌组织 神经组织
组织按一定方式组合构成器官。
若干功能相关的器官构成系统。
中空性器官 器官
实质性器官
中空性器官：管壁结构是分层的，学习时由 内向外分出管壁各层的结构。
01组织学绪论PPT课件
7.细胞培养术（cell culture） • 把从机体取得的细胞在体外模拟体内的条件 下进行培养；培养组织块或器官则称组织培 养术或器官培养术。 • 用于研究细胞、组织的代谢、增殖、分化、 形态和功能变化，各种理化因子对活细胞的 影响。 • 培养条件：营养、生长因子、pH值、渗透压 O2和CO2浓度、温度，控制污染。 • 用相差显微镜观察。
扫描电镜图，血细胞
3.组织化学和细胞化学术
组织化学(histochemistry)和细胞化学 (cytochemistry)术是用化学或物理反应原理 显示组织或细胞内某种化学成分，并对其 进行定位、定量及其相关功能的研究。将 该技术应用于游离细胞的样品，则称细胞 化学术。
组织化学术: 组织中的某种结构成分与所加试剂发生化 学反应、并呈现某种颜色,在显微镜下可观察到
体外培养的平滑肌细胞 （免疫组织化学染色显示肌动蛋白）
8. 组织工程（tissue engineering） 将组织学和材料学相结合，利用组织细胞
培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技 术。
正在构建的有皮肤、软骨、骨、肌腱、骨 骼肌、血管、角膜等；其中以组织工程皮肤 较为成功，已成为商品用于治疗烧伤、皮肤 静脉性溃疡等疾病。
1）普通光学显微镜切片标本的制备方法
• 石蜡切片术(paraffin section): 取材、 固定、脱水、包埋、切片、脱蜡和 染色、封片。
苏木精-伊红染色法 (hematoxylin-eosin staining, HE染色法)：
嗜碱性(basophilia):苏木精为碱性染料,可使 细胞核内的染色质和胞质内的核糖体等结 构染成紫蓝色, 易被碱性染料着色的性质称 为嗜碱性。 嗜酸性(acidophilia):伊红为酸性染料,使细胞 质和细胞外基质中的成分染成粉红色,易被 酸性染料着色的性质称为嗜酸性。 中性
01组织学绪论
当代组 织学
→1801 年比沙提出“组织”概念
研究内容 发展简史 学习方法 技术简介
光学显
微镜 • 提出：施万、施莱登（1838、1839）
细胞学说
• 内容：细胞是一切动、植物体的基本
电子显 微镜
结构和功能单位；细胞内进行着复杂
当代组 织学
的化学反应；新细胞由原有细胞产生
研究内容 发展简史 学习方法 技术简介
• 形态和结构相统一 结构是功能的基础，功能是结构的必然表现
• 培养观察能力：重视实习课和图像观察 培养空间思维能力：将二维图形还原为三维 构像
研究内容 发展简史 学习方法 技术简介
• 石蜡切片术（paraffin sectioning）：取材、
光镜技术 固定、脱水、包埋、切片（5 ～ 10 µ m
电镜技术 厚）、染色
组织化学 • 苏木精- 伊红染色法（hematoxylin-eosin
放射自显 staining， HE染色法）：苏木精为碱性染
影术
料，使染色质和核糖体着紫蓝色；伊红
图像分析
细胞培养 组织工程
为酸性染料，使胞质和细胞外基质着红
色
图4
嗜酸性（acidophilia);嗜碱性(basophilia)
组织化学 • 糖类： PAS（过碘酸希夫）反应，显示
放射自显 影术
图像分析
多糖和糖蛋白，呈紫红色
糖
多醛
过碘酸
紫红色反应产物
细胞培养 品红硫酸复合物
图9
组织工程 （希夫试剂，无色）
研究内容 发展简史 学习方法 技术简介
免疫组织化学（immunohistochemistry）
光镜技术
电镜技术 • 根据抗原、抗体特异性结合原理，检 组织化学 测组织切片中的肽和蛋白质
第1章：组织学绪论PPT教案
第7页/共35页
二、组织学发展简史和当代组织学
当代组织学： 20世纪后期，新仪器、新技术的发明和应用； 免疫组织化学技术、原位杂交技术将组织学 引入分子水平；组织工程学技术拓展了组织 学的临床应用前景。
第8页/共35页
三、组织学的学习方法
审视角度 平面与立体 形态与功能
第9页/共35页
审视角度
染色方 法
HE染色
苏木精
光镜技术
伊红
嗜碱性结构： 细胞核 粗面内质网 游离核糖体等
第17页/共35页
嗜酸性结构：
细胞质基质 溶酶体、线粒体 等细胞器 胶原纤维等
第18页/共35页
染色方 法
光镜技术
（2）、特殊染色
HE染色法以外的所有染色法，通常是为 了显示某些用HE染色法显示不出的细胞 和结构。如：
第6页/共35页
二、组织学发展简史和当代组织学
1838年德国植物学家Schladen(施来登)、 1839年动物学家Schwann（施万）分别发现 植物和动物都是由细胞组成的，细胞是植物和 动物的结构、功能和发生的基本单位。创立了 “细胞学说”。 19世纪后叶是组织学和细胞学发展的黄金时代 ，放大倍数较高的显微镜，切片机和各种染料 的应用。已能较为正确地描述细胞结构，使组 织学发展为一门独立而系统的学科。
四、组织学技术简介
电镜技术
（二）电镜技术
发明：1932 年德国学者卢斯卡和科诺尔
⒈ 透射电镜术 (transmission electron microscope ,TEM)
电子束穿透样品(超薄切片)。放大倍数为几万至 几十万倍，分辨率可达0.2nm。标本在荧光屏 上呈黑白反差的结构影像。被重金属浸染呈黑 色的结构，称高电子密度 (electron-dense)； 反 之 ， 浅 染 的 部 分 称 低 电 子 密 度 (electronlucent)。
二、组织学发展简史和当代组织学
当代组织学： 20世纪后期，新仪器、新技术的发明和应用； 免疫组织化学技术、原位杂交技术将组织学 引入分子水平；组织工程学技术拓展了组织 学的临床应用前景。
第8页/共35页
三、组织学的学习方法
审视角度 平面与立体 形态与功能
第9页/共35页
审视角度
染色方 法
HE染色
苏木精
光镜技术
伊红
嗜碱性结构： 细胞核 粗面内质网 游离核糖体等
第17页/共35页
嗜酸性结构：
细胞质基质 溶酶体、线粒体 等细胞器 胶原纤维等
第18页/共35页
染色方 法
光镜技术
（2）、特殊染色
HE染色法以外的所有染色法，通常是为 了显示某些用HE染色法显示不出的细胞 和结构。如：
第6页/共35页
二、组织学发展简史和当代组织学
1838年德国植物学家Schladen(施来登)、 1839年动物学家Schwann（施万）分别发现 植物和动物都是由细胞组成的，细胞是植物和 动物的结构、功能和发生的基本单位。创立了 “细胞学说”。 19世纪后叶是组织学和细胞学发展的黄金时代 ，放大倍数较高的显微镜，切片机和各种染料 的应用。已能较为正确地描述细胞结构，使组 织学发展为一门独立而系统的学科。
四、组织学技术简介
电镜技术
（二）电镜技术
发明：1932 年德国学者卢斯卡和科诺尔
⒈ 透射电镜术 (transmission electron microscope ,TEM)
电子束穿透样品(超薄切片)。放大倍数为几万至 几十万倍，分辨率可达0.2nm。标本在荧光屏 上呈黑白反差的结构影像。被重金属浸染呈黑 色的结构，称高电子密度 (electron-dense)； 反 之 ， 浅 染 的 部 分 称 低 电 子 密 度 (electronlucent)。
组织学与胚胎学 组织学绪论
“细胞学说”
? 人体细胞约 1×1015 细胞，200余种
? 1801年, Bichat (法国人)----组织（Tissue） Histology ：希腊文
组织：功能相关的细胞群和细胞外基质。 细胞— 组织— 器官
? 人体基本组织 —上皮组织、结缔组织、肌组织及 神经组织
二、组织学主要研究方法
（一）常用光镜标本制作技术 1.切片标本的制备 ２．涂片、铺片与磨片标本的制备
组织学与胚胎学 Histology and Embryology
周莉 教授
第一章 组 织 学 绪 论
Introduction of Histology
组织学研究内容
组织学在医学中的地位
人体各部结构 （解剖和组织）
人体各结构功能 （生理与生化）
疾病时各结构 的变化 （病理 学）
疾病时各结构 功能的变化 （病理生理学）
荧光素（常用异硫氰酸）标记抗体 辣根过氧化物酶标记抗体 ? 直接法和间接法
免疫组织化学方法
免疫组织化学（Sp法）
荧光免疫细胞化学技术
（五）细胞培养术（cell cultur。 ? 无菌条件下将从机体取得的细胞模拟体内各种
条件培养，可在倒置相差显微镜下观察和记录 细胞的生活状态。 特点：可排除体内复杂的影响因素，观察单一因素 对细胞形态和功能的影响，获得从体内实验难 以达到的实验结果。
诊断学 内科学
外科学
妇产科学 儿科学
眼科学
组织学发展简史
解剖学：肉眼 -分辨率：0.1mm
意大利文艺复兴 —达·芬奇，维萨利
? 1665 年, Robert Hook ( 英国人)-Cell ? 100年之久，石蜡切片术 — 微米（μm）0.2μm
? 人体细胞约 1×1015 细胞，200余种
? 1801年, Bichat (法国人)----组织（Tissue） Histology ：希腊文
组织：功能相关的细胞群和细胞外基质。 细胞— 组织— 器官
? 人体基本组织 —上皮组织、结缔组织、肌组织及 神经组织
二、组织学主要研究方法
（一）常用光镜标本制作技术 1.切片标本的制备 ２．涂片、铺片与磨片标本的制备
组织学与胚胎学 Histology and Embryology
周莉 教授
第一章 组 织 学 绪 论
Introduction of Histology
组织学研究内容
组织学在医学中的地位
人体各部结构 （解剖和组织）
人体各结构功能 （生理与生化）
疾病时各结构 的变化 （病理 学）
疾病时各结构 功能的变化 （病理生理学）
荧光素（常用异硫氰酸）标记抗体 辣根过氧化物酶标记抗体 ? 直接法和间接法
免疫组织化学方法
免疫组织化学（Sp法）
荧光免疫细胞化学技术
（五）细胞培养术（cell cultur。 ? 无菌条件下将从机体取得的细胞模拟体内各种
条件培养，可在倒置相差显微镜下观察和记录 细胞的生活状态。 特点：可排除体内复杂的影响因素，观察单一因素 对细胞形态和功能的影响，获得从体内实验难 以达到的实验结果。
诊断学 内科学
外科学
妇产科学 儿科学
眼科学
组织学发展简史
解剖学：肉眼 -分辨率：0.1mm
意大利文艺复兴 —达·芬奇，维萨利
? 1665 年, Robert Hook ( 英国人)-Cell ? 100年之久，石蜡切片术 — 微米（μm）0.2μm
组织胚胎学1、绪论、上皮组织PPT幻灯片
四大基本组织
2、光镜结构、电镜结构、H.E染色法、 嗜碱性、嗜酸性、中性、嗜银性
绪第 二 章论
上皮组织
epithelial tissue
上皮组织的结构特点：
1.上皮细胞排列紧密，细胞外基质少。 2.有极性：分游离面和基底面。 3.有基膜；没有血管; 神经末梢？
—游离面
——上皮组织
—基底面
—— 结缔组织
免疫组织化学术
根据抗原与抗体特异性结合的原 理，检测组织中肽和蛋白质的技术。
甲状腺
三、组织学与胚胎学的学习方法
1、对组织学内容的审视角度
从组织、细胞、亚细胞和分子四个水平
2、理论联系实际 注意形态与功能的统一
3、培养观察力和空间思维能力，
平面结合立体，看到平面想立体
绪论小结 1、细胞、组织、器官、系统的概念、
镀银染色法 是用硝酸银等重金属
盐显示细胞和组织的某些结构，如将 神经细胞染为黑色，具有嗜银性。
网状纤维（淋巴结）
神经胶质细胞
电子显微镜术
应用电镜观察细胞和细胞外基质超微结构
分 辨 率：0.2nm 电镜结构计量单位：nm(纳米) 1nm = 1/1000 um（微米）
电子显微镜下显示的结构，称 超微结构
第一章
组织学绪论
一、组织学的内容和意义
组织学是用显微镜技术研究
机体微细结构及其相关功能的 一门学科。
研究内容：
分子 亚细胞 细胞 细胞
系统 系统
3. 器 官
几种不同的组织按 一定的构筑方式组合
形成器官。
4. 系 统
许多功能相关的 器官构成系统
二、研究技术
光学显微镜
电子显微镜
纹状缘
微
2、光镜结构、电镜结构、H.E染色法、 嗜碱性、嗜酸性、中性、嗜银性
绪第 二 章论
上皮组织
epithelial tissue
上皮组织的结构特点：
1.上皮细胞排列紧密，细胞外基质少。 2.有极性：分游离面和基底面。 3.有基膜；没有血管; 神经末梢？
—游离面
——上皮组织
—基底面
—— 结缔组织
免疫组织化学术
根据抗原与抗体特异性结合的原 理，检测组织中肽和蛋白质的技术。
甲状腺
三、组织学与胚胎学的学习方法
1、对组织学内容的审视角度
从组织、细胞、亚细胞和分子四个水平
2、理论联系实际 注意形态与功能的统一
3、培养观察力和空间思维能力，
平面结合立体，看到平面想立体
绪论小结 1、细胞、组织、器官、系统的概念、
镀银染色法 是用硝酸银等重金属
盐显示细胞和组织的某些结构，如将 神经细胞染为黑色，具有嗜银性。
网状纤维（淋巴结）
神经胶质细胞
电子显微镜术
应用电镜观察细胞和细胞外基质超微结构
分 辨 率：0.2nm 电镜结构计量单位：nm(纳米) 1nm = 1/1000 um（微米）
电子显微镜下显示的结构，称 超微结构
第一章
组织学绪论
一、组织学的内容和意义
组织学是用显微镜技术研究
机体微细结构及其相关功能的 一门学科。
研究内容：
分子 亚细胞 细胞 细胞
系统 系统
3. 器 官
几种不同的组织按 一定的构筑方式组合
形成器官。
4. 系 统
许多功能相关的 器官构成系统
二、研究技术
光学显微镜
电子显微镜
纹状缘
微
组织学绪论2
• 石蜡切片术（paraffin sectioning）：取材、
光镜技术 固定、脱水、包埋、切片（5 ～ 10 µ m
电镜技术 厚）、染色
组织化学 • 苏木精- 伊红染色法（hematoxylin-eosin staining， HE染色法）紫蓝色；伊红
图7
影术 • 脂类：锇酸固定染色，呈黑色
图像分析 • 核酸：福尔根反应显示DNA，甲基绿－
细胞培养 派若宁反应同时显示DNA与RNA 组织工程 • 酶类：酶与特异性底物的反应产物、再
与捕捉剂反应，形成有色的沉淀物
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组织学绪论2
研究内容 发展简史 学习方法 技术简介
免疫组织化学（immunohistochemistry）
组织学绪论2
研究内容 发展简史 学习方法 技术简介
• 组织化学术（histochemistry）为应用化 光镜技术 学、物理、生物化学、免疫学或分子 电镜技术 生物学的原理和技术，与组织学技术
组织化学 结合而产生的技术，在组织切片显示
放射自显 某种物质的存在和分布状态
影术
• 分类：
图像分析 一般组织化学术
细胞培养 组织工程
免疫组织化学术
原位杂交术
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组织学绪论2
研究内容 发展简史 学习方法 技术简介
一般组织化学术：组织中的某种结构成分 光镜技术 与所加试剂发生化学反应并呈现某种颜 电镜技术 色，在显微镜下可观察到
组织化学 • 糖类： PAS（过碘酸希夫）反应，显示
放射自显 多糖和糖蛋白，呈紫红色
组织学绪论_2
PPT文档演模板
2020/11/30
组织学绪论2
研究内容 发展简史 学习方法 技术简介
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最常用组织切片标本制备技术 基本程序：①取材：0.5cm
②固定：甲醛、乙醇 ③脱水：如果是冰冻切片则不需要此步骤 ④包埋：石蜡、火棉胶、树脂 ⑤切片：组织切片机、冰冻切片机 ⑥脱蜡：如果是石蜡包埋则需要此步骤 ⑦染色：最常用染色方法为HE染色 ⑧封片：
2.非切片法：涂片法、铺片法、磨片法等。
常用染色方法：HE染色
组织学与胚胎学
Histology and Embryology
All Rights Reserved
组织学
histology
绪论
Introduction
一、组织学的定义和研究内容
组织学(histology)：研究机体微细结构及其相关功能的科学。
上皮组织
细胞 细胞间质
结缔组织 组织
肌肉组织
器官
系统
用于观察生活细胞和末经染色细胞的形态结构
⑵荧光显微镜(fluorescence micrscope)
是用以观察细胞、组织内荧光物质的分布
⑶激光共聚焦扫描显微镜(confocal laser scanning microscope，CLSM)
由激光光源、共焦成像扫描系统、电子光学系统和微机图象分析系统四 部份构成。
抗体检测未知抗原(组织细胞内某些多肽、蛋白质等大分子物质)的 存在与分布的一种方法。
直接法
间接法--PAP法
间接法--ABC法
(五)原位杂交术--核酸分子杂交组织化学技术
原位杂交(in situ hybridization)是 一种敏感性高、特 异性强的，能在组 织细胞原位进行的 核酸分子杂交技术。
(二)电子显微镜技术(electron microscope, EM)
冰扫分冻描析蚀透电刻射镜照电与－片镜照X线与片微照区片分析图片
透射电镜(transmission electron microscope, TEM)
观察细胞内部结构；分辨率为0.1-0.2nm,可放大几万－几十万倍
扫描电镜(scanning electron microscope, SEM)
可对样品进行断层扫描重建三维图来自，进行体视学分析；测定细胞内pH、 钙浓度等；精确地检测、识别组织细胞的微细结构及其变化。又称细 胞CT。
⑷倒置显微镜(inverted mi神cr经sc干op细e)胞培养 ⑸暗视野显微镜(dark field miCcMrLoSscope) ⑹偏光显微镜(polarization mi神cr经os球cope)
器官organ：由组织有机组合而成，具有一定的形态结构，并执行特定的生 理功能。如心、肝、脾、肺、肾。
系统system：由一些结构连续、功能相关的器官组合而成，完成连续的生 理活动。
组织学结构观察
组织学结构
光镜结构：用光学显微镜观察的结构 (light microscope，LM，简称光镜)
电镜结构：又称超微结构，电子显微镜下观察的结构 (electron microscope, EM，简称电镜)
SUCCESS
THANK YOU
2020/12/13
可编辑
13
(三)组织化学和细胞化学技术
1.糖类显示法： 过碘酸-希夫反应(periodic acid Schiff reaction，PAS反应)：
检测组织或细胞中有无多糖存在。 PAS反应阳性部位即表示多糖和蛋白多糖的存在 基本原理：多糖 过碘酸 醛 Schiff试剂 紫红色沉淀
嗜酸性
嗜碱性
其它染色方法
A 嗜银性 B 嗜铬性 C 异染性
普通光学显微镜
(light microscope，LM)
是观察组织细胞微细结构最常用的工具
光学部分：起放大作用 光镜的分辨率约为0.2µ m 可放大1500倍左右
机械部分：
几种特殊光学显微镜术
⑴相差显微镜(phase contrast microscope)
二、组织学的常用研究方法
组织学研究过程中存在的问题和解决方法
问题 观察对象太小 观察对象无色，无反差 观察对象生化成分不同 观察对象是活体
解决方法 显微镜放大 染色(如HE染色) 组织化学、免疫组织化学 培养
(一)光学显微镜技术
组织学与胚胎学最常用的技术，最大放大倍数常为1000倍。 1.切片术
苏木精 (Hematoxyli
n) 碱伊性红染料 (Eosin) 酸性染料
细胞核中的染色质 细胞质中的核糖体
细胞质 细胞间质成份
染成蓝色 (嗜碱性)
染成红色 (嗜酸性)
组织结构的嗜色性
嗜碱性：对碱性燃料有较强亲和力，可使细胞核内的染色质及细胞质内
的核糖体等结构染成蓝紫色
嗜酸性：对酸性染料有较强亲和力，可使多数细胞的细胞质染成粉红色 中 性：与两种染液亲合力都不强
氧化
PAS阳性 小肠上皮
2.酶类显示法：
酸性磷酸酶(ACP)显示法
3.脂类显示法： 4.核酸显示法：
福尔根反应 甲基绿-派若宁反应
脂锇类酸显示髓法鞘染苏色丹Ⅲ 核酸显示法：甲基绿-派若宁反应 酶细胞化学 神经元ACP酶阳性
(四)免疫组织化学和免疫细胞化学技术
是将免疫学原理与组织化学和细胞化学技术相结合建立的新技术. 利用抗原(antigen，Ag)，抗体(antibody)特异结合的原理，用已知
人体
神经组织
细胞cell：是机体形态结构与功能的基本单位。
细胞间质intracellular：由细胞分泌产生，对细胞起支持、营养、保护 等作用，构成细胞生存的微环境。
组织tissue：由一些形态结构相似、生理功能相近的细胞和细胞间质组成 的群体结构，是构成机体器官的基本成分。分为上皮组织、结缔组织、 肌组织和神经组织等4种基本组织。
观察组织或细胞表面的立体结构
冰冻蚀刻复型技术(freeze etch replica method)
观察细胞断裂表面形态结构
X-射线显微分析术(X-ray microanalysis)
研究细胞、组织内元素种类分布和含量
冷冻割断技术(freeze cracking) 扫 超描高电电镜 压铸电分型镜析技(电ul镜术tr(asvcoalntnaigneg eelleeccttrroonn1m.mi纤iccr毛淋rooXs巴sc线co2细op微.pe微胞e,区绒cU分aEsM毛析t)ing) 扫冰描冻探蚀针刻电镜细TE(胞Mscanning pr冷ob冻e m断ic裂rosco肾pe小, 球SPM) 右下 线粒体
②固定：甲醛、乙醇 ③脱水：如果是冰冻切片则不需要此步骤 ④包埋：石蜡、火棉胶、树脂 ⑤切片：组织切片机、冰冻切片机 ⑥脱蜡：如果是石蜡包埋则需要此步骤 ⑦染色：最常用染色方法为HE染色 ⑧封片：
2.非切片法：涂片法、铺片法、磨片法等。
常用染色方法：HE染色
组织学与胚胎学
Histology and Embryology
All Rights Reserved
组织学
histology
绪论
Introduction
一、组织学的定义和研究内容
组织学(histology)：研究机体微细结构及其相关功能的科学。
上皮组织
细胞 细胞间质
结缔组织 组织
肌肉组织
器官
系统
用于观察生活细胞和末经染色细胞的形态结构
⑵荧光显微镜(fluorescence micrscope)
是用以观察细胞、组织内荧光物质的分布
⑶激光共聚焦扫描显微镜(confocal laser scanning microscope，CLSM)
由激光光源、共焦成像扫描系统、电子光学系统和微机图象分析系统四 部份构成。
抗体检测未知抗原(组织细胞内某些多肽、蛋白质等大分子物质)的 存在与分布的一种方法。
直接法
间接法--PAP法
间接法--ABC法
(五)原位杂交术--核酸分子杂交组织化学技术
原位杂交(in situ hybridization)是 一种敏感性高、特 异性强的，能在组 织细胞原位进行的 核酸分子杂交技术。
(二)电子显微镜技术(electron microscope, EM)
冰扫分冻描析蚀透电刻射镜照电与－片镜照X线与片微照区片分析图片
透射电镜(transmission electron microscope, TEM)
观察细胞内部结构；分辨率为0.1-0.2nm,可放大几万－几十万倍
扫描电镜(scanning electron microscope, SEM)
可对样品进行断层扫描重建三维图来自，进行体视学分析；测定细胞内pH、 钙浓度等；精确地检测、识别组织细胞的微细结构及其变化。又称细 胞CT。
⑷倒置显微镜(inverted mi神cr经sc干op细e)胞培养 ⑸暗视野显微镜(dark field miCcMrLoSscope) ⑹偏光显微镜(polarization mi神cr经os球cope)
器官organ：由组织有机组合而成，具有一定的形态结构，并执行特定的生 理功能。如心、肝、脾、肺、肾。
系统system：由一些结构连续、功能相关的器官组合而成，完成连续的生 理活动。
组织学结构观察
组织学结构
光镜结构：用光学显微镜观察的结构 (light microscope，LM，简称光镜)
电镜结构：又称超微结构，电子显微镜下观察的结构 (electron microscope, EM，简称电镜)
SUCCESS
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2020/12/13
可编辑
13
(三)组织化学和细胞化学技术
1.糖类显示法： 过碘酸-希夫反应(periodic acid Schiff reaction，PAS反应)：
检测组织或细胞中有无多糖存在。 PAS反应阳性部位即表示多糖和蛋白多糖的存在 基本原理：多糖 过碘酸 醛 Schiff试剂 紫红色沉淀
嗜酸性
嗜碱性
其它染色方法
A 嗜银性 B 嗜铬性 C 异染性
普通光学显微镜
(light microscope，LM)
是观察组织细胞微细结构最常用的工具
光学部分：起放大作用 光镜的分辨率约为0.2µ m 可放大1500倍左右
机械部分：
几种特殊光学显微镜术
⑴相差显微镜(phase contrast microscope)
二、组织学的常用研究方法
组织学研究过程中存在的问题和解决方法
问题 观察对象太小 观察对象无色，无反差 观察对象生化成分不同 观察对象是活体
解决方法 显微镜放大 染色(如HE染色) 组织化学、免疫组织化学 培养
(一)光学显微镜技术
组织学与胚胎学最常用的技术，最大放大倍数常为1000倍。 1.切片术
苏木精 (Hematoxyli
n) 碱伊性红染料 (Eosin) 酸性染料
细胞核中的染色质 细胞质中的核糖体
细胞质 细胞间质成份
染成蓝色 (嗜碱性)
染成红色 (嗜酸性)
组织结构的嗜色性
嗜碱性：对碱性燃料有较强亲和力，可使细胞核内的染色质及细胞质内
的核糖体等结构染成蓝紫色
嗜酸性：对酸性染料有较强亲和力，可使多数细胞的细胞质染成粉红色 中 性：与两种染液亲合力都不强
氧化
PAS阳性 小肠上皮
2.酶类显示法：
酸性磷酸酶(ACP)显示法
3.脂类显示法： 4.核酸显示法：
福尔根反应 甲基绿-派若宁反应
脂锇类酸显示髓法鞘染苏色丹Ⅲ 核酸显示法：甲基绿-派若宁反应 酶细胞化学 神经元ACP酶阳性
(四)免疫组织化学和免疫细胞化学技术
是将免疫学原理与组织化学和细胞化学技术相结合建立的新技术. 利用抗原(antigen，Ag)，抗体(antibody)特异结合的原理，用已知
人体
神经组织
细胞cell：是机体形态结构与功能的基本单位。
细胞间质intracellular：由细胞分泌产生，对细胞起支持、营养、保护 等作用，构成细胞生存的微环境。
组织tissue：由一些形态结构相似、生理功能相近的细胞和细胞间质组成 的群体结构，是构成机体器官的基本成分。分为上皮组织、结缔组织、 肌组织和神经组织等4种基本组织。
观察组织或细胞表面的立体结构
冰冻蚀刻复型技术(freeze etch replica method)
观察细胞断裂表面形态结构
X-射线显微分析术(X-ray microanalysis)
研究细胞、组织内元素种类分布和含量
冷冻割断技术(freeze cracking) 扫 超描高电电镜 压铸电分型镜析技(电ul镜术tr(asvcoalntnaigneg eelleeccttrroonn1m.mi纤iccr毛淋rooXs巴sc线co2细op微.pe微胞e,区绒cU分aEsM毛析t)ing) 扫冰描冻探蚀针刻电镜细TE(胞Mscanning pr冷ob冻e m断ic裂rosco肾pe小, 球SPM) 右下 线粒体