P16蛋白在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变中的表达及临床意义

P16蛋白在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变中的表达及临床意义赵刚;周梅;赵峰;李景英
【摘要】目的研究P16蛋白在宫颈癌、癌前病变和宫颈炎中的表达,以寻求预测宫颈癌及宫颈癌前病变早期诊断的生物学标记.方法应用免疫组化技术检测23例宫颈癌、63例宫颈上皮内瘤变(CIN)和20例宫颈炎P16蛋白的表达,并进行分析比较.结果 (1)P16蛋白在宫颈癌与CIN Ⅰ级、CINⅢ级与CIN Ⅰ级中的表达差异具有统计学意义(P<0.05);在宫颈癌与宫颈炎、CIN与宫颈炎中的表达差异也具有统计学意义(P<0.05);(2)随着宫颈病变程度加重,P16蛋白的表达强度和阳性表达率不断升高(P<0.001).结论 P16蛋白的表达与宫颈癌及CIN病变程度及其进展有关,P16蛋白有可能作为宫颈癌及其癌前病变早期诊断的生物学标记.
【期刊名称】《新疆医科大学学报》
【年(卷),期】2010(033)002
【总页数】3页(P166-168)
【关键词】P16蛋白;宫颈癌;宫颈癌前病变;免疫组织化学
【作者】赵刚;周梅;赵峰;李景英
【作者单位】新疆医科大学附属中医医院B超室;新疆医科大学附属肿瘤医院病理科,新疆,乌鲁木齐,830000;新疆医科大学附属肿瘤医院病理科,新疆,乌鲁木
齐,830000;新疆医科大学附属肿瘤医院病理科,新疆,乌鲁木齐,830000
【正文语种】中文
【中图分类】R34;R737.33
宫颈癌是全球妇女第二大常见肿瘤[1],其死亡率已跃居各类妇科恶性肿瘤之首。

肿瘤抑制因子P16INK4A基因是近年来发现的一个新型抑癌基因,是一种细胞周期素依赖激酶抑制剂。

近年来的研究证实,几乎100%的宫颈癌及其癌前病变中
P16INK4A有高水平的表达,而在正常组织中无阳性表达[2],但P16INK4A在不同种族宫颈癌患者中的表达研究较少,本研究应用免疫组化的方法,检测不同种族宫颈癌及其宫颈上皮内瘤变患者P16的表达,并分析相关的临床指标,以探讨P16蛋白的表达与宫颈癌及其癌前病变的关系及临床意义,以寻求预测宫颈癌及宫颈癌前病变早期诊断的生物学标记。

1 资料与方法
1.1 一般资料选取新疆医科大学附属肿瘤医院2007～2008年宫颈活检和手术切除的宫颈标本106例,所有病变均经病理证实,其中宫颈癌23例,上皮内瘤变63例,宫颈炎20例。

宫颈癌患者年龄32～61岁,平均年龄44.22岁。

1.2 方法所有病例标本均经10%的福尔马林溶液固定,常规石蜡包埋,连续4 μ m 切片,采用 Envision免疫组化二步法检测组织标本中P16蛋白的表达情况,P16单克隆抗体购自北京中杉金桥公司。

1.3 结果判断 P16以细胞核和细胞质出现棕黄色颗粒为阳性,每张切片按着色细胞数＜10%为(-),10%～25%为(+),26%～50%(++),＞50%(+++)。

1.4 统计学处理应用SPSS13.0统计软件对数据进行统计学处理,计数资料采用χ2检验和四格表的确切概率法,相关性分析采用Spearman等级相关检验,检验水准α=0.05。

2 结果
2.1 P16蛋白在不同程度宫颈病变中阳性表达率的比较 P16蛋白在宫颈癌、CINⅢ级、CINⅡ级、CINⅠ级和慢性宫颈炎中的阳性表达率分别为91.3%、88%、
83.3%、55%,P16蛋白在宫颈癌、CINⅢ级与CINⅠ级中的表达差异具有统计学
意义(P ＜0.05);在宫颈癌、CIN Ⅲ级、CIN Ⅱ 级、CIN Ⅰ级与宫颈炎中的表达差异也具有统计学意义(P＜0.05);P16蛋白在宫颈癌与CINⅢ级、宫颈癌与CINⅡ 级、CINⅢ级与CINⅡ 级、CINⅡ 级与CINⅠ级中的表达差异均无统计学意义(P＞
0.05),具体见表1。

表1 P16蛋白在不同程度宫颈病变中阳性表达率的比较注:△表示宫颈癌与CINⅠ
级比较,*表示CINⅢ级与CINⅠ级比较,▲表示CINⅠ级与宫颈炎比较?
2.2 P16蛋白表达强度与宫颈病变程度的关系随着宫颈病变程度的加重,P16蛋白
的表达强度和阳性表达率不断升高,呈正相关(rs=0.367 2,P＜0.001),见表2。

表2 P16蛋白表达强度与宫颈病变程度的关系?
2.3 宫颈癌中P16蛋白的表达与临床病理指标的关系 P16蛋白的表达与宫颈癌患
者的年龄、族别、宫颈癌的分化程度及淋巴结转移无关(P＞0.05),见表3。

表3 宫颈癌中P16蛋白的表达与临床病理指标的关系?
3 讨论
宫颈癌是女性生殖系统主要恶性肿瘤之一,是影响妇女健康的主要疾病。

在发展中
国家,由于宫颈筛查工作不完善,宫颈癌的发生率居高不下,它已成为发展中国家妇女死亡的主要原因,死亡率仅次于乳腺癌,居第二位,且近年来,宫颈癌的发生率日趋年轻化[3],从宫颈癌前病变发展为宫颈癌需经历较长时间,约10年左右,若能早期得到及时正确的诊断和处理,将使宫颈癌成为一种可预防、可治愈的疾病。

P16基因是一种新型抑癌基因,为周期蛋白依赖激酶抑制剂,位于人第9号染色体短臂2区1带(9p21),由3个外显子和2个内含子组成,全长8.5 kb,编码蛋白分子量
为16×103,是人们发现的第一个直接参与细胞周期调控的抑癌基因,其产物
P16INK4A蛋白为细胞周期蛋白D/CDK激酶的抑制因子,该蛋白与细胞周期蛋白
D(cyclinD)竞争性地结合 CDK4和CDK6,并特异性地抑制 CDK4和CDK6的催化
活性,从而抑制视网膜母细胞瘤蛋白(pRb)的磷酸化,使其不能释放 E2F,形成了对CDK4-cyclinD-Rb-E2F环路的负性调节,阻止细胞由G1期进入S期,抑制细胞增殖[4]。

P16INK4A基因及其产物在人类许多原发性肿瘤和细胞株中发生改变,如脑肿瘤、头颈癌、食管癌、肺癌、胰腺癌、膀胱癌、乳腺癌、黑色素瘤、淋巴瘤、白血病等均发现较高的P16INK4A基因的失活,主要失活机制有突变、纯合性缺失及5′GPG岛甲基化失活等,使得细胞周期依赖激酶活性增加和Rb失活,引起细胞周期调节紊乱,导致细胞瘤变。

Kim等[5]研究发现,宫颈组织中P16INK4A甲基化率和P16INK4A的阳性表达率均随病变进展而升高,且在部分病变组织中同时存在
P16INK4A的甲基化和P16INK4A的高表达。

研究表明P16INK4A基因及其产物在大多数原发性肿瘤细胞中缺失,而却在100%的CINⅢ和宫颈癌中过表达。

文献报道高危HPV可诱导P16蛋白过表达[6],在HPV相关的宫颈癌及其癌前病变的发生发展过程中,HPV的E7致瘤蛋白能特异性地包裹并使pRb失活,P16INK4A与pRb的反馈调节被破坏,pRb的失活不能有效抑制P16INK4A的聚集,导致细胞中肿瘤抑制因子P16INK4A表达增加[7],然而过度表达的P16INK4A,由于
P16INK4A-pRb反馈环的破坏,不能正常发挥肿瘤抑制功能,细胞呈现持续增值状态,最终发生瘤变,而HPV阴性的宫颈癌组织中P16INK4A也呈高表达,提示
P16INK4A高表达尚存在 HPV外途径[8]。

本研究结果显示,P16蛋白在宫颈癌、CINⅢ级、CINⅡ级、CINⅠ级和慢性宫颈炎中的阳性表达率分别为91.3%、88%、83.3%、55%,P16蛋白在宫颈癌与CINⅠ级、CINⅢ级与CINⅠ级中的表达差异具有统计学意义(P＜0.05);在宫颈癌与宫颈炎、CIN与宫颈炎中的表达差异也具有统计学意义(P＜0.05);P16在宫颈癌和CIN 中的表达均显著高于宫颈炎,并且随着宫颈病变程度的加重P16的表达强度和阳性表达率不断升高(rs=0.367 2,P＜0.001),P16蛋白与宫颈癌及CIN病变程度和进展可能有关,这与国外学者的研究一致[9],提示P16蛋白有可能用于鉴别宫颈不典型
增生,筛查出需要早期治疗的高危患者,并监测宫颈病变的发生发展。

P16蛋白的表达与宫颈癌患者的年龄、族别、宫颈癌的分化程度及淋巴结转移无关(P＞0.05),由于标本量较小,P16蛋白的表达与宫颈癌的临床病理指标间的关系有待于进一步研究。

综上所述,宫颈癌是从宫颈上皮内瘤变到浸润性癌的一个由量变到质变的连续发展的过程,其中宫颈轻度上皮内瘤变是可逆性的,因此我们应选择合适的标记物对宫颈CIN早期和有效的筛查,以减少宫颈癌的发生。

P16蛋白在宫颈癌及其癌前病变中过表达,并且随着宫颈病变程度的加重P16的表达强度和阳性表达率不断升高,提示P16蛋白与宫颈癌及其癌前病变关系密切,P16蛋白有可能作为宫颈癌及其癌前病变早期诊断的标记物。

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