高效液相色谱法测定兽用氧氟沙星注射液中氧氟沙星的含量

高效液相色谱法测定兽用氧氟沙星注射液中氧氟沙星的含量罗杨
【摘要】对高效液相色谱法与紫外分光光度法测定兽用氧氟沙星注射液中氧氟沙
星的含量进行了比较.结果表明,高效液相色谱法分离速度快、分离效果好、回收率高,测定结果与<兽药质量标准>2003年版方法无显著性差异.
【期刊名称】《分析仪器》
【年(卷),期】2008(000)006
【总页数】3页(P28-30)
【关键词】兽用氧氟沙星注射液;含量;高效液相色谱法;紫外分光光度法
【作者】罗杨
【作者单位】贵州省兽药饲料监察所,贵阳,550003
【正文语种】中文
【中图分类】TH74
1 前言
氧氟沙星(ofloxacin,OFL) 系第三代喹诺酮类药物，又称氟嗪酸，属广谱抗菌药物，对细菌、支原体及部分厌氧菌有效。

据不完全统计，全国80%以上的兽药生产企
业正在生产和销售氧氟沙星制剂，它是目前兽医临床用药最广泛的抗菌药之一。

目前，氧氟沙星制剂中氧氟沙量含量的检测方法已报道的有高效液相色谱法、分光光度法、荧光分析法、电化学分析法、容量分析法、原子吸收光谱法等。

我国兽用
氧氟沙星注射液中氧氟沙量的含量目前采用《兽药质量标准》2003年版方法——紫外分光光度法测定。

本文对高效液相色谱法与紫外分光光度法测定氧氟沙星注射液中氧氟沙星的含量进行了比较。

结果表明，高效液相色谱法分离速度快、分离效果好、回收率高，测定结果与《兽药质量标准》2003年版方法无显著差异，可为此标准今后的修订提供参考。

2 实验部分
2.1 仪器设备
日本岛津L-2010A高效液相色谱仪及LCsolution色谱管理软件。

2.2 色谱条件
色谱柱：Symmetry C18(250mm×4.6mm，5μm)；
流动相： 0.05moL/L枸橼酸溶液-乙腈(79︰21)，用三乙醇胺调节pH值至4.0；柱温：35℃；
流速：1.0mL/min；
检测波长： 293nm；
进样量：10μL。

2.3 对照品和样品
对照品(中国兽医药品监察所)名称：氧氟沙星对照品，批号：H0091005，含量：99.0%。

样品(遵义县兽药厂)规格：0.2g/10mL，批号： 070701、070702、070703。

2.4 标准曲线的制备
取干燥至恒重的氧氟沙星对照品50mg，置于100mL量瓶中，用0.1mol/L盐酸
溶液稀释至刻度，摇匀，得0.5mg/mL储备液。

取该储备液1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL，分别置于不同的10mL量瓶中，用0.1mol/L盐酸溶液分别稀释至刻度，摇匀，得每mL含0.05、0.075、0.100、0.125、0.150mg的溶液。

用0.45μm
滤膜过滤，将滤液10μL进样，在293nm波长下用高效液相色谱法测定，结果见表1。

表 1 氧氟沙星对照品标标准曲线测定标准液浓度
(mg/mL)0.050.0750.1000.1250.150对应峰面积2726445.04076 702.65424 094.26712 211.08036 765.1标准曲线F(x)=8.44496e-017×x2+1.79493e-
008×x+0.000404265
相关系数r=0.9999862 r2=0.99997
平均值： 1.84919e-008 曲线好坏程度： 1.36811e-010
变异系数RSD: 0.739845%
理论塔板数: 3686.411
分离度: 1.294
保留时间: 3.93min
由此可以看出，用本方法测定氧氟沙星含量时，约4min出峰，分离速度快，分
离效果较好，准确度、精密度较高。

2.5 回收率试验
取干燥至恒重的氧氟沙星对照品，用0.1moL/L盐酸溶液分别制成每mL含0.075、0.100、0.125mg的溶液，用0.45μm滤膜过滤，将滤液10μL进样，在293nm
波长下用高效液相色谱法测定，结果见表2。

表 2 回收率测定结果样品浓度(mg/mL)实测浓度(平均值)(mg/mL)回收率(%)平均回收率(%)0.0750.074899.70.100.101101.00.1250.12499.299.97
由表2可以看出，本方法的回收率高。

2.6 重复性和稳定性试验
取070701批号样品，精密量取1mL置于200mL量瓶中，用0.1moL/L盐酸溶
液稀释至刻度，摇匀，用0.45μm滤膜过滤，将滤液10μL进样，在293nm波长
下用高效液相色谱法测定，每间隔0.5h测定一次，共测定5次，结果见表3。

表 3 重复性和稳定性测定结果测定时间(h)0.00.51.01.52.0测定结果
(%)97.297.397.097.297.1
由此可看出，本方法的重复性和稳定性较好。

3 样品测定结果比较
3.1 高效液相色谱法测定结果
用高效液相色谱法测定样品，结果见表4。

表 4 高效液相色谱法测定结果样品批号含量
(%)07070197.207070296.907070397.0
3.2 紫外分光光度法测定结果
用紫外分光光度法(《兽药质量标准》2003年版方法)测定样品，结果见表5。

表 5 紫外分光光度法测定结果批号含量(%)07070197.507070297.207070397.2 3.3 两种方法的测定结果比较
用高效液相色谱法和紫外分光光度法测定样品的结果比较见表6。

表 6 两种方法测定结果比较批号两种方法的相对标准偏差(%)允许相对标准偏差(%)0707010.150707020.150707030.100.5
4 结论
从上述结果可以看出，用高效液相色谱法和紫外分光光度法测定兽用氧氟沙星注射液中氧氟沙星含量无显著性差异。

高效液相色谱法具有分离速度快、分离效果好、回收率高的优点，在今后修订该产品标准时可以考虑采用高效液相色谱法。

参考文献
1 中华人民共和国农业部《兽药质量标准》2003年版. 北京：中华人民共和国农业部，2003： 152
2 中华人民共和国药典委员会《中华人民共和国药典》2000年版二部. 北京：化
学工业出版社， 2000： 712。