应用多元回归分析探讨同型半胱氨酸对高血压、冠心病的危险度判断
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８ Ｏ１・
企 医刊
第 ３期
值。后绘制曲线图， 以标准样 品浓度为横坐标 ， Ｏ Ｄ值为 纵 坐标 ， 可根据血清样 品的 Ｏ Ｄ值在标 准曲线上查询 其浓
度值 。在酶标 仪上可 以显示 标本 ＨＬ Ａ—Ｂ ２ ７浓度 。 健康 人 Ｈ Ｌ Ａ— Ｂ ２ ７ 预期 值 浓度 ＜ ３ ５ Ｕ ／ ｍ ｌ ， ＞ ３ ５ Ｕ ／ ｍ ｌ 为阳性 ， 试 剂盒 敏感度 ０ ． ５ Ｕ ／ ｍ ｌ 。 １ ． ３统计 分析 方法 对试 验 的数据 根 据如下 公式计 算 ： 敏 感度 （ ｓ ｅ ）＝ 真 阳性 列 数／ （ 真 阳性列 数 ＋加 阴性 列数 ） ， 特异性 （ ｓ ｐ ）＝真 阴性 列 数／ （ 假 阳性 列 数 ＋真 阴 性 列 数） 。统计 分析采 用卡方 检验 。
［ ５ ］ 裴兵 ． 探讨流式细胞术检测 Ｈ Ｌ Ａ—Ｂ ２ ７在强直性脊柱炎 中的临床 应用 价值 ［ Ｊ ］ ． 实用 检 验 医师 杂 志 ， ２ ０ １ ２ ， ０ ４
一
且分析客观 、 准确 、 可靠 。 本实验操作 过 程需 认 真仔 细 ， 试 验器 材 都要 消 毒处理 ， 防止 Ｄ Ｎ Ａ被污染 ， 操作过程都需注意交 叉污 染， 以免导致结果错误 。 ［ 参 考 文 献］
［ １ ］ 刘殉 ， 赵艳 ， 刘金 花 ， 等． Ｈ Ｌ Ａ —Ｂ宽特 异 性 抗 原表 位 Ｂ ｗ ４对 ＨＣ Ｖ特异性 Ｔ细胞反应影 响分析 ［ Ｊ ］ ． 中华微生 物学和免疫学杂志 ， ２ ０ １ ２， ３ ２ （ １ ０ ） ： ８ ７ ４— ８ ７ ８ ． ［ ２ ］ 赵晓君 ， 薛鸾 ， 陈云 飞等． 三种 方法 检测强 直性脊 柱炎 患者 Ｈ Ｌ Ａ—Ｂ ２ ７的效 果 比较 ［ Ｊ ］ ． 山东 医药 ， ２ ０ １ １ ， ５ １
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３ 讨 论
３ ． １ Ｈ Ｌ Ａ—Ｂ ２ ７作 为表 达人类 主要 组织 相容 性 的一 种复合体产物 ， 主要 负 责免 疫系 统 中细胞 间 的相互 诱 导和识 别反应 ， 并调 节免疫 应答功 能。Ｈ Ｌ Ａ—Ｂ ２ ７ 分子可与 自身的肽片段相结 合形成 能在细胞 膜上 表 达， 且 被细胞 Ｃ Ｄ ８＋ Ｔ识 别 的一种复合 体 ， 从 而使 Ｔ 细胞杀伤 自身靶 细胞 ， 导致 细胞 组织 的变 性 及器 官 受损等 。Ａ Ｓ主要涉及 到骶髂 关节 、 脊 柱及其 周 围的 大关节 ， 引起 残疾 的概率较 高 。Ｈ Ｌ Ａ—Ｂ ２ ７在 Ａ Ｓ患 者Ｈ Ｌ Ａ— Ｂ ２ ７阳性 率 和来 自 Ａ Ｓ显著 增加 患 的风 险 级亲属 ， 提示 Ｈ Ｌ Ａ—Ｂ ２ ７显 示 阳性 Ａ Ｓ的有 家族 性 聚集倾 向 ， 同时， 也被 认 为 Ｈ Ｌ Ａ—Ｂ ２ ７检测 Ａ ｓ的 有 效 方 法 。 Ｈ Ｌ Ａ —Ｂ ２ ７显 示 阳 性 者 极 易 患 上 强 直 性脊 柱炎 ， 选择 一种 鉴 别与 临床 诊 断效果 明 显 的检 测方法是最重要 的。本实 验作 者应用 Ｐ Ｃ Ｒ—Ｓ Ｓ Ｐ方 法和 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ方 法 ， 对 同一批次样 本进行检 测对 比 ， 可 发现 Ｐ Ｅ Ｒ—Ｓ Ｓ Ｐ方 法 的 检 测 具 有 高 特 异 性 （ Ｓ ｐ＝
表 ｌ 两种方法 Ｈ Ｌ Ａ—Ｂ ２ ７检 测 结 果 比 较
到试剂 Ｐ Ｈ值 、 室温 、 孵育时 间等 对实验条件 的影 响 ， 而导致抗原反应结果显 示偏弱 或者交叉反 应成 假 阳 性， 酶联免疫 吸 附试验 存在 和 淋 巴细胞 毒法存 在 相 同的问题 。流式细胞技术 的缺点 在于需要 特殊 昂贵 的流式细胞仪 ， 使用费用昂贵 ， 其结果判断更是复 杂 ， 不适合进行大规模群 体 的调查 。本次研究 采用 Ｐ Ｃ Ｒ Ｓ Ｓ Ｐ技术对 Ｈ Ｌ Ａ～Ｂ ２ ７进行检测 的点有 （ １ ） 样 品需 求量少 ， 容易获得 ， 设备仅 需要琼脂 糖凝胶 电泳 仪和 Ｐ Ｃ Ｒ扩增仪 即可 ， 提取后 的 Ｄ Ｎ Ａ还可 长期保存 ； （ ２ ） 实验方法简便 快捷 ， 适 合 临床 的常规 检验 ； （ ３ ） 检验 费用适 中， 使患者易于接受 ； （ ４ ） 判定 结果一 目了然 ，
９ ５ ． ７ ％） ， 高敏感度 性 （ Ｓ ｅ ＝９ ４ ． ４ ％） ， 其 敏感 度 明显
高于 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ方 法 的 检测 。 ３ ． ２ 目前对 Ｈ Ｌ Ａ—Ｂ ２ ７抗原 的检测方法 ， 有分析 生物 学Ｐ Ｃ Ｒ技术 和 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ技术 、 流式 细胞 术与经 典淋 巴 细胞毒术 ， 虽淋 巴细胞 毒技术方 法操作 简便 ， 但 因受
２ 结 果
通过 用 两 种 方 法 的 检 测 ， Ｐ Ｃ Ｒ —Ｓ Ｓ Ｐ法 检 测 Ｓ ｅ＝ ９ ４ ． ４ ％， Ｓ ｐ＝ ９ ５ ． ７ ％： Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法 Ｓ ｅ：８ ６ ． Ｏ ％， Ｓ ｐ＝８ ５ ． ５ ％， 病 例组 与对照组检 出率 比较 ， 差异具有 统计学意 义 （ Ｘ ２ ＝ ７ ． ３ ４７检测结果 比较见表 １ 。
（ ４ ３ ） ： ４ ８— ４ ９ ．
［ ３ ］ 于坤 ， 袁方 ， 代东发 ， 等． Ｈ Ｌ Ａ—Ｂ ２ ７ ０ ４重 链 胞 外 功 能 区 基 因片 段 的克 隆 表 达 及其 生 物 学 功 能 的初 步 鉴 定 ［ Ｊ ］ ． 生物技术通讯 ， ２ ０ １ ３ ， （ ２ ） ： １ ６ １ —１ ６ ４ ． ［ ４ ］ 曾洋 ， 谭诗梦 ， 冯斌 ， 等． Ｐ Ｃ Ｒ—Ｓ Ｓ Ｐ法检测 ２ ９种 Ｈ１ Ｊ Ａ— Ｂ ２ ７基因亚型［ Ｊ ］ ． 分子诊 断与治疗杂 志， ２ ０ １ １ ， ０ ３ （ ５ ） ：
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企 医刊
第 ３期
值。后绘制曲线图， 以标准样 品浓度为横坐标 ， Ｏ Ｄ值为 纵 坐标 ， 可根据血清样 品的 Ｏ Ｄ值在标 准曲线上查询 其浓
度值 。在酶标 仪上可 以显示 标本 ＨＬ Ａ—Ｂ ２ ７浓度 。 健康 人 Ｈ Ｌ Ａ— Ｂ ２ ７ 预期 值 浓度 ＜ ３ ５ Ｕ ／ ｍ ｌ ， ＞ ３ ５ Ｕ ／ ｍ ｌ 为阳性 ， 试 剂盒 敏感度 ０ ． ５ Ｕ ／ ｍ ｌ 。 １ ． ３统计 分析 方法 对试 验 的数据 根 据如下 公式计 算 ： 敏 感度 （ ｓ ｅ ）＝ 真 阳性 列 数／ （ 真 阳性列 数 ＋加 阴性 列数 ） ， 特异性 （ ｓ ｐ ）＝真 阴性 列 数／ （ 假 阳性 列 数 ＋真 阴 性 列 数） 。统计 分析采 用卡方 检验 。
［ ５ ］ 裴兵 ． 探讨流式细胞术检测 Ｈ Ｌ Ａ—Ｂ ２ ７在强直性脊柱炎 中的临床 应用 价值 ［ Ｊ ］ ． 实用 检 验 医师 杂 志 ， ２ ０ １ ２ ， ０ ４
一
且分析客观 、 准确 、 可靠 。 本实验操作 过 程需 认 真仔 细 ， 试 验器 材 都要 消 毒处理 ， 防止 Ｄ Ｎ Ａ被污染 ， 操作过程都需注意交 叉污 染， 以免导致结果错误 。 ［ 参 考 文 献］
［ １ ］ 刘殉 ， 赵艳 ， 刘金 花 ， 等． Ｈ Ｌ Ａ —Ｂ宽特 异 性 抗 原表 位 Ｂ ｗ ４对 ＨＣ Ｖ特异性 Ｔ细胞反应影 响分析 ［ Ｊ ］ ． 中华微生 物学和免疫学杂志 ， ２ ０ １ ２， ３ ２ （ １ ０ ） ： ８ ７ ４— ８ ７ ８ ． ［ ２ ］ 赵晓君 ， 薛鸾 ， 陈云 飞等． 三种 方法 检测强 直性脊 柱炎 患者 Ｈ Ｌ Ａ—Ｂ ２ ７的效 果 比较 ［ Ｊ ］ ． 山东 医药 ， ２ ０ １ １ ， ５ １
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３ 讨 论
３ ． １ Ｈ Ｌ Ａ—Ｂ ２ ７作 为表 达人类 主要 组织 相容 性 的一 种复合体产物 ， 主要 负 责免 疫系 统 中细胞 间 的相互 诱 导和识 别反应 ， 并调 节免疫 应答功 能。Ｈ Ｌ Ａ—Ｂ ２ ７ 分子可与 自身的肽片段相结 合形成 能在细胞 膜上 表 达， 且 被细胞 Ｃ Ｄ ８＋ Ｔ识 别 的一种复合 体 ， 从 而使 Ｔ 细胞杀伤 自身靶 细胞 ， 导致 细胞 组织 的变 性 及器 官 受损等 。Ａ Ｓ主要涉及 到骶髂 关节 、 脊 柱及其 周 围的 大关节 ， 引起 残疾 的概率较 高 。Ｈ Ｌ Ａ—Ｂ ２ ７在 Ａ Ｓ患 者Ｈ Ｌ Ａ— Ｂ ２ ７阳性 率 和来 自 Ａ Ｓ显著 增加 患 的风 险 级亲属 ， 提示 Ｈ Ｌ Ａ—Ｂ ２ ７显 示 阳性 Ａ Ｓ的有 家族 性 聚集倾 向 ， 同时， 也被 认 为 Ｈ Ｌ Ａ—Ｂ ２ ７检测 Ａ ｓ的 有 效 方 法 。 Ｈ Ｌ Ａ —Ｂ ２ ７显 示 阳 性 者 极 易 患 上 强 直 性脊 柱炎 ， 选择 一种 鉴 别与 临床 诊 断效果 明 显 的检 测方法是最重要 的。本实 验作 者应用 Ｐ Ｃ Ｒ—Ｓ Ｓ Ｐ方 法和 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ方 法 ， 对 同一批次样 本进行检 测对 比 ， 可 发现 Ｐ Ｅ Ｒ—Ｓ Ｓ Ｐ方 法 的 检 测 具 有 高 特 异 性 （ Ｓ ｐ＝
表 ｌ 两种方法 Ｈ Ｌ Ａ—Ｂ ２ ７检 测 结 果 比 较
到试剂 Ｐ Ｈ值 、 室温 、 孵育时 间等 对实验条件 的影 响 ， 而导致抗原反应结果显 示偏弱 或者交叉反 应成 假 阳 性， 酶联免疫 吸 附试验 存在 和 淋 巴细胞 毒法存 在 相 同的问题 。流式细胞技术 的缺点 在于需要 特殊 昂贵 的流式细胞仪 ， 使用费用昂贵 ， 其结果判断更是复 杂 ， 不适合进行大规模群 体 的调查 。本次研究 采用 Ｐ Ｃ Ｒ Ｓ Ｓ Ｐ技术对 Ｈ Ｌ Ａ～Ｂ ２ ７进行检测 的点有 （ １ ） 样 品需 求量少 ， 容易获得 ， 设备仅 需要琼脂 糖凝胶 电泳 仪和 Ｐ Ｃ Ｒ扩增仪 即可 ， 提取后 的 Ｄ Ｎ Ａ还可 长期保存 ； （ ２ ） 实验方法简便 快捷 ， 适 合 临床 的常规 检验 ； （ ３ ） 检验 费用适 中， 使患者易于接受 ； （ ４ ） 判定 结果一 目了然 ，
９ ５ ． ７ ％） ， 高敏感度 性 （ Ｓ ｅ ＝９ ４ ． ４ ％） ， 其 敏感 度 明显
高于 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ方 法 的 检测 。 ３ ． ２ 目前对 Ｈ Ｌ Ａ—Ｂ ２ ７抗原 的检测方法 ， 有分析 生物 学Ｐ Ｃ Ｒ技术 和 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ技术 、 流式 细胞 术与经 典淋 巴 细胞毒术 ， 虽淋 巴细胞 毒技术方 法操作 简便 ， 但 因受
２ 结 果
通过 用 两 种 方 法 的 检 测 ， Ｐ Ｃ Ｒ —Ｓ Ｓ Ｐ法 检 测 Ｓ ｅ＝ ９ ４ ． ４ ％， Ｓ ｐ＝ ９ ５ ． ７ ％： Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法 Ｓ ｅ：８ ６ ． Ｏ ％， Ｓ ｐ＝８ ５ ． ５ ％， 病 例组 与对照组检 出率 比较 ， 差异具有 统计学意 义 （ Ｘ ２ ＝ ７ ． ３ ４７检测结果 比较见表 １ 。
（ ４ ３ ） ： ４ ８— ４ ９ ．
［ ３ ］ 于坤 ， 袁方 ， 代东发 ， 等． Ｈ Ｌ Ａ—Ｂ ２ ７ ０ ４重 链 胞 外 功 能 区 基 因片 段 的克 隆 表 达 及其 生 物 学 功 能 的初 步 鉴 定 ［ Ｊ ］ ． 生物技术通讯 ， ２ ０ １ ３ ， （ ２ ） ： １ ６ １ —１ ６ ４ ． ［ ４ ］ 曾洋 ， 谭诗梦 ， 冯斌 ， 等． Ｐ Ｃ Ｒ—Ｓ Ｓ Ｐ法检测 ２ ９种 Ｈ１ Ｊ Ａ— Ｂ ２ ７基因亚型［ Ｊ ］ ． 分子诊 断与治疗杂 志， ２ ０ １ １ ， ０ ３ （ ５ ） ：