两种方法检测HLA-B27的临床价值

HLA-B27属于HLA-B位点之一,是人体白细胞抗原。

HLA-B27基因属于Ⅰ型MHC基因,表达在机体中所有有核的细胞上,尤其是在淋巴细胞表面含量较多。

现在研究表明[1-3],HLA-B27和强直性脊柱炎具有高度的相关性,HLA-B27检验已经成为临床上支持强直性脊柱炎诊断的重要依据。

目前检验HLA-B27的方法有许多,如微量细胞毒试验、流式细胞仪检验法、酶联免疫分析法、PCR法等。

该文方便选取该院2017年1—2017年12月在该院检测血液HLA-B27的134例患者为研究对象,探讨两种方法检测HLA-B27的临床价
DOI:10.16662/ki.1674-0742.2018.18.188
两种方法检测HLA-B27的临床价值
林乾飞
长春市中心血站输血研究所,吉林长春130033
[摘要]目的探讨磁性酶联免疫分析法和流式细胞术两种方法检测HLA-B27的临床价值,为临床血液HLA-B27的检验提供科学理论依据。

方法方便选取该院2017年1—12月在该院检测血液HLA-B27的134例患者为研究对象,所有患者均采用两种方法进行检验,根据检验方法不同,分为对照组和观察组。

对照组采用流式细胞仪检验,观察组采用磁性酶联免疫分析法进行检验,观察两种检验方法的灵敏度、特异性及阳性、阴性预测值。

结果磁性酶联免疫分析的灵敏度、特异性及阳性、阴性预测值分别为0.961,0.985,0.981,0.985,流式细胞仪的灵敏度、特异性及阳性、阴性预测值分别为0.961,0.971,0.968,0.973,两种方法结果的符合率为97.76%,差异无统计学意义(P>0.05)。

结论磁性酶联免疫分析法在检验血液HLA-B27的灵敏度和特异性较好,具有方面、省时、简单、准确的特点,适合强直性脊柱炎的早期诊断及鉴别,实用可靠,值得在临床上应用推广。

[关键词]磁性酶联免疫分析法;流式细胞术;两种检测方法;HLA-B27;临床价值
[中图分类号]R4[文献标识码]A[文章编号]1674-0742(2018)06(c)-0188-03
The Clinical Value of Two Methods for Detecting HLA-B27
LIN Qian-fei
Blood Transfusion Institute,Central Blood Station,Changchun,Jilin Province,130033China
[Abstract]Objective This paper tries to explore the clinical value of magnetic enzyme-linked immunosorbent assay and flow cytometry in the detection of HLA-B27,and to provide scientific theoretical basis for the clinical blood HLA-B27test.
Methods134patients with HLA-B27in the hospital from January to December2017were selected conveniently as the study subjects.All patients were tested by two methods.According to the different testing methods,they were divided into control group and observation group.The control group was examined by flow cytometry.The observation group was tested by magnetic enzyme-linked immunosorbent assay.The sensitivity,specificity,and positive and negative predictive value of the two test methods were observed.Results The sensitivity,specificity,and positive and negative predictive values of mag⁃netic enzyme-linked immunosorbent assay were0.961,0.985,0.981and0.985,respectively.The sensitivity,specificity,and positive and negative predictive values of flow cytometry were0.961,0.971,0.968,0.973.The coincidence rate of the two methods was97.76%.the difference was not statistically significant.Conclusion The magnetic enzyme-linked immunosor⁃bent assay has good sensitivity and specificity in the detection of blood HLA-B27.It has the characteristics of being time-saving,simple,and accurate.It is suitable for the early diagnosis and identification of ankylosing spondylitis.It is practical and reliable,and worthy of clinical application.
[Key words]Magnetic enzyme-linked immunoassay;Flow cytometry;Two detection methods;HLA-B27;Clinical value
[作者简介]林乾飞(1961-),男,吉林长春人,大专,副主任医
师,研究方向:血型鉴定,HLA基因分型等。

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中外医疗China&Foreign Medical Treatment
China &Foreign Medical Treatment
中外医疗
值,取得较好的效果,现报道如下。

1资料与方法1.1一般资料
方便选取在该院检测血液HLA-B27的134例患者为研究对象,所有患者血液均经流式细胞仪和酶联免疫分析法进行测定,分别为对照组和观察组。

患者中男71例,女63例,年龄6~85岁,平均年龄(47.0±2.69)岁。

该研究的所有流程项目都是在符合伦理委员会各项条例和批准的前提下进行的,同时也是获得了所有参与患者及其家属的知情同意。

1.2治疗方法
1.2.1标本准备两组患者晨起空腹抽取静脉血4mL,
分别装于2支EDTA 抗凝管(美国BD 公司)中,每管2mL,编号注明性别和年龄,在24h 内分别用于酶联免
疫分析法和流式细胞仪检测。

1.2.2对照组对照组采用流式细胞仪对患者血液进行
检验,采用美国BD 公司的FACSCalibur 流式细胞仪进
行检验,HLA-B27试剂盒为BD 公司的专用试剂盒,严格按照试剂盒说明书进行操作,采用专用软件进行血液样品分析和结果计算,将结果和定界值进行比较,大于等于定界值则为阳性,否则为阴性。

1.2.3观察组观察组采用美国Goldsign 公司的HLA-
B27抗原磁酶免疫试剂盒,严格按照试剂盒说明书进行操作,采用国产KHBst-360酶免疫检测仪,在波长450nm 和630nm 下读取吸光度值(OD 值),OD 值<0.7则判定为阴性,OD≥0.7则为阳性。

1.4统计方法
采用SPSS 19.0统计学软件处理数据,计数资料[n (%)]采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。

2结果
经过不同方法检测后,差异无统计学意义(P>0.05),检测结果比较见表1。

表1
两组方法检测结果比较
两种方法检测后,灵敏度、特异性及阳性、阴性预测值,差异无统计学意义(P>0.05),见表2。

表2两种方法指标比较(%)
3讨论
HLA 抗原是人类重要组织相容性复合体(MHC)的
表达产物,在人体免疫系统中负责细胞与细胞之间的识别、诱导免疫反应以及调节免疫应答的功能。

近年来,研究HLA 和疾病相关性的资料证明[4-6],一些疾病
的发生率盒某些特殊的HLA 检出率密切相关,这些患者大都是发病机理尚不明确,并伴有免疫功能异常和
有遗传倾向性的疾病[7]。

流式细胞术(FCM)是通过检测标记的荧光信号,对
悬液中的单细胞或其他生物粒子,实现高速、逐一的细胞定量分析技术,其特点是通过快速测定库尔特电阻、光散射、荧光和光吸收定量测定细胞细胞体积、DNA 含量、酶活性、蛋白质含量、细胞膜受体及表面抗原等参数,根据得到的参数将性质不同的细胞分开,获得供医学研究用的纯细胞群体。

FCM 法通过荧光抗原抗体检测技术,对细胞表面抗原进行分析,进行细胞分类及亚群分析,FCM 对于人体细胞免疫功能的评估、各种血液病及肿瘤的诊断和治疗均有重要作用。

酶联免疫吸附剂测定法(ELISA 法),简称酶联免疫法,是让抗体和酶复合物结合并通过显色来进行指标检测。

该研究检查结果显示流式细胞仪的灵敏度、特异性及阳性、阴性预测值分别为0.961、0.971、0.968、0.973,磁性酶联免疫的灵敏度、特异性及阳性、阴性预测值分别为0.981、0.985、0.981、0.985,与沈静[8]磁性酶联免疫分析的灵
敏度、特异性及阳性、阴性预测值分别为0.958、0.969、0.965、0.968,流式细胞仪的灵敏度、特异性及阳性、阴性预测值分别为0.979、0.981、0.982、0.987检测结果一
致。

该文研究磁性酶联免疫分析法在检验血液HLA-B27的灵敏度和特异性较好,具有方面、省时、简单、准
确的特点,适合强直性脊柱炎的早期诊断及鉴别,实用可靠,值得在临床上应用推广。

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流式细胞仪检测
磁性酶联免疫分析法检测χ2值
P 值组别
134134
3437
1.430.19例数阳性流式细胞仪磁性酶联免疫χ2
值
P 值检验方法0.9610.9811.46
0.227灵敏度性
0.9710.9851.89
0.219特异性0.9680.9812.18
0.1420.9730.9851.47
0.241阳性预测值阴性预测值(下转第192页)
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(收稿日期:2018-03-26)
理技术检查发现,MPR、SSD和VRT发现骨折依次为163根、169根和170根,检出率依次为95.88%、99.41%和100.00%,两种检查方法进行配对检验发现,多层螺旋CT后处理技术诊断四肢骨关节骨折的准确率显著高于数字化X线摄影平片(χ2=35.22,P<0.05),这提示多层螺旋CT后处理技术在诊断隐匿性骨折以及复合骨折中的应用价值更高.侯贤双在其研究中指出,经X线平片检查结果显示为可疑及未见异常但是实际上存在着隐匿性骨折的患者占20.00%,X线平片对隐匿性骨折的检出率为0.00%,多层螺旋CT后处理技术对隐匿性骨折的检出率为20.00%,两者相比差异有统计学意义(P<0.05),这和此次研究结构相似[13]。

总之,多层螺旋CT后处理技术是诊断四肢骨关节有效的检查手段,能够明显的降低漏诊和误诊,通过后处理技术可以清晰、直观的显示骨折位置、周围组织空间关系,对指导临床治疗具有重要参考价值。

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(收稿日期:2018-03-22)
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)
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