楸树外植体灭菌和初代培养的研究

In this paper, stem segments of Catalpa bungei were used as explants to study the effects of different sterilization time on the pollution of explants and the induction of axillary buds in stem segments by different basic media. The results showed that the best sterilization scheme for the stem segments of Catalpa bungei was to treat them with 75% alcohol for 30 s and wash them twice with sterile water for 20 min each time. Then treated with 0.1% mercury solution for 5 min, washed with sterile water for 4-5 times, 2 min each time. The optimum medium for axillary bud induction was DKW+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L+Folic Acid 0.5 mg/L. In this study, the primary culture system of Catalpa bungei was established to provide theoretical basis and technical support for the subsequent cultivation and rapid propagation system of tissue culture.
Catalpa bungei, sterilization, primary culture
楸树（Catalpa bungei C.A .Mey.）是紫葳科梓树属的一种 落叶乔木，原产于我国，距今已有 2 600 多年的栽培历史。主 要分布在我国的黄河流域、华东及西南等地区[1]。其生长迅 速,材质优良, 是一种珍贵的优质用材树种[2]。同时具有较高 的观赏价值和药用价[3]。楸树传统的繁殖方法有播种、埋根、 嫁接和扦插繁殖。然而，由于其多花而不实，结种率低，且种 子发芽率不高，播种繁殖比较困难；埋根繁殖可利用的材料 较 少 ；嫁 接 方 法 存 在 所 需 的 砧 木 培 养 周 期 长 、嫁 接 成 活 率 不高，管理成本大等问题[4,5]；扦插方法生根率较低，繁殖系数 低[6]。这些方法都存在很多问题，不是最佳的繁育途径，无法 大量满足生产的需求。探索一种快速繁殖楸树的有效途径， 实现楸树优质种苗的规模化生产已成为生产中急需解决的 问题。因此，本课题组利用植物组织培养技术对楸树的快速 繁殖进行了研究。本文主要对楸树外植体的灭菌方法及茎段 腋芽诱导培养基筛选进行了试验研究，旨在为后续的增殖培 养和生根培养奠定基础，提供充足的继代材料。
收稿日期 2019-06-19 基金项目 晋中市科技创新项目；山西林业职业技术学院技术 服务研究项目（20180402）。 作者简介 李小艳（1983-），女，硕士，讲师。研究方向：园艺植 物栽培与遗传育种。 通讯作者 潘亚，高级工程师，E-mail：3040748@。
1 材料与方法
1.1 试验材料 以山西省晋中市国营苗圃内栽植的楸树— ——“花楸”品
酸 0.5 mg/L。该研究建立了楸树初代培养体系，为后续的培养和组培快繁体系的建立提供理论基础和技术保障。
关键词 楸树；灭菌；初代培养
中图分类号 S792.99
文献标志码 A
doi:10.3969/j.issn.1673-887X.2019.07.042
Li Xiaoyan 1, Wu Xinqin 1, Pan Ya 2, Xing Yu’e 2, Zheng Jinxian 2
种为试验材料，于 2019 年春季采集优良单株的嫩枝为外植 体进行试验。 1.2 试验方法 1.2.1 外植体的灭菌
将采集的楸树外植体进行处理，剪去叶片，用洗衣粉溶 液浸泡 2 min，流水冲洗 1~2 h，预处理完成后。在超净工作台 内，先用 75%酒精处理 30 s，无菌水冲洗 2 次，每次 20 s。然后 用 0.1%升汞溶液分别处理 4 min、5 min 和 6 min 做对比，进 行不同灭菌时间对楸树茎段外植体污染的影响试验，最后无 菌水冲洗 4~5 次，每次 2 min。然后将外植体剪成 1~2 cm 的 带芽茎段，接种于培养基中，每瓶一个。 1.2.2 腋芽诱导培养基筛选方案
摘 要 文章以楸树茎段为外植体，研究不同灭菌时间对外植体污染的影响，及不同基本培养基对茎段腋芽诱导
的影响。结果表明：楸树茎段最佳的灭菌方案为采用 75%酒精处理 30 s，无菌水冲洗 2 次，每次 20 s。然后用 0.1%升
汞溶液处理 5 min，无菌水冲洗 4~5 次，每次 2 min。腋芽诱导最适培养基为：DKW+6-BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L+ 叶
农业技术与装备
AGRICULTURAL TECHNOLOGY & EL.2019
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文章编号：1673-887X(2019)07-0079-03
楸树外植体灭菌和初代培养的研究
李小艳 1，武新琴 1，潘 亚 2，邢玉娥 2，郑晋娴 2
（1.山西林业职业技术学院园艺系，山西 太原 030009；2.晋中市国营苗圃，山西 晋中 030600）
为了筛选不同基本培养基和植物激素组合对楸树腋芽 诱导的影响，在前人试验的基础上[7~11]，本试验选用了 N6、DKW 和 WPM3 种基本培养基，植物激素选用 了 6-BA1.0 mg/L， NAA0.01 mg/L 和 IBA0.1 mg/L，通过添加和不加叶酸 0.5 mg/L 做对比，共设计了 6 种培养基（见表 1）：①N6+6-BA1.0 mg/L+ NAA0.01 mg/L；② N6+6-BA1.0 mg/L+NAA0.01 mg/L+ 叶 酸 0.5 mg/L；③DKW+6-BA1.0 mg/L+IBA0.1 mg/L；④DKW+6-BA