心肌肌钙蛋白基因中连续AGG的同义替换与GST融合表达

心肌肌钙蛋白基因中连续AGG的同义替换与GST融合表达高丰厚;郑佐娅;王鸿利;王丛珠;赵卫国
【期刊名称】《中国实验诊断学》
【年(卷),期】2005(009)006
【摘要】目的获得高表达、易纯化的GST-cTnT融合蛋白,初步探讨其免疫反应性.方法(1)PCR扩增心肌肌钙蛋白T基因cDNA及其连续稀有密码子的同义替
换;(2)PGEX-4T-3/TnT-1、2、3、4的构建与GST-cTnT融合蛋白的表达和纯化;(3)Western Blot与电化学发光cTnT测定法研究GST-cTnT融合蛋白的免疫反应性.结果成功构建了PGEX-4T-3/TnT-1、2、3、4的表达载体.BL21-PGEX-4T-3/TnT-2、3、4表达的目的蛋白高于BL21-PGEX-4T-3/TnT-1,通过谷胱甘肽-琼脂糖亲和层析得到高纯度的融合蛋白.Western Blot与电化学发光cTnT测定法表明表达的融合蛋白和相应的抗体相互作用,且GST蛋白不与相应的抗体作用.结论cTnT基因上的连续稀有密码子的同义替换,可提高其在E.Coli中的表达量.GST-cTnT融合蛋白中的GST蛋白不影响cTnT的免疫反应性.
【总页数】4页(P875-878)
【作者】高丰厚;郑佐娅;王鸿利;王丛珠;赵卫国
【作者单位】上海第二医科大学,上海市医学检验重点实验室,上海,200023;上海第二医科大学,上海市医学检验重点实验室,上海,200023;上海第二医科大学,上海市医学检验重点实验室,上海,200023;上海第二医科大学,上海市医学检验重点实验室,上海,200023;上海第二医科大学,上海市医学检验重点实验室,上海,200023
【正文语种】中文
【中图分类】Q786
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