《动物细胞融合与单克隆抗体》 导学案

《动物细胞融合与单克隆抗体》导学案
一、学习目标
1、理解动物细胞融合的概念、原理和方法。

2、了解单克隆抗体的制备过程和应用。

3、探讨动物细胞融合和单克隆抗体技术在生物学和医学领域的重要意义。

二、学习重难点
1、重点
（1）动物细胞融合的原理和方法。

（2）单克隆抗体的制备过程。

2、难点
（1）单克隆抗体的制备过程中细胞筛选的原理和方法。

（2）动物细胞融合和单克隆抗体技术的应用。

三、知识梳理
（一）动物细胞融合
1、概念
动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。

2、原理
细胞膜的流动性。

3、诱导融合的方法
（1）物理法：离心、振动、电激等。

（2）化学法：聚乙二醇（PEG）诱导。

（3）生物法：灭活的病毒诱导。

4、意义
（1）突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。

（2）为制造单克隆抗体开辟了新途径。

（二）单克隆抗体
1、传统抗体的制备
（1）向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体。

（2）从动物血清中分离所需抗体。

这种方法的缺点：产量低、纯度低、特异性差。

2、单克隆抗体的制备
（1）免疫小鼠
给小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠产生免疫反应。

（2）骨髓瘤细胞的培养
在体外培养骨髓瘤细胞，使其大量增殖。

（3）细胞融合
将免疫小鼠的 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞在诱导剂的作用下融合。

（4）筛选杂交瘤细胞
在特定的选择性培养基中，未融合的亲本细胞和自身融合的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。

（5）克隆化培养和抗体检测
筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养，并对培养产生的抗体进行检测，筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。

（6）单克隆抗体的大量制备
将筛选出的能产生特定抗体的杂交瘤细胞在体外大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖，然后从培养液或小鼠腹水中提取大量的单克隆抗体。

3、单克隆抗体的优点
特异性强、灵敏度高、可大量制备。

4、单克隆抗体的应用
（1）作为诊断试剂
准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定的抗原发生特异性结合，具有准确、高效、简易、快速的优点。

（2）用于治疗疾病和运载药物
主要用于癌症治疗，制成“生物导弹”，将药物定向带到癌细胞所在部位，既消灭了癌细胞，又不会伤害健康细胞。

四、典型例题
例 1：下列关于动物细胞融合的说法，不正确的是（）
A 动物细胞融合也称细胞杂交
B 动物细胞融合需要用纤维素酶处理
C 动物细胞融合时需要诱导剂
D 动物细胞融合可用于生产单克隆抗体
解析：纤维素酶用于去除植物细胞壁，动物细胞没有细胞壁，B 选项错误。

A 选项，动物细胞融合也称细胞杂交，表述正确；C 选项，动物细胞融合需要诱导剂，如聚乙二醇、灭活的病毒等，表述正确；D 选项，动物细胞融合为制造单克隆抗体开辟了新途径，表述正确。

答案：B
例 2：单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和 B 淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。

在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是（）
①B 淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B 淋巴细胞自身融合细胞④骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞
A ①②③④
B ①③⑤
C ②④
D ①③
解析：特定培养基能选择性地抑制骨髓瘤细胞和 B 淋巴细胞自身融合细胞的增殖，而杂交瘤细胞可以存活和增殖。

B 淋巴细胞在体外不能无限增殖，会很快死亡。

答案：A
五、巩固练习
1、动物细胞融合的目的中最重要的是（）
A 克服远缘杂交不亲和的障碍
B 制备单克隆抗体
C 培育新物种
D 生产杂种细胞
2、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体。

与骨髓瘤细胞融合的细胞是（）
A 经过免疫的
B 淋巴细胞
B 不经过免疫的 T 淋巴细胞
C 经过免疫的 T 淋巴细胞
D 不经过免疫的 B 淋巴细胞
3、单克隆抗体与血清抗体相比，优越之处在于（）
A 单克隆抗体能够制成“生物导弹”
B 单克隆抗体可以在体外制备
C 单克隆抗体的特异性强、灵敏度高，产量也大大高于血清抗体
D 单克隆抗体的制备过程简单
六、拓展阅读
推荐阅读相关的科学文献、科普文章或在线资源，以加深对动物细胞融合和单克隆抗体的理解。

例如：《细胞融合技术的研究进展》《单克隆抗体在医学中的应用》等。

七、学习反思
通过本次学习，你对动物细胞融合和单克隆抗体有了哪些新的认识和理解？在学习过程中遇到了哪些困难？你是如何解决的？
以上导学案内容旨在帮助学习者系统地掌握动物细胞融合与单克隆抗体的相关知识，通过典型例题、巩固练习和拓展阅读等环节，加深对知识的理解和应用能力。