溶血标本中血钾定量校正方法的初探

溶血标本中血钾定量校正方法的初探
摘要】目的在日常标本采集中，常常会遇到溶血，是临床化学检验面临的难以避免的问题，对临床化学检验准确性有一定的影响，但由于其干扰机制不同，对
血钾影响到何种程度，如何纠正，目前未曾见有详细而系统的研究。

特别对急诊
病人可以减少其痛苦缩短救治时间，所以初步探索溶血标本中血钾定量校正方法
可行性。

方法用雅培c8000i测定正常标本血钾K0，再测不同程度的溶血标本血
钾为K1.K2.K3.K4.K5求得K=(K1(2345)-K0)/81为Y轴，在752紫外分光光度仪上412nm处进行比色记录吸光度A为X轴,作直线回归曲线。

结论 K0与A有正相关关系，公式y=0.0346x+0.0012。

【关键词】血钾溶血定量校正
引言
日常工作中,经常能碰到标本溶血的问题。

众所周知溶血标本的检测结果与实
际血清中的结果是有偏差的，其中血钾的偏差尤为明显，因为细胞内的钾是细胞
外钾的20多倍，故由溶血程度的增加而增加。

所以平常工作中我们碰到溶血标本，大多是拒收或令其重抽以排除影响，但问题有些病人是不能重抽的，如有些
要对比补液前后血钾水平的，补液前采集的血溶血，你再令其重抽已是补液中或
补液后了，失去了前后的对比意义。

再如有些红细胞脆性增高的病人，即使你反
复重抽其依然会有不同程度的溶血。

还有些危重病人，是没有时间重抽重做的等。

鉴于以上等因素我认为有必要整理和归纳出一条能够定量校正溶血标本血钾含量
的标准曲线或公式，并且要求校正方法简单重复性好能够满足临床治疗的准确度、易于日常操作、设备利用现有设备。

由于时间、资金、设备、人力、标本收集等
因素，我只能对溶血标本血钾定量校正进行初探。

1 材料与方法
1.1 标本来源选取20例门诊健康体检正常的血液标本，其血清无肉眼可见
的黄疽、脂血和溶血。

10例溶血标本和其重抽后不溶血正常标本，其间没有进行补液等影响血钾的治疗。

1.2 仪器
加样枪 Thermo Labsystems 4027
离心机 Varifuge 3.0RS
雅培全自动生化分析仪c8000i
752紫外分光光度仪
SYSMEX XT1800i 血球仪
1.3 试剂
去离子水
雅培原装试剂、贝克曼质控品1，2
SYSMEX 原装试剂、临检中心血液质控品
1.4 方法
1.4.1曲线回归：分别在真空EDTA-K2抗凝管1mlXT1800i测定HGB，普管内
取1ml备做溶血用,6ml静脉全血分离血清后按常规方法上机测定，记录未溶血血
钾值K0，取血清2ml备用。

1ml全血标本置-20℃1h后，取出化冻、使标本完全
溶血混匀并3000r离心10min待用。

分别取5个小试管加入4ml去离子水待用，
再取溶血上清层10、20、30、40、50u1分别加人到2ml血清中混匀，在每次加
入溶血上清后，分别取出50ul加入4ml去离子水的小试管中制备成不同程度溶血
标本，再取出100ul按常规方法上机测定，记录不同程度溶血血钾值K1.将5个小试管中制备成不同程度溶血标本在752紫外分光光度仪上412nm处以去离子水为空白进行比色分别记录其吸光度A，按上述方法做20人份标本，结果见试验结果表1-1。

1.4.2公式验证：10例溶血标本和其重抽后不溶血正常标本，分别用c8000i 测定血钾为K溶和K0实，在从溶血标本中取50ul血清加入4000ul去离子水中，混匀上752紫外分光光度计测得A，将A带入回归公式y=0.0346x+0.0012得出K0校，将K0校与K0实进行配对t检验。

K0实与K溶配对t检验[3］。

见表1-2。

2 试验结果
2.1原始数据如下表1-1：
图1-1
图1-2
以A为自变量x，（k1-k0）/81为y，做散点图如图1-1，可以看出有明显的正相关趋势。

做直线回归如图1-2得直线回归公式为： y=0.0346x+0.0012 相关系数r=0.966814，查r值表得P<0.01统计学上有正相关关系。

表1-2
(1)建立假设H0:K0实与K0校均数相等 H1: K0实与K0校均数不相等。

(2)t=d/Sd d=0.02 d2=0.6 Sd=S/厂n S=0.23 t=0.26。

(3)K0实与K0校配对t检验如表1-2 按a=0.01 ,t=0.26 ,t0.01=1.83 t<t0.01得P>0.01 接受H0 K0实与K0校均数相等，说明校正后结果有意义。

(1)建立假设H0:K0实与K溶均数相等 H1: K0实与K溶均数不相等。

(2)t=d/Sd d=-1.48 d2=18.8 Sd=S/厂n S=0.35 t=12.3。

(3)K0实与K溶配对t检验如表1-2 按a=0.01查t界值表得t0.01=1.83
t>t0.01 P<0.01 接受H1 K0实与K溶均数不相等，说明不校正结果统计学上有较大差异。

3 讨论
通常人体血钾水平处于相对稳定范围内，当代谢紊乱钾摄入或排泌过多，均可引起钾的升高或降低，影响机体正常生理活动，甚至危及生命［4］。

临床医生判定病人钾水平高低是通过准确测定的血浆钾值，而标本溶血则是血钾值误差的主要原因之一［6］。

红细胞的钾浓度和血红蛋白含量均较为稳定，红细胞内钾的浓度高于血浆水平近20倍［2］。

由于溶液中血红蛋白浓度值在特定范围内(0—300mg/L)时，与其在412 n波长处的吸光度具有较好的线性关系［1］，因为血红蛋白与钾有较好的相关性关系[K]未=[K]溶.-0.513Hb+0.092［5］，所以间接得出吸光度与钾有正相关关系。

由于本试验仅取至正常体检人群没有对低血钾与高血钾病人及细胞内钾相关代谢疾病病人的试验，所以本公式不能对正常人以外的人群进行外延伸，另外对于极特别严重溶血即稀释81倍后其吸光度A>1.2的要进
行再稀释，不在本公式矫正范围内。

在不便采标本补测时，数学校正成为提供准
确结果的补救措施。

通过公式y=0.0346x+0.0012 与公式(K1-K0)/81为Y轴，样本
稀释倍数为81倍，将吸光度代入公式y=0.0346x+0.0012测出K1值求出K0得出
校正结果，经10例临床溶血标本验证，校正结果与实际值符合较好，适合临床
应用。

限于研究时间短，收集标本数目有限，对高血钾及低血钾标本未进一步研究。

综上所述，临床测钾的溶血标本，符合上述条件的不宜重新抽取血液标本时，使用公式y=0.0346x+0.0012 与公式(K1-K0)/81为Y轴进行校正，能提供与实际值
较为接近的测定结果，可作为一种补救措施且无需制备标准液和其它显色剂，直
接在752紫外分光光度仪上412nm处进行比色价廉、快速、操作简便，且具有较好的重复性和线性范围，但本公式的应用范围较局限，希望在今后的工作中能有
所突破。

本文仅为抛砖引玉。

参考文献
[1]华泽钊.冷冻干燥新技术[M].北京:科学出版社，2006.1-5,419-421.
[2]杨麦贵.105例健康成人红细胞内钾浓度测定，第四军医大学学报，1999，11（6）：487.
[3]詹绍康.使用医学统计方法，上海: 科学出版社,1996,（1）:95.
[4]吴立翔.标本溶血对临床检验结果的影响[J].重庆医学，2005,34(11):1717-1719.
[5]陶建,蜀黄海.体外溶血对血钾测定的影响及校正.贵阳医学院学报，2006，6.
[6]沈伽第.溶血对临床生化检验的干扰和影响，中华医学检验杂志，1999，(4)：250-253.。