络石藤总黄酮的提取纯化工艺及抗炎镇痛药理作用的研究
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络石藤总黄酮的提取纯化工艺及抗炎镇痛药理作用的研究
发布时间:2022-08-17T02:21:43.371Z 来源:《健康世界》2022年8期作者:古虹刘小利卿雪梅李俊辉庞茗月[导读] 讨论络石藤总黄酮的提取纯化工艺及抗炎镇痛药理作用。
古虹1刘小利2卿雪梅2李俊辉2庞茗月2
达州中医药职业学院四川达州 635000
【摘要】目的:讨论络石藤总黄酮的提取纯化工艺及抗炎镇痛药理作用。
方法:通过微波+超声法对络石藤总黄酮进行提取,然后根据提取率,再结合统计学处理,对结果进行研究,最终明确最为有效的提取工艺;利用小鼠热板法掌握镇痛作用。
结果:和常规提取法相比,微波+超声法可更快的进行提取;对于抗炎实验来讲,络石藤总黄酮能够起到遏制小鼠耳肿胀的效果,抗炎效果显著;总黄酮在镇痛实验中可提升小鼠痛阈值,镇痛效果显著。
结论:微波+超声法提取络石藤总黄酮能够达到理想的效果。
同时能够使络石藤总黄酮达到理想的抗炎效果。
【关键词】总黄酮;微波+超声波;抗炎;纯化;镇痛
以往主要是通过回流提取法提取黄铜。
而通过长时间的研究后发现,微波+超声波法提取总黄酮,能够达到更好的提取效果。
那么接下来,本文就来对该实验进行充分的研究。
一络石藤总黄酮提取工艺研究
(一)实验材料
超声波清洗器、微波炉、电子天平、恒温水浴锅、循环水多用真空泵、真空干燥箱。
(二)实验药品和试剂
络石藤;无水乙醇、亚硝酸钠、氢氧化钠、芦丁标准品。
(三)实验方法
(1)总黄酮的含量检验
1对照品溶液的制备
将10.6mg芦丁对照品和30%乙醇溶解摇晃均匀,配置0.21mg.mL-1浓度的芦丁对照品溶液。
【1】2供试品溶液的制备
将络石藤粉碎。
把10g络石藤粗粉+200mL70%乙醇放入烧瓶,在70℃状态下加热回流提取,合并滤镜单做供试品溶液。
3选择测定波长
将1.0mL供试品溶液放入25mL容量瓶里,通过紫外-可见分光光度计在400nm-600nm波长范围内检验吸收峰。
4绘制标准曲线
依次将0.0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL的对照品溶液放入到25mL容量瓶,然后混入5%亚硝酸钠,时间6min;放入20%1mL硝酸铝进行均匀摇晃,再放入4%10mL氢氧化钠试液,最后通过紫外-可见分光光度计检验吸光度。
5检验供试品溶液里总黄酮含量
将1mL供试品溶液放入到25mL容量瓶,并检验吸光度,根据标准曲线,对供试品里的总黄酮量和总黄酮提取率进行运算。
【2】提取率(%)=(CVkV o/1000000WV)×100%。
C代表的是回归方程获取的测定液的浓度,单位是ug.mL-1;Vk代表的是测定用容量瓶的体积,单位是mL;V代表的是测定取样体积,单位是mL;W代表的是样品质量;V o代表的是样液总体积,单位是mL。
(四)结果
(1)最大吸收波长的选择
400nm到600nm的范围,芦丁对照品溶液、络石藤总黄酮能够达到最大吸收,同时最大吸收峰波长可分别达到508nm、502nm。
(2)芦丁标准曲线的制备
芦丁检测浓度为8.48ug.mL-1-42.20ug.mL-1,可和吸光度具有不错的线性关系。
(3)供试品溶液的含量
通过检验了解到,供试品里的总黄酮量达到了1.01mg.mL-1,提取率达到了4.06%。
二络石藤总黄酮抗炎镇痛药理作用
(一)实验材料、仪器
(1)实验试剂
氯化钠注射液、天水乙醇、冰醋酸、乙酸、二甲苯、络石藤总黄酮、阿司匹林、角叉菜胶。
(2)实验仪器
电子天平、无菌注射液、热板、打孔器、很稳水浴锅、紫外分光光度计。
(3)实验试剂制备
1 阿司匹林溶液
7.5mg阿司匹林放入50mL蒸馏水里,制备0.15mg.mL-1浓度的阳性对照品溶液。
2 灌胃用总黄酮溶液
将络石藤总黄酮通过蒸馏水制备三个等级剂量组,总黄酮量依次是5.86mg.mL-1、2.93mg.mL-11、1.47mg.mL-1。
(二)镇痛实验
对雌性小鼠予以热板法,将热板温度保持在55℃左右,在还未给药时,对小鼠的痛感反应进行检验,并将结果当做基础痛阈。
【3】对50只小鼠使用二甲苯,进行耳肿胀实验。
持续3d,在最后一次结束后,要在过1h后对小鼠的痛阈值进行检验。
如果小鼠在热板中,持续60s 没有发生舔后足的情况,就要以60s运算。
对数据进行研究,以此掌握络石藤总黄酮的镇痛效果。
【4】
(三)统计学处理
三讨论
以往主要是通过回流提取法提取黄铜。
而通过长时间的研究后发现,微波+超声波法提取总黄酮,能够达到更好的提取效果。
通过本次研究额结果来看,和常规提取法相比,微波+超声法可更快的进行提取;对于抗炎实验来讲,络石藤总黄酮能够起到遏制小鼠耳肿胀的效果,抗炎效果显著;总黄酮在镇痛实验中可提升小鼠痛阈值,镇痛效果显著。
综上所述,微波+超声法提取络石藤总黄酮能够达到理想的效果。
可使络石藤总黄酮达到理想的抗炎效果。
【参考文献】
[1]赵晨晨,承伟,王立冬. 微波辅助提取络石藤总黄酮的工艺研究[J]. 中草药,2012,43(04):718-720.
[2]赵晨晨. 络石藤总黄酮的提取纯化工艺及抗炎镇痛药理作用的研究[D].辽宁医学院,2011.
[3]赵晨晨,王立冬,承伟,程晓荣,薛志彬. 超声波辅助提取络石藤总黄酮的工艺研究[J]. 安徽农业科学,2011,39(04):2080-2081.
[4]周群,傅海滢,白佳伟,藜藜. 紫外分光光度法测定络石藤中总黄酮含量[J]. 时珍国医国药,2007,(02):351-352.。