中药防治脚气鞋垫的制作以及相关试验摘要提取中药配方中的有效

中药防治脚气鞋垫的制作以及相关实验
摘要：提取中药配方中的有效成分
对有效成分进行红色毛癣菌抗菌实验
制作含有效成分提取物的鞋垫
寻找试用者评价鞋垫
关键字：红色毛癣菌中药提取抗菌鞋垫试用者
脚气，又称脚弱。

本病以足胫麻木、酸痛、软弱无力为主症。

隋·巢元方《诸病源候论》对本病作了细致的论述。

临床根据其症状表现，主要分为干脚气、湿脚气和脚气冲心等。

南方之地，气候潮湿、暑热及瘴病旺盛，尤以岭南地区为甚。

方中苦参苦寒燥湿，消肿止痒，蛇床子杀虫止痒，渗湿消肿，薄荷、冰片清热止痛，消肿杀菌，狼毒散结杀虫为治疗皮癣之要药。

本品的优点：以鞋垫作为载体，解决了残留在鞋内与脚部进行相互感染的脚部真菌。

作用持续，在鞋垫保持药效的期间内可以做到持续的治疗，有益于做到根除真菌。

操作简便，穿鞋的同时就能进行治疗，无需进行其他操作。

成本低廉，选用中药材和鞋垫做原材料，成本只比普通鞋垫
稍高。

择药原理：方中苦参苦寒燥湿，消肿止痒，蛇床子杀虫止痒，渗湿消肿，薄荷、冰片清热止痛，消肿杀菌，狼毒散结杀虫为治疗皮癣之要药。

丁香：主要成分丁香酚具有抑菌、麻醉、解热、抗氧化、抗肿瘤等多种药理活性[1] 。

苦参：苦参碱类生物碱的成分众多，目前认为具有药理活性的5种主要生物碱是苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、槐胺碱
及槐定碱，经实验证明有一定的抗菌活性[2]。

蛇床子：β谷甾醇、单萜、倍半萜、萜醇类、蛇床子素，具有抗菌作用和止痒作用[3]。

芦荟：含芦荟大黄素，芦荟大黄素能有效促进创伤愈合剂量为300ug/ml时疗效最佳，通过增加皮肤及皮肤血管相关生
长因子的表达水平，从而促进创伤愈合[4]。

野菊花：萜类和挥发油，包括单萜、倍半萜、二聚倍半萜、三萜及其含氧衍生物等，其中大部分存在于挥发油中。

药理学
研究表明野菊花提取物具有抗菌抗病毒药理作用，临床上
主要用于抗菌消炎，清热解毒[5]。

薄荷：含薄荷油、薄荷醇，均可以剂量依赖性地抑制某类真菌的生长和繁殖[6]。

狼毒：多种具有较强生理活性的二萜类成分，具有真菌抑制作用
[7]。

薰衣草：薰衣草精油中主要成分芳樟醇能抑制10种真菌的生长
[8]。

冰片：主要成分为龙脑，对黑曲菌等真菌有抗菌作用, 冰片作用后的黑曲菌细胞壁变厚,细胞内的部分细胞器被破坏[9]。

1. 材料与方法
1.1 仪器
电子天平（JA31002上海精天电子仪器有限公司、FA1004上海天平仪器厂）， TGL-16GA高速冷冻离心机（上海安亭科学仪器厂），TBA-40FR全自动生化仪（东芝医疗系统有限公司），LEICA TP 1020半自动台式组织脱水机，LEICA EG 1160 石蜡包埋机，LEICA RM2235石蜡切片机，LEICA AUTOSTAINER XL 自动染色机，LEICA DMRE 研究型显微镜（德国徕卡），酶标仪（Thermo Scientific Microplate Reader）
1.2 药品
芦荟（批号：150226 上海康桥中药饮片有限公司）
苦参（批号：150915 上海康桥中药饮片有限公司）
薄荷（批号：150518 上海康桥中药饮片有限公司）
野菊花（批号：150713 上海康桥中药饮片有限公司）
蛇床子（批号：150104 上海康桥中药饮片有限公司）
冰片（批号：150701 上海康桥中药饮片有限公司）
丁香（批号：150508 上海康桥中药饮片有限公司）
薰衣草（批号：20150128 大同市城区福华堂大药房）
狼毒（批号：20150117 大同市城区福华堂大药房）
盐酸特比萘芬乳膏（批号：140802，国药准字H20059206）
1.3 试剂
石油醚（批号：20150216、20150410、20151225 国药集团化学试剂有限公司）
甲醇（批号：20150413、201512228国药集团化学试剂有限公司）白凡士林（批号：20150521 国药集团化学试剂有限公司）
滑石粉（批号：20150330 国药集团化学试剂有限公司）
蛋白胨、葡萄糖、氯霉素、琼脂
1.4 试验方法
1.4.1 有效成分的提取:
取丁香18g 、 苦参54g 、 蛇床子60g 、 野菊花90g 、
薄荷36g 、 狼毒36g 、 薰衣草60g 、 冰片1.8g
加石油醚3000ml于烧杯中，常温超声提取60min后抽滤，重复2次合并滤液
将滤液于45℃下旋转蒸发至糊状以甲醇溶出转移至小烧瓶中继续旋干
1.4.2 对有效成分进行药理实验：
1.4.
2.1 不同浓度软膏制备：取干燥提取物加入凡士林混合成70%、50%、30%%浓度的软膏
1.4.
2.2 活化菌株 真菌用沙堡弱液体培养基，28℃活化2次。

1.4.
2.3 制作菌悬液 挑取约芝麻粒大菌落，溶于1ml灭菌蒸馏水，充分混合均匀，调节菌悬液浊度为（0.5～1）麦氏浊度，相当于5×106～10×106CFU/ml。

1.4.
2.4 制作含菌平板 取直径9cm培养皿，加入熔化培养液20 ml，制作成沙堡弱培养基平板，将各菌悬液100μl用玻璃涂布棒均匀涂布于各培养基平板表面。

1.4.
2.5 打孔法加药
配置被检药物溶液：不同浓度的药物软膏。

阳性药物：软膏。

阴性样品：白凡士林。

用灭菌后的打孔器在90mm培养皿上打孔，每个培养皿打3个孔，孔之间呈等边三角形。

然后往每个孔里挤药物，直至药物填平孔为止。

1.4.
2.6 培养条件 真菌置28℃培养7天。

1.4.
2.7 结果观察 观察每块平板中每个滤纸圈抑菌圈大小并记录其直径mm值。

抑菌圈直径取最大径和最小径的均数（或用最大和最小半径的均数×2代表直径）。

1.4.
2.8 统计方法 以SPSS软件分析全部数据。

比较各药膏周围形成的对各实验菌株抑菌圈直径。

不同药物组间比较采用单因素方差分析后，用最小显著差数法（LSD法）作两两比较，相
同药物相同菌株之间比较采用t检验。

1.4.3 制作含有效成分提取物的鞋垫：
取干燥提取物与滑石粉以1:3比例混匀，分为1.2g为一袋，4袋分为一组
将4袋药粉分别缝于鞋垫的上下端，封口，再加盖两层薄布以免药粉泄露
1.4.4 试用者及其反馈
寻找不同年龄、性别的试用者评价鞋垫的疗效、舒适度、气味以及整体满意度。

2 结果与分析
2.1 经石油醚超声提取得提取物1.1g/100g
2.2 药理结果图片
浓度杀灭半径菌圈图片
30% 0.15
50% 0.50
70% 2.00
阴性0
阳性 1.25cm
2.3 鞋垫样品
2.4试用者结果反馈调查结果图表2.4.1 试用者使用前后对比图
1号试用者
2号试用者
左脚使用后
3号试用者
4号试用者
5号试用者
2.4.2调查表结果统计表
参考文献：
[1]朱金段,袁德俊,林新颖. 丁香的药理研究现状及临床应用[J].中国药物经济学,2013,01:32-35.
[2]胡艳丽,郭丽,贾晓红. 苦参总碱分离纯化方法的研究[J]. 食品科学,2007,01:32-36.
[3]陈艳,张国刚,余仲平. 蛇床子的化学成分及药理作用的研究进展[J]. 沈阳药科大学学报,2006,04:256-260.
[4]李牧,杜智敏. 芦荟大黄素的药理作用研究进展[J]. 中国临床药理学杂志,2015,09:765-768.
[5]陈传千,沈艳平,屈跃丹,王春雨,单广胜,朱小芳,范红艳. 野菊花提取物药理作用的研究进展[J]. 吉林医药学院学报,2010,03:175-178.
[6]景玉霞,兰卫. 薄荷的化学成分和药理作用[J]. 新疆中医药,2012,04:122-124.
[7]杨柯,王义善,王莉平,胡蓉蓉,王鑫,谷金. 狼毒药理作用研究及临床应用情况概述[J]. 医学信息,2010,07:2496-2498.
[8]王静. 薰衣草化学成分和药理作用的研究进展[J]. 金田,2014,09:494.
[9]吴寿荣,程刚,冯岩. 冰片药理作用的研究进展[J]. 中草药,2001,12:90-92.。