考马斯亮蓝法测定黄精蜗牛胶囊中蛋白质的含量

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１００ｒｔｇ／ｍ１。
２．３供试品溶液的制备精确称取２ｇ供试品，充分溶于蒸馏水，滤过，用蒸馏水冲洗滤纸，合并滤液定容于１００ｍｌ容量瓶ｔ精密吸取２ｍｌ，定容于１０００ｍｌ容量瓶，
配成浓度为４０￣ｔｇ／ｍｌ的供试品溶液。
７，讨论考马斯亮蓝Ｇ－２５０（ＣｏｏｍａｓｓｉｅＧ一２５０）是一种甲基取代的三苯基３．蛋白标准曲线及回归方程甲烷，能与蛋白质通过范德华力相互作用形成蛋白质～考马斯亮蓝复合精密量取浓度为２０、４０、６Ｏ、８０、１００ｌａｇ／ｍｌ蛋白标准溶液０．５ｍｌ／￣物蓝色溶液，在５９５ｎｍ处有最大吸收，可大大地提高蛋白质的测定灵敏别于５支ｌＯｍｌ：ｌ￣塞试管，再加入２．５ｍｌ考马斯亮蓝Ｇ－２５０溶液，摇匀后，度。蛋白质一考马斯亮蓝复合物溶液颜色的深浅与蛋白质的浓度成正放置５ｌＯｍｉｎ，待其充分反应后，用紫外分光光度计于５９５ｎｍ处测定吸比。用此法测定蛋白质含量灵敏度高，测定快速、简便，干扰物质少光度，对牛血清白蛋白溶液浓度和吸光度进行线性回归，建立回归方本实验显示在加考马斯亮蓝溶液后１０ｍｉｎ２０ｍｉｎ内完成测定样品
回归方程为：Ｃ＝２．７５６＋５１８．５７４．Ａ，相关系：０．９９８５，表明蛋白标准溶液在２０～１Ｏ０ｇ／ｍｌ范围内浓度与吸光度具有良好的正相关性稳定性在２０ｍｉｎ￣，Ｐ，ＳＤ＝２．４４％，在６０ｍ｝ｎ内，ＥＳＤ＝４．８５％，皆＜５％。平均加样回收率为囊的质量控制方法。
品质量标准，控制产品质量。实验方法：
光度最好是在加考马斯亮蓝溶液后ｌＯｍｉｎ２０ｍｉｎ内完成，在４０６０ａｉｒｎ内，随着时间的延长，吸光度值略有下降，结果见表３。
ｌ驶光度
３４
Ａ９
５
法，测定吸光度，代入回归方程，计算加样回收率。三组不同浓度的供试２、试液配制品加样回收率在１００％－１１０％之间，平均值为１０６．５７％，ＲＳＤ＝３．２６％，表２．１蛋白标准溶液的制备明用考马斯亮蓝法测定黄精蜗牛胶囊的蛋白含量结果较准确，方法可将牛血清白蛋白标准品溶于蒸馏水，配成浓度为１００ｇ／ｍｌ的蛋行，结果见表４。裹４加样回收实验结果白标准溶液，精密量取浓度为１００ｐｇ／ｍ１的蛋白标准溶液１０ｍｌ、２０ｍｌ、３０ｍｌ、４０ｍｌＪＪＩｌ蒸馏水定容于５０ｍｌ容量瓶，浓度分别为２０、４０、６０、
１仪器与试药１－１仪器：紫外分光光度计，岛津ＵＸ－２４５０；
分析天平，ＦＡ２００４，上海方瑞仪器有限公司１．２试药：牛血清白蛋白标准品，中国药品生物制品检定所，考马斯亮蓝Ｇ５０，国药集团化学试剂有限公司。黄精蜗牛胶囊由上海新亚药业邗江有限公司提供。
ＲＳＤ＝２．４４％，在６０ｍｉｎ内，ＲＳＤ＝４．８３％，皆＜５％。提示测定样品的吸
Ｉ关键词】黄精蜗牛胶囊；考马斯亮蓝法；分光光度法蛋白质是一切生命的物质基础，是机体细胞的重要组成部分。蜗牛是陆地上最常见的软体动物之一，含有大量的蛋白质，具有很高的食用和药用价值。本公司研制的黄精蜗牛胶囊以蜗牛为主料，佐以黄精、党参等药材，产品可以调节机体代谢，增加人体免疫功能。本文使用考马斯亮蓝法测定黄精蜗牛胶囊中蛋白质含量，以确定产
５稳定性实验取供试品溶液，按实验方法４中的方法，在６０ｍｉｎ内的，每隔１０６．５７％，ＢＳＤ＝５．２６％。结论：该方法简单、方便、准确，－－ｒ－￣为黄精蜗牛胶１０ｍｉｎ测定一次供试品的吸光度值，观测其稳定性，在２０ｍｉｎ内，
２２５１２７
表２黄精蜗牛胶囊中蛋白质含量
样品Ｉ１１２ｌ３吸光￣Ａ５９５１Ｏ．０５９ｌＯ．０６０１０．０５７蛋白质含量（ｇ／ｌＯＯｇ）ｌ５３．８Ｉ５４．６ｌ５２．３
科技卷
考马斯亮蓝法测定黄精蜗牛胶囊中蛋白质的含量
张政经瑁上海新亚药业邗江有限公司江苏扬州
【摘要Ｉ目的：制定产品质量标准，控制产品质量。方法：采用考马
斯亮蓝法测定黄精蜗牛胶囊中蛋白质含量。结果：考马斯亮蓝染色，用紫外分光光度计，在５９５ｎｍ处测定不同浓度蛋白标准溶液的吸光度。线性
６加样回收率实验结果
精密量取浓度为４０ｇ／ｍｌ的供试品溶液０．２５ｍｌ｝ＪＷ入１０ｍｌ具塞试管，分为三组，每组６个重复，再加入与供试品溶液相同体积的蛋白标准溶液，分别浓度为１６￣ｇ／ｍｌ、２０￣ｔｇ／ｍｌ、２４ｌａｇ／ｍｌ。按实验方法４中方
８０ｐｇ／ｍ１。
２．２考马斯亮蓝Ｇ－２５０溶液的制备精确称取考马斯亮蓝Ｇ一２５０１００ｍｇ，溶于５０ｍ１９０％的乙醇，加入８５％（Ｗ／Ｖ）磷酸１００ｍｌ，用蒸馏水定容于１０００ｍｌ