苏木素-伊红染色液 (混合型)
苏木素伊红染色
苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E）【型号】苏木素染色液分别为：Mayer型、改良Harris型、改良Lillie-Mayer型；伊红染色液分别为：水溶型、醇溶型；苏木素-伊红染色液混合型。
【包装规格】货号：DH0006单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；每套/盒包装规格分别为：2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛，苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法，在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。
因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色，红细胞则呈橙红色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或木素染色液(改良Harris)或木素染色液(Mayer) 苏木色精伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶) 伊红苏木素-伊红染色液混合型苏木色精、伊红【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】涂片和切片必须充分固定，石蜡切片要充分脱蜡。
【检验方法】l、石蜡切片于二甲苯I、II中各脱蜡若干分钟；2、经无水乙醇和95%乙醇各约若干分钟，经8O%乙醇若干分钟，自来水冲洗若干分钟；3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色若干分钟，自来水洗若干分钟；或苏木素染色液(Mayer)染色若干分钟；或苏木素-伊红染色液(混合型)染色若干分钟；4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制：99m1 75%乙醇加1ml浓盐酸）；若用苏木素染色液(Mayer)和苏木素-伊红染色液(混合型)染色后则不需分化；5、自来水冲洗返蓝若干分钟；亦可用碳酸锂水溶液返蓝若干秒，自来水洗若干分钟；6、入伊红染色液(水溶)染色若干分钟，稍洗；若用伊红染液(醇溶），切片应先经80%乙醇脱水后，再入伊红染液(醇溶)染色若干分钟(忌水洗）；此步骤苏木素-伊红染色液(混合型)不适用。
苏木素伊红HE染色实验说明
苏木素伊红(HE)染色试剂盒北京华越洋----------------------------------------------------------------------------------------- -产品简介：Ø华越洋生物生产的苏木素伊红(HE)染色试剂盒(Hematoxylin and eosin staining kit)综合了多种经典的HE染色方法，例如Harris法、Mayer法等，简化了操作步骤，缩短了操作时间，并且染色液内不使用汞、甲醇等有毒试剂。
可以用于组织切片或培养细胞的染色。
Ø 苏木素伊红染色后细胞核呈现蓝色，细胞浆呈现粉红色或红色。
Ø 本试剂盒可以和免疫荧光染色配合使用。
使用的苏木素伊红染色试剂盒，染色后可以进行免疫荧光染色或其它染料的染色。
Ø 染色液可以重复使用，直至认为效果不佳时再换用新的染色液。
本试剂盒至少可以染色300个样品。
包装清单：苏木素染色液: 200毫升伊红染色液:200毫升说明书:1份保存条件：室温保存，至少一年有效。
注意事项：Ø 需自备4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。
如果需要脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯、中性树胶或其它封片剂。
如果样品是石蜡切片，需自备90％乙醇、无水乙醇以及二甲苯。
Ø 染色液可以重复使用多次，认为效果不佳时再更换新的染色液。
样品数量很多时，可以使用碧云天生产的染色架和染色缸，便于操作。
Ø 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。
Ø 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：1.样品处理a) 对于石蜡切片：二甲苯中脱蜡5-10分钟。
换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟。
无水乙醇5分钟。
90%乙醇2分钟。
70%乙醇2分钟蒸馏水2分钟。
b) 对于冰冻切片：蒸馏水2分钟。
c) 对于培养细胞：用4%多聚甲醛固定10分钟以上。
河南赛诺特生物 苏木素-伊红（H-E）染色液产品说明书
苏木素-伊红（H-E）染色液产品说明书【产品名称】通用名称：苏木素-伊红（H-E）染色液英文名称：Hemaxytolin-Eosin(HE)Staining kit【包装规格】500mL/瓶，5瓶/盒【预期用途】用于对石蜡切片和冰冻切片的细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素经过氧化变成酸性染料苏木红，苏木红与三价铝离子结合形成带正电荷的蓝色色精，便可与细胞中带负电荷的脱氧核糖核酸结合。
苏木素染液主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红Y为酸性胞质性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
【主要组成成份】每套苏木素-伊红（HE）染色液试剂盒是由高清恒定液（A液）、苏木素染液（B液）、分化液（C液）、返蓝液（D液）、伊红染液（E液）组成。
每套苏木素-伊红（HE）染色液试剂盒的主要成分为：1)高清恒定液（A液），由专用稳定剂等成分组成；2)苏木素染液（B液），主要由苏木素、乙二醇、硫酸铝钾等成分组成；3)分化液（C液），主要由酒石酸等成分组成；4)返蓝液（D液），主要由Tris、氯化钠和防腐剂等成分组成；5)伊红染液（E液），主要由伊红二钠Y和乙醇等成分组成。
【储存条件及有效期】试剂盒应存放于室温（15-30℃），有效期为12个月，在有效期内的已开封试剂使用期限为3个月。
每次用后应及时盖上盖子，以免挥发或变质。
【适用仪器】手动常规染色和全自动染色机染色。
【样本要求】病理组织经取材，福尔马林固定，脱水处理，用石蜡包埋后制成蜡块，用切片机切成2-5μm厚度的组织切片采集到载玻片上（有些特殊类型的组织可能要求不同的切片厚度）。
之后将载玻片放置于烤片机上65℃（±5℃）下烤片10-30分钟，即可染色。
【检验方法】1、二甲苯I、II、III脱蜡各2-4min；2、无水乙醇I、II、III各2min；3、95%乙醇15s；4、75%乙醇15s；5、水洗1min；6、高清恒定液30s-60s；7、苏木素染液3-5min；8、水洗1min；9、分化液3-15s；10、水洗1min；11、返蓝液1-2min；12、水洗1min；13、95%乙醇30-60s；14、伊红染液20-60s；15、无水乙醇I、II、III各2min；16、二甲苯I、II、III各2min。
苏木素伊红(HE)染色试剂盒说明书
苏木素伊红(HE)染色试剂盒货号：AG1120规格：3×10ml/3×100ml保存：常温保存，复检期至少1年。
注意：环境温度低时，分化液可能会结晶析出，将分化液37℃水浴融化后即可，不影响使用。
产品说明：苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-Eosin staining )，简称HE 染色法，是病理学常规制片中最基本的染色方法。
苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
染色过程需要优化，着色情况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变。
例如，很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。
胶原纤维在老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。
本产品所包含试剂均为工作液，可直接使用。
操作说明（以下步骤仅供参考）：（一）石蜡组织切片染色。
1．取材组织块，经固定后，常规石蜡包埋，切片。
2．石蜡切片脱蜡水化：①二甲苯（I ）中脱蜡5min 。
②换用新鲜的二甲苯（Ⅱ），再脱蜡5min 。
③无水乙醇5min 。
④95%乙醇2min 。
⑤80％乙醇2min⑥70%乙醇2min 。
⑦蒸馏水2min 。
3．苏木素染液染色5-20min(具体时间根据染色结果和实验要求调整)，自来水冲洗。
4．分化液分化30s 。
5．自来水浸泡15min 或温水（约50℃）5min 。
6．置伊红染液几秒-2min(具体时间根据染色结果和实验要求调整)，自来水冲洗。
7．自来水浸泡1-2min 。
8．脱水，透明，封片：①95％乙醇（I ）1min②95％乙醇（Ⅱ）1min③100％乙醇（I ）1min 产品内容AG1120-10AG1120-100苏木素染液10ml 100ml 分化液10ml 100ml 伊红染液10ml 100mlShanghai Acmec Biochemical Co.,Ltd.Tel ：400-900-4166WEB ：④100％乙醇（Ⅱ）1min⑤二甲苯石炭酸（3：1）1min⑥二甲苯（I）1min⑦二甲苯（Ⅱ）1min⑧中性树胶封固，镜下观察。
石蜡切片(苏木精-伊红对染法)
石蜡切片制作(苏木精-伊红对染法)实验原理：石蜡切片是最基本的切片技术，冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。
苏木素与伊红对比染色法（简称H.E.对染法）是组织切片最常用的染色方法。
这种方法适用范围广泛，对组织细胞的各种成分都可着色，便于全面观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可长期保存。
经过HE染色，细胞核被苏木素染成蓝紫色，细胞质被伊红染色呈粉红色。
一、器材及试剂：1. 器材：切片刀，切片机，恒温箱，蜡杯，酒精灯，解剖刀，解剖剪，解剖盘，培养皿，镊子，单面刀片，毛笔，包埋盒，染色缸，盖玻片，载玻片，玻片盘，树胶，树胶瓶，显微镜，温度计，脸盆，水浴锅。
切片机，切片刀，温台，恒温箱，解剖刀，镊子，剪刀，解剖针，单面刀片，小台木，洒精灯，包埋纸盒，染色缸，烧杯，水盆，熔蜡炉，蜡杯。
2．试剂：中性福尔马林固定液、各种浓度的酒精、二甲苯、石蜡、蜂蜡、苏木精染液， 1%伊红酒精溶液，1%盐酸酒精溶液，甘油蛋白粘片剂，中性树胶。
卡诺（Carnoy）固定液，埃利希苏木精染液，1%伊红酒精溶液，1%盐酸乙醇液，各级酒精（30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%），二甲苯，甘油蛋白粘片剂，中性树胶。
3. 材料：鼠肝、肾、心肌、骨骼肌或其他组织、大豆或小麦、绿豆、洋葱、大蒜、蚕豆的根、茎、叶等。
二、实验原理：石蜡切片是最基本的切片技术，冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。
苏木素与伊红对比染色法（简称H.E.对染法）是组织切片最常用的染色方法。
这种方法适用范围广泛，对组织细胞的各种成分都可着色，便于全面观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可长期保存。
经过HE染色，细胞核被苏木素染成蓝紫色，细胞质被伊红染色呈粉红色。
三、试剂配法：1．中性甲醛固定液：甲醛（37%-40%，市售，本所购买即为此浓度） 100mL磷酸氢二钠 6.5磷酸二氢钾（钠） 4g双蒸水 900mL 2．苏木精、伊红染色液为碧云天产品3．1%盐酸乙醇液盐酸 1份70%酒精 100份4．甘油蛋白贴片剂：蛋白 50 ml甘油 50 ml水杨酸钠（防腐剂） 1g配制时将鸡蛋一个打破入碗或杯中，去蛋黄留下蛋白，用玻棒调打成雪花状泡沫，然后用粗纸或双层纱布过滤到量筒中，经数小时或一夜，即可滤出透明蛋白液。
苏木素伊红混合染色液(一步法)
苏木素伊红混合染色液(一步法)简介：苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛。
苏木精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的结晶，是一种碱性染色剂，它在被氧化后生成苏木素，同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)一起使用，能够使细胞核染色。
在病理诊断、教学和科研工作中，常用HE染色对正常组织和病变组织进行形态结构观察。
在HE染色的组织切片中，细胞核呈蓝色，细胞浆呈红色，二者形成鲜明的对比，易于观察分析。
Leagene苏木素伊红混合染色液是把苏木素和伊红混合在一起，只需对细胞、组织等样本染色一次，既能使苏木素上色亦可使伊红上色的新型染色液，可用于染色样本的类型有石蜡切片、冰冻切片、血液涂片、培养细胞以及体液涂片(如宫颈粘液涂片、脑脊液涂片等)等，本产品尤其适用于血液涂片和体液涂片染色。
染色原理：1、细胞核染色的原理：苏木素为碱性天然染料，可使细胞核着色。
细胞核内染色质的成分主要是DNA，在DNA 双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。
苏木素在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。
2、细胞浆染色的原理：伊红是一种化学合成的酸性染料，在一定条件下可使细胞浆着色。
细胞浆的主要成分是蛋白质，为两性化合物，细胞浆的染色与染液的pH值密切相关。
当染色液pH值在胞浆蛋白质等电点(4.7～5.0)以下时，胞浆蛋白质以碱式电离，则细胞浆带正电荷，就可被带负电荷的酸性染料染色。
伊红在水中离解成带负电荷的阴离子，与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合，使细胞浆着色，呈现红色。
3、分化作用：染色后，用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去，这个过程称为分化作用，所用的溶液称为分化液。
在HE染色中常用盐酸乙醇作为分化液，因酸能破坏苏木素的醌型结构，使组织与色素分离而退色。
(仅供参考)苏木素伊红染色液说明书
苏木素-伊红染色液（H-E）说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液（H-E）H&E Staining System【产品编号】HE-500ml,HE-1000ml,HE-2500ml【包装规格】苏木素染色液500ml、1000ml2500ml；伊红染色液500ml、1000ml 2500ml；返蓝染色液500ml、1000ml2500ml。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素-伊红染色液（H-E）由3部分组成：苏木素染色液、伊红染色液和返蓝染色液。
苏木素氧化后与金属媒染剂作用，可形成不可替代的细胞核颜料。
带有正电荷的苏木素-金属媒染剂复合体，易与细胞核内DNA上带负电荷的磷酸基团结合，因而使细胞核染色形成特定的蓝色。
伊红染色液是一种广泛用于组织学染色中与苏木素染色形成对比的染料（HE染色法）。
此染色法可观察到清晰的细胞结构。
样本中细胞核可经苏木素染色呈蓝色，细胞质经伊红染色呈粉红色。
伊红是一种阴离子染料，可将红细胞染成亮红色，同样也可对其他基本的细胞组分（细胞质，胶原及肌纤维）进行染色。
返蓝染色液为组织学染色试剂，可替代水洗，快速使核染色质和核膜显现蓝色。
由于其坚硬度和碱性，水冲洗后改变苏木素染核后的颜色。
使用BioGnost 返蓝染色液，粘附在玻片上的样本不会发生像使用其他返蓝染色液时发生降解。
【主要组成成分】苏木素：乙二醇、苏木素、碘酸钠、硫酸铝；伊红：伊红、乙醇；返蓝染色液：碳酸锂。
【储存条件及有效期】保证产品包装完整的情况下，储存温度在+15°C和+25°C 之间。
保持储存环境干燥，不要放置于寒冷的环境中，不要冷冻产品，避免直接阳光直射。
产品使用效期为2年，具体效期见标签。
【适用仪器】不适用【样本要求】使用合适的设备仪器收集组织样本，并标记清楚，根据操作说明进行实验。
为避免发生错误，染色及诊断过程最好由具相关专业知识的技术人员操作。
根据标准医疗诊断实验室标准镜检诊断。
苏木素伊红(HE)染色试剂盒
苏木素伊红(HE)染色试剂盒产品简介：苏木素(Hematoxylin)和伊红( Eosin)染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用机器广泛。
苏木精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的结晶，是一种碱性染色剂，它在被氧化后生成苏木素，同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)一起使用，能够使细胞核染色。
在病理诊断、教学和科研工作中，常用HE染色对正常组织和病变组织进行形态结构观察。
对于确定或鉴别病变组织、细胞中出现的某些异常物质与特殊成分，而需要采用的特殊染色方法、酶组织化学方法、免疫组织化学方法等也均是在观察HE染色组织切片的基础上进行的。
在HE染色的组织切片中，细胞核呈蓝色，细胞浆呈红色，二者形成鲜明的对比，易于观察分析。
Leagene苏木素伊红染色试剂盒中，苏木素染色液采用进口的高纯度苏木精、硫酸铝钾、甘油等组成，不含氧化汞、甲醇等有害物质，对细胞核染色效果好。
其特点：长期保存，不易产生沉淀和金属; 应用范围广，可以用于人、动物、畜牧、水产等领域，可以用于组织石蜡切片、冰冻切片和组织细胞的染色等；苏木素染色液可以重复使用。
染色原理：1、细胞核染色的原理：苏木素为碱性天然染料，可使细胞核着色。
细胞核内染色质的成分主要是DNA，在DNA 双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。
苏木素在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。
2、细胞浆染色的原理：伊红是一种化学合成的酸性染料，在一定条件下可使细胞浆着色。
细胞浆的主要成分是蛋白质，为两性化合物，细胞浆的染色与染液的pH值密切相关。
当染液的pH值在胞浆蛋白质等电点(4.7～5.0)以下时，胞浆蛋白质以碱式电离，则细胞浆带正电荷，就可被带负电荷的酸性染料染色。
伊红在水中离解成带负电荷的阴离子，与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合，使细胞浆着色，呈现红色。
苏木素-伊红染色切片褪色的解决办法
（ 稿 日期 ：０ ０ ０ — ２ 收 ２ １－ ６ ０ ）
有机溶剂， 与水互不相溶， 因此需要借助乙醇使组织切片从无
水状态进入到 乙醇 中进行染色反应Ｉ ④放人 １０ 。 】 。 ０ ％乙醇 Ⅱ ５
ｍｎ ⑤放人 ９％乙醇 ５ｍｎ再放入 ８％ ７％７醇各 ５ｍｎ ｉ。 ５ ｉ， ０ 、０ － － ， ｉ，
水水洗是洗去未与组织 结合 的染液 ，将切片表面的浮色洗干
１～ ４ ， ２２ 盖玻片 自 ｈ 动脱落。②将带有组织的盖玻片用镊子整
齐地夹放在染 色架 ， 泡入二 甲苯 Ⅱ溶液 以浸过盖玻 片为宜 ， 时
间 ３ ～ ５ｍ ｎ 洗净黏附在组织上的 中性树胶 吸水 纸吸干 Ｏ ４ ｉ， 用 液体 。③放入 １０ ０ ％乙醇 Ｉ ｎ 由于二 甲苯属于非水性 的 ５ｍｉ，
不易脱落 ， 将其浸泡在二甲苯 Ｉ 溶液时 ， 放人 ３ ～ Ｏ℃烤箱内 ７４
陈旧褪色的石蜡切 片重染方法 ，通常都采 用酸性高锰 酸
钾氧化 、 酸氧化 漂白还原 法日 １ ％冰醋酸１ 高锰酸钾 、 草 和 ０ ３ ］ ， 草 酸氧化漂 白还原法会使组织略带 酸性 ， 破坏组 织正 常结构 ， 形 成空洞和脱落。１ ％冰醋酸脱色法通常需要 ２ ３ｂ作用 时间 ０ － ， 长， 不易掌握 。 笔者 经过 反复试 验证 明 Ｈ Ｅ染色 ，％盐 酸 乙醇分 色 和 １ １ ％氨水 溶液返蓝 ， 重染着色效 果理想 ， 苏木 素染 色后的 自来
３ 章克萍 ， 龙飞． 组织苏木素 一 伊红染 色的石蜡切片褪色后 还原 对 比染色 ． 实用临床医学 ， ０ ８ １ ９ ： ６ ２ ０ ， （ ） １．
来水流水 冲洗 １～ ０ ｉ。 ０２ ｎ ⑩蒸馏水过洗 １２ 。 ｍ ⑩放入 ８％、 ｓ ０ ７％乙醇各 ５ ｉ ⑩ ０ ％ ０ ｎ ｍ 。 ． 伊红乙醇溶液 ３５ ｉ ５ ￣ ｎ ｍ 伊红乙醇
苏木精-伊红染色
作业
1、为什么生物体的组织要经过如此繁琐的步骤才能观察其组织结 构？
2、查阅文献，有哪些文章采用石蜡包埋切片和H.E.染色？ 3、通过查阅文献，谈一下石蜡包埋切片和H.E.染色的用途。 • 文献格式： • 作者. 文章题目. 期刊名称，年，卷（期）：起止页码 • 崔龙波，周雪莹，黄秀英，孙方臻. 年轻与老龄小鼠未成熟卵
母细胞之间的生发泡移植. 细胞生物学杂志， 2007，29（2）： 232-236 • Cui L B, Huang X Y and Sun F Z. Nucleocytoplasmic ratio of fully grown germinal vesicle oocytes is essential for mouse meiotic chromosome segregation and alignment, spindle shape and early embryonic development. Human Reproduction, 2005，20(10): 2946-53
• 须经氧化，加氧化剂（如碘酸钠）氧化。
• 须经媒染剂作用，加有媒染剂（硫酸铝钾）。
• 苏木精液主要着染细胞核。
• 有数种不同配方的苏木精液。
• Mayer(梅耶)氏苏木精液：
苏木素
1g
硫酸铝钾 50g
碘酸钠
0.2g
水合氯醛 50g
柠檬酸
1g
蒸馏水
1000ml
2、伊红（曙红）(eosin) • 伊红对细胞质、肌纤维、
20min 10min
各3-5min
2、苏木精液 3、流水冲洗 4、伊红液
5-7min 10min 5-7min
形态学技能-苏木素-伊红染色
2.二甲苯：①染色前：溶解切片中的石蜡，以使染液可以进入细胞和组织，因此，石蜡的存在妨碍水和染料进入细胞；②染色后：透明切片的作用，以利于光线透过，否则组织切片透明度达不到光学显微镜观察时透光度的要求，在显微镜下看不清细胞和组织结构。
苏木素-伊红（HE）染色操作
【试剂和材料】
已烤片的石蜡切片、二甲苯、无水乙醇、90%乙醇、70%乙醇、Ehrlich苏木素颜色液、0.5%盐酸70%酒精分色液、稀氨水返兰液、1%伊红染色液、中性树胶、自来水、蒸馏水
【耗材和设备】
染缸、盖玻片、玻璃棒、显微镜
【具体步骤】
1.实验准备：按步骤顺序摆放好染缸，准备计时器用主要依靠盐酸在水中容易电离出氢离子，用来改变组织的电荷性质，使过染和吸附在组织表面的染料从组织中及表面脱落下来，从而达到分化的目的。根据盐酸的性质，盐酸在水中电离出的氢离子要比在乙醇中电离出的氢离子多，我们认为传统的盐酸乙醇用于分化乙醇在这里并不起作用，相反，由于乙醇的存在致使切片更易脱落，因为乙醇具有脱水及使组织收缩的作用，分化后水洗时组织又发生吸水、膨胀，而造成脱片。为此，改用盐酸水溶液进行分化，可避免脱片现象的发生。
分化和返兰的作用
1.分化作用：苏木素染色后，用水洗去为结合在切片中染液，但是对细胞核中结合过多的染料和细胞浆中吸附的染料必须用酸性分化液脱去，保证细胞核和细胞浆染色分明。
2.返兰作用：分化之后苏木精在酸性条件下处红色离子状态，呈红色，若在碱性条件下处于蓝色离子状态，呈蓝色，所以在酸性溶液中分化之后用水洗去酸而中止分化，后用弱碱水（稀氨水）使细胞核中苏木素呈蓝色，呈返兰作用。
三种苏木素染色液临床应用分析与探讨
色色精 ，细胞核 与这 种带 正电荷呈碱性 的色精 以离子键或氢
键 结合 而被染色。 日常工作中经常看到有 的组织切片胞核发
每次 使 用必 须 过 滤 ， Ｍａ ｙ ｅ ｒ 苏木 素 液 染色 时 间长 。而 Ｌ ｉ ｌ ｌ ｉ ｓ Ｍａ ｙ ｅ ｒ 氏苏木 素液染色好控制 ， 染色时 间短 ， 使用时 间长 且稳
而Ｌ ｉ ｌ ｌ ｉ ｓ Ｍ ａ ｙ ｅ ｒ （ 改 良） 苏木精 液特点有 ： ①减少 硫酸铝 钾 用量 的配制 （ 用硫酸 铝钾 ３ ３ ． ４ ｇ ／ ７ ０ ０ ｍ Ｌ ） 染液 中后期 不会 出
现 析 出 的 明矾 结 晶很 多 也 节 省 了媒 染 剂 ，更 主 要 的 是 不会 有
・
病理诊断 ・
三种苏木素染 色液临床应用分析与探讨
山西 省 运 城 市 中心 医 院（ ０ ４ ４ ０ ０ ０ ） 段 淑 云
Ｈａ ｒ ｒ ｉ ｓ 苏木素液 有很 多优点 ， 但 也有不尽如人 意的地方 ，
如使用期短 ， 染片量 多时约一周就得更 换一次 ， 氧化结 晶 ， 多
正 电荷 的碱性染料结合 ，苏木红与媒染剂 中的铝结合形成蓝
０ ． ２ ｇ ， 甘油 ２ ０ ０ ｍ Ｌ ， 冰醋 酸 ２ ０ ｍＬ 。先将 Ａ液 加热溶解 后待
用， 再将 Ｂ液 加热溶解至沸腾 ， 去火 ， 待溶液小沸腾 状态时再 将 Ａ液 徐徐倾 入其 中 ， 全 部混匀后 ， 再使溶 液在短 时间 内加
热至沸腾 ， 去火 ， 放人冷水 中至 ８ ０℃ 时 ， 加 入碘酸钠 ０ ． ２ ｇ 搅
２ 结 果
就是半 氧化状态 。在染色过程 中逐步氧化 的过程是一直有较 好染 色能力 的染 液。③ 加入 ２ ０ ０ ｍ Ｌ丙 三醇 ：丙 三醇俗称甘
医院常规苏木素-伊红(HE)染色操作规程
常规苏木素－伊红（HE）染色操作规程染色步骤：1、二甲苯Ⅰ：5－10min2、二甲苯Ⅱ：5－10min3、二甲苯Ⅲ：5－10min4、无水乙醇Ⅰ：1－3min5、无水乙醇Ⅱ：1－3min6、95%乙醇：1－3min7、80%乙醇:：1－3min8、水洗：1min9、苏木素：3－10min10、流水冲洗：1min11、酸乙醇分化：1－3S12、水洗：30S13、40%氨水或温水（40度左右）返蓝1min14、0.5%伊红液染色：1－3min15、水洗：10S16、80%乙醇：10S17、95%乙醇：1－3min18、无水乙醇Ⅰ：1－3min19、无水乙醇Ⅱ：1－3min20、二甲苯Ⅰ：3－5min21、二甲苯Ⅱ：3－5min22、二甲苯Ⅲ：3－5min中性树胶封固（湿封）以上1、2、3中二甲苯的作用：石蜡切片的常规染色必须先用二甲苯脱去切片中的石蜡，其作用是二甲苯可以溶解切片中的石蜡，以使染料易于进入细胞和组织，石蜡的存在妨碍水和染料进入细胞。
以上4、5、6、7中酒精的作用：酒精用于苏木素染色前由高浓度向低浓度逐渐下降处理切片，是为了洗脱用于脱蜡的二甲苯，使水能进入细胞和组织中，因为纯酒精可以中和二甲苯互溶，二甲苯经过二次纯酒精的洗涤，完全被除去，再经过95%、80%酒精使水分逐渐进入切片，以免引起细胞形太结构改变。
此时水洗作用：洗去未与切片结合的染液。
此时分化的作用：苏木素染色之后，用水洗去未结合在切片中的染液，但是在细胞核中结合过多的染料和细胞浆中吸附的染料必须用分化液0.5~1%盐酸酒精脱去，才能保证细胞核和细胞浆染色的分明，把这个过程称为染色的分化作用，因酸能破苏木素的醌型结构，使色素与组织解离，分化不可过度。
此时水洗的作用：为了除去分化液和脱下的染料中止分化作用。
此时水洗的作用：用水洗去未结合的染液，以防止大量伊红染液进入脱水的酒精中。
以上16、17、18、19中酒精的作用：为二甲苯进入细胞创造条件，这时必须彻底脱水，否则二甲苯不能进入细胞组织切片透明度达不到光符显微镜观察时透光度的要求，在显微镜下能显示清晰的细胞和组织结构。
常用的五种细胞化学染色方法
常用的五种细胞化学染色方法一、细胞化学染色方法概述细胞化学染色是生物学和医学研究中常用的技术手段，通过对细胞内各种化学成分的染色，可以揭示细胞的结构、功能以及病变过程。
根据染色原理和目的的不同，细胞化学染色方法有多种分类。
本文将介绍五种常用的细胞化学染色方法，分别是：吉姆萨染色、瑞氏染色、巴氏染色、苏木素-伊红染色和福尔根染色。
二、常用的五种细胞化学染色方法1.吉姆萨染色吉姆萨染色是用于显示细胞内蛋白质和核糖体的方法。
该方法使用含有天青、伊红、酸性品红等染料的吉姆萨染液对细胞进行处理，使蛋白质和核糖体呈现紫红色或蓝紫色。
吉姆萨染色在免疫学和寄生虫学等领域有广泛应用。
2.瑞氏染色瑞氏染色是一种用于显示细胞内颗粒物质的染色方法，如细胞内酶、核酸等。
该方法使用含有伊红和天青染料的瑞氏染液对细胞进行处理，使颗粒物质呈现蓝紫色或红色。
瑞氏染色常用于病理学和血液学中的骨髓涂片检查。
3.巴氏染色巴氏染色是一种用于显示细胞内糖原的染色方法。
该方法使用含有苏丹III 或苏丹IV染料的巴氏染液对细胞进行处理，使糖原呈现红色或橙色。
巴氏染色在妇科和肿瘤学等领域有重要应用，常用于检查宫颈脱落细胞中的糖原含量。
4.苏木素-伊红染色苏木素-伊红染色是一种显示细胞核和细胞质的染色方法。
该方法使用含有苏木素和伊红染料的染液对细胞进行处理，使细胞核呈现蓝色，细胞质呈现红色或橘黄色。
苏木素-伊红染色在病理学中广泛用于组织切片的诊断。
5.福尔根染色福尔根染色是一种用于显示DNA的染色方法。
该方法使用含有品红和苦味酸的福尔根染液对细胞进行处理，使DNA呈现蓝色。
福尔根染色在遗传学和肿瘤学研究中常用作显示肿瘤细胞的DNA含量。
三、结论细胞化学染色在生物学和医学研究中具有重要价值，有助于揭示细胞的结构、功能和病变过程。
常用的五种细胞化学染色方法各有其特点和适用范围，可以根据研究目的和需求选择适合的方法。
这些常用的细胞化学染色方法在实验操作和试剂选择等方面有一定的标准和要求，熟练掌握这些方法有助于提高实验结果的可靠性和准确性。
苏木素-伊红染色试剂盒使用说明书
注意：当跳过此步骤时，不使用二甲苯透明，酒精将会保存于组织切片上，导致伊红从切片 上流出。
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13 封片：中性树胶封片，自然风干或烤干，显微镜观察。
注意事项 HE 染色是一个对经验要求非常高的染色，上述实验流程中所提供的染色时间都是参考时间， 要根据实验原理，结合具体情况而定。
染色较弱是由于：1）组织切片过薄；2）染色时间不足；3）随后 95%酒精分化过度。 染色过度是由于：1）染液浓度较高（可能是由于过度蒸发）；2）组织切片过厚；3）染色时 间过长；4）随后 95%酒精分化不足。
伊红染色未分化（一种颜色）是由于： 1）固定不彻底； 2）过度染色，a）染色时间过长；b）染液浓度过高。
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4. 水洗：苏木素染色后，用水洗组织是非常重要的。这一步以及随后的水洗，可将多余的 染料，媒染剂等去除。适当的漂洗可以去除表面金属光泽，金属光泽可阻止苏木素的染色。 注意：跳过此步，将产生不好的结果，例如沉淀的形成，染液的稀释，表面金属光泽的存在。 5. 酸酒精：酸酒精分色剂 3~5sec。在苏木素染色方 注意：如果没有此步骤，组织切片将变为暗紫色。嗜酸结构，例如，胶原，将不会呈现明亮 的粉红色。组织结构之间将很难区分。很难对切片做出正确的判断。 分色过度可能是由于：1)酸浓度过高；2)脱色时间过长等。分色不足是由于：1)酸浓度过低； 2)脱色时间不足；3)在切片上有多余的蛋白或者明胶等。
结果 细胞核染为蓝色；细胞质染为红色。
温馨提示 1. 为了您的自身安全，使用试剂前，请做好防护，如穿实验服，戴手套等。 2. 试剂应保存于阴凉、干燥、通风良好的环境中。
储存温度 避光储存于室温。
包装清单 货号
HCY112A HCY112B
伊红配制
伊红，是我们常用的染料，英文名为Eosin，又叫四溴荧光素，是一种混合物。
伊红是生物学上常用的染料，一般观察细胞用的HE染色，其中的E就是伊红的简称。
伊红的分子式，但是实际试用的是混合物，而非纯净物，根据溶解度不同，分为水溶性和醇溶性的两种，水溶性的并不是不溶于醇，而是溶解度较小的缘故。
加入浓盐酸之后，原来的水溶液，竟然分成两层了。
因为常用，所以科里面有许多以前购买的伊红试剂，反正我们上班之后一直用的就是那些试剂，技术员说，从来没有购买过。
不过最近技术员说配置的伊红不怎么着色，她用的方法大概是2.5-5g伊红，溶于500毫升蒸馏水中配称伊红染液；后来我看了一下，还有其他的方法，就用另外一种方法：伊红0.5克，蒸馏水75毫升，95%的酒精25毫升，以前用这种方法配的着色还行，不过这次用这种方法配，着色效果也不是很好。
大家找不到原因，最后担心是不是试剂时间太长，过了失效期了？不过试剂瓶上并没有有效期一说。
就想到到病理技术网上问问，后来丁老师给了一个方法：2.5克溶于500毫升水当中，然后加入10毫升浓盐酸，静置过夜然后过滤，之后把放置烤箱内烤干，用这些干燥物，加95%的酒精1000毫升配称原液，用时可以用1：1到1：2的比例稀释。
其实这个方法以前看到过，只不过没有看明白。
最主要的疑惑就是不知道用水溶解之后过滤剩余的该如何处理？难道要把这些滤液倒掉吗？所以一直有着用的一个疑问。
这个疑问是因为我们用的是水溶性的伊红，在水中的溶解度比较高，简单的方法直接就可以使用，这些滤液倒掉岂不可惜。
但是实际操作的时候，发现原来自己的担心是多余的。
因为伊红溶解添加浓盐酸10毫升之后，原来的水溶液逐渐出现浑浊，最后慢慢地出现分层，上层的是淡黄色的清亮液体，而下面粉红色的絮状沉淀。
原来是添加酸之后，水溶液里出现了絮状沉淀。
这样伊红是不会随着过滤流掉的。
看到这个现象才明白了这样做的目的，这样第二天过滤之后，原来的伊红不仅没有减少，似乎反而多了点。
苏木素染色液分类依据
苏木素染色液分类依据全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：苏木素（Safranin）是常用的生物染色液，在生物学、医学和组织学领域有着广泛的应用。
苏木素液是由苏木素、乙醇和蒸馏水等成分混合而成的染色剂。
苏木素染色液的分类依据主要包括其成分、pH值、染色效果等多个方面。
苏木素染色液的分类可以根据其成分的不同来划分。
一般来说，苏木素染色液可以分为普通苏木素染色液和改良苏木素染色液两种类型。
普通苏木素染色液是由苏木素、乙醇和蒸馏水等基本成分混合而成，适用于一般的生物染色实验。
而改良苏木素染色液则在普通苏木素染色液的基础上添加了一些增强染色效果的成分，如盐酸、醋酸等，使得染色效果更加明显、清晰。
苏木素染色液的分类也可以根据其pH值的不同来进行划分。
苏木素染色液的pH值对染色效果有着重要的影响，一般来说，苏木素染色液的pH值在2.5-3.0之间时，染色效果最佳。
如果pH值过高或过低，都会影响到染色的效果，甚至导致染色失败。
根据苏木素染色液的pH 值不同，可以将其分为酸性苏木素染色液和碱性苏木素染色液两种类型。
苏木素染色液的分类也可以根据其染色效果的不同来进行划分。
根据对细胞、组织或器官的染色效果，可以将苏木素染色液分为核内染色和细胞质染色两种类型。
核内染色是指苏木素染色液主要作用于核内的细胞器或细胞核，使得核内结构清晰可见，适用于观察细胞核形态和数量、核仁等。
而细胞质染色则是指苏木素染色液主要作用于细胞质内的细胞器或其他结构，使得细胞质结构清晰可见，适用于观察细胞质内的胞器结构、分布等。
苏木素染色液的分类依据主要包括其成分、pH值、染色效果等多个方面。
在实际应用中，根据具体的实验要求和研究对象的特点，选择合适的苏木素染色液对研究工作具有重要的意义。
希望通过以上介绍，能够帮助大家更好地理解苏木素染色液的分类依据，提高实验的效率和准确性。
第二篇示例：苏木素是一种用于生物组织染色的有机染料，常用于组织学切片的染色工作中。
病理室常用试剂配制方法
2021/10/10
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苏木精染色液的配制
配制苏木精染液所需试剂的作用 ：
• 甘油：作为稳定剂，延缓苏木精染液蒸发，防止 苏木精过度氧化，延长苏木精液的使用期。
• 冰醋酸：可抵销氧化剂的氧化，使苏木精和苏木 红保持均衡。同时又可增加胞核的选择性染色， 使胞核染色质显示得清晰细致。
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福尔马林的配制
固定液的种类很多，分为单纯固定液和混 合固定液。
常用单纯固定液 ：1.甲醛(formaldehyde ）；
2.乙醇(alcohol) ； 3.醋酸(aceticacid)又名乙酸
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福尔马林的配制
甲醛为非沉淀性固定剂，是一种约有40％ 重量溶于水的气体，易挥发，市售的为40 ％的甲醛水溶液，也称为福尔马林原液 (formalin)。此液久存自行分解，形成的白 色沉淀为副醛(三聚甲醛或多聚甲醛)。
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福尔马林的配制
日常工作中用于组织固定的10%福尔马林， 是由甲醛原液与蒸馏水1:9混合配制而成， 实际浓度含甲醛为4％。其固定液渗透能力 很强，固定均匀，对组织收缩小。
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Thank you
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2021/10Biblioteka 1011苏木精染色液的配制
苏木精染液配制是否理想，可从以下几方面检测： 将几滴苏木精染液滴入一小盘自来水内，滴入的 瞬间由红色转为紫色再转为紫蓝色慢慢扩散，则 该苏木精液配制得好；若在扩散中仍保持红色， 则为未足够成熟或陈旧的苏木精染液。 取一块滤纸滴入苏木精染液两滴，苏木精在滤纸 上扩散后不久将呈一紫酱色的圆斑，在圆斑的周 边最后呈深紫色，这是好的苏木精液。若周边不 呈深紫色，说明该染液未够成熟或没有配好。 理想的方法还是在实际操作中染一张淋巴结组织 切片，在镜下观察其染色效果。
改良的苏木素-伊红染液配制法及应用
改良的苏木素-伊红染液配制法及应用
赵红艳
【期刊名称】《西北国防医学杂志》
【年(卷),期】2003(024)001
【摘要】@@ 在常规病理组织制片的HE染色中,苏木素染色液的配制方法很多,各有其优缺点.从2000-07～2001-12我们对改良的吉尔氏半氧化苏木素染液[1]进行了使用和观察,同时对水溶性的伊红染色剂进行沉淀酸化处理,染色效果得到了明显的改善.由于染液配制方法及染色力与以往使用的哈瑞氏苏木素有所不同,我们在环节控制及染色时间上做了一些对比分析,现就改良的配制方法简介如下.
【总页数】1页(P24-24)
【作者】赵红艳
【作者单位】解放军第12医院病理科,新疆,疏勒,844200
【正文语种】中文
【中图分类】R446
【相关文献】
1.苏木素染液简易配制法及应用 [J], 梅立新;张旭晨
2.一种再改良的Harris苏木素染液的最新配制法 [J], 黎红;周伟;茹景顺
3.改良高锰酸钾-草酸脱黑色素法在黑色素瘤苏木素-伊红染色和免疫组织化学检测中的应用 [J], 吴昊;袁静萍;阎红琳;周亨
4.伊红染液在小组织标本组织处理预染色中的改良应用 [J], 杨屹;周林艳
5.介绍一种改良伊红染液的配制法 [J], 盛彩霞;周萍
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苏木素-伊红染色液(H-E)说明书
【产品名称】
苏木素-伊红染色液(H-E）
【型号】
混合型
【包装规格】
货号：DH0003
单瓶包装规格分别为：50ml、100ml、250ml、500ml、5000ml。
【预期用途】
主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】
苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛，苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法，在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。
因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色，红细胞则呈橙红色，本染色液系将苏木素和伊红混合成一种溶液，染色后可不分化即可达到常规HE染色效果。
【主要组成成分】
试剂组成主要成分
苏木素-伊红染色液(H-E）混合型苏木色精伊红
【储存条件及有效期】
5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】
涂片和切片必须充分固定，石蜡切片要充分脱蜡。
【检验方法】
l、石蜡切片于二甲苯I、II中各脱蜡若干分钟；
2、经无水乙醇和95%乙醇各约若干分钟，经80%乙醇若干分钟，自来水冲洗若干分钟；
3、苏木素-伊红染色液(H-E）(混合型)染色若干分钟；
4、自来水冲洗返蓝若干分钟；亦可用碳酸锂水溶液返蓝若干分钟，自来水洗若干分钟；
5、95%乙醇I、II中各调色约若干分钟，时间不宜过长；
6、无水乙醇I、II中各脱水若干分钟，二甲苯I、II中各透明I、II中各透明若干分钟；
7、封片胶封片，镜检。
【检验结果的解释】
细胞核呈蓝紫色，细胞质、间质、各种纤维呈不同程度的红色。
【检验方法的局限性】
仅供细胞和组织形态学观察染色使用。
【产品性能指标】
pH值(25℃±1℃)应为2.4±0.5。
【注意事项】
1、温度较低时染色液不易着色，可适当延长染色时间。
2、染色时可考虑不用分化，但应相应缩短染色时间，如若分化，盐酸乙醇分化时间应根据染色结果的具体情况而定。
3、该染色液不含汞等有毒物质，其着色强度可能会因使用日期不同而稍有差异，故开封后可先试染，根据试染结果稍调整染色时间以保证较佳染色效果。
4、该染色液主要用于组织切片的染色，亦可用于某些细胞染色，但染色时间应作调整。
5、碳酸锂水溶液的配方：取本产品附送的碳酸锂粉末一包，完全溶解于1000ml蒸馏水中，即为碳酸锂水溶液。
6、本产品仅用于体外诊断，应由专业人士使用及进行结果的判读。
7、使用前应详细阅读说明书，并做好个人卫生防护，在有效期内使用，生产日期、生产批号和失效日期见包装。
8、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。
【基本信息】
备案人/生产企业名称：安徽雷根生物技术有限公司
住所：淮北凤凰山经济开发区凤冠路三期标准化厂房三号厂房。