Masson 三色染色液染色步骤及注意事项
Masson染色的操作
贝博Masson染色试剂盒利用不同阴离子染料先后作用完成染色,根据组织不同的渗透 性,选择分子大小不同的阴离子染料进行染色,区分不同组织成分。操作简捷,性能稳定, 显色清晰。
注意事项: 1、 每个染色步骤均要保持玻片湿润。 2、 分色后不需冲洗,直接复染。 3、 镜检观察时若胶原纤维部分蓝色着色太浅,可用复染液复染 2-3 分钟,至颜色合适 为止。复染液染色时间不宜过长,否者颜色过深会造成对比不强烈。 4、 若整体染色效果不佳,可用水浸泡 60-90 分钟,褪色后,再重复染色。
传真:021-60853530
本产品仅供科学研究使用!
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3、水合:蒸馏水中浸泡 2 分钟。 4、漂洗:30-40℃水漂洗两次,每次 30-60 秒。
产品说明书
样本的染色 1、 用蒸馏水润湿玻片 30-60 秒。 2、 核染液染色 60 秒左右,冲洗液冲洗 30 秒。 3、 浆染液染色 30-60 秒,冲洗液冲洗 30 秒。 4、 分色液分色 6-8 分钟。 显微镜下观察,样本中胶原纤维部分褪成淡的粉红色为 宜。如果褪色效果不佳,可适当延长时间。 5、 复染液染色 5 分钟,用无水乙醇冲洗干净。 6、 吹干后,用封固剂封片。 7、 结果观察。染色试剂盒
产品组成:
产品编号 试剂组分 核染液 浆染液 分色液 复染液 冲洗液
403023 20ml * 8
20 ml 20 ml 20 ml 20 ml 20ml * 4
储存条件: 室温保存。
有效期: 一年。
产品简介: Masson染色是用于显示组织中纤维的染色方法之一,是胶原纤维(collagen fiber)染
Masson三色染色试剂盒说明书
Masson三色染色试剂盒说明书Masson 三色染色试剂盒说明书(南京森贝伽生物科技有限公司)【产品介绍】Masson 染液是显示组织中纤维染色的主要方法之一,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关。
分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。
淡绿分子量最大。
因此Masson 染色肌纤维红色,胶原纤维绿色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【用途】主要用于胶原纤维染色。
【产品特点】①染色稳定;②分化时间短,1~2 分钟;③色彩清晰鲜艳;④适用范围广,适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色;⑤所染切片保存时间长且不易褪色。
固定:甲醛升汞或甲醛盐溶液。
切片:所有类型。
【产品组成】编号名SBJ0126(7×50ml)SBJ0126(7×100ml)SBJ0126(7×500ml)Storage试剂(A)A1:苏木素染色液25ml 100ml 500ml RTA2:三氯化铁水溶液25ml 100ml 500ml RT 临用时取A1、A2 等量混合,成为试剂(A),不可预先配制后放置,因染色液的色素根与铁会化合,形成不容性沉淀,等量混合后,一般24h 后失去染色力。
试剂(B): 盐酸乙醇分化液50ml 100ml 500ml RT 试剂(C): 氨水水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂(D): 丽春红酸性品红染色液50ml 100ml 500ml RT 试剂(E): 乙酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂(F): 磷钼酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂(G): 苯胺蓝染色液50ml 100ml 500ml RT 【参考操作步骤】1、切片脱蜡至水。
2、试剂(A)染色5min~10min。
3、试剂(B)分化、水洗,试剂(C)返蓝、水洗。
Masson三色法
Masson三色法(根据Masson,1929)一、试剂配制(一)Weigert氏铁苏木素液(可用Herris苏木素代替)甲液:苏木素1g无水酒精(或95%酒精)100ml乙液:29%三氯化铁水溶液4ml蒸馏水95ml (30%三氯化铁溶液则为100ml)盐酸1ml临用时,取甲、乙液等量混合即可应用。
混合时应将乙液加人甲液内,染液呈紫黑色。
铁苏木素不能象明矾苏木素一样配制后可放置贮存备用,因铁与染色剂的色素根会化合生成不溶性沉淀,所以铁作媒染液时,必须与染液分别配制和分别保存,染片时临时混合应用。
由于这是一种铁苏木素,它将胞核染成黑色。
能抵抗在对比染色液中所含分色剂的脱色作用,且不会被光线退色,因此比钾矾苏木素染色较为持久。
(二)丽春红酸性品红液丽春红(Ponceau 2R)0.7g酸性品红(acid fuchsin)0.3g蒸馏水99ml冰醋酸(glacial acetic acid) 1ml(三)1%磷钼酸水溶液磷钼酸(phosphomolybdic acid)1g蒸馏水加至100ml(四)2%苯胺蓝液苯胺蓝(aniline blue)2g冰醋酸(glacial acetic acid )2ml蒸馏水加至100ml(五)亮绿液亮绿(light green)1g蒸馏水99ml冰醋酸(glacial acetic acid )1ml(六)Bouin氏液苦味酸饱和液(1.22%)75ml福尔马林25ml冰醋酸5ml此液一般在临用时配制,对皮肤及肌腱有软化作用。
二、操作方法1.组织固定于Bouin氏液,流水冲洗一晚,常规脱水包埋。
2.切片脱蜡至水:(1)二甲苯中脱蜡10分钟×3次,用吸水纸吸干液体;(2)100%乙醇5分钟×2次,用吸水纸吸干液体;(3)95%乙醇5分钟×2次,用吸水纸吸干液体;;(4)流水2分钟,用吸水纸吸干水分;3.Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
Masson三色染色液G1006
Masson 三色染色液30ml+20ml*5RT产品简介:由Mallory 三色染色改造,利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用完成染色,与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。
根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色,便可把不同组织成分显示出来。
包装内容:产品货号产品名称规格G1006-1重铬酸钾媒染剂30ml G1006-2Weigert 铁苏木素A 液20ml G1006-3Weigert 铁苏木素B 液20ml G1006-4丽春红酸性品红染液20ml G1006-5磷钼酸溶液20ml G1006-6苯胺蓝染液20ml保存条件:室温保存,有效期1年。
操作说明:1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min ,自来水洗。
2、重铬酸钾染色:切片入重铬酸钾浸泡过夜,自来水洗。
3、铁苏木素染色:铁苏木素A 液与B 液等比混合成铁苏木素染液,切片入铁苏木素3min ,自来水洗,盐酸酒精溶液分化,自来水冲洗。
4、丽春红酸性品红染色:切片入丽春红酸性品红浸染5-10min ,自来水漂洗。
5、磷钼酸染色:磷钼酸水溶液浸染1-3min 。
6、苯胺蓝染色:磷钼酸之后不用水洗,直接入苯胺蓝染液染3-6min 。
7、分化:切片用1%冰醋酸分化,两缸无水乙醇脱水。
8、透明封片:切片放入第三缸无水乙醇5min ,二甲苯5min 透明,中性树胶封片。
9、显微镜镜检,图像采集分析。
染色结果:胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色。
弹力纤维呈棕色。
肌纤维、纤维素和红细胞染红色。
细胞核染蓝黑色。
G 1006注意事项:1、Weigert铁苏木素分A、B两液,临用前将两液等比例混合使用。
不宜预先混合,否则容易氧化沉淀而失去染色力。
2、重铬酸钾染完后水洗要稍快,切片洗干净即可。
3、根据切片的数量对铁苏木素染液进行更换,也可以现配现用;4、丽春红的染色程度要控制好,胶原部分不能是红色或者太红,会影响后续苯胺蓝的着色;5、冰醋酸分化苯胺蓝的过程中,若是分化过度,胶原蓝色太浅,若分化不足,易与丽春红的颜色叠加呈紫蓝色。
masson染色步骤(临床医学研究中心总结)
试剂名:改良 Masson 三色染色液货号:G1345 品牌:索莱宝1、石蜡切片65℃烘烤1h(使组织更贴合玻片,并溶解石蜡。
如果是刚切好的切片,则烘烤2-3h),立即放入脱蜡剂中脱蜡;2、脱蜡:脱蜡剂Ⅰ(15min)、脱蜡剂Ⅱ(15min)水化:无水乙醇I(5min)、无水乙醇 II(5min)、95%乙醇I(5min)、95%乙醇II (5min)、85%乙醇(5min)、75%乙醇(5min)脱蜡处理,蒸馏水3min3、将 Bouin 液滴在组织上,于室温作用一晚或置入 37℃的温箱内 2h 进行媒染,然后流水冲洗至切片组织上的黄色消失。
4、天青石蓝染色液滴染3min,稍水洗玻片上无染料即可。
5、Mayer 苏木素染色液滴染3min,稍水洗玻片上无染料即可。
(显微镜下观察,细胞核呈现深蓝色,细胞质有蓝色)6、酸性乙醇分化液分化3-5s,流水冲洗 10min返蓝。
(细胞核呈现灰蓝色,细胞质应相对透明无色)7、丽春红品红染色液染 2-5min,稍水洗玻片上无染料即可。
(容易造成深红或紫红色,基本看不清细胞核。
建议先染色30s-1min,显微镜下观察,适当增加时间)8、磷钼酸溶液浸泡10min,倾去上液,切片不用水洗,直接滴入苯胺蓝染色液染 5-10min。
(如果丽春红染色过深,苯胺蓝也应该适当染久一些,最终应该是红蓝色分明,能明显分辨出胶原显微)9、弱酸溶液处理 2min。
10、透明:切片直接依次放入无水乙醇 I(5min)-无水乙醇 II(5min)- 脱蜡剂Ⅰ(5min)- 脱蜡剂Ⅱ(5min)。
然后用纸巾擦干玻片上残余脱蜡剂,或直接铺平玻片在通风橱内,干燥脱蜡剂。
使用中性树脂封片。
注:masson染色不像HE可以把颜色洗脱再重复步骤,建议使用同一批切片,先摸索染色时间。
Masson染色技术
胶原纤维染色(Masson三色染色法)胶原纤维:是三种纤维中分布最广泛,含量最多的一种纤维。
广泛分布于各脏器内。
在皮肤、巩膜和肌腱最为丰富。
胶原纤维染色主要用于和肌纤维的鉴别。
应用意义:定性定量胶原纤维在体内分布广泛。
HE染色不能以不同颜色将其显示出来,而胶原纤维定性特染可作到这一点,故在多种疾病的病理诊断和研究用中具有实用价值.如:1.显示组织,器官的损伤或炎症的修复与纤维板化程度2.判断心肌坏死后被除纤维结缔组织所取代的区域:HE染色时胶原纤维与心肌均为红色,胶原纤维染色则使胶原纤维呈红色,心肌纤维呈黄色。
3.鉴别心肌纤维化与心内膜弹纤维增生症。
4.区别胶原纤维透明变性与淀粉样变性。
5. 对肿瘤方面提供诊断和诊断鉴别的依据。
胶原纤维染色结果:胶原纤维呈绿色,肌纤维呈红色,红细胞呈橘红色。
组织样品应为:4%多聚甲醛固定组织,石蜡切片。
天狼猩红:胶原纤维呈红色,细胞核呈绿色,其它成分呈黄色。
V.G染色法 : 胶原纤维:鲜红色,肌纤维:黄色,红细胞:黄色。
细胞核:蓝黑或灰色。
Nagar-Olsen染色观察心肌缺氧早期改变,是早期心肌病变组织染色:显色结果:缺氧心肌红细胞呈现红色,正常心肌呈黄色或棕黄色,细胞核呈蓝色。
丽春红(Ponceau S)新法染色首先采用维多利亚蓝将细胞核染成绿色,再用Ponceau S 丽春红复合物将胶原纤维染成红色,肌肉成黄色。
实验流程一、实验试剂1. Regaud 氏苏木精:苏木精1g,95%酒精10ml,甘油10ml,蒸馏水80ml。
将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用;2. Masson丽春红酸性复红液:丽春红0.7g,酸性复红0.3g,蒸馏水99ml,冰醋酸1ml;3. 0.2%冰醋酸水溶液:冰醋酸0.2 ml,蒸馏水100 ml;4. 1%磷钼酸水溶液:磷钼酸1g,蒸馏水100 ml;5. 苯胺蓝水溶液:苯胺蓝2g,蒸馏水98 ml,冰醋酸2 ml;6. 1%光绿水溶液:光绿 1g,蒸馏水100 ml。
弹性纤维染色方法
改良Masson三色染色法在胶原纤维中的应用中华首席医学网 2006年05月24日11:05:41 Wednesday648作者:王珏, 朱礼国,唐幕湘, 张健《郧阳医学院学报》2006年2月25卷1期实验技术加入收藏夹【关键词】胶原纤维[关键词] 改良;Masson三色染色法;胶原纤维目前,Masson三色染色法仍是胶原纤维染色的主要方法之一。
它在临床外检和科研教学等方面有着重要的意义。
在实际工作中,我们认为传统的Masson三色染色法[1]操作程序多,染色效果欠佳,且不太稳定,对其做了改进,现将做法介绍如下。
1 方法1.1 染液的配制Harris苏木素、1%盐酸酒精、丽春红酸性品红、1%磷钼酸、2%苯胺蓝.1.2 染色方法石蜡切片3~4 μm脱蜡至水,Harris苏木素染3 min流水冲洗,1%的盐酸酒精分化3~5 s流水冲洗,温水返蓝1 min流水冲洗, 丽春红酸性品红加温染3 min,蒸馏水冲洗,1%磷钼酸分化1 min,不洗,擦净载玻片上的磷钼酸残液,2%苯胺蓝复染1 min,95%的酒精冲洗,95%酒精及无水酒精脱水,冷风吹干,中性树胶封片。
2 结果胶原纤维呈蓝色,肌纤维胞质呈红色,细胞核呈蓝褐色。
3 讨论通过长期实践探索,我们摸索出一种程序更简洁、组织着色效果更好,且性能稳定的改良Masson三色染色法。
其原理是利用苏木素,酸性品红和苯胺蓝对结缔组织和神经嗜银颗粒、胶原纤维等组织染色,使时间缩短,步骤简便。
改进后的方法,将传统的Masson三色染色法作了如下调整和改动:Bowin氏液由10%中性固定液[2]代替,省略了0.5%碘酒精作用10 min,5%硫代硫酸钠作用5 min和1%冰醋酸处理1min及地衣红染30~60 min 等过程,然后将原丽春红酸性品红,1%磷钼酸,2%苯胺蓝的染色时间分别由15 min,5 min,5 min,缩短为加热3min,1 min,1 min.通过对以上各步的调整和改进,使染色时间由原来的近3 h,缩短为30 min左右,且颜色对比度好,层次清楚,胞核胞浆着色均匀。
马松三色染色原理masson.
马松三色染色原理masson.Masson染色(2010-09-02 14:43:20转载标签:杂谈分类:实验日志masson 染色原理Masson三色法(根据Masson,1929试剂配制(一Weigert氏铁苏木素液(见苦味酸——酸性品红法(二丽春红酸性品红液丽春红(Ponceau 2R 0.7g酸性品红(acid fuchsin 0.3g蒸馏水 99ml冰醋酸(glacial acetic acid 1ml(三 1%磷钼酸水溶液磷钼酸(phosphomolybdic acid 1g蒸馏水加至 100ml(四 2%苯胺蓝液苯胺蓝(aniline blue 2g冰醋酸(glacial acetic acid 2ml蒸馏水加至 100ml(五亮绿液亮绿(light green 1g蒸馏水 99ml冰醋酸(glacial acetic acid 1ml操作方法1. 组织固定于Bouin氏液或Zenker氏液,流水冲洗一晚,常规脱水包埋。
2. 切片脱蜡至水。
如用Zenker氏液固定者,应进行除汞处理,其步骤如下:(1 切片脱蜡后于0.5%碘酒精作用10分钟。
(2 稍水洗(3 5%硫代硫酸钠作用5分钟。
(4 流水冲洗10分钟3. Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
4. 流水稍洗。
5. 1%盐酸酒精分化。
6. 流水冲洗数分钟。
7. 丽春红酸性品红液染5-10分钟。
8. 蒸馏水稍冲洗。
9. 1%磷钼酸水溶液处理约5分钟。
10.不用水洗,直接用苯胺蓝液或绿液复染5分钟。
11.1%冰醋酸处理1分钟。
12.95%酒精脱水多次。
13.无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固结果:胶原纤维虽蓝色(用苯胶蓝液复染或绿色(用亮绿复染。
胞质、肌纤维和红细胞红色。
胞核蓝褐色。
注意事项:1.组织用Bouin氏液或Zenker氏液固定为佳。
如已用10%甲酸液固定,切片可在脱蜡至水后.再放入Bouin氏液作用一晚或置37。
C温箱内1-2小时,然后流水冲洗切片至黄色消失再进行染色。
masson染色实验步骤 概述及解释说明
masson染色实验步骤概述及解释说明1. 引言1.1 概述Masson染色实验是一种常用的组织学技术,用于观察和分析组织样本中胶原纤维、肌纤维以及其他重要成分的分布和形态。
该实验技术通过特定的染料,能够使不同组织成分显色,并进一步提供了对组织结构和功能的深入认识。
Masson 染色方法已广泛应用于肿瘤学、病理学、解剖学等领域。
1.2 文章结构本文将从引言、Masson染色实验步骤、实验结果与解释、应用与意义以及结论等几个方面进行详细阐述。
1.3 目的本文的目的是为读者介绍Masson染色实验的基本步骤,并对其结果进行解释说明。
同时,还将探讨该实验在各个领域中的应用情况以及潜在意义和价值。
这些内容将有助于读者更全面地了解Masson染色技术,并为其在相关研究工作中提供参考和指导。
期待它们有望增加我们对组织样本中胶原纤维·肌肉纤维及其他关键成分的认识时请加填具体2. Masson染色实验步骤:2.1 实验前准备:在进行Masson染色实验之前,需要做好以下准备工作:1. 资料收集:先了解Masson染色的原理和目的,研究相关文献,了解该实验在什么情况下适用以及可以得到哪些信息。
2. 材料购买:准备所需的材料,包括Masson染色试剂盒、显微镜玻片和载玻片等。
3. 设备检查:确保显微镜、组织切片机和染色设备等实验设备正常运行并进行必要的校准或维护。
4. 实验环境准备:为了保证实验结果的准确性,要确保实验室环境清洁、无尘,并控制好温度和湿度。
5. 安全措施:遵循实验室安全规定,佩戴个人防护装备,如手套、眼镜和口罩等。
2.2 组织样本制备:在进行Masson染色实验前,需要对组织样本进行制备处理。
具体步骤如下:1. 组织获取:从动物或人体中采集需要研究的组织样本,可以是器官或组织结构。
2. 组织固定:将采集到的组织样本放入适当的组织固定剂中(如福尔马林),使得组织结构保持完整并防止腐败。
3. 组织包埋:将固定后的组织样本进行包埋处理,通常是将其浸泡在液态石蜡中,然后冷却使其凝固。
三色染色实验服务安全操作及保养规程
三色染色实验服务安全操作及保养规程简介三色染色实验是一种常见的细胞学实验,用于染色细胞的染色体和细胞器,进一步观察细胞结构的变化和功能的活动。
在进行三色染色实验时,需要特别注意实验过程中的化学品及设备的安全操作,以及实验后的设备保养工作。
本文档旨在为实验人员提供三色染色实验安全操作以及设备保养规程,以确保实验过程的安全性和设备的使用寿命。
三色染色实验安全操作规程1. 实验前准备在进行三色染色实验之前,需要进行一系列的准备工作,包括试剂的准备、设备的调试、试剂品质的检测等。
1.1 试剂准备根据实验方案所需的试剂及其浓度,准备相应试剂和稀释液。
同时需检查试剂是否过期,有无变质或污染。
1.2 设备调试检查三色染色实验设备的工作状态和功能是否正常,调试并确认设备参数符合实验要求,如温度、压力等。
1.3 试剂品质检测采用内标法对所采购到的每批试剂进行品质检测并留有记录,严格按照实验方案规定的试剂用量和比例进行混合以避免试剂污染。
2. 实验中的安全操作在进行三色染色实验的过程中,需要注意化学品的安全操作,以保障实验人员的身体健康和实验的顺利进行。
2.1 试剂使用在使用试剂时,需要佩戴手套以避免皮肤接触化学品,同时在处理液体时要注意避免产生气溶胶,避免吸入有害气体,同时注意放置和处理化学垃圾,避免污染环境。
2.2 设备操作在进行三色染色实验时,需要根据设备使用手册操作设备,严格按照实验方案场景参数要求操作设备,同时避免设备损坏,提高设备的使用寿命。
3. 实验后的安全操作在完成三色染色实验后,需要进行一些后续的安全操作,以确保化学品对环境和实验人员的影响降到最低。
3.1 试剂处置在实验完成后,要按照相关规定进行试剂的处理,避免化学品的污染和环境的污染。
3.2 设备保养及时对设备进行维护和保养,避免设备因为未及时保养而损坏,为设备换配件时遵照厂家原配件规格进行更换,维护设备的使用寿命并保证实验的精度和稳定性。
三色染色设备的保养规程在保证实验安全操作后,设备的保养工作必不可少,以下是三色染色设备保养规程:1. 清洗消毒三色染色实验设备在使用过程中,需要经常清洗消毒,以确保设备内部和外部环境的干净和卫生。
Masson三色染色液染色步骤及注意事项
Masson三色染色液染色步骤及注意事项步骤一:预处理1. 切片:将需要染色的组织标本切成厚度约为5um的切片,将切片均匀地放置在已经预先烘干和标记好的玻片上。
2.固定:用10%中性缓冲福尔马林固定切片,固定时间约为24小时。
步骤二:染色1. 染色剂的准备:将Masson三色染色液购买回来后,根据品牌推荐比例稀释至适当浓度。
不同品牌染色液稀释比例可能有所不同,因此以具体品牌的说明为准。
2.染色操作:(1)将切片放入染色盒中,并将染色盒放入水浴中加热,温度为60-70摄氏度,时间为20-30分钟。
(2)将加热后的染色盒取出,用水冲洗2-3分钟,直至明显的污染物被冲走。
(3)将切片置于70%酒精中,时间为5分钟。
(4)在20%盐酸酒精中浸泡1-2秒钟,然后立即将切片漂洗至酸性的第一盐酸酒精。
(5)在酸性的第一盐酸酒精中浸泡30秒至1分钟,然后漂洗至酸性的第二盐酸酒精中。
(6)在酸性的第二盐酸酒精中浸泡30秒至1分钟,然后漂洗至蒸馏水中。
(7)转移到可溶性亮蓝GR中染色5分钟。
(8)快速漂洗后,放入蒸馏水中清洗1-2分钟。
(9)再次转移到1%醋酸中染色1分钟。
(10)最后,在6%石蜡溶液中浸泡5-10分钟。
步骤三:封片1.脱水:将切片放入95%乙醇中,时间为1-2分钟,然后放入绝对乙醇脱水2-3分钟。
2.渗透:将切片放入二氯甲烷中,时间为5分钟,再在房温下放置3-5分钟以充分渗透。
3. 封片:将切片放入500-1000ml锡兰红封片剂中,时间为1-2分钟,然后将切片转到盖玻片上,将封片剂挤满,盖上玻片,压平后放在60摄氏度的烘箱中加热2-3小时。
注意事项:1.操作中应注意个人防护,佩戴手套和口罩,避免接触有害物质。
2.染色过程中要严格控制温度和时间,避免染色过程中出现偏差。
3.在脱水和封片过程中要注意将切片完全浸透,防止切片变形或脱落。
4.染色溶液和液体处理过程中,应注意防止溅溢和污染,保持操作环境清洁。
masson染色结果分析
Masson三色染色液说明书【产品名称】Masson三色染色液【包装规格】货号:DC0032套组包装规格:8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒【预期用途】主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。
【检验原理】Masson三色染色又称马松染色,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法,所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织,苯胺蓝的分子量很大,染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、Weigert铁苏木素A液苏木素2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁3、酸性乙醇分化液乙醇4、蓝化液碳酸盐5、丽春红品红染色液丽春红、品红6、乙酸溶液乙酸7、磷钼酸溶液磷钼酸8、苯胺蓝染色液苯胺蓝【储存条件及有效期】5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为l8个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等,流水冲洗,常规脱水包埋;2、切片常规脱蜡至水;3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液,用Weigert铁苏木素染色液染色,流水稍洗;4、酸性乙醇分化液分化数秒,流水冲洗数分钟;5、蓝化液返蓝数秒,流水冲洗数分钟;6、丽春红品红染色液染色数分钟,流水稍冲洗;7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液,用乙酸工作液洗切片;8、磷钼酸溶液处理后,倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗);9、苯胺蓝染色液复染,倾去玻片上染色液(不用水洗);10、用乙酸工作液处理切片,至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制);11、95%乙醇迅速脱水,无水乙醇脱水数次后,二甲苯透明,中性树胶封固。
masson染色方法
masson染色方法
Masson染色方法是一种常用的组织学染色技术,用于观察胶原和纤维组织在组织中的分布和形态。
该方法主要包括以下步骤:
1. 取组织标本后,用4%的中性缓冲福尔马林固定,可使组织保持其原有的形态和构造。
2. 将固定后的标本处理至透明化,可用xylene或其他透明剂进行处理。
3. 在脱水过程中,将标本浸泡于不同浓度的乙醇中,逐渐升高浓度,使标本脱水。
4. 将标本置于蜡质中,使其渗透蜡质。
5. 将蜡块切成5-8μm的切片,然后将切片贴于载玻片上。
6. 取一个玻片,将切片加热,使其蜡质熔化,然后用xylene或其他透明剂进行除蜡。
7. 将标本在不同浓度的乙醇中进行脱水,然后再用水洗涤。
8. 将标本浸泡在Weigert铁铵液中,使其染色。
9. 在洗涤过程中,将标本浸泡在不同浓度的乙醇中进行脱水。
10. 将标本浸泡在天蓝色溶液中,进行底色染色。
11. 用Ponceau fuchsin液进行胶原纤维染色。
12. 将标本在不同浓度的乙醇中进行脱水,然后再用xylene或其他透明剂进行透明化。
13. 最后,将标本覆盖玻片,用封边剂进行封边。
Masson染色方法可以同时染色胶原和细胞核等组织结构,能够
清晰显现组织结构的形态和分布情况。
该方法简单易行,经济实用,广泛应用于医学、生物学、农学等领域的组织学研究中。
Pollak三色染色液使用说明书
Pollak三色染色液使用说明书货号:G3500规格:4×50ml/4×100ml保存:RT避光,6个月有效。
产品内容:名称4×50ml4×100ml Storage试剂(A):Weigert铁苏木素A1:Weigert染液A25ml50ml RT避光A2:Weigert染液B25ml50ml RT避光临用前,取A1、A2等量混合即为Weigert铁苏木素染色液,不宜提前配制。
试剂(B):酸性分化液50ml100ml RT试剂(C):Pollak染色液50ml100ml RT试剂(D):Pollak分化液50ml100ml RT避光产品简介:Masson三色染色又称马松染色,是结缔组织染色中最经典的一种方法,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。
Pollak三色染色是在Masson三色染色法基础上改良而来的结缔组织多色染色法,采用媒染剂和促染剂同时染色,可使结缔组织中的多种成分着色。
操作步骤(仅供参考):1、切片常规脱蜡至水。
2、用配制好的Weigert铁苏木素染色15-20min。
3、充分水洗,镜下观察。
如果染色过深,可用酸性分化液分化数秒。
4、水洗返蓝,蒸馏水洗2~4次。
5、Pollak染色液染色3-7min。
6、蒸馏水快速冲洗,0.2%冰乙酸分化(镜下控制)大约10-20s。
过分化会使黏液,胶原纤维,纤维素的第1页,共2页颜色过浅,不易观察7、乙醇快速脱水。
8、无水乙醇脱水3次,每次5~10s。
二甲苯透明3次,每次1~2min。
9、中性树胶封固。
染色结果:胶原纤维、黏液、软骨、神经纤维蓝色肌肉、弹力纤维红色纤维素紫红色红细胞橘红色细胞核蓝黑色注意事项:1.切片脱蜡应尽量干净。
马松三色染色原理masson.
马松三色染色原理masson.Masson染色(2010-09-02 14:43:20转载标签:杂谈分类:实验日志masson 染色原理Masson三色法(根据Masson,1929试剂配制(一Weigert氏铁苏木素液(见苦味酸——酸性品红法(二丽春红酸性品红液丽春红(Ponceau 2R 0.7g酸性品红(acid fuchsin 0.3g蒸馏水 99ml冰醋酸(glacial acetic acid 1ml(三 1%磷钼酸水溶液磷钼酸(phosphomolybdic acid 1g蒸馏水加至 100ml(四 2%苯胺蓝液苯胺蓝(aniline blue 2g冰醋酸(glacial acetic acid 2ml蒸馏水加至 100ml(五亮绿液亮绿(light green 1g蒸馏水 99ml冰醋酸(glacial acetic acid 1ml操作方法1. 组织固定于Bouin氏液或Zenker氏液,流水冲洗一晚,常规脱水包埋。
2. 切片脱蜡至水。
如用Zenker氏液固定者,应进行除汞处理,其步骤如下:(1 切片脱蜡后于0.5%碘酒精作用10分钟。
(2 稍水洗(3 5%硫代硫酸钠作用5分钟。
(4 流水冲洗10分钟3. Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
4. 流水稍洗。
5. 1%盐酸酒精分化。
6. 流水冲洗数分钟。
7. 丽春红酸性品红液染5-10分钟。
8. 蒸馏水稍冲洗。
9. 1%磷钼酸水溶液处理约5分钟。
10.不用水洗,直接用苯胺蓝液或绿液复染5分钟。
11.1%冰醋酸处理1分钟。
12.95%酒精脱水多次。
13.无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固结果:胶原纤维虽蓝色(用苯胶蓝液复染或绿色(用亮绿复染。
胞质、肌纤维和红细胞红色。
胞核蓝褐色。
注意事项:1.组织用Bouin氏液或Zenker氏液固定为佳。
如已用10%甲酸液固定,切片可在脱蜡至水后.再放入Bouin氏液作用一晚或置37。
C温箱内1-2小时,然后流水冲洗切片至黄色消失再进行染色。
组织中成纤维细胞染色
组织中成纤维细胞染色
组织中成纤维细胞的染色可以通过多种染色方法实现,其中一种常用的染色方法是Masson三色染色法。
以下是其染色步骤:
1. 脱蜡至水:二甲苯Ⅰ5min,二甲苯Ⅱ5min,二甲苯Ⅲ5min,无水乙醇
1min,95%乙醇1min,75%乙醇1min,自来水冲洗数秒。
2. 用配置好的Weigert铁苏木素染色液染色8分钟。
3. 酸性乙醇分化液分化15秒,水洗。
4. Masson蓝化液返蓝5分钟,水洗。
蒸馏水洗1分钟。
5. 丽春红品红染色液染色5分钟。
6. 弱酸工作液洗1分钟。
7. 磷钼酸溶液洗1分钟,弱酸工作液洗1分钟。
8. 苯胺蓝染色液染2分钟,弱酸洗1分钟。
9. 脱水透明:95%乙醇快速脱水2-3秒,无水乙醇脱水3次,每次5-10秒,二甲苯透明3次,每次1-2分钟,中性树胶封固。
通过这种染色方法,成纤维细胞会呈现灰蓝色,核为蓝色。
此外,胶原纤维、黏液、软骨会呈蓝色(如亮绿液染色为绿色),胞质、肌肉、纤维素、神经胶质会呈红色,胞核为黑蓝色。
以上信息仅供参考,如需了解更多信息,建议查阅组织学相关书籍或咨询专业医师。
masson染色详细原理
masson染色详细原理Masson染色是一种常用的组织学染色技术,主要用于观察和研究细胞和组织的结构及其变化。
该染色方法以铁和铬为基础,通过染色剂与组织中的特定结构相互作用,使其产生颜色,从而提高对组织结构的分辨率和可视化能力。
Masson染色的原理主要涉及铁和铬之间的反应,以及染色剂与组织中的胶原蛋白的亲和作用。
具体步骤如下:1. 组织固定:首先,需要将待染色的组织标本进行固定,以保持其结构和形态的完整性。
常用的固定剂包括福尔马林和乙醛等。
2. 去脂脱水:接下来,需要将固定后的组织标本进行去脂脱水处理。
这一步骤主要是为了去除组织中的脂肪物质,以便染色剂更好地渗透和作用于组织。
3. 染色剂制备:Masson染色的染色剂通常由酸性染料、阳性染料和酸性溶剂组成。
酸性染料通常为酸性品红或品红染料,阳性染料为铬酸铜或酸性蓝染料。
4. 染色:将组织标本浸入染色剂中,经过一定的时间(通常为几分钟至几小时),染色剂与组织中的特定结构发生反应,形成颜色。
阳性染料与胶原蛋白结合,呈现蓝色或绿色;酸性染料则染色胞浆和胶原间质为红色。
5. 洗脱:染色完成后,需要将组织标本从染色剂中取出,并用去离子水进行洗脱,以去除多余的染色剂。
6. 固定:为了保持染色效果,需要使用固定剂对染色后的组织标本进行固定处理。
固定剂可以是福尔马林、乙醛等。
通过Masson染色,可以清晰地观察到组织中的胶原纤维、肌纤维、肌原纤维、胶原间质、纤维母细胞、胶质细胞等结构。
胶原纤维呈现蓝色或绿色,肌纤维和肌原纤维呈现红色,胶原间质呈现红色,纤维母细胞和胶质细胞呈现红色。
Masson染色在组织学研究中具有重要的应用价值。
通过该染色方法,可以清晰地观察到组织中各种成分的分布情况,进而研究组织的结构和功能。
同时,Masson染色还可以用于诊断和鉴别某些病理性病变,如肿瘤、纤维化和炎症等。
通过观察和分析染色结果,可以帮助医生确定病变类型、病变程度以及病变的扩展范围,为临床诊断和治疗提供重要的依据。
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Masson三色染色液染色步骤及注意事项
号:G1340
规格:7×50ml/7×100ml
有效期:12个月有效
产品简介:
结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维:胶原纤维、网状纤维、弹力纤维、而胶原纤维(collagen fiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。
Masson三色染色又称马松染色,是结缔组织染色中最经典的一种方法,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。
然而,淡绿或苯胺蓝的分子量很大,因此Masson染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈绿色或蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
Masson试剂盒的特点:◆染色稳定;◆分化时间短,1-2秒;◆色彩清楚鲜艳;◆使用范围广,适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色;◆所染切片保存时间长且不易褪色。
产品组成:
规格
名称
7×50ml7×100ml Storage
试剂(A):Weigert 铁苏木素染色液A1:Weigert染液A25ml50ml RT避光A2:Weigert染液B25ml50ml RT
临用时,取A1、A2等量混合,成为Weigert铁苏木素染色液,不可预先配制后放置。
试剂(B):酸性乙醇分化液50ml100ml RT
试剂(C):Masson蓝化液50ml100ml RT
试剂(D):丽春红品红染色液50ml100ml RT避光
试剂(E):弱酸溶液50ml100ml RT
试剂(F):磷钼酸溶液50ml100ml RT避光
试剂(G):苯胺蓝染色液50ml100ml RT避光
使用说明书1份
自备材料:
固定液:选用甲醛升汞或甲醛盐溶液、蒸馏水、系列乙醇、二甲苯、染缸
操作步骤(仅供参考):
1、切片常规脱蜡至水。
2、用配制好的Weigert铁苏木素染色液染色5min-10min。
3、酸性乙醇分化液分化5-15s,水洗。
4、Masson蓝化液返蓝3-5min,水洗。
5、蒸馏水洗1min。
6、丽春红品红染色液染色5-10min。
7、在上述操作过程中按蒸馏水:弱酸溶液=2:1比例配置弱酸工作液,用弱酸工
作液洗1min。
8、磷钼酸溶液洗1-2min
9、用配置好的弱酸工作液洗1min。
10、直接放入苯胺蓝染色液中染色1-2min。
11、用配置好的弱酸工作液洗1min。
12、95%乙醇快速脱水。
13、无水乙醇脱水3次,每次5-10s。
14、二甲苯透明3次,每次1-2min。
15、中性树胶封固。
染色结果:
细胞核、胶原纤维/蛋白蓝色
细胞浆、肌肉、红细胞红色
注意事项:
1、切片脱蜡应尽量干净。
2、取A1、A2等量混合,成为Weigert铁苏木素染色液,一般24h失去染色能力。
3、组织固定起着非常重要的作用,使用不同的固定液可延长或缩短染色时间。
4、经典masson三色染色中,用Harris苏木精染核,但Harris苏木精染核后切
片颜色不够鲜艳,本染液采用Weigert染细胞核,因为染色的目的主要在于区分胶
原纤维和肌纤维,一般也可以省略该染色步骤。
5、酸性乙醇分化时间应该依据切片薄厚,组织的类别和新旧而定。
6、弱酸溶液可使色彩更清晰鲜艳,如使用量大可自行配置0.1-0.3%乙酸溶液予
以替代。
7、磷钼酸分化时要在镜下控制,分化到胶原纤维呈淡红色、纤维呈红色即可。
分
化时间根据染色深浅而定,一般1-2min。
8、Masson蓝化液亦可自行配制Scoot促蓝液或0.1-1%碳酸锂水溶液予以替代。
9、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。