酶的抑制剂与激活剂
酶的抑制剂与激活剂
Folin-酚法测碱性蛋白酶酶活原理
Folin-酚试剂在碱性条件下，其磷钼酸盐-磷钨酸 盐易被酚类化合物还原而呈蓝色反应(钼蓝和钨蓝的混 合物)。
在一定浓度范围内，蓝色深浅与含酚羟基氨基酸 (酪 氨酸)的量成正比，通过比较加入金属离子(或洗衣粉)后 和未加入金属离子(或洗衣粉)的反应酶液的OD680值，可 以推断出该种金属离子是该酶的激活剂还是抑制剂。
(4)反应结束时加入10%三氯醋酸溶液2 ml(终止反应) ， 立即摇匀，静置10 min。
(5)各取上清1.5ml于EP管中，6000rpm,离心1min 。取上 清1ml于试管中，各加入0.4 mol/L Na2CO3溶液5ml及 福林一酚试剂1 ml，置于40℃显色15 min 。
(6)测定OD680值 ，并以原酶活力为100，算出相对酶活 。空白试验时，先加三氯醋酸溶液，再加入酶液和 底物，同样测定OD680值。
酶的抑制剂与激活剂
一.目的与内容
目的：学习研究酶的抑制剂和激活剂的方法，并通 过几种金属离子和表面活性剂对枯草杆菌碱性蛋白酶 活力的影响，筛选出该酶的某些抑制剂和激活剂。
内容：1.几种金属离子Ca2+、Ag+、Cu2+、Hg2+和 Mg2+对枯草杆菌碱性蛋白酶活力的影响；2.洗衣粉对枯 草杆菌碱性蛋白酶活力的影响。
2．洗衣粉对酶活力的影响： (1)分别在pH 7.0和pH 10.0酶液中加入洗衣粉(反应液
终浓度为0.03%)。 (2)混合液和pH7原酶液、 pH7空白(共4支)于25℃下放
置20 min。 (3)测酶活力，并以原酶活力为100，算出相对酶活。
五.注意事项
1.实验中，以先加TCA的酶液为空白，以原酶液试管为 标准液，对其操作应与实验试管同步一致。
激活剂和抑制剂对酶活性影响实验报告
激活剂和抑制剂对酶活性影响实验报告
影响酶作用的因素：影响酶促反应的因素常有酶的浓度、底物浓度、pH值、温度、抑制剂、激活剂等。
其变化规律有以下特点：
1、酶浓度对酶促反应的影响：在底物足够，其它条件固定的条件下，反应系统中不含有抑制酶活性的物质及其它不利于酶发挥作用的因素时，酶促反应的速度与酶浓度成正比。
2、底物浓度对酶促反应的影响：在底物浓度较低时，反应速度随底物浓度增加而加快，反应速度与底物浓度近乎成正比，在底物浓度较高时，底物浓度增加，反应速度也随之加快，但不显著，当底物浓度很大且达到一定限度时，反应速度就达到一个最大值，此时即使再增加底物浓度，反应也几乎不再改变。
3、酶的活性受激活剂或抑制剂的影响。
氯离子为唾液淀粉酶的激活剂，铜离子为其抑制剂，激活剂使酶的活性升高，抑制剂使酶活性降低。
注意事项：
激活剂和抑制剂对于酶活性的影响，常常分不清激活剂，因为加入蒸馏水、NaCl、Na2SO4这3支试管的颜色一致，都是黄色。
出现这种现象的原因是酶活性太高了，需要稀释唾液，唾液稀释至加入蒸馏水的试管呈浅红色即可。
这样一来，这3支试管的颜色分别是浅红、黄、浅红，就可以断定Cl-是激活剂。
偶尔也有分不清抑制剂的就是加入蒸馏水、CuSO4、
Na2SO4这三支试管的颜色一致，都是蓝色。
因为酶活性太低，需要提高酶活性，只要重新制备唾液淀粉酶就行（但是新酶的活性不可太高，否则又分不清激活剂）。
最后3支试管的颜色应该是浅红、蓝、浅红，可以断定Cu2+是抑制剂。
酶的抑制剂与激活剂
(4)反应结束时加入10%三氯醋酸溶液2 ml(终止反应) ， 立即摇匀，静置10 min。
(5)各取上清1.5ml于EP管中，6000rpm,离心1min 。取上 清1ml于试管中，各加入0.4 mol/L Na2CO3溶液5ml及 福林一酚试剂1 ml，置于40℃显色15 min 。
(6)测定OD680值 ，并以原酶活力为100，算出相对酶活 。空白试验时，先加三氯醋酸溶液，再加入酶液和 底物，同样测定OD680值。
Folin-酚法测碱性蛋白酶酶活原理
Folin-酚试剂在碱性条件下，其磷钼酸盐-磷钨酸 盐易被酚类化合物还原而呈蓝色反应(钼蓝和钨蓝的混 合物)。
在一定浓度范围内，蓝色深浅与含酚羟基氨基酸 (酪 氨酸)的量成正比，通过比较加入金属离子(或洗衣粉)后 和未加入金属离子(或洗衣粉)的反应酶液的OD680值，可 以推断出该种金属离子是该酶的激活剂还是抑制剂。
2．洗衣粉对酶活力的影响： (1)分别在pH 7.0和pH 10.0酶液中加入洗衣粉(反应液
终浓度为0.03%)。 (2)混合液和pH7原酶液、 pH7空白(共4支)于25℃下放
置20 min。 (3)测酶活力，并以原酶活力为100，算出相对酶活。
五.注意事项
1.实验中，以先加TCA的酶液为空白，以原酶液试管为 标准液，对其操作应与实验试管同步一致。
表2 洗衣粉对酶活力的影响
剩余酶活
相对酶活
pH7.0 酶
100
标
准
pH10.0 酶
100
洗 pH7.0酶
100
衣
粉 pH10.0 酶
100
八.问题与思考
1.根据你的实验结果，上述实验因子哪些是枯草杆 菌碱性蛋白酶的抑制剂，哪些是激活剂？
酶抑制剂与激活剂
酶抑制剂与激活剂酶抑制剂和激活剂是生物化学领域中重要的研究课题。
酶抑制剂可以通过阻止酶催化反应的发生或减缓其速率来发挥作用，而激活剂则可以提高酶催化反应的速率。
这两种化合物在许多领域中都有重要的应用，包括药物研发、农业生产以及食品加工等。
一、酶抑制剂酶抑制剂是一类能够与酶结合并减慢酶催化反应速率的化合物。
酶抑制剂可以通过以下几种方式来实现对酶的抑制作用：1. 竞争性抑制剂：竞争性抑制剂与酶底物结合的活性位点竞争，从而减慢底物与酶结合的速率。
竞争性抑制剂通常具有与底物类似的结构，从而与酶底物结合的位点相似。
2. 非竞争性抑制剂：非竞争性抑制剂与酶结合的非活性位点互相竞争，从而改变酶的构象并减慢酶催化反应的速率。
3. 不可逆性抑制剂：不可逆性抑制剂与酶结合后，形成永久性的复合物，从而完全抑制酶的活性。
不可逆性抑制剂通常与酶的功能位点结合，破坏酶的结构或功能。
酶抑制剂在医药领域中有重要的应用。
例如，抗生素就是一类特定的酶抑制剂，通过抑制细菌细胞内的酶活性来杀死细菌。
此外，许多药物都是通过与特定酶结合来实现治疗效果，如抑制病毒复制或减慢肿瘤生长等。
二、酶激活剂酶激活剂是一类能够提高酶催化反应速率的化合物。
酶激活剂可以通过以下几种方式来实现对酶的激活作用：1. 温度激活：酶催化反应速率通常随着温度的升高而增加。
适当提高反应温度可以增加酶的催化效率，从而加快反应速率。
2. 辅酶激活：许多酶催化反应需要辅酶的参与。
辅酶作为酶的辅助因子，可以提供必要的化学基团或电子从而加速酶的催化反应。
3. 金属离子激活：某些酶的活性需要特定的金属离子的参与。
金属离子可以改变酶的构象或提供化学催化位点，从而激活酶催化反应。
酶激活剂在许多领域中都有应用。
例如，在食品加工过程中，酶激活剂可以用于增强酶的催化效率，从而提高食品生产的效率和品质。
此外，在农业生产中，酶激活剂也被用于增加植物对养分的吸收效率。
结论酶抑制剂和激活剂在生物化学领域中发挥着重要作用。
温度、PH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
（一）、溫度、PH對酶活性的影響一、實驗目的了解溫度對酶活性的影響。
了解酶活性的最適PH及掌握一種檢測最適PH的方法。
二、實驗原理三、實驗步驟1、溫度對酶活性的影響取3支試管，編號后按下表加入試劑試管編號試劑1230.2%淀粉溶液 1.5 1.5 1.5稀釋唾液/ml11無煮沸過的稀釋唾液/ml無無1搖勻后，將1、3號兩試管放入37攝氏度恒溫水浴中，2號試管放入冰水中。
10min后取出，將2號試管內的液體分為兩半，用碘化鉀-碘溶液來檢驗1、2、3號試管內淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。
將2號試管剩下的一半溶液放入37GAGGAGAGGAFFFFAFAF攝氏度水浴中繼續保溫10min后，再用碘液檢驗，結果如何？記錄并解釋結果。
注意事項：1、唾液制備時，先用蒸餾水漱口，以清除食物殘渣，再含一小口蒸餾水，0.5~1min后，使其流入量筒，并稀釋到50ml。
2、PH對酶活性的影響取4個標有號碼的20ml試管。
用吸管按下表添加0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液和0.1mol/L檸檬酸溶液以制備PH=5.0~8.0的4種緩沖液。
試管編號試劑12340.2mol/L磷酸氫二鈉/ml 5.15 6.057.729.720.1mol/L檸檬酸/ml 4.85 3.95 2.280.28PH5 5.8 6.88從4個試管中各取緩沖液3ml，分別注入到4支帶有號碼GAGGAGAGGAFFFFAFAF的試管中，隨后于每個試管中添加0.5%淀粉溶液2ml和稀釋唾液2ml。
向各試管中加入稀釋唾液的時間間隔分別為1min。
將各試管內容物混勻，并依次置于37攝氏度恒溫水浴中保溫。
第四管加入唾液2min后，每隔1min由第二管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1滴碘化鉀-碘溶液，檢驗淀粉的水解程度。
待混合液變為棕黃色時，向所有試管中依次添加1或2滴碘化鉀-碘溶液。
添加碘化鉀-碘溶液的時間間隔從第一管起，均為1min。
觀察各試管內容物呈現的顏色，分析PH對唾液淀粉酶活性的影響。
实验五激活剂、抑制剂、温度及PH对酶活性的影响
实验五激活剂、抑制剂、温度及PH对酶活性的影响一、目的要求通过实验加深对酶性质的认识，了解测定α-淀粉酶活力的方法。
二、实验原理酶是生物体内具有催化作用的蛋白质，通常称为生物催化剂。
酶催化的反应称为酶促反应。
生物催化剂催化生化反应时具有：催化效率好、有高度的专一性、反应条件温和、催化活力与辅基，辅酶，金属离子有关等特点。
能提高酶活力的物质，称为激活剂。
激活剂对酶的作用有一定的选择性，其种类多为无机离子和简单的有机化合物。
使酶的活力中心的化学性质发生变化，导致酶的催化作用受抑制或丧失的物质称为酶抑制剂。
氯离子为唾液淀粉酶的激活剂，铜离子为其抑制剂。
应注意的是激活剂和抑制剂不是绝对的，有些物质在低浓度时为某种酶的激活剂，而在高浓度时则为该酶的抑制剂。
如氯化钠达到约30%浓度时可抑制唾液淀粉酶的活性。
酶促反应中，反应速度达到最大值时的温度和PH值称为某种酶作用时的最适温度和PH值。
温度对酶反应的影响是双重的：一方面随着温度的增加，反应速度也增加，直至最大反应速度为止；另一方面随着温度的不断升高，而使酶逐步变性从而使反应速度降低。
同样，反应中某一PH范围内酶活力可达最高，在最适PH的两侧活性骤然下降，其变化趋势呈钟形曲线变化。
食品级α-淀粉酶是一种由微生物发酵生产而制备的微生物酶制剂，主要由枯草芽孢杆菌、黑曲霉、米曲霉等微生物产生。
但不同菌株产生的酶在耐热性、酶促反应的最适温度、PH、对淀粉的水解程度，以及产物的性质等均有差异。
α-淀粉酶属水解酶，作为生物催化剂可随机作用于直链淀粉分子内部的α-1,4糖苷键，迅速地将直链淀粉分子切割为短链的糊精或寡糖，使淀粉的粘度迅速下降，淀粉与碘的反应逐渐消失，这种作用称为液化作用，生产上又称α-淀粉酶为液化淀粉酶。
α-淀粉酶不能水解淀粉支链的α-1,6糖苷键，因此最终水解产物是麦芽糖、葡萄糖和α-1,6键的寡糖。
本实验通过淀粉遇碘显蓝色，糊精按其分子量的大小遇碘显紫蓝、紫红、红棕色，较小的糊精（少于6个葡萄糖单位）遇碘不显色的呈色反应，来追踪α-淀粉酶作用于淀粉基质的水解过程，从而了解酶的性质以及动力学参数。
浙江大学生物化学实验甲酶的基本性质激活剂与抑制剂对酶活力的影响
酶的基本性质（4）-激活剂与抑制剂
常见的酶的抑制剂：重金属离子（Ag+，Hg2+等）， CO，氰化物，有机磷农药等。
少量的激活剂或抑制剂就能影响酶的活性，而且 它常具有特异性。
一种物质对某种酶是激活剂，对另一种酶则可能 是抑制剂。
有些物质在低浓度时为某种酶的激活剂，在高浓 度时则可能为该酶的抑制剂。
酶的基本性质（4）-激活剂与抑制剂
1.2、原理
• 本试验利用淀粉水解不同阶段产物与碘有不同颜 色反应的特点，定性观察唾液淀粉酶在酶促反应 中激活或抑制的现象。
淀粉酶
淀粉酶
淀粉酶
淀粉酶
淀粉酶
淀粉
紫色糊精
红色糊精
无色糊精
麦芽糖
葡萄糖
H2O
H2O
H2O
H2O
H2O
I2
I2
I2
I2
I2
I2
蓝色
紫色
红色
不显色（碘色） （金黄色）
不显色 （碘色）
不显色 （碘色）
酶的基本性质（4）-激活剂与抑制剂
1.3、操作方法
• 操作过程及注意事项参P99。
1.4、实验结果及处理
• 仔细观察并纪录各管颜色，对试验现象进行简要说 明并判断激活剂和抑制剂。
酶的基本性质（4）-激活剂与抑制剂
1.1、激活剂和抑制剂简介
激活剂：凡能使酶活性增加的物质。 抑制剂：凡能使酶活性降低但并不引起酶蛋白变性
的物质。 常见的酶的激活剂： ⑴、无机离子：常为阳离子，如Mg2+，Na+等，但也
有阴离子，如Cl-。 ⑵、中等大小的有机分子：如抗 坏血酸，谷胱苷肽 ⑶、某些蛋白分子：指对某些无活性的酶原起激活作
温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
[目的] 1.掌握温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性影响 的基本原理； 2.熟悉唾液淀粉酶所催化的酶促反应过程；
[原理] 1. 温度：对酶的活性的影响为双效性，当酶促反应 的温度为最适温度时，最有利于酶促反应的进行。 温度过低，酶的活性减弱，温度太高，会使酶变性、 失活； 2.pH ：酶活性最大时的环境 pH 为最适 pH 。 pH 不仅 会影响酶的活性，还会影响底物的解离状态，从而 影响酶与底物的结合。过酸或过碱性的环境可使酶 变性、失活。
3、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
C．激活剂、 抑制剂组 1%淀粉 试剂 （2滴） 唾液
C1管
1ml 1%NaCl 10d
C2管
1ml 1%CuSO4 10d
C3管
1ml
C4管
1ml
1%Na2SO4 蒸馏水 10d 10d
摇匀， 37℃保温,每隔30秒从1号管中吸取溶液1d加到白瓷 盘小池中（小池预先加好0.1%碘液） 。当碘液不变色时， 分别向4管中加入1%碘液2滴，观察颜色变化。
收集唾液 ( 自来水漱口、收集唾液约 2-3ml 于小烧杯 中，蒸馏水稀释10倍,备用) 1、温度对酶活性的影响 A．温度组 唾液 （2ml） 1%淀粉 （1ml） 1%碘液 A1管 冰水浴 5分钟 冰水浴 15分钟 2d A2管 37 ℃水 浴5分钟 37℃水浴 15分钟 2d A3管 沸水浴 5分钟 沸水浴 15分钟 2d
2、pH对酶活性的影响 B．PH值组 B1管 PH5.0 2ml 10d B2管 PH6.8 2ml 10d B3管 PH8.6 2ml 10d
磷酸盐缓冲液 （2ml） 1%淀粉 唾液
摇匀，立即置37℃保温，每隔30秒从2号管中吸取溶液1滴 加到白瓷盘小池中（小池预先加好0.1%碘液）。当碘液不 变色时，分别向3管中加入1%碘液2滴，观察颜色变化。
激活剂抑制剂
RO P
X + E OH
RO P
O E + HX 酸
O R'O 有机 磷化合物 羟基 酶
+
O R'O 磷酰化 酶 CHNOH
N
CH3 解磷定
+
N CH3
E OH O OR' P CHNO OR
有机磷化合物对羟基酶的抑制
激活剂和抑制剂影响酶活性常具有特异性，如 Mg2+对脱羧酶、烯醇化酶等有提高活力的作用， 而对肌球蛋白ATP酶则有降低活力的作用 激活剂和抑制剂影响酶活性的剂量是很少的， 并且同一种酶可因激活剂的浓度不同而作用不 同，如Cl－在低浓度时为唾液淀粉酶的激活剂， 而在高浓度时（达到1／3饱和度）就可抑制唾 液淀粉酶的活性。
实验十二 激活剂和抑制剂对酶活性的影响
一、实验目的 了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。 (1) 了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。 (2) 学习鉴定激活剂和抑制剂影响酶活性的原理和 方法。。 方法。。
二、 பைடு நூலகம்验原理
在酶促反应过程中，酶的活性常常受某些物 质的影响，有些物质能使酶的活力增加，称为 酶的激活剂 激活剂；有些物质它们并不引起酶蛋白变 激活剂 性，但能使酶分子上的某些必需基团发生变化， 使酶的活性降低，称这些物质为酶的抑制剂。 抑制剂。 抑制剂
三、 实验仪器与试剂
1．实验材料 ． 新鲜唾液，淀粉。 新鲜唾液，淀粉。 2．实验器材 ． 普通试管：20mL× 移液管：lmL× 2mL× 普通试管：20mL×4；移液管：lmL×4，2mL×1， 5mL×l；100mL容量瓶，150mL三角瓶；恒温水浴箱；试 5mL× 100mL容量瓶，150mL三角瓶；恒温水浴箱； 容量瓶 三角瓶 管架；漏斗。 管架；漏斗。 3．实验试剂： ．
酶的可调性 名词解释
酶的可调性名词解释酶的可调性- 窥探生命奥秘中的精密调控引言：酶作为生物体中生命活动的催化剂，扮演着不可或缺的角色。
酶的可调性是指酶活性与生理条件、环境变化之间的相互关系。
在细胞内，酶活性的调控至关重要，它决定着生物体能量的合理利用和代谢途径的选择。
本文将从多个角度探讨酶的可调性，并揭示酶活性的调节为生命的奥秘增添了一抹浓墨。
一、酶的可逆调节1. 温度调节酶活性酶的活性通常会随温度的升高而增加，这是因为加热使酶分子的动力学能够克服较高的能垒。
但是，当温度超过一定界限时，酶活性可能会迅速降低。
这是由于高温会导致酶分子的构象发生变化，进而影响其催化活性。
例如，高温会引发蛋白质的变性，使酶失去正常的空间结构，从而导致酶功能的丧失。
2. pH调节酶活性细胞内的酶活性通常对pH值非常敏感，pH值的变化可以显著改变酶分子的离子状态和氢键形成能力。
因此，恰当的pH调节可以改变酶分子与底物之间的亲和力，从而影响酶催化活性。
不同酶的最适pH值各不相同，这是由于酶在其进化过程中适应了特定的环境和代谢途径所致。
二、酶的可逆调节1. 底物浓度调节酶活性酶的活性通常与底物的浓度呈正相关关系。
当底物浓度较低时，酶分子会主动与底物结合，催化底物的反应。
然而，当底物浓度达到一定水平时，酶分子与底物结合的速度将快于酶催化反应的速度，从而使酶的活性受到限制。
这种底物浓度调节可以有效避免代谢过程中的物质浪费，实现能量的高效利用。
2. 产物浓度调节酶活性产物浓度对酶活性的调节呈现负相关关系。
当产物浓度较高时，酶活性会受到抑制。
这是因为产物分子能够与酶分子结合形成酶-产物复合物，从而抑制酶的催化活性。
这一调节机制有助于防止代谢途径中产物的过度积累，保持代谢过程的正常进行。
三、酶的非可逆调节1. 激酶和磷酸酶激酶和磷酸酶是一类能够通过磷酸化和去磷酸化调节酶活性的蛋白质。
磷酸化是指在酶分子上添加磷酸基团，而去磷酸化则是去除酶分子上的磷酸基团。
酶的激活剂和抑制剂实验报告
酶的激活剂和抑制剂实验报告一、实验目的本实验旨在探究酶的激活剂和抑制剂对酶催化反应速率的影响，进一步了解酶的调节机制。
二、实验原理1. 酶的激活剂酶的激活剂是指能够增加酶催化反应速率的物质。
它们通常与酶结合后改变了酶分子构象，使其更容易与底物结合并产生催化作用。
常见的激活剂包括金属离子、辅因子等。
2. 酶的抑制剂酶的抑制剂是指能够降低或阻止酶催化反应速率的物质。
它们通常与酶结合后影响了其分子构象或活性中心，使其不能正常地与底物结合并发挥催化作用。
常见的抑制剂包括竞争性抑制剂、非竞争性抑制剂等。
三、实验步骤1. 预处理样品：将所需样品放入离心管中，并加入适量缓冲液进行混匀。
2. 加入试剂：根据不同实验要求，加入不同的酶激活剂或抑制剂。
3. 反应条件：将样品放入恒温水浴中，在适当的时间内进行反应。
4. 结果分析：通过检测反应产物的生成量或底物消耗量，计算酶催化反应速率，并比较不同实验条件下的结果。
四、实验结果1. 酶的激活剂实验通过添加金属离子（如Mg2+）等激活剂，可以明显提高酶催化反应速率。
例如，在酯水解反应中，加入Mg2+后，反应速率可增加数倍以上。
这是因为金属离子能够促进底物结合和酶分子构象变化，从而增强了催化作用。
2. 酶的竞争性抑制剂实验通过添加竞争性抑制剂（如甲状腺素）等，可以明显降低酶催化反应速率。
例如，在乳糖酸脱氢酶催化反应中，加入甲状腺素后，底物转化率可降低50%以上。
这是因为甲状腺素与底物结构相似，能够与酶结合并占据活性中心，从而阻止底物结合和酶催化反应。
3. 酶的非竞争性抑制剂实验通过添加非竞争性抑制剂（如草酸）等，同样可以降低酶催化反应速率。
例如，在过氧化氢酶催化反应中，加入草酸后，反应速率可降低30%以上。
这是因为草酸能够与酶结合并改变其分子构象，从而影响底物结合和催化作用。
五、实验结论本实验结果表明，不同的酶激活剂和抑制剂对酶催化反应速率有着显著的影响。
通过调节这些因素，可以有效地控制酶的活性和功能，并为生物学研究和工业生产提供重要的理论基础。
酶的基本性质实验——底物专一性、激活剂和抑制剂、最适温度
因此它们与Benedict试剂无呈色反应。
淀粉被淀粉酶水解，产物为葡萄糖；蔗糖被蔗糖酶水解，其产物为果糖和葡
萄糖，它们都为具有自由半缩醛羟基的还原糖，与Benedict试剂共热，即产生
红棕色Cu2O沉淀。本实验以此颜色反应观察淀粉酶、蔗糖酶对淀粉和蔗糖的水 解作用。
三、实验材料与试剂 1、实验材料 ⑴ 蔗糖酶液(样品Ⅳ）; ⑵ 新鲜唾液（含唾液淀粉酶）； 2、实验试剂 ⑴ 蔗糖酶液
在酶促反应过程中，酶的活性常受某些物质的影响，有些物质能使酶的 活性增加，称为激活剂；某些物质它们并不引起酶蛋白变性，但能使酶 分子上的某些必需基团（主要是指酶活性中心上的一些基团）发生变化， 因而引起酶活力下降，甚至丧失，致使酶反应速度降低，称为酶的抑制 剂。
酶的激活剂种类： 1、一些简单的无机离子，如Mg2+、Cl-等；
有些酶只有作用于底物的立体异构物中的一种，而对另一种则 全无作用。如酵母中的糖酶类只作用于D-型糖而不能作用于L-型 的糖。
本实验以唾液淀粉酶、蔗糖酶对淀粉、蔗糖水解反应的催化作用来观察 酶的专一性。采用Benedict试剂检测反应产物。
Benedict试剂是碱性硫酸铜溶液，具有一定的氧化能力，能与还原性糖
蒸馏水 Benedict试剂
记录观察结果
(ml) (ml)
3
2
2
2
摇匀，置沸水浴煮沸2～3min
注： ①检查目的：试剂是否有干扰因素存在。 ②也可对蔗糖酶液、唾液淀粉酶液进行检查是否也有干扰因素存在，请自己设计。
检查试剂
试管编号：
1
2
3
㈡淀粉酶的专一性 取三支试管，按下表操作：
试剂处理
试管编号
1
温度与酶活力的关系测定是选择一定的条件，把底物浓度、酶浓度、反应 时间、pH等固定在最适状态下，然后在一系列不同温度条件下，进行反应初 速度测定，以酶反应初速度对温度作图，可以得一个钟罩形的曲线，即为温 度—酶活性曲线，在某温度有一酶活力最大值，这个温度即为最适温度。
实验四 温度、激活剂和抑制剂对酶活力的影响
1、实验器材： (1)恒温水浴锅 (2)试管 (3)烧杯 (4)量筒 (5)玻璃棒 (6)白磁板 三、试剂和器材 (7)铁三角架 (8)酒精灯 (10 )试管夹 (11)试管架 (12)秒表 2、实验试剂 (1) 0.2%淀粉的0.3%氯化钠溶液 (2) KI-I2 (4) 1%NaCl 6) 1%Na2SO4 (7) 0.1%淀粉溶 (8) 唾液淀粉酶
（二）激活剂对酶反应的影响 激活剂大部分是一些无机离子和小分子有机物。这些物质可与酶 分子上的氨基酸侧链基团结合，可能是酶活性部位的组成部分， 也可能作为辅酶或辅基的一个组成部分起作用。 一般情况下，一种激活剂对某种酶是激活剂，而对另一种酶则起 剂 抑制作用； i ] 对于同一种酶，不同激活剂浓度会产生不同的作用。
实验四 温度、激活剂和抑制剂对酶活 力的影响
一、实验目的 1、了解温度对酶活性的影响，学会检测酶 最适温度的方法。 2、了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。 3、学习检测激活剂和抑制剂影响酶促反应 速度的原理和方法。
二、实验原理 （一）温度对酶活性的影响
一方面是温度升高,酶促反 应速度加快。 另一方面,温度升高,也将导 致酶活性降低甚至丧失。 因此大多数酶都有一个最 适温度(即 酶促反应速度最 快时的环境温度) 酶的最适温度不是一个常 数，它与作用时间长短有 关。
— 1.5 1.0
1-2滴
1.0 1.5 1.0
1-2滴
— 1.5 1.0
激活剂及抑制剂对酶活性的影响(修)
激活剂及抑制剂对酶活性的影响酶是一种催化化学反应的生物催化剂。
它可以降低化学反应的活化能，因此可以加速化学反应。
酶在许多生化过程中起着至关重要的作用。
因此，了解酶催化反应的机制以及如何改变酶的活性是非常重要的。
在这篇文章中，我们将讨论激活剂和抑制剂如何影响酶的活性。
激活剂激活剂是一种可以提高酶活性的分子。
它可以通过与酶结合来改变酶的构象，并增强酶的活性。
激活剂通常与酶的活性部位结合，并通过改变酶的构象来影响酶的功能。
激活剂对酶的作用可以是可逆的或不可逆的。
一些激活剂可以增加酶催化反应的速率常数（kcat）。
这意味着，反应的速率可以增加，而反应所需的物质量可以减少。
激活剂可以作用于酶本身或作用于底物。
例如，ATP（三磷酸腺苷）就是一种常见的激活剂，它可以作用于许多酶，并提高它们的活性。
ATP可以通过与酶活性部位结合来影响酶的构象，从而增强酶的催化活性。
抑制剂抑制剂是一种可以减低酶活性的分子。
它可以通过与酶结合来阻碍酶的功能。
抑制剂通常与酶的活性部位结合，并通过改变酶的构象来影响酶的功能。
抑制剂对酶的作用可以是可逆的或不可逆的。
抑制剂可以分为两类：竞争性抑制剂和非竞争性抑制剂。
竞争性抑制剂可以与底物竞争结合酶的活性部位，并阻止底物结合酶。
这可以减慢酶催化反应的速率。
例如，苯丙氨酸羧化酶具有两个基本底物，苯丙氨酸和乙酰辅酶A。
竞争性抑制剂可以与酶的活性部位结合，并阻止苯丙氨酸结合酶，从而减慢反应的速率。
另一方面，非竞争性抑制剂不结合酶的活性部位，而是结合在其他部位上。
这可能会影响酶的构象，从而降低酶的活性。
例如，草酸可以作为异柠檬酸脱氢酶的非竞争性抑制剂。
草酸的结构与该酶的辅酶结合部分相似，因此可以结合在辅酶-酶复合物上，从而降低酶的活性。
激活剂和抑制剂是可以影响酶活性的分子。
激活剂可以通过改变酶的构象来增强酶的催化活性，而抑制剂通过改变酶的构象来减慢酶的催化活性。
竞争性抑制剂和非竞争性抑制剂是两种不同类型的抑制剂，它们对酶的构象影响是不同的。
激活剂及抑制剂对酶活性的影响(修)课件
总结词
酶可以根据其催化的反应类型、来源和结构进行分类和命名。
要点一
要点二
详细描述
根据催化的反应类型，酶可以分为氧化还原酶类、水解酶类、转移酶类、裂合酶类和合成酶类等。根据酶的来源，可以分为动物酶、植物酶和微生物酶等。根据酶的结构特征，还可以将酶分为单体酶、寡聚酶和多聚酶等。在命名上，通常采用国际纯粹与应用化学联合会（IUPAC）推荐的命名法，结合反应类型、底物、产物等特征进行命名。
总结词：酶的结构与其功能密切相关，常见的结构域包括催化结构域、底物结合结构域和调节结构域。
激活剂对酶活性的影响
是指能够增强酶促反应速度但不改变酶的活化能的物质。
激活剂
按作用机制可分为共价型和非共价型激活剂。
分类
通过与酶或底物结合，改变反应途径，降低反应所需活化能，从而加速反应速度。
降低反应活化能
竞争性抑制
抑制剂与酶的活性中心以外的结合位点结合，使酶不能同时结合底物，从而降低酶的活性。
非竞争性抑制
抑制剂与酶和底物复合物结合，使底物不能继续结合在酶的活性中心上，从而降低酶的活性。
反竞争性抑制
是一种重金属离子抑制剂，能够与酶活性中心的锌离子结合，从而抑制许多含锌离子的酶的活性。
硫酸铜
能够与酶活性中心的巯基结合，抑制许多含巯基的酶的活性。
激活剂与抑制剂对酶活性影响的实验研究
实验结论
根据实验结果分析得出结论，总结激活剂和抑制剂对酶活性的影响，以及作用机制。
讨论
对实验结果进行深入讨论，分析激活剂和抑制剂对酶活性影响的机制，探讨实际应用中的可能性与局限性。
感谢酶活性中心的钙离子结合，抑制许多含钙离子的酶的活性。
草酸盐
能够与酶活性中心的铁离子结合，抑制许多含铁离子的酶的活性。
生物化学实验课件-影响酶活力的因素-激活剂和抑制剂
实验原理
实验原理
酶活力常受某些物质的影响，有些物质能使酶活力增加，称为酶的激活剂； 另一些物质则能使酶活力降低，称为酶的抑制剂。例如，Cl-为唾液淀粉酶的 激活剂，Cu2+为其抑制剂。
实验试剂
实验试剂
（1）0.1%淀粉溶液：称取可溶性淀粉0.1g，先用少量的水加热调成糊状， 再加热水稀释至100ml； （2）1%氯化钠溶液：1g氯化钠溶于蒸馏水，稀释至100ml； （3）1%硫酸铜溶液：1g硫酸铜溶于蒸馏水，稀释至100ml； （4）1%硫酸钠溶液：1g硫酸钠溶于蒸馏水，稀释至100ml； （5）碘化钾-碘溶液：于2%碘化钾溶液加入碘至淡黄色。
实验步骤
实验步骤
激活剂和抑制剂对酶活力的影响
取干净试管4只，按下表加入试剂并操作。
试剂/管号
1
2
3
4
1%淀粉溶液/ml
1
1
1
1
1%硫酸铜溶液/ml
1
-
-
-
1%氯化钠溶液/ml
-
-
1
-
蒸馏水/ml
-
-
-
1
混匀，37℃水浴中保温2min
稀释的唾液（1∶30）/ml
0.5
0.5
生物化学实验
影响酶活力的因素-激活剂、抑制剂
目录 / CONTENTS
CHAPTER 01 CHAPTER 02 CHAPTER 03 CHAPTER 04 CHAPTER 05
实验目的 实验原理 实验试剂 实验步骤 注意事项
实验目的
实验目的
1.掌握激活剂及抑制剂对酶活力的影响。 2.理解激活剂及抑制剂影响酶活力的机制。 3.了解测定酶活力的方法。
0.5
酶的激活剂及抑制剂综述
酶的激活剂及抑制剂
【实验目的】
学习检定激活剂和抑制剂影响酶反应的方法和原理
【实验原理】
酶的活性常受某些物质的影响，有些物质能使酶的活性增加，称为酶的激活剂；有些物质能使酶的活性降低，称为酶的抑制剂。
例如，氯化钠为唾液淀粉酶的激活剂，硫酸铜为其抑制剂。
很少量的激活剂或抑制剂就会影响酶的活性，而且常有其特异性。
值得注意的是激活剂和抑制剂不是绝对的，有些物质在低浓度时为某种酶的激活剂，而在高浓度时则为该酶的抑制剂。
例如，氯化钠达到1/3饱和度时就可抑制唾液淀粉酶的活性。
【实验材料及用具】
1、l%淀粉溶液。
2、1%氯化钠溶液。
3、碘化钾–碘溶液：将碘化钾20克和碘10克溶解在100ml水中，使用前稀释10倍。
4、稀释100倍～200倍的新鲜唾液。
5、0.1%硫酸铜溶液。
【实验步骤】
取3支试管，编号。
向第l支试管中加入l%氯化钠溶液l毫升，向第2支试管中加入0.1%的硫酸铜溶液l毫升，向第3支试管中加入蒸馏水l毫升作对照。
再向每支试管各加入0.l%淀粉溶液3毫升和稀释的唾液l毫升。
摇匀各管内容物，一齐放入37℃恒温水浴中保温，10分钟～15分钟后取出。
冷后，各滴入2滴～3滴碘化钾–碘溶液，混匀。
观察比较3支试管颜色的深浅。
如果激活剂或抑制剂的作用不明显，主要原因可能是唾液淀粉酶活性不够高，可以适当延长反应时间或者降低唾液稀释倍数，然后再继续实验。
激活剂和抑制剂的名词解释
激活剂和抑制剂的名词解释在化学和生物领域中，我们经常听到激活剂和抑制剂这两个词汇，它们在化学反应和生物过程中起着重要的调节作用。
本文将从理论和实践角度解释这两个概念的含义、功能及其在科学研究和实际应用中的重要性。
一、激活剂激活剂是指可以提高化学反应速率的物质。
在许多反应中，化学反应的起始能量（活化能）较高，需要克服这个能垒才能进行反应。
在这种情况下，激活剂的作用是降低活化能，使反应更容易发生。
激活剂通过与反应物发生化学反应，形成中间体，然后再与反应物或过渡态发生反应，促使反应路径经过较低能垒，从而加速反应速率。
激活剂本身在反应结束后通常会恢复原状，因此它参与反应但不会消耗。
激活剂在化学合成和工业生产中广泛应用。
例如，在有机合成中，某些化合物的合成需要高温或高压条件，但这些条件也可能导致副反应的发生。
使用激活剂可以在温和条件下促进所需反应，提高产率和选择性，同时减少副反应的发生。
二、抑制剂抑制剂是指可以减慢或阻碍化学反应速率的物质。
与激活剂相反，抑制剂的作用是增加活化能，从而降低化学反应的速率。
抑制剂可以通过多种机制发挥作用。
一种常见的机制是竞争性抑制，即抑制剂与反应物竞争结合于酶活性部位或化学反应中心，降低反应物与酶或反应物与反应中心之间的结合能力。
这种竞争性抑制剂可以通过增加反应物浓度来克服，但当抑制剂浓度较高时，其抑制效果将更为显著。
另一种机制是非竞争性抑制，其中抑制剂结合到反应物（或酶）附近，在反应物与酶或反应中心结合后改变它们的构象，使其无法有效参与反应。
这种非竞争性抑制剂通常具有高度特异性，可以选择性地抑制特定的酶或反应。
抑制剂在生物学研究和药物设计中起着重要的作用。
通过选择性地抑制特定酶的活性，可以调控生物体内特定的代谢途径或信号传导通路，从而治疗疾病或减轻疾病症状。
三、激活剂与抑制剂的比较激活剂和抑制剂在功能上起着互补的作用。
激活剂通过降低反应活化能提高反应速率，而抑制剂通过增加活化能降低反应速率。
温度、PH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
（一）、温度、PH对酶活性的影响【1】一、实验目的了解温度对酶活性的影响。
了解酶活性的最适PH及掌握一种检测最适PH的方法。
二、实验原理三、实验步骤1、温度对酶活性的影响取3支试管，编号后按下表加入试剂试剂试管编号1 2 30.2%淀粉溶液 1.5 1.5 1.5稀释唾液/ml 1 1 无煮沸过的稀释唾液/ml 无无 1摇匀后，将1、3号两试管放入37摄氏度恒温水浴中，2号试管放入冰水中。
10min后取出，将2号试管内的液体分为两半，用碘化钾-碘溶液来检验1、2、3号试管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。
将2号试管剩下的一半溶液放入37摄氏度水浴中继续保温10min 后，再用碘液检验，结果如何？记录并解释结果。
注意事项：1、唾液制备时，先用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一小口蒸馏水，0.5~1min后，使其流入量筒，并稀释到50ml。
2、PH对酶活性的影响取4个标有号码的20ml试管。
用吸管按下表添加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1mol/L柠檬酸溶液以制备PH=5.0~8.0的4种缓冲液。
试剂试管编号1 2 3 40.2mol/L磷酸氢二钠/ml 5.15 6.05 7.72 9.720.1mol/L柠檬酸/ml 4.85 3.95 2.28 0.28PH 5 5.8 6.8 8 从4个试管中各取缓冲液3ml，分别注入到4支带有号码的试管中，随后于每个试管中添加0.5%淀粉溶液2ml和稀释唾液2ml。
向各试管中加入稀释唾液的时间间隔分别为1min。
将各试管内容物混匀，并依次置于37摄氏度恒温水浴中保温。
第四管加入唾液2min后，每隔1min由第二管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1滴碘化钾-碘溶液，检验淀粉的水解程度。
待混合液变为棕黄色时，向所有试管中依次添加1或2滴碘化钾-碘溶液。
添加碘化钾-碘溶液的时间间隔从第一管起，均为1min。
观察各试管内容物呈现的颜色，分析PH对唾液淀粉酶活性的影响。
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三.器材和用具
1.恒温水浴锅，试管，722紫外可见分光光度计，移液枪
，EP管，试管架。
酶的抑制剂与激活剂
授课教师: 余子全 研 究 生: 贾亮 何恋
一.目的与内容
目的：学习研究酶的抑制剂和激活剂的方法，并通 过几种金属离子和表面活性剂对枯草杆菌碱性蛋白酶 活力的影响，筛选出该酶的某些抑制剂和激活剂。
内容：1.几种金属离子Ca2+、Ag+、Cu2+、Hg2+和
Mg2+对枯草杆菌碱性蛋白酶活力的影响；2.洗衣粉对枯
(3)将混合液预热至40℃，加入预热的2%酪蛋白溶液1 ml
，于40℃反应10 min。
(4)反应结束时加入10%三氯醋酸溶液2 ml(终止反应) ，
立即摇匀，静置10 min。
(5)各取上清1.5ml于EP管中，6000rpm,离心1min 。取上
清1ml于试管中，各加入0.4 mol/L Na2CO3溶液5ml及 福林一酚试剂1 ml，置于40℃显色15 min 。 (6)测定OD680值 ，并以原酶活力为100，算出相对酶活 。空白试验时，先加三氯醋酸溶液，再加入酶液和
本实验所用的是枯草杆菌碱性蛋白酶，该酶是
由地衣芽孢杆菌经深层发酵提炼所得，能将大分 子蛋白质水解成游离的氨基酸等产物，最适pH值 一般为9-11，最适温度为40-50℃。
Folin-酚法测碱性蛋白酶酶活原理
Folin-酚试剂在碱性条件下，其磷钼酸盐-磷钨酸
盐易被酚类化合物还原而呈蓝色反应(钼蓝和钨蓝的混
底物，同样测定OD680值。
2．洗衣粉对酶活力的影响：
(1)分别在pH 7.0和pH 10.0酶液中加入洗衣粉(反应液
终浓度为0.03%)。 (2)混合液和pH7原酶液、 pH7空白(共4支)于25℃下放 置20 min。 (3)测酶活力，并以原酶活力为100，算出相对酶活。
五.注意事项
1.实验中，以先加TCA的酶液为空白，以原酶液试管为
2.试剂：20mM/L氯化钙， 20mM/L硝酸银， 20mM/L硫 酸铜， 20mM/L氯化汞， 20mM/L氯化镁，0.6％洗衣 粉， 0.4 mol/L 碳酸钠， 2％酪蛋白，枯草芽孢杆菌碱 性蛋白酶(稀释2000倍)，福林-酚(市售福林-酚试剂加
水稀释1倍，约为1 mol/L )， 0.5M/L氢氧化钠，pH10
Ag+
表2 洗衣粉对酶活力的影响
剩余酶活 pH7.0 酶 标 准 pH10.0 酶 100 相对酶活
100
洗 衣 粉
pH7.0酶
100
pH10.0 酶
100
八.问题与思考
1.根据你的实验结果，上述实验因子哪些是枯草杆
菌碱性蛋白酶的抑制剂，哪些是激活剂？
2.用何方法可以解除或避免金属离子对酶的抑制作
标准液，对其操作应与实验试管同步一致。
2.由于分光光度计比较精密，所以往试管中加药品的
时候要尽量做到准确。
3.拿比色皿是要拿它的毛面，不可以用手接触它的光滑
面；擦拭比色皿要顺着一个方向擦。
4.在比色皿中装入的液体量大约是比色皿体积的三 分之二。
六.实验报告
将实验结果填入下表中。
表1 金属离子对酶活力的影响
硼砂缓冲液，pH7磷酸缓冲液， 10% TCA。
四.操作步骤
1．金属离子对酶活力的影响：
(1)分别将1ml pH 10.0酶液与相应体积的氯化钙、硝酸银
、硫酸铜、氯化汞、氯化镁溶液混合，使反应液中金 属离子终浓度分别为0.8 mmol/L和0.4mmol/L。 (2)混合液及pH10原酶液、 pH10空白(共12支)25℃放置 20 min。
金属离子 0.8 mmol/L Ca2+ 0.4mmol/L 0.8 mmol/L 0.4 mmol/L Cu2+ 0.8 mmol/L 0.4mmol/L Hg2+ 0.8 mmol/L 0.4 mmol/L Mg2+ 0.8 mmol/L 0.4 mmol/L 剩余活力 相对活力 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100
草杆菌碱性蛋白酶活力的影响。
二.基本原理
酶分子与配体结合后，可以改变酶的活性。使酶
活性降低乃至完全丧失活性的配体，称为酶的抑制
剂；能启动和（或）增强酶的活性，称为酶的激活
剂。研究酶的抑制和激活作用，具有重要的实用价
值。 抑制剂或激活剂的作用部位，主要是酶的活性中 心的必要基团或直接影响酶的结构残基所引起的效 应。
用？
3.查阅文献，试对你的实验结果作出机理上的可能 解释。