水产微生物学：第二章 原核微生物
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革兰氏阴性菌由于细胞壁聚糖含量少， 虽被溶菌酶除去，但外壁层中脂多糖、脂 蛋白仍然全部保留，外壁的结构尚存，所 以，球形体较之原生质体对外界环境具一 定抗性，并能在普通培养基上生长。
③细菌L-型 L-form of bacteria
细菌L-型是细菌在某些环境条件下所形 成的变异型。没有完整而坚韧的细胞壁，细 胞呈多形态，有的能通过细菌滤器，故又称 “滤过型菌”。在低渗条件下生长缓慢，在 固体培养基上形成一种直径约0.1mm的微小菌 落，这种变异有的可恢复，有的不能恢复， 最先由英国的Lister医学研究院所发现。
⑷细胞壁缺陷细菌
用溶菌酶处理细胞或在培养基中加 入青霉素等因子，便可破坏或抑制细 胞壁的形成，成为细胞壁缺陷细菌。
①原生质体 ②球形体 ③细菌L-型
①原生质体protoplast
在革兰氏阳性细菌培养物中加溶菌酶，或在含青霉素等 的培养基里培养阳性细菌，便可破坏或抑制细胞壁的合成， 细菌除去细胞壁后剩下的部分叫做原生质体。
③革兰氏染色原理
染色时，细胞内形成了深蓝色的结晶紫-碘的复合物。这 种复合物可被酒精从革兰氏阴性细菌细胞内浸出，而阳性菌则 较困难。这是由于阳性细菌细胞壁较厚，尤其是肽聚糖含量较 高，网格结构紧密，含脂量又低，当它被酒精脱色时，引起了 细胞壁肽聚糖层网状结构的孔径缩小以至关闭，从而阻止了不 溶性结晶紫—碘复合物的逸出，故菌体呈深紫色；可是，革兰 氏阴性细菌的细胞壁肽聚糖层较薄，含量较少，而脂类的含量 高，当酒精脱色时，脂类物质溶解，细胞壁透性增大，结晶紫 -碘复合物也随之被抽提出来，故革兰氏阴性细菌菌体呈复染 液的红色。
1. 霍乱弧菌的正常形态；2. 霍乱弧菌的衰老型
2. 细菌的大小
细菌的个体要在显微镜下才能看见，其度量单位一般用 微米（ µ），各种细菌的大小，有一定的区别。 球菌：用直径表示，常在0.5-2 µ 杆菌：用长× 宽表示，其中
大杆菌：3-8 × 1-1.25 µ 中杆菌：2-3 × 0.5-1 µ 小杆菌：0.7-1.5 × 0.2-0.4 µ 螺旋菌：常以两端的直线距离为长度，一般2-20 × 0.4-2µ
⑴细胞壁的功能
具有保护细胞和维持细胞形态的作用。
①如果将杆菌接入浓度为0.2mol/L的蔗糖等渗溶液和盛 有玻璃珠的三角烧瓶中，加以摇动，可使细胞壁破裂，细胞 内含物流出，这样就可得到细胞壁的空壳。空壳呈杆状透明， 细胞内含物却是圆的。这个实验告诉我们，细菌细胞壁的功 能是使细菌具有一定的形状。
②将细菌用溶菌酶处理，除去细胞壁，并接入低渗溶液， 这时没有细胞壁的细胞膜很快破裂。
①革兰氏染色方法：着色：草酸铵结晶 紫+碘→脱色：95%乙醇→复染：复红或蕃 红
②革兰氏染色结果：细胞紫色—G+，细 胞红色—G-
实验程序
（简单染色的方法和步骤）
• 简单染色法（一般染色法） １.菌种： ２.涂片 ３.干燥：自然气干或酒精灯 高处微微加热。 ４ 固定 ５.染色：在整个涂面上滴加 齐氏石炭酸复红，染色１分 钟。 ６.水洗：倾去染液，用自来 水细流冲洗至流下的水中无 染料颜色为止。
第二章 原核微生物
第1节 细菌 第2节 放线菌 第3节 其他原核微生物
第1节 细菌
一、细菌的形态 二、细菌的结构 三、细菌的菌落 四、细菌的繁殖方式
一、细菌的形态
1. 细菌的外形和排列 2. 细菌的大小
1. 细菌的外形和排列
细菌的外形比较简单，仅 球状、杆状和螺旋状，分别称 为球菌、杆菌和螺旋菌。
原生质体由于没有坚韧的细胞壁，故任何形态的菌体均 呈球形。对环境条件很敏感，而且特别脆弱，渗透压、振荡、 离心以至通气等因素都易引起原生质体破裂，有的原生质体 还保留着鞭毛，但不能运动，也不能被相应的噬菌体感染。 可是其他生物活性基本不变。
②球形体sphaeroplast
指还残留着部分细胞壁的革兰氏阴Βιβλιοθήκη Baidu 细菌的原生质体。
③将细菌接入一定的高渗溶液中，原生质收缩，但细胞 仍可保持原来的形态；若接入低渗溶液中，细胞则膨大，但 不破裂。
⑵细胞壁的化学组成
肽聚糖—NAG，NAMA，
G+
短肽。 G+多、G-少
垣酸-- G+
脂多糖-- G-
G-
脂类-- G+少、G-多
蛋白质-- G+少、G-多
肽聚糖：粘肽、胞壁质
⑶细胞壁与革兰氏染色
四联球 菌
葡萄球 菌
球菌
链球 菌
八叠球 菌
链球菌
葡萄球菌
球菌
注意： 在以上各种类型排列的球菌
培养物中，都能经常看到游离 的单个菌体存在。
大肠杆菌（O157：H7菌株）
杆菌 双杆菌
链杆菌
八字形
栅栏样
杆菌
一般来说，杆菌呈圆柱形，也有近似卵圆 形的；菌体多数平直，也有些稍微弯曲的；菌 体两端多数钝圆，少数平截或尖锐状。杆菌除 了多数呈各种杆状外，还有些比较特殊的形态：
７干燥：空气中自然干燥。 ８ 镜检：在油镜下观察各种 细菌形态并绘图。
实验程序
（革兰氏染色的方法和步骤）
• 革兰氏（Gram）染色法 1. 涂片 2. 初染：在做好的涂面上滴加 草酸铵结晶紫染液，染1分钟， 倾去染液，流水冲洗至无紫色。 3. 媒染：先用新配的路哥氏碘 液冲去残水，而后用其覆盖涂 面1分钟，后水洗。 4. 脱色：除去残水后，滴加 95%酒精进行脱色约30秒，后 立即用流水冲洗。 5. 复染：滴加番红染色液，染1 分钟，水洗后用吸水纸吸干。 6. 镜检：观察染色结果并绘图。
球杆菌：菌体短小，两端钝圆，形态近似球形。
分枝杆菌：菌体有分支或有侧枝。
棒杆菌：菌体一端较另一端大。
柄杆菌：菌体一端有柄。
弧菌：菌 体只有1个 弯曲，呈 逗点状。
螺旋菌
螺菌：菌 体有2个以 上弯曲， 呈螺旋形。
螺旋菌
衰老型和多形性
在正常情况下，细菌的个体形状和 排列都是比较一致的，在老培养物中， 会出现各种和正常形状不一样的个体， 这就是衰老型或退化型，当这些衰老型 的培养物重新处于正常的培养环境中， 可恢复正常形状。但也有些细菌，即使 在最适宜的环境中生长，其形状也很不 一致，这种现象称多形性。
二、细菌的结构
基本结构：细胞壁， 细胞膜，细胞质， 核物质，核糖体； 特殊结构：鞭毛， 繖毛，荚膜，芽胞 等。
1.细胞壁 cell wall
是包在细胞表面较为坚韧略具弹性 的结构，可占细菌干重的10-40%；用 质壁分离和适当的染色方法，可在光 镜下看到。G+厚约20-80nm， G-厚约 10nm
③细菌L-型 L-form of bacteria
细菌L-型是细菌在某些环境条件下所形 成的变异型。没有完整而坚韧的细胞壁，细 胞呈多形态，有的能通过细菌滤器，故又称 “滤过型菌”。在低渗条件下生长缓慢，在 固体培养基上形成一种直径约0.1mm的微小菌 落，这种变异有的可恢复，有的不能恢复， 最先由英国的Lister医学研究院所发现。
⑷细胞壁缺陷细菌
用溶菌酶处理细胞或在培养基中加 入青霉素等因子，便可破坏或抑制细 胞壁的形成，成为细胞壁缺陷细菌。
①原生质体 ②球形体 ③细菌L-型
①原生质体protoplast
在革兰氏阳性细菌培养物中加溶菌酶，或在含青霉素等 的培养基里培养阳性细菌，便可破坏或抑制细胞壁的合成， 细菌除去细胞壁后剩下的部分叫做原生质体。
③革兰氏染色原理
染色时，细胞内形成了深蓝色的结晶紫-碘的复合物。这 种复合物可被酒精从革兰氏阴性细菌细胞内浸出，而阳性菌则 较困难。这是由于阳性细菌细胞壁较厚，尤其是肽聚糖含量较 高，网格结构紧密，含脂量又低，当它被酒精脱色时，引起了 细胞壁肽聚糖层网状结构的孔径缩小以至关闭，从而阻止了不 溶性结晶紫—碘复合物的逸出，故菌体呈深紫色；可是，革兰 氏阴性细菌的细胞壁肽聚糖层较薄，含量较少，而脂类的含量 高，当酒精脱色时，脂类物质溶解，细胞壁透性增大，结晶紫 -碘复合物也随之被抽提出来，故革兰氏阴性细菌菌体呈复染 液的红色。
1. 霍乱弧菌的正常形态；2. 霍乱弧菌的衰老型
2. 细菌的大小
细菌的个体要在显微镜下才能看见，其度量单位一般用 微米（ µ），各种细菌的大小，有一定的区别。 球菌：用直径表示，常在0.5-2 µ 杆菌：用长× 宽表示，其中
大杆菌：3-8 × 1-1.25 µ 中杆菌：2-3 × 0.5-1 µ 小杆菌：0.7-1.5 × 0.2-0.4 µ 螺旋菌：常以两端的直线距离为长度，一般2-20 × 0.4-2µ
⑴细胞壁的功能
具有保护细胞和维持细胞形态的作用。
①如果将杆菌接入浓度为0.2mol/L的蔗糖等渗溶液和盛 有玻璃珠的三角烧瓶中，加以摇动，可使细胞壁破裂，细胞 内含物流出，这样就可得到细胞壁的空壳。空壳呈杆状透明， 细胞内含物却是圆的。这个实验告诉我们，细菌细胞壁的功 能是使细菌具有一定的形状。
②将细菌用溶菌酶处理，除去细胞壁，并接入低渗溶液， 这时没有细胞壁的细胞膜很快破裂。
①革兰氏染色方法：着色：草酸铵结晶 紫+碘→脱色：95%乙醇→复染：复红或蕃 红
②革兰氏染色结果：细胞紫色—G+，细 胞红色—G-
实验程序
（简单染色的方法和步骤）
• 简单染色法（一般染色法） １.菌种： ２.涂片 ３.干燥：自然气干或酒精灯 高处微微加热。 ４ 固定 ５.染色：在整个涂面上滴加 齐氏石炭酸复红，染色１分 钟。 ６.水洗：倾去染液，用自来 水细流冲洗至流下的水中无 染料颜色为止。
第二章 原核微生物
第1节 细菌 第2节 放线菌 第3节 其他原核微生物
第1节 细菌
一、细菌的形态 二、细菌的结构 三、细菌的菌落 四、细菌的繁殖方式
一、细菌的形态
1. 细菌的外形和排列 2. 细菌的大小
1. 细菌的外形和排列
细菌的外形比较简单，仅 球状、杆状和螺旋状，分别称 为球菌、杆菌和螺旋菌。
原生质体由于没有坚韧的细胞壁，故任何形态的菌体均 呈球形。对环境条件很敏感，而且特别脆弱，渗透压、振荡、 离心以至通气等因素都易引起原生质体破裂，有的原生质体 还保留着鞭毛，但不能运动，也不能被相应的噬菌体感染。 可是其他生物活性基本不变。
②球形体sphaeroplast
指还残留着部分细胞壁的革兰氏阴Βιβλιοθήκη Baidu 细菌的原生质体。
③将细菌接入一定的高渗溶液中，原生质收缩，但细胞 仍可保持原来的形态；若接入低渗溶液中，细胞则膨大，但 不破裂。
⑵细胞壁的化学组成
肽聚糖—NAG，NAMA，
G+
短肽。 G+多、G-少
垣酸-- G+
脂多糖-- G-
G-
脂类-- G+少、G-多
蛋白质-- G+少、G-多
肽聚糖：粘肽、胞壁质
⑶细胞壁与革兰氏染色
四联球 菌
葡萄球 菌
球菌
链球 菌
八叠球 菌
链球菌
葡萄球菌
球菌
注意： 在以上各种类型排列的球菌
培养物中，都能经常看到游离 的单个菌体存在。
大肠杆菌（O157：H7菌株）
杆菌 双杆菌
链杆菌
八字形
栅栏样
杆菌
一般来说，杆菌呈圆柱形，也有近似卵圆 形的；菌体多数平直，也有些稍微弯曲的；菌 体两端多数钝圆，少数平截或尖锐状。杆菌除 了多数呈各种杆状外，还有些比较特殊的形态：
７干燥：空气中自然干燥。 ８ 镜检：在油镜下观察各种 细菌形态并绘图。
实验程序
（革兰氏染色的方法和步骤）
• 革兰氏（Gram）染色法 1. 涂片 2. 初染：在做好的涂面上滴加 草酸铵结晶紫染液，染1分钟， 倾去染液，流水冲洗至无紫色。 3. 媒染：先用新配的路哥氏碘 液冲去残水，而后用其覆盖涂 面1分钟，后水洗。 4. 脱色：除去残水后，滴加 95%酒精进行脱色约30秒，后 立即用流水冲洗。 5. 复染：滴加番红染色液，染1 分钟，水洗后用吸水纸吸干。 6. 镜检：观察染色结果并绘图。
球杆菌：菌体短小，两端钝圆，形态近似球形。
分枝杆菌：菌体有分支或有侧枝。
棒杆菌：菌体一端较另一端大。
柄杆菌：菌体一端有柄。
弧菌：菌 体只有1个 弯曲，呈 逗点状。
螺旋菌
螺菌：菌 体有2个以 上弯曲， 呈螺旋形。
螺旋菌
衰老型和多形性
在正常情况下，细菌的个体形状和 排列都是比较一致的，在老培养物中， 会出现各种和正常形状不一样的个体， 这就是衰老型或退化型，当这些衰老型 的培养物重新处于正常的培养环境中， 可恢复正常形状。但也有些细菌，即使 在最适宜的环境中生长，其形状也很不 一致，这种现象称多形性。
二、细菌的结构
基本结构：细胞壁， 细胞膜，细胞质， 核物质，核糖体； 特殊结构：鞭毛， 繖毛，荚膜，芽胞 等。
1.细胞壁 cell wall
是包在细胞表面较为坚韧略具弹性 的结构，可占细菌干重的10-40%；用 质壁分离和适当的染色方法，可在光 镜下看到。G+厚约20-80nm， G-厚约 10nm