糖组学glycomics的背景及研究意义
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（4）糖链影响糖蛋白的生物学活性 ●糖链与酶活性 糖链在酶的新生肽链折叠、转运和保护等 方面普遍起作用。但糖链与成熟酶活性的关 系因酶而异。有些酶除去糖链活性不受影响, 如UDP-葡糖醛酸酶、酵母羧肽酶等。有些酶 的活力依赖其糖链的存在， 如溶酶体β一葡 糖苷酶除去糖链后只有免疫活性而而完全没 有酶活力。
●SLAC
研究发现，植物凝集素是一类能选择性地结合糖链的糖结合 蛋白。利用这种特性可以特异性地富集某种糖蛋白/糖链。 用于纯化糖蛋白/糖链的植物凝集素主要有刀豆凝集素 (concanavalin A, Con A)、麦胚凝集素(wheat germ agglutinin, WGA)、豌豆外源凝集素(pea lectin)、植物血 凝素(phytohaemagglutinin-E4 ,E4-PHA) 和网孢盘菌凝集 素(Aleuria aurantia lectin,AAL)等。单一一种凝集素并 不能够富集细胞中所有的糖蛋白/糖链，因此科学家们在上 世纪80年代发明了一种被称作连续凝集素亲和色谱(serial lectin affinitychromatography, SLAC) 的方法来分离同一 细胞中的各种糖蛋白/糖链。这种方法是将不同的凝集素亲 和柱串联排列，样品混合物依次经过这些亲和柱，这样就可 将不同的糖蛋白/糖链富集在不同的柱中，提高了糖蛋白/糖 链的回收效率和混合糖蛋白/糖链的分离效果。
类风湿关节炎
总之
毫无疑问,如果试图深入了解生命的复杂规 律,就必须有“基因组－蛋白质组－糖组” 的整体观念,这样才有可能揭示自身全部基 因功能,从而进一步深入研究疾病的发病机 制,有效控制疾病的发生、发展及预后,以 及筛选疾病、预测诊断标记物和开发新的 药物靶标。
2、糖组学的研究策略
糖组学的研究远较基因组学、蛋白质组学复杂。 目前糖组学关注的焦点是糖蛋白,为了更好地与蛋白质组学相 关联,将研究对象锁定为糖肽。研究核心策略为: (1) 分析单物种生物所产生的所有聚糖; (2) 以糖肽为研究对象确认编码糖蛋白的基因; (3) 结合有效的理化和生化性质,研究糖蛋白糖链的性质。 研究的重点在于: (1) 编码糖蛋白的基因; (2) 实际糖基化的位点; (3) 聚糖结构; (4) 糖基化的作用。 主要分为三大部分: 结构糖组学、功能糖组学以及生物信息 学;其中结构糖组学主要包括“糖捕获”技术、前沿亲和层析 技术等,功能糖组学主要包括微阵列技术等。
●糖链与激素活性
糖蛋白激素主要有腺垂体促激素类包括FSH(促卵泡激 素),LH(促黄体生成激素)和TSH(促甲状腺 激素)以及胎盘绒毛 膜促性腺激素和肾脏红细胞生成素(erytlmpoietin,EPO)等。 FSH、LH和TSH均由α亚基和β亚基组成,两个亚基都有N一糖 链。糖链呈高度不均一性,例如LH和TSH中精链的外链末端有 些为SO4--4GalNAc β 1，有些为Sia α2 → 3Gal β 1→,而FSH中 的糖链都是以 Sia α2 → 3Gal β 1→为末端的。已经证明，带 有SO4--4GalNAc β 1→末端结构的激素对受体的亲和力比带有 Sia α2 → 3Gal β 1→末端的激素高，但在体内的半寿期前者比 后者短,因为在肝脏网状细胞表面有特异结合SO4--4GalNAc β 1→为末端的糖链的受体,而Sia为末端的糖链则必须经唾液酸 酶水解除去Sia从而暴露Gal后才能被半乳糖结合受体识别并 清除。
The lectins tested recognize the following residues:
β-D-galactosyl [Ricinus communis agglutinin 120, (RCA1) and peanut agglutinin, (PNA)]; α-D-galactosyl [Griffonia simplicifolia agglutinin (GSA)]; α-D-mannosyl>α-D- glucosyl [concanavalin A (ConA) and Lens culinaris agglutinin (LcH)]; N-acetyl- and N-glycolylneuraminic acid [Limax flavus agglutinin (LFA) andLimulus polyphemus agglutinin (LPA)]; N-acetyl-glucosaminyl and sialyl [wheat germ agglutinin (WGA)]; N-acetyl-D-galactosaminyl [Helix pomatia agglutinin (HPA) and Dolichos biflorus agglutinin (DBA)] andα -Lfucosyl [Ulex europeus agglutinin (UEA-1)].
1、糖组学(glycomics) 的背景及研究意义
20 世纪末,继基因组学、蛋白质组学之后,糖组学也日益受 到人们关注。顾名思义,糖组学是对糖链组成及其功能研究 的一门新学科,是基因组学的后续和延伸,具体内容包括研究 糖与糖之间、糖与蛋白质之间、糖与核酸之间的联系和相互 作用,其主要研究对象为聚糖。丰富多样的聚糖覆盖了生物 有机体的所有细胞,不仅体现细胞的类型和状态,也参与了许 多生物学行为,如细胞发育、分化、肿瘤转移、微生物感染、 免疫反应等;聚糖还体现生物和分子的进化作用,如糖酵解、 生物合成的保守性以及核糖的起源等。
●糖链与IgG 活性
每分子IgG 均含糖链约三条，几乎全部N一糖链都是复杂型, 非还原末端残基为Sia或Gal(去Sia),少数为GlcNAc(去Sia-Gal), IgG的N-糖链多达30余种,呈高 度不均一性。如IgG的N一糖链缺 失外链Gal (这种糖链称G0 糖链）后,可成为一种自身抗原,被免 疫系统识别而产生自身抗体。后者能与带有Go糖链的Ig G生成 免疫复合体，沉积于关节腔内,引起炎症。这种免疫复合体是由 带Go糖链的IgGFc段(作为抗原)和带末端Sia的IgG(作为抗 体)Fab段结合而成,实际上是IgG的自身聚合物。类风湿性关节 炎、红斑狼疮等都是一种与IgG的糖链结构改变有关的自身免疫 病(autoimmune disease)。
A、 N－糖链
●N-糖链的共同结构花式：核心五糖
Glc-葡萄糖；Gal-半乳糖；Man-甘露糖 ；Fru-果糖 Rib-核糖；Fuc-岩藻糖；Sia-唾液酸；GlcA-葡糖酸 GlcUA-糖醛酸；GlcNAc — N-乙酰葡萄糖胺； GalNAc — N-乙酰半乳糖胺；NeuNAc —N-乙酰神经氨酸
3、糖组学研究技术进展
1）结构糖组学
根据与糖链连接方式不同,蛋白质主要有N－连接 和O－连接两种糖基化形式: 前者是糖链与蛋白 Asn－XXX－Ser/Thr 序列子(XXX 为除脯氨酸以 外的氨基酸) 中Asn 残基上的 —NH2 相连;后者 则是糖链与蛋白Ser/Thr 残基上的—OH 相连。N －连接和O－连接糖蛋白主要定位于细胞膜表面, 也可以分泌型蛋白的形式存在。此外,糖蛋白还 有GPI锚定蛋白和近年来在细胞核和细胞质发现 的O－GlcNAc（N-乙酰氨基葡萄糖 ）修饰蛋白两 种存在形式。
示例： 糖链的生物学功能
（1）糖链在糖蛋白新生肽链折叠和缔合中的作用
研究表明：糖蛋白N-糖链在参与新生肽的折叠，维持蛋白 质正确构象时起重要作用。 缺 乏 则 不 能 折 叠 呈 三 聚 体 红 细 胞 血 凝 素 ， 如 糖 链
,
N-
（2）糖链影响糖蛋白的分泌和稳定性
能 分 泌 到 胞 外 而 留 在 内 质 网 中
（3）糖链的分离纯化
A、层析法 柱层析是分离纯化糖蛋白糖链的常规方法,由分离机制不 同可以有离子交换、分子筛、正相和反相等不同形式。 一般常压和低中压柱层析所需样品量较大,而高效液相层 析(HPLC) 因上样量少、灵 敏度高、重现性好、更加快 速和自动化,是目前微量糖链分析的首选。不同结构的糖 链在不同HPLC上的层析行为是不同的。 为了更充分、更准确地分离分析糖链混合物,可将几种不 同类型的HPLC 组合成多维HPLC (MD－HPLC) ,如离子交 换HPLC、正相HPLC、反相HPLC 组合就构成了3D－HPLC。 为达到最大分离效率,各维之间的分离模式应是各自独立 的,而且高维的分离速度应快于低维的分离速度,以避免 已分开组分的重新混合。
●N-糖链的分类
★复杂型N-糖链的分支
B、 O－糖链
特点：与N-糖链相比结构简单，但连接形式多。
几种糖蛋白的寡糖链
小结
糖链结构信息包括糖链的单糖组成、异头 碳构型、糖苷键的连接位臵和糖残基的序 列分析等内容。糖蛋白糖链的结构分析包 括糖蛋白的提取分离、糖链释放和糖链结 构鉴定等多个步骤。
●与细胞粘着有关
细胞粘着(cell adhesion)是进化中随着多细胞生物出现的 必然现象。多细胞生物中细胞有相互识别而聚集成细胞群的能 力——细胞粘着。细胞群或组织(tissue)中细胞与细胞之间充满 着由糖蛋白(胶原蛋白、纤连蛋白、层粘蛋白)、蛋白聚糖、透明 质酸等组成的胞外基质(extracellular matrix,ECM)。在整个生 物体中,ECM形成一个连续的主体网络结构,所有的细胞都交织或 浸泡在这一网状基质中,网络中细胞一细胞粘着,细胞一ECM粘着 都是通过有关的膜内在蛋白质(integral membrane protein)完 成的。这些膜蛋白称细胞粘着分子(cell adhesion molecule, CAM)或粘着蛋白,包括整联蛋白(integrin),钙粘着蛋白(cadher --in)免疫球蛋白超家族(Ig superfamily),血管地址素 (vescular addressin) 选择蛋白(selectin)等。CAM 绝大多数 都是含N一糖链的糖蛋白.例如整联蛋白是由α一和β一亚基组成 的异二聚体,两个亚基上有多个N一糖基化位点。去糖链的整联蛋 白完全失去与纤连蛋白的粘着能力。
（1）糖蛋白的提取和分离纯化
糖蛋白多定位于细胞表面,属于膜蛋白,水溶性不 好,其有效提取是糖组学糖链结构研究的瓶颈之 一。目前常采用先制备质膜,然后用CHAPS 等去 污剂释放或Triton X－114 相分离、有机溶剂萃 取等方法提取糖蛋白。获得的糖蛋白主要采用透 析、超滤、电泳和层析等方法来分离纯化,其中 由几种不同类型凝集素亲合柱组成的序列凝集素 亲合层析(serial lectin affinity chromatography, SLAC) 法是较好的方法。
（2）糖链的释放
纯化后的糖蛋白样品即可进行糖链释放。糖链释放一般 有化学释放和酶释放两种方法。 化学法主要有肼解法和β－消除法,前者可释放糖蛋白的 N－糖链和O－糖链,目前已实现仪器自动化。但因该法反 应条件剧烈,肼解后需对糖链进行乙酰化复原处理,而且 蛋白部分已经破坏,无法进行有关糖基化位点的研究。 酶法释放糖蛋白糖链因方法简单,条件温和,能够提供有 关糖链残基组成、排列顺序和糖苷键的α或β构型等信 息,目前应用较广。较常用的释放N－糖链的特异蛋白酶 有N－糖肽酶F(PNGase F) 和N－糖肽酶A(PNGase A) ,二 者具有很好的互补性,常联合使用。而PNGase F 因广谱 性好,也常单独使用。对于特异释放糖蛋白O－糖链的酶, 目前发现的较少,且广谱性不强。
受精是精子与卵子的 融合。哺乳动物的卵子外 面有一层透明的糖蛋白外 衣，称透明带（zone pelluci da,ZP)。透明带 由ZP-1、ZP-2和ZP-3三种 糖蛋白组成,受精中起主要 作用的是ZP-3,连接在ZP-3 上的O -GalNAc糖链能被精 子表面上的凝集素受体识 别(有物种特异性)。O GalNAc糖链的非还原端是 一个α一连接的半乳糖残 基,它可能在精卵识别中起 关键作用。
免 疫 球 蛋 白 如 缺 乏 糖 链 则 不
N-
（3）糖链参与分子识别和细胞识别
●与血浆中老蛋白的清除有关
血清中很多蛋白质式含有以唾液酸残基为末端的N-糖链糖蛋 白，称唾液酸糖蛋白，如免疫球蛋白、蛋白质激素，载体蛋白等。
如被唾液 酸酶降解
与肝细胞膜上的去唾液酸糖蛋白受体结合
胞吞作用并降解
●与精卵识别有关
（4）糖链影响糖蛋白的生物学活性 ●糖链与酶活性 糖链在酶的新生肽链折叠、转运和保护等 方面普遍起作用。但糖链与成熟酶活性的关 系因酶而异。有些酶除去糖链活性不受影响, 如UDP-葡糖醛酸酶、酵母羧肽酶等。有些酶 的活力依赖其糖链的存在， 如溶酶体β一葡 糖苷酶除去糖链后只有免疫活性而而完全没 有酶活力。
●SLAC
研究发现，植物凝集素是一类能选择性地结合糖链的糖结合 蛋白。利用这种特性可以特异性地富集某种糖蛋白/糖链。 用于纯化糖蛋白/糖链的植物凝集素主要有刀豆凝集素 (concanavalin A, Con A)、麦胚凝集素(wheat germ agglutinin, WGA)、豌豆外源凝集素(pea lectin)、植物血 凝素(phytohaemagglutinin-E4 ,E4-PHA) 和网孢盘菌凝集 素(Aleuria aurantia lectin,AAL)等。单一一种凝集素并 不能够富集细胞中所有的糖蛋白/糖链，因此科学家们在上 世纪80年代发明了一种被称作连续凝集素亲和色谱(serial lectin affinitychromatography, SLAC) 的方法来分离同一 细胞中的各种糖蛋白/糖链。这种方法是将不同的凝集素亲 和柱串联排列，样品混合物依次经过这些亲和柱，这样就可 将不同的糖蛋白/糖链富集在不同的柱中，提高了糖蛋白/糖 链的回收效率和混合糖蛋白/糖链的分离效果。
类风湿关节炎
总之
毫无疑问,如果试图深入了解生命的复杂规 律,就必须有“基因组－蛋白质组－糖组” 的整体观念,这样才有可能揭示自身全部基 因功能,从而进一步深入研究疾病的发病机 制,有效控制疾病的发生、发展及预后,以 及筛选疾病、预测诊断标记物和开发新的 药物靶标。
2、糖组学的研究策略
糖组学的研究远较基因组学、蛋白质组学复杂。 目前糖组学关注的焦点是糖蛋白,为了更好地与蛋白质组学相 关联,将研究对象锁定为糖肽。研究核心策略为: (1) 分析单物种生物所产生的所有聚糖; (2) 以糖肽为研究对象确认编码糖蛋白的基因; (3) 结合有效的理化和生化性质,研究糖蛋白糖链的性质。 研究的重点在于: (1) 编码糖蛋白的基因; (2) 实际糖基化的位点; (3) 聚糖结构; (4) 糖基化的作用。 主要分为三大部分: 结构糖组学、功能糖组学以及生物信息 学;其中结构糖组学主要包括“糖捕获”技术、前沿亲和层析 技术等,功能糖组学主要包括微阵列技术等。
●糖链与激素活性
糖蛋白激素主要有腺垂体促激素类包括FSH(促卵泡激 素),LH(促黄体生成激素)和TSH(促甲状腺 激素)以及胎盘绒毛 膜促性腺激素和肾脏红细胞生成素(erytlmpoietin,EPO)等。 FSH、LH和TSH均由α亚基和β亚基组成,两个亚基都有N一糖 链。糖链呈高度不均一性,例如LH和TSH中精链的外链末端有 些为SO4--4GalNAc β 1，有些为Sia α2 → 3Gal β 1→,而FSH中 的糖链都是以 Sia α2 → 3Gal β 1→为末端的。已经证明，带 有SO4--4GalNAc β 1→末端结构的激素对受体的亲和力比带有 Sia α2 → 3Gal β 1→末端的激素高，但在体内的半寿期前者比 后者短,因为在肝脏网状细胞表面有特异结合SO4--4GalNAc β 1→为末端的糖链的受体,而Sia为末端的糖链则必须经唾液酸 酶水解除去Sia从而暴露Gal后才能被半乳糖结合受体识别并 清除。
The lectins tested recognize the following residues:
β-D-galactosyl [Ricinus communis agglutinin 120, (RCA1) and peanut agglutinin, (PNA)]; α-D-galactosyl [Griffonia simplicifolia agglutinin (GSA)]; α-D-mannosyl>α-D- glucosyl [concanavalin A (ConA) and Lens culinaris agglutinin (LcH)]; N-acetyl- and N-glycolylneuraminic acid [Limax flavus agglutinin (LFA) andLimulus polyphemus agglutinin (LPA)]; N-acetyl-glucosaminyl and sialyl [wheat germ agglutinin (WGA)]; N-acetyl-D-galactosaminyl [Helix pomatia agglutinin (HPA) and Dolichos biflorus agglutinin (DBA)] andα -Lfucosyl [Ulex europeus agglutinin (UEA-1)].
1、糖组学(glycomics) 的背景及研究意义
20 世纪末,继基因组学、蛋白质组学之后,糖组学也日益受 到人们关注。顾名思义,糖组学是对糖链组成及其功能研究 的一门新学科,是基因组学的后续和延伸,具体内容包括研究 糖与糖之间、糖与蛋白质之间、糖与核酸之间的联系和相互 作用,其主要研究对象为聚糖。丰富多样的聚糖覆盖了生物 有机体的所有细胞,不仅体现细胞的类型和状态,也参与了许 多生物学行为,如细胞发育、分化、肿瘤转移、微生物感染、 免疫反应等;聚糖还体现生物和分子的进化作用,如糖酵解、 生物合成的保守性以及核糖的起源等。
●糖链与IgG 活性
每分子IgG 均含糖链约三条，几乎全部N一糖链都是复杂型, 非还原末端残基为Sia或Gal(去Sia),少数为GlcNAc(去Sia-Gal), IgG的N-糖链多达30余种,呈高 度不均一性。如IgG的N一糖链缺 失外链Gal (这种糖链称G0 糖链）后,可成为一种自身抗原,被免 疫系统识别而产生自身抗体。后者能与带有Go糖链的Ig G生成 免疫复合体，沉积于关节腔内,引起炎症。这种免疫复合体是由 带Go糖链的IgGFc段(作为抗原)和带末端Sia的IgG(作为抗 体)Fab段结合而成,实际上是IgG的自身聚合物。类风湿性关节 炎、红斑狼疮等都是一种与IgG的糖链结构改变有关的自身免疫 病(autoimmune disease)。
A、 N－糖链
●N-糖链的共同结构花式：核心五糖
Glc-葡萄糖；Gal-半乳糖；Man-甘露糖 ；Fru-果糖 Rib-核糖；Fuc-岩藻糖；Sia-唾液酸；GlcA-葡糖酸 GlcUA-糖醛酸；GlcNAc — N-乙酰葡萄糖胺； GalNAc — N-乙酰半乳糖胺；NeuNAc —N-乙酰神经氨酸
3、糖组学研究技术进展
1）结构糖组学
根据与糖链连接方式不同,蛋白质主要有N－连接 和O－连接两种糖基化形式: 前者是糖链与蛋白 Asn－XXX－Ser/Thr 序列子(XXX 为除脯氨酸以 外的氨基酸) 中Asn 残基上的 —NH2 相连;后者 则是糖链与蛋白Ser/Thr 残基上的—OH 相连。N －连接和O－连接糖蛋白主要定位于细胞膜表面, 也可以分泌型蛋白的形式存在。此外,糖蛋白还 有GPI锚定蛋白和近年来在细胞核和细胞质发现 的O－GlcNAc（N-乙酰氨基葡萄糖 ）修饰蛋白两 种存在形式。
示例： 糖链的生物学功能
（1）糖链在糖蛋白新生肽链折叠和缔合中的作用
研究表明：糖蛋白N-糖链在参与新生肽的折叠，维持蛋白 质正确构象时起重要作用。 缺 乏 则 不 能 折 叠 呈 三 聚 体 红 细 胞 血 凝 素 ， 如 糖 链
,
N-
（2）糖链影响糖蛋白的分泌和稳定性
能 分 泌 到 胞 外 而 留 在 内 质 网 中
（3）糖链的分离纯化
A、层析法 柱层析是分离纯化糖蛋白糖链的常规方法,由分离机制不 同可以有离子交换、分子筛、正相和反相等不同形式。 一般常压和低中压柱层析所需样品量较大,而高效液相层 析(HPLC) 因上样量少、灵 敏度高、重现性好、更加快 速和自动化,是目前微量糖链分析的首选。不同结构的糖 链在不同HPLC上的层析行为是不同的。 为了更充分、更准确地分离分析糖链混合物,可将几种不 同类型的HPLC 组合成多维HPLC (MD－HPLC) ,如离子交 换HPLC、正相HPLC、反相HPLC 组合就构成了3D－HPLC。 为达到最大分离效率,各维之间的分离模式应是各自独立 的,而且高维的分离速度应快于低维的分离速度,以避免 已分开组分的重新混合。
●N-糖链的分类
★复杂型N-糖链的分支
B、 O－糖链
特点：与N-糖链相比结构简单，但连接形式多。
几种糖蛋白的寡糖链
小结
糖链结构信息包括糖链的单糖组成、异头 碳构型、糖苷键的连接位臵和糖残基的序 列分析等内容。糖蛋白糖链的结构分析包 括糖蛋白的提取分离、糖链释放和糖链结 构鉴定等多个步骤。
●与细胞粘着有关
细胞粘着(cell adhesion)是进化中随着多细胞生物出现的 必然现象。多细胞生物中细胞有相互识别而聚集成细胞群的能 力——细胞粘着。细胞群或组织(tissue)中细胞与细胞之间充满 着由糖蛋白(胶原蛋白、纤连蛋白、层粘蛋白)、蛋白聚糖、透明 质酸等组成的胞外基质(extracellular matrix,ECM)。在整个生 物体中,ECM形成一个连续的主体网络结构,所有的细胞都交织或 浸泡在这一网状基质中,网络中细胞一细胞粘着,细胞一ECM粘着 都是通过有关的膜内在蛋白质(integral membrane protein)完 成的。这些膜蛋白称细胞粘着分子(cell adhesion molecule, CAM)或粘着蛋白,包括整联蛋白(integrin),钙粘着蛋白(cadher --in)免疫球蛋白超家族(Ig superfamily),血管地址素 (vescular addressin) 选择蛋白(selectin)等。CAM 绝大多数 都是含N一糖链的糖蛋白.例如整联蛋白是由α一和β一亚基组成 的异二聚体,两个亚基上有多个N一糖基化位点。去糖链的整联蛋 白完全失去与纤连蛋白的粘着能力。
（1）糖蛋白的提取和分离纯化
糖蛋白多定位于细胞表面,属于膜蛋白,水溶性不 好,其有效提取是糖组学糖链结构研究的瓶颈之 一。目前常采用先制备质膜,然后用CHAPS 等去 污剂释放或Triton X－114 相分离、有机溶剂萃 取等方法提取糖蛋白。获得的糖蛋白主要采用透 析、超滤、电泳和层析等方法来分离纯化,其中 由几种不同类型凝集素亲合柱组成的序列凝集素 亲合层析(serial lectin affinity chromatography, SLAC) 法是较好的方法。
（2）糖链的释放
纯化后的糖蛋白样品即可进行糖链释放。糖链释放一般 有化学释放和酶释放两种方法。 化学法主要有肼解法和β－消除法,前者可释放糖蛋白的 N－糖链和O－糖链,目前已实现仪器自动化。但因该法反 应条件剧烈,肼解后需对糖链进行乙酰化复原处理,而且 蛋白部分已经破坏,无法进行有关糖基化位点的研究。 酶法释放糖蛋白糖链因方法简单,条件温和,能够提供有 关糖链残基组成、排列顺序和糖苷键的α或β构型等信 息,目前应用较广。较常用的释放N－糖链的特异蛋白酶 有N－糖肽酶F(PNGase F) 和N－糖肽酶A(PNGase A) ,二 者具有很好的互补性,常联合使用。而PNGase F 因广谱 性好,也常单独使用。对于特异释放糖蛋白O－糖链的酶, 目前发现的较少,且广谱性不强。
受精是精子与卵子的 融合。哺乳动物的卵子外 面有一层透明的糖蛋白外 衣，称透明带（zone pelluci da,ZP)。透明带 由ZP-1、ZP-2和ZP-3三种 糖蛋白组成,受精中起主要 作用的是ZP-3,连接在ZP-3 上的O -GalNAc糖链能被精 子表面上的凝集素受体识 别(有物种特异性)。O GalNAc糖链的非还原端是 一个α一连接的半乳糖残 基,它可能在精卵识别中起 关键作用。
免 疫 球 蛋 白 如 缺 乏 糖 链 则 不
N-
（3）糖链参与分子识别和细胞识别
●与血浆中老蛋白的清除有关
血清中很多蛋白质式含有以唾液酸残基为末端的N-糖链糖蛋 白，称唾液酸糖蛋白，如免疫球蛋白、蛋白质激素，载体蛋白等。
如被唾液 酸酶降解
与肝细胞膜上的去唾液酸糖蛋白受体结合
胞吞作用并降解
●与精卵识别有关