利乐无菌试验

无菌试验操作指南(仅供内部参考)注意: 无菌试验安排在试产良好及档案记录完善的基础上进行.目录1. 定义 42. 无菌试验的准备 4(1). 生产加工区与灌装区的清洗 4(2). 超高温(UHT)杀菌设备与灌装机的清洗检查 43. 无菌试验协议的拟定 5(1). 双方职责 5(2). 费用 5(3). 时间安排 5(4). 产品 5(5). 辅助用品说明 5 4. 无菌试验操作步骤 6(1). 评估标准 6(2). 操作参数与原料质量 6(3). 中间产品质量要求 6(4). 取样方法 6(5). 无菌试验次数及取样量7(6). 评估方法7(7). 坏包样品的定义7(8). 无菌试验记录7(9). 工厂接收标准7(10). 低于接收标准结果的处理7 附录1. 灌装间要求8 附录2. 生产用水与锅炉用水质量要求9附录3. 灌装机用双氧水质量要求10 附录4. 不同的AQL与可信度下的取样说明11 附录5. 灌装机记录表12 附录6. 无菌试验记录表13 附录7. 无菌试验合格证书14注意: 以下无菌试验必须至少有一位利乐包装(中国)有限公司的代表参加进行。

1. 定义调试即在销售公司的主持下,对设备进行初步运转,以确保设备满足基本的设计意图并可投入商业运作。

设备适用于被考核的设备,如单个机器,部分生产线或整条生产线。

说明: 设备由用户界定。

性能指标特殊的功用性参数,表明设备理想的运转水平;有时已包含于利乐包装与客户间的协议及相关条款中。

工厂符合销售公司性能指标所规定的一条或几条生产线,甚至包括厂房。

销售公司向买方提供设备(销售或租赁)或服务的,相关的利乐包装或利乐拉伐销售公司。

买方设备买方或租赁方,或同时按交易条款申请技术服务的一方。

灌装机能提供纸盒成型,液态产品灌注(无菌或非无菌状态)以及进一步将其密闭的设备。

无菌试验一系列检测程序与条款,用以确认设备已达到商业无菌生产标准。

无菌试验安排在设备调试完成及设备投入商业生产之前进行。

2. 无菌试验前的准备(1). 生产加工区与灌装区的清洗生产加工区及灌装区：从地面到天花板作彻底清洗,并进行空气降落试验以检验无菌灌装间卫生状况(附录1中列出了灌装间的基本要求及空气降落试验方法)。

(2). 超高温(UHT)杀菌设备与灌装机的清洗检查在无菌试验之前,进行两次完整的CIP。

第一次CIP主要是针对系统内化学残留物质检查,具体方法是:在最后15分钟的CIP清水冲洗阶段,每隔2分钟进行一次电导率测试(电导率测定仪量程为0~105μs/c m±1.5%);最后取样时间应尽量靠近冲洗循环结束阶段。

另外,在CIP后,还需检查一些关键点处(如管道末端/弯管及保温段)是否有沉淀物。

检查结束后,进行第二次CIP。

3. 无菌试验协议无菌试验安排在试产完成后进行。

无菌试验用于考核整条生产线能否有效生产商业无菌产品。

无菌试验由商家,加工设备/包装机及其他生产设备供应商共同参加进行。

在无菌试验之前,利乐包装(中国)有限公司与客户之间应达成统一协议并依照执行。

(1). 双方职责签订最终协议之前,应就双方职责达成协议;在评估过程中,双方各委派一名代表处理相关的事务。

各方代表应妥善处理所产生的分歧,若暂时未达成统一意见的,应向双方更高层人员汇报以协调解决。

每次无菌试验结果以书面协议形式记载,并颁发合同设备“无菌试验”合格证书(见附录7),合格证书应在评估结束后两天内,经双方代表签字后颁发,证书一式四份,双方各留两份。

合格证书的签发,表明客户正式接收合同设备,并因此独立承担设备的保养、安全、操作及维修工作。

合格证书签发之前,设备的操作使用权由利乐包装(中国)有限公司所有。

若客户将设备投入商业运作,合同设备被视为自动交接!设备中所存在的,不影响基本操作功用的外观缺陷及故障,将不影响合格证书签发,但利乐包装(中国)有限公司应加以备注说明，并立即予以补救;倘若，由于客户的原因使机器达不到应有的性能，利乐包装(中国)有限公司将向客户提出改进方案，在这种情况下，客户应签收合格证书。

(2). 费用无菌试验过程中,技术工程服务费用由利乐包装(中国)有限公司承担;其余由客户承担,包括(不仅限于)原材料、包材，生产辅助供应如水、电、气及压缩空气、实验设施、人员配备等。

(3). 时间安排无菌试验时间应在最终合同签订前,由双方共同确定。

利乐包装(中国)有限公司将提前通知客户无菌试验时间,时间一经确定,双方务必遵守。

通常无菌试验安排在设备调试成功后15天内进行;无菌试验所需的一切条件应在评估前准备就绪;无菌试验应在20天内完成。

如果无菌试验失败，则相应增加天数。

(4). 产品液态产品可以分成高酸产品(p H<4.5)和低酸产品(p H≥4.5)两类;为了保证产品商业无菌,用于无菌试验的产品应与商业销售产品一致;如果同一生产线将生产高酸与低酸两类产品, 无菌试验时优先使用低酸产品。

(5). 辅助用品说明生产用水与锅炉用水质量要求见附录2。

双氧水质量要求见附录3。

4. 无菌试验操作步骤无菌试验只适用于整条生产线检查,不适用于生产线局部检查;当在无菌试验标准上达成统一协议后,不仅要注意设备操作及整体安装的环境卫生,而且要注意原料(配方组份)与半成品的微生物质量,因为这将影响所获得的结果。

无菌试验评估应由利乐包装(中国)有限公司与客户按以下内容共同协商进行:(1). 评估标准无菌试验标准通常用质量接受水平AQL表示,又称为最大可接受坏包率。

需要强调的是坏包率不可能为0,AQL是食品生产商的一项总体质量方针,应当由客户自己确定。

文中所列条件基于AQL1:1000,文末附录4列出了其它AQL值及相关要求。

不论所制定的AQL值是多少,应注意:•坏包率与可信度密切相关,•坏包率只表示在某段时间内,特定的现存条件下,所达到的结果，与该生产线在其它时段、其它条件下所获得的结果没有可比性。

(2). 操作参数与原料质量对于生产操作参数(如灭菌温度)及原料质量说明,无法给出统一要求,因为各公司设计及安装形式各不相同;但对于具体情况,应达成统一协议。

(3). 中间产品质量要求从微生物角度看,不论生产何类产品,要使最终产品AQL达到1:1000,其进入超高温灭菌机(UHT)之前的半成品应满足以下要求。

芽孢总数(cfu/ml) 100耐热芽孢计数(cfu/ml) 10(4). 取样方法无菌试验阶段,采用随机取样；同时应进行目的性取样以用于故障排除；在评估无菌试验结果时,应剔除目的性取样。

不同情况下的目的性取样及其取样数量(推荐使用):取样取样数量生产开始 5包替换包材连接前后 2+2包纵封贴条发生变化前后 2+2包灌装机停机 2包生产结束 5包(5). 无菌试验次数及取样量在即将开始无菌试验之前,应就无菌试验等级与客户达成协议。

一般推荐，每台灌装机在投入商业生产前,进行三次无菌试验;最先两次无菌试验安排在连续前两天完成,停车一天后,第四天进行第三次无菌试验。

每次试车后,安排一次完整的CIP,第三次试车前需增加一次CIP。

若在杀菌机与灌装机之间装有无菌罐，如果50%的产品直接从灭菌机进入灌装机，而另外50%产品灭菌后进入无菌罐，储存5小时后供进一步无菌试验使用，并且无菌罐的密封性及相关功能达不到要求,则其生产产品的坏包率将远高于前者。

每次无菌试验使用的产品类型、等级、灌注体积及装配应统一;生产应安排在类似的时段及在同样的生产条件下进行。

当AQL为1:1000，可信度为90%时,取样数量为2300包。

注意:如果用于无菌试验的灌装机与其它灌装机安装在同一生产线上,则所有灌装机产品阀的蒸汽屏障应处于工作状态。

(6). 评估方法所有的样品应随机获得,低酸产品在30~35︒C下保温7天,而高酸产品在20-25︒C 下保温10天,此后进行以下评估:•检查所有外包装,如胀包或其它感官缺陷•对所有样品进行pH测定(除高酸产品外,pH计精度应达到0.01)•对所有样品进行感官检验测定(包括色质/气味/分层/结块等)(7). 坏包样品的定义产生以下情形的样品,可视为微生物不合格可疑样品：保温试验后，样品的期望pH值下降0.2(或以上)，样品的风味或口感发生变化,以及产生胀包及外观缺陷。

为了确认可疑样品是否为微生物不合格,需进一步进行微生物检验(如划线试验)与包装密闭性测定；对于划线试验,菌落数小于等于3个的,可忽略不计。

污染菌的鉴别应当场进行。

机械损伤样品不计入坏包数量。

(8). 无菌试验记录无菌试验记录应在生产条件下进行,包括使用对数方格表及曲线图进行记录;将所有的机器设定记录下来(灌装机记录表见附录5)。

所有样品应按时间编号,认真记录保温试验结果,报告格式见附录6。

(9). 工厂接收标准无菌试验工厂接收标准由客户确定,主要为AQL与可信度。

若规定AQL1:1000/可信度90%,三次保温试验的总坏包数量为3包。

(附录4表2中列出了其它相关的AQL值/可信度及接收标准)(10). 低于接收标准结果的处理在保温试验之前,应就对低于接收标准的结果处理程序,与客户达成统一意见。

当三次保温试验总坏包量超过3包时,应对整条生产线进行研究分析,并重复三次保温试验,直到达标为止。

附录 1灌装间要求标准号: 01颁布日期: 1/9/98版号: 01页数: 1物理指标空气流速 0.2-0.3 m/s正压值2-4 mm H2O温度15-30 ︒C湿度 30-70 %换气频率 10-15 次/小时注意:灌装间应保持温湿度恒定。

卫生条件空气降落试验菌落计数不超过30个。

空气降落试验方法:将营养琼脂倒入直径9cm并经过灭菌处理的培养皿中,放入灌装间,打开培养皿暴露15分钟；而后,放入35 ± 2︒C恒温箱内保温两天,取出计数。

如果菌落计数结果大于30个,表明灌装间需要彻底清洗,并需要进行特殊处理如改进空气过滤系统,用紫外灯或乳酸消毒灌装间。

附录 2生产用水与锅炉用水质量要求标准号: 02颁布日期: 1/9/98版号: 01页数: 1理化指标沉淀物, mg/L 无混浊度无气味无口味无色度<10干物质, mg/L <500高锰酸钾消耗, mg/L <10钙镁含量, mg/L <100硬度(碳酸钙计, mg/L) <100铁, mg/L <0.1锰, mg/L <0.05铜, mg/L 0铝, mg/L <0.1锌, mg/L 0重碳酸盐, mg/L <80氯化物, mg/L -氰化物, mg/L 1有毒物质无pH 7 - 8.5微生物指标总菌数,cfu/ml <100大肠杆菌, cfu/100ml 0凝胶细菌,cfu /ml 0附录 3灌装机用双氧水(H2O2 )质量要求标准号: 03颁布日期: 1/9/98版号: 01页数: 1化学名H2O2质量要求无菌级或食品级浓度35 % - 40% (重量比) 外观清晰无色的液体磷酸盐< 100 ppm磷 < 35 ppm氯(Cl) < 1 ml/l砷(As) < 1 mg/l铅 (Pb) < 1 mg/l铁(Fe) < 0.1 mg/l铜(Cu) < 1 mg/l重金属如铅< 10 mg/l105 o C时不挥发物< 500 mg/lpH 2 - 4附录 4不同的AQL与可信度下的取样说明标准号: 04颁布日期: 1/9/98版号: 01页数: 1表1. 可信度,取样量与AQL之间的关系TSC: 芽孢总数, cfu/mlTRSC: 耐热芽孢计数, cfu/ml附录 5超高温灭菌机记录表标准号: 05颁布日期: 25/9/2000版号: 01页数: 2附录 6灌装机记录表标准号: 06颁布日期: 1/9/98版号: 01页数: 1停机记录附录 7无菌试验记录表标准号: 07颁布日期: 1/9/98版号: 01页数: 1附录 8ACCERTANCE CERTIFICATEFOR LINE PERFORMANCE EVULATIONProject and / or contract: ............................................................................................................ Purchaser: .................................................................................................................................. Seller: ........................................................................................................................................ Sections of Plant ( if applicable) ................................................................................................. Description of the Performance Evaluation: ................................................................................ Test / Inspection Period:Start Date:pletion date:........................................................ Purchaser and Seller agree that the Plant or above-named Section(s) (if applicable) has (have ) achieved the Performance Criteria specified in the Contract between the parties. Other than any items listed in a separated attachment, Seller’s sole remaining obligation under the Contract regarding the Plant or Section (if applicable) is any Mechanical Warranties on the Equipment.Minor items (if any) which do not adversely affect the achievement of the Performance Criteria but which Seller shall correct are listed in a separate attachment. seller agrees to correct such items without any unnecessary delay on its part.For and on behalf of For and on behalf ofPurchaser Seller Name:: ......................................................... Title:................................................................... Title: .............................................................Date:...........................................................................。