浙江省余姚中学高中生物微生物的实验室培养复习课件浙科版选修1

高中生物选修1课件10：2.1微生物的实验室培养

微生物的实验室培养
一、基础知识
（一）微生物的类群原核类: 细菌、支原体、放线菌、蓝藻
原生生物：显微藻类、原生生物微生真核类物
真菌：酵母菌、霉菌、食用菌
非细胞类：病毒、类病毒、朊病毒
◆微生物的共同特点：个体微小、结构简单
1.细菌的形态
2.细菌的繁殖二分裂
3.细菌的菌落
（1）概念：单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，形成的一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。
不加含碳有机物的无碳培养基分离自养型微生物
加入青霉素等抗生素的培养基分离导入了目的基因的受体细胞
——
伊红美蓝培养基
（四）无菌技术
1.概念
无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
2.消毒与灭菌
⑴消毒定义：利用化学或物理方法，杀死部份微生物的过程。
⑵灭菌的定义：以化学试剂或物理方法消灭所有微生物，包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及病毒，而达到完全无菌之过程。
3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？
平皿是由正反两平面板互扣而成，这种器具是专为防止空气中微生物的污染而设计的。
1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的？
无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如

高中生物浙科版配套课件：选修1 第一部分微生物的利用

有LB培养基和尿素培养基的培养皿中，并用
玻
培养:倒置培养皿，在37 ℃恒温箱中培养24 h～48 h。
观察:培养基中菌落数量。
3. 实验分析
(1)样品稀释: ①稀释原因:样品的稀释程度直接影响平板上生长的菌落数目。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。因此，恰当的稀释度是成功地统计菌落数目的关键。 ②稀释标准:选用一定稀释范围的样品液进行培养，保证
【高考警示】不同器具选用的灭菌方法不同 (1)接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法。
(2)培养基、无菌水、玻璃器皿等使用高压蒸汽灭菌法，
所用器械是高压蒸汽灭菌锅。 (3)表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。
考点二
大肠杆菌的培养和分离
1. 培养和分离实验步骤
步骤
具体操作将50 mL LB液体培养基、50 mL LB固体培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌在酒精灯火焰旁将固体培养基倒入4个灭菌的培养皿中，并水平放置使之形成平面
操作
第一次灼烧避免接种环上
划线结束后灼烧杀死接种环上
目的
可能存在的微
生物污染培养
残留的菌种，
避免污染环境
基
和感染操作者
(2)灼烧接种环后，需要等接种环冷却才能伸入菌液，以
免温度太高杀死菌种。
考点三
分离以尿素为氮源的微生物 1. 实验原理
(1)以尿素为唯一氮源的培养基培养细菌时，只有含有脲
酶的细菌能够正常生长，据此可分离出以尿素为氮源的微
生物。 (2)细菌合成的脲酶能将尿素分解成NH3，使pH升高，使酚红指示剂变红。
2. 实验步骤

复习选修1专题2微生物的培养与应用精品PPT课件

鉴别培养基
在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物。
如：可用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽)
四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
2、统计菌落数目的方法 (1)显微镜直接计数法 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计一定容积的样品中微生物数量。 ②方法：用计数板计数。 ③缺点：不能区分死菌与活菌。
3、分离分解纤维素的微生物的实验流程
土壤取样选择培养梯度稀释
挑选产生透明圈的
菌落
将样品涂布到鉴别纤维素分解菌
的培养基上
土壤取样选择培养纯化培养涂布培养
富含纤维素土壤
增大分解菌含量前置染色法
染色鉴别后置染色法分离出分解菌
分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的
是( A )
A．经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上
括芽孢和孢子)
杀死物体内外所有灼烧灭菌、干热灭灭菌的微生物，包括芽菌、高压蒸汽灭菌
孢和孢子
常用的消毒方法和灭菌方法
接种环牛奶双手培养基培养皿空气
①灼烧灭菌 ②巴氏消毒 ③化学消毒 ④干热灭菌 ⑤紫外线消毒 ⑥高压蒸气灭菌
三、微生物实验室培养
1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板
2、纤维素分解菌的筛选原理
(1)筛选纤维素分解菌的方法是_刚__果_红__染_色__法_ 该方法可以通过__颜_色___反应直接筛选。
(2)其原理是：刚果红可以与纤维素形成 _红__色_复__合_物__，当纤维素被__纤_维__素_酶__分解后，红色复合物无法形成，出现以 _纤__维__素_分__解_菌__为中心的_透__明__圈_，我们可以通过__是_否__产__生_透__明_圈__来筛选纤维素分解菌。

高中生物专题2课题1微生物的实验室培养课件选修1高中选修1生物课件

第四页，共三十六页。
一
二
三
四
二、无菌技术
1.获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵,具体操作如下。 (1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒。 (2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 (3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围(zhōuwéi)的物品相接触。
专题2 微生物的培养(péiyǎng)与应用
第一页，共三十六页。
课题(kètí)1 微生物的实验室培养
第二页，共三十六页。
1.说出培养基的种类、营养要素、配制原则。 2.能根据消毒、灭菌的原理,进行无菌操作。 3.能用牛肉(niúròu)膏蛋白胨培养基纯化大肠杆菌。
第三页，共三十六页。
一
二
三
四
第十九页，共三十六页。
一
二
三
四
五
六
六、微生物的纯化 1.纯化大肠杆菌 (1)原理:在培养基上将细菌稀释分散(fēnsàn)成单个细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是纯化的细菌菌落。
第二十页，共三十六页。
一
二
三
四
五
六
平板划线法
稀释涂布平板法
通过接种环在琼脂固体培养
基表面连续划线的操作,将
原理
【例题1】下列关于微生物的营养的说法,正确的是 ( )
A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B.凡是(fánshì)碳源都能提供能量
C.除水以外的无机物仅提供无机盐 D.无机氮源也可能提供能量解析:对一些微生物来说,含C、H、O、N的化合物既是碳源,又是氮源。 CO2是光能自养型细菌的碳源,但不能提供能量。CO2和N2是无机物,它们分别是微生物的碳源和氮源。硝化细菌所利用的氮源是无机氮源氨,同时

高中生物选修1课件：2.1微生物的实验室培养(共40张PPT)

(3) 为避免周围环境中 _微__生__物___ 的污染，实验操作应在 ___酒__精__灯__火__焰__附__近___进行。
(4) 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与栏目
周__围__的__物__品__相接触。
链接
2．消毒和灭菌
包括某些大量元素
无机化合物
特别提醒
①对异养微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源又是氮源、能源。
②一些天然营养物质，如酵母膏、蛋白胨、动植物组织
提取液等可为微生物提供生长因子。
栏目
链
接
③不同微生物对营养的需求不同，因此，首先根据不同
微生物的营养需求配制针对性强的培养基。
④营养物质过少不能满足微生物的营养需要，过多对微生物的生长有抑制作用。
花生饼、石油等
接
氮源
能为微生物的代谢提供氮元素的物质
无机氮源：N2、NH3、 NO、NH有机氮源：蛋白胨、尿素、蛋白质等
生长因子
生长必不可少的微量有机物
维生素、氨基酸、碱基等
在生物体内含量很高，水在低等生物体内含量更
高
外界摄入
栏
目
链
接
为微生物提供碳源、氮无机盐源以外的各种重要元素，
目
分利用营养物质；氮源主要是作为微生物合成蛋白质和核酸链
接
的原料；牛肉膏主要为微生物提供碳源、磷酸盐和维生素。
答案：B
变式训练
1．下列制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是 ()
A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯

高中生物选修1微生物的实验室培养ppt(共54张PPT)

稀释涂布平板法
涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？
应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。
微生物的恒温培养
微生物的恒温培养
微生物的恒温培养
3类。
（5）不论何种培养基，在各种成分都溶化后
分装前，要进行的是
。调整pH
（6）右表中各成分重量确定的原则
是依微生物的生长需要确定。（7）若右表培养基用于菌种鉴定，应该
增加的成分
琼脂（或凝固。剂）
一、课题目标：
了解有关微生物及培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。
二、课题重点和难点：
如图是酵母菌电子显微镜下的形态结构
青霉
生殖孢子生殖
直立菌丝营养菌丝
腐生生活
（二）培养基
培养基（培养液）是由人工方法配制
而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养
液。
1.培养基的类型
（1）按物理状态分：固体培养基和液体培养基、
半固体培养基。（2）按功能分：选择培养基和鉴别培养基。
（3）按成分分：天然培养基和合成培养基。
芽孢又小又轻，可以随风飘散。
平板划线的操作方法
C是正确的，因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌；
且体内一般不含有叶绿素.
寄生菌大部分病原菌
消毒与灭菌的概念及两者的区别
（2）若不慎将过量NaCl加入培养基中。
有的碳源同时是能源，如葡萄糖；
掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。

选修一微生物的实验室培养上新用精品PPT课件

选择培养基
加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌
加入青霉素等抗生素的培养基: 分离导入了目的基因的受体细胞
加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基:
分离杂交瘤细胞
4、右表是某微生物培养基成分，请据此回答：
（1）右表培养基可培养的微生物类型
是自养型微生。物（2）若不慎将过量 NaCl加入培养基中。如不想浪费此培养基，可再加入含碳有，机用物于培养金黄色葡萄球菌。
分离化学成分：天然培养基工业
鉴定
合成培养基生产
液体培养基：
固体培养基
表面生长均匀混浊沉淀生长生长
半固体培养基
培养基的种类
液体培养基固体培养基
选择培养基
不加凝固剂加凝固剂，如琼脂
工业生产
微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏
菌种
含化学成分不明确的天然物质工业生产
培养基成分明确
在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生
(1)根据你所掌握的知识，分析导致生产失败的根源是什么?
根源在于发酵物中混入了杂菌
(2)由此可见，研究和应用微生物的前提是什么？
防止杂菌入侵，获得纯净的培养物
课题1 微生物的实验室培养
微生物的实验室培养条件：
（1）为培养的微生物提供合适的营养和环境条件
（2）确保其他微生物无法混入
研究和应用微生物的前提
学习目标
1．说出培养基的类型、用途和基本成分
2．举例说明常用的消毒与灭菌方法。 3．阐明培养基配制的方法和接种的
方法。
• 学习重点
培养基的营养成分、无菌操作的基本方法、配制培养基的基本步骤、常用的微生物的接种方法。

高中生物微生物的培养与应用 2.1 微生物的实验室培养课件高二选修1生物课件

③吸管要在酒精灯火焰周围使用。
12/11/2021
第二十六页，共四十六页。
案例探究
类型
类型
类型
(lèixíng)一 (lèixíng)二 (lèixíng)三
类型一微生物的营养
【例1】下列有关微生物营养物质的叙述,正确的是 ( )
A.作碳源的物质不可能同时作氮源
B.凡是碳源都提供能量
C.除水以外的无机物只提供无机盐
探究点三
探究点一培养基的营养成分及配制原则
问题导引(dǎo yǐn)
在实验室培养微生物所需培养基的主要成分有哪些?
下表是培养两种细菌的培养基的配方,据此回答问题。
表一(培养基A)
成分
KH2PO4
Na2HPO4
MgSO4· 葡萄糖尿素琼脂 7H2O
含量/g 1.4
2.1
0.2
10.0 1.0 15.0
(3)接种过程的所有操作为什么一定要在火焰附近进行? 火焰附近存在着无菌区域。 (4)接种后,在固体培养基上培养细菌时为什么进行倒置培养?
避免培养过程产生的水分影响微生物的生长。
12/11/2021
第二十三页，共四十六页。
探究(tànjiū) 探究(tànjiū) 探究(tànjiū)
点一
点二
点三
答案:D
12/11/2021
第二十七页，共四十六页。
案例探究
类型
类型
(lèixíng) (lèixíng)
一
二
变式训练1
类型
(lèixíng)三
下表为某培养基的配方,下列叙述正确的是( )
成分蛋白胨葡萄糖 K2HPO4 伊红美蓝蒸馏水
含量 10 g 10 g 2 g

浙科版选修1第一部分实验二微生物的培养和利用课件2

2、有脲酶的细菌在生态稳态上起什么作用？
如果土壤中有许多尿素，在自然界较高温度下会被水解，水解后的氨使土壤变成碱性，与其他阴离子形成化合物则会使土壤板结。有脲酶的细菌使植物废弃物和动物尸体降解，并利用所形成的氨，有利于自然界的氮循环
3、有脲酶的细菌菌落周围为什么有着色的环带出现？
细菌向胞外分泌脲酶，使培养基中的尿素水解，尿素分解后产生氨，氨为碱性，酚红在酸性环境中为黄色，在碱性环境里变为红色。培养基中的酸碱指示剂产生颜色变化，标志着存在脲酶水解尿素的作用，从而证明这一菌株可以以尿素为氮源。红色环状区域的大小代表脲酶活性的强弱和含量的多少。红色区域越大，表明菌株利用尿素的能力越强
(1)简述甘蔗大规模快速繁殖技术的过程
选取甘蔗外植体，通过诱导脱分化产生愈伤组织，然后通过调整植物激素比例，再分化形成芽和根，获得大量试管苗（或通过诱导大量形成胚状体，制成人工种子，适宜条件下萌发长成幼苗）。
（2）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。步骤2: 制备选择培养基。在基本培养基的基础上，注意添加高浓度蔗糖（葡萄糖）和调低pH值，加琼脂后灭菌，制成固体平板。
（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后，才能倒掉。
1. 为了实现燃料供应来源多样化，发展长期替代化石燃料的产品如燃料酒精、生物柴油、沼气等已经列入我国未来10年的发展计划。广东省是我国甘蔗主产区之一。甘蔗是一种高光效的植物，单位面积产量很高，种植面积日益扩大，目前已成为南方地区燃料酒精生产的重要原料。利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为：甘蔗榨汁（蔗糖）、酵母发酵﹑蒸馏﹑成品（燃料酒精）。请根据上述材料，回答下列问题：

高二生物课件第一部分实验二《微生物的培养和利用》课件10(浙科版选修1)

分离以尿素为氮源的微生物并计数
• 实验原理实验是用琼脂糖代替琼脂作为微生物培养基的固化剂，其目的是：尽可能使培养基中只含尿素一种含氮化合物，以防止琼脂中的含氮化合物被以尿素为氮源的细菌利用，有利于对这类细菌的筛选。
分离以尿素为氮源的微生物并计数
（2）酸碱指示剂（鉴定）尿素在被脲酶催化分解前是中性的，由于尿素在脲酶的催化下分解产生了NH3，溶液会呈碱性。本实验中，酚红作为酸碱指示剂被添加到了培养基中，其变色范围是pH6.4～8.2，在酸性情况下呈黄色，碱性情况下呈红色，
微生物种类及其代谢
微生物的类型细胞类型单细胞、原核细胞代谢类型自养需氧型细菌异养需氧型举例蓝细菌、硝化细菌醋酸杆菌、大肠杆菌乳酸菌、大肠杆菌
异养厌氧型
微生物种类及其代谢
微生物的类型细胞类型单细胞、真核细胞真菌多细胞、真核细胞异养需氧型霉菌（青霉、曲霉）代谢类型异养、兼性厌氧举例酵母菌
分离以尿素为氮源的微生物并计数
（3）涂布法分离细菌：在无菌条件下，分别取0.1 mL 的稀释度为10-4和10-5的土壤稀释液（细菌悬液），分别加到装有全营养LB培养基和尿素培养基的培养皿（空白平板）中；再将保存在70%酒精中的玻璃刮刀放在酒精灯火焰上，待刮刀上火焰熄灭后，在酒精灯火焰旁打开培养皿，将前面已加入的土壤稀释液（细菌悬液）均匀涂布到整个平面上。
微生物种类及其代谢
• 异化作用类型：有氧呼吸型（需氧型） C6H12O6+6O2+6H2O→6CO2+12H2O+能量无氧呼吸型（厌氧型） C6H12O6 → 2C2H5OH+2CO2+能量 C6H12O6 → 2C3H6O3+能量