芹菜素抑制脂多糖诱导小鼠巨噬细胞分泌炎症介质的分子机制

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小檗碱干预脂多糖诱导小鼠肺泡巨噬细胞mh-s分泌no、il-6等炎性介质

doi:10.3969/j.issn.1000⁃484X.2020.01.008小檗碱干预脂多糖诱导小鼠肺泡巨噬细胞MH⁃S 分泌NO ㊁IL⁃6等炎性介质的机制研究孙　垚　朱　欢　张　跃　(南京医科大学附属儿童医院,南京210008) 中图分类号　R967 文献标志码　A 文章编号　1000⁃484X (2020)01⁃0042⁃05作者简介:孙　垚,男,硕士,住院医师,主要从事细胞与分子免疫及儿童康复医学方面研究㊂通讯作者及指导教师:张　跃,男,主任医师,主要从事儿童康复医学方面研究,E⁃mail:feiyuezhang@㊂[摘　要]　目的:观察小檗碱对脂多糖(LPS)诱导小鼠肺泡巨噬细胞分泌炎性介质的影响,并探讨其可能的机制㊂方法:体外培养小鼠肺泡巨噬细胞MH⁃S,用终浓度为0.5μg /ml 的LPS 刺激后,加入不同浓度的小檗碱作用24h㊂MTT 法检测小檗碱对MH⁃S 活力的影响;采用NO 测定试剂盒检测NO 的含量,ELISA 和RT⁃PCR 法检测TNF⁃α㊁IL⁃6㊁IL⁃1及IL⁃12的蛋白和mRNA 水平;Western blot 法检测MH⁃S 细胞中iNOS㊁TLR4㊁MyD88㊁IRAK⁃4及NF⁃κB p65的水平㊂结果:小檗碱在浓度不超过5μmol /L 时,在24h 内对MH⁃S 细胞的活力几乎无影响,在10μmol /L 的浓度下对巨噬细胞的活力有抑制作用,并呈一定的时⁃效性㊂小檗碱能够显著降低MH⁃S 细胞中NO 的分泌量(P <0.05),并在蛋白和基因层面上剂量依赖性地降低TNF⁃α㊁IL⁃6㊁IL⁃1及IL⁃12的水平㊂小檗碱能够显著下调iNOS㊁TLR4㊁MyD88㊁IRAK⁃4及NF⁃κB p65的表达量(P <0.05)㊂结论:小檗碱能够抑制iNOS 的活性,从而减少NO 的分泌,同时通过抑制TLR4/MyD88/IRAK⁃4通路而抑制NF⁃κB 的激活,进而发挥抗炎作用㊂[关键词]　小檗碱;小鼠肺泡巨噬细胞;诱导性一氧化氮合酶;TLR4/MyD88/IRAK⁃4信号通路;核转录因子κBMechanism of berberine on intervention of lipopolysaccharide⁃induced inflammatory mediators such as NO and IL⁃6in mouse alveolar macrophagesSUN Yao ,ZHU Huan ,ZHANG Yue .Nanjing Children′s Hospital Affiliated to Nanjing Medical University ,Nanjing210008,China[Abstract ]　Objective :To investigate the effect of berberine on lipopolysaccharide(LPS)⁃induced inflammatory mediators inmouse alveolar macrophages and explore its possible mechanism.Methods :MH⁃S cells was cultured in vitro and stimulated with LPS ata final concentration of 0.5μg /ml and then treated with different concentrations of berberine for 24h.MTT assay was used to detect the effect of berberine on MH⁃S cells activity.The NO assay kit was used to detect the content of NO.ELISA and RT⁃PCR were used to detect the protein and mRNA levels of TNF⁃α,IL⁃6,IL⁃1and IL⁃12.The levels of iNOS,TLR4,MyD88,IRAK⁃4and NF⁃κB p65in MH⁃S cells were detected by Western blot.Results :Berberine not exceeding 5μmol /L had almost no effect on the viability of MH⁃S cells within 24h.Berberine inhibited the activity of macrophages at a concentration of 10μmol /L and showed a certain time⁃effect.Berberine significantly reduced the secretion of NO in MH⁃S cells(P <0.05)and dose⁃dependently decreased TNF⁃α,IL⁃6,IL⁃1and IL⁃12at the protein and gene level.Berberine significantly down⁃regulated the expression levels of iNOS,TLR4,MyD88,IRAK⁃4and NF⁃κB p65(P <0.05).Conclusion :Berberine can inhibit the activity of iNOS,thereby reducing the secretion of NO.At the sametime,it blocked the activation of NF⁃κB by inhibiting the TLR4/MyD88/IRAK⁃4pathway,thereby exerting an anti⁃inflammatory effect.[Key words ]　Berberine;Mouse alveolar macrophages;Inducible nitric oxide synthase(iNOS);TLR4/MyD88/IRAK⁃4signalpathway;Nuclear factor κB(NF⁃κB) 肺泡巨噬细胞存在于肺泡内,是肺部巨噬细胞的主要种类,在正常生理环境下,其主要作用是清除组织内细胞碎片或无害抗原[1]㊂在肺组织受到致病微生物侵袭或者损伤时,肺泡巨噬细胞会启动强烈的促炎反应以维持组织稳态,但过度的炎性反应往往会加重组织损伤,从而诱发各种肺部疾病[2]㊂目前针对肺部炎症反应的治疗药物主要分为抗生素和糖皮质激素两类,前者以清除致病菌为主,后者以消除炎症为主[3⁃5]㊂然而,抗生素的过度使用极易出现耐药性,激素类药物又容易出现不良反应[6,7]㊂因此,寻求新的抗炎药物对于肺部炎症疾病乃至其他类炎症相关疾病的治疗具有重大意义㊂小檗碱(Berberine,BBR)主要存在于毛茛目毛茛科㊁小檗科㊁防己科及罂粟科植物中,此外在芸香科植物中也有较多分布,是一种具有广泛药理活性的生物碱类成分[8]㊂研究表明,小檗碱有很强的抗炎抑菌作用,其能通过对NF⁃κB㊁丝裂原活化蛋白激酶(mitogen⁃activated protein kinase,MAPK)㊁过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators⁃activated receptorγ)信号等通路的调节,影响免疫细胞之间的平衡,抑制炎症因子的分泌和表达㊁减轻组织损伤等多种作用途径来减轻或抑制炎症的产生与发展[9⁃12]㊂目前有关小檗碱体外抗炎作用机制的研究主要集中在单核细胞(THP⁃1)或腹腔巨噬细胞(RAW264.7)等,本文旨在研究小檗碱对LPS诱导小鼠肺泡巨噬细胞分泌炎性介质的影响及其可能的作用机制㊂1　材料与方法1.1　材料　小鼠肺泡巨噬细胞株MH⁃S购自美国ATCC;BBR购自成都普瑞法科技开发有限公司, HPLC纯度≥98%;RPMI1640培养基㊁胎牛血清购自美国Gibco公司;脂多糖(Lipopolysaccharides, LPS)㊁MTT[3⁃(4,5⁃dimethyl⁃2⁃thiazolyl)⁃2,5⁃diphenyl⁃2⁃H⁃tetrazolium bromide]购自美国Sigma公司;TRIzon总RNA提取试剂购自北京康为世纪生物科技有限公司;iTaq TM Universal SYBR Green supermix购自美国BIO⁃RAD公司;5×All in one RT⁃MasterMix购自上海斯信生物科技有限公司;一氧化氮(NO)测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所;小鼠肿瘤坏死因子α(TNF⁃α)㊁IL⁃6㊁IL⁃1及IL⁃12ELISA试剂盒购自南京翼飞雪生物科技有限公司;一抗诱导性一氧化氮合酶(iNOS)㊁Toll样受体4 (TLR4)㊁髓样分化因子(MyD88)㊁白介素1受体关联激酶4(IRAK⁃4)㊁核转录因子κB(NF⁃κB)㊁β肌动蛋白(β⁃actin)及二抗HRP标记羊抗兔IgG(H+ L)购自沈阳万类生物科技有限公司㊂1.2　方法1.2.1　细胞培养　MH⁃S细胞培养于含10%胎牛血清的RPMI1640培养基中,置37℃㊁5%CO2恒温培养箱中培养㊂待细胞生长至对数生长期时,将细胞接种于96孔板或6孔板中继续培养㊂1.2.2　MTT法检测小檗碱对MH⁃S细胞活力的影响　取对数生长期的细胞,接种于96孔板中,每孔约1×104个细胞,接种6h后,加入终浓度为0㊁1㊁5㊁10μmol/L的小檗碱㊂培养6㊁12㊁18㊁24h后弃去培养基,每孔加入MTT溶液(0.5mg/ml)100μl继续培养4h后弃去培养基,每孔加入100μl二甲基亚砜,充分溶解反应产物后,于490nm处测定各孔吸光度值,计算不同浓度小檗碱对细胞生长活力的影响㊂1.2.3　Western blot法检测小檗碱对LPS诱导MH⁃S细胞相关蛋白表达的影响　取对数生长期的细胞,接种于6孔板中,每孔约2×105个细胞,接种6h 后,除空白对照孔外,每孔加入终浓度为0.5μg/ml 的LPS溶液㊂设置模型孔(含LPS,不含小檗碱),其他每孔分别加入1㊁2㊁5μmol/L的小檗碱,继续培养24h后,用无菌管收集细胞上清液,进行细胞因子的检测㊂细胞用预冷的PBS洗涤2次后,每孔加入含蛋白酶抑制剂㊁磷酸酶抑制剂的细胞裂解液100~150μl,裂解后将细胞小心刮下离心取上清, BCA法检测细胞蛋白的浓度㊂调整蛋白浓度,取相同总量的蛋白进行SDS⁃PAGE电泳㊁转膜㊂转膜后用4%脱脂牛奶室温封闭2h,TBST清洗后加入一抗于4℃孵育过夜,TBST清洗后加入二抗于室温孵育2h,TBST清洗后进行化学发光㊁显影㊁定影㊂采用Image Pro⁃Plus6.0软件分析电泳条带灰度值,以目的蛋白与GAPDH灰度值的比值作为目的蛋白的相对表达量㊂1.2.4　RT⁃PCR检测小檗碱对LPS诱导MH⁃S细胞炎症因子的影响　按照1.2.2中方法进行MH⁃S细胞的接板㊁给药㊂给药48h后,弃去上清液,用预冷的无菌PBS缓冲液洗涤2次,加入TRIzon总RNA 提取试剂提取RNA㊂RNA逆转录参照逆转录试剂盒说明书将试剂混匀,放入逆转录仪器中进行转录㊂逆转录所得产物直接进行荧光定量PCR,参照试剂盒说明书在专用低位PCR反应孔板中加入相关反应物,引物序列见表1,参照试剂盒说明书所列程序进行反应㊂以β⁃actin做内参,所得结果将原始值进行2-ΔΔCt转换后进行统计学处理㊂1.2.5　细胞上清液NO㊁炎症因子的含量检测　按照相关试剂盒所附说明书的操作,绘制标准曲线,分别计算各细胞因子的含量㊂1.3　统计学方法　应用Graphpad Prism6.0软件进行统计学分析,结果以x±s表示,采用单因素方差分析(One way⁃ANOVA)对数据进行显著性检验,P< 0.05表示差异具有统计学意义㊂2　结果2.1　小檗碱对MH⁃S细胞活力的影响　结果如图1所示,小檗碱在1㊁5μmol/L的浓度作用24h,对MH⁃S细胞的生长活力几乎没有影响;在10μmol/L 的浓度下,能明显降低MH⁃S细胞的活力,在作用超过12h 开始具有统计学意义(P <0.05),呈一定的时效性㊂因此,小檗碱的给药浓度最大不能超过5μmol /L㊂2.2　小檗碱对LPS 刺激MH⁃S 细胞炎症因子的影响　结果如图2所示,0.5μg /ml 的LPS 作用MH⁃S 图1　小檗碱作用不同时间对MH⁃S 细胞活力的影响Fig.1　Effect of berberine on viability of MH⁃S cells atdifferent timesNote:Compared with the 0μmol /L group,*.P <0.05,**.P <0.01.细胞24h 后,细胞上清液中NO㊁TNF⁃α㊁IL⁃6㊁IL⁃1及IL⁃12的含量明显升高(P <0.01)㊂给予不同浓度的小檗碱刺激后,NO㊁TNF⁃α㊁IL⁃6㊁IL⁃1及IL⁃12的水平有不同程度地下降,并呈一定的量效关系㊂2.3　小檗碱对LPS 刺激MH⁃S 细胞中TNF⁃α㊁IL⁃6㊁IL⁃1及IL⁃12mRNA 的影响　结果如图3所示,0.5μg /ml 的LPS 作用MH⁃S 细胞24h 后,细胞中TNF⁃α㊁IL⁃6㊁IL⁃1及IL⁃12等炎症因子mRNA 的表达量明显升高(P <0.01)㊂给予不同浓度的小檗碱刺激后,NO㊁TNF⁃α㊁IL⁃6㊁IL⁃1及IL⁃12的mRNA 水平呈浓度依赖性地下调,并在剂量为5μmol /L 时,差异均具有统计学意义(P <0.05)㊂2.4　小檗碱对LPS 刺激MH⁃S 细胞中iNOS㊁TLR4㊁MyD88㊁IRAK⁃4及NF⁃κB p65的影响　结果见表2和图4,0.5μg /ml 的LPS 作用MH⁃S 细胞24h 后,细胞iNOS㊁TLR4㊁MyD88㊁IRAK⁃4及NF⁃κB p65蛋白表达量明显升高(P <0.01)㊂给予5μmol /L 的小檗碱刺激后,MH⁃S 细胞iNOS㊁TLR4㊁MyD88㊁IRAK⁃4及NF⁃κB p65蛋白表达量显著下调(P <0.05)㊂表1　引物序列Tab.1　Sequences of primers for real⁃time PCRNameForward(5′→3′)Reverse(5′→3′)Product(bp)TNF⁃αCCTGTAGCCCACGTCGTAGGGGAGTAGACAAGGTACAACCC 148IL⁃6CTGCAAGAGACTTCCATCCAG AGTGGTATAGACAGGTCTGTTGG 131IL⁃1GAAATGCCACCTTTTGACAGTG TGGATGCTCTCATCAGGACAG116IL⁃12CTGTGCCTTGGTAGCATCTATG GCAGAGTCTCGCCATTATGATTC 169β⁃actinGGCTGTATTCCCCTCCATCGCCAGTTGGTAACAATGCCATGT154图2　小檗碱对MH⁃S 中NO (A )㊁TNF⁃α(B )㊁IL⁃6(C )㊁IL⁃1(D )及IL⁃12(E )表达量的影响Fig.2　Effect of berberine on expression of NO (A ),TNF⁃α(B ),IL⁃6(C ),IL⁃1(D )and IL⁃12(E )in MH⁃S cellsNote:Compared with the Model group(LPS+,BBR-),*.P <0.05,**.P <0.01.表2　小檗碱对MH⁃S 中iNOS ㊁TLR4㊁MyD88㊁IRAK⁃4及NF⁃κB p65相对表达量的影响(x ±s ,n =3)Tab.2　Effect of berberine on relative expression of iNOS ,TLR4,MyD88,IRAK⁃4and NF⁃κB p65in MH⁃S cells (x ±s ,n =3)GroupsiNOSTLR4MyD88IRAK⁃4NF⁃κB p65Control 0.28±0.132)0.66±0.112)0.49±0.082)0.35±0.052)0.84±0.072)Model 2.01±0.162.47±0.422.73±0.171.89±0.102.19±0.24BBR 1.27±0.162)1.56±0.181)1.30±0.102)0.84±0.072)1.28±0.171)Note:Compared with the Model group,1)P <0.05,2)P <0.01.图3　小檗碱对MH⁃S 中TNF⁃α㊁IL⁃6㊁IL⁃1及IL⁃12mRNA 的影响Fig.3　Effect of berberine on mRNA level of TNF⁃α,IL⁃6,IL⁃1and IL⁃12in MH⁃S cellsNote:Compared with the Model group(LPS+,BBR-),*.P <0.05,**.P <0.01.图4　小檗碱对LPS 刺激MH⁃S 细胞中iNOS ㊁TLR4㊁MyD88㊁IRAK⁃4及NF⁃κB p65蛋白的影响Fig.4　Effect of berberine on expression of iNOS ,TLR4,MyD88,IRAK⁃4and NF⁃κB p65in MH⁃S cells induced by LPS3　讨论巨噬细胞是吞噬细胞的一种,是机体抵抗外来病原体侵袭的重要组成部分,其主要功能是对细胞碎片及病原体进行吞噬作用,激活免疫细胞并引起炎症反应㊂肺泡巨噬细胞长期存在于肺泡内,是肺部巨噬细胞的主要种类,是宿主抵御外部侵袭的第一道防线,在维持肺部免疫系统稳态过程中发挥关键作用[13]㊂在肺部受到外来或内在致病因素刺激后,肺泡巨噬细胞被激活并释放大量炎性介质如细胞因子㊁趋化因子㊁补体㊁危险信号分子等[14]㊂其中趋化因子能继续招募单核细胞和中性粒细胞,或作为刺激剂激活肺上皮细胞和间质巨噬细胞,从而建立肺部炎症微环境[15]㊂在炎性环境下,巨噬细胞表面Toll 样受体表达增加,刺激多种炎症因子的激活㊁表达㊁释放㊂研究表明,肺泡巨噬细胞的活化与多种肺部疾病相关,包括急性肺损伤㊁慢性阻塞性肺病㊁支气管哮喘㊁肺纤维化等[16⁃20]㊂巨噬细胞在受到LPS 等刺激下,会活化并释放大量炎症分子或因子,包括NO㊁TNF⁃α㊁IL⁃6㊁IL⁃1及IL⁃12等[21]㊂NO 由iNOS 催化合成,在LPS 的刺激下,巨噬细胞大量合成并释放NO,在杀伤病原体的同时对周围正常细胞也造成损害[22]㊂TNF⁃α是由巨噬细胞分泌的一种小分子蛋白,其作用于细胞表面时,与细胞膜表面受体结合后能形成复体,从而激活下游的一系列蛋白激酶,进而激活NF⁃κB 和JNK 信号通路,参与机体的炎症反应和免疫调节等病理过程[23]㊂IL⁃6㊁IL⁃1及IL⁃12均属白介素家族,主要由巨噬细胞㊁小胶质细胞㊁淋巴细胞及上皮细胞等产生㊂在正常生理条件下含量极低,在病理状态下如COPD㊁肺损伤,该类白介素含量急剧升高㊂IL⁃6能够介导炎症反应,促进T 细胞和B 细胞的增生和分化,参与免疫调节,引起免疫性病理损伤[24]㊂IL⁃1是参与炎症反应的最重要的细胞因子之一,能诱导出与TNF⁃α相似的生理和代谢改变,并能与TNF⁃α产生相互协同作用[25]㊂IL⁃12作为一种重要的免疫调节因子,具有多种生理功能,其一方面能促进巨噬细胞产生一氧化氮合酶,释放活性氮,增强吞噬功能和局部炎症反应;另一方面能促进Th1型细胞分化,抑制Th2型细胞分化,促进IL⁃2㊁TNF⁃α等细胞因子的产生[26]㊂小檗碱是一种季铵类型的生物碱,常用于治疗各种炎症疾病及细菌感染㊂药理研究发现,小檗碱能改善细胞内脂滴的聚集和氧化应激,从而改善棕榈酸钠诱导的细胞凋亡[27];并能通过抑制抗原诱导的Lyn㊁Syk 和Gab2的磷酸化,从而抑制下游MAPK 通路,在过敏反应的体内模型中,小檗碱的使用通过上述途径抑制小鼠的被动皮肤过敏反应[28]㊂但有关小檗碱对肺泡巨噬细胞活化影响的相关研究较少,本文研究结果表明,小檗碱能够明显抑制LPS 刺激的巨噬细胞活化,降低NO 的分泌量,同时剂量依赖性地在蛋白层面及基因层面下调TNF⁃α㊁IL⁃6㊁IL⁃1及IL⁃12等炎症因子的含量,具有显著的抗炎作用㊂Toll 样受体(toll⁃like receptors,TLRs)是一类天然免疫受体,在自然界动物体内广泛分布,主要表达于巨噬细胞㊁单核细胞㊁淋巴细胞等免疫细胞表面㊂TLRs 能够直接识别并结合病原体或其产物,引发一系列信号转导,进而导致炎性介质的释放[29]㊂TLR4是人类发现的首个TLRs 蛋白,其与相应配体结合后,能进一步激活NF⁃κB,从而促进各种炎性因子基因表达的激活㊂由LPS 激活的TLR4/NF⁃κB 信号通路主要分为MyD88依赖的信号通路及MyD88非依赖的信号通路㊂在细胞表面,TLR4与LPS结合后发生聚合将信号转导至胞内,与MyD88的羧基端结合,同时MyD88的氨基端与IRAK⁃4结合,并激活TRAF⁃6,进而激活IKKs复合物,NF⁃κB抑制物在IKKs复合物的作用下发生磷酸化并降解,使得NF⁃κB激活并转入细胞核内诱导细胞因子IL⁃1㊁IL⁃6及IL⁃12等的表达[30⁃32]㊂本实验研究结果发现,小檗碱能够通过抑制iNOS的活性,减少NO的释放,另一方面通过抑制TLR4/MyD88/IRAK⁃4通路的活化,进而抑制NF⁃κB 的激活,从而减少炎症介质的释放㊂参考文献:[1]　Balhara J,Gounni AS.The alveolar macrophages in asthma:Adouble⁃edged sword[J].Mucosal Immunol,2012,5(6):605⁃609.[2]　Allard B,Panariti A,Martin JG.Alveolar macrophages in theresolution of inflammation,tissue repair,and tolerance to infection [J].Front Immunol,2018,9:1777.[3]　Motos A,Kidd JM,Nicolau DP.Optimizing antibioticadministration for pneumonia[J].Clin Chest Med,2018,39(4): 837⁃852.[4]　胡小芳,李　言,张　永.糖皮质激素辅助治疗社区获得性肺炎研究进展[J].中华医院感染学杂志,2017,27(2):477⁃480.Hu XF,Li Y,Zhang Y.Progress of study on glucocorticoids in adjuvant therapy of community⁃acquired pneumonia[J].Chin J Nosocomiol,2017,27(2):477⁃480.[5]　Ariani F,Liu K,Jing Z,et al.Glucocorticosteroid in treatment ofsevere pneumonia[J].Mediators Inflamm,2013:865635. 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芹菜素对小鼠急性肺损伤的保护作用

芹菜素对小鼠急性肺损伤的保护作用王玉明（酒泉职业技术学院，甘肃酒泉735000）摘要：急性肺损伤是由创伤、感染、休克等诸多非心源性因素导致的一种急性、进行性呼吸障碍。

该病的主要特点是出现顽固型低氧血症、促进呼吸频数升高、呼吸加重、呼吸困难、X线分析结果显示肺泡多出现弥漫性浸润等。

本实验在构建L P S诱导的小鼠急性肺损伤模型的基袖上，通过观察肺组织病理学变化、肺组织MPO活性变化及炎性细胞数量、促炎性细胞因子及NF%B和MAPKs 信号通路中关键接头蛋白分子磷酸化水平变化，探讨芹菜素对LPS诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用。

关键词：芹菜素；小鼠；急性肺损伤；核转录因子一％B；丝裂原活化蛋白激酶［中图分类号％S852.3［文献标识码％A［文章编号％10046704（2020）02001705Protective effect of Apigenin on Acute Lung Injury in MiceWANG Yu-mingCJiuquan Vocaiionl and Technical College,>iuquan Gansu China,735000)Abstract:Acute lung injury(ALI)is an acute,progressive respiratory dysfunction,which usually caused by trauma,in-fec ion,shock,and many oCher non cardiac causes.The mainfeaCuresofChediseaseareChesCubbornhypoxemia,increased breaChfrequency,heavybreaChing,dysonea,adi f useinfilCraCionofalveolarChroughX—rayanalysis.OnChebasisofChelung issue paChology observaCion,lung issue MPO acCivi y changes and inflammaCory ce l s,andChe changes of inflammaCory cyCo-kines and NF—^B protein molecules and MAPKs signaling pathways in the key joint phosphorylation level,this experiment built a mouse model of acute lung injury induced by LPS,explored the effect of apigenin on the protection of acute lung injury +n m+ce+nducedbyLPS.Key words：apigenin；mice；acute lung injury；LPS*MAPKs11.1清洁级BALB/c小鼠（6—8周龄，体重20#23 g）,购自吉林大学白求恩医学院动物实验中心，小鼠饲养一周左右以适应新环境，给予充足的饲料和饮水。

芹菜素对LPS诱导小鼠急性肺损伤的保护作用

芹菜素对LPS诱导小鼠急性肺损伤的保护作用王玉明;杨正涛;张乃生【摘要】[目的]揭示芹菜素的抗炎作用机制.[方法]通过建立小鼠模型,研究芹菜素对LPS诱导急性肺损伤的保护作用.[结果]芹菜素可以降低LPS诱导的肺组织损伤和肺组织MPO活性.与LPS组相比,芹菜素治疗组可以显著降低肺泡盥洗液中TNF-α、IL-1β、IL-6的表达水平,并抑制NF-κB信号通路的激活.[结论]芹菜素可以通过抑制NF-κB的激活并降低炎性细胞因子的水平,从而对小鼠急性肺损伤产生抗炎保护作用.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2015(000)035【总页数】3页(P187-189)【关键词】LPS;急性肺损伤;芹菜素;NF-κB【作者】王玉明;杨正涛;张乃生【作者单位】吉林大学动物医学学院,吉林长春130062;吉林大学动物医学学院,吉林长春130062;吉林大学动物医学学院,吉林长春130062【正文语种】中文【中图分类】S865.1急性肺损伤常伴有毛细血管内皮细胞损伤、肺水肿及中性粒细胞浸润等病理学变化[1]。

LPS是引起急性肺损伤的主要因素[2]。

LPS能够诱导细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6显著升高[3-4]，这些细胞因子可以启动、放大并延续炎症反应，并对机体造成严重损伤。

急性肺损伤及其严重时发生的急性呼吸窘迫综合征所导致的病人死亡率约为20%～50%[5-6]。

因此，寻找防治急性肺损伤的有效策略具有重要的临床意义。

芹菜素是一种黄酮类化合物，研究发现芹菜素具有抗肿瘤、抗炎等多种药理作用[7-8]。

据报道，芹菜素可以抑制LPS刺激巨噬细胞所引起的炎性细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的释放[9]，对大鼠急性脑损伤和大鼠肝脏局部缺血再灌注损伤具有一定的保护作用[10]。

然而，芹菜素对LPS诱导的急性肺损伤的保护作用鲜有报道。

笔者通过建立小鼠模型观察芹菜素对LPS诱导急性肺损伤的保护作用，并初步揭示芹菜素的抗炎作用机制。

芹菜素对3T3-L1细胞作用的研究

芹菜素对3T3-L1细胞作用的研究段培琪;王洋;王华清;来进君;陈志【摘要】芹菜素对3T3-L1小鼠胚胎成纤维细胞有一定的分化影响。

通过对3T3-L1细胞的培养,研究其增殖周期及作用;而后分析细胞密度与MTT光密度值的对应关系,利用不同质量浓度的芹菜素对细胞密度的影响进行分析,得出芹菜素对脂肪细胞在30、50、100μg/m L时具有明显的抑制作用。

【期刊名称】《生物化工》【年(卷),期】2017(000)002【总页数】3页(P26-28)【关键词】3T3-L1小鼠胚胎成纤维细胞;芹菜素;增殖;抑制【作者】段培琪;王洋;王华清;来进君;陈志【作者单位】青海师范大学生命与地理科学学院;青海师范大学生命与地理科学学院;青海师范大学生命与地理科学学院;青海师范大学生命与地理科学学院;青海师范大学生命与地理科学学院【正文语种】中文【中图分类】R151芹菜素（Apigenin）是一种黄酮类的化合物，广泛存在于蔬菜、水果、茶叶内，玄参科植物水蔓青、百合科等松科植物体中[1]。

临床方面上，其可以抑制致癌物质的致癌活性，还可以作为治疗HIV和其他病毒感染的抗病毒药物，同时还具有安神、镇静、降压、降脂和抗氧化[2-4]等功能。

现如今，随着肥胖人数的逐年增加，疾病的困扰也增加了很多，如脂肪肝、骨关节病、Ⅱ型糖尿病[5-6]等。

本文通过利用芹菜素去检测3T3-L1脂肪细胞的分化、调节、抑制作用，能更好地为研究肥胖等疾病作用机理提供一定的依据。

1.1 试验材料3T3-L1小鼠胚胎成纤维细胞购于上海歌凡生物科技有限公司，胰蛋白酶、PBS （缓冲液）购于哈灵生物科技有限公司，芹菜素于青海师范大学实验室内川西獐牙菜中提取。

1.2 试验仪器立式压力蒸汽灭菌锅LS－35HD，江阴滨江医疗设备有限公司；生物安全柜BHC－1100IIA2，济南鑫贝西生物技术有限公司；二氧化碳培养箱，力康发展有限公司；奥林巴斯荧光显微镜；Eppendorf 离心机5804R；BIO－RAD xMark 酶标仪；微孔板孵育器MB100-4P，金坛市盛蓝仪器制造有限公司。

岩白菜素对脂多糖诱导小胶质细胞炎症反应的抑制作用及其分子机制

山东医药2023 年第 63 卷第 17 期岩白菜素对脂多糖诱导小胶质细胞炎症反应的抑制作用及其分子机制高佳，宋晓东，王敏蚌埠医学院第一附属医院康复医学科，安徽蚌埠233004摘要：目的　探讨岩白菜素对脂多糖（LPS ）诱导的BV2小胶质细胞炎症反应模型的影响以及其机制是否与调控小胶质细胞M1/M2表型极化相关。

方法　BV2小胶质细胞分为对照组、LPS 组、LPS+低剂量岩白菜素组、LPS+高剂量岩白菜素组，LPS+低剂量岩白菜素组、LPS+高剂量岩白菜素组分别加入10 µmol /L 、100 µmol /L 的岩白菜素预处理2 h 后与LPS 组一起加入LPS 刺激诱导炎症反应模型，对照组正常培养不做任何处理。

各组置于倒置显微镜下观察细胞形态变化，Western blotting 法检测细胞M1型小胶质细胞分泌型标志物一氧化氮诱导合酶（iNOS ）、M2型小胶质细胞分泌型标志物精氨酸1（Arg -1）蛋白表达。

结果　对照组细胞呈梭形，胞体小，有较少的分支形成；LPS 组细胞胞体变大，细胞分支增多，呈阿米巴样；LPS+低剂量岩白菜素组、LPS+高剂量岩白菜素组细胞形态均较LPS 组有改善，胞体变圆，分支减少。

细胞iNOS 蛋白表达对照组、LPS+高剂量岩白菜素组、LPS+低剂量岩白菜素组>LPS 组；细胞Arg -1蛋白表达LPS 组>iNOS 蛋白表达对照组、LPS+高剂量岩白菜素组、LPS+低剂量岩白菜素组（P 均<0.05）。

结论　岩白菜素可抑制LPS 诱导的小胶质细胞炎症反应，该作用可能通过促进小胶质细胞向M2表型极化实现。

关键词：岩白菜素；小胶质细胞；脂多糖；一氧化氮诱导合酶；精氨酸1；炎症反应doi ：10.3969/j.issn.1002-266X.2023.17.006中图分类号：R285 文献标志码：A 文章编号：1002-266X （2023）17-0026-03Inhibitory effect of bergenin on LPS -induced inflammatory response of microglia and its molecular mechanismGAO Jia ， SONG Xiaodong ， WANG MinDepartment of Rehabilitation Medicine ， The First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College ， Bengbu 233004， ChinaAbstract ： Objective To investigate the effect of bergenin （BGN ） on the lipopolysaccharide （LPS ）-induced inflam‐matory response model of BV2 microglia and whether its mechanism is related to the regulation of M1/M2 phenotype polar‐ization of microglia. Methods BV2 microglial cells were divided into the control group ， LPS group ， LPS+ low -dose BGN group ， and LPS+ high -dose BGN group. Cells in the LPS+ low -dose and LPS+ high -dose BGN groups were pretreated with 10 µmol /L and 100 µmol /L bergenin for 2 h ， respectively ， and cells in the LPS group ， LPS+ low -dose BGN group and LPS+ high -dose BGN group were added with LPS to stimulate and induce inflammatory response models. Cells in thecontrol group were cultured normally without any treatment. The morphological changes of cells in each group were ob‐served under an inverted microscope. The expression of inducible nitric oxide synthase （iNOS ） in M1 microglia and argi‐nine 1 （Arg -1） in M2 microglia were detected by Western blotting. Results In the control group ， the cells were fusi‐form ， with small cell bodies and fewer branches. The cell body of the LPS group was enlarged and the cell branches in‐creased. Compared with the LPS group ， the cell morphology of the LPS+ low -dose BGN group and LPS+ high -dose BGN group was improved ， and the cell bodies became round and the branches were reduced. The iNOS protein expression was higher in the control group ， LPS+ high -dose BGN group ， and LPS+ low -dose BGN group than in the LPS group ； and theArg -1 protein expression was higher in LPS group than in the control group ， LPS+ high -dose BGN group and LPS+ low -基金项目：安徽省中医药领军人才建设项目［康复（2018-23-1）］；蚌埠医学院2022年度研究生科研创新计划立项项目（Byycxz22013）；袁祖华名老中医工作室项目［皖中函（2013）56号］。

没食子酸对脂多糖诱导的人THP1巨噬细胞炎症反应的抑制作用

没食子酸对脂多糖诱导的人THP1巨噬细胞炎症反应的抑制作用刁佳雯;徐慧;马新月;全吉淑【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2024(34)4【摘要】目的探讨没食子酸(gallic acid, GA)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的人THP1巨噬细胞炎症反应的抑制作用。

方法将人THP1单核细胞用佛波酯(phorbol myristate acetate, PMA)分化为巨噬细胞,用LPS诱导建立巨噬细胞炎症模型,给予不同浓度GA进行保护。

CCK-8法筛选LPS和GA对THP1细胞的安全浓度;设正常组、模型组(100μg/L LPS)和GA组(100μg/L LPS+不同浓度GA)。

ELISA法检测各组细胞培养液白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平,微板法检测各组细胞培养液乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)活性和一氧化氮(nitric oxide, NO)含量,荧光染色检测各组细胞活性氧(ROS)水平、细胞损伤情况和线粒体跨膜电位的变化,Western blot法检测各组细胞环氧合酶-2(COX-2)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、P38丝裂原活化蛋白激酶(P38)、核转录因子-κB(NF-κB)、NOD样受体3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、IL-1β和消皮素D(Gasdermin D,GSDMD)蛋白表达的影响。

结果与正常组比较,模型组细胞培养液IL-6、TNF-α、IL-1β和NO的分泌增多(P<0.05),COX-2、HMGB1、p-ERK、p-JNK、p-P38、p-NF-κB、NLRP3、Caspase-1和IL-1β蛋白表达升高(P<0.05),GSDMD蛋白表达水平降低(P<0.05),ROS生成和细胞损伤明显增多,线粒体跨膜电位较正常组显著降低,LDH活性显著升高(P<0.05);与模型组比较,GA组细胞培养液IL-6、TNF-α、IL-1β和NO的分泌减少(P<0.05),COX-2、HMGB1、p-ERK、p-JNK、p-P38、p-NF-κB、NLRP3、Caspase-1和IL-1β蛋白表达降低(P<0.05),GSDMD蛋白表达水平升高(P<0.05),ROS生成和细胞损伤减少,线粒体跨膜电位逐渐升高,LDH活性降低(P<0.05)。

12味止血中药对脂多糖诱导小鼠巨噬细胞产生一氧化氮的抑制作用

文献标识码 A
文章编号 1001- 0408( 2007) 09- 0649- 03
摘要目的: 研究 12 味止血中药对脂多糖( L P S) 诱导小鼠巨噬细胞产生一氧化氮( N O ) 的抑制作用, 并探讨其止血机制。方法: 以 1 g mL - 1 L PS 刺激小鼠巨噬细胞 RA W 264 7, 22h 后以 G riess 法测定 N O 的终产物亚硝酸盐的含量, 观察 L P S 对 N O 生成的影响。结果: 12 味止血药均可抑制 L PS 诱导小鼠巨噬细胞 RA W 264 7 中 N O 的生成。三七、地榆、仙鹤草、槐花、艾叶、蒲黄、侧柏叶及白茅根的抑制作用显著( P < 0 05) 。结论: 本实验为 12 味止血中药对脂多糖诱导小鼠巨噬细胞产生 N O 的抑制作用提供了一定的理论依据。关键词止血中药; 脂多糖; 一氧化氮; 巨噬细胞 RA W 264 7
中医药理论中, 止血药是以制止体内、外出血为主要作用的药物, 具有调理血行、减轻血管损伤、促进血液凝固的功效, 临床用于咯血、吐血、衄血、便血、尿血、崩漏以及敛止血药、化淤止血药、温经止血药等 4 类 [1]。研究认为其药理学过程包括血液凝固、血小板聚集和血管收缩等 3 个重要方面。
4 讨论
人体在出血的情况下, 破损的血管处凝血是机体正常的生理反应。体内的凝血过程是多种生物成分参与的相互作用过程, 主要包括血管壁止血、血小板因素、血浆止血等 3 大因素。对止血中药的止血研究发现, 三七、仙鹤草、蒲黄等有增加外周血小板数目, 提高血小板黏附性、聚集性或促进其伸展伪足, 加速血小板内促凝物质释放的作用 ; 而小蓟等则可激动 - 受体、收缩血管, 产生止血作用 [4]。随着 N O 的发现及研究的深入, 已明确 N O 的改变与以上 3 种因素的变化均有关联。

AcSDKP体外抑制脂多糖诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞促炎功能研究

AcSDKP 体外抑制脂多糖诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞促炎功能研究*李兵航，李梦婷，何玲楠，周达，白洁，丁永年，陈源文，范建高【摘要】目的探讨N-乙酰-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸（AcSDKP ）对小鼠RAW264.7巨噬细胞促炎功能的影响。

方法取小鼠RAW264.7巨噬细胞体外培养，分为对照组、脂多糖（LPS ）组和LPS 加不同浓度的AcSDKP （1nmol/L 、10nmol/L 和100nmol/L ）处理组。

采用荧光定量PCR 法检测细胞肿瘤坏死因子（TNF ）-α、白细胞素（IL ）-1β、IL-6和诱导型一氧化氮合成酶（iNOS ）mRNA 相对水平；使用Transwell 小室检测RAW264.7细胞的趋化能力；采用Western blot 法检测细胞iNOS 、磷酸化的蛋白激酶复合体抑制物(p-IKK)、磷酸化的κB 抑制蛋白(p-I κB)和磷酸化的P65（p-P65）蛋白表达水平。

结果LPS 处理组TNF-α、IL-1β和IL-6mRNA 水平显著高于对照组【分别高出（41±2.1）倍、（1073±80.8）倍和（1726±110.2）倍，P <0.01】；AcSDKP （10nmol/L 和100nmol/L ）处理组TNF-α水平显著低于LPS 处理组【分别降低19.0%和39.3%，P <0.01】；AcSDKP （1nmol/L 、10nmol/L 和100nmol/L ）处理组IL-1β水平显著低于LPS 处理组【分别降低22.08%、35.8%和38.2%，P <0.01】；AcSDKP （1nmol/L 、10nmol/L 和100nmol/L ）处理组IL-6水平显著低于LPS 处理组【分别降低15.8%、35.7%和43.3%，P <0.01】；LPS 处理组穿过小室的细胞数为（136±5.3）个/HP ，显著高于对照组【（64±5.3）个/HP ，P <0.01】，而AcSDKP 处理组穿过小室的细胞数【分别为（105±4.8）、（85.3±5.0）和（73.7±5.6）个/HP 】，显著低于LPS 组【（136±5.3）个/HP ，P <0.05】；LPS 处理组iNOS mRNA 和蛋白表达水平显著高于对照组【分别为（21±2.5）倍和（5.9±0.4）倍，P <0.01】，而AcSDKP 处理组iNOS mRNA 显著低于LPS 处理组【分别降低37.8%、23.3%和33.1%，P <0.05】；在10nmol/L 和100nmol/L 浓度AcSDKP 处理组，两种蛋白水平显著低于LPS 处理组【分别降低27.0%和40.2%，P <0.05】；LPS 处理组p-IKK 、p-I κB 和p-P65表达量均显著高于对照组【分别为（25.9±4.8）倍、（9.5±0.6）倍和（2.1±0.2）倍，P <0.01】，而AcSDKP （10nmol/L ）处理组三者水平较LPS 处理组显著下降【分别为42.5%、17.8%和29.7%，P <0.05】。

脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞parkin 表达及线粒体自噬形成

脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞parkin 表达及线粒体自噬形成程艳伟;靳梦醒;闫海;黄大可;黄保军;张林杰【期刊名称】《中国免疫学杂志》【年(卷),期】2014(000)011【摘要】目的：探讨巨噬细胞在脂多糖（ LPS）处理后parkin表达及对线粒体自噬的影响。

方法：无菌分离并原代培养小鼠腹腔巨噬细胞；200 ng/ml LPS作用巨噬细胞，JC-1标记线粒体，流式细胞仪检测线粒体膜电位变化；RT-PCR 检测巨噬细胞parkin mRNA水平；Western blot 检测parkin及自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的表达水平；激光共聚焦显微镜分别检测巨噬细胞在LPS处理前后parkin在细胞内的分布及与LC3和线粒体三者的共定位情况。

结果：JC-1染色流式细胞仪检测结果显示，LPS处理后，巨噬细胞线粒体膜电位降低，并随LPS作用时间延长呈持续下降趋势；parkin mRNA在LPS处理6 h内仅有少量的增加，但parkin蛋白水平在LPS刺激6 h后增加明显；parkin在巨噬细胞定位结果表明，未受LPS处理时parkin呈弥散均匀分布，而LPS刺激后parkin呈明显的点状聚集；Western blot检测结果显示巨噬细胞在LPS刺激后，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比例增大，表明巨噬细胞发生明显的自噬；激光共聚焦显微镜结果显示，巨噬细胞在LPS 刺激后，parkin、LC3和线粒体三者存在共定位关系。

结论：巨噬细胞在LPS刺激后，parkin表达增加并介导线粒体自噬形成，参与对损伤线粒体的清除，可能在巨噬细胞参与的炎症反应中发挥一定的调控作用。

【总页数】5页(P1457-1461)【作者】程艳伟;靳梦醒;闫海;黄大可;黄保军;张林杰【作者单位】安徽医科大学基础医学院免疫学教研室，合肥 230032;安徽医科大学基础医学院免疫学教研室，合肥 230032;安徽医科大学基础医学院免疫学教研室，合肥 230032;安徽医科大学基础医学院综合实验室，合肥 230032;安徽医科大学基础医学院免疫学教研室，合肥 230032;安徽医科大学基础医学院免疫学教研室，合肥 230032【正文语种】中文【中图分类】R378.2;R392.1【相关文献】1.洋葱槲皮素对脂多糖诱导的小鼠腹腔巨噬细胞炎症反应抑制作用 [J], 倪湾;李敬双;于洋2.莫西沙星对脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞炎性反应的影响 [J], 李娜;刘雅琴;张秀冰;李美欣;袁红霞;邱振宇3.脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞炎性反应中前列腺素E2/前列腺素E受体4调控高迁移率族蛋白Ⅰ的机制 [J], 王晓亮;张勇;斯妍娜;徐亚杰;鲍红光;白小明;冷静4.不同浓度乙醇洗脱沙葱黄酮对脂多糖诱导的小鼠腹腔巨噬细胞的抗炎作用 [J], 王翠芳;王特日格乐;丹妮;杜红喜;张秀媛;萨茹丽;敖长金5.沙葱总黄酮对脂多糖诱导的小鼠腹腔巨噬细胞炎症介质的影响 [J], 王特日格乐;王翠芳;丹妮;萨茹丽;杜红喜;郭春利;哈斯额尔敦;曹琪娜;敖长金因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

芹菜素的生物学活性研究进展

芹菜素的生物学活性研究进展作者：窦笑菊周子琪谢东锋来源：《科技风》2018年第04期摘要：芹菜素是一种自然界中广泛存在的黄酮类化合物，具有广泛的药用价值，本文就芹菜素的生物学特性及其抗肿瘤，抗氧化，抗炎症作用及其作用机理进行综述，以期为揭示芹菜素的作用机制，扩大其应用价值提供依据。

关键词：芹菜素；生物学活性；作用机制芹菜素（Apigenin），化学名4'，5，7三羟基黄酮；别名芹黄素。

是一种自然界中常见的黄酮类化合物。

芹菜素主要来源于伞形科植物旱芹Apium graveolens L. var. dulce DC.的叶，在瑞香科、马鞭草科、卷柏科植物中广泛存在。

也可以从蔬菜水果中大量获得。

纯化的芹菜素为黄色针状结晶，分子式C15H10O5，分子量270.24，难溶于水，易溶于乙醇，KOH等有机溶剂。

独特的化学结构决定了其特殊的生物学特性和药理作用。

作为一种天然小分子化合物，芹菜素在多项研究中被证实具有舒张血管，降低血压和血脂，抗炎症，抗肿瘤，抗氧化等生物学活性。

但是，由于其难溶于水的特性，口服的利用率较低，一定程度上限制了其应用范围。

1 芹菜素的抗肿瘤作用在Hela细胞中，芹菜素通过PI3K/AKT信号通路，激活caspase 3，下调CyclinD1、D3 和Cdk4，在HepG2细胞中，通过阻滞细胞周期于G2/M期，诱导肿瘤细胞凋亡。

芹菜素还具有抑制酪氨酸激酶和蛋白激酶的作用，通过改变其应答蛋白Grb2的结合位点，抑制MAPK信号通路的磷酸化反应，从而干扰肿瘤细胞的信号传导。

芹菜素也能降低c Myc 的磷酸化水平、增加P53基因的表达量，通过抑制癌基因表达，上调抑癌基因的表达，抑制肿瘤细胞增殖。

芹菜素通过抑制 ATP 酶活性，降低 ATP 生成量，通过与下调NFKB和Bcl2的表达，降低肿瘤细胞对化疗药物的拮抗，纠正细胞的耐药性。

2 芹菜素的降血脂血糖作用研究发现，芹菜素具有降低高脂血症大鼠血糖和血脂的作用，腹腔给药40， 80mg/kg 后，大鼠的血糖水平，血清中 TC、TG、LDLC 含量显著降低、肝脏组织中 SOD、活性显著升高，MDA 含量显著降低；肝组织形态学改变和脂肪病变均明显减轻。

胆绿素对脂多糖诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞NLRP3炎性体激活的作用

胆绿素对脂多糖诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞NLRP3炎性体激活的作用龚睿;蒋磊;宋宁;费东生;杨松林;刘文;赵鸣雁【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2017(046)010【摘要】目的探讨胆绿素(biliverdin,BV)对脂多糖诱导RAW264.7巨噬细胞NLRP3炎性体激活的影响及其作用机制.方法用不同浓度胆绿素(10、20、30μmol/L)处理小鼠RAW264.7巨噬细胞30min后再用LPS(1 μg/ml)处理细胞6h,ELISA法检测培养上清液IL-β和IL-18中的分泌量.30μmoL/L胆绿素处理细胞30min后再用LPS处理细胞6h,Western blot法检测胞内NLPR3、caspase-1、ASC和磷酸化IκB(p-IκB)的蛋白表达水平;NF-κB抑制剂BAY11-7082处理细胞1h后,然后给予细胞30 μmol/L胆绿素孵育30min,经1μg/ml LPS孵育6h,ELISA 法检测细胞培养上清液中IL-β、IL-18的表达水平.结果 (1)在受到LPS作用后,RAW264.7巨噬细胞分泌IL-β、IL-18水平显著升高;而在预先给予胆绿素后,抑制了LPS诱导的IL-β、IL-18表达,并且呈剂量依赖性(P＜0.05).(2)与空白对照组相比,LPS处理巨噬细胞6h后,NLRP3炎性体各组分蛋白和p-IκB蛋白表达明显上调(P均＜0.05),在同时间点,巨噬细胞在LPS处理前经过胆绿素预处理后,NLRP3炎性体各组分蛋白和p-IκB蛋白表达都显著降低(均P＜0.05).(3)与LPS组相比,BAY+胆绿素明显抑制了LPS诱导的IL-β、IL-18的表达(P＜0.05),并且BAY和胆绿素的对于LPS诱导炎性反应对的联合抑制作用显著的高于BAY或者胆绿素的单独作用(P＜0.05).结论在RAW264.7巨噬细胞中,胆绿素可以通过抑制NF-κB的活性进而抑制NLRP3炎性体的形成,从而发挥抗炎作用.%Objective To investigate theeffects of biliverdin on NLRP3 inflammasome pathway in LPS-induced RAW264.7 macrophages.Methods RAW264.7 macrophage was pre-treated with different concentrations (10,20,30μmol/L) of biliverdin(BV) for 30 minutes,then administrated with LPS(1μg/ml) for 6 hours,and the expression of supernatant levels of proinflammatory cytokine IL-1β,IL-18 were measured respectively by ELISA.Cells were treated with LPS(1 μg/ml) for 6h,and pretreated with BV(30μmol/L) for 30min before LPS stimulation,the protein expression of NLPR3,caspase-1,ASC and phosphorylated IκB were determined by western blot.Cells were preincubated with BAY11-7082 (an inhibitor of NF-κB) for 1 hour,followed by BV treatment and then LPS stimulation.Meanwhile,the levels of pro-inflammatory cytokine IL-1β,IL-18 in the supernatant were measured by ELISA.Results LPS significantly increased IL-1β,IL-18 scretion levels in the supernatant,however,pretreatment with BV suppressed the LPS-induced IL-1β,IL-18 in a concentration-dependent manner(P ＜ 0.05).The protein expressions of NLRP3 inflammasome and phosphorylated IκB were up-regulated significantly 6 hours after LPS stimulation compared with control group (P ＜ 0.05),while downregulated by BV on the same time point(P ＜0.05).Compared with LPS group,a large reduction in IL-1β,IL-18 expression were observed in BAY + BV + LPS group(P ＜ 0.05).Furthermore,these cytokines were much less in BAY + BV + LPS group than in BAY + LPS group or BV + LPS group (P ＜ 0.05).Conclusion Biliverdin exerted anti-inflammatory effects by regulating NLRP3 expression partially through the NF-κB pathway in RAW264.7 macrophages.【总页数】5页(P35-39)【作者】龚睿;蒋磊;宋宁;费东生;杨松林;刘文;赵鸣雁【作者单位】150086 哈尔滨医科大学附属第一医院ICU;150086 哈尔滨医科大学附属第一医院ICU;150086 哈尔滨医科大学附属第一医院ICU;150086 哈尔滨医科大学附属第一医院ICU;150086 哈尔滨医科大学附属第一医院ICU;150086 哈尔滨医科大学附属第一医院ICU;150086 哈尔滨医科大学附属第一医院ICU【正文语种】中文【中图分类】R3【相关文献】1.肺炎支原体经ROS激活NLRP3炎性体诱导RAW264.7细胞分泌IL－1β [J], 张涵;马晶;张云凌;张树明;许庆瑞;王伟明2.NAC抑制NLRP3炎性体在脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤的作用及机制 [J], 孙磊;陈珊珊;王李;章福彬3.白色念珠菌经组织蛋白酶B途径诱导小鼠腹腔巨噬细胞NLRP3炎性体表达 [J], 许莉;李东升;董碧麟;陈宏翔;陈娜;王辉4.活性氧参与脂多糖诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7活化诱导凋亡 [J], 张宸豪;王月华;王长文;周露露;李妍5.翼茎羊耳菊提取物对脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7的抗炎作用 [J], 黄春丽;吴乐昊;于洋;金慧子;张岩因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

黄连素对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤和炎症的改善作用及其机制

黄连素对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤和炎症的改善作用及其机制池明;高玲;吴巍巍;张博儒;王雷【摘要】目的:构建内毒素(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠模型,探讨黄连素对ALI的保护作用及其机制.方法:40只C57BL/6小鼠随机分为对照组、LPS组、黄连素+LPS组和黄连素组,每组10只.对照组小鼠给予生理盐水,LPS组小鼠通过滴鼻给予5 mg·kg-1 LPS 6 h,黄连素+LPS组小鼠在给予LPS的前5天灌胃50 mg·kg-1黄连素,黄连素组小鼠给予50 mg·kg-1黄连素灌胃5 d.HE染色检测各组小鼠肺组织形态表现;检测各组小鼠肺湿干重比值;检测各组小鼠肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白浓度和细胞渗出数;ELISA法检测各组小鼠BALF中炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平;超氧化物阴离子荧光探针(DHE)检测各组小鼠肺组织中活性氧(ROS)水平;线粒体膜电位检测试剂盒检测各组小鼠肺组织中线粒体膜电位;Western blotting法检测各组小鼠肺组织中Bcl-2和Bax蛋白表达水平,计算Bcl-2/Bax比值.结果:与对照组比较,LPS组小鼠肺间质炎性细胞浸润增加,肺泡空间增大,肺泡壁增厚,小鼠肺湿干重比值明显升高(P<0.01),总蛋白质浓度升高(P<0.05),BALF中细胞渗透数增多(P<0.01),BALF中TNF-α和IL-6水平升高(P<0.01),肺组织中ROS水平升高,线粒体膜电位降低(P<0.01),Bax/Bcl-2比值升高(P<0.01);与LPS组比较,黄连素+LPS组小鼠肺组织炎性改变减轻,小鼠肺湿干重比值降低(P<0.05),总蛋白浓度降低(P<0.05),BALF中细胞渗透数降低(P<0.05),BALF中TNF-α和IL-6水平降低(P<0.01),肺组织中ROS水平降低,肺组织中线粒体膜电位升高(P<0.05),肺组织中Bax/Bcl-2比值降低(P<0.01).结论:黄连素可改善LPS诱导的小鼠ALI和炎症程度,其机制可能与降低肺组织中ROS水平和保护线粒体功能有关.【期刊名称】《吉林大学学报（医学版）》【年(卷),期】2018(044)006【总页数】7页(P1194-1199,后插2)【关键词】内毒素;急性肺损伤;活性氧簇;线粒体;黄连素【作者】池明;高玲;吴巍巍;张博儒;王雷【作者单位】长春医学高等专科学校基础医学院免疫教研室,吉林长春 130031;长春医学高等专科学校基础医学院免疫教研室,吉林长春 130031;吉林大学第一医院烧伤外科,吉林长春 130021;吉林大学第一医院烧伤外科,吉林长春 130021;吉林大学口腔医院牙周科,吉林长春 130021【正文语种】中文【中图分类】R363.2急性肺损伤(acute lung injury，ALI)是一种遍布全球的常见临床疾病,其主要特征是肺内发生过度激活的炎症反应导致机体严重的气体交换功能受损，肺泡-毛细血管屏障破坏和肺部发生水肿[1-2]。

大黄素抑制脂多糖诱导星形胶质细胞炎症反应的机制研究

大黄素抑制脂多糖诱导星形胶质细胞炎症反应的机制研究林昱;赖文芳;苏燕青;宋百颖;黄鑫;洪桂祝【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2018(034)011【摘要】目的探讨大黄素对脂多糖(LPS)诱导大鼠星形胶质细胞炎症反应的抗炎作用及其机制.方法健康成年♀、♂SD大鼠合笼交配,取出生24 h内的乳鼠脑组织(皮层)消化为细胞后,于细胞培养箱内培养10～14 d,纯化、分离出星形胶质细胞,并将其分为正常组、正常给药对照组、模型组、给药组,使用LPS(100 μg·L-1)造模24 h,并给予大黄素(10μmol·L-1),采用NO测定试剂盒检测上清液中NO的释放量;qPCR技术检测原代星形胶质细胞CD14、C3的表达;Western blot技术检测原代星形胶质细胞C3、Egr-4的表达.结果与正常组相比,模型组CD14、C3 mRNA表达升高(p＜0.01),C3蛋白表达升高(P＜0.05),Egr-4蛋白表达升高(P＜0.01);与模型组相比,给药组CD14 mRNA表达降低(P＜0.01),C3 mRNA及蛋白表达降低(P＜0.05),Egr-4蛋白表达降低(P＜0.01).结论大黄素在星形胶质细胞LPS 诱导的炎症损伤中,可明显降低其受体CD14及补体C3、Egr-4的表达,其抗炎作用可能与下调CD14表达,抑制LPS-LBP-CD14三联复合物形成,调控C3、Egr-4表达有关.【总页数】6页(P1528-1533)【作者】林昱;赖文芳;苏燕青;宋百颖;黄鑫;洪桂祝【作者单位】福建中医药大学药学院,福建福州 350122;福建中医药大学药学院,福建福州 350122;福建中医药大学药学院,福建福州 350122;福建中医药大学药学院,福建福州 350122;福建中医药大学药学院,福建福州 350122;福建中医药大学药学院,福建福州 350122【正文语种】中文【中图分类】R-332;R284.1;R329.24;R364.5;R392.11;R977.6【相关文献】1.衢枳壳黄酮组分抑制脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症反应的作用机制研究 [J], XU Xiao;WANG Yang;WANG Siwei;ZHONG Songyang;LOU Lijun2.五味子丙素抑制脂多糖诱导心肌细胞的炎症反应与细胞焦亡的作用及机制研究[J], 刘力亨3.抗炎合剂通过TLR4/MyD88/NF-κB通路抑制脂多糖诱导的过表达高迁移率蛋白-1转染小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞炎症反应的机制研究 [J], 闫国良;李淑芳;王馨璐;孙雪;汪海慧4.淫羊藿次苷Ⅱ通过调节IKK/IκB/NF-κB信号通路抑制脂多糖诱导的星形胶质细胞炎症反应 [J], 郑勇;高健美;龚其海5.跳骨片含药血清抑制脂多糖诱导的软骨细胞炎症反应的作用机制研究 [J], 郑文伟;何晓娟;贾良良;马玉环;陈后煌;邵翔;陈达;刘献祥;李西海;叶蕻芝因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

芹菜素对氧糖剥夺损伤小胶质细胞的抗炎作用(一)

芹菜素对氧糖剥夺损伤小胶质细胞的抗炎作用(一)作者：李泽宜,韩书珍,王果,陈翔【摘要】目的探讨芹菜素对氧糖剥夺(OGD)损伤后复氧复糖(OGD/R)小胶质细胞中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)产生的影响。

方法将原代培养的小胶质细胞随机分为正常组、二甲基亚砜(DMSO)组及芹菜素(10、25、50μmol/L)组,其中DMSO组和芹菜素组小胶质细胞进行OGD8h,之后加入相应药物培养基,观察24h后,收集细胞上清,用双抗夹心酶联免疫吸附法检测上清中IL-1β、TNF-α含量。

结果24h后DMSO组细胞上清中IL-1β、TNF-α含量增多(P＜0.01)。

芹菜素组TNF-α、IL-1β分泌量明显低于DMSO组。

芹菜素可以抑制OGD后小胶质细胞的炎症反应,且呈剂量依赖性。

结论芹菜素可以通过减少OGD/R小胶质细胞中IL-1β、TNF-α的产生而发挥神经保护作用。

【关键词】氧糖剥夺；芹菜素；小胶质细胞；白细胞介素-1β；肿瘤坏死因子-αAbstract：ObjectiveTostudytheneuroprotectiveeffectofapigeninonmicrogliawhichwasexposedtooxygengluco sedeprivationandreperfusion(OGD/R),whichwascharacterizedbyitsinfluenceonIL-1βandTNF-αexpr ession.MethodsPrimarymicroglialcultureswerepreparedfromnewbornratbrain.Thepurityofisolate dcellswereidentifiedbyGSA-IB4.Thecellswererandomizedinto5groups：normalgroup,DMSOgroupandapigenin-treatedgroups(10,25,50μmol/L).ThecellsofDMSOgroupand apigenin-treatedgroupwereexposedto8hofOGDand24hofreperfusioninthepresenceorabsenceofa pigeninatarangeofconcentrations.CulturesupernatantswerecollectedandIL-1βandTNF-αweredetec tedbyELISAassay.ResultsTheexpressionofIL-1βandTNF-αweresignificantlyhigherinDMSOgroup(P＜0.01),however,apigeninconcentration-dependentlysuppressedIL-1βandTNF-αproductionofmicrogl ial.ConclusionApigeninmayplayaneuroprotectiveeffectwhichwasrelatedwithdepressionofIL-1βand TNF-αproductioni nOGD/Rmicroglia.Keywords：oxygenglucosedeprivation；apigenin；microglia；IL-1β；TNF-α小胶质细胞是中枢神经系统中数量第三的细胞,是重要的免疫感受与效应细胞,具有抗原提呈、分泌多种细胞因子、吞噬病原体和坏死组织以及神经修复的作用。

芹菜素对脂多糖致小鼠急性肺损伤的作用机制研究

芹菜素对脂多糖致小鼠急性肺损伤的作用机制研究马明明;李岩;朱委委;张小强;李君;刘向勇;王晓芝【期刊名称】《中国中西医结合急救杂志》【年(卷),期】2014(000)003【摘要】目的：观察芹菜素对脂多糖（LPS）诱导小鼠急性肺损伤（ALI）的影响，探讨其可能的作用机制。

方法将40只健康雄性昆明小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组及芹菜素低、中、高剂量组，每组8只。

采用腹腔注射LPS 5 mg/kg制备ALI模型；芹菜素低、中、高剂量组分别于制模前1 h腹腔注射芹菜素10、25、50 mg/kg进行干预。

制模后6 h进行指标检测，取右肺上叶行苏木素-伊红（HE）染色观察肺组织病理改变并对其进行病理评分，取右肺下叶称重测湿/干质量（W/D）比值，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清及支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测p38丝裂素活化蛋白激酶（p38MAPK）、ICAM-1和TNF-α的mRNA表达。

结果与对照组比较，模型组肺W/D比值增高（17.79±2.89比5.56±0.37，P＜0.05），肺组织病理评分增加（分：10.32±0.23比1.87±0.54，P＜0.05），血清及BALF中ICAM-1、TNF-α含量升高〔血清中ICAM-1（ng/L）：21.4±2.7比14.3±3.5，TNF-α（ng/L）：254.8±10.6比142.3±13.7；BALF 中 ICAM-1（ng/L）：20.3±2.4比11.5±3.2，TNF-α（ng/L）：230.3±5.8比110.5±11.2，均 P＜0.05〕，且 p38MAPK、ICAM-1和 TNF-α的mRNA表达亦明显升高（以对照组为1，p38MAPK、ICAM-1、TNF-α的相对表达量分别为4.42±0.37、4.89±0.27、3.28±0.13，均P＜0.05）；不同剂量芹菜素可减轻上述损伤效应，以中剂量组改善最为明显，肺W/D比值为13.28±1.21，血清中ICAM-1为（18.5±4.3）ng/L，TNF-α为（169.4±20.8）ng/L，BALF中ICAM-1为（17.8±3.5）ng/L，TNF-α为（150.4±7.1）ng/L，肺组织p38MAPK、ICAM-1、TNF-α的mRNA表达分别为2.99±0.28、3.97±0.17、2.87±0.27，与模型组比较差异均有统计学意义（P ＜0.05或P＜0.01）。

IRF1对LPS诱导的小鼠巨噬细胞凋亡和自噬的调节作用及其机制研究

IRF1对LPS诱导的小鼠巨噬细胞凋亡和自噬的调节作用及其机制研究一、本文概述本文旨在深入探究干扰素调节因子1（IRF1）对脂多糖（LPS）诱导的小鼠巨噬细胞凋亡和自噬的调节作用及其潜在机制。

通过系统地研究IRF1在LPS刺激下对巨噬细胞生物学行为的影响，本文期望为理解巨噬细胞在炎症和感染过程中的复杂反应提供新的视角，并为相关疾病的预防和治疗提供理论依据。

本文将概述IRF1和LPS的基本生物学特性及其在巨噬细胞中的功能。

随后，通过构建适当的实验模型，观察IRF1在LPS诱导的巨噬细胞凋亡和自噬过程中的表达变化，并探讨其与凋亡和自噬关键分子的相互作用。

本文还将深入剖析IRF1调节LPS诱导的巨噬细胞凋亡和自噬的分子机制，包括但不限于信号转导通路、基因表达调控等方面。

通过本研究的实施，我们期望能够为理解IRF1在巨噬细胞凋亡和自噬调控中的作用提供新的证据，并为未来开发针对相关疾病的干预策略提供理论基础。

本文还将为其他研究者在巨噬细胞生物学及相关领域的研究提供有益的参考和启示。

二、材料与方法本实验使用的小鼠巨噬细胞系（RAW7）购自中国科学院细胞库。

细胞在含有10%胎牛血清（FBS）和1%抗生素（青霉素/链霉素）的RPMI 1640培养基中，于37°C、5% CO2的恒温培养箱中培养。

LPS（脂多糖，来自大肠杆菌O111:B4）、IRF1（干扰素调节因子1）特异性抑制剂、细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-FITC/PI双染法）、自噬检测试剂盒（LC3B抗体）、Western Blot相关试剂（蛋白裂解液、蛋白Marker、PVDF膜等）均购自Sigma-Aldrich公司。

流式细胞仪（BD Biosciences）、Western Blot电泳及转膜设备（Bio-Rad）、倒置显微镜（Olympus）、CO2恒温培养箱（Thermo Fisher Scientific）等。

RAW7细胞以每孔1×10^6个细胞的密度接种于6孔板中，待细胞贴壁后，用不同浓度的LPS（100 ng/ml）刺激细胞，同时加入或不加入IRF1特异性抑制剂。

镧抑制脂多糖诱导小鼠巨噬细胞产生一氧化氮的机制的开题报告

镧抑制脂多糖诱导小鼠巨噬细胞产生一氧化氮的机
制的开题报告
题目：镧抑制脂多糖诱导小鼠巨噬细胞产生一氧化氮的机制
背景：
一氧化氮（NO）是由巨噬细胞等免疫细胞产生的一种重要的活性分子。

它在免疫系统中具有重要的作用，如调节免疫细胞的功能、细胞信号传导等。

然而，在炎症反应中，NO的生成过多也会导致伤害和损伤。

脂多糖（LPS）是引起炎症反应的重要因素，而抑制LPS诱导NO的生成可能有助于治疗炎症疾病。

近年来，镧被发现具有抑制LPS诱导巨噬细胞产生NO的作用，但其具体机制尚不明确。

问题：
1. 镧能否抑制LPS诱导小鼠巨噬细胞产生NO？
2. 镧抑制LPS诱导NO产生的机制是什么？
方法：
1. 体外实验：采用RAW264.7小鼠巨噬细胞作为实验对象，使用不同浓度的镧进行预处理，再添加LPS来诱导NO的产生。

利用Griess试剂检测细胞培养液中NO的含量。

2. 细胞信号通路检测：使用Western blot技术检测镧处理后的RAW264.7细胞中相关信号通路的蛋白表达、磷酸化水平等的变化。

预期结果：
1. 镧能够抑制LPS诱导小鼠巨噬细胞产生NO，且有明显的剂量依赖性。

2. 镧抑制LPS诱导NO产生的机制可能与下游信号通路、转录因子以及氧化应激途径等相关。

意义：
本研究可以进一步探究镧的免疫调节机制，为免疫疾病的防治提供新思路和新方法。

同时，还有助于深入了解LPS诱导炎症反应的机制。

芹菜素药理作用的研究进展

芹菜素药理作用的研究进展
王海娣;刘艾林;杜冠华
【期刊名称】《中国新药杂志》
【年(卷),期】2008(17)18
【摘要】芹菜素是一种常见的黄酮类化合物,具有广泛的药理作用.体外及动物实验研究发现芹菜素对多种肿瘤具有预防、治疗或化疗增敏作用;对多种原因导致的骨、前列腺、肝脏、眼等组织、器官的病变具有防护作用,对中枢神经系统病变亦具有
一定的预防作用;对雌性和雄性大鼠的生殖系统的内分泌功能具有明显影响;芹菜素
还具有抗菌、抗病毒、抗过敏、抗氧化、防护辐射损伤及调节分化等作用.文中总
结了近3年来芹菜素在药理学方面的研究进展,对进一步开发芹菜素具有指导意义.【总页数】5页(P1561-1565)
【作者】王海娣;刘艾林;杜冠华
【作者单位】中国医学科学院北京协和医学院药物研究所国家药物筛选中心,北京,100050;中国医学科学院北京协和医学院药物研究所国家药物筛选中心,北
京,100050;中国医学科学院北京协和医学院药物研究所国家药物筛选中心,北
京,100050
【正文语种】中文
【中图分类】R282.71
【相关文献】
1.芹菜素药理作用的研究进展* [J], 郭霜;张晚霞;余薇;
2.芹菜素药理作用的研究进展 [J], 郭霜;张晚霞;余薇
3.芹菜素治疗2型糖尿病及其并发症的研究进展 [J], 张纯萍
4.芹菜素药理作用的研究进展 [J], 付海洋;姜良勇;齐亚军;姚宜山;周奎臣
5.芹菜素联合其它药物在疾病治疗中药理作用及机制的研究进展 [J], 卢慧颖;王天阳;王浩泽;周婕
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219415332_芹菜素对小鼠RAW264.7_巨噬细胞极化和炎症反应的作用及其机制

第 49 卷第 3 期2023年 5 月吉林大学学报（医学版）Journal of Jilin University（Medicine Edition）Vol.49 No.3May 2023DOI：10.13481/j.1671‑587X.20230301芹菜素对小鼠RAW264.7巨噬细胞极化和炎症反应的作用及其机制李海涛, 李沁, 蔡飞, 胡国富, 滕云飞（华中科技大学同济医学院附属协和医院血管外科，湖北武汉430000）［摘要］目的目的：探讨不同浓度芹菜素（API）对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7炎症反应和极化的作用，并阐明其可能机制。

方法：将RAW264.7细胞分为RAW264.7组（不做任何处理）和RAW264.7+API组（2、4、8、16 和32 μmol·L－1 API）。

药物处理细胞24 h后，CCK-8法检测各组细胞增殖率，选取API实验浓度。

将RAW264.7细胞分为RAW264.7组（正常RAW264.7细胞）、RAW264.7+ox-LDL组（0.08 g·L－1 ox-LDL诱导24 h）、RAW264.7+ox-LDL+低剂量API组（2 μmol·L－1 API和0.08 g·L－1 ox-LDL诱导24 h）和RAW264.7+ox-LDL+高剂量API组（8 μmol·L－1 API和0.08 g·L－1 ox-LDL诱导24 h），药物处理细胞24 h，采用油红O染色观察各组RAW264.7细胞中泡沫细胞形态表现，酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测各组细胞培养上清液中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素4（IL-4）和白细胞介素10（IL-10）水平，Western blotting法检测各组细胞中核转录因子κB （NF-κB）p65、磷酸化NF-κB（p-NF-κB）p65、诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）、信号转导与转录激活因子6（STAT6）、磷酸化STAT6（p-STAT6）和精氨酸酶1（Arg-1）蛋白表达水平。

芹菜素的研究进展

第４期２０１５年２月
江苏科技信息
ＪｉａｎｇｓｕＳｃｉｅｎｃｅ＆ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＩｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ
Ｎｏ．４Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２０１５
芹菜素的研究进展
黄佳颖，杨悦，李玉荣，王星
素结构式中ｃ４ ’ 、ｃ５和ｃ７上的３个羟基以及ｃ２、ｃ３之间的双键决定了其独特的药理学效应和生物学活性＿１］。图１芹菜素结构中因含有酚环而具有一定酸性，能与碱中和，还能与浓硫酸、盐酸作用生成盐。分子式为ｃ。Ｈ００，分子量约为２７０．２５，熔点３４５ ℃一３５０￣Ｃ。芹菜素纯品呈浅黄或黄绿色，其溶解度因
ＳＨＲ大鼠的降血压作用与其增强ＡＣＥ２ｍＲＮＡ的表达有关。
Ｈｏ
３抗氧化作用
芹菜素可通过直接作用或螯合作用有效清除脂质过氧化
物、自由基正离子和超氧阴离子等 … ，从而抑制这些自由基引
ｏＨｏ
起的ＤＮＡ、低密度脂蛋白（ＬＤＬ）等的氧化损伤。ＬｉｎＥ。等研究表
图１芹菜素的化学结构
显著抑制脂多糖（ＬＰｓ）引起的巨噬细胞ｉＮＯＳ的过度表达，从而显著降低细胞内ＮＯ含量。另外，环氧化酶（ｃｏｘ）在炎症因
子ＰＧ的合成途径中起关键作用，芹菜素能够抑制ＬＰＳ诱导的巨噬细胞ＣＯＸ一２的表达，由此减少ＰＧ的生成［。阚伟娟等