DMEM培养基配制方法
培养基配方
一、哺乳动物培养基1、DMEM培养基DMEM培养基低糖(干粉) D2902 10X1L 含L-谷氨酰胺和1000 mg/L的葡萄糖。
不含酚红和和碳酸氢钠。
50L每升培养基含10.0g干粉。
配制时每升加3.7g碳酸氢钠。
DMEM培养基低糖（干粉）D5523 10×1L 含L-谷氨酰胺和1000 mg/L葡萄糖，不含碳酸氢钠。
2×5L每升培养基含10.0g干粉。
配制时每升加3.7g碳酸氢钠。
5L50L DMEM培养基低糖（干粉）D5030 10×1L 不含L-谷氨酰胺，葡萄糖，酚红，丙酮酸钠和碳酸氢钠。
10L每升培养基含8.3g干粉。
配制时每升加1.0g葡萄糖，0.584g 50LL-谷氨酰胺和3.7g碳酸氢钠。
DMEM培养基低糖（干粉）D5280 10×1L 可以高压消毒。
10L含1000 mg/L的葡萄糖。
不含L-谷氨酰胺和碳酸氢钠。
50L每升培养基含9.6g干粉。
配制时每升加0.584g L-谷氨酰胺和3.7g碳酸氢钠。
DMEM培养基低糖（液体）D5546 500ML 含有1000 mg/L葡萄糖和碳酸氢钠，不含L-谷氨酰胺。
用盐6×500ML 酸维生素B6代替盐酸吡哆醛。
使用前每升加入0.584g L-谷氨酰胺。
24×500ML1L6×1L DMEM培养基低糖（液体）D5921 100ML 含有1000 mg/L葡萄糖和碳酸氢钠，不含L-谷氨酰胺和酚红。
500ML用盐酸维生素B6代替盐酸吡哆醛。
使用前每升加入0.584g L-谷氨酰胺。
6×500MLDMEM培养基低糖（液体）D6046 100ML 含有1000 mg/L葡萄糖，L-谷氨酰胺和碳酸氢钠。
用盐酸维500ML 生素B6代替盐酸吡哆醛。
6×500ML1LDMEM培养基低糖（液体）D2429 100ML 1×的培养基含有1000 mg/L的葡萄糖。
DMEM培养基配制方法
DMEM培养基配制方法DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）是一种常用的细胞培养基，广泛应用于细胞培养、病毒繁殖和实验室研究中。
DMEM培养基含有多种必需和非必需氨基酸、糖类、维生素和盐类成分，提供了生长细胞所需的营养和环境。
以下是DMEM培养基的配制方法。
配制DMEM培养基的主要成分包括基础培养基、补充物和pH调节剂。
基础培养基：1.准备适量的无菌去离子水，用于稀释和配制DMEM培养基。
补充物：1.氨基酸：将提供的无菌氨基酸液中的每种氨基酸均匀混合，制得氨基酸混合液。
如有需要，可以根据实验需求添加特定的氨基酸。
2.糖类：将葡萄糖溶液与无菌去离子水混合，配制成葡萄糖溶液。
3.维生素：将提供的无菌维生素溶液与去离子水混合，制得维生素溶液。
4.盐类：将提供的无菌盐溶液与去离子水混合，制得盐溶液。
pH调节剂：1. 英文名Tris（Tris(hydroxymethyl)aminomethane）：是一种常用的pH缓冲剂。
取适量的Tris溶液。
2. 英文名Sodium bicarbonate：是一种重要的pH调节剂，可提供细胞培养中所需的碱性环境。
取适量的Sodium bicarbonate溶液。
先准备好所需的试剂和仪器，并保证它们是无菌的。
配制过程如下：1.取适量的基础培养基（DMEM），移至无菌培养瓶中。
2.依次向DMEM基础培养基中加入补充物。
首先加入氨基酸混合液，根据提供的比例将其加入培养基中，充分混合。
然后加入葡萄糖溶液、维生素溶液和盐溶液，依次混合均匀。
3. 加入适量的Tris溶液，用于调节pH值。
根据实验需求和DMEM配方，逐渐加入Tris溶液，同时用pH计测量pH值，直到达到所需的pH范围（通常为7.2-7.4）。
4. 加入适量的无菌Sodium bicarbonate溶液，用于调节和维持培养基的碱性环境。
根据实验需求和DMEM配方，逐渐加入Sodium bicarbonate溶液，充分混合。
DMEM低糖培养基说明书
深圳市达科为生物工程有限公司地址：深圳市坪山区坑梓街道金辉路14号深圳市生物医药创新产业园区1号楼702、703邮编：518122Tel**************Web:E-mail:*************DMEM低糖培养基说明书Cat#：6016111产品描述：Dulbecco′s Modified Eagle′s Medium (DMEM)是一种改进的Eagle基础细胞培养基(BME)，含有四倍浓度的氨基酸和维生素。
本品为低糖型（1000mg/L），支持多种哺乳动物细胞的培养，包括原代成纤维细胞、神经元、胶质细胞、HUVECs和平滑肌细胞，以及HeLa、293、Cos-7和PC-12等细胞系。
本产品是GMP级别的培养基，不含动物成分，培养细胞时需额外添加胎牛血清等培养添加物。
包装规格：货号名称规格6016111DMEM低糖培养基含酚红，碳酸氢钠，L-谷氨酰胺和丙酮酸钠500mL产品信息：预期用途：采用无菌工艺生产该培养基，可用于进一步的制造用途。
本产品不适用于人体、诊断或治疗用途。
保存方法：2℃~8℃，避光保存，保质期12个月。
注意：本品避免反复冻融，使用时注意无菌操作。
产品配方：完整成分清单mg/L氨基酸Glycine30L-Arginine•HCl 84L-Cystine•2HCl 63L-Glutamine584L-Histidine•HCl•H 2O 42L-Isoleucine 105L-Leucine 105L-Lysine•HCl 146L-Methionine 30L-Phenylalanine 66L-Serine 42L-Threonine 95L-Tryptophan16L-Tyrosine•2Na•2H 2O 104L-Valine 94维生素Choline chloride 4Folic Acid 4myo-Inositol 7.2Niacinamide4D-Pantothenic Acid•1/2Ca 4Pyridoxal•HCl 4Riboflavin 0.4Thiamine•HCl 4无机盐CaCl2200Fe(NO 3)3•9H 2O 0.1MgSO 497.67KCl400NaHCO 33700NaCl6400NaH 2PO 4109其它D-Glucose1000Phenol Red•Na 15Sodium Pyruvate110相关产品：货号名称规格6016011RPMI-1640培养基500mL 6016211α-MEM培养基500mL 6016311IMDM培养基500mL 6021021胎牛血清（南美）500mL 6021031胎牛血清（新西兰）500mLREV:C/2。
常用细胞培养基配方及缓冲液
常用细胞培养基配方及缓冲液细胞培养基是为了在体外维持细胞生长和增殖所设计的一种营养液。
细胞培养基的配方要求提供细胞所需的基本营养物质，如氨基酸、糖类、维生素和激素，并提供适当的pH和离子平衡。
同时，缓冲液也是细胞培养过程中不可或缺的一部分，用于稳定细胞培养基的pH，维持细胞正常的生长环境。
下面列举几种常用的细胞培养基配方及缓冲液：1. DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium)-细胞培养基配方：-DMEM培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液：无2. RPMI 1640 Medium (Roswell Park Memorial Institute Medium) -细胞培养基配方：-RPMI1640培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液：HEPES(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸)溶液，浓度为25mM，用于稳定pH。
3. MEM (Minimum Essential Medium)-细胞培养基配方：-MEM培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)- 缓冲液：盐酸/NaOH缓冲体系，通常用NaHCO3/N-2-羟乙基piperazine-N'-2-乙磺酸(HEPES)缓冲。
4. Hank's Balanced Salt Solution (HBSS)-细胞培养基配方：-HBSS培养基粉末-对应体积的无菌水-缓冲液：无5. L-15 Medium (Leibovitz's L-15 Medium)-细胞培养基配方：-L-15培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-缓冲液：HEPES溶液，浓度为25mM。
6. DMEM/F12 Medium (Dulbecco's Modified Eagle Medium and Ham's F-12 Medium)-细胞培养基配方：-DMEM/F12培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液：HEPES溶液，浓度为25mM。
DMEM培养基配方
DMEM培养基配方DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）是一种常用的细胞培养基，广泛用于体外细胞培养和研究。
下面是一种常见DMEM培养基的配方，以及其组成成分和原理解析。
1.DMEM基础培养基：-DMEM混合物：420mL-热灭菌的双蒸馏水：500mL2.补充物：-胎牛血清（FBS）：100mL-青霉素和链霉素：1mL-10%海马酸溶液：5mL配方的组成成分和原理解析：1.DMEM基础培养基：DMEM是Eagle培养基的一种改良版，其中包含了额外的氨基酸、维生素和无机盐。
DMEM是无血清培养基，不含胎牛血清，可减少实验结果受到外界因素的影响。
2.热灭菌的双蒸馏水：双蒸馏水是通过蒸馏过程去除水中的杂质和微生物，保证细胞培养过程中的无菌状态。
3.胎牛血清（FBS）：胎牛血清是培养细胞所必需的重要补充物，其中含有许多生长因子、激素和蛋白质，可以提供细胞所需的养分。
4.青霉素和链霉素：青霉素和链霉素是两种广谱抗生素，用于预防和控制细胞培养中的细菌污染。
5.10%海马酸溶液：海马酸（L-glutamine）是一种重要的氨基酸，对细胞的生长和分裂非常关键。
10%的海马酸溶液用于提供细胞所需的L-谷氨酰胺。
补充物中的FBS用于提供细胞所需的生长因子、激素和蛋白质。
青霉素和链霉素的加入可以预防细菌感染，确保细胞培养的纯度和健康度。
海马酸溶液则提供细胞所需的L-谷氨酰胺，促进细胞的生长和分裂。
总结：DMEM培养基是一种常用的细胞培养基，配方中包含基础培养基、水和补充物。
基础培养基提供细胞所需的基本成分，而补充物则提供细胞所需的生长因子、抗生素和氨基酸。
这种培养基的配方可以为细胞提供稳定的生存环境，促进细胞的生长和分裂。
DMEM培养基
DMEM培养基DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基，是在MEM培养基的基础上研制的。
分为高糖型（低于4500mg/L）和低糖型(低于1000mg/L)。
高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长，适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。
基本简介DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基，是在MEM培养基的基础上研制的。
与MEM比较增加了各种成分用量，同时又分为高糖型（低于4500mg/L）和低糖型(低于1000mg/L)。
高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长，适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。
主要特点（1）氨基酸含量为依格尔培养基的2倍，且含有非必需氨基酸，如甘氨酸等；（2）维生素含量为依格尔培养基的4倍；（3）含有糖酵解途径中的重要物质——丙酮酸；（4）含有微量的铁离子。
主要成分DMEM(A)细胞培养基（粉末型）成分序号1234567891011121314化合物名称无水氯化钙.2H2O硝酸铁.9H2O氯化钾无水硫酸镁氯化钠无水磷酸二氢钠丁二酸丁二酸钠L-盐酸精氨酸L-盐酸胱氨酸甘氨酸L-盐酸组氨酸L-异亮氨酸L-亮氨酸含量(mg/L)265.000.10400.0097.676400.00109.0075.00100.0084.0063.0030. 0042.00105.00105.00序号1819202122232425262728293031化合物名称L-丝氨酸L-苏氨酸L-色氨酸L-酪氨酸L-缬氨酸D-泛酸钙酒石酸胆碱叶酸肌醇烟酰胺核黄素盐酸硫胺盐酸吡哆辛葡萄糖含量(mg/L)42.0095.0016.0072.0094.004.007.204.007.204.000.404.004.001 000.00151617L-盐酸赖氨酸L-甲硫氨酸L-苯丙氨酸146.0030.0066.003233丙酮酸钠酚红110.009.30.00相关应用该类培养基广泛应用于疫苗生产和各种初代病毒宿主细胞的细胞培养及单一细胞培养;如A9、3T6、BALB/3T3、COS-1、COS-3、COS-7、L6、WEHI-3b等细胞系的培养。
DMEM培养基配制方法
自行配制DMEM的方法及说明书这里是一份GIBCO的低糖DMEM粉剂配制说明（普通高糖的DMEM培养基配法是一样的）：TO PREPARE 1*LIQUID1. Measrue out 5% less distilled water than desired total volume of medium using a mixing container that is as close to the final volume as possible.2. Add powdered medium to 15 to 30℃(room temperature)water with gentle stirring. (Do not heat water)3. Rinse out inside of package to remove all traces of powder.4. Add 3.7g of NaHCO3 per liter of medium.5. Dilute to a desired volume with water. Stir until dissolved. (Do not over-mix)6. Adjust pH of medium to 0.2-0.3 below desired final working pH* use of IN NaOH or IN HCl is recommended. (Add slowly with stirring) After pH has been adjusted keep container closed until medium is filtered.7. Sterilize immediately by membrane filtration. (Positive pressure recommended) *pH unite will usually rise 0.1-0.3upon filtration.另外，在李玲、李雪峰编著的《细胞生物学实验》中配制方法如下：1 制备新鲜三蒸水或Millipore超纯水。
DMEM培养基配制方法
DMEM培养基配制方法DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）是一种被广泛应用于细胞培养的营养培养基，适用于多种细胞类型的培养。
在使用DMEM培养基前，需要配制和调整培养基的组成，下面将详细介绍DMEM培养基的配制方法。
配制DMEM培养基的材料有：1.DMEM粉末：可从实验室供应商处购买。
2.无菌蒸馏水：用于稀释粉末和混合培养基。
3.黄体酮或胰岛素：这些添加剂用于特殊培养条件下的细胞培养。
4.无菌过滤器：用于过滤培养基以去除微生物污染。
下面是DMEM培养基的配制步骤：1.消毒实验台和培养物。
在开始培养基的配制之前，确保实验台和培养器具已经进行了有效的消毒。
这可以通过使用70%乙醇或其他消毒剂来实现。
此外，需要对培养物进行表面消毒处理。
2.配置培养基。
将适量的DMEM粉末称量到一个无菌容器中，并加入一定量的蒸馏水。
粉末的添加量根据细胞类型和细胞密度的不同而异，一般建议将DMEM粉末加入到预定体积的80-90％。
例如，如果需要100mL的培养基，可以将80-90g的DMEM粉末加入到约90mL的蒸馏水中。
3.调整pH值。
使用酸或碱类物质（如NaOH或HCl）逐滴调整培养基的pH值，直到达到理想的值。
一般来说，DMEM培养基的pH值在7.2-7.4之间是理想的。
4.筛选和过滤培养基。
将配制好的培养基通过无菌纤维过滤器过滤，以去除可能存在的微生物污染物。
这可以保证培养基的无菌性。
5.存储和标记培养基。
将过滤的培养基分装到无菌的培养基瓶中，并在瓶子上标记培养基的配方、配制日期和其他必要的信息。
将培养基存放在4℃下，避免光照。
请注意，在一些特殊情况下，可能需要向DMEM培养基中添加额外的添加剂，如黄体酮（对于一些动物细胞的培养）或胰岛素（对于一些特殊的细胞系的培养）。
在添加这些添加剂时，应遵循相应的实验室标准操作程序。
总结：DMEM培养基是一种广泛使用的细胞培养基，适用于多种细胞类型的培养。
DMEM 细胞培养基(高糖,无酚红)说明书
仅供科研使用版本号：A版DMEM细胞培养基(高糖,无酚红)说明书【货号】BC-M-029【规格】500mL【保存】2-8℃，12个月。
【产品简介】DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)培养基是一种广泛应用的基础培养基，用于支持多种哺乳动物细胞的生长，包括原代成纤维细胞、神经元、胶质细胞、huvecs和平滑肌细胞，以及细胞系，如hela、293、cos-7和pc-12。
除不完全DMEM培养基（高糖，无酚红）外，我们还提供添加双抗、胎牛血清的DMEM培养基，以供客户不同需要。
本培养基含：4.5g/L葡萄糖、0.584g/L L-谷氨酰胺、丙酮酸钠、碳酸氢钠等。
本培养基不含HEPES，不含酚红。
【使用方法】根据具体实验使用，注意避免微生物污染。
【注意事项】1、注意避免溶液被微生物污染，避免冻融。
2、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
【相关产品】货号产品名称规格保存条件BC-M-001DMEM/F12(with Penicillin-Streptomycin)500ml2-8℃，12个月BC-M-002DMEM/F12500ml2-8℃，12个月BC-M-005DMEM(High Glucose)500ml2-8℃，12个月BC-M-008Ham's F-12K Medium500ml2-8℃，12个月BC-M-011Medium199500ml2-8℃，12个月BC-M-014DMEM(Low Glucose)500ml2-8℃，12个月BC-M-017RPMI1640Medium500ml2-8℃，12个月BC-M-020MEM500ml2-8℃，12个月BC-BPBS-011×PBS(0.01M,pH7.2-7.4)500ml室温，12个月BC-BPBS-0210×PBS(0.1M,pH7.2-7.4)500ml室温，12个月BC-CE-001胰酶细胞消化液(0.05%胰酶，含EDTA，不含酚红)100ml-20℃，12个月BC-CE-002胰酶细胞消化液(0.05%胰酶,含EDTA和酚红)100ml-20℃，12个月100ml-20℃，12个月BC-CE-003胰酶细胞消化液(0.25%胰酶，含EDTA，不含酚红)BC-CE-004胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,不含EDTA和酚红)100ml-20℃，12个月BC-CE-005胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,含酚红100ml-20℃，12个月和EDTA)100ml-20℃，12个月BC-CE-006胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,含酚红,不含EDTA)BC-CE-007青霉素-链霉素溶液(100×)100ml-20℃，12个月。
DMEM培养基
基本简介
DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基，是在MEM培养基的基础上研制的。
与MEM比较增加了各种成分用量，同时又分为高糖型（低于4500mg/L）和低糖型(低于1000mg/L)。
高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长，适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。
主要特点
（1）氨基酸含量为依格尔培养基的2倍，且含有非必需氨基酸，如甘氨酸等；
（2）维生素含量为依格尔培养基的4倍；
（3）含有糖酵解途径中的重要物质——丙酮酸；
（4）含有微量的铁离子。
主要成分
DMEM(A) 细胞培养基（粉末型）成分
相关应用
该类培养基广泛应用于疫苗生产和各种初代病毒宿主细胞的细胞培养及单一细胞培养;如A9、3T6、BALB/3T3、COS-1、COS-3、COS-7、L6、WEHI-3b等细胞系的培养。
DMEM高糖配方培养基
DMEM高糖配方培养基DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）是一种经典的培养基，常用于体外细胞培养和细胞增殖实验中。
DMEM培养基是由Eagle于1959年修改得到的Eagle培养基，后经Dulbecco 于1960年对其进行了进一步的改良，得到了现在的DMEM培养基。
DMEM高糖配方培养基在经典的DMEM培养基基础上，增加了蔗糖和葡萄糖的含量，以提供更多的能量供给细胞生长。
除了蔗糖和葡萄糖，DMEM高糖配方培养基还包含丰富的氨基酸、维生素和盐类。
这些成分能够提供细胞所需的营养物质，维持细胞的正常功能。
其中包括必需氨基酸、非必需氨基酸、维生素B群、维生素C和维生素E等。
此外，DMEM高糖配方培养基还添加了缬氨酸和谷氨酰胺，以促进细胞的增殖。
DMEM高糖配方培养基还含有盐类，包括钙、钾、钠、镁、磷酸盐和其他微量元素。
这些盐类维持细胞的渗透调节、酸碱平衡和神经传导等生理功能。
此外，DMEM高糖配方培养基还含有HEPES缓冲液，调节培养基的pH值，确保细胞在适宜的环境中生长。
DMEM高糖配方培养基还含有胎牛血清（FBS）或胎儿牛血清（FCS），用于增加培养基中的营养成分和细胞生长因子的含量，促进细胞的增殖。
青春期的牛的血液中含有丰富的细胞因子、生长因子和营养物质，对于细胞的生长和增殖有很好的促进作用。
总结起来，DMEM高糖配方培养基是一种富含蔗糖和葡萄糖的培养基，适合于细胞快速增殖和大规模培养的需求。
它提供了细胞所需的能量、营养物质和生长因子，促进细胞的生长和增殖。
DMEM高糖配方培养基在生物医学研究和生物工程领域具有广泛的应用价值。
哺乳动物细胞培养技术
哺乳动物细胞培养技术一、前言哺乳动物细胞培养技术是生物学研究中的重要分支，它可以为生物医学研究提供大量的细胞材料，从而促进了细胞生物学、免疫学、药理学等领域的发展。
本文将介绍哺乳动物细胞培养技术，包括培养基的配制、无菌操作、细胞分离与传代、冷冻保存和复苏等方面。
二、培养基的配制1. 基础培养基哺乳动物细胞培养最常用的基础培养基是DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）和RPMI-1640（Roswell Park Memorial Institute 1640），这两种培养基都是以含有必需氨基酸和维生素的高糖量液体为基础，添加适当浓度的人血清或牛血清作为营养来源。
2. 补充因子除了上述基础成分外，还需要添加多种补充因子，如抗生素（青霉素和链霉素）、重组人胰岛素、转铁蛋白等。
抗生素可以有效地抑制细菌和真菌的生长，保证培养物的无菌性；胰岛素是细胞增殖和分化所必需的营养物质，可以提高培养细胞的存活率和增殖能力；转铁蛋白则可以促进铁离子的转运，保证细胞正常代谢。
3. pH值调节pH值对于细胞生长和代谢具有重要影响，因此需要在培养基中添加缓冲液来调节pH值。
最常用的缓冲液是HEPES（4-（2-羟乙基）-1-哌嗪乙烷磺酸），其pH范围为7.0~8.0。
三、无菌操作无菌操作是哺乳动物细胞培养过程中最为关键的环节之一。
以下是无菌操作需要注意的几个方面：1. 实验室环境实验室环境应该保持清洁、干燥、通风，并且应该经过消毒处理。
实验人员应该穿戴干净、整洁、合适的实验服，并戴上口罩和手套。
2. 器皿消毒所有用于培养细胞的器皿都需要在高压蒸汽灭菌器中进行消毒处理，以杀死其中的所有微生物。
3. 操作流程无菌操作应该按照一定的操作流程进行，包括洗手、穿戴实验服、准备实验器具和培养基、开展操作等步骤。
在操作过程中要注意不要碰触到非无菌区域和非无菌器具。
四、细胞分离与传代1. 细胞分离细胞分离是指将原始细胞群体中的单个细胞分离出来，使其成为一个独立的单元。
DMEM培养基配方
序号
化合物名称
含量(mg/L)
序号
化合物名称
含量(mg/L)
1
无水氯化钙.2H2O
265.00
18
L-丝氨酸
42.00
2
硝酸铁.9H2O
0.10
19
L-苏氨酸
95.00
3
氯化钾
400.00
20
L-色氨酸
16.00
4
无水硫酸镁
97.67
21
L-酪氨酸
72.00
5
氯化钠
6400.00
22
含量(mg/L)
1
无水氯化钙
200.00
17
L-丝氨酸
42.00
2
硝酸铁.9H2O
0.10
18
L-苏氨酸
95.00
3
氯化钾
400.00
19
L-色氨酸
16.00
4
无水硫酸镁
97.67
20
L-酪氨酸钠盐
104.00
5
氯化钠
6400.00
21
L-缬氨酸
94.00
6
无水磷酸二氢钠
125.00
22
D-泛酸钙
4.00
29
盐酸硫胺
4.00
13
L-异亮氨酸
105.00
30
盐酸吡哆辛
4.00
14
L-亮氨酸
105.00
31
葡萄糖
1000.00
15
L-盐酸赖氨酸
146.00
32
丙酮酸钠
.00
33
酚红
17
L-苯丙氨酸
DMEM培养基配方
DMEM培养基配方DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）是一种常用的培养基，常用于细胞培养和病毒培养中。
该培养基是由Eagle在1961年发展而来的，并在之后被Dulbecco所改进，增加了可以用于细胞培养的组分。
DMEM培养基具有良好的细胞生长和维持能力，适用于多种细胞系的培养。
以下是DMEM培养基的标准配方：成分（每1升DMEM培养基）：-无菌去离子水1000mL- 葡萄糖（D-葡萄糖） 1000 mg- L-谷氨酰胺 584 mg-青霉素/链霉素100单元/mL-菌脂体抗生素混合物（氰胺苯胂和核黄素酮）10mL-青霉素/链霉素抗生性混合物10mL- 乳酸 660 mg- 杂酸钠 200 mg- 高氨基酸（L-谷氨酸，L-赖氨酸，L-Leu，L-异亮氨酸，L-Lys，L-Met，L-Phe，L-Thr，L-Trp，L-Arg，L-His，L-Ile，L-Val） 2 mL - L-胱氨酸 4 mg- 胖利钠 392 mg-维生素溶液（1X）10mL-必需氨基酸溶液10mL-非必需氨基酸10mL-小牛血清10%各组分的详细介绍如下：1.无菌去离子水：用于稀释和制备培养基，确保培养基的无菌。
4.青霉素/链霉素：抗菌药物，避免培养基中细菌的污染，浓度为100单元/mL。
5.菌脂体抗生素混合物：混合了氰胺苯胂和核黄素酮，提供对细菌和真菌的广谱抗生素覆盖。
6.青霉素/链霉素抗生素性混合物：对细菌的广谱抗生素覆盖。
7.乳酸：调节培养基的酸碱平衡，以维持适宜的细胞生长环境。
8.杂酸钠：提供缓冲剂，维持培养基的pH值稳定。
9.高氨基酸：添加了多种必需氨基酸，为细胞提供生长所需的氨基酸。
10.L-胱氨酸：提供了硫含量丰富的氨基酸，对细胞代谢和抗氧化有重要作用。
11. 填充无机盐 392 mg：提供一些无机盐，维持细胞代谢所需的电解质平衡。
12.维生素溶液（1X）：提供维生素，满足细胞生长过程中的营养需求。
培养基配制与使用记录
培养基配制与使用记录一、引言培养基是细胞培养的基础，它提供了细胞生长所需的养分和环境，对细胞培养的成功与否起着关键的作用。
培养基的配制与使用记录对于保证实验结果的准确性和稳定性非常重要。
本文将介绍培养基配制和使用记录的基本原则与注意事项，以及一份示例配制与使用记录。
二、培养基配制的基本原则与注意事项1.培养基成分的选择培养基的成分主要包括碳源、氮源、无机盐等。
选择合适的成分是培养基配制成功的关键。
一般来说，培养基的配方可以参考已经发表的文献或者专利，也可以根据自己的研究需要进行调整和改良。
2.培养基的配制培养基的配制需要按照一定的比例将不同的成分溶解在适当的溶液中。
其中，一些成分需要在高温或者高压下溶解，注意安全操作。
此外，配制过程中需要注意培养基成分的顺序和混合均匀度，以确保最终的培养基质量。
3.培养基的储存和保存4.培养基的使用记录使用记录是培养基配制与使用过程中的一项重要工作，它可以帮助实验室人员掌握各个步骤的详细信息，方便日后查阅和复现实验结果。
三、培养基配制和使用记录的示例下面是一份示例的培养基配制和使用记录，供参考：培养基名称：DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）配方：-DMEM粉末：10g-葡萄糖：4.5g-高血压磷酸盐缓冲液：4.77g-HEPES缓冲液：2.38g-Ｌ-谷氨酸：0.584g-雌二酚Ａ：0.03g-青霉素-链霉素：1%溶液：1毫升-酵母提取物：1毫升-胎牛血清：10%配制方法：1.在无菌的条件下，将DMEM粉末加入适量的去离子水中，并搅拌均匀溶解。
2.依次加入葡萄糖、高血压磷酸盐缓冲液、HEPES缓冲液和Ｌ-谷氨酸，每次加入后用搅拌器搅拌均匀。
3.加入雌二酚Ａ、青霉素-链霉素溶液和酵母提取物，再次搅拌均匀。
4.最后加入胎牛血清并搅拌均匀。
使用记录：-配制日期：2024年1月1日-配制人员：张三-储存条件：4℃冰箱，密封保存-有效期：3个月将培养基用于细胞培养的过程中，可以记录以下信息：1.使用日期和时间；2.培养基浓度；3.培养基的前处理（如加热、滤过等）；4.细胞的种类和数量；5.培养皿或培养瓶的数量和规格；6.培养的温度、湿度和CO2浓度；7.培养时间和观察结果等。
上海新型细胞冻存液配制步骤
上海新型细胞冻存液配制步骤
以下是上海新型细胞冻存液配制步骤：
材料：
- DMEM培养基
- 人血清（10%）
- 细胞冻存液（DMSO）
- 细胞
步骤：
1. 将DMEM培养基室温下预热至37°C，并确保消毒。
2. 加入10%的人血清，混合均匀。
3. 按照1:1比例将细胞冻存液（DMSO）加入到培养基中，并
充分混合。
4. 用无菌吸管将细胞收集到离心管中。
5. 加入适量的冻存液至细胞中，使其与细胞混合均匀。
6. 冷却离心管至4°C并放置45分钟至1小时使细胞逐渐适应
冷却条件。
7. 将离心管置于-80°C的冰箱中进行冷冻，随后可转移到液氮
中冷冻保存。
注意事项：
1. 所有实验室操作必须在无菌环境下进行。
2. 细胞应在首次培养后冻存，以备日后实验需要。
3. 加入到细胞中的冻存液不超过10％，以减轻冻存液对细胞
的毒性作用。
4. 冷却离心管时不要使其冰冻，以防冰冻过程对细胞造成伤害。
5. 在液氮中冻存时，需要使用专门的液氮罐，并将离心管完全浸泡在液氮中。
高糖培养基
高糖培养基引言培养基是一种给养物种或细胞提供营养和环境的物质。
在细胞培养的过程中，培养基的选择十分重要，因为不同类型的细胞需要不同的培养基来满足其生长和繁殖的需求。
其中，高糖培养基是一种特殊的培养基，其含有高浓度的糖类物质。
本文将对高糖培养基的组成、制备方法以及应用进行详细的介绍和讨论。
组成高糖培养基的组成主要包括以下几个方面：1.基础培养基：高糖培养基通常以带有高浓度糖类的基础培养基为基础，如DMEM（Dulbecco’s Modified Eagle Medium）、RPMI（Roswell ParkMemorial Institute）、MEM（Minimum Essential Medium）等。
这些基础培养基中含有丰富的营养物质、氨基酸和维生素，可以为细胞提供生长所必需的营养物质。
2.高浓度糖类：高糖培养基中的糖类物质通常选择葡萄糖作为主要成分。
葡萄糖的浓度通常在4.5-25g/L之间，视具体实验要求而定。
高浓度的糖类物质可以提供细胞所需的能量，促进细胞的生长和繁殖。
3.补充物质：为了满足细胞特定的生长需求，高糖培养基中还可以添加一些补充物质，如血清、抗生素、植物源蛋白等。
制备方法高糖培养基的制备方法相对简单，具体步骤如下：1.取出适量的基础培养基。
根据实验要求和需要，选择合适的基础培养基。
2.添加高浓度的糖类物质。
将事先称好的葡萄糖加入到基础培养基中，根据所需的浓度加入适量的葡萄糖。
3.搅拌均匀。
使用磁力搅拌器将培养基搅拌均匀，确保糖类物质和基础培养基充分混合。
4.调整pH值。
根据基础培养基的要求，使用酸碱溶液或缓冲液调整培养基的pH值，通常保持在7.2-7.4之间。
5.过滤消毒。
将制备好的高糖培养基通过0.22μm的滤器进行消毒，以去除潜在的污染物和细菌。
应用高糖培养基在细胞生物学研究中有着广泛的应用，主要包括以下几个方面：•细胞的生长和繁殖：高糖培养基中丰富的营养物质和能量可以促进细胞的生长和繁殖。