DMEM培养基配制方法
DMEM培养基配制方法
自行配制DMEM的方法及说明书之蔡仲巾千创作
这里是一份GIBCO的低糖DMEM粉剂配制说明（普通高糖的DMEM培养基配法是一样的）： TO PREPARE 1*LIQUID
1. Measrue out 5% less distilled water than desired total volume of medium using a mixing container that is as close to the final volume as possible.
2. Add powdered m edium to 15 to 30℃ (room temperature)water with gentle stirring. (Do not heat water)
3. Rinse out inside of package to remove all traces of powder.
4. Add 3.7g of NaHCO3 per liter of medium.
5. Dilute to a desired volume with water. Stir until dissolved. (Do not over-mix)
6. Adjust pH of medium to 0.2-0.3 below desired final working pH* use of IN NaOH or IN HCl is recommended. (Add slowly with stirring) After pH has been adjusted keep container closed until medium is filtered.
DMEM培养基配制方法
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自行配制DMEM的方法及说明书
这里是一份GIBCO的低糖DMEM粉剂配制说明（普通高糖的DMEM培养基配法是一样的）： TO PREPARE 1*LIQUID
1. Measrue out 5% less distilled water than desired total volume of medium using a mixing container that is as close to the final volume as possible.
2. Add powdered medium to 15 to 30℃ (room temperature)water with gentle stirring. (Do not heat water)
3. Rinse out inside of package to remove all traces of powder.
4. Add 3.7g of NaHCO3 per liter of medium.
5. Dilute to a desired volume with water. Stir until dissolved. (Do not over-mix)
6. Adjust pH of medium to below desired final working pH* use of IN NaOH or IN HCl is recommended. (Add slowly with stirring) After pH has been adjusted keep container closed until medium is filtered.
DMEM培养基配制方法
自行配制DMEM的办法及说明书之老阳三干创作
这里是一份GIBCO的低糖DMEM粉剂配制说明（普通高糖的DMEM培养基配法是一样的）： TO PREPARE 1*LIQUID
1. Measrue out 5% less distilled water than desired total volume of medium using a mixing container that is as close to the final volume as possible.
2. Add powdered medium to 15 to 30℃ (room temperature)water with gentle stirring. (Do not heat water)
3. Rinse out inside of package to remove all traces of powder.
4. Add 3.7g of NaHCO3 per liter of medium.
5. Dilute to a desired volume with water. Stir until dissolved. (Do not over-mix)
6. Adjust pH of medium to 0.2-0.3 below desired final working pH* use of IN NaOH or IN HCl is recommended. (Add slowly with stirring) After pH has been adjusted keep container closed until medium is filtered.
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自行配制DMEM的方法及说明书
这里是一份GIBCO的低糖DMEM粉剂配制说明（普通高糖的DMEM培养基配法是一样的）： TO PREPARE 1*LIQUID
1. Measrue out 5% less distilled water than desired total volume of medium using a mixing container that is as close to the final volume as possible.
2. Add powdered medium to 15 to 30℃ (room temperature)water with gentle stirring. (Do not heat water)
3. Rinse out inside of package to remove all traces of powder.
4. Add 3.7g of NaHCO3 per liter of medium.
5. Dilute to a desired volume with water. Stir until dissolved. (Do not over-mix)
6. Adjust pH of medium to below desired final working pH* use of IN NaOH or IN HCl is recommended. (Add slowly with stirring) After pH has been adjusted keep container closed until medium is filtered.
DMEM培养基配制方法
DMEM培养基配制方法
DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）是一种常用的细胞培养基，广泛应用于细胞培养、病毒繁殖和实验室研究中。DMEM培养基含有多种必需和非必需氨基酸、糖类、维生素和盐类成分，提供了生长细胞所需的营养和环境。以下是DMEM培养基的配制方法。
配制DMEM培养基的主要成分包括基础培养基、补充物和pH调节剂。基础培养基：
1.准备适量的无菌去离子水，用于稀释和配制DMEM培养基。
补充物：
1.氨基酸：将提供的无菌氨基酸液中的每种氨基酸均匀混合，制得氨基酸混合液。如有需要，可以根据实验需求添加特定的氨基酸。
2.糖类：将葡萄糖溶液与无菌去离子水混合，配制成葡萄糖溶液。
3.维生素：将提供的无菌维生素溶液与去离子水混合，制得维生素溶液。
4.盐类：将提供的无菌盐溶液与去离子水混合，制得盐溶液。
pH调节剂：
1. 英文名Tris（Tris(hydroxymethyl)aminomethane）：是一种常用的pH缓冲剂。取适量的Tris溶液。
2. 英文名Sodium bicarbonate：是一种重要的pH调节剂，可提供细胞培养中所需的碱性环境。取适量的Sodium bicarbonate溶液。
先准备好所需的试剂和仪器，并保证它们是无菌的。
配制过程如下：
1.取适量的基础培养基（DMEM），移至无菌培养瓶中。
2.依次向DMEM基础培养基中加入补充物。首先加入氨基酸混合液，根据提供的比例将其加入培养基中，充分混合。然后加入葡萄糖溶液、维生素溶液和盐溶液，依次混合均匀。
各种培养液的配方
各种培养液的配方
不同的细胞类型和培养目的需要使用不同的培养液。下面列举一些常
见的细胞培养液配方及其用途。
1.DMEM培养液：
DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）是一种最常用的细胞
培养基，适用于多种哺乳动物细胞的培养。以下是DMEM培养液的配方：-1×DMEM：将DMEM粉末加入去离子水中，调整pH至7.2-7.4，用
0.22μm过滤器过滤灭菌。
-10%胎牛血清（FBS）：将FBS加入1×DMEM中，使最终浓度为10%。
-1%抗生素/抗菌素：将1%抗生素/抗菌素（如青霉素/链霉素）加入
1×DMEM中，使最终浓度为1%。
2.RPMI1640培养液：
RPMI1640是一种适用于淋巴细胞和白血病细胞的培养基。以下是
RPMI1640培养液的配方：
-1×RPMI1640：将RPMI1640粉末加入去离子水中，调整pH至7.2-
7.4，用0.22μm过滤器过滤灭菌。
-10%FBS：将FBS加入1×RPMI1640中，使最终浓度为10%。
-1%抗生素/抗菌素：将1%抗生素/抗菌素加入1×RPMI1640中，使最
终浓度为1%。
- 2-mercaptoethanol：将2-mercaptoethanol加入1×RPMI 1640中，使最终浓度为0.05mM。
3.MEM培养液：
MEM（Minimum Essential Medium）是一种用于哺乳动物细胞培养的基础培养液。以下是MEM培养液的配方：
-1×MEM：将MEM粉末加入去离子水中，调整pH至7.2-7.4，用
培养基配方及配制方法
培养基配方及配制方法
培养基是一种用于寄养和培养细胞、微生物、组织等生物体的基质。
其配方的选择和配制方法对于不同的生物体和研究目的有很大的差异。以
下是一般常用的培养基配方及简单的配制方法：
1. LB培养基（Luria-Bertani）
LB培养基是常见的用于大肠杆菌等细菌的培养基，其配方包括：
- 1% 蛋白胨（tryptone）: 添加营养源和能量
- 0.5% 酵母粉（yeast extract）: 提供维生素和生长因子
-1%NaCl（氯化钠）:调节渗透压
-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积
配制方法：将蛋白胨、酵母粉和NaCl加入蒸馏水中，调整pH至7.0，将混合液体加热至溶解，过滤杂质，如需固化则加入1.5%的琼脂。
2. YPD培养基（Yeast extract-Peptone-Dextrose）
YPD培养基常用于酵母菌的培养，其配方包括：
- 1% 酵母提取物（yeast extract）: 提供维生素和生长因子
- 2% 蛋白胨（peptone）: 为细菌提供碳源和能量
- 2% 葡萄糖（dextrose）: 为细菌提供碳源和能量
-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积
配制方法：将酵母提取物、蛋白胨和葡萄糖加入蒸馏水中，调整pH
至7.0，将混合液体加热至溶解，过滤杂质，如需固化则加入2%的琼脂。
3. DMEM培养基（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）
DMEM培养基是常用的哺乳动物细胞培养基，其配方包括：
-10%胎牛血清（FBS）:提供生长因子和营养物质
- 1% 青霉素-链霉素溶液（Penicillin-Streptomycin Solution）: 防止细菌污染
DMEM培养基配制方法
自行配制DMEM的方法及说明书
这里是一份GIBCO的低糖DMEM粉剂配制说明（普通高糖的DMEM培养基配法是一样的）：TO PREPARE 1*LIQUID
1. Measrue out 5% less distilled water than desired total volume of medium using a mixing container that is as close to the final volume as possible.
2. Add powdered medium to 15 to 30℃(room temperature)water with gentle stirring. (Do not heat water)
3. Rinse out inside of package to remove all traces of powder.
4. Add 3.7g of NaHCO3 per liter of medium.
5. Dilute to a desired volume with water. Stir until dissolved. (Do not over-mix)
6. Adjust pH of medium to 0.2-0.3 below desired final working pH* use of IN NaOH or IN HCl is recommended. (Add slowly with stirring) After pH has been adjusted keep container closed until medium is filtered.
常用细胞培养基配方及缓冲液
常用细胞培养基配方及缓冲液
细胞培养基是一种含有适当营养物质和生长因子的液体或凝胶，用于维持细胞的生长与繁殖。常用的细胞培养基配方和缓冲液如下：
一、常用的细胞培养基配方：
1. DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）
-DMEM是最常用的细胞培养基之一，适用于多种种类的细胞培养。
-基本配方：
-高糖DMEM：添加25mM葡萄糖
-低糖DMEM：添加5.5mM葡萄糖
-高氨基酸DMEM：添加高浓度的氨基酸，以促进细胞生长和蛋白质合成。
2.RPMI1640
-适用于淋巴细胞和一些肿瘤细胞的培养。
-基本配方：
-高糖RPMI1640：添加25mM葡萄糖
-低糖RPMI1640：添加5.5mM葡萄糖
-高氨基酸RPMI1640：添加高浓度的氨基酸。
3. MEM（Minimum Essential Medium）
-MEM是最早用于细胞培养的培养基。
-基本配方：
-高糖MEM：添加25mM葡萄糖
-低糖MEM：添加5.5mM葡萄糖
4. Ham's F-10
-适用于肿瘤细胞和一些原代细胞的培养。
-基本配方：
- 高糖Ham's F-10：添加25mM葡萄糖
- 低糖Ham's F-10：添加5.5mM葡萄糖
5.L-15
-适用于多种种类的细胞培养。
-基本配方：
- L-15培养基：必须在CO2-free环境下使用。
二、常用的缓冲液：
1. 磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffered Saline，PBS）
-0.1MPBS的配方：
-8gNaCl
-0.2gKCl
-1.44gNa2HPO4
DMEM、F12培养基配置方法
DMEM/F12培养基
（华越洋生物）
DMEM/F12培养基说明书
一．【组成成分】
成分mg/L 成分mg/L 成分mg/L
无水氯化钙116.6 L-亮氨酸59.05 亚油酸0.042
五水硫酸铜0.0013 L-赖氨酸盐酸盐91.25 硫辛酸0.105
九水硝酸铁0.05 L-蛋氨酸17.24 酚红8.1
七水硫酸亚铁0.417 L-苯丙氨酸35.48 1,4-丁二胺二盐酸盐0.081 氯化钾311.8 L-丝氨酸26.25 丙酮酸钠55
氯化镁28.64 L-苏氨酸53.45 维生素H 0.0035
无水硫酸镁48.84 L-丙氨酸 4.45 D-泛酸钙 2.24 氯化钠6999.5 L-天门冬酰胺7.5 氯化胆碱8.98 无水磷酸二氢钠54.35 L-天门冬氨酸6.65 叶酸 2.65
磷酸氢二钠71.02 L-半胱氨酸盐酸盐17.56 i-肌醇12.6
七水硫酸锌0.432 L-谷氨酸7.35 烟酰胺 2.02
L-精氨酸盐酸盐147.5 L-脯氨酸17.25 盐酸吡哆醛2
L-胱氨酸盐酸盐31.29 L-色氨酸9.02 盐酸吡哆醇0.031 L-谷氨酰胺365 L-酪氨酸38.4 核黄素0.219
甘氨酸18.75 L-缬氨酸52.85 盐酸硫胺 2.17 L-组氨酸盐酸盐31.48 D-葡萄糖3151 胸苷0.365
L-异亮氨酸54.47 次黄嘌呤2 维生素B120.68
二．【产品指标】
外观：粉红色固体粉末
溶解性：完全溶解，溶液澄明。
pH值：①加NaHCO3 6.60～7.20
DMEM培养基配制方法
自行配制DMEM的方法及说明书
这里是一份GIBCO的低糖DMEM粉剂配制说明（普通高糖的DMEM培养基配法是一样的）：TO PREPARE 1*LIQUID
1. Measrue out 5% less distilled water than desired total volume of medium using a mixing container that is as close to the final volume as possible.
2. Add powdered medium to 15 to 30℃(room temperature)water with gentle stirring. (Do not heat water)
3. Rinse out inside of package to remove all traces of powder.
4. Add 3.7g of NaHCO3 per liter of medium.
5. Dilute to a desired volume with water. Stir until dissolved. (Do not over-mix)
6. Adjust pH of medium to 0.2-0.3 below desired final working pH* use of IN NaOH or IN HCl is recommended. (Add slowly with stirring) After pH has been adjusted keep container closed until medium is filtered.
DMEM培养基配方
DMEM培养基配方
DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）是一种常用的细胞培养基，广泛用于体外细胞培养和研究。下面是一种常见DMEM培养基的配方，以及其组成成分和原理解析。
1.DMEM基础培养基：
-DMEM混合物：420mL
-热灭菌的双蒸馏水：500mL
2.补充物：
-胎牛血清（FBS）：100mL
-青霉素和链霉素：1mL
-10%海马酸溶液：5mL
配方的组成成分和原理解析：
1.DMEM基础培养基：
DMEM是Eagle培养基的一种改良版，其中包含了额外的氨基酸、维生素和无机盐。DMEM是无血清培养基，不含胎牛血清，可减少实验结果受到外界因素的影响。
2.热灭菌的双蒸馏水：
双蒸馏水是通过蒸馏过程去除水中的杂质和微生物，保证细胞培养过程中的无菌状态。
3.胎牛血清（FBS）：
胎牛血清是培养细胞所必需的重要补充物，其中含有许多生长因子、激素和蛋白质，可以提供细胞所需的养分。
4.青霉素和链霉素：
青霉素和链霉素是两种广谱抗生素，用于预防和控制细胞培养中的细菌污染。
5.10%海马酸溶液：
海马酸（L-glutamine）是一种重要的氨基酸，对细胞的生长和分裂非常关键。10%的海马酸溶液用于提供细胞所需的L-谷氨酰胺。
补充物中的FBS用于提供细胞所需的生长因子、激素和蛋白质。青霉素和链霉素的加入可以预防细菌感染，确保细胞培养的纯度和健康度。海马酸溶液则提供细胞所需的L-谷氨酰胺，促进细胞的生长和分裂。
总结：
DMEM培养基是一种常用的细胞培养基，配方中包含基础培养基、水和补充物。基础培养基提供细胞所需的基本成分，而补充物则提供细胞所需的生长因子、抗生素和氨基酸。这种培养基的配方可以为细胞提供稳定的生存环境，促进细胞的生长和分裂。
完全培养基配制操作方法
完全培养基配制操作方法
完全培养基（Complete medium）是一种为细胞培养提供所有必需营养物质的培养基。完全培养基包括有机和无机物质、糖、氨基酸、维生素和激素等物质，可以满足细胞的生长和增殖的需求。下面是一种常见的制备完全培养基的方法。
1. 准备实验室所需设备和试剂，包括称量器具、移液器、试剂瓶等。
2. 按照预先计算好的配方准备所需的试剂。完全培养基的配方可以根据具体实验需要调整。以下为一种常用的完全培养基配方：
- DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）培养基
- FBS（Fetal Bovine Serum）胎牛血清
- L-谷氨酰胺粉末（或谷氨酸盐酸盐）
- 青霉素和链霉素（或青霉素和链霉素抗生素混合物）
3. 使用称量器具称量所需的DMEM粉末，并将其溶解于无菌蒸馏水中。根据DMEM培养基的配方指导书，溶解适量的DMEM粉末可以得到一定浓度的DMEM培养基溶液。
4. 将配制好的DMEM培养基溶液过滤器通过0.22微米的滤膜过滤器以去除悬浮物和细菌，得到无菌的DMEM培养基液。
5. 加入适量的FBS胎牛血清到DMEM培养基中。一般情况下，FBS浓度为10%。加入FBS胎牛血清的目的是提供细胞生长所需的营养物质和生长因子。
6. 加入适量的L-谷氨酰胺粉末（或谷氨酸盐酸盐）到DMEM培养基中，以提供氨基酸供细胞使用。L-谷氨酰胺是蛋白质合成的重要组成部分。
7. 加入适量的青霉素和链霉素（或青霉素和链霉素抗生素混合物）到DMEM培养基中，以预防细菌污染。青霉素和链霉素是在无菌环境中操作时添加的，以防止培养物中细菌的生长。
DMEM培养基配制方法
DMEM培养基配制方法
DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）是一种被广泛应用于细
胞培养的营养培养基，适用于多种细胞类型的培养。在使用DMEM培养基前，需要配制和调整培养基的组成，下面将详细介绍DMEM培养基的配制
方法。
配制DMEM培养基的材料有：
1.DMEM粉末：可从实验室供应商处购买。
2.无菌蒸馏水：用于稀释粉末和混合培养基。
3.黄体酮或胰岛素：这些添加剂用于特殊培养条件下的细胞培养。
4.无菌过滤器：用于过滤培养基以去除微生物污染。
下面是DMEM培养基的配制步骤：
1.消毒实验台和培养物。
在开始培养基的配制之前，确保实验台和培养器具已经进行了有效的
消毒。这可以通过使用70%乙醇或其他消毒剂来实现。此外，需要对培养
物进行表面消毒处理。
2.配置培养基。
将适量的DMEM粉末称量到一个无菌容器中，并加入一定量的蒸馏水。粉末的添加量根据细胞类型和细胞密度的不同而异，一般建议将DMEM粉
末加入到预定体积的80-90％。例如，如果需要100mL的培养基，可以将
80-90g的DMEM粉末加入到约90mL的蒸馏水中。
3.调整pH值。
使用酸或碱类物质（如NaOH或HCl）逐滴调整培养基的pH值，直到
达到理想的值。一般来说，DMEM培养基的pH值在7.2-7.4之间是理想的。
4.筛选和过滤培养基。
将配制好的培养基通过无菌纤维过滤器过滤，以去除可能存在的微生
物污染物。这可以保证培养基的无菌性。
5.存储和标记培养基。
将过滤的培养基分装到无菌的培养基瓶中，并在瓶子上标记培养基的
DMEM培养基配制方法
自行配制DMEM的办法及说明书之五兆芳芳创作
这里是一份GIBCO的低糖DMEM粉剂配制说明（普通高糖的DMEM培养基配法是一样的）：TO PREPARE 1*LIQUID
1. Measrue out 5% less distilled water than desired total volume of medium using a mixing container that is as close to the final volume as possible.
2. Add powdered medium to 15 to 30℃ (room temperature)water with gentle stirring. (Do not heat water)
3. Rinse out inside of package to remove all traces of powder.
4. Add 3.7g of NaHCO3 per liter of medium.
5. Dilute to a desired volume with water. Stir until dissolved. (Do not over-mix)
6. Adjust pH of medium to 0.2-0.3 below desired final working pH* use of IN NaOH or IN HCl is recommended. (Add slowly with stirring) After pH has been adjusted keep container closed until medium is filtered.
培养细胞所需的几种主要液体的配制方法
培养细胞所需的几种主要液体的配制方法：1．DMEM维持培养基
DMEM基础培养基95ml 95ml
胎牛血清5ml
谷氨酰胺液2ml
含有DMEM基础培养基95ml，胎牛血清5ml，谷氨酰胺液2ml。混合均匀，密封后与4摄氏度保存。
2．D-hank’s
D-hank’s干粉g(1袋)
NaHCO3
超纯水1000ml
取D-hank’s干粉加入超纯水500ml搅拌均匀，加入的NaHCO3搅拌至完全溶解，倒入1000ml容量瓶中，用1mol/l的HCL或者NaOH 溶液调整溶液的PH值为7.2,最后经过∮0.22微升的滤膜过滤除菌,分装后4摄氏度保存.
3. DMEM完全培养基
85ml,
DMEM基础培养液85ml,
, l-谷氨酰胺溶液, 2ml
1000u/ml双抗液1ml
胎牛血清15ml
取DMEM基础培养基85ml, 胎牛血清15ml,l -谷氨酰胺溶液2ml,
混合均匀,密封于4摄氏度保存.
4. DMEM细胞基础培养基
DMEM干粉(1袋)
Na2HCO3
超纯水1000 ml
取DMEM干粉1袋()倒入烧杯中,取800ml 超纯水溶解培养基干粉,搅拌均匀,然后向溶液中加入的Na2HCO3,搅拌至完全溶解后倾入1000 ml容量瓶中,再用1mol/l 的HCL 或者1mol/l的NaOH溶液调整溶液的PH值为7.2,混合均匀后,定容,∮0.22微升的滤膜过滤除菌,分装4摄氏度保存.
5. l-谷氨酰胺溶液
l-谷氨酰胺
DMEM基础培养基100ml
称取l-谷氨酰胺干粉g于烧杯中,加80 ml超纯水于烧杯中搅拌溶解,用100ml容量瓶定容,∮0.22微升的滤膜过滤除菌,分装于小瓶中于-20摄氏度保存.使用添加量是1ml/50ml,使用浓度是2mmol/l.