1、临床实验室生物安全(修改版)

设施要求：试验室的送风必须经过三级 过滤，不允许使用循环回风；排风还需 要经过高效过滤后排放。实验室的排风 必须独立设置，并采取有效措施保证排 风系统的平衡，保证各个试验区域之间 的负压要求。试验必须在在IIB级以上的 生物安全柜内进行。 人员进入要求：非实验室工作人员禁止 入内；未成年人严禁入内。

设施要求
布局：无特殊要求。 设施设备：无特殊要求。 人员进入：无特别限制。

2、生物安全2级实验室 （BSL-2）



实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备 适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。 设置要求：建立新实验室时应尽量远离公共区 域并进行有效的隔离 ；三区划分明确；贮存 限制性病原体的实验室门窗必须加锁。 设施要求：对于可能发生气溶胶的实验在II级 生物安全柜中进行；如果涉及到化学致癌物质、 放射性物质和挥发性溶剂，则应在具有全排风 功能的II级B2生物安全柜中进行；限制锐利器 具的使用。 人员进入要求：禁止外人进入实验区域。

2级风险组：指对人或环境具有中等潜在 危害的微生物。 特性： 中等个体危害，有限群体危害 。 即某种病原体，能引起人类或动物疾病， 但对实验室人员、社会、牲畜或环境不 太可能具有严重的危险性，实验室暴露 可能引起严重感染，但具有有效的治疗 方法及预防措施，并且感染的传播性有 限。

3级风险组：主要通过呼吸途径使人传染 上严重的甚至是致死性疾病的致病微生 物及其毒素。 特性：高个体危害，低群体危害 。即某 种病原体，通常能引起严重的人类或动 物疾病，但一般不会因偶然接触而从一 个个体传染给他人，具有有效的治疗方 法及预防措施，即通常已有预防传染的 疫苗和治疗药物。
例一：1956年，前苏联的一个实验室曾 有9支装有感染了委内瑞拉马脑炎病毒的 鼠脑的安瓿被打破。由于没采取必要的 措施，结果在几天内造成24名工作人员 感染。 例二： 1961年莫斯科一家研究所的实验 人员从流行性出血热疫区捕捉到一些野 鼠带回实验室。由于疏忽，这些野鼠被 放在了室内暴露的场所。不久，实验室 相继有63人出现发热症状，开始被误诊 为流感，1周内又增加了30人，才开始怀 疑到是流行性出血热。

例五：1998年，我国某大城市的某高校在 使用大白鼠进行试验时，有两名学生被大 白鼠咬伤，还有一些学生在给实验老鼠放 血、解剖的过程中，未按照要求戴手套操 作，结果在29名实验人员中，有 9人感染 了流行性出血热。 例六： 2001年，在英国波布特莱尔实验室 东北方向50公里的布伦特伍德地区发生了 口蹄疫。据分析和证实，口蹄疫病毒是从 波布特莱尔实验室里泄漏出来，经过空气 传播到布伦特伍德的地区，从而造成了大 规模的口蹄疫爆发。
（ 个体危险 中等，群体危 险低）病原微 生物能够对人 或动物致病， 但对实验室工 作人员、社区、 牲畜或环境不 易导致严重危 害。实验室暴 露也许会引起 严重感染，但 对感染有有效 的预防和治疗 措施，并且疾 病传播的危险 有限。
二 能够引起人 类 类或者动物 严重疾病， 比较容易直 接或者间接 在人与人、 动物与人、 动物与动物 间传播的微 生物。
（ 个体和群 体的危险均 高） 病原微生物 通常能引起 人或动物的 严重疾病， 并且很容易 发生个体之 间的直接或 间接传播， 对感染一般 没有有效的 预防和治疗 措施。
根据《实验室生物安全通用要求》 （ GB19489-2004）等级划分与标准，病 原微生物按危险程度分为四组： 1级风险组：指对个体和社会无危险或危 险性较低的微生物。 特性：低个体危害，低群体危害。不会 导致健康人员和动物致病的细菌、真菌、 病毒和寄生虫等生物因子属之。
(一)、 生 物安全实验室的分级 及适用范围

一般说来，生物安全实验室分为如下四 个级别：
1、生物安全1级实验室 （BSL-1）
实验室结构和设施、安全操作规程、安 全设备适用于对健康成年人已知无致病 作用的微生物，如用于教学的普通微生 物实验室等。 一级为普通的微生物实验室，对外人的 进入不特别禁止，也不需要使用生物安 全柜。试验一般在普通实验台上进行
四 在通常情况 类 下不会引起 人类或者动 物疾病的微 生物。
三 类
能够引起人类 Ⅱ 或者动物疾病， 级 但一般情况下 对人、动物或 者环境不构成 严重危害，传 播风险有限， 实验室感染后 很少引起严重 疾病，并且具 备有效治疗和 预防措施的微 生物。
( 中等个体危 Ⅱ 害，有限群体 级 危害)能引起 人或动物发病， 但一般情况下 对健康工作者、 群体、家畜或 环境不会引起 严重危害的病 原微生物。实 验室感染不导 致严重疾病， 具备有效治疗 和预防措施， 并且传播风险 有限。

（2）、微生物气溶胶 是指由微生物组成的悬浮于气体介质中 的相对稳定的分散体系。

形成原因：搅拌、振荡、离心等。 特点： ①、无色无味、无孔不入、不易发现、 易于感染； ②、感染症状不典型，病程复杂，难以 及时诊治，影响预后；

③、有些气溶胶感染只有呼吸道粘膜免 疫才有预防作用，非呼吸道免疫途径作 用效果欠佳，现有常规疫苗的预防效果 不理想，如肺炭疽； ④、呼吸道传播的病原微生物特别是高 致病性病毒常常发生变异，尤其是其抗 原性、致病性都可能发生改变，在空气 中存活力也可能增强；
临床实验室生物安全
河南省卫生厅临床检验中心 金雨琦
临床实验室的主要危害源包括三个方面： 物理危害源 化学危害源 生物危害源 前两者的特性：1、可感知，易避免；2、 危害范围有限；3、危害持续时间短。

一、惨痛的历史教训

历史上，实验室感染的事件曾多次发生， 实验室人员曾为此付出了沉重的代价。 这些感染的主要原因是：防护意识不强； 操作失误，防护条件不足。


例七：2003年9月，一名27岁的研究生在 新加坡国立大学生物安全二级实验室， 因不恰当的实验程序，受到西尼罗河病 毒样本与非典冠状病毒的交叉感染。

例八： 2010年12月19日下午，东北农业 大学应用技术学院畜禽生产教育班学生 在动物医学学院实验室进行“羊活体解 剖学实验”。共5个班级28人感染布鲁氏 菌病，其中包括27名学生（14名男生， 13名女生）、1名老师。

4级风险组：对人体和环境具有高度的危 险性，通过气溶胶途径传播或传播途径 不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法 的病原微生物及其毒素。 特性：高个体危害，高群体危害。即能 引起人类或动物非常严重的疾病，一般 不能治愈，容易直接或间接或因偶然接 触而在人与人、人与动物、动物与动物 之间传播的病原微生物。

2、几个重要的概念 （1）、HEPA 高效空气过滤器 high efficiency particulate air filter (HEPA) HEPA是指在额定风量和有效过滤面积下及 空气阻力在245Pa以下的对直径≥0.3μ m 的粒子捕集效率在99.97%以上的空气过滤 器。 高效过滤器采用超细玻璃纤维滤纸或聚丙 烯滤纸为滤材，经密折而成。 特点：通风阻力小、展开面积大、容尘量 大、滤过效率高。

例三： 1967年，欧洲的三个城市为研制疫 苗，从乌干达等地进口了一批黑长尾猴， 而这些猴子携带一种特殊的病毒，引起了 13名工作人员患病，并使这种疾病在德国 马尔堡等地区流行，马尔堡病毒由此而得 名。 例四： 1979年4月,前苏联斯维尔德洛夫斯 克实验室的泄露事故。 当地的生物武器实 验室发生了爆炸，约10公斤的炭疽芽孢粉 剂泄露，爆炸释放出大量的细菌毒雾，造 成附近1000多人发病，数百人死亡。

产生微生物气溶胶的其它因素


除了实验室操作可以产生微生物气溶胶外，患 有呼吸道传染病或皮毛上染有病原微生物的实 验动物也可以产生微生物气溶胶。 微生物气溶胶在一个实验室内产生后，还可以 通过气流转移到同一建筑物的其他地方，甚至 污染整个建筑物的空气。
扩散的防止方法——有效拦截： 过筛；阻挡。
一 能够引起人类 类 或者动物非常 严重疾病的微 生物，以及我 国尚未发现或 者已经宣布消 灭的微生物。
Ⅳ ( 高个体危害， Ⅳ 级 高群体危害 ) 级 能引起人类 或动物非常 严重的疾病， 一般不能治 愈，容易直 接或间接或 因偶然接触 在人与人， 或动物与人， 或人与动物， 或动物与动 物间传播的 病原微生物。
生物危害警告标识
授权人员方可进入 生物安全水平：-----------责任人：------------紧急联系电话：----------白天电话：------------ 家庭电话：----------必须得到上述责任人的授权方可进入
3、生物安全3级实验室 （BSL-3）
实验室结构和设施、安全操作规程、安 全设备适用于主要通过呼吸道途径使人 传染上严重的甚至是致死性疾病的病原 微生物及其毒素，通常已有预防传染的 疫苗和治疗药物。 设置要求：实验室的设计和工程应符合 特定要求：独立设置、三区两缓、用时 负压。


⑤、微生物气溶胶易引起病原体在人与 人、人与动物、动物与动物之间的传播； ⑥、微生物气溶胶可以远距离或较远距 离传播，这是其传播性难以预防的另一 重要原因。
微生物气溶胶产生的方式和类型 对276种实验室操作测试发现，239种 （86.6%）操作可以产生微生物气溶胶。 按其产生微生物气溶胶颗粒的多少，可 以将这些操作分为重度、中度和轻度三 级。可以产生各种严重程度微生物气溶 胶的主要实验操作如下：

三、临床实验室的 生物安全防护


实验室生物安全防护（biological safety containment labortories）：是指在实验室环境 下处理和保存感染性物质的过程中采用的一系 列的防护措施。它包括一级防护（primary containment ）和二级防护(secondary containment）。 一级防护（屏障）：个人防护装备和设备。 二级防护（屏障）：实验室设置和设施。