酶标仪使用详解
酶标仪的使用方法与数据处理
酶标仪的使用方法与数据处理
酶标仪的使用方法与数据处理如下:
准备工作:确保酶标仪处于正常工作状态,校准和检修需要在必要时进行。根据实验需求选择合适的酶标仪板和酶标仪试剂盒。
样品处理:根据实验要求选择合适的样品,并进行相应的前处理步骤。将样品放置于酶标仪板中的孔中。
加入酶标试剂:根据实验要求和试剂盒说明书中的指导,将相应的酶标试剂添加至每个孔中。注意按照正确的顺序和比例加入试剂,避免污染和误差。
混匀和孵育:轻轻摇晃或轻轻拍打酶标仪板,确保样品和试剂充分混合。将酶标仪板放置在恒温条件下的孵化箱中进行相应的孵育时间,以促进反应的进行。
反应停止和读数:在孵育结束后,根据试剂盒说明书中的指导,加入适当的反应停止剂,终止反应。将酶标仪板放置在酶标仪中,根据所测定的具体物质选择相应的波长或滤光片,读取吸光度或荧光强度值。
数据处理:根据实验需要,使用软件或计算公式将读数结果转化为所需的具体物质的浓度或活性。
清洗和维护:使用适当的清洗液和方法对酶标仪进行清洁和消毒,确保下次使用时的准确性和可靠性。按照设备的维护手册,定期进行维护和检修工作,包括校准和更换部件等。
酶标仪使用方法
酶标仪使用方法
酶标仪是一种能够实现定量测定、蛋白质检测、实验过程控制和样品分析的仪器设备,它具有体积小、操作简单、灵敏度高、重复性好、可靠性强、能够处理大量数据等优点。它在生命科学领域已经发挥了非常重要的作用,可以提供精确、可靠的结果。
酶标仪的使用方法主要包括以下几个步骤:
第一步:准备实验样本。根据实验要求,准备好所需的实验样本,并及时将其冷冻保存;
第二步:清洗所需仪器。将所需仪器洗涤干净,其中包括定量管、比色皿、二氧化碳阀等;
第三步:配制反应混合液。根据实验要求,配制反应混合液,并将其均匀混合;
第四步:样本测定。将准备好的样本按要求,放入定量管中,并利用酶标仪进行样本测定;
第五步:数据处理。将测定结果利用计算机进行记录和分析,并进行图形处理;
第六步:记录数据。将测定结果记录在相应的表格中,以便以后查询和参照。
在使用酶标仪实验时,有几点需要特别注意:
1.实验操作要熟练。在操作前,要认真阅读说明书,仔细了解仪器操作方法,并熟练掌握实验流程;
2.样品配制要准确。样品的配制是实验的关键,必须确保样品的
精确配制,以保证实验的准确性;
3.反应时间要得当。根据实验要求,选择恰当的反应时间,以保证实验结果的准确性;
4.使用规范要遵守。在使用酶标仪时,要遵守和按照使用规范和要求来操作,以确保实验数据的精准度。
总之,酶标仪是一种用来测定实验中的蛋白质和其他生化物质的仪器,它的操作简便,精密度高、灵敏度强,被广泛应用于生命科学和实验室研究中。在使用酶标仪时,需要准备好实验样本,熟练掌握实验流程,精确配制样本,选择合适的反应时间,并严格遵守使用要求,以保证实验结果的准确性及可靠性。
酶标仪的使用流程
酶标仪的使用流程
1. 准备工作
在使用酶标仪之前,需要进行一些准备工作,以确保使用的顺利进行。以下是
一些准备工作的步骤:
•确保酶标仪处于合适的工作环境,避免阳光直射和尘埃污染。
•确保酶标仪的电源和连接线正常,并接通电源。
•检查酶标仪内部的试剂是否充足,并根据需要进行补充。
2. 样本处理
在使用酶标仪之前,需要处理待测样本,以准备好进行后续的实验操作。以下
是样本处理的步骤:
•收集待测样本,并进行必要的稀释或处理。
•将样本放置在标记好的试管或孔板中,确保每个样品的位置准确无误。
•使用酶标仪的自动吸液器或手动移液器,将样本加入到试管或孔板中。
3. 实验操作
一旦完成了样本的处理,就可以进行实验操作了。如下所示是酶标仪实验操作
的步骤:
•打开酶标仪的软件,并选择相应的实验方案。
•将样本所在的试管或孔板放置在酶标仪的样本架中。
•根据实验方案的要求,设置酶标仪的参数,如吸光度测量波长、测量间隔时间等。
•启动实验,并等待酶标仪完成测量过程。
•根据实验方案的要求,将实验结果保存或导出。
4. 数据分析
完成实验后,需要对实验结果进行数据分析,以得出相应的结论。以下是数据
分析的步骤:
•使用酶标仪提供的数据分析软件,导入实验结果。
•根据实验方案的要求,进行数据处理和统计分析。
•绘制图表,展示实验结果的变化趋势。
•根据实验结果,分析样品的浓度或活性。
5. 结论和报告
根据数据分析的结果,得出结论,并撰写实验报告。以下是撰写实验报告的步骤:
•总结实验结果,陈述结论。
•根据实验结果,提出进一步的实验设想或建议。
•撰写实验报告,并按照学术规范进行格式和内容的整理。
酶标仪的基本操作新手不得不看 酶标仪如何操作
酶标仪的基本操作新手不得不看酶标仪如何
操作
酶标仪是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动两大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。测定一般要求测试液的体积在250L以下,用一般光电比色计无法完成测试,因此对酶标仪中的光电比色计有特别要求。
酶标仪的功能是用来读取酶联免疫试剂盒的反应结果,因此要得到精准结果,试剂盒的使用必需规范。很多医院在使用酶标仪之前是通过目测判定结果,操作过程任意性较大,在使用酶标仪后假如不能适时矫正操作习惯,会造成较大误差。在酶标仪的操作中应注意以下事项:
1.使用加液器加液,加液头不能混用。
2.洗板要洗干净。假如条件允许,使用洗板机洗板,避开交叉污染。
3.严格依照试剂盒的说明书操作,反应时间精准。
4.在测量过程中,请勿碰酶标板,以防酶标板传送时挤伤操作人员的手。
5.请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部,操作完成后请洗手。
6.假如使用的样品或试剂具有污染性、毒性和生物学危害,请严格依照试剂盒的操作说明,以防对操作人员造成损害。
7.假如仪器接触过污染性或传染性物品,请进行清洗和消毒。
8.不要在测量过程中关闭电源。
9.对于因试剂盒问题造成的测量结果的偏差,应依据实际情况适时修改参数,以达到较佳效果。
10.使用后盖好防尘罩。
11.显现技术故障时应适时与厂家联系,切勿擅自拆卸酶标仪。
怎么使用酶标仪
作为微孔板比色计的酶标仪,其基本功能不外乎一个比色测定,所不同的是在测定波长范围、吸光度范围、光学系统、检测速度、
酶标仪使用方法
酶标仪使用方法
酶标仪是一种常见的实验仪器,用于检测细胞、蛋白质等生物体内分子的含量和活性。它通过测量化学反应的光学信号来确定分子的浓度,广泛应用于生物学、医学领域等科研实验和临床检测中。本文将介绍酶标仪的使用方法,以帮助读者更好地理解和应用这一仪器。
酶标仪由灯源、检测系统、计算机等部分组成。首先,我们需要在酶标板上加样。通常情况下,酶标板上有多个孔,每个孔都可以加入不同的样品。在加样之前,我们需要准备好需要测量的样品和相应的试剂。试剂的种类和用途会根据测量的目的不同而有所差异,这一点可以在实验设计之前根据实验要求和文献资料进行选择。
将待测样品加入到酶标板的不同孔中后,需要将酶标板放入酶标仪中进行测量。打开酶标仪的电源,选择相应的波长和测量模式。波长的选择取决于我们所使用试剂的性质。一般来说,我们会根据试剂说明书或者先前的实验经验来确定测量所需的最佳波长。
在测量过程中,仪器会通过激发光源照射在酶标板上,并测量样品发出的荧光或吸光度等光信号。这些光信号和样品中分子的含量或活性有关。仪器会通过检测系统将光信号转化为电信号,并发送给计算机进行分析和处理。
正确设置酶标仪的参数对于获取准确的实验结果至关重要。首先,我们需要设置合适的增益或灵敏度。过低的增益会导致信号过于弱小无法被检测到,而过高的增益则会引起信号饱和。合理选择增益可以保证信号大小在仪器的可检测范围内,同时尽量减少噪音的干扰。
除了增益之外,还需要设置积分时间。积分时间是指仪器采集光信号的时间长度。一般来说,如果信号较强,则可以选择较短的积分时间,而如果信号较弱,则需要选择较长的积分时间来提高信噪比。过长或过短的积分时间都会对测量结果产生影响,因此需要在实验前进行优化和调试。
酶标仪测酶的使用流程
酶标仪测酶的使用流程
1. 准备工作
在使用酶标仪之前,首先需要进行一些准备工作,以确保实验顺利进行。
1.1 酶标仪器准备
•将酶标仪置于干净的实验台上,确保仪器平稳放置。
•打开酶标仪电源,并等待仪器启动和进入工作状态。
•检查仪器是否连接到电脑或打印机等外设。
1.2 试剂准备
•根据实验需求,准备好所需的试剂和底物,确保试剂的保存期限在有效期内。
•按照试剂说明书的要求,将试剂稀释至适当的浓度,用于后续实验操作。
2. 样品处理
在进行酶标仪实验之前,需要对样品进行适当的处理和准备。
2.1 样品采集
•根据实验设计,采集待测样品,并确保样品储存条件符合要求,如冷藏或冷冻保存。
•样品采集时需注意操作规范,避免污染和交叉感染。
2.2 样品制备
•根据具体实验要求,将待测样品进行适当的处理和制备,如离心、过滤或稀释等。
•样品制备过程中应采取严格的无菌操作,避免污染对结果的影响。
3. 酶标仪实验操作步骤
经过准备工作和样品处理后,即可按照下述步骤在酶标仪上进行实验。
3.1 仪器设置
•在酶标仪上选择相应的实验模式,并根据试剂和测量参数设置仪器。
•设置酶标仪的波长,通常为450nm或620nm,根据实验需求进行选择。
3.2 标准曲线建立
•准备一系列不同浓度的标准溶液,并确保每个浓度的标准溶液准确地配制。
•获取酶标仪的测量数据,并绘制标准曲线,用于后续待测样品的定量测量。
3.3 样品测量
•将样品加入到酶标仪的反应孔中,确保每个孔的样品用量相等。
•启动酶标仪,设定相应的测量参数,如测量时长或间隔时间。
•酶标仪完成测量后,记录或导出测量数据。
ELX800酶标仪使用说明
ELX800酶标仪使用说明
一、概述
ELX800酶标仪是一种用于酶标和酶免疫分析的仪器。它具有多通道
读取能力,可同时读取96孔板上的各个孔位,既适用于常规的酶标试验,也适用于各种酶免疫分析。本使用说明将详细介绍如何正确操作和使用
ELX800酶标仪。
二、仪器组成
1.主机:包括仪器控制器、读取器、显示器等。
2.孔板托架:用于放置和定位96孔板。
3.过滤器:用于筛选光源发射波长或检测波长。
4.过滤器盒:用于放置过滤器。
5.计算机:用于控制仪器,保存和分析数据。
6.打印机:用于打印测试结果。
三、使用方法
1.准备工作:
a.将主机接通电源,并将显示器、计算机、打印机等设备连接好。
b.打开仪器软件,并进行系统登录。
c.将需要测试的96孔板放置在孔板托架上,并将托架移入酶标仪中。
d.检查过滤器是否正确安装,并根据需要调整过滤器盒中的过滤器位置。
e.在计算机上设置好实验参数,如波长、吸光度范围等。
2.启动仪器:
a.在仪器软件中点击启动按钮,酶标仪开始自检,检查仪器是否正常运行。
b.检查光源是否工作正常,如果需要更换光源或调整光源强度,可在软件中进行设置。
c.选择所需要的读取模式(如吸光度读取、发光读取等)。
3.读取数据:
a.将孔板托架放置在仪器中心,确保孔位对准检测光源。
b.在仪器软件中设置读取参数,包括波长、测量时间间隔等。
c.点击读取按钮,仪器开始读取数据。
d.读取完成后,将数据保存到计算机中,并进行结果分析、图表生成等操作。
4.数据分析:
a.使用仪器软件或其他统计软件进行数据分析,如计算平均值、标准差、浓度等。
酶标仪(使用方法)
酶标仪使用方法
一、仪器准备
1.将MK3酶标仪后部的电源开关打开,仪器将显示自检,基础酶联,软件版本号。2.等待数秒后,荧屏显示“基础酶联,准备和时间”。表示仪器正常,处于等待状态。操作规程
1.工作人员心须详细阅读仪器操作使用说明书。
2.将被测样品板放入酶标盘中,同时打开与酶标仪相连的打印机开关。
3.按“测量模式”键:进入选择波长程序
荧屏显示:“基础酶联”
“1.单波长检测”
按“↑”“↓”选择单波长.双波长检测.
4.按“输入”键:进入选择好的文件名状态。
若选择单波长检测,
荧屏显示:“1.单波长检测”
“滤光片405”
再用数字键选择需要的波长.
若选择双波长检测,
荧屏显示:“2.双波长检测”
“1.滤光片450”
再用数字键选择需要的第一检测波长.按”输入”键,
荧屏显示: “2双波长检测”
“2.滤光片630”
再用数字键选择需要的第二检测波长.按”输入”键,
荧屏显示:“2双波长检测”
“无试剂空白”
5.继续按”输入”键, 荧屏显示:“2双波长检测”
“最终结果”(单波长无此步骤)
6.按”输入”键,返回到荧屏显示“基础酶联,准备和时间”
7.按”开始”键, 启动阅读功能,酶标仪对样品板开始进行测试。
8.读数完毕,被测孔子板复位,荧屏显示“正在传送数据”,等待数秒后,打印机开始打印测试结果。当打印完毕后,关闭打印机开关,荧屏回到主菜单状态。此时将酶标仪右侧开关打至“O”即可。
二、计算机控制
1.将MK3酶标仪后部的电源开关打开,仪器将显示自检,基础酶联,软件版本号2.等待数秒后,荧屏显示“基础酶联,准备和时间”。表示仪器正常,处于等待状态。3.在lab-35计算机的桌面上打开“思桥检验科管理系统”,输入用户名“system”及密码“system”.
酶标仪使用方法
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酶标仪操作规程范文
酶标仪操作规程范文
酶标仪是一种常用的实验仪器,用于测定物质在溶液中的浓度。酶标
仪操作规程如下:
1.实验前准备
(1)酶标仪的开机前需要检查电源是否连接好,仪器是否处于正常工
作状态。
(2)校准酶标仪,使用校准物质进行校准,确保仪器的准确性和稳定性。
(3)准备好所需的实验材料和试剂,包括标准曲线样品、待测样品、
底物、酶标记物以及所需要的缓冲液等。
2.设置酶标仪参数
(1)打开酶标仪软件,选择合适的测量模式,如吸光度测量、荧光测
量或发光测量等。
(2)根据实验要求,设置波长和测量时间。
(3)选择合适的板式,如96孔板或384孔板,并根据实验需求选择合
适的测试板。
3.样品处理
(1)使用缓冲液调整待测样品的pH值,使其适应于所选择的测量模式。
(2)将待测样品按照预定的比例与底物、酶标记物等混合,并充分混
合均匀。
(3)将混合液加入到所选择的测试板中,每个孔位加入适量的混合液。
(4)为了保证结果的准确性,建议每个样品和标准样品设置重复测量。
4.测量操作
(1)将预处理好的测试板放入酶标仪中,确保每个孔位对准所选择的
波长。
(2)启动测量程序,按下开始按钮,酶标仪会自动测量每个孔位的吸
光度或荧光强度。
(3)程序结束后,将测试板取出,并进行数据保存。
5.结果分析
(1)根据测量结果,绘制标准曲线,通过标准曲线可以计算出待测样
品的浓度。
(2)对于荧光或发光测量模式,需要根据标准曲线计算样品的相对荧
光测量强度或相对发光测量强度。
(3)根据实验需求,可以利用数据处理软件进行结果分析和统计。
6.清洁和维护
(1)实验结束后,及时清洁酶标仪的测试板和其他相关部件,保持仪
酶标仪使用详解范文
酶标仪使用详解范文
酶标仪是一种常见的实验仪器,用于检测生物样本中特定分子的浓度。它广泛应用于生物医学研究、药物研发和临床诊断等领域。本文将详细介
绍酶标仪的使用方法及注意事项。
一、酶标仪的基本原理
酶标仪是通过光学测量来确定样本中特定分子浓度的仪器。其工作原
理是利用底物与酶的反应产生的物质颜色变化来测定样品中酶活性或者其
中一种特定分子的浓度。酶标仪通过测量底物产生的吸光度或荧光来确定
管内样本中特定分子的浓度。
二、酶标仪的使用步骤
1.准备工作:首先打开酶标仪电源,等待其预热。然后根据需要选择
合适的检测模式,如吸光度或荧光模式。
2.设定参数:按照实验要求,设定酶标仪的参数,包括波长、时间和
增益等,这些参数取决于所使用的底物和样品类型。通常需要根据实验所
需设定不同的参数。
3.校准仪器:在进行测量之前,需要对酶标仪进行校准,以确保测量
结果的准确性。校准一般分为零点校准和标准曲线校准两个步骤。零点校
准是将酶标仪的读数归零,标准曲线校准则是使用已知浓度的标准样品制
作标准曲线,以便后续测量时根据标准曲线确定待测样品中的物质浓度。
4.加样测量:用自动吸管器或移液器将样品加入酶标仪中,确保每个
孔都有足够的样品进行测量。加样完成后,将酶标板或孔板插入酶标仪的
样品槽内,等待测量结果。
5.数据处理:酶标仪会自动测量各个孔的吸光度或荧光值,并将结果显示在仪器屏幕上。根据实验要求,将数据导出并进行数据处理,如制作标准曲线、计算浓度等。
三、酶标仪使用注意事项
1.酶标仪是一种精密仪器,使用前需仔细阅读使用说明书,并按照操作步骤进行操作。
酶标仪使用方法
酶标仪使用方法
酶标仪使用方法
(一)安装设备:
1.首先要准备设备,包括:酶标仪主机、样本架、样本演变分析仪、计算机系统、扩展套件。
2.将主机置于平稳的工作台上,注意空间的宽度和深度,主机前面至少要保留25mm的控制台。
3.将样本演变分析仪及样本架安装在主机底端,滑动样本架侧边固定装置,使
样本架自由滑动,但不改变位置。
4.将计算机系统及扩展套件连接到主机上,包括USB键盘、鼠标、屏幕、U盘、蜂鸣器等,上电后准备工作。
(二)启动设备:
1.在计算机系统上,双击鼠标左键,进入酶标仪选择界面,进行后续操作。
2.操作者使用特定键盘输入指定的必要参数,进行测定方法选择。
3.点击“启动”,酶标仪便会自动进行后续实验,在指定时间内得到实验结果。
4.可以通过调节启动过程中的参数来更改实验结果,完成更准确的分析。
(三)清洁和维护设备:
1.实验结束后,应及时清洁实验装置,以保证下次实验的质量。
2.定期检查并更换流体部件,及时更换耗材,保证流程的顺畅。
3.定期清理过滤器及设备内部的积污物,防止设备内部杂质影响实验结果。
4.对于涉及到精密部件的维护及调整,建议选择正品配件保证质量。
5.正确使用设备,定期维护,可以延长酶标仪的使用寿命。
酶标仪操作流程
酶标仪操作流程
按仪器背面的按钮可以直接启动仪器,经过几分钟后的仪器自检后就可以开始用于检测。电脑和仪器哪个先开没有关系。
1)在操作过程中出现卡板现象,立即关掉电源,再开机。
2)保持避光和干净的室内环境,维持一定的湿度(30%-80%)。
3)维持室内比较恒定的温度,以20-22度为最适宜。
4)适用6-384孔板。96孔微孔板内每孔可检测100-300ul溶液,最佳检测体积为200ul。
5) 384孔微孔板内每孔可检测50-100ul溶液,最佳检测体积为80ul。
6)检测后的微孔板和比色皿不要长期置于仪器插槽中,检测完后就从仪器中取出,避免溶
液蒸发腐蚀或损坏仪器内部光路系统。如果为有腐蚀性或挥发性溶液,请带盖检测。
7)对于可见光吸收检测,使用全透明微孔板;紫外光吸收检测,使用紫外可透全透明微孔
板;荧光强度和荧光偏振,使用黑色不透明板,需要检测底读的用黑色底透微孔板;化学发光和时间分辨荧光,使用白色不透明微孔板。
8) SpectraMax M5/M5e随仪器有一块紫红色的适配板,在检测96孔板和384孔板光吸收以
及荧光顶读的时候必须预先以下图方向置于插槽中,然后再如图放入微孔板进行检测。
9)开机时不打开遮光盖,自检完毕可打开。
10)仪器与电脑连接端口需专用,不可随意改变。
11)不要罩防尘罩以保持透气和除湿。
12)打开软件已管理员身份进入。数据保存:save as *sda有数据,*spr 仅保存模板,pdf。Export可导出excel数据。
13)温度以仪器面板为准,温度可设(只可升温不可降温)。
酶标仪使用流程
酶标仪使用流程
酶标仪使用流程
简介
酶标仪是一种常用的实验仪器,广泛应用于生物化学、分子生物学、免疫学等领域。它可以用来检测目标物质的含量,了解其在样品中的浓度或活性。本文将详细介绍酶标仪的使用流程,帮助您更好地掌握这一实验技术。
一、准备工作
1. 检查设备:先确保酶标仪的电源和仪器的连接正常,仪器处于工作状态。
2. 准备试剂:根据实验需要,准备好所需的试剂和标准品,注意按照规定的浓度和容量配置好。
3. 样品处理:如果需要对样品进行处理,如离心、稀释等,根据实验要求进行预处理。
二、实验设置
1. 设定波长:根据所使用酶标仪的要求和实验需求,选择合适的波长进行测定。常见的波长有450nm、490nm等,具体波长需根据实验所用底物的特性来确定。
2. 标定仪器:使用标准品进行仪器的校准,确保仪器的准确性和稳定性。
3. 设置实验参数:设定所需的实验参数,如反应时间、温度等。根据
实验目的,调整仪器的灵敏度和测量范围。
三、样品测定
1. 建立样品曲线:根据需要,使用标准品制作一系列浓度不同的标准
曲线,用于确定未知样品的含量。
2. 取样测定:取一定量的样品和标准品,分别放入酶标板的孔中。注
意每个孔的样品量要相同,避免误差。
3. 开始测试:将装有样品和标准品的酶标板放入酶标仪,按下开始按钮,仪器即开始自动化测试。
4. 读取结果:等待一定时间后,酶标仪会自动读取各个孔的吸光度值。记录下每个孔的吸光度值,供后续数据分析使用。
四、数据处理和分析
1. 进行质控:对实验数据进行质控,检查各个样品的结果是否符合期望。如有异常结果,需重新检测或检查实验操作是否正确。
酶标仪使用
酶标仪使用
实验二酶标仪检测金属离子对SOD 酶活性的影响
一实验目的
通过SpectraMax M5 酶标仪的演示使用,了解该型号酶标仪的结构;掌握酶标仪的操作步骤与softMax Pro v5.0.1版本软件的使用。
二实验指导要点
1.酶标仪仪器安装连接
2.仪器使用、保养注意事项
3.软件操作步骤
三仪器设备及实验材料
SpectraMax M5 酶标仪、softMax Pro v5.0.1版本软件、SOD 提取液
四仪器检测参数设定
1 SpectraMax M5 酶标仪构造
酶标仪需要用专门连接线(仪器自带)与电脑连接,并有连接线两边插头、仪器背面的插口和电脑背面的9针串口(COM)。
2仪器使用、保养注意事项
电源要求:酶标仪对电源要求很高,我们要求的电源有接地,并通过不间断电源UPS来对仪器和电脑接点,防止:1)大电流的冲击,2)电压不稳,3)突然断电。
保养要求:
有良好的电源,保持24小时开机。
保持避光和干净的室内环境,维持一定的湿度(30%-80%)。
维持室内比较恒定的温度,以20-22度为最适宜。
适用6-384孔板。96孔微孔板内每孔可检测100-300ul溶液,最佳检测体积为200ul。
384孔微孔板内每孔可检测50-100ul溶液,最佳检测体积为80ul。
检测后的微孔板和比色皿不要长期置于仪器插槽中,检测完后就
从仪器中取出,避免溶液蒸发腐蚀或损坏仪器内部光路系统。如果为有腐蚀性或挥发性溶液,请带盖检测。
对于可见光吸收检测,使用全透明微孔板;紫外光吸收检测,使用紫外可透全透明微孔板;荧光强度和荧光偏振,使用黑色不透明板,需要检测底读的用黑色底透微孔板;化学发光和时间分辨荧光,使用白色不透明微孔板。
荧光酶标仪的用法
荧光酶标仪的用法
荧光酶标仪是一种常用于生物医学研究、药物筛选和临床诊断等领域的高灵敏度检测仪器。它通过检测样本中的荧光信号来定量分析生物活性物质,具有操作简便、检测快速、灵敏度高等优点。本文将详细介绍荧光酶标仪的使用方法及其在各个领域的应用。
一、荧光酶标仪的基本原理
荧光酶标仪的基本原理是利用荧光物质在受到激发光照射后发射出的荧光信号进行检测。荧光酶是一种能够发射荧光的生物活性物质,其发射的荧光信号强度与酶活性成正比。
因此,通过检测荧光信号的强度,可以对生物活性物质进行定量分析。
二、荧光酶标仪的使用方法
1.样本准备:根据实验需求,准备相应的样本,如细胞培
养液、血清、血浆等。确保样本的质量和数量符合实验要求。
2.试剂准备:选择适合的荧光酶底物和反应缓冲液。底物
应与目标酶具有高特异性,以减少背景干扰。反应缓冲液的成分和pH值应根据目标酶的特性进行优化。
3.加样:将样本和试剂按照实验设计加入到酶标板中。确
保加样准确、均匀,避免产生气泡和交叉污染。
4.反应:将酶标板置于荧光酶标仪中,设置合适的温度和
时间进行反应。在反应过程中,荧光酶底物被目标酶催化产生荧光信号。
5.检测:反应结束后,使用荧光酶标仪进行检测。设置合
适的激发波长和发射波长,以获取最佳的荧光信号。根据需要,可以选择单点检测、动力学检测或扫描检测等模式。
6.数据分析:将检测数据导出至电脑,使用专业软件进行
数据分析。根据实验目的和要求,选择合适的统计方法和模型进行处理,得出实验结果。
三、荧光酶标仪的应用领域
1.生物医学研究:荧光酶标仪在生物医学研究中具有广泛
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酶标板
每一个孔代表可以设置的含意
普通(纯数字) = 标本号 空白孔=(BC+N) 阴性孔=(NC+N) 阳性孔=(PC+N) 质控孔=(QC+N)
酶标板
空白对照=(BC1+BC2+BC3…)/N
• 阴性对照=(NC1+NC2+NC3…)/N • 阳性对照=(PC1+PC2+PC3…)/N • Cutoff=Cutoff公值的计算值
酶标仪使用详解
工作原理
酶标仪测定的原理是在特定波长下,检测 被测物的吸光值。在特定波长下测定每一 种物质都有其特定的波长,在此波长下, 此物质能够吸收最多的光能量。如果选择 其它的波长段,就会造成检测结果的不准 确。因此,在测定检测物时,我们选择特 定的波长进行检测,称为测量波长。注意 这里提出了两个关键概念OD值(吸光值) 和波长。
双波长测量介绍
使用参考波长过滤一些环境因素(样本的 浊度、干扰色、噪音、漂移、电压),使结 果更稳定。 使用双波长测量是不需要设置空白孔的。 对一些比较敏感的项目最好使用双波长如 HIV。
双波长测量
只需要设置了参考波长程序就认为当前要 使用双波长进行测量。 难点:
怎样确认当前波片的波长。
阳性公式: OD>=NC*2.5
弱阳性公式
阳性公式: OD>= NC*2.1
CutOff公式
NC*2.1
控制界面
酶标板
酶标板
组成
酶标板是由12*8个孔组成的,每一个孔可以理 解为一个标本。每一板中还需要设置和阳性公 式相关的孔阳性、阴性、空白等。
酶标项目
每一行可以设置一个酶标项目(下拉方式), 可以设置为单板单项和单板多项。
酶标板
模板
可以把当前设置好的酶标板保存为模板,供以 后使用。
标本号设置
可以使用拖动的方式增加标本号,标本号生成 可以分为横行和纵向。
酶标板
酶标板的显示内容
样本编号=标本号 原始OD值=仪器传回来没有减去空白的OD值 (OD值=吸光度值) OD值=根据参数来判断是否要减去空白孔的值 (BC)。 定性值=根据公式计算出孔是阴性、阳性、弱 阳性
常用酶标仪
雷勃-MK3
常用酶标仪
科华ST-360
酶标板
96孔透明酶标板
酶标仪基础设置
增加酶标仪仪器
设置内容
仪器类别
必须选择“酶标仪”
酶标仪设置
波长 振板频率 振板时间 进板方式 空白形式
酶标仪项目设置
项目设置
项目性质
必须选择”酶标仪目”
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
阳性公式
MK3
PC
P 测量 测量结果
MK3
练习
按要求建立酶标项目。(见练习文档提纲 十)
酶标板项目设置
单板单项
一个酶标标只有一个项目,常用于标本量比较 大的时候。
单板多项
一块板可以做多个项目,注意项目是横向排列 的而且每个项目都必须设置公式中需要的阴性 阳性孔。
工作流程
PC
R 连接仪器 OK
MK3
PC
F2 设置波长 OK
MK3
PC
X1 振板频率 OK
MK3
PC
30 振板时间 OK