实验室细胞培养基本知识

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细胞培养知识

细胞培养基础知识

细胞培养基本条件

1、合适的细胞培养基

合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的最重要的条件之一，培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质，而且还提供培养细胞生长和繁殖的生存环境。

2、优质血清

目前，大多数合成培养基都需要添加血清。血清是细胞培养液中最重要的成分之一，含有细胞生长所需的多种生长因子及其它营养成分。

3、无菌无毒细胞培养环境

无菌无毒的操作环境和培养环境是保证细胞在体外培养成功的首要条件。在体外培养的细胞由于缺乏对微生物和有毒物的防御能力，一旦被微生物或有毒物质污染，或者自身代谢物质积累，可导致细胞中毒死亡。因此，在体外培养细胞时，必须保持细胞生存环境无菌无毒，及时清除细胞代谢产物。

4、恒定的细胞生长温度

维持培养细胞旺盛生长，必须有恒定适宜的温度。

5、合适的气体环境

气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一，所需气体主要有氧气和二氧化碳。细胞培养基种类与基本成分

细胞培养基的种类很多，按其来源分为合成培养基和天然培养基（目前使用的培养基绝大部分是合成培养基），按其物质状态分为干粉培养基和液体培养基

两类。干粉培养基需由实验者自己配制并灭菌，液体培养基由专业商家提供，用户可直接使用，非常方便。

1、合成培养基的主要成分有：氨基酸、碳水化合物、无机盐、维生素及其它辅助物质：

氨基酸

氨基酸是组成蛋白质的基本单位。不同种类的细胞对氨基酸的要求各异，但有几种氨基酸细胞自身不能合成，必须依靠培养液提供，这几种氨基酸称为必需氨基酸。其中谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸，在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡。因此，各种培养液中都有较大量的谷氨酰胺。但是，由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20℃冰箱中保存，在使用前加入培养液内。已含谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱中储存2 周以上时，还应重新加入原来量的谷氨酰胺。

中国药科大学新药筛选中心细胞培养基础知识培训材料

培养基产品及FAQ
培养基
• 培养基（Medium）是供微生物、植物和动物细胞生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物 (糖)、氨基酸、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。 •细胞培养液= 基础培养基+10%FBS+营养添加剂+抗生素
细胞培养液= 减血清培养基+2%FBS+营养添加剂+抗生素
如何避免血清出现严重沉淀？
血清有轻微絮状物，但产品比较澄清或略显浑浊是正常现象，但下属操作会致使血清出现严重沉淀，应尽量避免 a.储存不当：反复冻融；长期储存在2-8℃；在室温下放置时间过长 b.不正确地解冻操作，融化时没有混匀。 c.热灭活血清 d.37℃培养血清 e.γ射线辐照
血清常见问题
贴壁细胞培养基本流程
基础培养基 + FBS + 添加剂 + 抗生素去除Media
用PBS或 Trypsin清洗加入Trypsin 以分离贴壁细胞将部分细胞传代到新的 Media中
细胞培养主要成分
①血清 ②基本培养基 ③细胞培养试剂（抗生素、细胞解离，生长因子等） ④平衡盐溶液
血清产品及FAQ
血清的作用
• 血清提供：营养和能量来源生长和粘附因子肽和类固醇激素载体蛋白 • 保护细胞：免受蛋白酶、毒性物质、pH值波动、机械剪切力、氧化及自由基的损伤。

细胞培养技术_第一讲

(3)胶原酶溶液胶原酶在上皮类细胞原代培养时经常使用，胶原酶作用的对象是
胶原组织，因此不容易对细胞产生损伤。
抗生素溶液
通常是青霉素和链霉素联合使用，俗称“双抗溶液”。青霉素主要是对革兰阳性菌有效，链霉素主要对革兰阴性菌有效。加入这两种抗生素可预防绝大多数细菌污染。
培养基内青霉素、链霉素最终使用浓度为每毫升 100单位。
与体内主要不同相对孤立、相对单一、缺乏体内的系统作用、失去神经体液的调节和细胞相互间的影响。
主要表现失去原有组织结构和细胞形态、分化减弱、细胞
趋向单一化。
提示要正确认识体外培养细胞是一种特定条件下生长
的细胞群体。
细胞培养的应用领域
一、在病毒学研究中的应用二、在免疫学研究中的应用三、在分子生物学研究中的应用四、在遗传学研究中的应用五、在药理学研究中的应用六、在毒理学研究中的应用七、在肿瘤学研究中的应用八、在器官移植中的应用九、细胞生物学的基础研究十、细胞工程学的应用研究
细胞培养技术
大连大学医学院郑丛龙
细胞培养技术
绪论
这是一个真核细胞模型 Can you describe it?
绪论
细胞培养的基本概念细胞培养的发展简史细胞培养的优缺点细胞培养的应用领域
细胞培养（cell culture)
细胞培养技术是选用各种细胞的最佳生存条件对活细胞进行体外培养和研究的技术。

实验室细胞培养基本知识

引言：

实验室细胞培养是一种重要的生命科学研究技术，通过体外培养细胞，可以模拟人体内的生理和病理状态，加深对细胞生物学和疾病机制的理解。本文将介绍实验室细胞培养的基本知识，包括培养基的组成、细胞培养的种类、培养条件的调节等方面。

概述：

实验室细胞培养是指在人工设备中，提供合适的环境条件，以维持细胞的生长和增殖。细胞在培养基中不仅可以扩增，还可以进行各种实验室研究，如细胞凋亡、基因表达、药物筛选等。下面将分五个大点详细介绍实验室细胞培养的基本知识。

一、培养基的组成：

1.细胞培养基是由培养基基础组分和辅助组分构成的。基础组分包括无机盐溶液、有机物、能量源、氨基酸等，辅助组分包括生长因子、激素、抗生素等。

2.常用的培养基有DMEM、MEM、RPMI1640等，其组成根据细胞类型和研究目的可有所差异。

3.细胞培养基的pH值、温度和储存条件对细胞生长至关重要，应根据细胞类型调整。

4.无菌技术在培养基制备过程中非常重要，避免细菌和真菌污染对细胞的影响。

二、细胞培养的种类：

1.原代细胞培养是从组织中分离得到的初代细胞，细胞数和传代次数有限。

2.细胞株是从原代细胞培养中筛选得到的具有增殖潜能的细胞系列。

3.基于细胞的特定表型、遗传改造或药物处理的细胞系，可用于特定研究领域，如癌症研究、药物筛选等。

4.三维细胞培养技术可以模拟人体组织的三维结构和功能，提供更接近体内的环境。

三、培养条件的调节：

1.细胞密度是影响细胞生长和增殖的重要因素，应根据细胞类型和实验需求进行优化。

2.培养温度应符合细胞体内温度，通常在37摄氏度下进行。

GIBCO细胞培养基本知识手册(中文版)

什么是细胞培养？ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2 有限细胞系与连续细胞系 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2 培养条件 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2 冻存 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2 培养细胞的形态 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3 细胞培养的应用 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3

微生物的实验室培养

培养基中凝固剂的含量比固体培养基少，培养基中琼脂含量一般为0.2％－0.7％。
常用来观察微生物的运动特征、分类鉴定等
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
固体培养基：菌落
半固体培养基：
无动力
有动力(弥散)
(是否运动)
一、基础知识（一）培养基
4、培养基的种类
（2）按成分来分：天然培养基和合成培养基。
缺点
缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要。
营养成分丰富，培养效果好。
来源受限；成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析；易发生支原体污染。
一、基础知识（一）培养基 4、培养基的种类（3）按用途来分：
选择培养基：加入某种化学物质，从众多微生物中分离出所需微生物
鉴别培养基：加入某种试剂，鉴别不同种类的微生物
当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸。加入蛋白胨和氯化钠，用玻璃棒搅拌使之溶解，再加入琼脂，搅拌，待完全溶解后，加自来水定溶至100mL。（4）灭菌：
将配制好的培养基放到锥形瓶中（瓶口加棉塞，包上牛皮纸），放入高压灭菌锅，… … 。
培养皿（5～8套，用几层报纸包好）放入干热灭菌箱内，… … 。（5）倒平板：待培养基冷却到50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。
试管中，重复步骤2，直至到第六支试管。

细胞培养必备知识

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5. 消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。 6. 分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500~1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。 7. 计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2~7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用 NaHCO3调整。 8. 培养：置于36.5℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞，纱布塞易生霉菌，每次换液时需要换新塞。
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6.用吸管吸取3ml的PBS，打入培养瓶内。烧培养瓶口，来回晃动PBS100次后到掉PBS。重复此操作一次。 7.拿出胰酶瓶子，烧瓶口和镊子；用镊子将塞子取出，烧瓶口（至少10圈）。 8.用吸管吸取1ml的胰酶，打入培养瓶内，烧培养瓶口和盖子，盖上盖子； 9.拿出工作台外，在倒置显微镜下观察细胞，然后用酒精棉球擦瓶口及瓶身，放入培养箱内；5分钟后取出；
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材料和试剂 1. 细胞：贴壁细胞株 2. 试剂：0.25％胰酶、1640培养基（含10 ％小牛血清） 3. 仪器和器材：倒置显微镜，培养箱、培养瓶、吸管、废液缸等

细胞培养基础知识

潜伏期
此时细胞有生长活动，而无细胞分裂。细胞株潜伏期一般为6～24小时。
对数生长期：
细胞数随时间变化成倍增长，活力最佳，最适合进行实验研究。
停止期（平台期பைடு நூலகம்：
细胞长满瓶壁后，细胞虽有活力但不再分裂
机制：接触抑制、密度依赖性
培养细胞生长的条件
1 细胞的营养需要
2 细胞的生存环境
温度: 37 ℃
http://www.genemedicine.com.cn/cell_catalog.asp 6.中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库
• http://www.cellbank.org.cn/ • 7.南京中医药大学新药及海洋药物研究中心药理毒理研究室细胞库目录
http://202.195.210.5/web/keyanziyuan/haiyangcell1.htm • 8.中国医学科学院基础医学研究所细胞中心保藏细胞目录
培养细胞的特性
培养细胞的生长方式
贴附生长：必须贴附于支持物表面才能生长。见于各种实体瘤
细胞悬浮生长：
于悬浮状态下即可生长，不需要贴附于支持物表面。见于各种造血系统肿瘤细胞
每代贴附生长细胞的生长过程
游离期贴壁期潜伏期对数生长期停止期（平台期）
游离期：
细胞接种后在培养液中呈悬浮状态．也称悬浮期。此时细胞质回缩，胞体呈圆球形。

细胞培养基本知识

1 细胞培养细胞培养是生物医学中的一项重要技术，应用较为广泛，渗透到细胞生物学、生物化学、临床检验学等各个领域。 1.1 细胞的来源可直接来自人或动物组织，也可间接来自于细胞系。前者直接来自生物体，各项生物指标更接近于在体情况；但一般细胞的提取过程较繁冗，而且大多数细胞只能原代培养或只能传1~2代，如人血管内皮细胞、小鼠神经细胞等；细胞系的好处是较为方便，可直接购买使用，免去了分离过程，一般可较稳定地传代，但其生物学指标与在体情况有一定差异。 1.2 细胞培养的实验室要求细胞培养要求较高，目的是使细胞能在无菌条件下存活。提取细胞的手术器具在每次使用之前应高温、高压消毒，配培养液的水要求用灭菌双蒸水并加入双抗。所用培养瓶、离心管等器皿最好为一次性。要在无菌室超净台上操作。每次操作之前，要用紫外灯照射工作台20-30min，然后将手洗干净，换拖鞋进入无菌间，将手用新洁尔灭喷洗一遍再操作。 2 以人血管内皮细胞为例说明细胞培养由于细胞本身性质不同，其分离和培养方法也会有差异。其来源一般是新鲜脐带的脐静脉（来自于产后24h以内），具体的分离方法是：取新生儿脐带血(25 cm左右)，放入含青、链霉素各100U/mL的灭菌PBS中，4C保存，24h内进行实验。 2.1. 取材和原代培养在脐静脉的两端各插入一支磨平的注射器针头，用止血钳夹住脐带以防针头滑出，用注射器从异端的针头注入PBS冲洗血管，直到流出PBS无明显血迹，用PBS将残留血液冲洗干净，以充分暴露内皮细胞。注入0.1?(g/L)胶原酶溶液(用PBS配制)，待血管内残留PBS流尽后，用注射器封住另一端针头，继续注入胶原酶，充盈血管，于室温下消化20-30min，掌握好消化时间，否则，时间太短会致消化不完全，造成浪费；时间太长，可能会将平滑肌细胞一并消化下来，造成生物污染，干扰内皮细胞的生长。将消化液打入无菌的离心管中，离心(800r/min, 8min)。轻轻吸出上清液，加5mL培养液于离心管中悬浮细胞。加2mL纤粘连蛋白（1mg/mL）于培养瓶中，铺均匀后，吸出剩余液体，放置片刻，将细胞种入培养瓶，置CO2孵育箱培养，24h后换液一次，以后每48h换液一次，4-6天汇合成内皮单层。消化时间要掌握好，若时间太短会致消化不完全，造成浪费；时间太长，又会将平滑肌细胞一并消化下来，造成生物污染，干扰内皮细胞的生长。 2.2. 传代当培养瓶内内皮细胞形成致密单层时，进行传代。PBS冲洗细胞2次，加0.125?(g/L)胰蛋白酶/0.02?(g/L)EDTA?Na2 1mL消化细胞，显微镜下可观察到细胞立即收缩、变圆，当观察到

细胞培养的知识

标签：细胞培养无菌环境常用培养器皿清

洗消毒杂谈

细胞培养的无菌环境

一、无菌室

无菌室的结构：一般由更衣间、缓冲间、操作间三部分组成。

无菌室的消毒和防污染：为保持无菌状态，经常消毒是必要的，通常采用每日（使用前）紫外照射（1－2h），每周甲醛、乳酸、过氧乙酸熏蒸（2h）和每月新洁尔灭擦拭地面和墙壁一次的方式进行消毒。实际工作中，要根据无菌室建筑材料的差异来选择合适的消毒方法。

此外，还应注意防止无菌室的污染。造成无菌室污染的可能包括：送入无菌室的风没有被过滤除菌；进出无菌室时，能使外界空气直接对流进无菌室的操作间；等。

二、超净工作台

工作原理：鼓风机驱动空气通过高效过滤器得以净化，净化的空气被徐徐吹过台面空间而将其中的尘埃、细菌甚至病毒颗粒带走，使工作区构成无菌环境。根据气流在超净工作台的流动方向不同，可将超净工作台分为侧流式、直流式和外流式三种类型。

超净台的使用与保养：超净台的平均风速保持在为宜，过大、过小均不利于保持净化度；使用前最好开启超净台内紫外灯照射10－30min，然后让超净台预工作10－15min，以除去臭氧和使用工作台面空间呈净化状态；使用完毕后，要用70%酒精将台面和台内四周擦拭干净，以保证超净台无菌。还要定期用福尔马林熏蒸超净台。

常用培养器皿及清洗消毒

细胞培养需要大量消耗性物品，如玻璃器皿、金属器皿、塑料、橡胶制品、布类、纸类等，因此掌握清洗、消毒知识，学会清洗、消毒方法是从事细胞培养工作必须的。

一、清洗离体条件下，有害物质直接同细胞接触，细胞对任何有

害物质十分敏感，极少残留物都可以对细胞产生毒副作用。因此，新的或重新使用的器皿都必须认真清洗，达到不含任何残留物的要求。

细胞实验室培训计划

一、培训目标

1. 建立良好的实验室安全意识，规范操作流程，确保实验室安全。

2. 掌握细胞培养的基础知识和技能，能够独立进行细胞培养和分离。

3. 熟练掌握细胞实验操作的基本技能，包括PCR、Western blot等。

4. 培养科研思维和动手能力，提高实验数据可靠性。

5. 培养团队合作精神，提高实验室整体效率。

二、培训内容

1. 安全意识培训：实验室的常见危险和预防措施、应急预案、废弃物处理等。

2. 细胞培养基础知识和技能：包括细胞培养基本原理、培养条件、培养物制备等。

3. 细胞分离技术：包括贴壁法、离心法、流式细胞术等。

4. 细胞实验操作技能：包括PCR扩增技术、Western blot技术等。

5. 科研思维和动手能力培养：实验设计、数据分析和结果解读。

6. 团队合作意识培养：团队沟通、合作和协作技巧。

三、培训方式

1. 理论培训：通过专业讲师授课、讲解PPT、视频等方式传授基础知识和技能。

2. 实践操作：学员进行实验操作练习，由专业人员进行现场指导和指导。

3. 小组讨论：针对实验中出现的问题和困难，开展小组讨论，共同解决。

4. 学员交流：学员之间开展交流，分享经验和心得体会。

四、培训计划

1. 第一阶段（两周）：安全意识培训、细胞培养基础知识和技能培训。

2. 第二阶段（两周）：细胞分离技术培训、细胞实验操作技能培训。

3. 第三阶段（两周）：科研思维和动手能力培训、团队合作意识培训。

五、培训评估

1. 知识考核：培训结束后进行理论知识考核，通过达到一定分数才能获得证书。

2. 操作技能考核：学员进行细胞培养、细胞分离等实验操作，由专业人员进行实际操作考核。

细胞培养基本知识基本技术

• 饱和密度：在特定条件下，培养器皿内能
达到的最高细胞数，当细胞达到饱和密度后细胞群体停止繁殖。
• • • •
潜伏期/滞留期指数增长期平台期/停滞期退化或死亡
• 细胞系的生长过程
• 细胞系：原代培养细胞经首次传代成功后即成为
细胞系，可泛指一般可以传代的细胞。
• 细胞株：通过筛选或克隆化，从原代细胞或细胞
• 高等生物体，细胞周期时间的长短变化主要集中在G1期，S，G2和M期基本保持稳定。
• Hela 8-16h 5-9h 2-8h
20-28h
一群细胞的增殖：细胞生长曲线
• 接种后，每天进行检测计数，以细胞数为纵坐标，以时间为横坐标，绘制成曲线。
• 测定细胞绝对生长数的常用方法，也是判定细胞活力的重要指标，是培养细胞生物学特性的基本参数之一。
温度
• 体外培养的细胞需要在保持一定恒温的环境中才能生长。在达到最适温度（37°）前，一般细胞繁殖率因温度的升高而增加，但是，温度逐步升高并超过最适温度时，繁殖会被抑制。 • 当温度在25°- 35°，细胞的生长速度很慢，但能够生存；细胞在4°也能存活数天；只要温度不低于0°，细胞都能生存；加了保护剂还能放到液氮中保存。 • 当高温时，在41°- 42°中培养1h，细胞损伤严重，43°以上，则多数细胞死亡。 • 高温比低温对细胞的影响更为明显。

医学实验中细胞培养的基本操作教程

细胞培养是医学实验中常用的技术手段，可以通过培养细胞体外研究细胞结构、功能、代谢以及疾病的发病机制。本文将介绍医学实验中细胞培养的基本操作教程，包括无菌操作、细胞传代和细胞培养基的制备。

一、无菌操作

1. 器具准备：将工作区域和培养器具用70%乙醇喷雾消毒，将所需器具放入无

菌工作台，待干燥后再进行后续操作。

2. 细胞培养基准备：将所需的细胞培养基放入无菌环境中，根据实验需求添加

适量的血清、抗生素等。

3. 细胞取样：取出培养物中所需的细胞，使用吸管或移液器将细胞转移到无菌

的培养基中。

4. 细胞传播：将细胞和培养基混合均匀后，转移到培养皿或培养瓶中，注意避

免皿壁的污染。

5. 无菌操作结束：将使用过的培养器具进行无菌处理，清理工作区域并进行必

要的消毒。

二、细胞传代

1. 始代细胞收获：当细胞在培养器中达到一定密度后，使用细胞解离液将细胞

从底物上解离下来。

2. 离心：将解离的细胞转移到离心管中，以适当的转速离心沉淀细胞。

3. 上清液去除：倒掉离心管中上清液，注意尽量不要干扰到细胞沉淀。

4. 细胞悬浮液制备：使用无菌PBS洗涤离心沉淀的细胞，再添加适量的细胞

培养基将其悬浮均匀。

5. 细胞传代操作：将悬浮细胞转移到新的培养器具中，注意避免气泡的产生，

并将培养基置于CO2孵化箱中培养。

三、细胞培养基的制备

1. 培养基组成：根据实验需求，制备含有特定成分的培养基，如DMEM、RPMI 1640等。

2. 液体消毒：将容器进行高温高压灭菌，确保培养基的无菌。

3. 配方调整：按照实验需求向培养基中添加适量的血清、抗生素、谷氨酸等。

细胞培养实验注意事项

细胞培养是生物学研究中常用的实验技术之一，它可以为科学家提供大量的细胞供应，用于研究细胞的生理、生化和分子生物学特性。然而，细胞培养实验需要严格的操作和注意事项，以确保实验结果的准确性和可靠性。本文将介绍一些细胞培养实验中需要注意的事项。

1. 实验室环境和设备：

在进行细胞培养实验前，必须确保实验室环境清洁、无菌，并且符合细胞培养的要求。实验室应定期消毒，工作台面和设备应经过高温高压灭菌处理。此外，实验室内应有恒温箱、培养箱、显微镜等设备，以满足不同实验的需求。

2. 细胞培养物的选择：

在选择细胞培养物时，应根据实验目的和所需细胞类型的特性进行选择。常用的细胞培养物包括DMEM、RPMI 1640等。此外，还需要添加适当的添加剂，如胎牛血清、抗生素等，以促进细胞的生长和增殖。

3. 细胞的处理和传代：

在进行细胞培养实验前，必须正确处理细胞。首先，需要用消毒液将工作台面和培养器具消毒，然后用PBS缓冲液洗涤细胞。接下来，用胰酶或胰蛋白酶等酶解剂处理细胞，使其离解，以便进行传代或实验。传代时，应注意细胞的密度和培养时间，以避免细胞过度增殖或老化。

4. 培养基的更换：

细胞培养基的更换是细胞培养过程中的重要环节。一般情况下，细胞培养基每2-3天更换一次。更换培养基时，应使用预先预热的培养基，并将旧的培养基完全吸出，以避免细胞受到污染。

5. 细胞的冻存和解冻：

细胞冻存是为了长期保存细胞，并在需要时进行解冻使用。在进行细胞冻存前，应将细胞培养至适当的密度，并添加适当的冻存液，如DMSO。冻存过程中，应

实验学知识点总结

实验学是一门跨学科的学科，涉及物理、化学、生物和地球科学等领域。通过实验学，我

们可以通过实践来探索自然界的规律，并且可以用实验来验证已有的理论，或者发现新的

现象和规律。实验学是一种重要的科学研究方法，也是学习自然科学知识的重要手段。

在实验学的学习过程中，有一些重要的知识点和原理是必须要掌握的。下面将对实验学中

一些重要的知识点进行总结。

一、物理实验学知识点总结

1. 测量方法

物理实验中，测量是非常重要的一环。在进行物理实验时，我们经常需要测量长度、时间、质量、温度等物理量。在测量过程中，应该遵循一些基本的原则，比如准确度、精确度、

误差分析等。此外，还需要了解一些特定实验测量方法，比如利用量筒测量液体体积、利

用天平测量质量等。

2. 牛顿力学原理

牛顿力学是物理学中最基础的学科之一，它描述了物体在受力作用下的运动规律。在进行

物理实验时，我们往往需要利用牛顿的三大定律来分析实验结果，推导出实验现象背后的

物理规律。

3. 光学实验

光学实验是物理实验中的重要内容之一。在光学实验中，我们可以通过各种仪器测量光的

反射、折射、干涉、衍射等现象，从而加深对光学原理的理解。

4. 电学实验

电学实验是物理学中的另一个重要领域。在电学实验中，我们可以通过各种仪器来测量电场、电势、电流、电阻等物理量，了解电学原理，并且可以通过实验来验证欧姆定律、各

种电路规律等。

5. 热学实验

在热学实验中，我们可以研究热传导、热膨胀、热容等热力学现象，了解热学原理，并且

可以通过实验来验证热学定律。

以上是物理实验学的一些重要知识点，通过学习这些知识点，我们可以更好地进行物理实验，并且加深对物理学原理的理解。

细胞培养原理

细胞培养是生物学研究中非常重要的一项技术，它可以帮助科学家们更好地理

解细胞的生长、分化和功能。在细胞培养中，细胞被放置在含有营养物质的培养基中，并提供适当的温度、湿度和气体环境，以促进细胞的生长和增殖。细胞培养的成功与否直接影响着细胞生物学实验的结果，因此了解细胞培养的原理对于科研工作者来说至关重要。

首先，细胞培养的基本原理是提供一个类似于体内环境的培养条件，使细胞可

以在其中生长和繁殖。培养基是细胞培养的基础，它通常包括营养物质、生长因子、激素、维生素和抗生素等成分，以满足细胞生长和增殖的需要。培养基的配方因细胞类型而异，不同类型的细胞需要的营养成分和生长因子也各不相同。

其次，细胞培养需要提供适当的生长环境。温度、湿度和气体环境是影响细胞

生长的重要因素。一般来说，细胞培养室内的温度控制在37摄氏度，湿度保持在95%以上，这样有利于细胞的生长和增殖。此外，细胞还需要适当的气体环境，例

如含有5%二氧化碳的空气，以维持细胞内外环境的稳定。

细胞培养的原理还包括细胞的传代和检测。在细胞培养过程中，细胞会不断地

进行增殖，当细胞密度达到一定程度时，需要进行传代，即将细胞从原来的培养瓶中移植到新的培养瓶中，以保持细胞的健康和活力。此外，细胞的检测也是细胞培养中必不可少的一环，通过形态学、生物学和分子生物学等方法对细胞进行检测，以确保细胞的纯度和稳定性。

总的来说，细胞培养的原理是提供一个适合细胞生长和增殖的环境，包括培养

基的配制、生长环境的控制、细胞的传代和检测等方面。只有在这样的条件下，细胞才能够健康地生长和增殖，为生物学研究提供可靠的实验材料。因此，掌握细胞培养的原理对于细胞生物学研究具有重要意义，也是细胞培养技术成功的关键。