实验六 家兔离体小肠平滑肌生理特性及药物作用的观察
实验五-离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察-(2)
实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察【实验目的】学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性,对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。
【实验材料】实验动物:家兔,2.0-2.5kg实验药品:台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
实验器材:恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、张力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。
【实验步骤】1.恒温浴槽的准备工作;2.标本制备;3.仪器连接与设置;4.启动计算机,打开BL-420生物信号系统,调节参数,开始记录。
观察项目1.自动节律性收缩,描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线,观察其节律性收缩及张力水平。
2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
(1)乙酰胆碱的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
作用产生后,洗涤三次,进行下一项实验。
(2)阿托品的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的阿托品溶液2~3滴,两分钟后,再加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
与(1)比较结果后,洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
去甲肾上腺素的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的去甲肾上腺素2~3滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
4.观察钙离子对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1%的氯化钙溶液2~3滴,观察肠管平滑肌的反应。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
5.观察酸碱度对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1mol/l的盐酸溶液1~2滴,观察平滑肌的反应,待作用出现明显后,在此基础上,加入1mol/l的NaOH溶液1~2滴,观察平滑肌的反应。
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察实验目的:学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分,酸碱度,温度,乙酰胆碱,肾上腺素等药物对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
实验原理:消化道平滑肌具有自动节律性,较大的伸展性,对化学物质,温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。
将离体的组织,器官置于模拟的内环境中,可在一定时间内保持其功能,从而为我们检测它们的生理学和药理学特性提供了便利的条件。
功能和维持的时间长短与模拟内环境的精确性和稳定性有关。
实验动物:家兔,体重2.0~~2.5kg,雌雄不拘。
实验器材:台氏液,0.01%肾上腺素溶液,0.01%乙酰胆碱溶液,0.01%阿托品溶液,1mol/L盐酸溶液,1mol/L氢氧化钠溶液。
恒温平滑肌槽,小烧杯,丝线,温度计,张力换能器,污物杯,双凹夹。
实验步骤:1..处死动物2.制备肠段标本注意事项:1.肠管勿牵拉过紧或过松,且连线必须垂直,且不得与浴槽的管壁,通气塑料管接触,以免摩擦。
2.浴槽中液体的量以高过肠段为准,并保持液面高度一致。
3.药物应滴在肠管附近,药物要事先预热至38度。
各药用量系参考剂量,若效果不明显,可以增补加药,但不可一次过多,以免引起不可逆反应。
4.每次加药出现反应后,必须立即更换浴槽内的台氏液至少三次,待肠管恢复稳定活动后,再观察下一项目。
实验结果:1.正常情况下,离体小肠平滑肌在台氏液中可以自由缓慢收缩,但其节律性不规则。
在浴槽中加入乙酰胆碱后可见离体肠管活动增强,描计曲线出现收缩频率变快,幅度增加。
出现上述现象是因为消化道平滑肌产生动作电位的离子基础与钙离子的内流有关,乙酰胆碱可与肌膜上的M受体结合,使得两类通道开放:一类为电位敏感性钙离子专用通道,另一类为特异性受体活化钙离子专用通道。
前一类对Ach敏感,小剂量Ach即引起开放;后一类对Ach相对不敏感,只有大剂量才会引起开放。
这两类通道开放都使得肌浆中钙离子增高,进而激活肌纤蛋白—肌凝蛋白—ATP系统,使平滑肌收缩,肌张力增加。
实验五-离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察-(2)
实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察【实验目的】学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性,对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。
【实验材料】实验动物:家兔,2.0-2.5kg实验药品:台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
实验器材:恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、张力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。
【实验步骤】1.恒温浴槽的准备工作;2.标本制备;3.仪器连接与设置;4.启动计算机,打开BL-420生物信号系统,调节参数,开始记录。
观察项目1.自动节律性收缩,描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线,观察其节律性收缩及张力水平。
2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
(1)乙酰胆碱的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
作用产生后,洗涤三次,进行下一项实验。
(2)阿托品的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的阿托品溶液2~3滴,两分钟后,再加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
与(1)比较结果后,洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
去甲肾上腺素的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的去甲肾上腺素2~3滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
4.观察钙离子对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1%的氯化钙溶液2~3滴,观察肠管平滑肌的反应。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
5.观察酸碱度对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1mol/l的盐酸溶液1~2滴,观察平滑肌的反应,待作用出现明显后,在此基础上,加入1mol/l的NaOH溶液1~2滴,观察平滑肌的反应。
实验六 家兔离体小肠平滑肌生理特性及药物作用的观察
实验原理
2. 消化道的神经支配
肌间神经丛
内在神经
(壁内神经丛) 粘膜下神经丛
控制消化道运动
消化道腺体分泌、肠内物 质吸收、局部血流控制
外来神经
交感神经
+乙酰胆碱
截图并 清洗3遍
+阿托品
+乙酰胆碱
不洗
截图
并清 洗3 遍
4.观察项目
实验步骤
3)观察肾上腺素能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响 去甲肾上腺素(第4张图); 酚妥拉明后去甲肾上腺素(第5张图)
+去甲肾上腺素
截图并 清洗3遍
+酚妥拉明 不洗
+去甲肾上腺素 截图 并清
洗3 遍
4.观察项目
实验步骤
4)观察氯化钙对肠段收缩的影响 无钙台氏液 (第6张图)
台氏液
先恢复相对正常的波形,在将 其中的台氏液换成无钙台氏液
无钙台氏液
截图 并清
洗3 遍
4.观察项目
实验步骤
5)观察温度对肠段收缩的影响 室温台式液 (第7张图)
先恢复相对正常的波形,在将 其中的台氏液换成室温台氏液
截图 保存
台氏液
室温台氏液
实验步骤
1.准备工作
1)外面大槽中添 加自来水;
2)内部4个小槽均 添加台氏液;
3)调节温度至 38℃,加热,备用。
实验步骤
2.标本制备
1)取十二指肠及其邻近上 段小肠(约20-30cm),温 热台氏液洗净肠3-4cm,每组取一段 至于温热台氏液中。
家兔小肠平滑肌实验报告
家兔小肠平滑肌实验报告家兔小肠平滑肌实验报告引言:实验目的是通过观察家兔小肠平滑肌的收缩反应,探究平滑肌在生理条件下的功能和特性。
平滑肌是一种非志愿性肌肉,存在于消化道、血管和呼吸道等内脏器官中,对于维持正常的生理功能至关重要。
材料与方法:1. 实验动物:选取健康的家兔作为实验对象,确保其生理状态正常。
2. 实验设备:使用生理记录仪、平滑肌收缩力测定仪等设备。
3. 实验药物:采用乙酰胆碱作为刺激剂,用于引发平滑肌收缩反应。
实验过程:1. 准备工作:将家兔置于适宜的实验环境中,确保其舒适和安全。
2. 实验操作:通过生理记录仪记录家兔小肠平滑肌的收缩情况,同时使用平滑肌收缩力测定仪测量肌肉收缩力的变化。
3. 实验刺激:将乙酰胆碱溶液注入家兔小肠,观察平滑肌收缩的变化,并记录数据。
实验结果:在实验中观察到家兔小肠平滑肌对乙酰胆碱的刺激产生了收缩反应。
随着乙酰胆碱浓度的增加,平滑肌的收缩力逐渐增强。
而在乙酰胆碱浓度过高时,平滑肌收缩力出现饱和现象,即增加乙酰胆碱浓度不再引起明显的增强效果。
讨论与分析:1. 平滑肌的收缩特性:实验结果表明,家兔小肠平滑肌对乙酰胆碱的刺激具有明显的收缩反应。
这说明平滑肌在生理条件下具有较高的收缩能力,从而可以推动消化道的蠕动和物质的传输。
2. 乙酰胆碱的作用机制:乙酰胆碱是一种神经递质,在神经末梢释放后能够与平滑肌细胞上的乙酰胆碱受体结合,从而引发平滑肌的收缩反应。
实验结果验证了乙酰胆碱对平滑肌的刺激作用。
3. 平滑肌收缩力的调节:平滑肌收缩力的增强和饱和现象表明,平滑肌收缩力受到调节。
可能存在其他调节因子或机制,如神经调节、激素调节等,这些因素可能对平滑肌的收缩产生影响。
结论:通过本次实验,我们观察到家兔小肠平滑肌对乙酰胆碱的刺激产生了收缩反应。
这一实验结果揭示了平滑肌在生理条件下的收缩特性和调节机制。
进一步的研究可以探究其他调节因素对平滑肌收缩的影响,以及平滑肌在疾病状态下的变化,为相关疾病的治疗提供理论依据和实验基础。
实验五_离体小肠平滑肌的生理特性与药物作用的观察_(2)
实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察【实验目的】学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性,对化学物质、温度及牵刺激较为敏感等生理特性。
【实验材料】实验动物:家兔,2.0-2.5kg实验药品:台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
实验器材:恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。
【实验步骤】1.恒温浴槽的准备工作;2.标本制备;3.仪器连接与设置;4.启动计算机,打开BL-420生物信号系统,调节参数,开始记录。
观察项目1.自动节律性收缩,描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线,观察其节律性收缩及力水平。
2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
(1)乙酰胆碱的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管力和收缩有何变化。
作用产生后,洗涤三次,进行下一项实验。
(2)阿托品的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的阿托品溶液2~3滴,两分钟后,再加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管力和收缩有何变化。
与(1)比较结果后,洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
去甲肾上腺素的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的去甲肾上腺素2~3滴,观察肠管力和收缩有何变化。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
4.观察钙离子对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1%的氯化钙溶液2~3滴,观察肠管平滑肌的反应。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
5.观察酸碱度对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1mol/l的盐酸溶液1~2滴,观察平滑肌的反应,待作用出现明显后,在此基础上,加入1mol/l的NaOH溶液1~2滴,观察平滑肌的反应。
家兔离体小肠平滑肌生理特性
家兔离体小肠平滑肌生理特性[实验目的]1.通过观察各种因素对离体小肠平滑肌运动的影响,加深对平滑肌生理特性的了解。
2.学习动物离体组织器官灌流的实验方法。
[实验原理]消化管、血管、子宫、输尿管、输卵管等均由平滑肌组成。
平滑肌除具有肌肉的一般生理特性外,还具有自动节律性、较大的伸展性及对化学、温度和牵拉刺激敏感等生理特性。
在一定时间内,离体的小肠平滑肌在适宜的环境中仍可保持其生理功能。
本实验将小肠平滑肌置于模拟内环境中,观察当模拟内环境因素发生变化时,离体小肠平滑肌运动的变化。
该实验方法不仅在理论上可以证明平滑肌的生理特性,而且还可用来测定微量化学物质或药物的生物学特性,被称为生物学检定法。
[器械与材料]兔(大白鼠或鸭)、恒温平滑肌浴槽、计算机生物信号采集处理系统(或二道生理记录仪)、张力换能器、哺乳动物手术器械一套、注射器、纱布、棉线、丝线、万能支架、螺旋夹、双凹夹、温度计、细塑料管(或橡胶管)、长滴管。
缝针、培养皿、台氏液、肾上腺素(1∶10000)、乙酰胆碱(1∶100000)、0.5mg/ml 阿托品、0.01%磷酸组织胺、1mol/LNaOH、1mol/LHCI、1%BaCl2。
1%CaCl2、心得安、阿托品、自己准备可影响消化的药物。
[方法与步骤]1.恒温平滑肌槽的准备首先注水于水浴槽,浸漫度务必超过2支加热管。
然后在药液管及预液管加适量台氏液,二通开关是用于接通预液管和药液管之间的台氏液,使预液管预温的台氏液通向药液管。
恒温仪上的加温旋钮置于所需的温度约40℃(此温度是水浴槽中加热管旁的水温,与药液管内的温度相差2~3℃),为了药液管内的温度得到准确控制,须采用外加温度计调整。
最后打开供氧开关,即可产生空气气泡供氧,微调旋钮调节使气泡一个接一个不断涌出,不能过快以免液面振动而影响记录。
肌槽的右侧面有与预液管、药液管相通的出液管,用弹簧夹控制出液量。
2.水浴里的水恒温38℃,营养管内充满台氏液。
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察实验报告
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察一、实验目的: ①进一步熟悉BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统;②学习离体肠肌的实验装置和使用方法;③观察并记录传出神经系统药物以及酸碱对离体小肠平滑肌收缩的影响二、实验对象:家兔离体小肠肠管。
三、实验原理:消化道平滑肌具有自动节律性运动的特性,其产生机理源于其肌肉细胞本身的自发缓慢放电并受中枢神经系统及体液因素的调节,所以可以取离体的小肠肠管并放置于人工创造的正常生理环境下,利用BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统和换能器系统分别研究传出神经系统药物以及酸碱对小肠平滑肌收缩的影响。
四、实验记录与分析㈠图(一)图(一)表示小肠由38度台氏液到室温下其平滑肌收缩曲线变化情况从图(一)可以看出小肠所处温度降到室温时明显减弱,因为平滑肌收缩需要酶催化,而温度在一定范围内下降时钠钾泵及离子通道的酶的催化活性也会降低,这就可以影响钠钾钙等离子的转运,继而影响去极化和复极化的速度,进而动作电位的产生速率和幅度就会下降,所以平滑肌的收缩程度会减弱。
㈡图(二)图(二)表示在38度台氏液加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩曲线的变化情况由图(二)可知加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩明显减弱,这是因为肾上腺素与小肠平滑肌肌膜上的β肾上腺素能受体结合,可导致使膜超极化,从而使膜去极化达到阈电位的幅度增加,所以其动作电位的产生频率下降,所以小肠平滑肌的收缩幅度减弱。
㈢图(三)图(三)表示在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱的小肠平滑肌收缩曲线变化情况由图(三)可知在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩明显增强,这是应为乙酰胆碱与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合后,可以在膜去极化未达到一定的电位时提前激活更多的慢钙通道,使大量的钙离子内流,进而使动作电位产生的频率增加,所以小肠的平滑肌收缩增强。
㈣图(四)图(四)表示在正常38度台氏液先滴加阿托品,三十秒后再加乙酰胆碱的小肠收缩变化情况由图(四)可知小肠平滑肌的收缩无明显的变化,这是因为阿托品作为平滑肌肌膜上M受体抗结剂与M受体结合了,在滴加阿托品三十秒后再滴加乙酰胆碱,乙酰胆碱不能与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合,就不能引起小肠平滑肌的兴奋性效应,所以其收缩没什么明显改变。
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察实验报告
㈠
图(一)
图(一)表示小肠由38度台氏液到室温下其平滑肌收缩曲线变化情况
从图(一)可以看出小肠所处温度降到室温时明显减弱,因为平滑肌收缩需要酶催化,而温度在一定范围内下降时钠钾泵及离子通道的酶的催化活性也会降低,这就可以影响钠钾钙等离子的转运,继而影响去极化和复极化的速度,进而动作电位的产生速率和幅度就会下降,所以平滑肌的收缩程度会减弱。
㈤
图(五)
图(五)为在正常38度台氏液里滴加盐酸几秒后再滴加氢氧化钠的小肠收缩曲线变化情况
由图(五)可知在滴加盐酸后小肠平滑肌收缩明显减弱,这是因为加入盐酸后,小肠所处环境的氢离子浓度升高,氢离子可以影响慢钙通道的开放,是钙离子内流减少,进而影响动作电位产生的频率;另外氢离子能与钙离子竞争钙调蛋白结合的位点,使肌凝蛋白ATP酶活性下降、肌纤蛋白对钙离子的敏感性下降,肌质网释放钙离子的量减少,能干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化过程,所以小肠的平滑肌收缩显著减弱。当过几秒后加入氢氧化钠后中和了氢离子,使小肠所处的环境恢复正常,所以其收缩慢慢趋于正常。
㈢
图(三)
图(三)表示在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱的小肠平滑肌收缩曲线变化情况
由图(三)可知在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩明显增强,这是应为乙酰胆碱与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合后,可以在膜去极化未达到一定的电位时提前激活更多的慢钙通道,使大量的钙离子内流,进而使动作电位产生的频率增加,所以小肠的平滑肌收缩增强。
㈣
图(四)
图(四)表示在正常38度台氏液先滴加阿托品,三十秒后再加乙酰胆碱的小肠收缩变化情况
由图(四)可知小肠平滑肌的收缩无明显的变化,这是因为阿托品作为平滑肌肌膜上M受体抗结剂与M受体结合了,在滴加阿托品三十秒后再滴加乙酰胆碱,乙酰胆碱不能与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合,就不能引起小肠平滑肌的兴奋性效应,所以其收缩没什么明显改变。
离体肠段平滑肌的生理特性
实验六离体肠段平滑肌的生理特性【原理】哺乳动物消化管平滑肌具有肌组织共有的特性,如兴奋性、传导性和收缩性等。
但是消化道平滑肌肉有其特点,即兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有紧张性、自动节律性,对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。
将离体组织器官至于模拟体内环境的溶液中,可以在一定时间内保持其功能。
本实验以台氏液作灌流液,在体外观察及记录家兔离体肠段的一般生理特性。
取离体兔肠段置于台氏液中,用计算机采集系统扫描其收缩曲线,假如肾上腺素、乙酰胆碱、阿托品等不同的化学药物,观察他们对于离体肠段收缩的影响。
通过这种观察,学习离体肠段平滑肌的实验方法,分析消化馆平滑肌组织的特性,如兴奋性、传导性和收缩性等。
【实验步骤与结果】1.如右图装好实验装置,麦氏浴槽外的水浴温度为37℃,浴槽内调温至37±0.5℃. 2.制备离体兔肠段用立掌(或木槌)猛击兔后头延髓部,致其昏迷后立即剖开腹腔,找到胃幽门与十二指肠交界处。
在十二指肠起始端扎一线,剪取十二指肠、空肠,放入冷台氏液内。
先用20m1注射器冲洗肠内容物,冲洗干净后剪成若干约1.5cm长的小肠段(每一实验小组一段)。
在其两端结扎,一端做一短线环固定在通气的L管下方或浴皿内,另一端扎线与张力传感器相连。
将肠段完全浸浴在调好温度的麦氏浴槽中,并调整好台氏液充气量(小气泡接连不断)。
游离及取出肠段时,动作要快,取兔肠及兔肠穿线时,尽可能不用金属及手指触及。
为保持离体肠段的活性,可先预冷充氧的营养液,游离肠段及穿线在预冷的营养液中进行。
实验中始终要通气。
3.开启计算机采集系统,接通与张力传感器相连的通道。
固定L管并调节扎线与张力传感器,使肠段运动自如又能牵动传感器(注意:扎线不可贴壁或过紧过松)。
调节增益与扫描速度,使肠段的运动曲线清晰地显示在显示器上并记录肠段活动曲线。
4.实验观察(1)记录对照肠段运动曲线后,加入2滴肾上腺素(1:10 000),观察并记录曲线变化。
实验五-离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察-(2)
实验五-离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察-(2)实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察【实验目的】学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性,对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。
【实验材料】实验动物:家兔,2.0-2.5kg实验药品:台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
实验器材:恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、张力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。
【实验步骤】1.恒温浴槽的准备工作;2.标本制备;3.仪器连接与设置;4.启动计算机,打开BL-420生物信号系统,调节参数,开始记录。
观察项目1.自动节律性收缩,描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线,观察其节律性收缩及张力水平。
2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
(1)乙酰胆碱的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
作用产生后,洗涤三次,进行下一项实验。
(2)阿托品的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的阿托品溶液2~3滴,两分钟后,再加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
与(1)比较结果后,洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
去甲肾上腺素的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的去甲肾上腺素2~3滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
4.观察钙离子对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1%的氯化钙溶液2~3滴,观察肠管平滑肌的反应。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察实验报告
离体小肠平滑肌的生理特性及药物感化观察之杨若古兰创作一、实验目的: ①进一步熟悉BL-410/420多媒体生物旌旗灯号记录分析零碎;②进修离体肠肌的实验安装和使用方法;③观察并记录传出神经零碎药物和酸碱对离体小肠平滑肌收缩的影响二、实验对象:家兔离体小肠肠管.三、实验道理:消化道平滑肌具有主动节律性活动的特性,其发生机理源于其肌肉细胞本人的自觉缓慢放电并受中枢神经零碎及体液身分的调节,所以可以取离体的小肠肠管并放置于人工创造的正常生理环境下,利用BL-410/420多媒体生物旌旗灯号记录分析零碎和换能器零碎分别研讨传出神经零碎药物和酸碱对小肠平滑肌收缩的影响.四、实验记录与分析㈠图(一)图(一)暗示小肠由38度台氏液到室温下其平滑肌收缩曲线变更情况从图(一)可以看出小肠所处温度降到室温时明显减弱,由于平滑肌收缩须要酶催化,而温度在必定范围内降低时钠钾泵及离子通道的酶的催化活性也会降低,这就可以影响钠钾钙等离子的转运,继而影响去极化和复极化的速度,进而动作电位的发生速率和幅度就会降低,所以平滑肌的收缩程度会减弱.㈡图(二)图(二)暗示在38度台氏液加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩曲线的变更情况由图(二)可知加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩明显减弱,这是由于肾上腺素与小肠平滑肌肌膜上的β肾上腺素能受体结合,可导导致膜超极化,从而使膜去极化达到阈电位的幅度添加,所以其动作电位的发生频率降低,所以小肠平滑肌的收缩幅度减弱.㈢图(三)图(三)暗示在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱的小肠平滑肌收缩曲线变更情况由图(三)可知在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩明显加强,这是应为乙酰胆碱与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合后,可以在膜去极化未达到必定的电位时提前激活更多的慢钙通道,使大量的钙离子内流,进而使动作电位发生的频率添加,所以小肠的平滑肌收缩加强.㈣图(四)图(四)暗示在正常38度台氏液先滴加阿托品,三十秒后再加乙酰胆碱的小肠收缩变更情况由图(四)可知小肠平滑肌的收缩无明显的变更,这是由于阿托品作为平滑肌肌膜上M受体抗结剂与M受体结合了,在滴加阿托品三十秒后再滴加乙酰胆碱,乙酰胆碱不克不及与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合,就不克不及惹起小肠平滑肌的高兴性效应,所以其收缩没什么明显改变.㈤图(五)图(五)为在正常38度台氏液里滴加盐酸几秒后再滴加氢氧化钠的小肠收缩曲线变更情况由图(五)可知在滴加盐酸后小肠平滑肌收缩明显减弱,这是由于加入盐酸后,小肠所处环境的氢离子浓度升高,氢离子可以影响慢钙通道的开放,是钙离子内流减少,进而影响动作电位发生的频率;另外氢离子能与钙离子竞争钙调蛋白结合的位点,使肌凝蛋白ATP酶活性降低、肌纤蛋白对钙离子的敏感性降低,肌质网释放钙离子的量减少,能干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化过程,所以小肠的平滑肌收缩明显减弱.当过几秒后加入氢氧化钠后中和了氢离子,使小肠所处的环境恢复正常,所以其收缩慢慢趋于正常.。
离体小肠平滑肌生理特性及药物作用观察实验报告
一、实验目的:①进一步熟悉BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统;
②学习离体肠肌的实验装置和使用方法;
③观察并记录传出神经系统药物以及酸碱对离体小肠平滑肌收缩的影响
二、实验对象:家兔离体小肠肠管。
三、实验原理:消化道平滑肌具有自动节律性运动的特性,其产生机理源于其肌肉细胞本身的自发缓慢放电并受中枢神经系统及体液因素的调节,所以可以取离体的小肠肠管并放置于人工创造的正常生理环境下,利用BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统和换能器系统分别研究传出神经系统药物以及酸碱对小肠平滑肌收缩的影响。
㈤
图(五)
图(五)为在正常38度台氏液里滴加盐酸几秒后再滴加氢氧化钠的小肠收缩曲线变化情况
由图(五)可知在滴加盐酸后小肠平滑肌收缩明显减弱,这是因为加入盐酸后,小肠所处环境的氢离子浓度升高,氢离子可以影响慢钙通道的开放,是钙离子内流减少,进而影响动作电位产生的频率;另外氢离子能与钙离子竞争钙调蛋白结合的位点,使肌凝蛋白ATP酶活性下降、肌纤蛋白对钙离子的敏感性下降,肌质网释放钙离子的量减少,能干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化过程,所以小肠的平滑肌收缩显著减弱。当过几秒后加入氢氧化钠后中和了氢离子,使小肠所处的环境恢复正常,所以其收缩慢慢趋于正常。
㈣
图(四)
图(四)表示在正常38度台氏液先滴加阿托品,三十秒后再加乙酰胆碱的小肠收缩变化情况
由图(四)可知小肠平滑肌的收缩无明显的变化,这是因为阿托品作为平滑肌肌膜上M受体抗结剂与M受体结合了,在滴加阿托品三十秒后再滴加乙酰胆碱,乙酰胆碱不能与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合,就不能引起小肠平滑肌的兴奋性效应,所以其收缩没什么明显改变。
图三表示在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱的小肠平滑肌收缩曲线变化情况由图三可知在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩明显增强这是应为乙酰胆碱与小肠平滑肌肌膜上的m受体结合后可以在膜去极化未达到一定的电位时提前激活更多的慢钙通道使大量的钙离子内流进而使动作电位产生的频率增加所以小肠加完乙site碱后的小肠平滑肌帧绻曲呂慝台氏液小肠平滑肌收缩曲线级完网托品旳秒后再加乙醍胆碱的小肠平滔肌收缩曲图四表示在正常38度台氏液先滴加阿托品三十秒后再加乙酰胆碱的小肠收缩变化情由图四可知小肠平滑肌的收缩无明显的变化这是因为阿托品作为平滑肌肌膜上体抗结剂与m受体结合了在滴加阿托品三十秒后再滴加乙酰胆碱乙酰胆碱不能与小肠平滑肌肌膜m受体结合就不能引起小肠平滑肌的兴奋性效应所以其收缩没什么明显改变
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注意事项
1. 穿线系肠管时,速度要快,结扎牢固,应在温热台氏液中进 行。
2. 肠管勿牵拉过紧或过松,与张力换能器的连线必须垂直,不 得与浴槽管壁、通气塑料管接触,以免磨擦。 3. 浴槽中液体的量以高过肠段为准,并保持液面高度恒定。 4. 药物应滴在肠管附近,各药用量系参考剂量,若效果不明显, 可以增补加药,但不可一次过多,以免引起不可逆反应。 5. 每次加药出现反应后,必须立即放掉含药液的台氏液,并冲 洗至少三次,以免引起不可逆反应。待肠管恢复稳定活动后, 再观察下一项目。
实验步骤
(第6张图)
先恢复相对正常的波形,在将 其中的台氏液换成无钙台氏液
截图 并清 洗3 遍
台氏液
无钙台氏液
4.观察项目
5)观察温度对肠段收缩的影响 室温台式液
实验步骤
(第7张图)
先恢复相对正常的波形,在将 其中的台氏液换成液
4.观察项目
实验步骤
(第8张图)
6)观察酸碱度对肠段收缩的影响 盐酸后氢氧化钠 +HCl 不洗
外来神经
副交感神经
Ach(+)运动、分泌
激动M受体——兴奋肠道平滑肌收缩
实验动物
家兔 体重?Kg 雌/雄
实验材料
1. 器材
恒温平滑肌槽、BL-420N系统、张力换能器、手术剪、眼科剪、
眼科镊、小烧杯、污物杯、平皿、丝线
2.试剂和药品
台氏液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、 0.01%阿托品溶液、0.1%酚妥拉明溶液、0.01%盐酸溶液、
+NaOH
截图并 并存
实验结束 后将恒温 平滑肌槽 内的液体 倒掉并清 洗实验槽 三次以上
实验结果
要求:共截图8张,有图序和图题。 举例:
1.一个处理因素的,如右图
2.两个处理因素的,如下图
图1.乙酰胆碱对家兔离体小肠平滑肌收缩 曲线的影响
即要有
正常+处理因素
两部分组成
图2.阿托品后乙酰胆碱对家兔离体小肠平滑肌收缩曲线的影响
离体小肠平滑肌生理特性及药物 作用的观察
遵义医学院
药理学教研室
实验目的
1.学习一种离体组织器官实验方法。 2.观察乙酰胆碱、阿托品、去甲肾上腺素、酚妥拉明、 Ca2+、温度、酸碱度等对离体小肠平滑肌的作用。 3.观察并分析平滑肌活动的生理特性及理化环境改变 对它的影响。
实验原理
1.消化道平滑肌的生理特性
10-3M氢氧化钠溶液
实验步骤
1.准备工作
1)外面大槽中添 加自来水; 2)内部4个小槽均 添加台氏液;
3)调节温度至 38℃,加热,备用。
实验步骤
2.标本制备
1)取十二指肠及其邻近上 段小肠(约20-30cm),温 热台氏液洗净肠管内容物。
2)将肠段分为10段(菱形), 每段约3-4cm,每组取一段 至于温热台氏液中。
实验步骤
3.仪器的连接与设置
1)两端用细线结扎,一端系于通 气管的挂钩上,另一端与张力换能 器相连。
2)启动计算机,在“实验模块”中 选择“消化”中“消化道平滑肌生理 特性”项,调节参数,开始记录。
4.观察项目
1)自动节律收缩
实验步骤
2)观察胆碱能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响 乙酰胆碱;阿托品后乙酰胆碱 3)观察肾上腺素能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响 去甲肾上腺素;酚妥拉明后去甲肾上腺素
思考题
1. 哺乳动物离体器官或组织在灌流液中保持良好状态需具备哪些基 本灌流条件? 2. 取肠时为什么采用击昏家兔而不在麻醉下进行? 3. 为什么加入各种药物会引起离体肠段活动的变化?其机理是什么?
下次课内容:氨在肝性脑病发病中的作用(第一实验室)
+乙酰胆碱 不洗 截图 并清 洗3 遍
4.观察项目
实验步骤
3)观察肾上腺素能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响 去甲肾上腺素(第4张图); 酚妥拉明后去甲肾上腺素(第5张图)
+去甲肾上腺素
截图并 清洗3遍
+酚妥拉明
+去甲肾上腺素 截图 并清 洗3 遍
不洗
4.观察项目
4)观察氯化钙对肠段收缩的影响 无钙台氏液
①兴奋性较低,收缩缓慢。 ②自动节律性,但频率慢且节律不稳定。 ③紧张性。 ④较大伸展性。
⑤对电刺激不敏感,但对机械牵张、温度和化学刺激
特别敏感。
实验原理
2. 消化道的神经支配
肌间神经丛
控制消化道运动
内在神经
(壁内神经丛) 粘膜下神经丛
交感神经
消化道腺体分泌、肠内物 质吸收、局部血流控制
NA(-)运动、分泌 激动α受体——抑制肠道平滑肌收缩
4)观察氯化钙对肠段收缩的影响 无钙台氏液 5)观察温度对肠段收缩的影响 室温台式液 6)观察酸碱度对肠段收缩的影响 盐酸后氢氧化钠
4.观察项目
1)自动节律收缩(第1张图)
实验步骤
2)观察胆碱能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响 乙酰胆碱(第2张图) ;阿托品后乙酰胆碱(第3张图)
+乙酰胆碱 截图并 清洗3遍 +阿托品