医学实验动物学动物实验基本技术与模拟肿瘤接种

注意事项:
实验时请不要戏弄动物、防止被动 物咬伤，防止动物逃逸
实验结束后请把器械清洗干净，整 理齐全
解剖观察
操作项目
小鼠：灌胃、尾静脉注射、眼底静 脉丛采血；心脏采血*、麻醉后解剖 观察*。
大鼠：灌胃* 、腹腔注射麻醉、心 脏采血、麻醉后解剖观察。
《医学实验动物学》 实验课
实验二
1.模拟肿瘤（组织块）移植 2.裸鼠与正常小鼠免疫器官的比较
一、实验目的
1.了解裸小鼠和KM小鼠的胸腔结构 了解正常的胸腺结构与不增殖胸腺基的形
待其麻醉后，仰卧位固定在解剖板上 胸骨左侧，腋窝平行线下2-3肋骨间，小鼠心
搏动最强处斜行刺入（1ml注射器） 缓慢抽动针管采血 取血量多时采用（同样适用于大鼠）
安全采血量：小鼠1ml;大鼠：8ml!
大鼠心脏采血
八、大体解剖观察及绘图
1.按0.1ml/10g体重，将SD大鼠用3.5% 水合氯醛腹腔注射麻醉。 2.腹部朝上固定于解剖板。 3. 用10cm剪刀从下腹部向上剪开皮肤， 打开腹腔，观察腹腔内脏器，观察大鼠肝 脏时特别注意大鼠无胆囊。 4. 用14cm剪刀打开胸腔，观察胸腔脏器。 5. 根据大体解剖所见，绘图。
《医学实验动物学》 实验课
实验一 大、小鼠给药、采血、
麻醉和解剖
实验目的
1.掌握大小鼠常用给药方法和采血技术 2.掌握大小鼠的麻醉方法和解剖步骤 3.熟悉大小鼠的解剖 结构
一、小鼠的抓取和固定
注意点
抓取小鼠时动作要迅速，要轻 防止被小鼠转过头咬，抓其颈后皮肤要多 如果被咬，应立即挤出血液，清水冲洗
态 2.掌握正确的胸腺摘除方式 3.掌握组织块（肿瘤）皮下移植的基本技
术
二、实验原理
•哺乳动物的胸腺是T淋巴细胞分化成熟的场所， 而T淋巴细胞是参与宿主对异体的组织或细胞排斥 的主要成分，裸鼠胸腺的原基从第三咽囊起不能 发育，因此，裸鼠囊状很小的胸腺残基保持终身。
•胸腺的不增殖导致成熟的T淋巴细胞数大量减少， 其结果是裸鼠机体不能排斥同种异体和异种间的 组织器官移植。
入盛有生理盐水的培养皿中。 用剪刀将肾脏分解为若干2×3mm组织
小块，取边缘整齐、色泽红润为佳。 将一小块肾组织放入套筒针内备用。
实验步骤 4（组织移植）
选取组织的目标区域，常用区域为肋侧 （近腋窝处 ）。
实验步骤 4（组织移植）
在离目标区域中心点1-2cm处，用眼科 小剪刀作一2-3mm切口。
五、实验步骤 1 (麻醉解剖小鼠）
按0.1ml/10g体重分别对裸鼠和KM小鼠腹腔 注射3.5%水合氯醛 。
待小鼠麻醉后，腹部朝上固定于小鼠固定板上。 以3%碘酒棉球和75%酒精棉球对KM小鼠进
行皮肤消毒；同时，对裸鼠腋部进行消毒。 用直头剪刀于KM小鼠生殖口上端切一小口，
沿腹部两侧作弧型切开，直至胸膈肌根部。
实验步骤 4（组织移植）
用套筒针在切口处刺入皮下直至目标中 心区域，将组织块推入，并迅速拔出。
实验步骤 5
麻醉、解剖裸鼠，与KM鼠比较胸腺的 区别
裸鼠胸腺只剩残基，基本上看不到
解剖观察
实验报告要求:
完成实验指导上第13、16页二份实验报 告
在实验报告的实验结果一项中完成小鼠 解剖图
另一人慢慢抽动针管采血 注意: 要将小鼠固定好，防止其头部晃动
六、大小鼠手术麻醉
腹腔麻醉：进针点为右下腹腔，进针角 度为与身体成45度，深度约1cm。
麻醉剂：麻醉药为3.5%水合氯醛，剂量 按Байду номын сангаас鼠体重0.1ml/10g，20g的小鼠为 0.2ml。
七、大、小鼠心脏采血
右下腹腔麻醉（麻醉药为3.5%水合氯醛，剂 量按0.1ml/10g)
固定器固定小鼠 消毒尾部，扩张血管，左右两侧的静脉 将尾巴成一个适宜注射的角度，1ml注射器
平行向心方向刺入静脉血管 干棉球压迫止血 注意排除气泡 注射点由尾部远端
五、小鼠眼底静脉丛采血
一人徒手固定小鼠于桌面上，使眼球充 分向外突出
将注射器针头从内眼角位置插入眼球和 眼眶之间，进针约0.5cm（1ml注射器）
•人类的肿瘤能在裸鼠的体内生长，使裸鼠作为一 种疾病模型的载体，广泛地运用于研究人类移植 性肿瘤生长和转移。
三、影响被移植的动物组织或细胞成 活的因素
•组织的相容性 •宿主对移植物的血供 •供体组织或细胞的活性 •其他因素
四、模拟移植物的选择
肾脏组织 ——是哺乳动物中血供较好、活力较强 的组织
小鼠的抓取和固定
实验步骤 2(观察胸腺)
观察膈肌形状后，于两侧根部分别切一 小口，将膈肌横向切开，绞断肋骨，直 至锁骨，然后掀起胸骨，暴露整个胸腔。
直视心脏，在心脏的上部，主动脉弓处， 有两片乳白色蝴蝶状的小片，即为胸腺。
实验步骤 3（取肾脏组织）
用圆头镊将肠道拨向对侧，暴露肾脏。 用眼科剪刀取下肾脏，剥去肾包膜，放
二、大鼠的抓取与固定
三、小鼠灌胃（给药方法之一）
将实验小鼠徒手固定 灌胃针从嘴角处插入口腔内，紧贴咽
后壁插入食道（1ml注射器，深度大 约为3cm） 推动针管给药（生理盐水） 注意不要插入气管，不要抓的太紧以 致小鼠窒息死亡
最大灌胃量：小鼠1ml;大鼠：8ml!
尾静脉
四、小鼠尾静脉注射（给药方法之二）